專利名稱：：一種含冰片的復(fù)方丹參凍干粉針劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，更具體地說，涉及以中藥為原料制成一種復(fù)方丹參凍干粉針劑。
背景技術(shù)：
：在大多數(shù)西方國家，心血管病的死亡約占總死亡數(shù)的一半，其中冠心病占首位，約占心血管死亡數(shù)的50％以上。作為亞洲國家，冠心病在中國不如歐美國家多見，但近年有增多趨勢。據(jù)衛(wèi)生部公布的生命統(tǒng)計(jì)資料，1957年城市居民心腦血管病死亡占總數(shù)的12.0％，1989年上升至16.6％，死因順位由第5、7位上升到2、3位。由此可見，冠心病的發(fā)病率逐年增高，大多數(shù)人的心血管病危險因素也呈持續(xù)快速上升趨勢。冠心病患者除了有可能因冠脈阻塞引起心肌梗塞導(dǎo)致死亡外，心絞痛的頻繁發(fā)作也將使其學(xué)習(xí)、工作能力大大受限，嚴(yán)重時個人生活不能自理，對家庭和社會都帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。因此，自70年代以來，冠心病的防治工作已列為國家重點(diǎn)課題之一，隨著冠心病發(fā)病率的增加，研制開發(fā)有效地預(yù)防、治療冠心病、心絞痛的藥物以減少心血管疾病對人類健康的威脅是一項(xiàng)十分有意義的工作?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為，對心臟予以機(jī)械性刺激并不引起疼痛，但心肌缺血缺氧則引起疼痛。當(dāng)冠狀動脈的供血與心肌的需要之間發(fā)生矛盾，冠狀動脈血流量不能滿足心肌代謝的需要，引起心肌急劇的、暫時缺血與缺氧時，即產(chǎn)生心絞痛。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對本病的治療原則是改善冠狀動脈的供血和減輕心肌的耗氧，同時治療動脈粥樣硬化。心絞痛發(fā)作時可使用作用較快的硝酸制劑。常用的有硝酸甘油0.3～0.6mg，舌下含化；二硝酸異山梨醇酯5～10mg，舌下含化等。不良作用有頭昏、頭脹痛、頭部跳動感、面紅、心悸等，偶有血壓下降。長期反復(fù)應(yīng)用可由于產(chǎn)生耐藥性而效力減低。緩解期盡量避免各種確知足以誘致發(fā)作的因素。使用作用持久的抗心絞痛藥物，以防心絞痛發(fā)作，常用的有(1)硝酸酯制劑(二硝酸異山梨醇酯、長效硝酸甘油制劑等)；(2)腎上腺素能β受體阻滯劑(心得安、氧烯洛爾、吲哚洛爾、美托洛爾等)，但本類藥物有可能引起體位性低血壓等不良反應(yīng)、突然停用有引起心肌梗塞的可能；(3)鈣通道阻滯劑(維拉帕米、硝苯啶等)，但有過度抑制心臟的危險，停用本類藥物不當(dāng)有可能引起冠狀動脈痙攣；(4)冠狀動脈擴(kuò)張劑(潘生丁、嗎多明、胺碘酮等)，本類藥物尤其是潘生丁能減少側(cè)支循環(huán)的血流量，引起所謂“冠狀動脈竊血”現(xiàn)象，反而使心肌缺血加重，在臨床雖然常用但頗多爭論。此外，近年來還逐漸興起了施行主動脈-冠狀動脈旁路移植手術(shù)和經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動脈成形術(shù)兩種手術(shù)治療方法。但手術(shù)能否改善心室功能，能否使以后不發(fā)生嚴(yán)重心律失常、心力衰竭或心肌梗塞，能否延長病人壽命，尚無定論；加以手術(shù)本身可并發(fā)心肌梗塞，術(shù)后移植的血管可栓塞，因此手術(shù)適應(yīng)癥較嚴(yán)格，并非適合大多數(shù)冠心病患者。中醫(yī)中藥是防治冠心病的重要手段。針對本病，根據(jù)祖國醫(yī)學(xué)辨證論治采用治標(biāo)和治本兩法。治標(biāo)，主要在疼痛期應(yīng)用，以“通”為主，有活血、化瘀、理氣、通陽、化痰等治法；治本，一般在緩解期應(yīng)用，以調(diào)整陰陽、臟腑、氣血為主，有補(bǔ)陽、滋陰、補(bǔ)氣血、調(diào)理臟腑等法。其中以“活血化瘀法”(常用含赤芍、丹參、紅花、川芎、蒲黃、郁金等中藥的復(fù)方或中成藥)和“芳香溫通法”(常用蘇合香丸、蘇冰滴丸、寬胸丸、保心丸、麝香保心丸等)最為常用。但現(xiàn)有的中藥成藥以湯劑和復(fù)方丸劑為主，服用量大，攜帶不便，起效慢等缺點(diǎn)。凍干粉制劑為中藥先進(jìn)劑型，既能克服口服制劑起效慢，又能克服注射液穩(wěn)定性差的問題，與其它劑型相比，凍干粉穩(wěn)定性好，有效避免了組方中藥物發(fā)生配伍變化，在延長制劑有效期的同時保持了療效；其次工藝先進(jìn)，藥效物質(zhì)純度更高；另外還可最大限度保持復(fù)方丹參凍干粉中有效成分的生物學(xué)活性，從而滿足臨床需要，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種復(fù)方丹參凍干粉針劑。本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑，是由下列重量份原料制成丹參1000～4000g、三七260～850g、冰片5～50g。優(yōu)選的本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑，是由下列重量份原料制成丹參2000～3000g、三七360～550g、冰片15～35g。最佳的本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑，是由下列重量份原料制成丹參2486.2g、三七486.2g、天然冰片27.6g。本發(fā)明藥物中，丹參為君藥，活血通絡(luò)、祛淤止痛；配以三七為臣，活血化瘀、通絡(luò)止痛；冰片開竅醒神，三藥合用，可達(dá)到活血化瘀、理氣止痛的功效。本發(fā)明藥物有效成分可以采用以下方法水提法、水提醇沉法、醇提水沉、萃取法、浸漬法、滲漉法、回流提取法、連續(xù)回流提取法、大孔樹脂吸附法制備。本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑有效組分的制備方法，包括如下步驟a.取上述處方量丹參、三七、冰片備用；b.以上三味，丹參加水煎煮，合并煎液，并濃縮，濃縮液加入乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，濃縮液加入乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，加水，冷藏，濾過，濾液濃縮，加入乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，干燥，得丹參提取物；三七，加水煎煮，合并煎液，濃縮，加入乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，加水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精，加水，加熱使溶解，加活性炭煮沸，脫炭，濾液備用；將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，包合，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液，即得。本發(fā)明復(fù)方凍干粉針劑中，含有丹參提取物、三七提取物、以及冰片。本發(fā)明復(fù)方凍干粉針中，冰片含量以右旋龍腦計(jì)，含量照氣相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIE)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜柱INNOWAX(30m*0.32mm*0.5um)，柱溫程序升溫150℃保持7min，以20℃/min升至220℃，保持5min。汽化溫度250℃；檢測器溫度250℃；檢測器FID氫火焰離子化檢測器，氫氣流量40ml/min；空氣流量350ml/min；載氣高純度氮?dú)?；載氣流量2ml/min，尾吹30ml/min；進(jìn)樣方式分流比5∶1。理論板數(shù)按右旋龍腦峰計(jì)算應(yīng)不低于1900。校正因子的測定取水楊酸甲酯適量，精密稱定，加無水乙醇配制成1mg/ml的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。取右旋龍腦對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成1mg/ml的溶液，再精密量取0.5ml于10ml量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml后用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，吸取1ul，注入氣相色譜儀，計(jì)算校正因子。測定法取本品5瓶，傾出內(nèi)容物，混勻，精密稱取適量(約相當(dāng)于1瓶的量)，于25ml量瓶中，用水5ml溶解后，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，再精密量取0.5ml于10ml量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml后用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，吸取續(xù)濾液1ul，注入氣相色譜儀，測定，即得。本品每瓶含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為6.25～75.0mg/g凍干粉固形物。優(yōu)選的復(fù)方丹參凍干粉針劑，其中冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為12.5～62.5mg/g凍干粉固形物。進(jìn)一步優(yōu)選的復(fù)方丹參凍干粉針劑，其中冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為25.0～50.25mg/g凍干粉固形物。最佳的復(fù)方丹參凍干粉針劑，其中冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為31.25～41.5mg/g凍干粉固形物。