專利名稱：一種魚腥草凍干粉針劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種魚腥草凍干粉針劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
魚腥草為三白草科蕺菜屬植物蕺菜Houttuyniacordata Thunb的全草，始載于《名醫(yī)別錄》。味辛、性涼，具有清熱解毒、消癰排膿、利尿通淋等功效。因具有抗菌、抗病毒、抗過敏、抗腫瘤、抗炎止痛、增強機體免疫功能、抗鉤端螺旋體、利尿等作用而廣泛應(yīng)用于臨床，現(xiàn)代藥理研究表明，魚腥草的作用有1.呼吸系統(tǒng)疾病應(yīng)用；2.消化系統(tǒng)疾病應(yīng)用；3.泌尿系統(tǒng)疾病應(yīng)用；4.婦科疾病應(yīng)用；5.五官科疾病應(yīng)用；6.腫瘤疾病應(yīng)用；7其他疾病的應(yīng)用，如水痘、帶狀皰疹、腮腺炎、銀屑病。
魚腥草有效成分主要為揮發(fā)油中的魚腥草素，其易于聚合失效[上海藥品檢驗所.魚腥草有效成分癸酰乙醛分析的初步研究.新醫(yī)藥雜志，1973，(8)33.]，常被制成亞硫酸鈉加成物，實驗表明，魚腥草素水溶液易混濁，甚至出現(xiàn)油狀物，顯示其在水中溶解性能不佳及不穩(wěn)定，又由于該藥具有強烈魚腥氣味，使其注射液制劑和應(yīng)用受到一定限制[劉啟泰，秀紹宗，趙勝利，等.魚腥草注射液質(zhì)量的研究.中草藥通訊，1979，(11)23.]。近年來報道，藥劑學(xué)上新型輔料2-羥丙基-β-環(huán)糊精能與多種化合物形成包合物，可增強藥物的穩(wěn)定性，提高溶解度及溶出度，降低藥物揮發(fā)性，掩蓋不良氣味。隨著制劑研究的深入，β-環(huán)糊精本身固有的水溶解度低、毒性大等缺點和不足顯示出來，2-羥丙基-β-環(huán)糊精是β-環(huán)糊精經(jīng)過人工合成的衍生物，與β-環(huán)糊精比較，2-羥丙基-β-環(huán)糊精的水溶性顯著提高，熱穩(wěn)定性好，溶血作用顯著降低，2-羥丙基-β-環(huán)糊精的毒性與葡萄糖相近[國外醫(yī)藥—合成藥、生化藥、制劑分冊，1996第17卷第2期]。因此，應(yīng)用2-羥丙基-β-環(huán)糊精對魚腥草提取物進行包合比用β-環(huán)糊精包合具有顯著的實際意義。
現(xiàn)在臨床廣泛應(yīng)用的魚腥草制劑包括魚腥草注射液和與魚腥草素鈉制劑，前者是以魚腥草提取的揮發(fā)油為制劑原料制備成的注射液，因為魚腥草揮發(fā)油的性質(zhì)，使其制劑經(jīng)常出現(xiàn)渾濁、出現(xiàn)油滴等情況，使其質(zhì)量和藥理藥效大大降低；后者屬于合成類化學(xué)藥品，臨床中常常出現(xiàn)魚腥草素鈉不穩(wěn)定導(dǎo)致的不良反應(yīng)，給患者帶來巨大痛苦；專利申請?zhí)枮?6117459“一種魚腥草注射液及其制備方法”的專利采用水蒸氣蒸餾法提取魚腥草有效部位，制備成注射液，從提取工藝上本發(fā)明的新穎性較差，從制劑上，本發(fā)明制備成注射液，同樣具有制劑質(zhì)量不穩(wěn)定和藥理藥效降低的缺點。

發(fā)明內(nèi)容
基于上述原因，本發(fā)明采用超臨界提取法從魚腥草中提取純化有效部位，最大程度的提高了有效成分的含量，再用2-羥丙基-β-環(huán)糊精與提取物按照特定比例進行包合，使得有效成分在包合物中含量達到最大，同時也使揮發(fā)油成分提取物更加趨于穩(wěn)定，最后與藥用輔料混合制備成凍干粉針劑。本發(fā)明的魚腥草凍干粉針劑具有很好的穩(wěn)定性、溶解度、溶出度、生物利用度，與同類品種比較具有更好的藥理作用。
本發(fā)明通過以下實驗方案實現(xiàn)的。
