專利名稱：C型肝炎輔助治療劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種做為輔助治療C型肝炎具有冬蟲夏草、黃蓍成分的治療劑，其可搭配C型肝炎復(fù)合療法(干擾素和Ribavirin)以提高C型肝炎的治愈率。
背景技術(shù)：
C型肝炎病毒是一種RNA病毒，在1989年發(fā)現(xiàn)，以前稱為非A非B型肝炎(Non-A，Non-B hepatitis)，多半由輸血引起，發(fā)現(xiàn)此病毒后，檢驗(yàn)人員在輸血前，所有血液皆事先篩檢，發(fā)生率遂大幅下降。
C型肝炎依據(jù)okamoto氏的分類分別為I、II、III、IV四種基因型，在臺灣的C型肝炎主要為geno typeII約占73％，其次為typeIII占13％及typeIV占3％。使用干擾素治療C型肝炎以對于III型和IV型比較有效，而對于II型和I型效果較差。單獨(dú)使用干擾素治療慢性肝炎的病毒廓清率不佳約僅20-30％，因此，全世界目前皆采用干擾素合并Ribavirin的組合療法來治療C型肝炎，據(jù)稱可達(dá)到加倍的效果。另外一種長效型的干擾素(如pegylated干擾素)也正在發(fā)展中，其是利用生物科技使干擾素緩慢釋放，其半衰期較傳統(tǒng)干擾素長十倍而維持在病患血液中，使病患每周就診的次數(shù)減少。
目前C型肝炎的治療方式，以利用干擾素合并抗病毒藥物Ribavirin的復(fù)合療法(combanation therapy)較單獨(dú)采用干擾素治療有較佳的療效，但是，治療后發(fā)現(xiàn)也僅有18％達(dá)到持續(xù)性病毒清除，當(dāng)然，若延長干擾素療程到一年的時(shí)間，固然可以提高其持續(xù)性病毒清除到30％，但藥物的副作用及花費(fèi)等負(fù)擔(dān)，仍是病者所無法忍受的。以藥物的副作用而言干擾素的副作用洼射初期有重感冒如發(fā)燒、頭痛、肌肉酸痛、噁心癥狀，不過在一至二周后即會消失。
晚期會產(chǎn)生疲倦、肌肉酸痛、白血球輕度下降、貧血憂郁及焦慮、焦躁不安、體重減輕及掉頭發(fā)等癥狀。
抗病毒藥物Ribavirin的副作用有貧血、咳嗽、搔癢、紅疹及失眠等癥狀。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種C型肝炎輔助治療劑，該輔助治療劑搭配C型肝炎復(fù)合療法(干擾素和Ribavirin)，其效果優(yōu)于目前任何一種治療方式，尤其服用該輔助治療劑后，肝硬化病人體內(nèi)的自然殺手細(xì)胞、CD8+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞和CD4+/CD8+細(xì)胞比率明顯增加，IgG、IgA則會降低，血清中補(bǔ)體濃度也相對提高，因此有提同患者免疫機(jī)能的功效。
具體實(shí)施例方式
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的C型肝炎輔助治療劑用以搭配C型肝炎復(fù)合療法(干擾素和Ribavirin)以治療C型肝炎，包含重量比50至90的冬蟲夏草(Cordyceps sinensis)及重量比10至50的黃蓍(Astragalus memsrancens)。
其中，冬蟲夏草指其無性型的中國被毛孢(Hirsutella sinensis)菌絲體深層發(fā)酵培養(yǎng)物。
其中，冬蟲夏草指冬蟲夏草所分離純化而得的菌絲體(菌種)，包含中國擬青霉(Paecilomyces sinensi)、中國金孢霉(Chrysosporiumsinense)、蟲生簇孢(Sporothrix insectorum)、葡萄穗霉(Stachybotrys sp.)、中國彎頸霉(Tolypocladium sp.)、蝙蝠峨擬青霉、蝙蝠蛾被毛孢等菌絲體深層發(fā)酵培養(yǎng)物。
其中，冬蟲夏草較佳的重量比為70至80，黃蓍為20至30。
其中，還包含重量比5至10的鋅。
其中，包含重量比75至80的冬蟲夏草、重量比10至20的黃著，以及重量比5至10的鋅。
該輔助治療劑中的主要成分及其對治療C型肝炎的藥理功效，分述如下