本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑，采用如下方法測定凍干粉針中丹酚酸B(C36H30O16)的含量，其含量測定方法如下照高效液相色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.1％磷酸(24∶76)為流動相；檢測波長為288nm；理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于3000；對照品溶液的制備精密稱取丹酚酸B對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.15mg的溶液，搖勻，即得。供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下本品內(nèi)容物，混勻，取0.15g，精密稱定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，微孔濾膜(0.45um)濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，含丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，含量為6.25～100.00mg/g凍干粉固形物。本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑，其中三七以人參皂苷Rg1(C27H32O16)、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的總量計(jì)，含量為6.25～56.25mg/g凍干粉固形物；丹參以丹參素(C9H10O5)計(jì)，含量為1.25～18.75mg/g凍干粉固形物；丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，含量為6.25～100.0mg/g凍干粉固形物；冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為6.25～75.0mg/g凍干粉固形物。優(yōu)選的復(fù)方丹參凍干粉針劑，其中三七以人參皂苷Rg1(C27H32O16)、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的總量計(jì)，含量為12.5～50.0mg/g凍干粉固形物；丹參以丹參素(C9H10O5)計(jì)，含量為2.5～15.5mg/g凍干粉固形物；丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，含量為12.5～75.0mg/g凍干粉固形物；冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為12.5～62.5mg/g凍干粉固形物。進(jìn)一步優(yōu)選的復(fù)方丹參凍干粉針劑，其中三七以人參皂苷Rg1(C27H32O16)、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的總量計(jì)，含量為18.75～31.25mg/g凍干粉固形物；丹參以丹參素(C9H10O5)計(jì)，含量為3.75～12.75mg/g凍干粉固形物；丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，含量為25.0～50.125mg/g凍干粉固形物；冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為25.0～50.25mg/g凍干粉固形物。最佳的復(fù)方丹參凍干粉針劑，其中三七以人參皂苷Rg1(C27H32O16)、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的總量計(jì)，含量為18.75～25.0mg/g凍干粉固形物；丹參以丹參素(C9H10O5)計(jì)，含量為3.75～8.875mg/g凍干粉固形物；丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，含量為25.0～41.375mg/g凍干粉固形物；冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為31.25～41.5mg/g凍干粉固形物。本發(fā)明復(fù)方凍干粉針劑中，三七以人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1，三七皂苷R1總量計(jì)，含量照高效液相色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水梯度洗脫為流動相；檢測波長為203nm。理論板數(shù)按人參皂苷Rg1峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。線性梯度洗脫流動相配比變化程序?qū)φ掌啡芤旱闹苽浞謩e精密稱取人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1對照品適量，分別加甲醇制成每1ml含0.5mg、0.5mg、0.2mg的溶液，搖勻，即得。供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下本品內(nèi)容物，混勻，取0.5g，精密稱定，置10ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，微孔濾膜(0.45um)濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，計(jì)算，即得。本品含三七以人參皂苷Rg1(C27H32O16)、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的總量計(jì)，含量為6.25～56.25mg/g凍干粉固形物。本發(fā)明復(fù)方凍干粉針劑中，丹參以丹參素計(jì)含量照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.1％磷酸(8∶92)為流動相；檢測波長為280nm。理論板數(shù)按丹參素鈉峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備精密稱取丹參素鈉對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，搖勻，即得。供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下本品內(nèi)容物，混勻，取0.4g，精密稱定，置25ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，微孔濾膜(0.45um)濾過，即得。測定法精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得(每1mg丹參素鈉相當(dāng)于0.880mg丹參素)。本品含丹參以丹參素(C9H10O5)計(jì)，含量為1.25～18.75mg/g凍干粉固形物。本發(fā)明藥物可以采用中藥制劑常規(guī)方法制備。也可將這些原料藥粉碎成粉末混合均勻制成散劑沖服；也可以將這些藥物一起水煎，然后濃縮水煎液，制成口服液；也可以將本發(fā)明藥物所用原料藥粉碎，將原料藥粉碎成分與輔料混合均勻，直接壓片。本發(fā)明可以采用上述提取方法獲得的藥物活性組分，與目前常見藥劑學(xué)說用輔料制成任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型；如片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、溶液劑、軟膏劑、硬膏劑、噴霧劑、滴丸、軟膠囊、注射液、凍干粉針劑等制劑形式，但優(yōu)選采用下述方法提取原料藥，并制備成凍干粉針劑，以下只是對本發(fā)明的進(jìn)一步說明，但這不構(gòu)成對本發(fā)明的限制。本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑的制備方法，包括如下步驟a.取處方量丹參、三七、冰片備用；b.以上丹參、三七經(jīng)過分別提取或者合提取，得丹參提取物、三七提取物或者丹參、三七合提取物；冰片用適量乙醇溶解，用β-環(huán)糊精包合；將丹參提取物、三七提取物或丹參三七提取物加注射用水適量使溶解，煮沸，放冷，濾過，濾液與冰片β-CD包合溶液混合，加甘露醇，補(bǔ)加注射用水適量，調(diào)pH，凍干，即得。優(yōu)選的本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑的制備方法，包括如下步驟a.取處方量丹參、三七、冰片備用；b.以上三味，丹參加水煎煮，合并煎液，并濃縮，濃縮液加入乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，濃縮液加入乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，加水，冷藏，濾過，濾液濃縮，加入乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，干燥，得丹參提取物；三七，加水煎煮，合并煎液，濃縮，加入乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，加水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精，加水，加熱使溶解，加活性炭煮沸，脫炭，濾液備用；將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，包合，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水適量使溶解，煮沸，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加活性炭，保溫，脫炭，濾液冷卻后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇，補(bǔ)加注射用水適量，調(diào)pH，凍干，即得。優(yōu)選的本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑的制備方法，包括如下步驟a.