專利名稱：：一種中藥組合物制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種中藥組合物制劑的制備方法，特別涉及用于抑制流感病毒、上呼吸道感染病毒、SARS病毒和細(xì)菌的中藥組合物制劑的制備方法。
背景技術(shù)：
：流行性感冒又稱流感，是由流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病，流感發(fā)病不受季節(jié)限制，一年四季均可發(fā)生，但以秋冬季節(jié)發(fā)病率最高，由于流感病毒存在于病人的鼻涕、口涎、痰液等分泌物中，極易傳染而引起流行。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的統(tǒng)計(jì)，每年世界有6億至12億人感染流感，死亡25萬至50萬人，流感的發(fā)病率為15.6％。迄今尚無針對(duì)病毒的理想西藥。流感在中醫(yī)屬于瘟病的范疇，中醫(yī)藥防治流感有一定的優(yōu)勢(shì)，但也沒有作用明確的中成藥。上呼吸道感染由細(xì)菌和病毒所致，特別是病毒性上呼吸道感染，是人類最常見的疾病之一，其癥狀可輕可重，目前醫(yī)學(xué)界尚無特效藥，治療上僅以支持對(duì)癥治療為主。上呼吸道感染在中醫(yī)屬于外感病范疇，其癥可見于瘟病中的“風(fēng)溫”、“春溫”、“暑溫”等及傷寒中“太陽病”、“少陽病”、“陽明病”各型中。中醫(yī)藥在防治本疾病較西醫(yī)有一定的優(yōu)勢(shì)。雖然目前國(guó)內(nèi)已經(jīng)存在一定的治療本疾病的中成藥，但也存在病機(jī)無統(tǒng)一認(rèn)識(shí)，特別是針對(duì)病毒的，具有殺滅和抑制病毒作用的新藥極度缺乏。傳染性非典型肺炎(InfectiousAtypicalPneumonia，IAP)WHO又稱為嚴(yán)重急性呼吸道綜合癥(SevereAcuteRespiratorySyndroma，SARS)，是一種傳染性極強(qiáng)的呼吸系統(tǒng)疾病，屬于中醫(yī)的“溫病學(xué)”范疇。本病始發(fā)冬春季節(jié)，其特點(diǎn)是發(fā)病急劇，傳變迅速，病情險(xiǎn)惡，傳染性極強(qiáng)，人群普遍易感而引起流行。已經(jīng)在我國(guó)及世界30多個(gè)國(guó)家流行，2003年SARS流行期間，全世界共發(fā)生病例8422例，死亡916例，其中中國(guó)大陸5327例，死亡349例，嚴(yán)重危害人民的生命健康，并對(duì)社會(huì)安定和經(jīng)濟(jì)建設(shè)帶來了負(fù)面影響。針對(duì)SARS中醫(yī)的病機(jī)轉(zhuǎn)歸，實(shí)施辨證施治，SARS早期為疫毒侵肺，濕遏熱阻，宜清熱解毒，化濕透邪；中期肺部實(shí)邪充滯，熱毒、瘀毒、濕毒壅遏肺絡(luò)，氣機(jī)閉塞，因?qū)嵵绿?，宜益氣化瘀，利濕解毒；后期肺脾氣虛，心血耗損，重在健脾和胃，脾升胃降，中氣得復(fù)，心血自生。處方多為湯劑，推薦用中成藥為清開靈注射液，燈盞細(xì)辛注射液，藿香正氣液，黃連素，雙黃連口服液等。中成藥中目前沒有針對(duì)SARS病毒的防治專用藥，且沒有針對(duì)SARS病毒防治的使用、攜帶便利的劑型。針對(duì)SARS的西醫(yī)治療，在早期針對(duì)發(fā)熱的治療，主要是解熱鎮(zhèn)痛藥，如阿司匹林，布洛芬，雙氯芬酸，吲哚美辛等，但多有不同程度的胃腸反應(yīng)，或有過敏反應(yīng)，一般用藥3天，體溫不降不宜繼續(xù)使用，長(zhǎng)期使用還會(huì)抑制骨髓造血功能。導(dǎo)致白細(xì)胞和血小板的減少。對(duì)于SARS高熱及呼吸窘迫綜合癥的治療，西醫(yī)一般使用物理降溫，抗生素和激素治療，特別是激素的使用，雖然能暫時(shí)穩(wěn)定病情，但也可能掩蓋一些癥狀，停藥后，體溫可迅速回升，同時(shí)由于抗感染不足，引起感染病灶的迅速擴(kuò)散。鑒于上述危害人類生命健康疾病防治的困難，本研究在于研發(fā)出具有抑制流感病毒、上呼吸道感染病毒、SARS病毒和細(xì)菌的中藥復(fù)方制劑。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個(gè)目的在于公開一種新的用于抑制流感病毒、上呼吸道感染病毒、SARS病毒和細(xì)菌的中藥組合物；本發(fā)明的另一個(gè)目的在于公開一種新的用于抑制流感病毒、上呼吸道感染病毒、SARS病毒和細(xì)菌的中藥組合物噴霧劑；本發(fā)明的另一個(gè)目的在于公開制備一種新的用于抑制流感病毒、上呼吸道感染病毒、SARS病毒和細(xì)菌的中藥組合物方法；本發(fā)明的另一個(gè)目的在于公開一種新的用于制備抑制流感病毒、上呼吸道感染病毒、SARS病毒和細(xì)菌的中藥噴霧劑質(zhì)量控制方法。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成及配比如下(按重量份)地龍100-500重量份黃芩苷1-10重量份甘草100-500重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成及配比優(yōu)選如下(按重量份)地龍200-400重量份黃芩苷3-8重量份甘草200-400重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成及配比優(yōu)選如下(按重量份)地龍300重量份黃芩苷6.5重量份甘草300重量份。本發(fā)明中藥組合物的制備方法為取預(yù)處理后地龍，加0.1mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液，室溫下混勻放置15-25小時(shí)后，15-25℃400-600rpm勻漿10-20分鐘，8000-12000rpm離心，取上清液置50-65℃中放置，8000-12000rpm離心，取上清液進(jìn)行超濾透析，濃縮液冷藏備用；甘草加水煎煮1-3次，每次1-3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10，加入乙醇使含醇量達(dá)60-70％，靜置10-14小時(shí)，濾過，回收乙醇，加入地龍?zhí)崛∫海瑪噭?