冬蟲夏草(Cordyceps sinensis)成分冬蟲夏草含有許多活性物質(zhì)，包括胺基酸、多醣類(polysaccharide)、蟲草素(cordycepin)、蟲草酸(cordycepic acid)、麥角醇(ergosterol)、核甘酸(nucleutide)、超氧歧化酵素(SOD)及微量元素(traceelements)。其中，核甘酸有使細(xì)胞活潑，自然提高人體機(jī)能與抵御致病物的能力。
藥理功效冬蟲夏草的藥理作用包括抗菌、消炎、解熱、鎮(zhèn)靜、促進(jìn)血管擴(kuò)張、平喘、抗心律不整、促進(jìn)新陳代謝、抗老化、抗腫瘤(癌癥)及刺激免疫活性。一般多用于祛痰、鎮(zhèn)咳、增強(qiáng)精力、病后復(fù)原與腎虛陽萎，于下列疾病亦有療效，如肺結(jié)核、貧血、狹心癥、腎炎、肝炎、肝硬化、高血壓、糖尿病及多種癌癥治療在臨床上亦有實(shí)例。
另在藥理研究文獻(xiàn)中，冬蟲夏草曾被提及的作用大致有對細(xì)胞免疫或體液免疫，具有抑制、促進(jìn)的雙向調(diào)節(jié)作用。其水萃取物可促進(jìn)胸腺細(xì)胞有絲分裂，直接刺激T淋巴細(xì)胞增值。與桃仁并用治療肝炎后肝硬化，可以增加淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)換率，自然殺手細(xì)胞功能，CD4+/CD8+比值。對肝炎后肝硬化治療顯示其仰制體液免疫作用，降低IgG、IgA等。
黃蓍(Astragalus memsrancens)成份黃蓍為多年生荳科草本植物黃蓍的根，種類繁多，學(xué)名Astragalus memsrancens，俗名Milk-Vetch Root。是一種生長在中國南方多年生草本植物，使用部位為根部，根部中心為深黃色，嘗起來帶有甜味。黃蓍藥用部位為根部，是一種極為普通、非常安全的多年生草本植物，也是中醫(yī)最廣泛用來補(bǔ)氣的補(bǔ)養(yǎng)藥物。近代科學(xué)家對黃蓍的藥理作用和化學(xué)成份進(jìn)行廣泛的研究，分析黃蓍主要含多糖、單糖、黃酮類、生物堿(膽堿、甜菜堿)、多種氨基酸、葡萄糖醛酸及微量葉酸等，及硒、硅等多種微量金屬元素。
藥理功效根據(jù)可靠文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，黃蓍已成為治療癌癥和愛滋病這兩種疾病所需的重要免疫調(diào)整劑，作為一種可以支援已經(jīng)轉(zhuǎn)弱的免疫系統(tǒng)、可以強(qiáng)化人體內(nèi)的干擾素系統(tǒng)的草藥。另外，近年來在國外的健康食品也逐漸加入黃著作為主成份之一，以提供消費(fèi)者以天然物藥品作為治療疾病的另一選擇。就黃蓍的藥理功效而言，經(jīng)實(shí)驗(yàn)得知，其在抗體生成方面對免疫反應(yīng)早期階段的脾臟抗原結(jié)合細(xì)胞(包括T細(xì)胞、B細(xì)胞的前驅(qū)體細(xì)胞)有促進(jìn)增生作用。對正常人或病患均有增進(jìn)脾臟中環(huán)磷酸腺甘(cAMP)，及血液中IgG，IgA和IgM的能力。在細(xì)胞免疫方面，對慢性氣管炎、慢性肝炎患者及健康人均有增強(qiáng)細(xì)胞免疫的功能。
黃蓍對免疫功能有廣泛而重要的影響，具有增強(qiáng)或調(diào)節(jié)的作用。在動物實(shí)驗(yàn)中證明，黃蓍可促進(jìn)病毒誘生γ-干擾素而抑制病毒繁殖。
冬蟲夏草的鑒定本發(fā)明所采用的冬蟲夏草，廣義的包括了在文獻(xiàn)中所稱的冬蟲夏草對應(yīng)的無性世代所分離純化而得的菌絲體(菌種)，包括有中國被毛孢(Hirsutella sinensis)、中國擬青霉(Paecilomyces sinensi)、中國金孢霉(Chrysosporium sinense)、蟲生簇孢(Sporothrix insectorum)、葡萄穗霉(Stachybotrys sp.)、中國彎頸霉(Tolypocladium sp.)、蝙蝠蛾擬青霉、蝙蝠蛾被毛孢等菌絲體的深層發(fā)酵培養(yǎng)物，而在以下的本發(fā)明所有的敘述及操作中所稱的冬蟲夏草是指中國被毛孢(Hirsutella sinensis)。中國被毛孢雖然1989年被報(bào)導(dǎo)為冬蟲夏草的無性型，但其一直是學(xué)術(shù)的爭論焦點(diǎn)。