取處方量丹參、三七、冰片備用；b.以上三味，丹參切片加水煎煮1～5次，每次0.5～3小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)50～85％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)85％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15～1.45(50℃)的浸膏，加2～14倍量水，冷藏，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)50～90％，靜置，濾過，濾液濃縮至稠膏，干燥，得丹參提取物；取三七，加水煎煮1～5次，每次0.5～3小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)50～90％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加1～10倍量水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用50～85％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精100～1500g，加水至適量，加熱使溶解，加0.2～1％活性炭煮沸5～60分鐘，脫炭，濾液備用。將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，超聲包合1～12小時，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水適量使溶解，煮沸1～20分鐘，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加0.05～0.2％活性炭50～90℃保溫10～60分鐘，脫炭，濾液冷卻至70℃以下后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇20～300g，補(bǔ)加注射用水至適量，調(diào)pH為5～7，凍干，即得。最佳的本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑的制備方法，包括如下步驟a.取處方量丹參、三七、冰片備用；b.以上三味，丹參切片加水煎煮三次，每次1小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)75％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)85％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25左右(50℃)的浸膏，加8～10倍量水，冷藏，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)80％，靜置，濾過，濾液濃縮至稠膏，干燥，得丹參提取物；取三七粉碎成顆粒，加水煎煮三次，每次1小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)80％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加3～5倍量水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精500g，加水至1500ml，加熱使溶解，加0.5％活性炭煮沸20分鐘，脫炭，濾液備用。將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，超聲包合6小時，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水適量使溶解，煮沸10分鐘，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加0.1％活性炭80℃保溫30分鐘，脫炭，濾液冷卻至50℃以下后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇100g，補(bǔ)加注射用水至4000ml，調(diào)pH為6.5，除菌濾過，灌裝至西林瓶中，加丁基橡膠塞，凍干，壓蓋，檢驗(yàn)，包裝即得。本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑，每瓶中凍干粉針固形物為0.75～0.85g。優(yōu)選本發(fā)明復(fù)方丹參凍干粉針劑，每瓶中凍干粉針固形物為0.8g。以上組成在生產(chǎn)時可按照相應(yīng)的比例增大或減少，如大規(guī)模生產(chǎn)可以以公斤或以噸為單位，小規(guī)模生產(chǎn)也可以以克為單位，重量可以增大或減小，但各組成之間的生藥材料重量配比比例不變。為了更好的理解本發(fā)明，以下通過本發(fā)明藥物藥效學(xué)試驗(yàn)來進(jìn)一步闡述發(fā)明藥物的有益效果，下面試驗(yàn)旨在進(jìn)一步說明藥物的作用，而非對本發(fā)明的限制。實(shí)驗(yàn)例注射用復(fù)方丹參凍干粉的藥效學(xué)試驗(yàn)1實(shí)驗(yàn)材料1.1藥品受試藥物復(fù)方丹參凍干粉(凍干前樣品)由天津和本堂生物技術(shù)有限公司提供，規(guī)格300g/100ml/瓶，批號030307；陽性對照藥物香丹注射液，江蘇康怡制藥有限公司產(chǎn)品，生產(chǎn)批號030710-1。1.2試劑氨基甲酸乙酯(烏拉坦)，為上海三浦化工有限公司產(chǎn)品，批號20030812；戊巴比妥鈉，為上?；瘜W(xué)試劑公司產(chǎn)品，批號F20020915；垂體后葉素注射液，由上海第一生化藥業(yè)公司與上海生物化學(xué)制藥廠聯(lián)合生產(chǎn)，批號040301；藍(lán)四氮唑(UNI-CHEMChemicalReogents)，批號GD3010034；ADP和膠原，Sigma公司產(chǎn)品，終濃度為3.5μmol/L。1.3儀器BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，為四川省成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品；動物人工呼吸機(jī)，DH-150型，浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)儀器廠生產(chǎn)；RM-6000型四道生理多導(dǎo)儀為日本光電公司產(chǎn)品，所用插件分別為浮地式生物電放大器(AT-601G)、載波放大器(AP-621G)、血壓記錄器(AP-611G)、心率計(jì)數(shù)器(AT-601G)；MF-1200型電磁流量計(jì)為日本光電公司產(chǎn)品；電熱恒溫干燥箱為長沙醫(yī)療器械廠產(chǎn)品；HH-W600數(shù)顯三用恒溫水箱，為江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司產(chǎn)品；激光多普勒血流儀(PeriFluxSystem5000，PERIMED，USA)；LDZ5-2離心機(jī)為北京醫(yī)用離心機(jī)廠產(chǎn)品；血?dú)夥治鰞x(USAInsyrumentationLaboratory，Gem-3000型)以及生化自動化分析儀(USAVIROS-950型)；TYXN-91型智能血小板聚集儀(上海伯奧生物科技有限公司)；SystemCA-530血液流變學(xué)儀(美國)。1.4劑量設(shè)定參照臨床用藥劑量，結(jié)合小鼠急性耐缺氧試驗(yàn)、對小鼠凝血時間影響以及對垂體后葉素致大鼠心肌缺血影響等試驗(yàn)得出各種動物給藥劑量，如下大鼠低劑量0.30g/kg、中劑量0.60g/kg、高劑量1.20g/kg；犬低劑量0.09g/kg、中劑量0.18g/kg、高劑量0.36g/kg；小鼠低劑量0.44g/kg、中劑量0.88g/kg、高劑量1.76g/kg；香丹注射液犬0.53ml/Kg，大鼠1.8ml/Kg，小鼠2.6mI/lg。藥物稀釋方法、給藥途徑及體積取同一批號的各實(shí)驗(yàn)所用藥品，用生理鹽水配制，每日現(xiàn)配制現(xiàn)用；給藥途徑靜脈注射或腹腔注射；各種單位給藥容積分別為小鼠為0.15ml/10g體重；大鼠為0.3ml/100g；犬為3.0ml/kg體重。1.5實(shí)驗(yàn)動物清潔級昆明種小鼠，體重18～22g，雌雄各半，合格證號2002A055；清潔級SD大鼠，雌雄各半，體重180～230g，合格證號2003A070新西蘭大白兔，體重2.0～2.5kg，雌雄不限，合格證號2003A034；雜種犬，體重11.0～14.0kg，均由中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。飼養(yǎng)條件動物進(jìn)入清潔級動物實(shí)驗(yàn)室后，小鼠每籠放養(yǎng)10只，大鼠每籠放養(yǎng)5只，由專人飼養(yǎng)管理。動物室每天燈光照明12小時，通風(fēng)和空調(diào)設(shè)備良好，室溫控制在25±1℃，相對濕度為40～50％。實(shí)驗(yàn)室按常規(guī)定期消毒。1.6統(tǒng)計(jì)方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，計(jì)量資料的組間比較應(yīng)用student’st檢驗(yàn)，計(jì)量資料的試驗(yàn)前后比較采用配對t檢驗(yàn)。2實(shí)驗(yàn)與結(jié)果2.2復(fù)方丹參對急性心肌缺血犬心肌的影響2.2.1實(shí)驗(yàn)方法健康雜種犬30只，體重11.0～14.0kg，雌雄均有，隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組(生理鹽水)、復(fù)方丹參凍干粉低劑量組(0.09g/kg)、復(fù)方丹參凍干粉中劑量組(0.18g/kg)、復(fù)方丹參凍干粉高劑量組(0.36g/kg)和香丹注射液組(0.53ml/kg)，每組5只動物。3％戊巴比妥鈉(30mg/kg)靜脈注射行全身麻醉，背位固定。從右頸靜脈插管作為抽血備用。切開氣管，插入氣管套管，接動物呼吸機(jī)行正壓人工呼吸(16次/min)。