一.工藝制法(1)取魚腥草粉碎，過30-50目篩，放入CO2超臨界提取器中的萃取釜中，調(diào)整萃取釜壓力為15-25Mpa，萃取溫度為30℃-50℃，流量為50-60Kg/h，解析釜1、2的壓力為3-5Mpa，解析溫度為20℃-30℃，萃取60-100分鐘，合并解析釜1、2的物料，備用；取上述解析釜1、2的物料，采用飽和水溶液法用2-羥丙基-β-環(huán)糊精進行包合稱取2-羥丙基-β-環(huán)糊精，以20ml/g-30ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草提取物∶2-羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶4-10的比例(v/g)加入魚腥草提取物，攪拌時間40-80分鐘，取出冷卻20-24小時，離心，過濾，濾渣常溫下干燥36-48小時，得到魚腥草揮發(fā)油包合物；(2)本發(fā)明的制劑的處方為魚腥草揮發(fā)油包合物為10-30重量份，藥用輔料為70-90重量份；(3)按照本發(fā)明制劑處方取魚腥草揮發(fā)油包合物和藥用輔料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的濾芯過濾，濾液注入西林瓶中，冷凍干燥，得到魚腥草凍干粉針劑。
二.檢測分析采用氣相色譜法進行檢測分析1.實驗藥物本發(fā)明魚腥草凍干粉針劑(北京乾露春科技有限公司實驗室提供)市售魚腥草注射液(正大青春寶藥業(yè)有限公司制藥分公司生產(chǎn)，北京白塔寺醫(yī)藥公司提供)2.實驗方法將本發(fā)明凍干粉針劑用注射用水溶解成與市售魚腥草注射液密度相同的溶液，按照標準號為WS3-B-3264-98魚腥草注射液中的檢測分析項進行檢測分析。
3.實驗結(jié)果按照上述方法進行檢測分析，計算結(jié)果見表1表1 各組制劑的含量比較

結(jié)論通過上述檢測分析實驗我們可以得知本發(fā)明魚腥草凍干粉針劑的有效成分含量提高，充分說明本發(fā)明的工藝具有實際意義。
三.穩(wěn)定性實驗
(一)市售魚腥草注射液與本發(fā)明魚腥草凍干粉針劑比較1.實驗藥物本發(fā)明魚腥草凍干粉針劑(北京乾露春科技有限公司實驗室提供)市售魚腥草注射液(正大青春寶藥業(yè)有限公司制藥分公司生產(chǎn)，北京白塔寺醫(yī)藥公司提供)2.實驗方法采用加速實驗方法進行穩(wěn)定性實驗，將市售魚腥草注射液和本發(fā)明凍干粉針劑放置在室溫37℃，相對濕度為75％的條件保存，每月進行一次檢測分析，連續(xù)3個月。
3.實驗結(jié)果見表2表2 各組制劑的含量變化

結(jié)論通過上述穩(wěn)定性實驗我們可以觀察到本發(fā)明的魚腥草凍干粉針劑的含量在3個月內(nèi)變化較小，市售魚腥草注射液的的含量變化較大，充分說明本發(fā)明魚腥草粉針劑穩(wěn)定性較好。
(二)β-環(huán)糊精包合的魚腥草凍干粉針劑與本發(fā)明魚腥草凍干粉針劑穩(wěn)定性比較1.實驗藥物本發(fā)明魚腥草凍干粉針劑(北京乾露春科技有限公司實驗室提供)β-環(huán)糊精包合的魚腥草凍干粉針劑(按照本發(fā)明工藝制法的要求，用β-環(huán)糊精包合魚腥草提取物后制備成凍干粉針劑，進行實驗研究。)2.實驗方法同上。
3.實驗結(jié)果見表3表3 各組制劑的含量變化

結(jié)論通過上述穩(wěn)定性實驗我們可以觀察到本發(fā)明的魚腥草凍干粉針劑的含量在3個月內(nèi)變化較小，β-環(huán)糊精包合的魚腥草凍干粉針劑的含量變化較大，充分說明本發(fā)明魚腥草粉針劑穩(wěn)定性較好。
四.魚腥草提取物用β-環(huán)糊精包合和2-羥丙基-β-環(huán)糊精包合的包和率和包結(jié)率的比較。
實驗方法(1)取本發(fā)明工藝的2-羥丙基-β-環(huán)糊精包合的魚腥草包合物置圓底燒瓶中，加入蒸餾水150ml及少許沸石蒸餾4h，用揮發(fā)油測定器提取揮發(fā)油，待冷卻30min后測定揮發(fā)油體積，進行三次實驗。(注經(jīng)測定，1ml混合揮發(fā)油重0.9218g)(2)取本發(fā)明工藝的魚腥草提取物，按照本發(fā)明包合工藝將其與β-環(huán)糊精進行包合后，按照方法(1)進行實驗。(注經(jīng)測定，1ml混合揮發(fā)油重0.9218g)包結(jié)率＝(回收的揮發(fā)油體積/加入的揮發(fā)油體積×空白回收率)×100％[空白回收率分別(1)為91.2％(2)為91.0％]包合率＝〔包合物的重量/(β-環(huán)糊精重量或者2-羥丙基-β-環(huán)糊精重量+加入揮發(fā)油的重量)〕×100％。根據(jù)公式計算，見表4表4 包合物包和率和包結(jié)率的比較


結(jié)論本發(fā)明工藝制備的2-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物與傳統(tǒng)的包合物β-環(huán)糊精比較，可以得到包合物的包和率和包結(jié)率均有明顯提高，充分說明本發(fā)明工藝具有實際意義。