因此，申請人通過業(yè)已取得的美國專利權(quán)US6251606及US6271003兩件冬蟲夏草鑒定技術(shù)，對中國被毛孢進(jìn)行是否為冬蟲夏草的生物鑒定，結(jié)果證實(shí)中國被毛孢確為冬蟲夏草的無性型。另外，其他的研究報(bào)告也指出，通過比較它們之間的ITS序列發(fā)現(xiàn)天然的冬蟲夏草和中國被毛孢的遺傳距離是很低的(＜0.02)(即相似率很高)，而和中國擬青霉(Paecilomycessinensi)、葡萄穗霉(Stachybotrys sp.)，彎頸霉(Tolypocladium sp.)的遺傳距離相當(dāng)大(即相似率低)，分別為0.34，0.21和0.25。因此，本發(fā)明選擇以中國被毛孢代表冬蟲夏草做為操作的對象。但此選擇并非據(jù)此否定其他如中國擬青霉、葡萄穗霉、彎頸霉等不具有冬蟲夏草的成分，而無法做為本發(fā)明的治療劑成分并達(dá)到預(yù)期的功效。
冬蟲夏草(中國被毛抱)的毒性測試以冬蟲夏草為成分的保健食品已是市場中的主流，但為使本發(fā)明所采用的冬蟲夏草在長時(shí)間劑量的服用后，不致對人體產(chǎn)生不良影響，尤其足對免疫功能降低的C型肝炎患，因此，針對冬蟲夏草(Cordycepssinensis)(中國被毛孢)的毒性，委托臺灣中國醫(yī)藥研究所(National ResearchInstitute of Chinese Medicine)，進(jìn)行亞急性霉性測試。
1、執(zhí)行方式進(jìn)行連續(xù)14天口服每日一劑本發(fā)明的冬蟲夏草菌絲體水萃取物(Water fractin of Cordyceps MeOH extracts)的亞急性安全毒理試驗(yàn)。萃取物給藥劑量是以臨床給藥劑量10倍為參考指標(biāo)，每日一劑連續(xù)口服兩周，并連續(xù)觀察實(shí)驗(yàn)動物(大白鼠)以下各項(xiàng)情況(1).行為表現(xiàn)(自發(fā)性運(yùn)動)。
(2).體重、食物及水?dāng)z取量的變化。
(3).血液學(xué)的檢驗(yàn)如血紅素、血小板、紅血球、白血球的分類，以及凝血時(shí)間等。
(4).血液生化檢驗(yàn)一血液生化12項(xiàng)檢查，如bilirubin，AST，ALT，BUN，Creatinine，glucose，total protein，albumin，K，Na，Ca。
(5).尿液生化檢驗(yàn)如沉降比、蛋白質(zhì)、電解質(zhì)含量、pH值。
(6).器官與組織切片心、肝、肺、腎、胃、膽等主要臟器的顯微病理解剖檢驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)動物連續(xù)服用，冬蟲夏草菌絲體水萃取物15天，經(jīng)觀察統(tǒng)計(jì)后發(fā)現(xiàn)，對服用飼料、飲水量、尿量與對照組比較并無影響，血中生化值顯示，全身營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的參考值血漿蛋白增加，而相對的BUN，尿中蛋白質(zhì)亦增加，但是鼠類與人類不同點(diǎn)的一為尿中含有蛋白質(zhì)且隨血漿的量而增加，并不是因藥物所引起的毒性現(xiàn)象。
由以上結(jié)果可以得知，本發(fā)明的冬蟲夏革菌絲體水萃取物，對于實(shí)驗(yàn)動物大白鼠并無亞急性毒性的影響。
實(shí)驗(yàn)性前臨床試驗(yàn)為進(jìn)一步驗(yàn)證本發(fā)明的輔助治療劑的藥效，特與醫(yī)師合作進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性前臨床試驗(yàn)，將輔助治療劑與干擾素和Ribavirin合并治療C型肝炎，其結(jié)果治療率接近90％，并能有效改善C型肝炎患者使用干擾素和Ribavirin的各種副作用。
所有的受試病患皆接受為期24周的敷干擾素和Ribavirin合并治療，再搭上本發(fā)明的輔助治療劑或是安慰劑(placebo)，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的雙盲試驗(yàn)(double-blind)，治療24周再另外追蹤24周，成為總共為48周的實(shí)驗(yàn)性前臨床實(shí)驗(yàn)。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間，收集血液樣本及資料。