右側(cè)臥位固定，于左第IV肋間開胸，剪開心包，暴露冠狀動脈左前降支(LAD)穿線備用(作結(jié)扎)，在往下適當(dāng)位置的心包膜上置9個電極作測心外膜電圖用。手術(shù)損傷完畢，待所有觀測指標(biāo)穩(wěn)定后，記錄正常指標(biāo)及抽血。結(jié)扎冠脈左前降支(LAD)復(fù)制心肌缺血模型，穩(wěn)定30min記錄指標(biāo)，然后分別按各組劑量靜脈滴注給藥(控制15min內(nèi)滴完)。分別抽血和記錄結(jié)扎冠脈前、結(jié)扎冠脈后30min及給藥后30min、60min、120min時各個點(diǎn)的心外膜電圖。實(shí)驗(yàn)過程中，連續(xù)監(jiān)測心電圖II導(dǎo)聯(lián)的變化。以BL-410生物信號采集與分析裝置描記心外膜電圖及心電圖。2.2.2觀察指標(biāo)1.對心肌缺血范圍的影響①分別在各個時間點(diǎn)用BL-410生物信號系統(tǒng)描記心外膜電圖，心電圖缺血范圍(N-ST)以每導(dǎo)聯(lián)中ST段抬高超出2mv的點(diǎn)數(shù)總和表示。心肌缺血程度(∑-ST)以每導(dǎo)聯(lián)中ST段上升或下降幅度的總和表示。②對心肌梗死范圍的測定于180min后，取下心臟進(jìn)行心肌組織NBT染色，以稱重法測定梗死的范圍(梗死區(qū)/左室重×100％)。2.血清酶測定分別于扎前和給藥后180min時取血，分離血清，應(yīng)用生化自動分析儀測定血清乳酸脫氫酶(LDH)和肌酸磷酸激酶(CPK)。2.2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.對心肌缺血犬心肌缺血范圍的影響(1)對心外膜電圖N-ST和∑-ST的影響下表10表明，模型對照組結(jié)扎后N-ST和∑-ST結(jié)扎后30min到用藥后120min未見明顯變化，注射給予復(fù)方丹參凍干粉和香丹注射液組的N-ST和∑-ST均小于缺血模型組，中、高劑量尤明顯，提示復(fù)方丹參凍干粉能有效縮小心肌缺血范圍，減輕心肌缺血的程度。表10復(fù)方丹參凍干粉對心肌缺血犬心外膜電圖影響(n＝5，)<tablesid="table3"num="003"><tablewidth="793">時間給藥后30min給藥后60min給藥后120minN-ST假手術(shù)模型對照復(fù)方丹參低劑量中劑量高劑量香丹注射液0.17±0.41**8.33±0.828.17±0.758.17±0.418.33±0.528.33±0.520.17±0.41**8.00±1.266.83±0.985.83±0.98**5.67±1.21**6.00±1.102*0.00±0.00**8.00±1.266.50±0.04*6.00±0.63**5.16±1.60**6.17±1.47*0.00±0.00**7.83±1.336.83±0.756.00±1.26*4.67±2.06**6.17±0.41**∑-ST假手術(shù)模型對照復(fù)方丹參低劑量中劑量高劑量香丹注射液9.22±3.30**32.41±11.8635.69±9.3634.83±8.3638.67±8.7531.33±7.969.57±2.45**30.65±11.2028.79±7.2920.96±3.92*19.27±2.78*21.09±4.85*9.13±2.34**30.80±11.3028.08±6.9622.99±3.85*17.66±2.44**21.07±5.27*9.67±1.82**28.56±10.3828.69±6.2724.19±5.1119.15±2.39*21.77±5.66</table></tables>與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01(2)對心肌梗死范圍的影響表11顯示復(fù)方丹參凍干粉各劑量組能明顯減小心肌缺血范圍，高劑量組最明顯，中劑量組與陽性對照藥效果相當(dāng)。表11對心肌缺血犬心肌梗死范圍的影響()<tablesid="table4"num="004"><tablewidth="536">組別動物數(shù)心肌梗死范圍(％)模型對照組復(fù)方丹參低劑量組中劑量組高劑量組香丹注射液組6666614.80±3.5410.03±2.00**8.58±1.86**6.48±2.68**8.05±3.37**</table></tables>與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.012.對血清酶(LDH，CK)水平的影響下表12結(jié)果表明，假手術(shù)組犬心肌酶LDH和CK用藥前后沒有明顯改變，冠脈結(jié)扎犬心肌酶LDH和CK較假手術(shù)組或手術(shù)前均顯著升高。復(fù)方丹參和香丹注射液同模型組比較均有降低心肌缺血犬血清LDH和CPK水平的作用。表12對心肌缺血犬LDH及CK的影響()與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.013.對垂體后葉素所致心肌缺血的影響3.1實(shí)驗(yàn)方法SD大鼠70只，體重180～230g，隨機(jī)分7組，每組10只，雌雄各半。用烏拉坦1200mg/Kg腹腔注射麻醉。背位固定，以BL-410生物信號采集與分析裝置記錄II導(dǎo)聯(lián)心電圖。各組大鼠分別從腹腔注射或灌胃給予以下藥物①模型組(腹腔注射，ip.)生理鹽水3.0ml/kg；②復(fù)方丹參凍干粉低劑量(ip.)組0.30g/kg；③復(fù)方丹參凍干粉中劑量(ip.)組0.60g/kg；④復(fù)方丹參凍干粉高劑量(ip.)組1.20g/kg)；⑤復(fù)方丹參凍干粉低劑量(灌胃，po.)組0.60g/kg；⑥復(fù)方丹參凍干粉高劑量(po.)組1.20g/kg；⑦香丹注射液(ip.)組1.80ml/kg。連續(xù)給藥3天，每天一次，末次給藥30min后(灌胃組給藥后1h)，各組大鼠分別由舌下靜脈注射垂體后葉素1u/kg致心肌缺血，觀察并記錄每只大鼠注射垂體后葉素前及后5s、10s、15s、30s、1min、3min、10min的II導(dǎo)聯(lián)心電圖，測量各時點(diǎn)心電圖指標(biāo)的變化，對各組結(jié)果進(jìn)行給藥前后的比較及組間比較。3.2觀察指標(biāo)(1)J點(diǎn)位移(mv)J點(diǎn)即QRS波的終了點(diǎn)，位移就是發(fā)生了位置的改變，抬高或壓低；(2)T波幅值(mv)(3)心率(次/min)靜脈注射垂體后葉素后，動物立即出現(xiàn)心電圖缺血改變，表現(xiàn)為J點(diǎn)抬高或壓低、T波高聳或低平、心律失常如室性早搏、心動過緩、房室傳導(dǎo)組滯等，記錄給垂體后葉素前后以上幾項(xiàng)指標(biāo)的變化。3.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果由表13、表14和表15可見，給垂體后葉素后，大鼠因心肌缺血致心電圖發(fā)生明顯改變，如J點(diǎn)抬高、T波高聳、心律失常及心率減慢等現(xiàn)象，以10s、15s時改變最為顯著。與模型對照組比較，復(fù)方丹參凍干粉低、中、高三個劑量組能明顯降低垂體后葉素所致的大鼠心電圖J點(diǎn)的抬高輻度(與模型組比較，P＜0.05或P＜0.01)，T波升高的輻度亦較模型組明顯降低(P＜0.05)。復(fù)方丹參凍干粉靜脈給藥效果優(yōu)于灌胃給藥的效果。表13復(fù)方丹參凍干粉對垂體后葉素所致大鼠心電J點(diǎn)位移(μv)變化值的影響(n＝10，與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01表14復(fù)方丹參凍干粉對垂體后腺素所致大鼠心電T波輻值(μv)變化值的影響(n＝10，與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01表15復(fù)方丹參凍干粉對垂體后葉素所致大鼠心率的變化值的影響(n＝10，)與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.015.復(fù)方丹參凍干粉對血小板與血栓的影響5.1對體外血小板聚集的影響從家兔耳動脈取血，用硅化試管取血，以3.8％枸櫞酸鈉(1/10血量)抗凝，800r/min離心10分鐘，吸出上層富血小板血漿(PRP)，再以3000r/min離心，取出貧血小板血漿(PPP)。用PPP將透光度調(diào)到100，然后以PRP調(diào)零，加攪拌棒、加生理鹽水或復(fù)方丹參凍干粉(0.002、0.004、0.008g/ml)及香丹注射液(0.05ml/ml)，37℃溫育。將PRP移至測定孔，加入ADP(終濃度為3.5μmol/L)或膠原(終濃度為30μg/ml)，觀察5min最大聚集程度，儀器為TYXN-91型智能血小板聚集儀(上海伯奧生物科技有限公司)。計(jì)算血小板聚集百分率(Plateletaggregation，PAG)或抑制聚集百分率。由下表16、17結(jié)果可見，復(fù)方丹參凍干粉對ADP或膠原誘導(dǎo)的家兔血小板聚集有明顯的抑制作用，隨著劑量的增大抑制作用逐漸增強(qiáng)，即其對ADP或膠原誘導(dǎo)的家兔血小板聚集的抑制作用有明顯的劑量依賴性。表16復(fù)方丹參凍干粉對ADP誘導(dǎo)的體外家兔血小板聚集(PAG)的影響()<tablesid="table9"num="009"><tablewidth="794">組別濃度(mg/ml)樣本數(shù)(N)PAG(％)抑制聚集率(％)溶劑對照復(fù)方丹參低劑量中劑量高劑量香丹注射液-2480.05ml/ml101010101046.87±9.6634.40±6.17**29.56±6.56**25.37±5.90**31.12±7.65**-26.636.945.933.6</table></tables>與緩沖液對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01表17復(fù)方丹參凍干粉對膠原誘導(dǎo)的體外家兔血小板聚集(PAG)的影響()<tablesid="table10"num="010"><tablewidth="780">組別濃度(mg/ml)樣本數(shù)(N)PAG(％)抑制聚集率(％)溶劑對照復(fù)方丹參低劑量中劑量高劑量香丹注射液-2480.05ml/ml101010101051.26±9.2533.10±8.53**26.09±6.02**24.91±7.89**31.16±7.93**-35.449.151.439.2</table></tables>與緩沖液對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.015.2對大鼠動-靜脈旁路血栓形成的影響SD大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，10％水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射(ip)麻醉固定，分別從舌下靜脈給予香丹注射液(1.8ml/kg)、復(fù)方丹參凍干粉高劑量組(1.2g/kg)、中劑量組(0.6g/kg)、低劑量(0.3g/kg)，模型組給予等容積的生理鹽水。