五.藥理實施例抑菌作用研究1.實驗藥物本發(fā)明魚腥草凍干粉針劑(北京乾露春科技有限公司實驗室提供)市售魚腥草注射液(正大青春寶藥業(yè)有限公司制藥分公司生產(chǎn)，北京白塔寺醫(yī)藥公司提供)2.實驗菌種金黃葡萄球菌(Staphylococcusaureus)大腸桿菌(Escherichiacoli)枯草桿菌(Bacillussubitilis)青霉菌(Penicilliumsp)黑曲霉(Aspergillusniger)啤酒酵母菌(Saccaromycescerevisiae)上述菌種均由北京大學(xué)微生物教研室提供4.實驗方法濾紙片法測定抑菌作用取直徑6mm的濾紙片，放入藥物中浸泡16h，120℃下濕熱滅菌備用。將上述供試菌液各取0.5ml與相應(yīng)固體培養(yǎng)基，在超凈工作臺內(nèi)制成含菌平板，取含浸出汁的濾紙片貼在含菌平板上，每皿貼5片，每菌做3次重復(fù)，細菌置37℃、霉菌及酵母菌置27℃的生化培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h，測定24h、48h后濾紙片的抑菌圈大小，比較抑菌效果見表5最低抑菌濃度(Mic)測定配制上述菌種分別所需的培養(yǎng)基，準確量取9ml分裝試管，準確加入8％、4％、2％、1％、0.5％、0.25％藥物系列濃度溶液1ml，配成系列培養(yǎng)基，120℃高壓濕熱滅菌，冷卻后，每系列接種一個菌種，每系列做3次重復(fù)，細菌置37℃、霉菌及酵母菌置27℃的生化培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h，觀察菌種生長情況，以完全沒有菌生長的最低濃度為最低抑菌濃度，見表6表5 對供試菌種的抑制效果

表6 最低抑制濃度

結(jié)論通過上述藥理實驗表明，本發(fā)明的魚腥草凍干粉針劑與市售魚腥草注射液比較具有更好的藥理作用。
六.制備實施例實施例1(1)取魚腥草10000克粉碎，過30目篩，放入CO2超臨界提取器中的萃取釜中，調(diào)整萃取釜壓力為15Mpa，萃取溫度為30℃，流量為50Kg/h，解析釜1、2的壓力為3Mpa，解析溫度為20℃，萃取60分鐘，合并解析釜1、2的物料，備用；取上述解析釜1、2的物料，采用飽和水溶液法用2-羥丙基-β-環(huán)糊精進行包合稱取2-羥丙基-β-環(huán)糊精，以20ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草提取物∶2-羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶4的比例(v/g)加入魚腥草提取物，攪拌時間40分鐘，取出冷卻20小時，離心，過濾，濾渣常溫下干燥36小時，得到魚腥草揮發(fā)油包合物1099.8mg；(2)本發(fā)明的制劑處方為魚腥草揮發(fā)油包合物為1克，藥用輔料甘露醇為9克；(3)按照本發(fā)明制劑處方取魚腥草揮發(fā)油包合物和藥用輔料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的濾芯過濾，濾液注入西林瓶中，冷凍干燥，得到魚腥草凍干粉針劑100支。
實施例2(1)取魚腥草粉碎100公斤，過50目篩，放入CO2超臨界提取器中的萃取釜中，調(diào)整萃取釜壓力為25Mpa，萃取溫度為50℃，流量為60Kg/h，解析釜1、2的壓力為5Mpa，解析溫度為30℃，萃取100分鐘，合并解析釜1、2的物料，備用；取上述解析釜1、2的物料，采用飽和水溶液法用2-羥丙基-β-環(huán)糊精進行包合稱取2-羥丙基-β-環(huán)糊精，以30ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草提取物∶2-羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶10的比例(v/g)加入魚腥草提取物，攪拌時間80分鐘，取出冷卻24小時，離心，過濾，濾渣常溫下干燥48小時，得到魚腥草揮發(fā)油包合物11.732克；(2)本發(fā)明的制劑處方為魚腥草揮發(fā)油包合物為10克，藥用輔料為蔗糖90克；(3)按照本發(fā)明制劑處方取魚腥草揮發(fā)油包合物和藥用輔料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的濾芯過濾，濾液注入西林瓶中，冷凍干燥，得到魚腥草凍干粉針劑1000支。