，用氨水調(diào)pH值適宜，加入黃芩苷，加水適量，攪勻，冷藏，過夜，濾過，經(jīng)過常規(guī)工序直接或間接加入藥學(xué)上可接受的賦型劑制成臨床可接受的劑型，如片劑、膠囊、顆粒劑、滴丸、口服液、噴霧劑。本發(fā)明中藥組合物噴霧劑的制備方法為地龍100-500重量份黃芩苷1-10重量份甘草100-500重量份。取預(yù)處理后地龍，加0.1mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液，室溫下混勻放置15-25小時(shí)后，15-25℃400-600rpm勻漿10-20分鐘，8000-12000rpm離心，取上清液置50-65℃中放置，8000-12000rpm離心，取上清液進(jìn)行超濾透析，濃縮液冷藏備用；甘草加水煎煮1-3次，每次1-3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10，加入乙醇使含醇量達(dá)60-70％，靜置10-14小時(shí)，濾過，回收乙醇，加入地龍?zhí)崛∫海瑪噭?，用氨水調(diào)pH值適宜，加入黃芩苷，加水適量，攪勻，冷藏，過夜，濾過，加0.2％苯甲酸鈉和0.6％蘋果香精，攪勻，濾過，加水制成1000體積份，灌裝，即得。本發(fā)明說明書中所述的重量份/體積份與克/毫升相對(duì)應(yīng)。本發(fā)明中藥組合物噴霧劑的質(zhì)量控制方法包括以下鑒別和/或含量測(cè)定鑒別方法包括以下方法中的一種和/或幾種1、黃芩取本品液體10ml，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml熱溶，濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以4-6∶1-4∶1-2∶1-2醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水展開劑，預(yù)平衡25-35分鐘，展開，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中在與黃芩苷對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上顯一相同的暗綠色斑點(diǎn)；2、甘草取本品液體10ml，加甲醇50ml回流提取1小時(shí)，回收甲醇至干，加入30ml水使溶解，用正丁醇提取2-4次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材0.5g，同供試品方法操作得溶液0.5ml，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一用1％NaOH溶液噴霧的預(yù)制硅膠G薄層板上，以13-17∶1-2∶1-2∶1-3醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上顯一相同顏色的熒光斑點(diǎn)；3、地龍取本品10ml，加氯仿20ml，密塞，超聲處理15-25分鐘，濾過，濾液濃縮至約1ml，作為供試品溶液。另取地龍藥材3g，同法制成藥材溶液；照薄層色譜法(附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩鐘溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以7-11∶1-2苯-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。含量測(cè)定黃芩苷照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VID)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；45-50∶50-55∶0.1-0.4甲醇-水-磷酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm；理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2500；對(duì)照品溶液的制備精密稱取在60℃減壓干燥4小時(shí)的黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含64.40μg的溶液；供試品溶液的制備精密量取本品溶液1ml置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，置水浴中微熱，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀測(cè)定，外標(biāo)法計(jì)算，即得；本品每25ml液體含黃芩苷(C21H18O11)不得少于67.5mg。本發(fā)明組合物制劑主要用于流感、上呼吸道感染和SARS的防治，具有很好的清熱解毒、活血化瘀、祛痰止咳之功效，通過抗菌、抗病毒、抗炎、抗過敏、免疫調(diào)節(jié)及解熱等作用以改善呼吸道及肺功能達(dá)到防治流感、上呼吸道感染和SARS目的。本發(fā)明組合物所制成液體噴霧劑型具有起效迅速，毒副作用小，儲(chǔ)運(yùn)、攜帶、使用方便特點(diǎn)。藥物成品為藥物有效成分的水溶性制劑，在滿足藥效學(xué)對(duì)制劑要求的同時(shí)，具有制備方便，成本低廉等產(chǎn)業(yè)化優(yōu)勢(shì)。本發(fā)明組合物噴霧劑的質(zhì)量控制方法使噴霧劑質(zhì)量穩(wěn)定，易于控制。以下實(shí)驗(yàn)例進(jìn)一步說明本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明組合物成份篩選實(shí)驗(yàn)160只雄性小鼠體重均衡后，隨機(jī)組，按正交設(shè)計(jì)表L16(215)內(nèi)涵，適應(yīng)本研究的五因素兩水平觀察要求，五種影響因素為A地龍、B黃芩苷甙、C甘草酸、D納洛酮、E梔子甙和三七總甙。各因素均有兩種狀態(tài)為不用藥(用1表示)和用藥(用2表示)。