于給藥后30min，分離右側(cè)頸總動脈和左側(cè)頸外靜脈。在聚乙烯管中段放入一根長6cm4號絲線，用肝素生理鹽水溶液(50μl/ml)充滿聚乙烯管。當(dāng)聚乙烯管的一端插入左頸外靜脈后，另一端塑料管注入肝素(50μl/m)0.2ml抗凝，然后再將此端插入右側(cè)頸總動脈。打開動脈夾，讓血液從右側(cè)頸總動脈流入管內(nèi)，返回左側(cè)頸外靜脈，開放血液15min后，中斷血流，迅速取出聚乙烯管中的血栓在分析天平上稱重，求出血栓抑制率(％)。血栓抑制率＝[(對照組血栓濕重-給藥組血栓濕重)×100％]/對照組血栓濕重由下表18可見，復(fù)方丹參凍干粉高、中、低三個劑量均能明顯抑制大鼠動靜脈旁路血栓的形成，在所設(shè)計(jì)的0.3g/kg至1.2g/kg，隨機(jī)量的增加作用增強(qiáng)。表18復(fù)方丹參凍干粉對大鼠頸總動-靜脈形成血栓影響(n＝10)與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.016.復(fù)方丹參凍干粉對凝血時間和血液流變學(xué)的影響6.1復(fù)方丹參凍干粉對小鼠凝血時間的影響方法小鼠70只，體重18～22g，雌雄兼用，按體重和性別隨機(jī)分成7組，給藥容積為0.15ml/10g體重。分別給予靜脈注射生理鹽水溶液，0.22g/kg，0.44g/kg，0.88g/kg、1.76g/kg、3.52g/kg的復(fù)方丹參凍干粉，及2.6ml/kg香丹注射液。給藥后30min，用毛細(xì)玻璃管自眼球取血，玻片法測定凝血時間。由下表19可見，復(fù)方丹參凍干粉0.22～3.52g/kg五個劑量均有延長小鼠凝血時間的作用，0.22～1.76g/kg隨劑的增加作用增強(qiáng)，大于1.76g/kg作用不再增加。表19復(fù)方丹參凍干粉對小鼠凝血時間的影響(n＝10)6.2復(fù)方丹參凍干粉對大鼠血液流變學(xué)的影響方法SD大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別從腹腔注射給予香丹注射液(1.8ml/kg)、復(fù)方丹參凍干粉高劑量組(1.2g/kg)、中劑量組(0.6g/kg)、低劑量(0.3g/kg)，對照組給予等容積的生理鹽水。每日1次，計(jì)7日，末次給藥后30min，用乙醚麻醉大鼠，自大鼠腹腔動脈取血1.8ml，迅速加入有19檸檬酸鈉溶液0.2ml的測定管中，采用用血液流變儀(美國產(chǎn))測定各全血粘度、血漿粘度(ηp)、血液相對粘度(ηr)、紅細(xì)胞聚集指數(shù)(AI)、屈服應(yīng)力(CVS)、卡松粘度(CV)。結(jié)果下表20可見復(fù)方丹參凍干粉高劑量組能明顯降低不同切變率時大鼠的全血粘度、血漿粘度和還原粘度，降低紅細(xì)胞聚集指數(shù)，中劑量組可明顯降低高切全血粘度。提示復(fù)方丹參凍干粉可改善血液流變學(xué)功能的作用。表20-1復(fù)方丹參凍干粉對大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響(n＝10)與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01表20-2復(fù)方丹參凍干粉對大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響(n＝10)與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.017.復(fù)方丹參凍干粉對小鼠耐缺氧能力的影響小鼠70只，雌雄各半，隨機(jī)分為7組，每組10只。分別靜脈注射下述藥物①生理鹽水0.15ml/10g；②復(fù)方丹參凍干粉0.22g/kg；③復(fù)方丹參凍干粉0.44g/kg；④復(fù)方丹參凍干粉0.88g/kg；⑤復(fù)方丹參凍干粉1.76g/kg；⑥復(fù)方丹參凍干粉3.52g/kg；⑦香丹注射液2.6ml/kg。每次注射容量為0.15ml/10g。注射完30分鐘再分別腹腔注射鹽酸異丙腎上腺素(15mg/kg)，然后逐個將小鼠放入容量為250ml、底部鋪有5g鈉石灰的缺氧瓶內(nèi)，蓋上涂有凡士林的瓶塞，造成密閉性缺氧。記錄密閉瓶口時間，不斷觀察小白鼠呼吸頻率、深度、皮膚和口唇顏色的變化，直到動物停止呼吸，記下死亡時間，從蓋瓶塞到動物停止呼吸的持續(xù)時間作為缺氧條件下小鼠的存活時，比較用藥組與對照組的存活時間。由表21可見，復(fù)方丹參凍干粉各劑量組小鼠在常壓缺氧條件下的存活時間較對照組分別延長了23.20％(P＞0.05)、35.57％(P＞0.05)、55.15％(P＜0.05)、76.29％(P＜0.01)、78.35％(P＜0.01)，提示復(fù)方丹參凍干粉能提高小鼠的耐缺氧能力，以1.76g/kg較為顯著。表21復(fù)方丹參凍干粉對耐缺氧時間的影響(n＝10)與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01實(shí)驗(yàn)證明，給犬靜脈注射復(fù)方丹參凍干粉0.18g/kg及0.36g/kg能增加心臟做功、明顯增加心輸出量和冠狀動脈血流量；縮小冠脈結(jié)扎犬的心電圖缺血范圍及心肌缺血程度，對心肌缺血引起的損害有劑量依賴性的保護(hù)作用。另復(fù)方丹參凍干粉能抑制血小板聚集，抑制體內(nèi)血栓形成，延長凝血時間，改善血液流變學(xué)指標(biāo)以及提高小鼠耐缺氧能力。表明本藥具有明顯的活血化淤和抗心肌缺血作用，是防治心肌缺血性疾病的有效藥物，有重要的開發(fā)價值。本研究提示復(fù)方丹參凍干粉具有增強(qiáng)心臟泵的功能、增加冠脈血流、抵御心肌缺血缺氧、縮小嚴(yán)重心肌缺血所致的心肌損害等功能。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步說明，下述各實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而并非對本發(fā)明的限制。實(shí)施例1a.取丹參1000g、三七850g、冰片5g備用；b.以上丹參、三七經(jīng)過分別用水提取兩次，每次1小時，合并提取液，濃縮，得丹參提取物、三七提取物；冰片用適量乙醇溶解，用β-環(huán)糊精包合；將丹參提取物、三七提取物加注射用水適量使溶解，煮沸，放冷，濾過，濾液與冰片β-CD包合溶液混合，加甘露醇，補(bǔ)加注射用水適量，調(diào)pH，凍干，即得。本發(fā)明復(fù)方凍干粉針中，冰片含量以右旋龍腦計(jì)，含量照氣相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIE)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜柱INNOWAX(30m*0.32mm*0.5um)，柱溫程序升溫150℃保持7min，以20℃/min升至220℃，保持5min。汽化溫度250℃；檢測器溫度250℃；檢測器FID氫火焰離子化檢測器，氫氣流量40ml/min；空氣流量350ml/min；載氣高純度氮?dú)猓惠d氣流量2ml/min，尾吹30ml/min；進(jìn)樣方式分流比5∶1。理論板數(shù)按右旋龍腦峰計(jì)算應(yīng)不低于1900。校正因子的測定取水楊酸甲酯適量，精密稱定，加無水乙醇配制成1mg/ml的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。取右旋龍腦對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成1mg/ml的溶液，再精密量取0.5ml于10ml量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml后用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，吸取1ul，注入氣相色譜儀，計(jì)算校正因子。測定法取本品5瓶，傾出內(nèi)容物，混勻，精密稱取適量(約相當(dāng)于1瓶的量)，于25ml量瓶中，用水5ml溶解后，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，再精密量取0.5ml于10ml量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml后用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，吸取續(xù)濾液1ul，注入氣相色譜儀，測定，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為6.25～15.0mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例2a.取丹參4000g、三七260g、冰片50g備用；b.以上丹參、三七經(jīng)過分別用乙醇提取，得丹參提取物、三七提取物；冰片用適量乙醇溶解，用β-環(huán)糊精包合；將丹參提取物、三七提取物加注射用水適量使溶解，煮沸，放冷，濾過，濾液與冰片β-CD包合溶液混合，加甘露醇，補(bǔ)加注射用水適量，調(diào)pH，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為30.25～75.0mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例3a.取丹參1200g、三七300g、冰片6g備用；b.