專利名稱：芳基取代的嘧啶及其用途的制作方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明屬于醫(yī)藥化學(xué)領(lǐng)域。確切而言，本發(fā)明涉及新穎的芳基取代的嘧啶，發(fā)現(xiàn)這些化合物是鈉(Na+)通道的阻滯劑。
相關(guān)技術(shù)若干類治療上有用的藥物已經(jīng)顯示通過(guò)阻滯或調(diào)制Na+通道活性，共享共同的作用機(jī)理，包括局部麻醉劑，例如利多卡因和布比卡因，抗心律失常劑，例如普羅帕酮和胺碘酮，和抗驚厥劑，例如lamotrigine、苯妥英和卡馬西平(Catterall，W.A.，Trends Pharmacol.Sci.857-65(1987))。每種這些藥物據(jù)信通過(guò)干擾Na+離子的迅速流入而發(fā)揮作用。
最近，其他Na+通道阻滯劑和BW619C89和lifarizine已經(jīng)顯示在全身性與局灶性缺血?jiǎng)游锬Ｐ椭惺巧窠?jīng)保護(hù)性的，目前處于臨床試用中(Graham et al.，J.Pharmacol.Exp.Ther.269854-859(1994)；Brown et al.，British J.Pharmacol.1151425-1432(1995))。
Na+通道阻滯劑的神經(jīng)保護(hù)活性是由于它們通過(guò)抑制谷氨酸鹽的釋放，有效減少缺血期間的細(xì)胞外這種興奮毒性氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)濃度。研究已經(jīng)顯示，不象谷氨酸鹽受體拮抗劑，Na+通道阻滯劑防止對(duì)哺乳動(dòng)物白質(zhì)的低氧損傷(Stys et al.，J.Neurosci.12430-439(1992))。因而，它們可以為治療某些類型中風(fēng)或神經(jīng)元?jiǎng)?chuàng)傷提供益處，其中對(duì)白質(zhì)束的損傷是突出的。
臨床使用的另一種Na+通道阻滯劑的實(shí)例是riluzole。這種藥物已經(jīng)顯示延長(zhǎng)一部分ALS患者的存活期(Bensimm et al.，New Engl.J.Med.330585-591(1994))，隨后已經(jīng)獲得FDA批準(zhǔn)用于治療ALS。除了上述臨床用藥以外，卡馬西平、利多卡因和苯妥英有時(shí)候也用于治療神經(jīng)病性疼痛，例如三叉神經(jīng)病、糖尿病性神經(jīng)病和其他神經(jīng)損傷形式(Taylor and Meldrum，Trends Pharmacol.Sci.16309-316(1995))，卡馬西平和lamotrigine已經(jīng)用于治療躁狂抑郁(Denicott etal.，J.Clin.Psychiatry 5570-76(1994))。此外，基于慢性疼痛與耳鳴之間的大量相似之處(Moller，A.R.Am.J.Otol.18577-585(1997)；Tonndorf，J.Hear.Res.28271-275(1987))，已有建議耳鳴應(yīng)當(dāng)被視為慢性疼痛感覺(jué)的一種形式(Simpson，J.J.and Davies，E.W.Tips.2012-18(1999))。事實(shí)上，利多卡因和卡馬西平已經(jīng)顯示在治療耳鳴中是有效的(Ma jumdar，B.et al.Clin.Otolaryngol.8175-180(1983)；Donaldson，I.Laryngol.Otol.95947-951(1981))。
已經(jīng)確認(rèn)，在電壓-敏感性Na+通道上存在至少五至六個(gè)特異性結(jié)合神經(jīng)毒素的位點(diǎn)(Catterall，W.A.，Science 24250-61(1988))。研究已經(jīng)進(jìn)一步揭示，治療作用受Na+通道介導(dǎo)的抗心律失常、抗驚厥劑和局部麻醉劑通過(guò)相互作用于Na+通道的細(xì)胞內(nèi)側(cè)和異位抑制與神經(jīng)毒素受體位點(diǎn)2的相互作用而發(fā)揮它們的作用(Catterall，W.A.，Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.1015-43(1980))。
本領(lǐng)域需要這樣的新穎化合物，它們是有力的鈉通道阻滯劑，因此可用于治療多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥，包括疼痛。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及新穎的式I芳基取代的嘧啶。
而且，本發(fā)明提供可用于治療對(duì)鈉離子通道阻滯有應(yīng)答的障礙的藥物組合物，含有有效量式I化合物與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑的混合物。
本發(fā)明另外的實(shí)施方式和優(yōu)點(diǎn)一部分將如下列說(shuō)明所述，一部分將因這些說(shuō)明而顯而易見(jiàn)，或者可以借助發(fā)明的實(shí)施而獲知。借助附后權(quán)利要求所確切指出的要素和組合，將實(shí)現(xiàn)和達(dá)到本發(fā)明的實(shí)施方式和優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明還涉及由式I代表的芳基取代的嘧啶充當(dāng)鈉(Na+)通道阻滯劑這一發(fā)現(xiàn)。
本發(fā)明的一個(gè)方面涉及治療患有鈉通道活性過(guò)度的哺乳動(dòng)物對(duì)所述通道阻滯有應(yīng)答的障礙，給以有效量的充當(dāng)鈉通道阻滯劑的式I化合物。
本發(fā)明的另一方面是提供治療、預(yù)防或改善全身性與局灶性缺血繼發(fā)的神經(jīng)元損失的方法；治療、預(yù)防或改善疼痛的方法，包括急性與慢性疼痛和神經(jīng)病性疼痛；治療、預(yù)防或改善驚厥和神經(jīng)變性病癥的方法；治療、預(yù)防或改善躁狂抑郁的方法；用作局部麻醉劑和抗心律失常劑的方法；和治療耳鳴的方法，對(duì)需要這類治療或應(yīng)用的哺乳動(dòng)物給以式I化合物。
可以理解，上述一般說(shuō)明和下列詳細(xì)說(shuō)明僅僅是例證性的和解釋性的，本發(fā)明僅受權(quán)利要求書(shū)所限。
發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明新穎的本發(fā)明化合物是由式I代表的芳基取代的嘧啶 或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其中A選自C＝O或C-R4，其中當(dāng)A是C＝O時(shí)，N與A之間的鍵是單鍵，R3是存在的；當(dāng)A是C-R4時(shí)，N與A之間的鍵是雙鍵，R3是不存在的；R4是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；R1選自下組(i)苯氧基苯基；(ii)芐氧基苯基；
(iii)苯硫基苯基；(iv)芐硫基苯基；(v)苯基；(vi)萘基；其中每個(gè)(i)至(iv)的末端芳基環(huán)和(v)與(vi)環(huán)的任意部分可選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；其附帶條件是當(dāng)(a)R1是苯基且A是C-R4時(shí)，其中R4是氫或C1-6烷基；R2不是(i)氫；(ii)C1-3烷基；(iii)烷氧基取代的芐基；(iv)C1-2烷氧基烷基；(v)C1-2羥基烷基；(vi)C1-2鹵代烷基；(vii)C1-3烷氧基；或者當(dāng)(b)R1是苯基且A是C＝O時(shí)；R2不是氫；或者當(dāng)(c)R1是萘基且A是C-R4時(shí)，其中R4是氫或C1-6烷基；R2不是(i)氫，或(ii)C1-6烷基； 其中R5和R6獨(dú)立地是鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；p和q獨(dú)立地是整數(shù)0至4；其附帶條件是當(dāng)(a)A是C-R4時(shí)，其中R4是氫或C1-6烷基；R2不是