具體設(shè)計(jì)統(tǒng)計(jì)學(xué)表格所示，項(xiàng)目欄的15列代表5種因素或其兩兩交互作用，其中第01、02、04、08、15列分別代表A、B、C、D、E等5因素影響效果，其余各列反映各部位間的兩兩交互作用；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的16行代表16組動(dòng)物；Ri表示觀察指標(biāo)的結(jié)果，1水平、2水平各指標(biāo)數(shù)值之間進(jìn)行t檢驗(yàn)，分析兩水平的差異，以P＜0.25為有效趨勢(shì)的有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義1.單一因素對(duì)肺水腫程度的影響①地龍80只未用地龍小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.1048±0.037286、0.022613±0.008968、0.082188±0.032733、0.774642±0.088514，80只使用地龍小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別增加為0.116613±0.03751、0.024288±0.008728、0.092325±0.031154、0.78954±0.05269，肺濕重、水重、水百分比增加有顯著性意義(P＜0.05)，而肺干重降低無顯著性意義(P＞0.05)。說明地龍可能對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫具有負(fù)性作用。②黃芩苷80只未用黃芩苷小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.103638±0.036055、0.022263±0.009157、0.081375±0.030975、0.77920±0.088845，80只使用黃芩苷小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別降低為0.117775±0.038297、0.024638±0.008445、0.093138±0.032627、0.784974±0.053037，肺濕重、肺干重、水重增加有顯著性意義(P＜0.05)，而水百分比降低無顯著性意義(P＞0.05)。說明黃芩苷可能對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫具有負(fù)性作用。③甘草80只未用甘草酸小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.10865±0.038944、0.021925±0.008406、0.086725±0.032603、0.795901±0.053888，80只使用甘草酸小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別降低為0.112763±0.036642、0.024975±0.009092、0.087788±0.032102、0.768281±0.086216，肺干重、水百分比降低有顯著性意義(P＜0.05)，而肺濕重、水重降低無顯著性意義(P＞0.05)。說明甘草酸對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫具有防治作用。④納洛酮80只未用納洛酮小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.108275±0.039162、0.023088±0.009192、0.085188±0.033605、0.778869±0.082838，80只使用納洛酮小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別降低為0.113138±0.036362、0.023813±0.00856、0.089325±0.03092、0.785313±0.061969，肺濕重、肺干重、水重、水百分比變化均無顯著性意義(P＞0.05)。說明納洛酮對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫無防治作用。⑤三七梔子(通絡(luò)救腦注射液)80只未用三七梔子小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.114975±0.04063、0.023563±0.009487、0.091413±0.034418、0.791414±0.061221，80只使用三七梔子小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別降低為0.106438±0.034354、0.023338±0.008246、0.0831±0.029572、0.772768±0.082458，肺濕重、肺干重、水重、水百分比變化均無顯著性意義(P＞0.05)。說明三七梔子對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫無防治作用。2.減輕肺水腫程度的雙因素交互作用①地龍與甘草的交互作用80只地龍與甘草酸無交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.111463±0.038428、0.022813±0.009455、0.08865±0.03106、0.796114±0.058715，80只地龍與甘草酸有交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別降低為0.10995±0.037283、0.024088±0.008234、0.085863±0.033547、0.768068±0.082931，水百分比降低有顯著性意義(P＜0.01)，而肺濕重、肺干重、水重降低無顯著性意義(P＞0.05)。說明地龍與甘草酸交互作用對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫具有防治作用。②黃芩苷與甘草的交互作用80只黃芩苷與甘草無交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.112625±0.037405、0.022838±0.009678、0.089788±0.030921、0.796264±0.062072，80只黃芩苷與甘草交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別降低為0.108788±0.038226、0.024063±0.007975、0.084725±0.033541、0.767918±0.080396，水百分比降低有顯著性意義(P＜0.01)，而肺濕重、肺干重、水重降低無顯著性意義(P＞0.05)。