實施例3(1)取魚腥草100公斤粉碎，過40目篩，放入CO2超臨界提取器中的萃取釜中，調(diào)整萃取釜壓力為18Mpa，萃取溫度為35℃，流量為52Kg/h，解析釜1、2的壓力為4Mpa，解析溫度為25℃，萃取65分鐘，合并解析釜1、2的物料，備用；取上述解析釜1、2的物料，采用飽和水溶液法用2-羥丙基-β-環(huán)糊精進行包合稱取2-羥丙基-β-環(huán)糊精，以25ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草提取物∶2-羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶5的比例(v/g)加入魚腥草提取物，攪拌時間50分鐘，取出冷卻22小時，離心，過濾，濾渣常溫下干燥40小時，得到魚腥草揮發(fā)油包合物11.389克；(2)本發(fā)明的制劑處方為魚腥草揮發(fā)油包合物為11克，藥用輔料甘露醇為89克；(3)按照本發(fā)明制劑處方取魚腥草揮發(fā)油包合物和藥用輔料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的濾芯過濾，濾液注入西林瓶中，冷凍干燥，得到魚腥草凍干粉針劑1000支。
實施例4(1)取魚腥草200公斤粉碎，過40目篩，放入CO2超臨界提取器中的萃取釜中，調(diào)整萃取釜壓力為20Mpa，萃取溫度為40℃，流量為55Kg/h，解析釜1、2的壓力為4Mpa，解析溫度為25℃，萃取80分鐘，合并解析釜1、2的物料，備用；取上述解析釜1、2的物料，采用飽和水溶液法用2-羥丙基-β-環(huán)糊精進行包合稱取2-羥丙基-β-環(huán)糊精，以26ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草提取物∶2-羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶6的比例(v/g)加入魚腥草提取物，攪拌時間55分鐘，取出冷卻23小時，離心，過濾，濾渣常溫下干燥42小時，得到魚腥草揮發(fā)油包合物23.482克；(2)本發(fā)明的制劑處方為魚腥草揮發(fā)油包合物為20克，藥用輔料蔗糖為80克；(3)按照本發(fā)明制劑處方取魚腥草揮發(fā)油包合物和藥用輔料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的濾芯過濾，濾液注入西林瓶中，冷凍干燥，得到魚腥草凍干粉針劑1000支。
實施例5(1)取魚腥草300公斤粉碎，過45目篩，放入CO2超臨界提取器中的萃取釜中，調(diào)整萃取釜壓力為25Mpa，萃取溫度為45℃，流量為55Kg/h，解析釜1、2的壓力為4Mpa，解析溫度為28℃，萃取75分鐘，合并解析釜1、2的物料，備用；取上述解析釜1、2的物料，采用飽和水溶液法用2-羥丙基-β-環(huán)糊精進行包合稱取2-羥丙基-β-環(huán)糊精，以28ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草提取物∶2-羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶8的比例(v/g)加入魚腥草提取物，攪拌時間70分鐘，取出冷卻24小時，離心，過濾，濾渣常溫下干燥36小時，得到魚腥草揮發(fā)油包合物35.149克；(2)本發(fā)明的制劑處方為魚腥草揮發(fā)油包合物為30克，藥用輔料乳糖為70克；(3)按照本發(fā)明制劑處方取魚腥草揮發(fā)油包合物和藥用輔料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的濾芯過濾，濾液注入西林瓶中，冷凍干燥，得到魚腥草凍干粉針劑1000支。