(i)氫，或(ii)C1-6烷基；(viii) 其中R7是鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；(ix) 其中R8是C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；R2選自下組(i)氫；(ii)C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；(iii)芐基，可選地被鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；R3選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；并且僅當(dāng)A是C＝O時(shí)是存在的。
就R1而言，苯氧基苯基、苯硫基苯基、芐氧基苯基和芐硫基苯基部分的苯基組分可以在該苯基部分的2-、3-或4-位與嘧啶核連接(即分別的鄰、間或?qū)ξ?。優(yōu)選地，苯基部分通過(guò)3-或4-位與嘧啶核連接(即分別的間或?qū)ξ?。
若R1是苯基，其上可選的取代基也可以位于鄰、間或?qū)ξ唬鄬?duì)于苯基與吡啶核的連接點(diǎn)而言。若R1是萘基，其上可選的取代基可以占據(jù)萘基上任意可用的位置，相對(duì)于它在嘧啶核上的連接點(diǎn)而言。
優(yōu)選的式I化合物是這樣的，其中A是C＝O；R1選自苯氧基苯基、芐氧基苯基或苯基，它們可以可選地在末端芳基環(huán)上被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；R2選自氫或芐基，可選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代，其中適用上述附帶條件；R3選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
特別優(yōu)選的式I化合物還是這樣的，其中A是C＝O；R1是苯氧基苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是氫或芐基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R3選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
特別優(yōu)選的式I化合物還是這樣的，其中A是C＝O；R1是苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是C1-6烷基或芐基，可選地被鹵素取代；R3選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
優(yōu)選的式I化合物還是這樣的，其中A是C-R4；R1選自苯氧基苯基、芐氧基苯基或苯基，它們可以可選地在末端芳基環(huán)上被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；R2選自氫或芐基，可選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代，其中適用上述附帶條件。
特別優(yōu)選的其中A是C-R4的式I化合物是這樣的，其中R1是苯氧基苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是氫；R4選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
尤其優(yōu)選的其中A是C-R4的式I化合物是這樣的，其中R1是苯氧基苯基，可選地被鹵素取代；R2是芐基，可選地被鹵素取代；R4選自氫或C1-6烷基。
出于本發(fā)明的目的，術(shù)語(yǔ)“烷基”表示直鏈或支鏈C1-10碳鏈，優(yōu)選C1-6碳鏈。適合的烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、3-戊基、己基和辛基。
術(shù)語(yǔ)“芳基”表示C6-14單環(huán)或多環(huán)芳族環(huán)系。適合的碳環(huán)芳基可以選自但不限于苯基、萘基、菲基、蒽基、茚基、 基、聯(lián)苯、亞聯(lián)苯基和芴基。特別優(yōu)選的碳環(huán)芳基是苯和萘。
術(shù)語(yǔ)“雜芳基”表示3-7元單環(huán)或7-14元多環(huán)芳族環(huán)系，獨(dú)立地含有一個(gè)或多個(gè)氮、氧或硫原子。適合的雜芳基可以選自但不限于吲哚、吡啶、咔唑、咪唑、呋喃等。優(yōu)選的雜芳基是吡啶、咔唑、呋喃和咪唑。
適合用在本發(fā)明中的非芳族雜環(huán)包括但不限于吡咯烷、哌啶和嗎啉。
可以用在本發(fā)明方法中的示范性優(yōu)選化合物非限制性地包括2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-6-氨基-嘧啶-4-酮；2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-6-氨基-5-(2-氯芐基)嘧啶-4-酮；2-苯基-6-氨基-5-(2-氯芐基)嘧啶-4-酮；和2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4-叔丁基-6-氨基嘧啶-4-酮；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
本文所公開(kāi)的發(fā)明意在涵蓋所公開(kāi)的化合物的所有藥學(xué)上可接受的鹽。藥學(xué)上可接受的鹽包括但不限于金屬鹽，例如鈉鹽、鉀鹽、銫鹽等；堿土金屬鹽，例如鈣鹽、鎂鹽等；有機(jī)胺鹽，例如三乙胺胺、吡啶鹽、甲基吡啶鹽、乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、二環(huán)己胺鹽、N，N’-二芐基乙二胺鹽等；無(wú)機(jī)酸鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸、磷酸鹽等；有機(jī)酸鹽，例如甲酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、馬來(lái)酸鹽、酒石酸鹽等；磺酸鹽，例如甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)-甲苯磺酸鹽等；氨基酸鹽，例如精氨酸鹽、天冬氨酸鹽、谷氨酸鹽等。
本文所公開(kāi)的發(fā)明也意在涵蓋所公開(kāi)的化合物的體內(nèi)代謝產(chǎn)物。這類產(chǎn)物例如可以從所給藥的化合物的氧化、還原、水解、酰胺化、酯化等作用生成，主要由于酶過(guò)程。因此，本發(fā)明包括由這樣一種過(guò)程所生成的化合物，包含使本發(fā)明化合物與接觸一段足以產(chǎn)生其代謝產(chǎn)物的時(shí)間。這類產(chǎn)物通常是這樣鑒別的，制備放射性標(biāo)記的本發(fā)明化合物，以可檢測(cè)的劑量對(duì)動(dòng)物腸胃外給藥，例如大鼠、小鼠、豚鼠、猴或者人，經(jīng)過(guò)足以發(fā)生代謝的時(shí)間，從尿、血液或其他生物樣本中分離它的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。
本文所公開(kāi)的發(fā)明也意在涵蓋被同位素標(biāo)記的所公開(kāi)的化合物，其中一個(gè)或多個(gè)原子被具有不同原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子代替?？梢該饺胨_(kāi)的化合物中的同位素實(shí)例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分別例如2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。