說明黃芩苷與甘草交互作用對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫具有防治作用。③納洛酮與三七梔子的交互作用80只納洛酮與三七梔子無交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.107288±0.041068、0.02165±0.00948、0.085638±0.034237、0.795372±0.062714，80只納洛酮與三七梔子交互作用小鼠的肺濕重、干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別降低為0.114125±0.034024、0.02525±0.007847、0.088875±0.030275、0.76881±0.080206，肺干重、水百分比降低有顯著性意義(P＜0.01)，而肺濕重、水重降低無顯著性意義(P＞0.05)。說明納洛酮與三七梔子交互作用對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫具有防治作用。④甘草與納洛酮的交互作用80只甘草與納洛酮無交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.1088±0.0371、0.0225±0.0096、0.0863±0.0303、0.7929±0.0639，80只甘草與納洛酮交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別降低為0.1126±0.0385、0.0244±0.0080、0.0882±0.0342、0.7713±0.0800，、水百分比降低有顯著性意義(P＜0.05)，而肺濕重、肺干重、水重降低無顯著性意義(P＞0.05)。說明甘草與納洛酮交互作用對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫具有防治作用。3.不影響肺水腫程度的雙因素交互作用①地龍與黃芩苷的交互作用80只地龍與黃芩苷無交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.104075±0.039398、0.023300±0.009979、0.080775±0.032726、0.770971±0.087163，80只使用地龍小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別增加為0.117338±0.035023、0.0236±0.007642、0.093738±0.030627、0.793211±0.053624，肺濕重、水重、水百分比增加有顯著性意義(P＜0.05)，而肺干重增加無顯著性意義(P＞0.05)。說明地龍與黃芩苷交互作用對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫具有負(fù)性作用。②地龍與納洛酮的交互作用80只地龍與納洛酮無交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.106438±0.037715、0.02245±0.00911、0.083988±0.032451、0.781732±0.084837，80只地龍與納洛酮交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別增加為0.114975±0.03753、0.02445±0.008545、0.090525±0.031927、0.78245±0.059378，肺濕重、肺干重、水重、水百分比變化均無顯著性意義(P＞0.05)。說明地龍與納洛酮交互作用對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫無防治作用③黃芩苷甙與納洛酮的交互作用80只黃芩苷甙與納洛酮的交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.106625±0.037923、0.02315±0.008828、0.083475±0.032396、0.775055±0.081643，80只黃芩苷甙與納洛酮的交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別增加為0.114788±0.037363、0.02375±0.008939、0.091038±0.031869、0.789127±0.062908，肺濕重、水重增加有顯著性意義(P＜0.05)，而肺干重、水百分比增加無顯著性意義(P＞0.05)。說明黃芩苷甙與納洛酮交互作用對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫起負(fù)性作用。④甘草與三七梔子的交互作用80只甘草與三七梔子無交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.1068±0.0393、0.0226±0.0089、0.0842±0.0339、0.7802±0.0845，80只甘草與三七梔子交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別增加為0.1146±0.0359、0.0243±0.0088、0.0904±0.0305、0.7840±0.0598，肺濕重、肺干重、水重、水百分比增加均無顯著性意義(P＞0.05)。說明甘草與三七梔子交互作用對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫無影響。⑤黃芩苷與三七梔子的交互作用80只黃芩苷與三七梔子無交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.111275±0.036446、0.023625±0.008638、0.08765±0.03059、0.784136±0.058003，80只黃芩苷與三七梔子交互作用小鼠的肺濕重、干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別降低為0.110138±0.039229、0.023275±0.009129、0.086863±0.034029、0.780046±0.085735，肺干重、肺濕重、水重、水百分比降低均無顯著性意義(P＞0.05)。