專利名稱：用于預(yù)防或治療心血管、心肺、肺部或腎臟疾病的特來沙坦和阿托伐他汀的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于預(yù)防或治療心血管、心肺、肺部或腎臟疾病的方法，特別是對于已診斷有糖尿病或懷疑有前驅(qū)糖尿病的患者，用于預(yù)防糖尿病和前驅(qū)糖尿病，或治療具有正常血壓的患者的新陳代謝綜合癥和抗胰島素性。該方法包括對需要治療的患者共同施用有效量的血管緊張素II受體拮抗劑特米沙坦(Telmisartan)和HMG-CoA還原酶抑制劑阿托伐他汀(Atorvastatin)，或者是它們的多晶型物或鹽。此外，本發(fā)明還涉及含有特米沙坦和阿托伐他汀或它們的多晶型物或鹽的適合的藥物組合物，作為在這些疾病的預(yù)防或治療過程中同時、分開或相繼的應(yīng)用的復(fù)合制劑，以及還涉及特米沙坦和阿托伐他汀或它們的多晶型物或鹽，在制備用于預(yù)防或治療這些疾病的藥物組合物的組合應(yīng)用。
血管緊張素II(ANG II)在病理生理學(xué)上起重要作用，特別是作為對人類最有效的血壓增加制劑。已知，ANG II除了其增強(qiáng)血壓作用外還另具有促進(jìn)生長的作用，該作用會造成左心室供血不足、血管增厚、動脈粥樣硬化、腎機(jī)能衰竭和中風(fēng)。另一方面，舒緩激肽能起到擴(kuò)張血管和保護(hù)組織的作用。因此，ANG II-拮抗劑適于治療哺乳動物的高血壓和充血性心力衰竭。在EP-A-0502314、EP-A-0253310、EP-A-0323841、EP-A-0324377、US-A-4355040和US-A-4880804中記載有ANG II拮抗劑的實例。ANG II-拮抗劑的例子是坎特沙坦(Candesartan)、依普沙坦(Eprosartan)、伊貝沙坦(Irbesartan)、氯沙坦(Losartan)、奧米沙坦(Olmesanan)、特索沙坦(Tasosartan)、纈沙坦(ValSartan)或特米沙坦。ANG II-拮抗劑的抗高血壓和保護(hù)腎臟的作用記載于，例如以下公開文獻(xiàn)中·W.Wienen等人在高血壓性糖尿病(D)的大鼠長期治療之后，特米沙坦的抗高血壓和腎臟保護(hù)效果，2nd.Int，Symposium On Angiotensin IIAntagonism，F(xiàn)ebmaryl5-18，1999，The Queen Elizabeth II Conference Center，London，UK，Book Of Abstracts，Abstract No.50；·J.Wagner等人在有易于中風(fēng)菌株的自發(fā)性高血壓大鼠中，AT1受體阻斷血壓和腎素血管緊張素系統(tǒng)的效果，Clin.Exp.Hypertens.，Bd.20(1998)，S.205-221；和·M.Bohm等人在TGR(mREN2)27中阻斷血管緊張素II受體腎素-血管緊張素-系統(tǒng)基因表達(dá)的影響和心血管功能，J.Hypertens.，Bd.13(8)1995，S.891-899。
在首次臨床試驗中已證實的ANG II-拮抗劑還有保護(hù)腎臟的作用記載在，例如，以下公開文獻(xiàn)中·S.Andersen等人在患有糖尿病性腎病的I型糖尿病患者中，阻斷血管緊張素II受體的腎臟保護(hù)效果，Kidney Int.Bd.57(2)(2000)，S.601-606；·L.M.Ruilope在糖尿病中阻斷腎臟保護(hù)作用和腎素-血管緊張素系統(tǒng)，Am.J.Hypertens.，Bd.10(12PT2)Suppl.(1997)，S.325-331；·J.F.E.Mann纈沙坦和腎臟現(xiàn)在和未來，J.Cardiovasc.Pharmacol.，Bd.33，Suppl.1(1999)，S.37-40。
此外，ANG II-拮抗劑對于內(nèi)皮機(jī)能紊亂的作用記載在，例如，以下公開文獻(xiàn)中·E.L.Schiffrin等人在人類原發(fā)性高血壓中，通過血管緊張素受體拮抗劑氯沙坦而矯正動脈結(jié)構(gòu)和內(nèi)皮的機(jī)能障礙，Circulation，Bd.101(14)(2000)，S.1653-1659；·R.M.Touyz等人血管緊張素II在得自人類動脈的血管平滑肌細(xì)胞中刺激DNA和蛋白質(zhì)合成細(xì)胞外信號—調(diào)節(jié)激酶的作用，J.Hyprtens.，Bd.17(7)，S.907-916。
·E.L.Schiffrin在高血壓患者中的血管重建和內(nèi)皮功能抗高血壓藥治療的效果，Scand.Cardiovasc.J.，Bd.32，Suppl.47(1998)S.15-21；以及·Prasad急性和慢性血管緊張素-1受體拮抗作用在動脈粥樣硬化中逆轉(zhuǎn)內(nèi)皮的機(jī)能障礙，Circulation，Bd.101(2000)，S2349ff.。
此外還已知，ANG II-拮抗劑可選擇性地阻斷AT1-受體，同時不影響在抗增長作用和組織再生作用中發(fā)揮作用的AT2-受體。
EP-A-1013273還記載了AT1-受體-拮抗劑或AT2-受體-調(diào)節(jié)劑，對治療疾病的用途，該疾病隨著在皮下區(qū)域的AT1-受體或在上皮中AT2-受體的增長而出現(xiàn)，特別是用于治療各種肺病。
另一方面已證實，高血壓經(jīng)常同時伴隨著高血脂。這兩種現(xiàn)象被認(rèn)為是心血管疾病發(fā)展過程中的最主要的危險因素，其常常會導(dǎo)致不利的心血管事件。
高血膽固醇濃度和高血脂濃度例如參與初期的動脈硬化動脈粥樣硬化，它是一種在動脈，包括冠狀動脈、頸動脈和外周動脈的內(nèi)膜上不規(guī)則地分散脂質(zhì)沉積為特征的病征。
這種不均勻脂質(zhì)分布是冠心病，心血管疾病的特點，其危害和發(fā)病也會受到糖尿病，患者的性別，抽煙和作為高血壓并發(fā)癥的左心室肥厚而有影響(Wilson等，Am.J.Cardiol.，Bd.59(14)(1987)，S.91G-94G)。
II型糖尿病是兩種病理生理現(xiàn)象的體現(xiàn)，即胰腺β細(xì)胞的胰島素分泌的減少和目標(biāo)器官肝、骨骼肌肉和脂肪組織的抗胰島素性。通常會出現(xiàn)兩種要素的復(fù)雜的病變。以下疾病被診斷為空腹-高血糖癥，即在經(jīng)歷10-12小時的禁食之后，血糖濃度高于每dl血漿125葡萄糖的臨界值。通過使用噻唑烷二酮(Glitazone)類化合物可有目的地治療明顯的II型糖尿病。這些化合物能改善對循環(huán)的胰島素的利用，并因而使得血糖值下降(胰島素敏化劑)。同時，通過反饋機(jī)理而降低升高的胰島素濃度并因此而減輕胰腺的負(fù)擔(dān)。胰島素敏化劑如曲格列酮(Troglitazone)、羅格列酮(Rosiglitazone)或吡格列酮(Pioglitazone)通過結(jié)合特定的核受體，即所謂的PPAR-γ(過氧化物酶體增生劑活化受體)而起到這些作用。
WO95/06410公開了血管緊張素II受體拮抗劑用于治療慢性炎癥，包括全身性自動免疫疾病的用途。糖尿病是多種全身性自動免疫疾病中的一種。1型糖尿病就屬于這種自動免疫疾病，該病主要是30歲以下的成年人患有，其中，在相應(yīng)的遺傳因素下，在不同因素的影響下，導(dǎo)致隨后造成B-細(xì)胞病變的胰腺炎，使胰腺只能產(chǎn)生少量或不產(chǎn)生胰島素。II型糖尿病則不是自身免疫疾病。
因為從診斷角度看，例如每兩個II型糖尿病患者中就會有一例冠心病，它是在復(fù)雜的代謝失調(diào)中，糖尿病增多的原因，可通過一系列的危險因素表現(xiàn)，如紊亂的抗葡糖性、升高的空腹血糖值、抗胰島素性、高血壓、脂質(zhì)異?；蜍|干肥胖癥。具有高甘油三酸酯血癥和低HDL-膽固醇的患者中，抗胰島素的發(fā)病率特別突出。可以提及的有前驅(qū)II型糖尿病，代謝綜合癥，綜合癥X或抗胰島素綜合癥。在第一個階段，目標(biāo)器官的較低的胰島素反應(yīng)導(dǎo)致胰腺的胰島素分泌量增加，從而將血糖濃度維持在正常范圍內(nèi)。多年后，過高或是升高的胰島素產(chǎn)生使由于胰腺的β-細(xì)胞而造成胰島素的分泌量不再提高。因此也就開始紊亂的抗葡糖性階段。機(jī)體不再能夠足夠快地達(dá)到葡萄糖峰值。最后，空腹血糖值就會保持在高水平并表現(xiàn)為糖尿病。