有些本文所公開(kāi)的化合物可以含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心，因而可以形成對(duì)映體、非對(duì)映體和其他立體異構(gòu)形式。本發(fā)明也意在涵蓋所有這類可能的形式以及它們的外消旋與拆分形式及其混合物。當(dāng)本文所述化合物含有烯屬雙鍵或其他幾何不對(duì)稱中心時(shí)，除非另有指定，這打算包括E和Z幾何異構(gòu)體。而且，所有互變體也都打算為本發(fā)明所涵蓋。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)體”是個(gè)別分子全部異構(gòu)體的一般術(shù)語(yǔ)，這些分子僅在原子空間取向上有差別。它包括具有一個(gè)以上手性中心的化合物的對(duì)映體和異構(gòu)體，它們不是彼此的鏡像(非對(duì)映體)。
術(shù)語(yǔ)“手性中心”表示連接有四個(gè)不同基團(tuán)的碳原子。
術(shù)語(yǔ)“對(duì)映體”或“對(duì)映體的”表示這樣一種分子，它不可疊加于它的鏡像上，因此是旋光活性的，其中對(duì)映體使偏振光的平面朝一個(gè)方向旋轉(zhuǎn)，它的鏡像使偏振光的平面朝相反方向旋轉(zhuǎn)。
術(shù)語(yǔ)“外消旋”表示等量對(duì)映體的混合物，它是無(wú)旋光活性的。
術(shù)語(yǔ)“拆分”表示分子兩種對(duì)映體形式之一的分離或富集或排除。短語(yǔ)“對(duì)映體過(guò)量”表示這樣一種混合物，其中一種對(duì)映體的濃度大于它的鏡像分子。
本發(fā)明還涉及治療患有對(duì)鈉通道阻滯有應(yīng)答的障礙的哺乳動(dòng)物所述障礙的方法。具體而言，本發(fā)明的方法利用沒(méi)有上述附帶條件的式I嘧啶化合物，可以用于治療人或?qū)櫸?，例如狗和貓。特別優(yōu)選用在本發(fā)明第一方面方法中的式I嘧啶化合物是如上所定義的沒(méi)有上述附帶條件的那些。
這些化合物對(duì)本發(fā)明方法的有效性是借助離體海馬神經(jīng)元的電生理學(xué)測(cè)定法加以評(píng)估的，以測(cè)定鈉通道阻滯劑的活性。還可選地使用大鼠前腦膜和[3H]BTX-B測(cè)定這些化合物與神經(jīng)元電壓-依賴性鈉通道的結(jié)合。
鈉通道是在多種組織中被表達(dá)的大型跨膜蛋白。它們是電壓敏感性通道，負(fù)責(zé)響應(yīng)于很多可興奮細(xì)胞中與動(dòng)作電壓有關(guān)的去極化而迅速增加Na+滲透性，這類可興奮細(xì)胞包括肌肉、神經(jīng)和心肌細(xì)胞。
本發(fā)明方法的另一方面是本文所述化合物作為特異性Na+通道阻滯劑的作用機(jī)理的發(fā)現(xiàn)。基于這種機(jī)理的發(fā)現(xiàn)，這些化合物被考慮可用于治療或預(yù)防由局灶性或全身性缺血引起的神經(jīng)元損失，治療或預(yù)防神經(jīng)變性障礙，包括ALS、焦慮和癲癇。它們也被預(yù)期有效治療、預(yù)防或改善神經(jīng)病性疼痛、手術(shù)疼痛、慢性疼痛和耳鳴。這些化合物也被預(yù)期可用作抗心律失常劑、麻醉劑和抗躁狂抑郁劑。
本發(fā)明的方法涉及式I化合物的使用，它們是電壓-敏感性鈉通道的阻滯劑。安裝本發(fā)明，具有優(yōu)選的鈉通道阻滯性質(zhì)的那些化合物在本文所述電生理學(xué)測(cè)定法中表現(xiàn)約100μM或以下的IC50。優(yōu)選地，本發(fā)明化合物表現(xiàn)10μM或以下的IC50。最優(yōu)選地，本發(fā)明化合物表現(xiàn)約1.0μM或以下的IC50。下列結(jié)合測(cè)定法和電生理學(xué)測(cè)定法可以用于測(cè)試本發(fā)明化合物的Na+通道阻滯活性。
體外結(jié)合測(cè)定法遵照Yasushi，J.Biol.Chem.2616149-6152(1986)和Creveling，Mol.Pharmacol.23350-358(1983)分別詳細(xì)描述的工藝，測(cè)定本發(fā)明化合物調(diào)制Na+通道位點(diǎn)1或位點(diǎn)2的能力。使用大鼠前腦膜作為Na+通道蛋白的來(lái)源。結(jié)合測(cè)定法是這樣進(jìn)行的，在130μM氯化膽堿中，在37℃下，分別用[3H]非蛋白質(zhì)強(qiáng)毒素和[3H]箭毒蛙堿作為位點(diǎn)1和位點(diǎn)2的放射性配體培育60分鐘。
體內(nèi)藥理學(xué)
利用大量小鼠抗驚厥試驗(yàn)，包括最大電休克癲癇發(fā)作試驗(yàn)(MES)，可以在i.v.、p.o.或i.p.注射后測(cè)試本發(fā)明化合物的體內(nèi)抗驚厥活性。最大電休克癲癇發(fā)作是這樣誘發(fā)的，在體重在15-20g之間的雄性NSA小鼠和體重在200-225g之間的雄性Sprague-Dawley大鼠中，利用UgoBasile ECT裝置(7801型)施加電流(50mA，60脈沖/sec，0.8msec脈沖寬度，1sec持續(xù)時(shí)間，D.C.，小鼠；99mA，125脈沖/sec，0.8msec脈沖寬度，2sec持續(xù)時(shí)間，D.C.，大鼠)。抓住背表面松弛皮膚，使小鼠受到限制，在兩只角膜上輕輕固定涂有鹽水的角膜電極。允許大鼠在臺(tái)頂上自由活動(dòng)，使用耳夾電極。施加電流，在多達(dá)30秒內(nèi)觀察強(qiáng)直性后肢伸肌應(yīng)答的發(fā)生。強(qiáng)直性癲癇發(fā)作被定義為后肢伸長(zhǎng)超過(guò)身體平面的90度。以量化方式處理結(jié)果。
可以在福爾馬林模型中測(cè)試化合物的抗感受傷害活性，如Hunskaar，S.，O.B.Fasmer，and K.Hole，J.Neurosc i.Methods 1469-76(1985)所述。在全部實(shí)驗(yàn)中使用雄性Swiss Webster NIH小鼠(20-30g；Harlan，San Diego，CA)。在實(shí)驗(yàn)當(dāng)天撤除飼料。將小鼠置于有機(jī)玻璃罐中達(dá)至少1小時(shí)以適應(yīng)環(huán)境。適應(yīng)階段后，將小鼠稱重，i.p.或p.o.給以有關(guān)化合物或適當(dāng)體積載體(10％吐溫-80)。i.p.給藥15分鐘后和p.o.給藥30分鐘后，向小鼠右后爪背表面注射福爾馬林(20μL 5％甲醛的鹽水溶液)。將小鼠轉(zhuǎn)移至有機(jī)玻璃罐，監(jiān)測(cè)花在舔或咬被注射爪上的時(shí)間量。
在福爾馬林注射后記錄舔和咬的時(shí)間，間隔5分鐘，歷時(shí)1小時(shí)。全部實(shí)驗(yàn)都是在光照周期期間、以盲方式進(jìn)行的。在0-5分鐘之間測(cè)量舔/咬，作為早期福爾馬林應(yīng)答，在15-50分鐘之間測(cè)量晚期。借助單路徑方差分析(ANOVA)分析載體與藥物處置組之間的差異。p值小于0.05被視為顯著性。阻滯福爾馬林-誘發(fā)舔爪活動(dòng)的急性和繼發(fā)階段的活性預(yù)示了化合物被視為對(duì)急性和慢性疼痛是有效的。
在外周神經(jīng)病的Chung模型中可以測(cè)試化合物治療慢性疼痛的潛力(抗異常性疼痛和抗痛覺(jué)過(guò)敏活性)。將體重在200-225g之間的雄性Sprague-Dawley大鼠用氟烷(在70％空氣與30％氧的混合物中含有1-3％)麻醉，在麻醉期間利用恒溫毯控制它們的體溫。然后在L5和L6水平進(jìn)行2cm背部中線切開(kāi)，兩側(cè)切除脊柱旁肌肉組。然后暴露L5和L6脊神經(jīng)，分離，用6-0絲線緊緊結(jié)扎。進(jìn)行假手術(shù)，暴露對(duì)側(cè)L5和L6脊神經(jīng)，作為陰性對(duì)照。