說明黃芩苷與三七梔子交互作用對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫具無影響。⑥地龍與三七梔子的交互作用80只地龍與三七梔子無交互作用小鼠的肺濕重、肺干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別為0.107488±0.034436、0.0223±0.008912、0.085188±0.029367、0.789401±0.066445，80只地龍與三七梔子交互作用小鼠的肺濕重、干重、水重、水百分比的平均數(shù)值分別降低為0.113925±0.040756、0.024600±0.008713、0.089325±0.034971、0.774781±0.078741，肺干重、肺濕重、水重、水百分比降低均無顯著性意義(P＞0.05)。說明地龍與三七梔子交互作用對(duì)小鼠急性呼吸窘迫綜合征肺水腫具無影響。4.實(shí)驗(yàn)結(jié)論①單一因素降低肺水腫的程度地龍、黃芩苷可能有負(fù)性作用，甘草具有防治作用，納洛酮、三七梔子無防治作用。②因素交互減輕肺水腫的程度地龍與甘草、黃芩苷與甘草、納洛酮與三七梔子、甘草與納洛酮等4種兩因素交互作用具有防治效應(yīng)。綜上所述，地龍、黃芩苷與甘草組方治療SARS為最佳篩選配伍。實(shí)驗(yàn)例2提取工藝研究實(shí)驗(yàn)一、甘草提取工藝研究參考《中國(guó)藥典》2000版一部甘草浸膏制備方法，甘草提取以水為溶劑，以水煎煮次數(shù)、加水倍數(shù)及時(shí)間為因素A，水煎液濃縮相對(duì)密度為因素B，乙醇沉淀濃度為因素C，采用四因素三水平表安排實(shí)驗(yàn)；檢測(cè)指標(biāo)為甘草酸含量；檢測(cè)方法采用HPLC方法。甘草含量測(cè)定方法參照藥典(中國(guó)藥典2000年版一部66頁(yè))甘草項(xiàng)下含量測(cè)定方法)儀器Waters2695高效液相色譜儀，Waters2996紫外檢測(cè)器色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸(67∶33∶1)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。對(duì)照品溶液的制備由于沒有買到中國(guó)藥品生物制品鑒定所的標(biāo)準(zhǔn)甘草酸單銨鹽對(duì)照品，只能用現(xiàn)有甘草酸單銨鹽(標(biāo)記含量98％)作對(duì)照，以確定工藝。因此，所測(cè)得結(jié)果偏低，而不影響試驗(yàn)趨勢(shì)。供試品溶液的制備精密吸取表2中各提取條件下所得樣品，水浴蒸干，用流動(dòng)相定溶，在線性范圍內(nèi)進(jìn)樣，計(jì)算，即得。因素水平表及實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表1甘草提取工藝正交實(shí)驗(yàn)因素水平表表2甘草提取工藝正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表3黃芩提取工藝方差分析表<tablesid="table1"num="001"><tablewidth="766">方差來源組間平方和自由度均方F值因素影響ABC誤差0.82830.08960.17830.033422220.41420.04480.08920.016724.802.685.34顯著不顯著不顯著</table></tables>F0.05(2.2)＝19F0.01(2.2)＝99如上圖方差分析結(jié)果所示，因素A影響呈顯著性差異，且A2＞A3＞A1故選擇水平A2；在因素B中B3＞B1＞B2，故選擇B3；而在因素C中C3＞C2＞C1，但是C3與C2差別不大，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)我們選擇C2。因此根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)選擇A2B3C2為最佳工藝條件。但從級(jí)差值和方差分析來看，B因素即濃縮密度對(duì)于結(jié)果影響不顯著，因此，從小試結(jié)果來看，我們選擇密度1.1較為適宜，即水煎煮三次，加水量分別為10、8、8倍，時(shí)間分別為2、1、1小時(shí)；水煎液合并后濃縮至相對(duì)密度1.1，并且醇沉濃度為65％。二、地龍?zhí)崛」に囇芯课覀儾捎眯碌奶崛」に嚕崛□r地龍含有的抗病毒治療和預(yù)防上呼吸道感染有效成分，在處方篩選中我們發(fā)現(xiàn)這些成分是一類以DNA酶為主的物質(zhì)，因此我們采用了生化方法進(jìn)行蛋白酶混合成分的提取。A.地龍制備工藝研究預(yù)處理鮮地龍用自來水漂洗體表的污垢，置18-22℃的蒸餾水中浸泡8小時(shí)，每2小時(shí)漂洗并換水，使地龍吐凈胃腸道中的泥土。然后加0.1％NaCl，混勻，刺激其分泌大量黃色分泌物，重復(fù)三次，每次20分鐘，間隔期間用10倍體積蒸餾水漂洗2次。然后置于直徑為0.5mm的尼龍網(wǎng)中，用強(qiáng)力吸水纖維吸去多余液體，-20℃冷凍保存。粗蛋白液制備取處理過的地龍，加5倍體積0.1mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液，室溫下混勻放置20小時(shí)，發(fā)泡，用工業(yè)勻漿機(jī)500rpm勻漿15分鐘，每3分鐘間歇1分鐘，勻漿溫度為20℃。10000rpm離心20分鐘，取上清備用。精濾液制備取上清液置55℃中36小時(shí)，10000rpm離心20分鐘，取上清進(jìn)行超濾透析，外水透析液是樣品的50倍體積，超濾后樣品被濃縮15-18倍，呈澄明無色或微褐色液體，冷凍備用。B.工藝篩選蛋白的分離提純關(guān)鍵是對(duì)原料的處理，因此我們對(duì)工藝中處理后的地龍溶解劑激溶法與直接勻漿后柱層析法進(jìn)行了對(duì)照研究。