實施例6(1)取魚腥草200公斤粉碎，過45目篩，放入CO2超臨界提取器中的萃取釜中，調(diào)整萃取釜壓力為20Mpa，萃取溫度為40℃，流量為55Kg/h，解析釜1、2的壓力為4Mpa，解析溫度為25℃，萃取85分鐘，合并解析釜1、2的物料，備用；取上述解析釜1、2的物料，采用飽和水溶液法用2-羥丙基-β-環(huán)糊精進行包合稱取2-羥丙基-β-環(huán)糊精，以25ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草提取物∶2-羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶9的比例(v/g)加入魚腥草提取物，攪拌時間75分鐘，取出冷卻20小時，離心，過濾，濾渣常溫下干燥48小時，得到魚腥草揮發(fā)油包合物19.856克；(2)本發(fā)明的制劑處方為魚腥草揮發(fā)油包合物為19克，藥用輔料蔗糖為81克；(3)按照本發(fā)明制劑處方取魚腥草揮發(fā)油包合物和藥用輔料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的濾芯過濾，濾液注入西林瓶中，冷凍干燥，得到魚腥草凍干粉針劑1000支。
實施例7(1)取魚腥草100公斤粉碎，過40目篩，放入CO2超臨界提取器中的萃取釜中，調(diào)整萃取釜壓力為20Mpa，萃取溫度為45℃，流量為60Kg/h，解析釜1、2的壓力為4Mpa，解析溫度為25℃，萃取95分鐘，合并解析釜1、2的物料，備用；取上述解析釜1、2的物料，采用飽和水溶液法用2-羥丙基-β-環(huán)糊精進行包合稱取2-羥丙基-β-環(huán)糊精，以25ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草提取物∶2-羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶8的比例(v/g)加入魚腥草提取物，攪拌時間70分鐘，取出冷卻22小時，離心，過濾，濾渣常溫下干燥46小時，得到魚腥草揮發(fā)油包合物12.489克；(2)本發(fā)明的制劑處方為魚腥草揮發(fā)油包合物為12克，藥用輔料甘露醇為88克；
(3)按照本發(fā)明制劑處方取魚腥草揮發(fā)油包合物和藥用輔料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的濾芯過濾，濾液注入西林瓶中，冷凍干燥，得到魚腥草凍干粉針劑1000支。
權(quán)利要求
1.一種魚腥草凍干粉針劑，其特征在于其活性成分為從中藥魚腥草提取的揮發(fā)油，用2-羥丙基-β-環(huán)糊精進行包合，再與藥用輔料混合制備成凍干粉針劑，制劑中魚腥草揮發(fā)油包合物為10-30重量份，藥用輔料為70-90重量份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚腥草凍干粉針劑的制備方法，其特征包括以下步驟(1)取魚腥草粉碎，過30-50目篩，放入CO2超臨界提取器中的萃取釜中，調(diào)整萃取釜壓力為15-25Mpa，萃取溫度為30℃-50℃，流量為50-60Kg/h，解析釜1、2的壓力為3-5Mpa，解析溫度為20℃-30℃，萃取60-100分鐘，合并解析釜1、2的物料，備用；(2)取上述解析釜1、2的物料，采用飽和水溶液法用2-羥丙基-β-環(huán)糊精進行包合稱取2-羥丙基-β-環(huán)糊精，以20ml/g-30ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草提取物與2-羥丙基-β-環(huán)糊精以14-10的比例(v/g)加入魚腥草提取物，攪拌時間40-80分鐘，取出冷卻20-24小時，離心，過濾，濾渣常溫下干燥36-48小時，得到魚腥草揮發(fā)油包合物；(3)取魚腥草揮發(fā)油包合物和藥用輔料混合，加注射用水溶解完全，用0.22um的濾芯過濾，濾液注入西林瓶中，冷凍干燥，得到魚腥草凍干粉針劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥用輔料為甘露醇或乳糖或蔗糖的一種。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種魚腥草凍干粉針劑及其制備方法，其特征在于從中藥魚腥草中得到魚腥草揮發(fā)油為活性成分，經(jīng)2－羥丙基－β－環(huán)糊精包合，提高了魚腥草揮發(fā)油的穩(wěn)定性、溶解度、溶出度、生物利用度，與藥用輔料混合，制備成凍干粉針劑。藥理實驗結(jié)果表明，本發(fā)明的魚腥草揮發(fā)油凍干粉針劑，具有更強的藥理作用。
文檔編號A61P35/00GK1583130SQ200410046098
公開日2005年2月23日 申請日期2004年6月10日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月10日
發(fā)明者張晴龍 申請人:張晴龍