心絞痛是一種因胸部產(chǎn)生強(qiáng)烈收縮性疼痛的病癥，且這種疼痛常常是從心前區(qū)輻射到左肩內(nèi)并向下到達(dá)左臂，通常通過β-阻斷劑、硝酸酯或鈣通道阻斷劑與一種降血脂劑的組合治療來治療這種病癥。一般而言，心絞痛因心臟局部缺血引起的且通常是由于冠狀動脈疾病而引起的。在通過外科手術(shù)治療心絞痛患者常常會具有并發(fā)癥，如再狹窄，這種并發(fā)癥非常明顯地表現(xiàn)出來，可表現(xiàn)為在由于血管成形術(shù)引起的創(chuàng)傷上出現(xiàn)短時期的增生反應(yīng)，或是也可表現(xiàn)在移植血管和血管成形術(shù)片段的動脈硬化過程的長期進(jìn)行。一些用于降低血脂和膽固醇的治療方案都是基于抑制3-羥基-3-甲基戊二?；?輔酶A-還原酶(HMG-CoA-還原酶)的活性，該酶能催化使3-羥基-3-甲基戊二酰-輔酶A轉(zhuǎn)化為甲羥戊酸酯，即生物合成膽固醇-代謝途徑的早期階段。已知的HMG-CoA-還原酶的抑制劑是，例如，那些衍生自真菌代謝物且其所采用的名稱以“他汀(statin)”結(jié)尾的化合物，諸如帕伐它汀(Pravastatin)、洛伐他汀(Lovastatin)、氟伐他汀(Fluvastatin)、辛伐他汀(Simvastatin)或阿托伐他汀。
已知，阿托伐他汀是一種3-羥基-3-甲基戊二?；?輔酶A-還原酶(HMG-CoA-還原酶)的強(qiáng)效抑制劑，并且能作為高度肝臟選擇性的膽固醇-生物合成的抑制劑，其作用是通過較低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)的降低而消失。該作用是基于治療復(fù)合型高血脂，一種臨床上常見的導(dǎo)致動脈粥樣硬化的病變時的這種分子吸引活性并因此也抑制動脈硬化的發(fā)展。
試驗結(jié)果還表明，LDL-C-濃度的降低起到了對冠心病的保護(hù)作用(參見，例如“Scandinavian Simvastatin Survival Study”或4S-Studie，發(fā)表于TheLancet，Bd.344(1994)，S.1383-1389，或論文“Prevention of coronary heart diseasewith prevastatin in men with hypercholesterolemia”，Sheperd等發(fā)表于The NewEngland Journal of Medicine，Bd.333(1995)，S.1301-1307)。
為了確定Statin具有防止非胰島素依賴性糖尿病患者出現(xiàn)心衰，中風(fēng)和冠心病的防護(hù)能力，還進(jìn)行了其它研究；“Collavorative Atorvastatin DiabetesStudy”或CARDS-研究“Atorvastatin Versus Revascularisation Treatment”，AVERT-研究和“Angio-Scandinavian Cardiac Outcomes trial”或ASCOT-研究。
如上所述，由于高血壓常常會伴隨著高血脂或II型糖尿病癥狀一起出現(xiàn)，并且也因為這些現(xiàn)象是出現(xiàn)那些常常能導(dǎo)致不利的心血管病變的心血管疾病發(fā)展的主要危險因素，所以對患者有益的是采取能預(yù)防或治療這些癥狀的單一治療方法。
此外，也比較有利的是，組合治療也能改善預(yù)防或治療那些確定ANGII-拮抗劑能對其起作用的心肺、肺部或腎臟疾病。
本發(fā)明的目的在于提供一種藥劑，其適于治療高血壓也適于治療高血脂，并同時還能用于治療表現(xiàn)明顯的II型糖尿病和用于治療前驅(qū)糖尿病的復(fù)合型代謝紊亂的初期癥狀，并因此也能預(yù)防II型糖尿病。
已提出一些組合治療方法和相應(yīng)的含有HMG-CoA-還原酶抑制劑和ANG II-拮抗劑的組合物。
·WO95/26188記載了一種治療動脈粥樣硬化和降低膽固醇的方法，其中使用了HMG-CoA-還原酶抑制劑和ANG II-拮抗劑?？商峒暗淖鳛榭墒褂玫腍MG-CoA-還原酶抑制劑用的是帕伐它汀、辛伐他汀和洛伐他汀?？商峒暗目墒褂玫腁NG II-拮抗劑是氯沙坦。
·WO97/37688中記載了組合使用HMG-CoA-還原酶抑制劑和ANG II-拮抗劑治療多種癥狀，例如心絞痛和動脈粥樣硬化。可提及可用作HMG-CoA-還原酶抑制劑的是帕伐它汀、辛伐他汀、洛伐他汀和氟伐他汀(Fluvastatin)。
·WO99/11260記載了組合使用一種特定的HMG-CoA-還原酶抑制劑和ANG II-拮抗劑以降低血壓和血脂濃度以及用于治療哺乳動物的心絞痛和動脈硬化。所謂特定的HMG-CoA-還原酶抑制劑指的是阿托伐他汀。可提及的優(yōu)選用作ANG II-拮抗劑的是氯沙坦，依貝沙坦和纈沙坦。其他還可提及的ANG II-拮抗劑是坎地沙坦和依普沙坦。
·WO00/45818記載了組合使用HMG-CoA-還原酶抑制劑和ANG II-拮抗劑來改善糖尿病性神經(jīng)病，特別用來改善罹患糖尿病患者的神經(jīng)傳導(dǎo)速度和神經(jīng)供血狀況?？梢蕴峒暗倪@些組合的實例是帕瓦它汀，辛伐他汀，斯伐他汀(Cerivastatin)，氟伐他汀，阿托伐他汀和Statin(E)與ANG II-拮抗劑的氯沙坦，依貝沙坦，纈沙坦和坎地沙坦的組合，其中優(yōu)選是與坎地沙坦的結(jié)合。
·WO01/15674記載了組合使用腎素-血管緊張素-系統(tǒng)的抑制劑與其他的抗高血壓藥、降膽固醇制劑，利尿劑或阿司匹林來抑制心血管疾病事件，如中風(fēng)，充血性心力衰竭，心血管病致死亡，心肌梗塞，絞痛加劇，心跳停止，血管再形成過程，糖尿病和糖尿病并發(fā)癥。可提及的這些有效組合的實例是血管緊張素-轉(zhuǎn)化酶(ACE)的抑制劑，即采用的名稱以“-pril”結(jié)尾的化合物，如卡托普利、咪達(dá)普利(Imidapril)、雷米普利(Ramipril)和類似物，與降低膽固醇濃度的洛伐他汀，帕伐它汀，辛伐他汀或氟伐他汀的組合。
本發(fā)明驚奇地發(fā)現(xiàn)，血管緊張素II受體拮抗劑特米沙坦及其鹽除了已知的降血壓作用外，還能在細(xì)胞系統(tǒng)中基因表達(dá)增強(qiáng)，已知其轉(zhuǎn)錄過程是通過PPARγ受體調(diào)節(jié)。為了可比較的條件以保證這種效果，在本發(fā)明范疇內(nèi)可借助穩(wěn)定轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系(參見實施例2)而觀察且定量化。其中所涉及一種是具有兩個基因構(gòu)件的轉(zhuǎn)化結(jié)果的CHO-細(xì)胞。這些結(jié)構(gòu)中的第一種構(gòu)件，在具有酵母Gal4連結(jié)位點(參見基因庫序列AF058756)五次重復(fù)的合成啟動子控制的條件下，對來自Photinus Pyralis(de Wet JR，Mol Cell Biol(1987)7725)的熒光素酶基因進(jìn)行編碼。第二種結(jié)構(gòu)對由人體PPARγ2轉(zhuǎn)錄因子(參見基因庫序列U79012)的配位體連接區(qū)以及酵母GAL4 DNA連接區(qū)(氨基酸1-147；Sadowski I，Nucleic Acid Res(1989)177539)組成的融合蛋白質(zhì)(Fusionprotein)進(jìn)行編碼。