具體方法如下激溶法將預(yù)處理后地龍加溶解劑5倍體積0.1mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液發(fā)泡使地龍蛋白自溶，然后進(jìn)行勻漿，高速離心后上清液即為粗蛋白溶液。將粗蛋白溶液按前述方法制備精濾液后，冷凍干燥，以凍干粉與原料地龍的比率計(jì)算產(chǎn)率。柱層析法將預(yù)處理后干地龍直接勻漿，然后將離心后上清液過柱，蛋白洗脫液即為粗蛋白溶液。將粗蛋白溶液按前述方法制備精濾液后，冷凍干燥，以凍干粉與原料地龍的比率計(jì)算產(chǎn)率。兩種工藝的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表4不同工藝的終產(chǎn)品產(chǎn)率、活性比較從以上結(jié)果分析，激溶法提取地龍活性成分可使產(chǎn)品得率和總活性均有大幅度的提高。而且采用激溶法不僅可最大限度的提取原料中的活性成分，而且減少離心后的雜質(zhì)清理及環(huán)境污染問題，而柱層析法中直接勻漿不能使蛋白質(zhì)全部溶解，有效成分損失較多，而且離心后產(chǎn)生大量廢棄物，帶來了很多工業(yè)污物的處理問題。激溶法省略了柱層析過程，不僅節(jié)省了大量的生產(chǎn)成本，而且去除了生產(chǎn)環(huán)節(jié)的限速步驟，簡(jiǎn)化了超濾等后續(xù)工作，大大提高生產(chǎn)效率，同時(shí)終產(chǎn)物活性明顯提高，是一種經(jīng)濟(jì)實(shí)用高效的生產(chǎn)工藝。實(shí)驗(yàn)例3本發(fā)明組合物藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究實(shí)驗(yàn)中所用龍芩草噴霧劑為本發(fā)明組合物噴霧制劑(制劑詳見實(shí)施例)。1.龍芩草噴霧劑解熱試驗(yàn)的藥效學(xué)研究實(shí)驗(yàn)采用大腸桿菌內(nèi)毒素致日本大耳自家兔發(fā)熱模型，靜脈注射內(nèi)毒素后家兔體溫開始上升，至第1-2小時(shí)達(dá)到第一個(gè)高峰，此后體溫穩(wěn)定于此或略有升降，到第4小時(shí)左右體溫第二次升高并且超過第一個(gè)體溫高峰，此后逐漸下降，持續(xù)8小時(shí)以上，模型組家兔體溫曲線呈內(nèi)毒素發(fā)熱之典型雙峰熱型。與模型組比較，龍芩草噴霧劑有非常顯著的解熱作用(P＜0.01)，且呈明顯量效關(guān)系，其解熱作用優(yōu)于雙黃連口服液。2.龍芩草噴霧劑化痰試驗(yàn)的藥效學(xué)研究實(shí)驗(yàn)中使小鼠霧化吸入酚紅生理鹽水，通過檢測(cè)小鼠氣管洗液中的酚紅吸光度來反映其氣管粘膜的分泌能力。結(jié)果顯示龍芩草噴霧劑5.91g/kg組小鼠酚紅排泌量明顯增加，與空白組相比較有極顯著差異(p＜0.01)，其他各組無明顯改變(P＞0.05)。3.龍芩草噴霧劑鎮(zhèn)咳試驗(yàn)的藥效學(xué)研究實(shí)驗(yàn)采用小鼠氨水引咳模型，觀察龍芩草噴霧劑對(duì)此模型的小鼠咳嗽潛伏期及咳嗽次數(shù)的影響。結(jié)果顯示，龍芩草噴霧劑劑對(duì)氨水所致小鼠咳嗽的咳嗽潛伏期影響不大，各組與空白組相比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；而龍芩草噴霧劑1.48g/kg組小鼠的咳嗽次數(shù)明顯減少，并與空白組相比較，具有極顯著差異(p＜0.01)，其他各組無明顯改變(P＞0.05)。4.龍芩草噴霧劑對(duì)油酸所致大鼠急性肺損傷模型肺組織TNF、IL-6、IL-2等炎性因子的表達(dá)的作用的影響正常對(duì)照大鼠肺組織內(nèi)TNF、IL-6、IL-2的表達(dá)較低，油酸所致急性肺損傷模型大鼠肺組織內(nèi)TNF、IL-6、IL-2的表達(dá)明顯增高，陽性藥組、龍芩噴霧劑2.85g/kg組、0.71g/kg組能明顯降低油酸所致急性肺損傷模型大鼠肺組織內(nèi)TNF、IL-6、IL-2的表達(dá)，與模型組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05，p＜0.01)，小劑量組降低不明顯。5.龍芩草噴霧劑最小殺菌濃度測(cè)定采用液體稀釋法測(cè)定龍芩草噴霧劑最小殺菌濃度。龍芩草噴霧劑對(duì)金黃色葡萄球菌的最小殺菌稀釋度是1∶4，對(duì)乙型溶血性鏈球菌的最小殺菌稀釋度是1∶16，對(duì)肺炎克雷伯氏桿菌的最小殺菌稀釋度是1∶2；而對(duì)大腸桿菌和綠膿桿菌沒有殺菌作用。6.龍芩草噴化劑對(duì)油酸所致大鼠急性肺損傷模型的影響采用油酸所致大鼠急性肺損傷模型。龍芩草噴霧劑能有效促進(jìn)油酸所導(dǎo)致急性肺損傷大鼠的肺功能，動(dòng)脈血壓和心率，動(dòng)脈血?dú)?，肺表面張力系?shù)，肺組織表面活性物質(zhì)含量，肺系數(shù)和含水百分比，肺組織病變性質(zhì)及其形態(tài)計(jì)量等指標(biāo)均明顯好轉(zhuǎn)，達(dá)到甚至超過納絡(luò)酮治療作用。結(jié)果證明龍芩草噴霧劑對(duì)油酸引起的急性肺損傷具有顯著的防治作用。7.龍芩草噴化劑對(duì)野百合堿所致肺損傷慢性大鼠模型的影響采用野百合堿所致大鼠慢性肺損傷模型，龍芩草噴霧劑能顯著促進(jìn)野百合堿所導(dǎo)致慢性肺損傷大鼠的肺功能，肺動(dòng)脈血壓，動(dòng)脈血?dú)?，肺表面張力系?shù)，肺組織表面活性物質(zhì)含量，肺組織羥脯氨酸含量，血清透明質(zhì)酸含量，肺、心臟、肝臟的臟器系數(shù)，肺組織病變和膠原纖維沉積及其形態(tài)計(jì)量等指標(biāo)均好轉(zhuǎn)，部分療效優(yōu)于硝苯地平。龍芩草噴霧劑對(duì)野百合堿引起的慢性肺損傷具有顯著的防治作用。8.龍芩草噴霧劑體外抗流感病毒的藥效學(xué)研究試驗(yàn)采用給藥后觀察小鼠肺部病變率、死亡保護(hù)率和延長(zhǎng)生命率來檢測(cè)龍芩草噴霧劑體內(nèi)對(duì)流感病毒的抑制作用，結(jié)果顯示龍芩草噴霧劑能顯著降低小鼠發(fā)病率、減輕肺部病變率和延長(zhǎng)生命率，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異具有顯著性(p＜0.01)，結(jié)果表明龍芩草噴霧劑具有顯著抑制流感病毒的作用。9.