觸覺(jué)異常性疼痛將大鼠轉(zhuǎn)移至升高的測(cè)試籠，籠子帶有金屬絲網(wǎng)底，適應(yīng)5至10分鐘。向后爪跖表面施用一系列Semmes-Weinstein單絲，以測(cè)定動(dòng)物的收縮閾值。所用第一條單絲具備9.1g(.96log值)的彎曲重量，使用多達(dá)五次，以觀察它是否引起收縮應(yīng)答。如果動(dòng)物具有收縮應(yīng)答，那么施用該系列下一條最輕的單絲多達(dá)五次，以測(cè)定它是否能夠引起應(yīng)答。利用隨后一條次輕的單絲重復(fù)該工藝，直至沒(méi)有應(yīng)答，記錄引起應(yīng)答的最輕單絲。如果動(dòng)物對(duì)最初9.1g單絲沒(méi)有收縮應(yīng)答，那么施用隨后一條增加重量的單絲，直至單絲引起應(yīng)答，然后記錄該單絲。就每只動(dòng)物而言，在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行三次測(cè)量，得到平均收縮閾值。在藥物給藥之前和之后1、2、4和24小時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)。觸覺(jué)異常性疼痛和機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏試驗(yàn)是并行進(jìn)行的。
機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏將大鼠轉(zhuǎn)移至升高的測(cè)試籠，籠子帶有金屬絲網(wǎng)底，適應(yīng)5至10分鐘。用稍鈍的針接觸后爪跖表面，導(dǎo)致皮膚形成小凹，而不穿透皮膚。用針接觸對(duì)照爪子通常引起快速的退縮反應(yīng)，時(shí)間之短以至無(wú)法用計(jì)時(shí)表計(jì)時(shí)，于是任意設(shè)定收縮時(shí)間為0.5秒。神經(jīng)病動(dòng)物經(jīng)過(guò)手術(shù)的一側(cè)爪子表現(xiàn)對(duì)鈍針產(chǎn)生夸張的收縮應(yīng)答。使用10秒最大收縮時(shí)間作為截止時(shí)間。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)量動(dòng)物兩只爪子的收縮時(shí)間三次，每?jī)纱沃g有5分鐘的恢復(fù)期。利用這三次測(cè)量結(jié)果生成每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的平均收縮時(shí)間。觸覺(jué)異常性疼痛和機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏是并行進(jìn)行的。
按照Buchan等(Stroke，Suppl.148-152(1993))和Sheardown等(Eur.J.Pharmacol.236347-353(1993))和Graham等(J.Pharmacol.Exp.Therap.2761-4(1996))所述工藝，可以測(cè)試化合物在大鼠或沙土鼠局灶性與全身性缺血后的神經(jīng)保護(hù)活性。
按照Wrathall等(Exp.Neurologyl 37119-126(1996))和Iwasaki等(J.Neuro Sci.13421-25(1995))所述工藝，可以測(cè)試化合物在創(chuàng)傷性脊髓損傷后的神經(jīng)保護(hù)活性。
電生理學(xué)測(cè)定法利用電生理學(xué)測(cè)定法測(cè)量本發(fā)明化合物對(duì)在非洲蟾蜍屬卵母細(xì)胞中表達(dá)的rBIIa/β1鈉通道的效力。
編碼克隆大鼠腦IIa(rBIIa)和β1型的cRNA的準(zhǔn)備利用標(biāo)準(zhǔn)方法在實(shí)驗(yàn)室克隆編碼大鼠腦B1亞單位的cDNA克隆體，借助標(biāo)準(zhǔn)方法制備mRNA。編碼rBIIa的mRNA是由Dr.A.Golden(UC Irvine)提供的。將mRNA稀釋成1μL等分試樣，在-80℃下貯存直至注射。
卵母細(xì)胞的準(zhǔn)備遵照既定工藝(Woodward，R.M.，etal.，Mol.Pharmacol.4189-103(1992))，將成熟Xenopus laevis用0.15％ 3-氨基苯甲酸乙酯(MS-222)麻醉(20-40min)。
手術(shù)切除2至6片卵巢葉。從卵巢中切取處于發(fā)育階段V-VI的卵母細(xì)胞，其中卵母細(xì)胞仍然被周圍的卵巢組織所包圍。在手術(shù)當(dāng)天，借助膠原酶處理使卵母細(xì)胞去卵泡化(0.5mg/mL Sigma Type I或Boehringer Mannheim Type A，0.5-1hr)。使經(jīng)過(guò)處理的卵母細(xì)胞旋轉(zhuǎn)，以除去上皮，反復(fù)洗滌，貯存在Barth培養(yǎng)基中，其中含有88mM NaCl、1mM KCl、0.41mM CaCl2、0.33mM Ca(NO3)2、0.82mM MgSO4、2.4mM NaHCO3、5mM HEPES，用0.1mg/mL硫酸慶大霉素調(diào)至pH7.4。
卵母細(xì)胞的微量注射利用Nanoject注射系統(tǒng)(DrummondScientific Co.，Broomall，PA)向去卵泡化卵母細(xì)胞微量注射。傾斜注射吸移管，使堵塞最小化。注射吸移管的尖端直徑為15-35μm。分別向卵母細(xì)胞微量注射大約50nL rBIIa與β1 cRNA的1∶10混合物。
電生理學(xué)在蛙Ringer溶液中記錄膜電流應(yīng)答，其中含有115mMNaCl、2mM KCl、1.8mM CaCl2、5mM HEPES，pH7.4。利用常規(guī)雙電極電壓夾(Dagan TEV-200)進(jìn)行電記錄，時(shí)間跨度在注射后1-7天之間。記錄腔是簡(jiǎn)單的重力流通腔(容量100-500mL，依賴于抽吸器的調(diào)節(jié))。將卵母細(xì)胞置于記錄腔中，固定電極，用蛙Ringer溶液連續(xù)灌注(5-15mL/min)。借助浴灌注施用供試化合物。
激發(fā)鈉通道電流的電壓方案全卵母細(xì)胞夾的標(biāo)準(zhǔn)維持電位為-120mV。借助40ms去極化步驟建立標(biāo)準(zhǔn)電流-電壓關(guān)系，從-60mV開(kāi)支至+50mV，增量10mV。在去極化電壓步驟之后測(cè)量峰電流，作為最大負(fù)電流。記錄來(lái)自最大電流響應(yīng)的電壓，用于下一電壓方案。
目的是發(fā)現(xiàn)這樣的化合物，它們是神經(jīng)元鈉通道的狀態(tài)依賴性調(diào)節(jié)劑。優(yōu)選地，化合物對(duì)通道的靜止/關(guān)閉狀態(tài)的親和性低，但是對(duì)失活狀態(tài)的親和性高。利用下列電壓方案測(cè)量化合物對(duì)失活狀態(tài)的親和性。使卵母細(xì)胞保持在-120mV的維持電位下。在這種膜電壓下，幾乎全部通道處于關(guān)閉狀態(tài)。然后對(duì)引起最大電流的電壓進(jìn)行4秒去極化。在該去極化結(jié)束時(shí)，幾乎全部通道處于失活狀態(tài)。然后進(jìn)行10ms超極化步驟，目的是使一些通道脫離失活狀態(tài)。在這種延長(zhǎng)的去極化之后利用最終的去極化試驗(yàn)脈沖測(cè)定鈉電流(見(jiàn)下分析)。在施用供試化合物之前和之后測(cè)量在這種試驗(yàn)脈沖下的鈉電流。利用PCLAMP 8.0軟件獲得數(shù)據(jù)，用CLAMPFIT軟件分析(Axon instruments)。
數(shù)據(jù)分析利用下列方程(Cheng-Prusoff方程的一般化形式)，從單點(diǎn)抑制數(shù)據(jù)測(cè)定拮抗劑的表觀抑制常數(shù)(Ki值)(Leff，P.and I.G.Dougall，TiPS 14110-112(1993))。
Ki＝(FR/1-FR)*[藥物] Eq.2其中FR是分步應(yīng)答，被定義為在施用藥物之前從最終去極化試驗(yàn)脈沖引起的鈉電流除以在有藥物存在下測(cè)量的鈉電流。[藥物]是所用藥物的濃度。
藥物首先將藥物在DMSO中制成2-10mM的濃度。然后進(jìn)行稀釋，生成一系列DMSO儲(chǔ)備液，濃度從0.3μM至10mM——依賴于化合物的效力。將儲(chǔ)備溶液在Ringer溶液中稀釋1000-3000倍，制成工作溶液。在這些稀釋比例下，單獨(dú)的DMSO對(duì)膜電流應(yīng)答沒(méi)有或者幾乎沒(méi)有可測(cè)量的效應(yīng)。將藥物的DMSO儲(chǔ)備液貯存在4℃黑暗處。藥物的Ringer溶液是在每天使用時(shí)新鮮制備的。