PPARγ控制的基因的轉(zhuǎn)錄的誘導(dǎo)是由已知用作抗糖尿病的噻唑烷二酮(例如羅格列酮(Rosiglitazone)進(jìn)行的并且可通過其結(jié)合在PPARγ受體上及其活化而起作用的。在這里所用的測試系統(tǒng)可定量作為轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系的誘導(dǎo)的熒光素酶的活性。特米沙坦，對熒光素酶活性的這種誘導(dǎo)作用，不出所料同樣是通過活性物質(zhì)結(jié)合在受體PPARγ上而進(jìn)行的。在各種測試系統(tǒng)中都不可能證實特米沙坦能結(jié)合到在PPARγ受體上。因此推測，當(dāng)高親和性的合成PPARγ-配位體不存在時，由血管緊張素II受體拮抗劑特米沙坦引起PPARγ的輔助因子蛋白質(zhì)(Cofaktorprotein)親和力的提高，也造成輔助因子蛋白質(zhì)的補(bǔ)充(Rekrutierung)。于是，這引起一種通過輔助因子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄的活化，該基因可通過PPARγ受體來調(diào)節(jié)。因為這基因的誘導(dǎo)承擔(dān)著噻唑烷二酮的抗糖尿病作用，所以由此得出，相同基因的誘導(dǎo)可通過特米沙坦而發(fā)揮可相對比的抗糖尿病作用。因此，這些活性成分不僅適合于治療高血壓，而且還適于治療和預(yù)防II型糖尿病。其中包括治療和預(yù)防新陳代謝綜合癥，X綜合癥或抗胰島素綜合癥。
特米沙坦及其鹽的這種新的治療作用意味著，它們可用于制備一種治療人體或哺乳動物的藥劑，用于預(yù)防或治療心血管、心肺、肺部或腎臟疾病，其中當(dāng)診斷為II型糖尿病或懷疑為前驅(qū)糖尿病，或者是診斷為抗胰島素綜合癥的代謝紊亂時。特殊意義是，治療其表現(xiàn)為預(yù)防或治療高血壓并發(fā)高血脂或動脈粥樣硬化的人，或者治療哮喘、支氣管炎或間質(zhì)性肺病。它們還能適用于治療和預(yù)防II型糖尿病和前驅(qū)II型糖尿病。其中包括治療和預(yù)防新陳代謝綜合癥、X綜合癥或抗胰島素癥。具有特別意義的是，治療人其中預(yù)防或治療高血壓并發(fā)高血脂或動脈粥樣硬化，或者治療哮喘、支氣管炎或間質(zhì)性肺病。
II型糖尿病表現(xiàn)為空腹血糖值高于每dl血漿125mg葡萄糖，而血液中葡萄糖值的確定是醫(yī)學(xué)常規(guī)分析中的標(biāo)準(zhǔn)方法。在進(jìn)行葡糖耐量試驗時，在空腹服用75g葡萄糖后2小時內(nèi)，糖尿病患者的每dl血漿的血糖值就會超過200mg葡萄糖。在葡糖耐量測試中，受試者在經(jīng)過10-12個小時的禁食期后口服75g葡萄糖，并且直接在服用前以及在服用葡萄糖后1或2小時直接測定血糖值。對于健康者，在服用前血糖值是每dl血漿60至110mg，服用后一小時為每dl低于200mg，2小時后為低于每dl140mg。如果2小時后該值在140至200mg之間，則也可認(rèn)為有紊亂的葡糖耐受性。
前驅(qū)糖尿病存在的最明顯標(biāo)志是由抗胰島素性得到證實。某人為了維持葡萄糖體內(nèi)平衡需要相對于其他人2-3倍量的胰島素，而不具有直接的病理學(xué)現(xiàn)象則該人可能是前驅(qū)糖尿病。最有說服力的、能用以確定抗胰島素的方法是血糖正常-血胰島素過多的(euglykmisch-hyperinsulinmische)Clamp測試。在組合的胰島素-葡萄糖輸注技術(shù)范疇內(nèi)測定胰島素對葡萄糖的比例。如葡萄糖指數(shù)低于受試背景總體25個百分點則有抗胰島素性(WTO定義)。比Clamp試驗成本更低的是所謂的極小模型，在該模型中靜脈內(nèi)葡糖耐量測試過程中在固定的時間間隔測定血液中的胰島素和葡萄糖濃度，并從中計算出抗胰島素性。另一種確定方法是數(shù)學(xué)HOMA一模型。抗胰島素是通過空腹血漿葡萄糖和空腹胰島素濃度計算而得的。在該方法中無法區(qū)分肝的抗胰島素性和周邊的抗胰島素性。這些方法很少適用于日常實踐中的抗胰島素性的評價，在日常臨床實踐中，為了評價抗胰島素性通常引入其它一些參數(shù)。為此優(yōu)選引入患者的甘油三酸酯濃度，因為甘油三酸酯的濃度顯著地與抗胰島素性有關(guān)聯(lián)。
當(dāng)空腹血糖值超過了每dl血漿最大的正常值110mg葡萄糖，但是不超過與糖尿病相關(guān)的每dl血漿極限值125mg葡萄糖，則懷疑存在前驅(qū)糖尿病。前驅(qū)糖尿病的另一標(biāo)志是紊亂的葡糖耐受性，即在葡糖耐量試驗中，空腹攝入75g葡萄糖后2小時血糖值為每dl血漿140-200mg葡萄糖。
如果甘油三酸酯的血液值超過了150mg/dl，則也可能存在著前驅(qū)糖尿病。若HDL-膽固醇的血液值較低則更加強(qiáng)這種懷疑。對于婦女每dl血漿是低于40mg，對于男人則每dl血漿是低于50mg，這被認(rèn)為是低的。血液中甘油三酸酯和HDL-膽固醇的測定同樣也屬于醫(yī)學(xué)分析中的標(biāo)準(zhǔn)方法，并且記載在如Thomas L(Hrsg.)“Labor und Diagnose”，TH-Books出版公司mbH，法蘭克福/Main，2000。當(dāng)空腹血糖值同時超過了每dl血漿110mg葡萄糖，則可進(jìn)一步加強(qiáng)前驅(qū)糖尿病的懷疑。如果所測得的血液值在極限值范圍內(nèi)，則可以引入腰圍對臀圍之比作為輔助的決定性參數(shù)。該比值對于婦女若超過0.8或是對于男人若超過1，則說明需要治療。
如果也必須治療高血壓的話，則特米沙坦是特別適于治療糖尿病或可能的前驅(qū)糖尿病的。也就是指收縮壓高于140mmHg且舒張壓高于90mmHg時。若是確證某患者已患有明顯糖尿病，則目前推薦要將收縮壓降低至低于130mmHg，且舒張壓低于80mmHg。為了要達(dá)到這些目標(biāo)值，就要根據(jù)情況采用血管緊張素II受體拮抗劑與利尿劑或鈣血管緊張素的組合。術(shù)語“利尿劑”包括有噻嗪或噻嗪類似物如氫氯噻嗪(HCTZ)、克氯帕米(Clopamide)、利多速尿(Xipamide)或氯噻酮(Chlorthalidone)，醛甾酮-拮抗劑如螺內(nèi)酯(Spironolacton)或Eperenone以及其它一些適用于治療高血壓的利尿劑，如利尿磺胺(Flurosemide)和苯吡磺苯酸(Piretanide)，和它們與氨氯吡咪(Amiloride)和氨苯喋啶(Triamteren)的組合物。
本發(fā)明表示，對于那些因高血壓而需要治療的患者來說，當(dāng)需要預(yù)防前驅(qū)糖尿病的發(fā)展或是治療明顯的糖尿病時，血管緊張素II受體拮抗劑特米沙坦總是非常適用的。
可鑒別確認(rèn)的病因只是占到高血壓各種情況中的百分之十(繼發(fā)性高血壓(sekundare Hypertonie))，如腎臟疾病。通過治療和除去該病因，通常也就能消除該繼發(fā)性高血壓。但是涉及到的原發(fā)性高血壓所有情況中的幾乎90％的，它們的確切病因還不知曉，因此也就不可能直接治愈。高血壓的消極作用可以通過改變生活習(xí)慣和正確的治療而得以減弱。不同危險因素的共同作用或是各個危險因素的共同出現(xiàn)似乎就導(dǎo)致了高血壓。首先應(yīng)密切觀察高血壓與脂肪和糖代謝紊亂的共同出現(xiàn)。這種紊亂首先常常是不可察覺的，但是可根據(jù)甘油三酸酯和葡萄糖血液值的升高以及HDL-膽固醇的血液值下降而辨別。在后一段可看到緩慢的肥胖現(xiàn)象。這種紊亂的原因在于抗胰島素性的增強(qiáng)所引起。胰島素的作用越少，脂肪和糖類代謝也就越雜亂。所有這些紊亂情況的組合最后就提高了罹患糖尿病的可能性并且可能提前患上或死于心臟病或血管疾病。
因為原發(fā)性或自發(fā)性高血壓是一種多因素導(dǎo)致的疾病，所以抗胰島素性或胰島素過多不太可能是高血壓的唯一原因。但是一系列觀察表明，胰島素代謝缺陷會導(dǎo)致血壓升高并因此易于造成高血壓。在本文中稱為高血壓性抗胰島素性。在正常體重的高血壓患者和正常血壓的第一順序親屬中有50％已可證實到存在有抗胰島素性的情況。與瘦長的高血壓患者相比在肥胖的患者中，不僅發(fā)現(xiàn)有較高的抗胰島素性現(xiàn)象，而且高血壓和胰島素過多之間有著密切的相關(guān)度。