龍芩草噴霧劑體外抗甲3型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒3型、鼻病毒的藥效學(xué)研究采用病毒(CPE)法，在狗腎傳代細(xì)胞(MDCK)、咽癌上皮細(xì)胞(Hep-2)、人胚腎傳代細(xì)胞(293)和宮頸癌傳代細(xì)胞(HeLa)內(nèi)，檢測(cè)龍芩草噴霧劑體外抗甲3型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒3型、鼻病毒14型的抑制作用，結(jié)果顯示龍芩草噴霧劑對(duì)甲3型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒3型有一定的抑制作用，但對(duì)鼻病毒14型作用不明顯。下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例的效果。實(shí)施例1龍芩草噴霧劑地龍300g黃芩苷6.5g甘草300g以上三味，取預(yù)處理后地龍300g，加5倍體積0.1mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液，室溫下混勻放置20小時(shí)后，20℃500rpm勻漿15分鐘，10000rpm離心20分鐘，取上清液置55℃中36小時(shí)，10000rpm離心20分鐘，取上清進(jìn)行超濾透析，濃縮液冷藏備用；甘草300g加水煎煮，第一次10倍量水2小時(shí)，第二、三次各8倍量水1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10(60℃測(cè))，加入乙醇使含醇量達(dá)65％，靜置12小時(shí)，濾過，回收乙醇至無醇味，加入地龍?zhí)崛∫海瑪噭?，用氨水調(diào)pH值5.5--6.5，加入黃芩苷6.5g，加水適量，攪勻，冷藏(4-8℃)，過夜，濾過，加0.2％苯甲酸鈉和0.6％蘋果香精，攪勻，濾過，加水制成1000ml，灌裝，即得。鼻腔、口腔噴霧，每次3-5撳，每日6-12次或遵遺囑。25ml/瓶實(shí)施例2口服液地龍400g黃芩苷8.5g甘草400g以上三味，取預(yù)處理后地龍400g，加6倍體積0.1mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液，室溫下混勻放置24小時(shí)后，24℃500rpm勻漿15分鐘，10000rpm離心20分鐘，取上清液置55℃中36小時(shí)，10000rpm離心20分鐘，取上清進(jìn)行超濾透析，濃縮液冷藏備用；甘草400g加水煎煮，第一次12倍量水2小時(shí)，第二、三次各8倍量水1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10(60℃測(cè))，加入乙醇使含醇量達(dá)65％，靜置12小時(shí)，濾過，回收乙醇至無醇味，加入地龍?zhí)崛∫?，攪勻，用氨水調(diào)pH值5.5--6.5，加入黃芩苷8.5g，加水適量，攪勻，冷藏(4-8℃)，過夜，濾過，經(jīng)常規(guī)工藝制成口服液1000ml。實(shí)施例3片劑地龍250g黃芩苷4.5g甘草300g以上三味，取預(yù)處理后地龍250g，加4倍體積0.1mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液，室溫下混勻放置20小時(shí)后，20℃500rpm勻漿15分鐘，10000rpm離心20分鐘，取上清液置55℃中36小時(shí)，10000rpm離心20分鐘，取上清進(jìn)行超濾透析，濃縮液冷藏備用；甘草300g加水煎煮，第一次9倍量水1.5小時(shí)，第二、三次各9倍量水1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10(60℃測(cè))，加入乙醇使含醇量達(dá)65％，靜置12小時(shí)，濾過，回收乙醇至無醇味，加入地龍?zhí)崛∫?，攪勻，用氨水調(diào)pH值5.5--6.5，加入黃芩苷4.5g，加水適量，攪勻，冷藏(4-8℃)，過夜，干燥，經(jīng)常規(guī)工藝制成片劑。實(shí)施例4膠囊地龍350g黃芩苷6.5g甘草250g以上三味，取預(yù)處理后地龍350g，加9倍體積0.1mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液，室溫下混勻放置20小時(shí)后，20℃500rpm勻漿15分鐘，10000rpm離心20分鐘，取上清液置55℃中36小時(shí)，10000rpm離心20分鐘，取上清進(jìn)行超濾透析，濃縮液冷藏備用；甘草250g加水煎煮，第一次10倍量水2小時(shí)，第二、三次各8倍量水1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10(60℃測(cè))，加入乙醇使含醇量達(dá)65％，靜置12小時(shí)，濾過，回收乙醇至無醇味，加入地龍?zhí)崛∫?，攪勻，用氨水調(diào)pH值5.5-6.5，加入黃芩苷6.5g，加水適量，攪勻，冷藏(4-8℃)，過夜，干燥，經(jīng)常規(guī)工藝制成膠囊。實(shí)施例5龍芩草噴霧劑質(zhì)量控制方法鑒別1.黃芩取本品液體10ml，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml熱溶，濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以5∶3∶1∶1醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水展開劑，預(yù)平衡30分鐘，展開，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中在與黃芩苷對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上顯一相同的暗綠色斑點(diǎn)；2.