第2周開始將病患分組并給予實(shí)驗(yàn)組補(bǔ)充本發(fā)明的輔助治療劑或安慰劑，于第24周干擾素合并Ribavirin治療結(jié)束，輔助治療劑或安慰劑仍持續(xù)提供至第48周結(jié)束。血液樣本及資料包括·抽血檢驗(yàn)相尖生化數(shù)值-WBC、Hemoglobin、Platelet、BUN、Creatinine、SGOT/SGPT、HCV-RNA定性。
·不適癥狀種類及頻率實(shí)驗(yàn)性臨床實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)結(jié)果依次如下列所示實(shí)驗(yàn)性前臨床試驗(yàn)一1、治療藥物治療期6個(gè)月，皮下注射羅氏Roferon-A(IFN)3百萬單位，每周3次(無搭配抗病毒藥Ribavirin)，并于治療期第2周開始口服本發(fā)明的輔助治療劑或安慰劑，一直持續(xù)到笫6個(gè)月結(jié)束。
2、受試人數(shù)28人，皆未曾接受過干擾素治療，進(jìn)行隨機(jī)編組。
3、″IFN+輔助治療劑”組10人，單純干擾素治療搭配本發(fā)明的輔助治療劑。
4、″IPN″組18人，單純干擾素治療搭配安慰劑。
5、持續(xù)病毒清除率％(SVR)如表1表1實(shí)驗(yàn)性前臨床試驗(yàn)一結(jié)果 括號中為其占總受試人口的百分比6、結(jié)論(1).加入本發(fā)明的輔助治療劑搭配治療，可以提升干擾素治療效果。
(2).加入本發(fā)明的輔助治療劑搭配治療，可以降低治療后的復(fù)發(fā)牢。
實(shí)驗(yàn)性前臨床試驗(yàn)二1、治療藥物采用復(fù)合療法，皮下注射羅氏Roferon-A(IFN)3百萬單位每周3次，加抗病毒藥Ribavirin 1000毫克每周2次。并于治療期第二周開始口服本發(fā)明的輔助治療劑或安慰劑，治療期一共6個(gè)月。
2、受試人數(shù)20人，皆未曾接受過干擾素治療，進(jìn)行隨機(jī)編組。
3、″IFN+輔助治療劑″組8人，標(biāo)準(zhǔn)復(fù)合療法搭配輔助治療劑。
4、″IFN″組12人，標(biāo)準(zhǔn)復(fù)合療法搭配安慰劑。
5、持續(xù)病毒清除率％(SVR)如表2表2實(shí)驗(yàn)性前臨床試驗(yàn)二結(jié)果 括號中為其占總受試人口的百分比6、結(jié)論(1)加入本發(fā)明的輔助治療劑搭配治療，可以提升復(fù)合療法(IFN+Ribavirin)的治療效果。
(2)加入本發(fā)明的輔助治療劑搭配治療，可以降低治療后的復(fù)發(fā)率；8個(gè)受試患者中，有7個(gè)在治療后2年仍維持病毒安全清除的狀態(tài)。
(3)在這個(gè)試驗(yàn)中，加入抗病毒藥Ribavirin似乎沒有改善治療的效果。
實(shí)驗(yàn)性前臨床試驗(yàn)三1、治療藥物治療期6個(gè)月，皮下注射羅氏Roferon-A(IFN)3百萬單位每周3次，加抗病毒藥Ribavirin 1000毫克每周2次，并于治療期第二周開始口服本發(fā)明的輔助治療劑或安慰劑。
2、受試人數(shù)32人，皆未曾接受過干擾素治療，進(jìn)行隨機(jī)編組。
3、″IFN+輔助治療劑″組16人，標(biāo)準(zhǔn)復(fù)合療法搭配本發(fā)明的輔助治療劑。
4、″IFN″組16人，標(biāo)準(zhǔn)復(fù)合療法搭配安慰劑。
5.持續(xù)病毒清除率％(SVR)如表3