由此可以估計，世界上營養(yǎng)過度的約三分之一的成年人面臨著高血壓與脂肪和糖類代謝紊亂的共同作用，并且這個數(shù)字還在不斷增加。因此需要一種藥劑，其能夠在盡可能早的時間段內(nèi)延緩或停止所述的代謝紊亂的發(fā)展，并同時避免高血壓對健康的損害作用。
本發(fā)明現(xiàn)公開一種藥劑，其不僅能用于同時治療高血壓和高血脂，而且還能用于治療確認(rèn)的II型糖尿病或前驅(qū)糖尿病的復(fù)雜的代謝紊亂的最初癥狀。新型的活性成分組合物特別適于治療和預(yù)防上述的高血壓性抗胰島素癥狀，所述癥狀是指在血液循環(huán)中循環(huán)的胰島素沒有充分利用的情況，并由此引起血壓的升高。因此，本發(fā)明也包括由于在治療高血壓和高血脂的病人中預(yù)防患者的糖尿病的方法。因此，如果當(dāng)出現(xiàn)了上述前驅(qū)糖尿病癥狀之一時，即刻使用特米沙坦和阿托伐他汀的組合物來控制血壓、高血脂或高血壓性抗胰島素，由此延緩或避免明顯的出現(xiàn)II型糖尿病。
特米沙坦及其合適的鹽表明·不在體外結(jié)合在人體PPARγ受體的配位體結(jié)合區(qū)，·當(dāng)它們被添加到穩(wěn)定轉(zhuǎn)化的PPARγ-受體細(xì)胞的培養(yǎng)基中時，會誘導(dǎo)熒光素酶活性，其a)表達(dá)一種由人體PPARγ轉(zhuǎn)錄因子的配位體結(jié)合區(qū)以及酵母GAL4DNA結(jié)合區(qū)構(gòu)成的融合蛋白質(zhì)，和b)含有在五次重復(fù)的酵母Gal4-結(jié)合位點控制之下的熒光素酶基因。
在實施例2中記載這種PPARγ-受體細(xì)胞系的制備。
如果在α篩選(AlphaScreen)(Ullmann EF等，Proc Natl Acad Sci USA(1994)915426-5430)中不能得到證實，則在體外不存在結(jié)合到人體PPARγ2受體的配位體結(jié)合區(qū)。除了α篩選也可進(jìn)行SPA-化驗(Mukherjee R等，J SteroidBiochem Mol Biol(2002)81217-225)或NMR-測試(Johnson BA等，J MolBiol(2000)298187-194)。通常這些方法中沒有一個能夠證實在受體的結(jié)合。
組合使用血管緊張素II受體阻斷劑與一種或多種其它治療有效的藥物是有意義或必須的，特米沙坦就是一種優(yōu)選的血管緊張素II受體阻斷劑，因為它以單獨的有效物質(zhì)具有降低血壓和抗糖尿病的組合作用，或者有助于預(yù)防糖尿病。出于這個理由，由特米沙坦與HMG-Co A還原酶抑制劑阿托伐他汀配制的有效物質(zhì)組合物，即為一種在治療心血管、心肺、肺部或腎臟疾病方面有重大的改進(jìn)，特別是當(dāng)需要同時治療高血脂、前驅(qū)糖尿病或明顯的II型糖尿病、骨質(zhì)疏松或早期老年癡呆以及需要預(yù)防糖尿病時。
可以觀察到，通過共同服用有效量的特米沙坦和有效量的阿托伐他汀，或是它們的多晶型物或鹽，在對需要治療的患者進(jìn)行預(yù)防或治療心血管、心肺、肺部或腎臟疾病方面可取得令人驚訝的優(yōu)點。與僅服用ANG II-拮抗劑或HMG-CoA-還原酶抑制劑相比，這不依賴于活性成分特米沙坦的已知的降血壓活性，也不依賴于活性成分阿托伐他汀的抗高血脂活性。這樣，就可例如控制基質(zhì)-金屬蛋白酶MMP-9的表達(dá)，而這種表達(dá)在呼吸道的慢性發(fā)炎過程中或是在II型糖尿病上會強(qiáng)烈地體現(xiàn)。也可抵制促進(jìn)炎癥的細(xì)胞素CD40L的升高的血漿值。CD40L的血漿值的提高是已知的心血管疾病的危險因素。
此外還觀察到，所述組合物能改善預(yù)防或治療內(nèi)皮功能，并且對于既要控制血壓又要控制血脂濃度的病人可起到保護(hù)器官、組織和血管的作用。因此可改善動脈的彈性，并能在皮膚內(nèi)增加產(chǎn)生NO，NO是內(nèi)皮功能的基因標(biāo)記。
另外還發(fā)現(xiàn)，該組合物能特別有效地預(yù)防或治療以下癥狀適應(yīng)癥(Indikation)(A)，通過以下措施可積極影響該適應(yīng)癥，即抑制由AT1-受體引起的作用并維持由AT2-受體所引起的血管緊張素II(ANGII)的作用，并抑制HMG-CoA還原酶的作用，因而由此也就能強(qiáng)化由血管舒緩激肽所引起的作用并可以得到抗高血脂作用；或適應(yīng)癥(B)，且該癥狀還伴隨出現(xiàn)皮下區(qū)域內(nèi)AT1-受體的增加或是上皮細(xì)胞內(nèi)AT2-受體的增加。
合適的適應(yīng)癥(A)選自如下這些適應(yīng)癥治療高血壓并發(fā)高血脂；減少出現(xiàn)中風(fēng)、急性心肌梗塞或心血管疾病死亡，特別是對于那些有著較高缺陷性心血管病或中風(fēng)危險的患者；發(fā)揮腎臟保護(hù)作用，例如對于腎功能不全或糖尿病性腎病；防止左心室肥大，血管增厚，例如防止血管手術(shù)后血管壁的增厚，改善心臟移植手術(shù)之后的存活可能性，防止血管成形術(shù)后出現(xiàn)動脈再狹窄，預(yù)防或治療動脈硬化的病癥，如動脈粥樣硬化癥，防止出現(xiàn)冠狀動脈疾病，防止動脈硬化進(jìn)展和預(yù)防糖尿病性血管??；降低膽固醇，降低血纖維蛋白原和血漿粘度，抑制平滑肌細(xì)胞增生，減小巨噬細(xì)胞氧化LDL的能力，保護(hù)心肌細(xì)胞不受缺氧損傷并降低血纖維蛋白溶酶原激活劑-抑制劑-1(PAI-1)；預(yù)防或治療缺血性外周循環(huán)系統(tǒng)紊亂和心肌缺血(心絞痛)；和抑制心肌梗塞后心臟機(jī)能不全的發(fā)展。
合適的適應(yīng)癥(B)選自如下適應(yīng)癥阻塞性呼吸道疾病，慢性阻塞性肺部疾病，如支氣管炎或慢性支氣管炎，肺氣腫，例如基于哮喘的，囊腫性纖維化，間質(zhì)性肺病，肺癌，肺部血管疾病和提高呼吸器呼吸時的氣流的阻力；成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)，減小肺癌和乳腺癌時上皮細(xì)胞的增生能力，治療敗血癥，肺部損傷，如肺炎胃內(nèi)物的抽吸，胸腔損傷，休克，燒傷，脂栓塞，心肺繞道術(shù)，O2-中毒，出血性胰腺炎，間質(zhì)性和支氣管肺泡性炎癥，特別是當(dāng)其伴隨基質(zhì)-金屬蛋白酶如MMP-9升高的表達(dá)而出現(xiàn)時，上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞的增生，膠原質(zhì)富集和纖維化。
因此，本發(fā)明提供一種用于預(yù)防或治療高血壓和高血脂的方法，且該方法首先針對已確診為糖尿病或存在前驅(qū)糖尿病懷疑的哺乳動物，并且該方法包括共同服用一種有效量的HMG-CoA-還原酶-抑制劑阿托伐他汀或它們的多晶型物或鹽，與一種有效量的ANGII-拮抗劑特米沙坦或它們的多晶型物或鹽。
另外，本發(fā)明還涉及組合使用特米沙坦和阿托伐他汀，或者組合使用這些活性成分的多晶型物或鹽用于制備預(yù)防或治療高血壓結(jié)合高血脂，特別是當(dāng)確診為糖尿病或存在懷疑前驅(qū)糖尿病時用的藥物組合物。
因此，本發(fā)明的有利作用主要都涉及對器官、組織和血管的組合治療的防護(hù)作用，以及涉及糖尿病的預(yù)防作用。
前述不可預(yù)料的優(yōu)點可歸因于通過阿托伐他汀有效地阻斷因AT1-受體所傳遞的ANGII的作用，由AT2-受體所傳遞的通過特殊的ANGII-拮抗劑而不會受到影響的ANGII的作用和由舒緩激肽所傳遞的作用而共同增強(qiáng)，類似PPARγ的轉(zhuǎn)錄活化作用而得到了抗高血脂的作用。