甘草取本品液體10ml，加甲醇50ml回流提取1小時(shí)，回收甲醇至干，加入30ml水使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材0.5g，同供試品方法操作得溶液0.5ml，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一用1％NaOH溶液噴霧的預(yù)制硅膠G薄層板上，以15∶1∶1∶2醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上顯一相同顏色的熒光斑點(diǎn)；3.地龍取本品10ml，加氯仿20ml，密塞，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至約1ml，作為供試品溶液。另取地龍藥材3g，同法制成藥材溶液；照薄層色譜法(附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩鐘溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9∶1苯-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。含量測(cè)定黃芩苷照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VID)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；47∶53∶0.2甲醇-水-磷酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm；理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2500；對(duì)照品溶液的制備精密稱取在60℃減壓干燥4小時(shí)的黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含64.40μg的溶液。供試品溶液的制備精密量取本品溶液1ml置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，置水浴中微熱，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀測(cè)定，外標(biāo)法計(jì)算，即得；本品每25ml液體含黃芩苷(C21H18O11)不得少于67.5mg。權(quán)利要求1.一種中藥組合物的制備方法，其特征在于該方法包括選用如下原料地龍100-500重量份黃芩苷1-10重量份甘草100-500重量份。2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于該方法包括選用如下原料地龍200-400重量份黃芩苷3-8重量份甘草200-400重量份。3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于該方法包括選用如下原料地龍300重量份黃芩苷6.5重量份甘草300重量份。4.如權(quán)利要求1-3所述的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟取預(yù)處理后地龍，加0.1mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液，室溫下混勻放置15-25小時(shí)后，15-25℃400-600rpm勻漿10-20分鐘，8000-12000rpm離心，取上清液置50-65℃中放置，8000-12000rpm離心，取上清液進(jìn)行超濾透析，濃縮液冷藏備用；甘草加水煎煮1-3次，每次1-3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10，加入乙醇使含醇量達(dá)60-70％，靜置10-14小時(shí)，濾過，回收乙醇，加入地龍?zhí)崛∫海瑪噭?，用氨水調(diào)pH值適宜，加入黃芩苷，加水適量，攪勻，冷藏，過夜，濾過，經(jīng)過常規(guī)工序直接或間接加入藥學(xué)上可接受的賦型劑制成臨床可接受的劑型，如片劑、膠囊、顆粒劑、滴丸、口服液、噴霧劑。5.一種中藥噴霧劑的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟地龍100-500重量份黃芩苷1-10重量份甘草100-500重量份；取預(yù)處理后地龍，加0.1mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液，室溫下混勻放置15-25小時(shí)后，15-25℃400-600rpm勻漿10-20分鐘，8000-12000rpm離心，取上清液置50-65℃中放置，8000-12000rpm離心，取上清液進(jìn)行超濾透析，濃縮液冷藏備用；甘草加水煎煮1-3次，每次1-3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.10，加入乙醇使含醇量達(dá)60-70％，靜置10-14小時(shí)，濾過，回收乙醇，加入地龍?zhí)崛∫?，攪勻，用氨水調(diào)pH值適宜，加入黃芩苷，加水適量，攪勻，冷藏，過夜，濾過，加0.2％苯甲酸鈉和0.6％蘋果香精，攪勻，濾過，加水制成1000體積份，灌裝，即得。全文摘要本發(fā)明公開了一種中藥組合物制劑制備方法，特別涉及用于抑制流感病毒、上呼吸道感染病毒、SARS病毒和細(xì)菌的中藥組合物制備方法。該方法為取預(yù)處理后地龍，加醋酸－醋酸鈉緩沖液，室溫下混勻放置，勻漿10－20分鐘，離心，取上清液置50－65℃中放置，離心，取上清液進(jìn)行超濾透析，濃縮液冷藏備用；甘草加水煎煮，合并煎液，濾過，濾液濃縮，加入乙醇，靜置10－14小時(shí)，濾過，回收乙醇，加入地龍?zhí)崛∫?，攪勻，用氨水調(diào)pH值適宜，加入黃芩苷，加水適量，攪勻，冷藏，過夜，濾過，經(jīng)過常規(guī)工序直接或間接加入藥學(xué)上可接受的賦型劑制成臨床可接受的劑型。該制備方法使得有效成份的充分溶出，組合物制劑具有很好功效。文檔編號(hào)A61K9/48GK1754555SQ20041008021公開日2006年4月5日申請(qǐng)日期2004年9月28日優(yōu)先權(quán)日2004年9月28日發(fā)明者牛欣,司銀楚,徐元景,李海燕,牛勃,陸漢文,顧立剛,王玥琦,蔡大勇,王宏濤,席時(shí)芳,賈旭,周莉,杜紅,葉明磊,趙紅,黃兵,文仁都申請(qǐng)人:北京中醫(yī)藥大學(xué)