以上丹參、三七經(jīng)過分別經(jīng)水提，3次醇沉，合并提取液，濃縮，得丹參提取物、三七提取物；冰片用適量乙醇溶解，用β-環(huán)糊精包合；將丹參提取物、三七提取物加注射用水適量使溶解，煮沸，放冷，濾過，濾液與冰片β-CD包合溶液混合，加甘露醇，補(bǔ)加注射用水適量，調(diào)pH，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為12.25～26.4mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例4a.取丹參1500g、三七550g、冰片20g備用；b.以上丹參水提取兩次，第一次加8倍量水提取3小時，第二次加6倍量水提取2小時，合并提取液，濃縮，得丹參提取物；三七醇提取兩次，第一次加8倍量85％乙醇提取2小時，第二次加6倍量乙醇提取1小時，合并提取液，濃縮，得三七提取物；冰片用適量乙醇溶解，用β-環(huán)糊精包合；將丹參提取物、三七提取物或丹參三七提取物加注射用水500ml使溶解，煮沸5分鐘，放冷，濾過，濾液與冰片β-CD包合溶液混合，加甘露醇10g，補(bǔ)加注射用水適量補(bǔ)足1000ml，調(diào)pH為5～7，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為18.33～26.0mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例5a.取丹參1400g、三七350g、冰片30g備用；b.以上丹參水提取三次，第一次加8倍量水提取2小時，第二次加6倍量水提取1小時，第三次加4倍量水提取1小時，合并提取液，醇沉，溶液濃縮，得丹參提取物；三七醇提取三次，第一次加6倍量80％乙醇提取2小時，第二次加6倍量70％乙醇提取1小時，第三次加4倍量60％乙醇提取1小時，合并提取液，濃縮，得三七提取物；冰片用適量乙醇溶解，用β-環(huán)糊精包合；將丹參提取物、三七提取物或丹參三七提取物加注射用水300ml使溶解，煮沸10分鐘，放冷，濾過，濾液與冰片β-CD包合溶液混合，加甘露醇60g，補(bǔ)加注射用水適量補(bǔ)足1000ml，調(diào)pH為5～6.5，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為25.00～35.0mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例6a.取丹參3500g、三七400g、冰片8g備用；b.以上三味，丹參加8倍量水煎煮，合并煎液，并濃縮，濃縮液加入60％乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，濃縮液加入70％乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，加水，濾過，濾液濃縮，加入80％乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，干燥，得丹參提取物；三七，加4倍量水煎煮，合并煎液，濃縮，加入乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，加水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用85％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精，加水，加熱使溶解，加活性炭煮沸，脫炭，濾液備用；將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，包合，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水200ml使溶解，煮沸，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加活性炭，保溫，脫炭，濾液冷卻后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇，補(bǔ)加注射用水適量至1000ml，調(diào)pH5～5.5，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為6.25～14.8mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例7a.取丹參2000g、三七450g、冰片30g備用；b.以上三味，丹參加6倍量水煎煮2次，每次1小時，合并煎液，并濃縮，濃縮液加入85％乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，濃縮液加入80％乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，加水，濾過，濾液濃縮，加入80％乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，干燥，得丹參提取物；三七，加7倍量水煎煮，合并煎液，濃縮，加入75％乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，加水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用75％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精，加水，加熱使溶解，加活性炭煮沸，脫炭，濾液備用；將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，包合，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水250ml使溶解，煮沸，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加活性炭，保溫，脫炭，濾液冷卻后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇，補(bǔ)加注射用水1500ml，調(diào)pH4～5，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為22.4～34.8mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例8a.取丹參1800g、三七260g、冰片10g備用；b.以上三味，丹參加5倍量水煎煮2次，每次2小時，合并煎液，并濃縮，濃縮液加入75％乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，濃縮液加入80％乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，加水，濾過，濾液濃縮，加入80％乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，干燥，得丹參提取物；三七，加8倍量水煎煮，合并煎液，濃縮，加入85％乙醇，靜置，濾過，濾液濃縮，加水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用85％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精，加水，加熱使溶解，加活性炭煮沸，脫炭，濾液備用；將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，包合，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水450ml使溶解，煮沸，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加活性炭，保溫，脫炭，濾液冷卻后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇，補(bǔ)加注射用水2000ml，調(diào)pH4～6，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為7.5～16.4mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例9a.取丹參3000g、三七360g、冰片15備用；b.以上三味，丹參切片加水煎煮5次，每次1小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)85％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)85％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15～1.45(50℃)的浸膏，加4倍量水，冷藏，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)90％，靜置，濾過，濾液濃縮至稠膏，干燥，得丹參提取物；取三七，加水煎煮5次，每次1小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)90％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加10倍量水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用85％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精1500g，加水至適量，加熱使溶解，加1％活性炭煮沸60分鐘，脫炭，濾液備用；將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，超聲包合2小時，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水適量使溶解，煮沸20分鐘，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加0.2％活性炭90℃保溫60分鐘，脫炭，濾液冷卻至70℃以下后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇300g，補(bǔ)加注射用水至適量，調(diào)pH為5～7，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為12.5～32.5mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例10a.