例如觀察到，共同服用特定的ANGII-拮抗劑特米沙坦和特定的HMG-CoA-還原酶抑制劑阿托伐他汀，或者是共同服用這些活性成分的多晶型物或鹽，與僅只是服用這些活性成分中的一種相比，前者更能起到顯著的防止心血管疾病死亡和抑制總死亡率的作用，特別是有關(guān)出現(xiàn)中風(fēng)和急性心肌梗塞的方面。
因此，優(yōu)選的本發(fā)明方法在于，要減少在需要治療的人群或非人哺乳動物中出現(xiàn)中風(fēng)和急性心肌梗塞，特別是對那些確證患II型糖尿病或懷疑有前驅(qū)糖尿病或具有高危險缺陷性的心血管病或中風(fēng)的人群，對其共同給藥特米沙坦和阿托伐他汀或是將這些活性成分的多晶型物或鹽一起服用。
此外還觀察到，組合治療和相應(yīng)的特別含有一定量HGM-CoA-還原酶抑制劑阿托伐他汀和一定量ANGII-拮抗劑特米沙坦或這些活性成分的多晶型物或鹽的組合物，在調(diào)節(jié)哺乳動物的血壓和調(diào)節(jié)血脂方面起到較高的活性。可以預(yù)料，通過這些特定組合而達(dá)到的協(xié)同作用是令人驚訝地超過相應(yīng)的傳統(tǒng)組合方法所起的作用。
所謂用于調(diào)節(jié)血壓和血脂的協(xié)同組合物應(yīng)理解為，該組合物中含有一定量的阿托伐他汀和一定量的特米沙坦或是這些活性成分的多晶型物或鹽，其中單個活性成分的量是不足以達(dá)到治療效果，并且一定量的治療藥劑的組合效用大于以該量的單個藥劑所能達(dá)到的治療效果的總和。
本發(fā)明的再一項內(nèi)容在于含有特米沙坦或其鹽中的一種以及阿托伐他汀的藥物組合物，以及這種藥物組合物的制備方法。該組合物施用于人體或非人哺乳動物體而預(yù)防或治療前述的疾病或適應(yīng)癥，其中的組合物含有特米沙坦和阿托伐他汀且適當(dāng)時還含有藥物學(xué)相容的稀釋劑和/或載體物質(zhì)，更確切地說是在預(yù)防或治療疾病或適應(yīng)癥的過程中能同時、分開或相繼施用的組合劑型進(jìn)行給藥。
通常，這些活性成分組合物中可混入一種或多種配方助劑，如甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、碳酸鈣、磷酸鈣、乳糖、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉鹽(纖維素羧甲基醚鈉鹽，交聯(lián)的)、交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮、淀粉羥乙酸鈉、羥丙基纖維素(低取代的)、玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、乙烯吡咯烷酮和其它乙烯衍生物的共聚物(共聚乙烯吡咯烷酮)、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、微晶纖維素或淀粉、硬脂酸鎂、硬脂基富馬酸鈉、滑石、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素、醋酸纖維素鄰苯二甲酸酯、聚乙酸乙烯酯、水、水/乙醇、水/甘油、水/山梨醇、水/聚乙二醇、丙二醇、十六烷基硬脂醇、羧甲基纖維素或含脂肪的物質(zhì)如硬脂或其合適的混合物，并且可加工成蓋倫式制劑如片劑、糖衣丸劑、膠囊、粉劑、懸浮液或栓劑。
也可以，例如，通過混合活性成分與一種或多種助劑并接著壓制成型而制得片劑。片劑也可以由多層構(gòu)成。助劑的例子是·惰性稀釋劑如甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、碳酸鈣、磷酸鈣和乳糖；·崩解劑如交聯(lián)羧甲基纖維素鈉鹽(纖維素羧甲基醚鈉鹽，交聯(lián)的)，交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮，淀粉羥乙酸鈉，羥丙基纖維素(低取代的)和玉米淀粉；·粘結(jié)劑如聚乙烯吡咯烷酮，乙烯吡咯烷酮和其它乙烯衍生物的共聚物(共聚乙烯吡咯烷酮)，羥丙基纖維素，羥丙基甲基纖維素，微晶纖維素或淀粉；·潤滑劑如硬脂酸鎂，硬脂基富馬酸鈉和滑石；·用于儲存效果的試劑如羥丙基甲基纖維素，羧甲基纖維素，乙酸鄰苯二甲酸纖維素和聚乙酸乙烯酯；和·藥物學(xué)相容的顏料如有色的氧化鐵。
在本發(fā)明的各個方面，涉及的特定的ANG II-拮抗劑特米沙坦，是{4’-[2-正丙基-4-甲基-6-(1-甲基苯并咪唑-2-基)-苯并咪唑-1-基甲基]-聯(lián)苯基-2-羧酸}，或其多晶型物或鹽，優(yōu)選是鈉鹽。特米沙坦已有市售，例如商品名Micardis。
特米沙坦記載在，例如，EP-0502314和US-5591762中。特米沙坦的多晶型物記載在，例如，WO-00/43370，US-6358986和US-6410742中。特米沙坦的鈉鹽記載在，例如，WO03/037876中。
例如，在WO03/037876中記載有，可通過合適地選擇制備條件而選擇性地制得晶體多晶型形式的且具有如下化學(xué)式的特米沙坦的鈉鹽。
特米沙坦鈉鹽的這種晶體形式的特征在于熔點T＝245±5℃(通過差示掃描量熱法并使用Mettler-Toledo DSC82-裝置測得；加熱速率為10°K/min)。
為了制備特米沙坦的鈉鹽，可以采取如下所述的兩種制備方法之一。
在本發(fā)明的各個方面，涉及HMG-CoA-還原酶抑制劑的阿托伐他汀或其多晶型物或鹽，優(yōu)選涉及的是半鈣鹽(Hemicalciumsalz){[R-(R*，R*)]-2-(4-氟苯基)-β，δ-二羥基-5-(1-甲基乙基)-3-苯基-4-[(苯氨基)-羰基]-1H-吡咯-1-庚酸-半鈣鹽}，例如可以商品名Lipitor，Zarator和Sortis購得。
阿托伐他汀記載在，例如，EP0247633和US-4681893中。阿托伐他汀的多晶型物記載在例如，WO-97/03958，WO-97/03959，EP-0848704和EP-1148049中。阿托伐他汀的鹽(單鉀鹽，單鈉鹽，鈣鹽，鎂鹽，鋅鹽和葡甲胺)則記載在，例如，EP-0409281和US-5273995中。
所謂共同服用兩種活性成分應(yīng)理解為是按時間相繼服用或同時服用，并且優(yōu)選同時服用。如果是相繼服用，則可以在服用了阿托伐他汀之前或之后服用特米沙坦。
活性成分可以經(jīng)口服、口腔、腸胃外、通過吸入、直腸或局部給藥，其中優(yōu)選口服給藥。腸胃外給藥可以是包括皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)和胸骨內(nèi)的注射以及輸注技術(shù)。
可以以多種不同的制劑形式以口服給藥，即有效物質(zhì)可以和各種藥物學(xué)相容的惰性載體加工成片劑、膠囊、丸劑、糖、粉劑、噴霧劑、水性懸浮液、酏劑、糖漿等等。屬于這種載體物質(zhì)的有固體稀釋劑或填料，消毒的水性介質(zhì)和各種無毒的有機(jī)溶劑。此外，這種口服的藥物制劑可以以合適的方式混有甜味劑和/或增味劑，其中可使用那些符合此目的而常用的各種制劑。通常，本發(fā)明的化合物在這種口服制劑中的濃度范圍以組合物總重計為約0.5至約90重量％，且其用量應(yīng)以形成理想的劑量單位為準(zhǔn)。另一些合適的本發(fā)明化合物的制劑包括技術(shù)人員所熟悉的具有控制釋放能力的制劑和藥具。對于口服給藥，可以使用片劑，其含有一定量不同載體，如檸檬酸鈉、碳酸鈣和磷酸鈣，并結(jié)合各種崩解劑，如淀粉，優(yōu)選的土豆或木薯淀粉、藻酸和某些復(fù)合的硅酸鹽，以及粘合劑如聚乙烯吡咯烷酮，蔗糖，明膠和阿拉伯膠。此外，還可以使用潤滑劑，如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉和滑石或相似類型的組合物，同樣作為填裝在軟膠囊和硬膠囊中的填料。屬于此類的也有乳糖或奶糖以及高分子量的聚乙二醇。如果希望是用于口服的水性懸浮液和/或酏劑，則可以使活性成分與各種甜味劑或增味劑，著色劑或顏料和任選的乳化劑和/或水、乙醇、丙二醇、甘油和它們的各種組合物相結(jié)合。