表3 實(shí)驗(yàn)性前臨床試驗(yàn)三結(jié)果 括號中為其占總受試人口的百分比6、治療時(shí)副作用比較副作用 ″IFN+輔助治療劑″組人數(shù)″IFN″組人數(shù)發(fā)燒、頭痛、肌肉酸痛 13(83％)14(90％)疲倦 12(75％)12(75％)關(guān)節(jié)痛 13(83％)12(75％)異常眼球運(yùn)動 10(63％)13(83％)輕微脫發(fā) 9(56％) 10(63％)紅疹 11(69％)11(69％)憂郁 10(63％)11(69％)易怒 2(13％) 3(19％)失眠 12(75％)13(83％)體重減輕 9(56％) 14(90％)貧血10g/dl＜血紅素＜11g/dl 5(31％) 9(56％)9g/dl＜血紅素＜10g/dl 1(6％) 2(13％)血紅素＜9g/dl 1(6％) 0(0％)白血球減少3,000/UL＜白血球＜3,500/UL 3(19％) 5(31％)2,500/UL＜白血球＜3,000/UL 0(0％) 0(0％)白血球＜2,500/UL 3(19％) 1(6％)括號中代表其占總受試人口的百分比7、結(jié)論(1)加入本發(fā)明的輔助治療劑搭配復(fù)合療法(IFN+Ribavirin)治療，展現(xiàn)了病毒的清除率提升的效果，同時(shí)也降低了復(fù)發(fā)率。
(2)在治療時(shí)的副作用中，有加入本發(fā)明的輔助治療劑的那一組，異常眼球運(yùn)動、體重減輕、血紅素及白血球細(xì)胞減少等副作用，都有減緩的情形。
由上述的各種實(shí)驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)可知，本發(fā)明的輔助治療劑確實(shí)可搭配目前的C型肝炎治療方式，并能有效的增加其療效，及減輕病患于治療時(shí)的副作用。
如上述的本發(fā)明的C型肝炎輔助治療劑主要是由冬蟲夏草、黃蓍所組成，然而在實(shí)際的實(shí)施過程中尚可添加其他微量的元素以增加其對C型肝炎治療的治療效果。例如，在本發(fā)明的C型肝炎輔助治療劑中加入微量的鋅(Zinc)元素，可以補(bǔ)充C型肝炎患者體內(nèi)所流失的鋅，而且鋅元素自來就對于人體免疫細(xì)胞(T細(xì)胞)的生成有直接關(guān)系，因此，將鋅加入于本發(fā)明的C型肝炎輔助治療劑中，可以增生患者的免疫細(xì)胞暨達(dá)到提升免疫功能的效果。該加入的微量鋅元素的重量比約5-10。上述的鋅元素補(bǔ)充，還可通過其他的方式，非以直接加入本發(fā)明的C型肝炎輔助治療劑中為唯一的實(shí)施方式。
權(quán)利要求
1.一種C型肝炎輔助治療劑，用以搭配C型肝炎復(fù)合療法(干擾素和Ribavirin)以治療C型肝炎，包含重量比50至90的冬蟲夏草(Cordyceps sinensis)及重量比10至50的黃蓍(Astragalus memsrancens)。
2.如權(quán)利要求1所述的C型肝炎輔助治療劑，其特征在于，冬蟲夏草指其無性型的中國被毛孢(Hirsutella sinensis)菌絲體深層發(fā)酵培養(yǎng)物。
3.如權(quán)利要求1所述的C型肝炎輔助治療劑，其特征在于，冬蟲夏草指冬蟲夏草所分離純化而得的菌絲體(菌種)，包含中國擬青霉(Paecilomyces sinensi)、中國金孢霉(Chrysosporiumsinense)、蟲生簇孢(Sporothrix insectorum)、葡萄穗霉(Stachybotrys sp.)、中國彎頸霉(Tolypocladium sp.)、蝙蝠峨擬青霉、蝙蝠蛾被毛孢等菌絲體深層發(fā)酵培養(yǎng)物。
4.如權(quán)利要求1所述的C型肝炎輔助治療劑，其特征在于，冬蟲夏草較佳的重量比為70至80，黃蓍為20至30。
5.如權(quán)利要求1所述的C型肝炎輔助治療劑，其特征在于，還包含重量比5至10的鋅。
6.如權(quán)利要求5所述的C型肝炎輔助治療劑，其特征在于，包含重量比75至80的冬蟲夏草、重量比10至20的黃著，以及重量比5至10的鋅。
全文摘要
一種C型肝炎輔助治療劑，用以搭配C型肝炎復(fù)合療法(干擾素和Ribavirin)以治療C型肝炎，其由重量比50至90的冬蟲夏草、重量比10至50的黃蓍所組成。由該輔助治療劑以調(diào)節(jié)C型肝炎患者的免疫機(jī)能，并搭配既有的干擾素療法殺死病毒，從而提升C型肝炎的療效。
文檔編號A61P1/00GK1607003SQ20031010128
公開日2005年4月20日 申請日期2003年10月16日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月16日
發(fā)明者柯萬盛 申請人:泰宗生物科技股份有限公司