取丹參8000g、三七550g、冰片65備用；b.以上三味，丹參切片加水煎煮3次，每次2小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)50％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)85％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15～1.45(50℃)的浸膏，加2倍量水，冷藏，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)50％，靜置，濾過，濾液濃縮至稠膏，干燥，得丹參提取物；取三七，加水煎煮3次，每次1小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)50％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加2倍量水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用50％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精100g，加水至適量，加熱使溶解，加0.2％活性炭煮沸5分鐘，脫炭，濾液備用。將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，超聲包合1～12小時，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水適量使溶解，煮沸1～20分鐘，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加0.05％活性炭50℃保溫10分鐘，脫炭，濾液冷卻至70℃以下后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇20g，補(bǔ)加注射用水至適量，調(diào)pH為5～7，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為40.75～75.0mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例11a.取丹參2469.85g、三七425.25g、冰片25.25備用；b.以上三味，丹參切片加水煎煮2次，每次1.5小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)75％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)65％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15～1.45(50℃)的浸膏，加10倍量水，冷藏，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置，濾過，濾液濃縮至稠膏，干燥，得丹參提取物；取三七，加水煎煮2次，每次1.5小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加6倍量水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用65％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精200g，加水至適量，加熱使溶解，加0.5％活性炭煮沸30分鐘，脫炭，濾液備用；將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，超聲包合4小時，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水適量使溶解，煮沸15分鐘，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加0.1％活性炭70℃保溫20分鐘，脫炭，濾液冷卻至60℃以下后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇40g，補(bǔ)加注射用水至適量，調(diào)pH為5～7，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為25.00～38.0mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例12a.取丹參2266.2g、三七438.2g、天然冰片20.6g備用；b.以上三味，丹參第一次加8倍量水，第二、三次分別加6倍量水，每次煎煮1小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)65％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)65％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15～1.45(50℃)的浸膏，加8倍量水，冷藏，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)80％，靜置，濾過，濾液濃縮至稠膏，干燥，得丹參提取物；取三七，加6倍量水煎煮3次，每次1小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)60％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加6倍量水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用65％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精150g，加水至適量，加熱使溶解，加0.4％活性炭煮沸20分鐘，脫炭，濾液備用；將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，超聲包合2小時，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水適量使溶解，煮沸10分鐘，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加0.01％活性炭70℃保溫10分鐘，脫炭，濾液冷卻至70℃以下后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇80g，補(bǔ)加注射用水至適量，調(diào)pH為5～7，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為20.45～38.9.0mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例13a.取丹參2486.2g、三七486.2g、天然冰片27.6g備用；b.以上三味，丹參第一次加8倍量水，第二、三次分別加6倍量水，每次煎煮1小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)75％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)85％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25左右(50℃)的浸膏，加8～10倍量水，冷藏，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)80％，靜置，濾過，濾液濃縮至稠膏，干燥，得丹參提取物；取三七粉碎成顆粒，加8倍量水煎煮三次，每次1小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)80％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加3～5倍量水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精500g，加水至1500ml，加熱使溶解，加0.5％活性炭煮沸20分鐘，脫炭，濾液備用。將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，超聲包合6小時，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水適量使溶解，煮沸10分鐘，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加0.1％活性炭80℃保溫30分鐘，脫炭，濾液冷卻至50℃以下后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇100g，補(bǔ)加注射用水至4000ml，調(diào)pH為6.5，除菌濾過，灌裝至西林瓶中，加丁基橡膠塞，凍干，壓蓋，檢驗(yàn)，包裝即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為31.25～41.5mg/g凍干粉固形物。實(shí)施例14a.取丹參2468.2g、三七468.2g、冰片35.6g備用；b.以上三味，丹參切片加水煎煮3次，每次0.5小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)75％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)85％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15～1.45(50℃)的浸膏，加4倍量水，冷藏，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)85％，靜置，濾過，濾液濃縮至稠膏，干燥，得丹參提取物；取三七，加6倍量水煎煮3次，每次0.5～3小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)50～90％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.35(50℃)的浸膏，加5倍量水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用75％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精200g，加水至適量，加熱使溶解，加1％活性炭煮沸50分鐘，脫炭，濾液備用；將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，超聲包合8小時，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水適量使溶解，煮沸5分鐘，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加0.08％活性炭60℃保溫25分鐘，脫炭，濾液冷卻至70℃以下后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇150g，補(bǔ)加注射用水至適量，調(diào)pH為5～7，凍干，即得。