對于腸胃外給藥，可以使用化合物于芝麻油或花生油中的溶液，或者是水性丙二醇中的溶液，以及消過毒的相應(yīng)藥物學(xué)相容的鹽的水溶液。適當(dāng)時也可以合適的方法對這種水溶液進(jìn)行緩沖，并且適當(dāng)時可以用足量的食鹽或葡萄糖使液體稀釋劑成為等滲壓的。這種特定的水性溶液特別適于靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)和皮下注射。其中，經(jīng)消毒的水性介質(zhì)可簡便地根據(jù)技術(shù)人員所公知的常用技術(shù)而得到。例如，使用通常的蒸餾水作為液體稀釋劑。制成的制劑通過合適的濾菌器，如由燒結(jié)玻璃、硅藻土或未玻璃化的陶瓷制成的過濾器而得到。屬于這種類型的優(yōu)選的過濾器是Berkefeld-，Chamberland-和石棉盤-金屬-Seitz-過濾器，其中借助于真空泵而將液體吸入經(jīng)消毒的容器中。在可注射溶液的整個制備過程中，所需步驟的實施要使得終產(chǎn)物以消毒狀態(tài)存在。
對于透皮給藥的特定化合物或組合物的制劑，例如，溶液、洗劑、膏劑、乳劑、凝膠、栓劑、具有緩釋的制劑以及適用于此的藥具。這些制劑形式包括特殊的化合物并且還可以含有乙醇、水、滲透增強(qiáng)劑和惰性載體，例如成膠材料、礦物油、乳化劑、苯甲醇等類似物。
所制得的給藥制劑含有，例如，2.5-40mg，優(yōu)選5，10，15，20，25，30，35或40mg阿托伐他汀的當(dāng)量物。阿托伐他汀或其多晶型物或鹽的日劑量為，口服劑量為約1.25mg(或0.018mg/kg體重，以體重為70kg的人計)至約450mg(6.43mg/kg體重，以體重為70kg的人計)，腸胃外給藥量為約20mg(0.286mg/kg體重，以體重為70kg的人計)，且優(yōu)選以口服給藥，給藥量為約2.5mg(0.036mg/kg體重，以體重為70kg的人計)至約80mg(1.428mg/kg體重，以體重為70kg的人計)。特別優(yōu)選口服日劑量為約5mg(0.071mg/kg體重，以體重為70kg的人計)，約10mg(0.143mg/kg體重，以體重為70kg的人計)，約20mg(0.286mg/kg體重，以體重為70kg的人計)或約40mg(0.571mg/kg體重，以體重為70kg的人計)或特別在開始時口服日劑量即為約10mg。
所制得的給藥制劑含有，例如，20-200mg，優(yōu)選20，40，80，120，160或200mg特米沙坦游離酸的當(dāng)量物。如果活性成分與HCTZ或氯噻酮相組合，則給藥制劑含有10-50mg，優(yōu)選50，25或12.5mg的利尿劑。特米沙坦或其多晶型物或鹽的給藥量按照日劑量計算，口服劑量為約10mg(或0.143mg/kg體重，以體重為70kg的人計)至約500mg(7.143mg/kg體重，以體重為70kg的人計)，腸胃外給藥量為約20mg(0.286mg/kg體重，以體重為70kg的人計)，且優(yōu)選以口服給藥，給藥量為約20mg(0.286mg/kg體重，以體重為70kg的人計)至約100mg(1.429mg/kg體重，以體重為70kg的人計)。特別優(yōu)選口服日劑量為約40mg(0.571mg/kg體重，以體重為70kg的人計)至約80mg(1.143mg/kg體重，以體重為70kg的人計)，或特別優(yōu)選劑量為約80mg(1.143mg/kg體重，以體重為70kg的人計)。
在藥物組合物中，優(yōu)選阿托伐他汀對特米沙坦或其多晶型物或鹽之比為1∶100至100∶1(以重量計)。
在特別優(yōu)選的實施方式中，以口服形式共同服用阿托伐他汀或其多晶型物或鹽與特米沙坦或其多晶型物或鹽時，按照以下日劑量進(jìn)行給藥10mg阿托伐他汀和40mg特米沙坦(或它們的多晶型物或鹽)；10mg阿托伐他汀和80mg特米沙坦(或它們的多晶型物或鹽)；20mg阿托伐他汀和40mg特米沙坦(或它們的多晶型物或鹽)；20mg阿托伐他汀和80mg特米沙坦(或它們的多晶型物或鹽)；根據(jù)一優(yōu)選實施方式，本發(fā)明的藥物組合物中，單個劑量單位中含有HMG-CoA-還原酶-抑制劑，其量為1.25mg至450mg，和ANG II-拮抗劑，其量為10mg至500mg，并且適當(dāng)時還可含有一種或多種藥物學(xué)相容的稀釋劑和/或載體物質(zhì)。
根據(jù)另一優(yōu)選的實施方式，本發(fā)明的藥物組合物中，單個劑量單位中含有其量為2.5mg至80mg的阿托伐他汀，和其量為20至100mg的特米沙坦，且適當(dāng)時還可含有一種或多種藥物學(xué)相容的稀釋劑和/或載體。
在本發(fā)明的藥物組合物的另一優(yōu)選小組中，單個劑量單位中含有其量為5mg至20mg的阿托伐他汀和其量為40mg至80mg的特米沙坦，且適當(dāng)時還可含有一種或多種藥物學(xué)相容的稀釋劑和/或載體。
在本發(fā)明的藥物組合物的再一優(yōu)選小組中，單個劑量單位中含有其量為10或20mg的阿托伐他汀，和其量為40或80mg的特米沙坦，且適當(dāng)時還可含有一種或多種藥物學(xué)相容的稀釋劑和/或載體。
如上所述的，本發(fā)明也涉及到特米沙坦用于制備藥物組合物的用途，所述該藥物組合物在與阿托伐他汀相組合使用時能對人體或非人哺乳動物體預(yù)防或治療上述那些適應(yīng)癥。對于這種應(yīng)用，應(yīng)理解為是制備所有上文提及的符合本發(fā)明的藥物組合物。
實施例實施例1特米沙坦，氯沙坦和依貝沙坦不在體外結(jié)合在PPARγ配位體結(jié)合區(qū)在大腸桿菌(E.coli.)中制備含有人體PPARγ-配位體結(jié)合區(qū)(LBD)的蛋白質(zhì)作為GST-融合蛋白質(zhì)并用親合色譜法進(jìn)行提純。
為此，通過在表達(dá)載體pGEX-4T-1(Amersham)中另外嵌入限制性片段位點BamH I和Xho I而亞克隆DNA片段，其編碼人體PPARγ2-轉(zhuǎn)錄因子的氨基酸205-505(參見基因庫登記號U79012)，并且控制該片段的序列。在25℃下用0.2mM的IPTG誘導(dǎo)4小時之后，在推薦的大腸桿菌-菌株BL21(DE3)的pGEX載體中進(jìn)行融合蛋白質(zhì)的表達(dá)。表達(dá)后接著使細(xì)菌沉淀并逐份在PBS，pH7.4中冷凍(wegfrieren)。根據(jù)法國Press說明，借助于GSTrap-柱(Parmacia)提純?nèi)芙獾腉ST-PPARγ-LBD-融合蛋白質(zhì)。通過添加20mM還原的谷胱甘肽進(jìn)行洗提。
利用HiTrap脫鹽柱(Parmacia)對GST-PPARγ-LBD-蛋白質(zhì)餾分脫鹽，并利用標(biāo)準(zhǔn)化驗法確定蛋白質(zhì)濃度。
在E.coli.中制備含有人體RXRα-配位體結(jié)合區(qū)(LBD)的蛋白質(zhì)作為Histag-融合蛋白質(zhì)并用親合色譜法進(jìn)行提純。
為此，通過在表達(dá)載體pET28c(Novagen)中另外嵌入限制性片段位點BamH I和Not I而對對人體RXRα-轉(zhuǎn)錄因子的氨基酸220-461編碼的DNA片段(參見基因庫登記號NM 002957)進(jìn)行亞克隆，并且控制該片段的序列。在25℃下用0.2mM的IPTG誘導(dǎo)4小時后，在推薦的大腸桿菌-菌株BL21(DE3)的pET載體中進(jìn)行融合蛋白質(zhì)的表達(dá)。緊接著表達(dá)后將細(xì)菌沉淀并逐份在PBS，pH7.4中冷凍去(wegfrieren)。根據(jù)法國Press說明，借助于HiTrap螯合-柱(Parmacia)提純?nèi)芙獾腍is-RXRalpha-LBD-融合蛋白質(zhì)。通過添加500mM的咪唑梯度(stufe)進(jìn)行洗提。利用HiTrap脫鹽柱(Parmacia)對His-RXRalpha-LBD-蛋白質(zhì)餾分脫鹽，并利用標(biāo)準(zhǔn)化驗法確定蛋白質(zhì)濃度。