在本發(fā)明范圍內(nèi)的組合物包括全部這樣的組合物，其中本發(fā)明化合物的含量對(duì)達(dá)到預(yù)期目的而言是有效的。盡管個(gè)體的需要各不相同，不過(guò)每種組分的最佳有效量范圍的確定都在本領(lǐng)域技術(shù)范圍內(nèi)。通常，化合物對(duì)哺乳動(dòng)物、例如人類口服給藥的劑量可以是0.0025至50mg/kg哺乳動(dòng)物體重或其藥學(xué)上可接受的鹽的等價(jià)量每天，用于治療癲癇、神經(jīng)變性疾病、麻醉、心律失常、躁狂抑郁和慢性疼痛。就肌內(nèi)注射而言，劑量一般是口服劑量的大約一半。
在治療或預(yù)防全身性與局灶性缺血、腦與脊髓創(chuàng)傷、低氧、低血糖、癲癇持續(xù)狀態(tài)和手術(shù)中的神經(jīng)元損失的方法中，可以將化合物靜脈內(nèi)注射，劑量為約0.025至約10mg/kg。
單元口服劑量可以包含約0.01至約50mg、優(yōu)選約0.1至約10mg化合物?？梢詫卧?jiǎng)┝棵咳战o藥一次或多次，分一片或多片，每片含有約0.1至約10mg、適宜約0.25至50mg化合物或其溶劑化物。
除了將化合物作為粗化學(xué)品給藥以外，可以將本發(fā)明化合物作為藥物制備物的一部分給藥，其中含有適合的藥學(xué)上可接受的載體，包含賦形劑和助劑，它們有利于化合物加工成能夠藥用的制備物。優(yōu)選地，制備物、確切為能夠口服給藥和能夠用于優(yōu)選給藥類型的那些制備物，例如片劑、錠劑和膠囊劑，和能夠直腸給藥的制備物，例如栓劑，以及適合于注射或口服給藥的溶液，含有約0.01至99％、優(yōu)選約0.25至75％活性化合物，以及賦形劑。
在本發(fā)明范圍內(nèi)還包括本發(fā)明化合物的無(wú)毒性藥學(xué)上可接受的鹽。酸加成鹽是這樣生成的，將本發(fā)明嘧啶的溶液與藥學(xué)上可接受的無(wú)毒性酸的溶液混合，例如鹽酸、富馬酸、馬來(lái)酸、琥珀酸、乙酸、檸檬酸、酒石酸、碳酸、磷酸、草酸、二氯乙酸等。堿性鹽是這樣生成的，將本發(fā)明噻唑烷酮化合物的溶液與藥學(xué)上可接受的無(wú)毒性堿的溶液混合，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化膽堿、碳酸鈉等。
可以將本發(fā)明藥物組合物對(duì)任何可以體驗(yàn)本發(fā)明化合物有益效果的動(dòng)物給藥。這類動(dòng)物中最重要的是哺乳動(dòng)物，例如人類，不過(guò)本發(fā)明不打算僅限于此。
本發(fā)明藥物組合物可以借助任何達(dá)到預(yù)期目的的手段給藥。例如，給藥可以借助腸胃外、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、透皮或頰途徑。非此即彼地或者并行地，給藥可以借助口服途徑。所給藥的劑量將依賴于接受者的年齡、健康與體重、并行治療(如果有的話)的種類、治療的頻率和所需效果的屬性。
本發(fā)明藥物制備物是按照本身已知的方式制造的，例如借助常規(guī)的混合、造粒、制錠、溶解或凍干過(guò)程。因而，口用藥物制備物可以這樣制得，將活性化合物與固體賦形劑混合，可選地研磨所得混合物，再加工顆?；旌衔铮绻枰虮匾脑捲诩尤脒m合助劑后，得到片劑或錠劑芯。
適合的賦形劑確切地有填充劑，例如糖，例如乳糖或蔗糖，甘露糖醇或山梨糖醇，纖維素制備物和/或磷酸鈣，例如磷酸三鈣或磷酸氫鈣，以及粘合劑，例如淀粉糊，例如使用玉米淀粉、小麥淀粉、水稻淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮。如果需要的話，可以加入崩解劑，例如上述淀粉以及羧甲基淀粉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或者藻酸或其鹽，例如藻酸鈉。助劑尤其有流動(dòng)調(diào)節(jié)劑和潤(rùn)滑劑，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其鹽，例如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣，和/或聚乙二醇。為錠劑芯提供適合的包衣，如果需要的話包衣是耐受胃液的。為此，可以使用濃糖溶液，其中可以可選地含有阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶液和適合的有機(jī)溶劑或溶劑混合物。為了形成耐受胃液的包衣，使用適合的纖維素制備物的溶液，例如乙酰纖維素鄰苯二甲酸鹽或羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸鹽?？梢韵蚱瑒┗蝈V劑包衣加入染料或色素，例如用于鑒別或者為了區(qū)分活性化合物劑量的組合。
其他可以口用的藥物制備物包括由明膠制成的推入配合式膠囊劑、以及由明膠和增塑劑制成的軟密封膠囊劑，增塑劑例如甘油或山梨糖醇。推入配合式膠囊劑可以含有顆粒形式的活性化合物，它們可以與下列成分混合填充劑，例如乳糖；粘合劑，例如淀粉；和/或潤(rùn)滑劑，例如滑石或硬脂酸鎂；和可選的穩(wěn)定劑。在軟膠囊劑中，優(yōu)選地將活性化合物溶解或懸浮在適合的液體中，例如脂肪油或液體石蠟。另外，可以加入穩(wěn)定劑。
能夠直腸使用的可能的藥物制備物例如包括栓劑，由一種或多種活性化合物與栓劑基質(zhì)的組合組成。適合的栓劑基質(zhì)例如有天然或合成甘油三酯或石蠟烴。另外，還有可能使用明膠直腸膠囊劑，由活性化合物與基質(zhì)的組合組成?？赡艿幕|(zhì)材料例如包括液體甘油三酯、聚乙二醇或石蠟烴。
適合于腸胃外給藥的制劑包括水溶形式的活性化合物的水溶液，例如水溶性鹽和堿性溶液。另外，酌情可以將活性化合物的油性注射懸液給藥。適合的親脂性溶劑或載體包括脂肪油，例如芝麻油，或合成脂肪酸酯，例如油酸乙酯或甘油三酯或聚乙二醇-400(化合物可溶于PEG-400)。水性注射懸液可以含有增加懸液粘度的物質(zhì)，例如包括羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇和/或葡聚糖。可選地，懸液還可以含有穩(wěn)定劑。
本發(fā)明的另一方面涉及制備新穎的式I嘧啶化合物的方法，其中不適用上述附帶條件。
式I嘧啶是借助這樣一種方法制備的，包含第一步使腈-取代的芳基化合物與碳酸銨反應(yīng)，第二步使第一步產(chǎn)物與一種腈化合物反應(yīng)，選自 或 再回收第二步所得產(chǎn)物。
若R1是可選被取代的苯氧基苯基，對(duì)應(yīng)的腈-取代的芳基化合物可以這樣制備，使可選被取代的苯酚與鹵代苯基腈化合物反應(yīng)。若R1是可選被取代的芐氧基苯基，對(duì)應(yīng)的腈-取代的芳基化合物可以這樣制備，使可選被取代的苯甲醇與鹵代苯基腈化合物反應(yīng)。
若R1是可選被取代的苯硫基苯基或可選被取代的芐硫基苯基，對(duì)應(yīng)的腈-取代的化合物可以這樣制備，分別使可選被取代的巰基苯或可選被取代的巰基芐基化合物與鹵代苯基腈化合物反應(yīng)。
若R1是可選被取代的苯基或可選被取代的萘基，對(duì)應(yīng)的腈-取代的芳基化合物分別是可選被取代的芐腈或可選被取代的萘腈。
另外適合用在本發(fā)明中的腈-取代的芳基化合物是 其中R5和R6獨(dú)立地是氫、鹵素、可選被取代的C1-6烷基或可選被取代的C1-6烷氧基；p和q獨(dú)立地是整數(shù)0至4； 其中R7是氫、鹵素或可選被取代的C1-6烷基； 其中R8是氫或可選被取代的C1-6烷基。
流程1例證制備所選擇的本發(fā)明腈-取代的中間體化合物的方法，其中G代表一個(gè)或多個(gè)可選的取代基，選自鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基，R9選自氧或硫。本發(fā)明腈-取代的中間體化合物還可以借助本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的其他方法加以制備。如流程1所例證的所選擇的腈-取代的中間體化合物的R1可以被取代成其他如前文所定義的R1部分。
流程2顯示按照本發(fā)明步驟1和2制備式I嘧啶化合物的過(guò)程，其中R1、R2、R3和R4已經(jīng)如上文所定義。化合物5和6相當(dāng)于式I化合物。