按照實(shí)施例1方法測定含量，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為21.25～39.5mg/g凍干粉固形物。權(quán)利要求1.一種復(fù)方丹參凍干粉針劑，其特征在于，采用如下方法測定凍干粉針中冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，其含量測定方法如下色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜柱INNOWAX(30m*0.32mm*0.5um)，柱溫程序升溫150℃保持7min，以20℃/min升至220℃，保持5min。汽化溫度250℃；檢測器溫度250℃；檢測器FID氫火焰離子化檢測器，氫氣流量40ml/min；空氣流量350ml/min；載氣高純度氮?dú)猓惠d氣流量2ml/min，尾吹30ml/min；進(jìn)樣方式分流比5∶1；理論板數(shù)按右旋龍腦峰計(jì)算應(yīng)不低于1900；校正因子的測定取水楊酸甲酯適量，精密稱定，加無水乙醇配制成1mg/ml的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。取右旋龍腦對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成1mg/ml的溶液，再精密量取0.5ml于10ml量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml后用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，吸取1ul，注入氣相色譜儀，計(jì)算校正因子；測定法取本品5瓶，傾出內(nèi)容物，混勻，精密稱取適量(約相當(dāng)于1瓶的量)，于25ml量瓶中，用水5ml溶解后，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，再精密量取0.5ml于10ml量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml后用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，吸取續(xù)濾液1ul，注入氣相色譜儀，測定，本品含冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為6.25～75.0mg/g凍干粉固形物。2.如權(quán)利要求1所述復(fù)方丹參凍干粉針劑，其特征在于，其中冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為12.5～62.5mg/g凍干粉固形物。3.如權(quán)利要求2所述復(fù)方丹參凍干粉針劑，其特征在于，其中冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為25.0～50.25mg/g凍干粉固形物。4.如權(quán)利要求3所述復(fù)方丹參凍干粉針劑，其特征在于，其中冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為31.25～41.5mg/g凍干粉固形物。5.如權(quán)利要求1所述復(fù)方丹參凍干粉針劑，其特征在于，其中三七以人參皂苷Rg1(C27H32O16)、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的總量計(jì)，含量為6.25～56.25mg/g凍干粉固形物；丹參以丹參素(C9H10O5)計(jì)，含量為1.25～18.75mg/g凍干粉固形物；丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，含量為6.25～100.0mg/g凍干粉固形物；冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為6.25～75.0mg/g凍干粉固形物。6.如權(quán)利要求5所述復(fù)方丹參凍干粉針劑，其特征在于，其中三七以人參皂苷Rg1(C27H32O16)、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的總量計(jì)，含量為12.5～50.0mg/g凍干粉固形物；丹參以丹參素(C9H10O5)計(jì)，含量為2.5～15.5mg/g凍干粉固形物；丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，含量為12.5～75.0mg/g凍干粉固形物；冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為12.5～62.5mg/g凍干粉固形物。7.如權(quán)利要求6所述復(fù)方丹參凍干粉針劑，其特征在于，其中三七以人參皂苷Rg1(C27H32O16)、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的總量計(jì)，含量為18.75～31.25mg/g凍干粉固形物；丹參以丹參素(C9H10O5)計(jì)，含量為3.75～12.75mg/g凍干粉固形物；丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，含量為25.0～50.125mg/g凍干粉固形物；冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為25.0～50.25mg/g凍干粉固形物。8.如權(quán)利要求7所述復(fù)方丹參凍干粉針劑，其特征在于，其中三七以人參皂苷Rg1(C27H32O16)、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的總量計(jì)，含量為18.75～25.0mg/g凍干粉固形物；丹參以丹參素(C9H10O5)計(jì)，含量為3.75～8.875mg/g凍干粉固形物；丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，含量為25.0～41.375mg/g凍干粉固形物；冰片以右旋龍腦(C10H18O)計(jì)，含量為31.25～41.5mg/g凍干粉固形物。9.如權(quán)利要求1～8任一所述復(fù)方丹參凍干粉針劑，其特征在于，制備方法如下a.取丹參1000～4000g、三七260～850g、冰片5～50g備用；b.以上三味，丹參切片加水煎煮三次，每次1小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)75％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)85％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25左右(50℃)的浸膏，加8～10倍量水，冷藏，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)80％，靜置，濾過，濾液濃縮至稠膏，干燥，得丹參提取物；取三七粉碎成顆粒，加水煎煮三次，每次1小時，合并煎液，并濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)80％，靜置，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15左右(50℃)的浸膏，加3～5倍量水，冷藏，濾過，濾液通過大孔吸附樹脂柱后，先用水洗，再用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮至稠膏，干燥，得三七提取物；取羥丙基-β-環(huán)糊精500g，加水至1500ml，加熱使溶解，加0.5％活性炭煮沸20分鐘，脫炭，濾液備用。將冰片用適量乙醇溶解，緩慢滴加至羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，超聲包合6小時，濾過，得冰片羥丙基-β-CD包合溶液；將丹參提取物與三七提取物分別加注射用水適量使溶解，煮沸10分鐘，放冷至室溫，冷藏，濾過，濾液合并，加0.1％活性炭80℃保溫30分鐘，脫炭，濾液冷卻至50℃以下后與冰片羥丙基-β-CD包合溶液混合，加甘露醇100g，補(bǔ)加注射用水至4000ml，調(diào)pH為6.5，除菌濾過，灌裝至西林瓶中，加丁基橡膠塞，凍干，壓蓋，檢驗(yàn)，包裝即得。10.如權(quán)利要求9所述復(fù)方丹參凍干粉針劑，其特征在于每瓶中凍干粉針固形物為0.8g。全文摘要本發(fā)明藥物是提供一種含冰片的復(fù)方丹參凍干粉針劑及其制備方法。本發(fā)明是由丹參、三七、冰片為藥物組成，丹參、三七經(jīng)過提取，得丹參提取物、三七提取物；冰片用適量乙醇溶解，用β－環(huán)糊精包合；將丹參提取物、三七提取物或丹參三七提取物加注射用水適量使溶解，煮沸，放冷，濾過，濾液與冰片β－CD包合溶液混合，加甘露醇，補(bǔ)加注射用水適量，調(diào)pH，凍干，制成的凍干粉針劑。本發(fā)明藥物更加適合危、重、急癥的臨床需要。本品含冰片以右旋龍腦(C文檔編號G01N33/15GK101085002SQ20061001422公開日2007年12月12日申請日期2006年6月8日優(yōu)先權(quán)日2006年6月8日發(fā)明者葉正良,李永強(qiáng),鄭永鋒,周桂榮申請人:天津天士力之驕藥業(yè)有限公司