a)α篩選在Ullmann EF等，Proc Natl Acad Sci USA(1994)915426-5430中首次記載了α篩選試驗。本實施例中所施行的測量過程是按Glickman JF等，J BiomolScreen(2002)73-10中所記載的進(jìn)行。試驗緩沖液是由25mM的Hepes pH7.4，100mM的NaCl，1mM的DTT，0.1％的Tween-20，0.1％的BSA組成的。在有各種濃度的試樣(DMSO中)存在條件下，在室溫下培養(yǎng)3nM的GST-PPARγ-LBD-融合蛋白質(zhì)，15nM的輔因子CBP的生物素化LXXLL-肽(相當(dāng)于Mukherjee R等的J Steroid Biochem Mol Biol(2002)81217-225中的第218頁上公開的，具有另一N封端的半胱氨酸的肽)和每次10μg/ml的抗GST-受體珠或鏈霉抗生蛋白素-供體珠(實用的生物系統(tǒng))4個小時，其總體積為12.5μl。在試驗的最后DMSO濃度為1％(v/v)。將1％的DMSO溶液用作對照參比物(NSB)。測量是在Packard Fusion-測量儀上進(jìn)行。
與羅格列酮相反，一種文獻(xiàn)中已知的在LBD結(jié)合的PPARγ-激動劑，發(fā)現(xiàn)隨著特米沙坦，氯沙坦和依貝沙坦的濃度增加(濃度直至50μM)，沒有發(fā)生PPARγ-LBD的直接活化并因此也沒有發(fā)生顯著的LXXLL-肽的補(bǔ)充。
b)SPA-試驗在Mukherjee R等，J Steroid Biochem Mol Biol(2002)81217-225中記載了SPA-試驗方式。試驗緩沖液是由25mM的Tris pH7.5，25mM的KCl，10mM的DTT，0.2％的Triton X-100組成的。將30nM的GST-PPARγ-LBD-融合蛋白質(zhì)，30nM的His-RXRα-LBD，抗GST-抗體(1∶600，Amersham Pharmacia)，0.25mg蛋白質(zhì)A SPA PVT抗體結(jié)合珠(Amersham Pharmacia)，30nM的3H-標(biāo)記的羅格列酮在用試驗物質(zhì)稀釋的100μl總體積中在室溫培養(yǎng)5小時。
添加10μM的未標(biāo)記的羅格列酮取代放射性的羅格列酮作為對照參比(NSB)，添加所用的溶劑如DMSO取代試樣作為最大值(Bmax)。
培養(yǎng)后緊接著將測試物在Hettich Universal 30Rf-離心器中于2000Upm的條件下離心分離5分鐘并在Packard TopCount NXT上進(jìn)行測量。
與結(jié)合在PPARγ-LBD上的直接的PPARγ-激動劑相反，在特米沙坦、洛沙坦或依貝沙坦過量很多的情況下也沒有濃度依賴性地抑制來自結(jié)合位點的放射性羅格列酮。
c)NMR-檢測與直接的PPARγ-配位體，例如羅格列酮不同，當(dāng)在有試樣特米沙坦存在的條件下對PPARγ-LBD進(jìn)行15N TROSY譜的測量時，沒有出現(xiàn)試樣與結(jié)合位點的氨基酸發(fā)生相互作用。在有試樣的條件下結(jié)合位點的氨基酸的定位與沒有配位體存在時一樣。
實施例2制備一種穩(wěn)定轉(zhuǎn)化的PPARγ-受體細(xì)胞系對人體PPARγ2-轉(zhuǎn)錄因子的205-505(對應(yīng)于基因庫-序列號U79012的核苷酸703-1605)進(jìn)行編碼的DNA片段是通過另外在載體pFA-CMV(stratagene)的多克隆位點嵌入限制性片段位點BamH I和Hind III而進(jìn)行，并驗證其序列。所得的質(zhì)粒pFA-CMV/hPPARγ2-LBD，在對于Gal4 DNA-結(jié)合區(qū)的相同的讀框中對PPARγ-LBD的N端基進(jìn)行編碼。另外，質(zhì)粒還對新霉素抗體進(jìn)行了編碼。
細(xì)胞系CHO-K1(ATCC CCL-61)和質(zhì)粒pFA-CMV/hPPARγ2-LBD和pFR-Luc(stratagene)共轉(zhuǎn)染。pFR-Luc在五重復(fù)的酵母Gal4-結(jié)合位置的控制下對熒光素酶進(jìn)行編碼。根據(jù)制造者的說明用Lipofectamin2000進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
轉(zhuǎn)染之后，在有0.5mg/ml G-418存在的條件下在介質(zhì)(含有10％小牛血清的Ham’s F12)中培養(yǎng)細(xì)胞。培養(yǎng)六天后細(xì)胞傳代并在培養(yǎng)基中再保持10天。在顯微鏡下檢出所得的抗新霉素的菌落并在96-孔-盤內(nèi)進(jìn)行分隔和培養(yǎng)。得到含有質(zhì)粒(例如克隆號10，11，13等)的各種不同轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，并將其繼續(xù)保留在培養(yǎng)基中。
關(guān)于熒光素酶的基因的可誘導(dǎo)性，通過PPARγ-激動劑，例如羅格列酮，研究細(xì)胞系，并與通過PPARγ-激動劑刺激使其增加的熒光素信號反應(yīng)。
實施例3特米沙坦，氯沙坦和伊貝沙坦活化的PPARγ細(xì)胞在96-well-平底盤中播撒來自實施例2的轉(zhuǎn)化克隆體11衍生的CHO-K1細(xì)胞系，其密度為3×104細(xì)胞/200μl/孔的密度，然后在含有10％小牛血清和0.5mg/ml G-418的Ham’s F-12-培養(yǎng)基中培養(yǎng)過夜。24小時后將其改換到不添加G-148的培養(yǎng)基中。
用合適的溶劑，例如DMSO使試樣濃度達(dá)到100倍的理想濃度，并通過料添加50μl的洗滌緩沖液和150μl的熒光素酶-試驗緩沖液(25mM Tricine，0.5mM EDTA，0.54mM NaTPP，16.3mM MgSO4，1.2mM ATP，0.05mM熒光素，56.8mM 2-巰基乙醇，0.1％的Trition X-100，pH7.8)。在Packard TopCountNXT上等待五分鐘的時間后進(jìn)行熒光的測量。對開始測量后最初十秒內(nèi)的相對熒光素酶單位(RLU)進(jìn)行積分而得到熒光紊酶活性。
通過血管緊張素II受體拮抗劑特米沙坦能特別強(qiáng)烈地活化在PPARγ-受體細(xì)胞系中的PPARγ-通道。通過其他血管緊張素II受體拮抗劑如氯沙坦和伊貝沙坦首先在較高測試濃度并以較小程度進(jìn)行活化作用。
實施例4配方實施例片劑1通過直接壓制特米沙坦的鈉鹽和助劑以及硬脂酸鎂，能得到具有如下組成的片劑組分 mg特米沙坦的鈉鹽 41.708甘露醇 149.542
微晶纖維素50.000交聯(lián)羧甲基纖維素鈉鹽 5.000酸硬脂酸鎂3.750總計 250.000片劑2通過直接壓制特米沙坦的鈉鹽和助劑以及硬脂酸鎂，得到具有如下組成的片劑組分 mg特米沙坦的鈉鹽 83.417山梨醇 384.083聚乙烯吡咯烷酮K2525.000硬脂酸鎂 7.500總計 500.000片劑3將氫氯噻嗪、特米沙坦的鈉鹽、山梨醇和氧化鐵紅在自由落體混合器(“Free Fall Blender”)中混合，通過0.8mm的篩網(wǎng)進(jìn)行篩分，并在添加硬脂酸鎂后于自由落體混合器中加工成粉末狀混合物。
然后，用合適的壓片機(jī)(例如Korsch EK0或Fette P1200)將活性成分和助劑的組合物壓制成片劑。制得的片劑具有如下組成，其中每片所含有的特米沙坦的鈉鹽的量相當(dāng)于特米沙坦的游離酸80mg。