流程1 X＝鹵素；R9＝O，S 所得化合物經(jīng)過(guò)快速柱色譜或硅膠色譜純化。
下列實(shí)施例是本發(fā)明方法和組合物的說(shuō)明而非限制。在臨床治療中遇到的和對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見(jiàn)的其他適合的多種條件和參數(shù)的變化和調(diào)整都在本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)。
實(shí)施例12-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-6-氨基-嘧啶-4-酮(5)的制備(a)4-(4-氟苯氧基)芐腈(3)的制備將4-氟苯酚(1)(5.1g，45.5mmol)、4-氟芐腈(2)(4.58g，37.8mmol)與碳酸鉀(12g，86.8mmol)在DMF(150mL)中的混合物回流過(guò)夜。將反應(yīng)冷卻至室溫，在乙酸乙酯與水之間分配。水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并有機(jī)層，用水洗滌三次，經(jīng)硫酸鈉干燥，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)，得到7.5g(93％)粗的4-(4-氟苯氧基)芐腈，為固體。1H NMR(CDCl3)δ7.60(d，J＝9.0Hz，2H)，7.10-6.96(m，6H).Tanaka，A.et al.，J.Med.Chem.414408-4420(1998)。
(b)4-(4-氟苯氧基)芐脒乙酸鹽(4)的合成將4-(4-氟苯氧基)芐腈(4.7g，22.4mmol)溶于乙醇。將溶液冷卻至0℃，向溶液通入HCl氣達(dá)20分鐘。將反應(yīng)密封，在室溫下攪拌過(guò)夜。在減壓下蒸發(fā)溶液，將所得固體殘余物溶于乙醇，用固體乙酸銨(6.0g，75.5mol)處理。攪拌過(guò)夜后，過(guò)濾分離純的脒。隨后從濾液中分離另外的產(chǎn)物。將濾液濃縮至干，將所得固體用己烷研制四次，從乙醇中重結(jié)晶兩次。所得脒的總重量為2.92g(45％收率)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.8 5(d，J＝8.0Hz，2H)，7.31(t，J＝8.7Hz，2H)，7.21-7.17(m，2H)，7.11(d，J＝8.0Hz，2H)，1.77(s，3H)。
(c)2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-6-氨基-嘧啶-4-酮(5)的合成向含有脒(4)(0.5mmol)和2-氰基乙酸(即式II腈)(1.5mmol)的反應(yīng)容器加入乙醇(0.75mL)和乙醇鈉的乙醇溶液(0.6mL，21wt.％)。將反應(yīng)在95℃下加熱2天。將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，蒸發(fā)溶劑。借助硅膠色譜進(jìn)行產(chǎn)物(5)的純化。
實(shí)施例22-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4-叔丁基-6-氨基嘧啶-4-酮(6)的制備向含有來(lái)自實(shí)施例1的脒(4)(0.5mmol)和氰甲基-叔丁基酮(即式III酮)(1.5mmol)的反應(yīng)容器加入乙醇(0.75mL)和乙醇鈉的乙醇溶液(0.6mL，21wt.％)。將反應(yīng)在95℃下加熱2天。將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，蒸發(fā)溶劑。借助硅膠色譜進(jìn)行產(chǎn)物(6)的純化。
實(shí)施例3本發(fā)明化合物的生物學(xué)活性借助上述測(cè)定法測(cè)定所選擇的本發(fā)明化合物的鈉通道抑制作用Ki值，列在下表1中。
表1本發(fā)明化合物的抑制常數(shù)(Ki) 實(shí)施例4片劑的制備如下表2所述制備分別含有25.0、50.0和100.0mg本發(fā)明化合物(即“活性化合物”)的片劑。
表2含有25-100mg活性化合物的片劑量(mg)活性化合物 25.0 50.0 100.00微晶纖維素 37.25100.0 200.0改性食用玉米淀粉 37.254.25 8.5硬脂酸鎂 0.50 0.75 1.5將全部活性化合物、纖維素和一部分玉米淀粉混合，造粒成10％玉米淀粉糊。將所得顆粒過(guò)篩，干燥，與其余玉米淀粉和硬脂酸鎂摻合。然后將所得顆粒壓制成片，分別含有25.0、50.0和100.0mg活性成分每片。表2所述每種成分的具體量不是限制性的，而是示范性的?；钚猿煞值牧靠梢允?5-100mg范圍內(nèi)的任意量。其余成分的量因而可以相應(yīng)地加以調(diào)整，如果本領(lǐng)域普通技術(shù)人員認(rèn)為必要的話。
實(shí)施例5靜脈內(nèi)溶液的制備如下表3所示制備本發(fā)明化合物(即“活性化合物”)的靜脈內(nèi)劑型。
表3靜脈內(nèi)溶液制劑活性化合物0.5-10.0mg檸檬酸鈉 5-50mg檸檬酸1-15mg氯化鈉1-8mg注射用水(USP) 適量至1ml利用上述量，將活性化合物在室溫下溶于預(yù)先制備的氯化鈉、檸檬酸與檸檬酸鈉在注射用水中的溶液(USP，United StatesPharmacopeia/National Formulary for 1995，p.1636，United StatesPharmacopeial Convention，Inc.，Rockville，Maryland(1994))。
現(xiàn)在已經(jīng)詳細(xì)描述了本發(fā)明，將為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所理解的是，可以在寬泛和等價(jià)的條件、制劑與其他參數(shù)范圍內(nèi)實(shí)施發(fā)明，而不影響發(fā)明或其任意實(shí)施方式的范圍。
鑒于本文所公開(kāi)的發(fā)明的說(shuō)明和實(shí)施，其他發(fā)明實(shí)施方式對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言將是顯而易見(jiàn)的。說(shuō)明和實(shí)施例被視為僅僅是示范性的，發(fā)明的真正范圍和精神是由下列權(quán)利要求書(shū)所指出的。
本文引用的全部專利和出版物全文結(jié)合在此作為參考。
權(quán)利要求
1.式I化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其中A選自C＝O或C-R4，其中當(dāng)A是C＝O時(shí)，N與A之間的鍵是單鍵，R3是存在的；當(dāng)A是C-R4時(shí)，N與A之間的鍵是雙鍵，R3是不存在的；R4是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；R1選自下組(i)苯氧基苯基；(ii)芐氧基苯基；(iii)苯硫基苯基；(iv)芐硫基苯基；(v)苯基；(vi)萘基；其中每個(gè)(i)至(iv)的末端芳基環(huán)和(v)與(vi)環(huán)的任意部分可選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；其附帶條件是當(dāng)(a)R1是苯基且A是C-R4時(shí)，其中R4是氫或C1-6烷基；R2不是(i)氫；(ii)C1-3烷基；(iii)烷氧基取代的芐基；(iv)C1-2烷氧基烷基；(v)C1-2羥基烷基；(vi)C1-2鹵代烷基；(vii)C1-3烷氧基；或者當(dāng)(b)R1是苯基且A是C＝O時(shí)；R2不是氫；或者當(dāng)(c)R1是萘基且A是C-R4時(shí)，其中R4是氫或C1-6烷基；R2不是(i)氫，或(ii)C1-6烷基；(vii) 其中R5和R6獨(dú)立地是鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；p和q獨(dú)立地是整數(shù)0至4；其附帶條件是當(dāng)(a)A是C-R4時(shí)，其中R4是氫或C1-6烷基；R2不是(i)氫，或(ii)C1-6烷基；(viii) 其中R7是鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；(ix) 其中R8是C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；R2選自下組(i)氫；(ii)C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；(iii)芐基，可選地被鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；R3選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；并且僅當(dāng)A是C＝O時(shí)是存在的。