三批料的片劑中的特米沙坦的鈉鹽經(jīng)過30分鐘的攪拌(75rpm)后溶于900ml的0.1M磷酸鹽緩沖液pH7.5至92±1.5％，96±1.8％或100±1.0％中。30分鐘后，氫氯噻嗪30分鐘后溶解在900ml的0.1M HCl(100rpm)達(dá)69±6.3％，72±2.1％或78±1.8％中。
實施例5從特米沙坦制備晶狀特米沙坦鈉鹽制備結(jié)晶的特米沙坦鈉鹽的原料是按傳統(tǒng)方法(例如，根據(jù)EP-0502314)得到的特米沙坦的游離酸。
將154.4g特米沙坦置于合適的反應(yīng)容器中的308.8ml甲苯中，向懸浮液中混入27.8g的44.68％的氫氧化鈉溶液和84.9ml的乙醇，在78℃下加熱約30分鐘。然后過濾混合物。接著，任選地，當(dāng)大量固體殘留在過濾器中時，用61.8ml的甲苯和15.3ml的乙醇混合物洗滌過濾器。
將463.2ml的甲苯置于另一反應(yīng)容器中，并在回流條件下加熱。然后在沸騰溫度下緩慢地添加根據(jù)上述方法所得的濾液，同時進(jìn)行共沸蒸餾。在完全添加后，同樣添加任選地通過洗滌過濾器而得到的溶液并重新進(jìn)行共沸蒸餾。蒸餾混合物直至溫度為103℃。然后將懸浮液冷卻到環(huán)境溫度。抽濾晶體，用154.4ml的甲苯洗滌并在60℃下于循環(huán)空氣干燥箱中進(jìn)行干燥。
得率154.6g(96％)無色晶體C33H29N4O2Na×0.5H2O 計算值.C72.51H5.72N10.25測得值.C72.57H5.69N10.21實施例6從特米沙坦-氫氯化物制備晶狀特米沙坦的鈉鹽特米沙坦-氫氯化物的制備將411g的叔丁基-4’-[[2-正丙基-4-甲基-6-(1-甲基苯并咪唑-2-基)-苯并咪唑-1-基]-甲基]-聯(lián)苯基-2-羧酸酯懸浮在822ml的冰醋酸中，并加入213g的濃鹽酸水溶液(37％)。在回流條件下加熱混合物。蒸去約640ml的溶劑。緩慢地向殘留物中加入50-60℃的約620ml的水。向該混合物中加入20g活性炭(例如Norit SX2 Ultra)。在恒溫下攪拌所得的混合物約10分鐘。過濾后用25ml的冰醋酸和約620ml的水洗滌殘留物3次。將所得濾液重新加熱到約50-60℃并加入約2升的水。在經(jīng)過23℃下約12小時的攪拌后，抽濾所形成的晶體并用約500ml的水洗滌2次，用約900ml的丙酮洗滌1次，然后在約60℃下干燥。
得率367g(92.5％)無色晶體熔點278℃由特米沙坦氫氯化物制備晶狀特米沙坦鈉鹽將55.1g的特米沙坦氫氯化物溶于110.2ml甲苯，5.5ml水和55.1ml異丙醇中。向混合物中加入36.9g甲醇鈉(30％甲醇溶液)和2.75g活性炭(例如Norit SX2Ultra)。接著將混合物加熱到約75℃。在恒溫下于約30分鐘內(nèi)蒸去約50ml的溶劑混合物。過濾所得懸浮液。用約20ml甲苯洗滌殘留物。向濾液中加入約5ml水和約150ml的甲苯。在回流條件下加熱所得混合物。其中共沸蒸餾掉約150ml的溶劑混合物(直至102℃)。在100℃下結(jié)晶混合物1小時。抽濾晶體，用約50ml甲苯洗滌并在約60℃下干燥。
得率53.6g(99％)無色晶體C33H29N4O2Na×0.5H2O 計算值.C72.51H5.72N10.25測得值.C72.44H5.68N10.20
權(quán)利要求
1.血管緊張素II受體拮抗劑特米沙坦或其一種鹽和HMG-CoA-還原酶抑制劑阿托伐他汀的用途，其用于制備一種治療那些需要預(yù)防或治療心血管、心肺或腎臟疾病的人或哺乳動物的藥劑。
2.如權(quán)利要求1所述的用于醫(yī)治人類的用途，其中所述醫(yī)治是預(yù)防或治療高血壓組合高血脂或動脈粥樣硬化的患者。
3.如權(quán)利要求1所述的用于醫(yī)治人類的用途，其中所述醫(yī)治是治療哮喘，支氣管炎或間質(zhì)性肺病的患者。
4.如權(quán)利要求1所述的用于醫(yī)治人類的用途，其中所述醫(yī)治是對診斷II型糖尿病或者是懷疑存在前驅(qū)糖尿病的人以預(yù)防糖尿病和前驅(qū)糖尿病，或者治療代謝綜合癥和具有正常血壓的患者的抗胰島素癥狀。
5.如權(quán)利要求1所述的用途，它用于治療或預(yù)防高血壓性抗胰島素性。
6.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，在待治療的人群中空腹血糖值每dl血漿高于110mg葡萄糖。
7.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，在待治療的人群中甘油三酸酯的血液值高于150mg/dl。
8.如權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于，在待治療的人群中HDL的血液值，婦女是每dl血漿低于40mg，男子是每dl血漿低于50mg。
9.如權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于，在待治療的人群中，收縮壓超過130mmHg且舒張壓超過80mmHg。
10.如權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，口服時，阿托伐他汀或其多晶型物或鹽的日用劑量為約0.018mg/kg體重至6.43mg/kg體重，而特米沙坦或其多晶型物或鹽的日用劑量為約0.143mg/kg至7.143mg/kg體重。
11.如權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，腸胃外給藥時，阿托伐他汀或其多晶型物或鹽的日用劑量為約0.286mg/kg體重，而特米沙坦或其多晶型物或鹽的日用劑量為約0.286mg/kg體重。
12.用于醫(yī)治那些需要預(yù)防或治療心血管、心肺或腎臟疾病的人群的方法，其特征在于給藥一種含有血管緊張素II受體拮抗劑特米沙坦或一種其鹽和HMG-CoA-還原酶抑制劑阿托伐他汀的藥劑。
13.用于醫(yī)治那些需要預(yù)防或治療心血管、心肺或腎臟疾病的人類或哺乳動物的藥物組合物，其含有特米沙坦并組合阿托伐他汀，且適當(dāng)時還含有一種或多種助劑。
14.如權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其特征在于，藥物的給藥制劑中含有20-300mg的特米沙坦和2.5-40mg的阿托伐他汀。
15.如權(quán)利要求14所述的藥物組合物，其特征在于，阿托伐他汀對特米沙坦或它們的多晶型物或鹽之比為1∶2至1∶8(以重量計)。
16.如權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其特征在于，兩種活性成分還另組合有利尿劑。
17.如權(quán)利要求16所述的藥物組合物，其特征在于，藥物的給藥制劑中含有10-50mg的HCTZ或氯噻酮。
18.如權(quán)利要求13所述的藥物組合物，以同時、分開或相繼施用活性成分進(jìn)行治療。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種通過改善內(nèi)皮功能和在需要對血壓血脂進(jìn)行控制的適應(yīng)癥中對器官、組織和脈管的保護(hù)作用，而預(yù)防或治療心血管、心肺、肺部或腎臟疾病的方法，特別是針對那些確診有II型糖尿病或懷疑存在有前驅(qū)糖尿病的人群，所述方法也用于預(yù)防糖尿病和前驅(qū)糖尿病并用于治療新陳代謝綜合癥和血壓正常的患者的抗胰島素性。所述方法包括共同施用有效量的特米沙坦或其多晶型物或鹽和阿托伐他汀。本發(fā)明也涉及含有特米沙坦或其多晶型物或鹽和阿托伐他汀的適宜的藥物組合物，作為一種以同時、分開或相繼使用于預(yù)防或治療所述疾病的組合制備。
文檔編號A61K31/401GK1738617SQ200480002407
公開日2006年2月22日 申請日期2004年1月14日 優(yōu)先權(quán)日2003年1月16日
發(fā)明者阿克塞爾·里德爾, 約瑟普－瑪麗亞·森德拉, 約瑟夫·M·E·萊特, 斯蒂芬·考?？? 邁克爾·馬克 申請人:貝林格爾·英格海姆國際有限公司