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中A是C＝O。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1選自下組(i)苯氧基苯基；(ii)芐氧基苯基；和(iii)苯基；其中每個(gè)(i)和(ii)的末端芳基環(huán)和(iii)環(huán)的任意部分可選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R2選自氫或芐基，可選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中R3選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
6.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1是苯氧基苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是氫；R3是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
7.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1是苯氧基苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是芐基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R3是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
8.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1是芐氧基苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是氫；R3是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
9.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1是芐氧基苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是芐基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R3是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
10.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1是苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是芐基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R3是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中A是C-R4。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的化合物，其中R1選自下組(i)苯氧基苯基；(ii)芐氧基苯基；和(iii)苯基；其中每個(gè)(i)和(ii)的末端芳基環(huán)和(iii)環(huán)的任意部分可選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其中R2選自氫或芐基，可選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代。
14.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其中R1是苯氧基苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是氫；R4是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
15.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其中R1是苯氧基苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是芐基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R4是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
16.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其中R1是芐氧基苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是氫；R4是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
17.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其中R1是芐氧基苯基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R2是芐基，可選地被鹵素或C1-6烷基取代；R4是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
18.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物選自下組2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-6-氨基-嘧啶-4-酮；2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-6-氨基-5-(2-氯芐基)嘧啶-4-酮；2-苯基-6-氨基-5-(2-氯芐基)嘧啶-4-酮；和2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4-叔丁基-6-氨基嘧啶-4-酮；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
19.藥物組合物，包含根據(jù)權(quán)利要求1-18任意一項(xiàng)的化合物和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
20.治療、預(yù)防或改善患有對(duì)鈉通道阻滯有應(yīng)答的障礙的哺乳動(dòng)物所述障礙的方法，包含對(duì)需要這類治療的所述哺乳動(dòng)物給以有效量的式I化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其中A選自C＝O或C-R4，其中當(dāng)A是C＝O時(shí)，N與A之間的鍵是單鍵，R3是存在的；當(dāng)A是C-R4時(shí)，N與A之間的鍵是雙鍵，R3是不存在的；R4是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；R1選自下組(i)苯氧基苯基；(ii)芐氧基苯基；(iii)苯硫基苯基；(iv)芐硫基苯基；(v)苯基；(vi)萘基；其中每個(gè)(i)至(iv)的末端芳基環(huán)和(v)與(vi)環(huán)的任意部分可選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；(vii) 其中R5和R6獨(dú)立地是鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；p和q獨(dú)立地是整數(shù)0至4；(viii) 其中R7是鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；(ix) 其中R8是C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；R2選自下組(i)氫；(ii)C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；(iii)芐基，可選地被鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；R3選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；并且僅當(dāng)A是C＝O時(shí)是存在的。
21.治療、預(yù)防或改善患有對(duì)鈉通道阻滯有應(yīng)答的障礙的哺乳動(dòng)物所述障礙的方法，包含對(duì)需要這類治療的所述哺乳動(dòng)物給以有效量的選自下組的化合物2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-6-氨基-嘧啶-4-酮；2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-6-氨基-5-(2-氯芐基)嘧啶-4-酮；2-苯基-6-氨基-5-(2-氯芐基)嘧啶-4-酮；和2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4-叔丁基-6-氨基嘧啶-4-酮；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
22.根據(jù)權(quán)利要求20或21任意一項(xiàng)的方法，其中所述障礙選自由神經(jīng)元損傷、神經(jīng)變性病癥、急性或慢性疼痛、抑郁和糖尿病性神經(jīng)病組成的組。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的方法，其中所述神經(jīng)元損傷是由局灶性或全身性缺血所導(dǎo)致的。
24.根據(jù)權(quán)利要求22的方法，其中所述神經(jīng)變性病癥是肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)。
25.根據(jù)權(quán)利要求20或21任意一項(xiàng)的方法，其中所述化合物充當(dāng)抗耳鳴劑、抗驚厥劑、抗心律失常劑、局部麻醉劑或抗躁狂抑郁劑。
26.根據(jù)權(quán)利要求20或21任意一項(xiàng)的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人、狗或貓。
27.制備式I化合物的方法， 或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其中A選自C＝O或C-R4，其中當(dāng)A是C＝O時(shí)，N與A之間的鍵是單鍵，R3是存在的；當(dāng)A是C-R4時(shí)，N與A之間的鍵是雙鍵，R3是不存在的；R4是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；R1選自下組(i)苯氧基苯基；(ii)芐氧基苯基；(iii)苯硫基苯基；(iv)芐硫基苯基；(v)苯基；(vi)萘基；其中每個(gè)(i)至(iv)的末端芳基環(huán)和(v)與(vi)環(huán)的任意部分可選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；(vii) 其中R5和R6獨(dú)立地是鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；p和q獨(dú)立地是整數(shù)0至4；(viii) 其中R7是鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；(ix) 其中R8是C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；R2選自下組(i)氫；(ii)C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；(iii)芐基，可選地被鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；R3選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；并且僅當(dāng)A是C＝O時(shí)是存在的；其中所述方法包含(i)使腈-取代的芳基化合物與銨鹽反應(yīng)；(ii)使(i)所得產(chǎn)物與一種腈化合物反應(yīng)，選自 或 (iii)回收(ii)所得產(chǎn)物。
28.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其中該腈-取代的芳基化合物選自下組(i)苯氧基芐腈；(ii)芐氧基芐腈；(iii)苯硫基芐腈；(iv)芐硫基芐腈；(v)芐腈；(vi)萘腈；其中每個(gè)(i)至(iv)的末端芳基環(huán)和(v)與(vi)環(huán)的任意部分可選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；(vii) 其中R5和R6獨(dú)立地是鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；p和q獨(dú)立地是整數(shù)0至4；(viii) 其中R7是鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；(ix) 其中R8是C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基。
29.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其中就步驟(ii)而言R2選自下組(i)氫；(ii)C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基；(iii)芐基，可選地被鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基、C1-6羥基烷基或C1-6烷氧基烷基取代；R3選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6鹵代烷基。
30.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其中步驟(i)的反應(yīng)溶劑包含鹽酸和一種醇。
31.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述醇選自甲醇、乙醇或丙醇。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，其中所述醇是乙醇。
全文摘要
本發(fā)明涉及使用新穎的式(I)芳基取代的嘧啶化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物治療對(duì)鈉離子通道阻滯有應(yīng)答的障礙的方法，其中A、R
文檔編號(hào)A61P3/10GK1646500SQ03808383
公開(kāi)日2005年7月27日 申請(qǐng)日期2003年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月13日
發(fā)明者R·R·格赫靈, S·F·維科特里, D·J·凱勒 申請(qǐng)人:歐洲凱爾特股份有限公司