專利名稱：取代的雜芳基苯并呋喃酸的制作方法
相關(guān)申請的交叉參考本申請要求2004年9月23日提交的美國專利申請No.＿＿＿的優(yōu)先權(quán)，后一申請要求2003年9月25日提交的美國臨時申請No.60/506,012的權(quán)益，其全部內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
背景技術(shù)：
本發(fā)明通常涉及取代的雜芳基苯并呋喃酸和使用它們的方法。
絲氨酸蛋白酶抑制劑PAI-1是纖維蛋白溶解系統(tǒng)的主要抑制劑之一。纖維蛋白溶解系統(tǒng)包括纖溶酶原，其通過兩種組織類型的纖溶酶原激活物t-PA或u-PA之一轉(zhuǎn)化為活性纖溶酶。PAI-1是t-PA和u-PA的主要生理抑制劑。纖溶酶在纖維蛋白溶解系統(tǒng)中的一個主要職責是在血管損傷部位消化纖維蛋白。但是，纖維蛋白溶解系統(tǒng)不僅負責從循環(huán)中除去纖維蛋白，而且還參與其他幾種生物過程，包括排卵、胚胎發(fā)生、內(nèi)膜增殖、血管生成、腫瘤發(fā)生和粥樣硬化。
己將高水平的PAI-1與多種疾病和病癥關(guān)聯(lián)在一起，包括與纖維蛋白溶解系統(tǒng)損害有關(guān)的疾病和病癥。例如，高水平的PAI-1牽涉到血栓形成疾病，例如以形成局部阻塞血管血液流動或者脫落和栓塞從而堵塞血液順流流動的血栓為特征的疾病。(Krishnamurti，Blood，69，798(1987)；Reilly，Arteriosclerosis and Thrombosis，11，1276(1991)；Carmeliet，Journal of Clinical Investigation，92，2756(1993)，Rocha，fibrinolysis，8，294，1994；Aznar，Haemostasis 24，243(1994))?？贵w中和PAI-1活性導致促進內(nèi)源性血栓溶解和再灌注(Biemond，Circulation，91，1175(1995)；Levi，Circulation 85，305，(1992))。高水平的PAI-1還牽涉到例如以下疾病多囊卵巢綜合征(Nordt，Journal ofclinical Endocrinology and Metabolism，85，4，1563(2000))、雌激素不足引起的骨損失(Daci，Journal of Bone and Mineral Research，15，8，1510(2000))、囊性纖維變性、糖尿病、慢性牙周炎、淋巴瘤、與胞外基質(zhì)積累有關(guān)的疾病、與新血管生成有關(guān)的惡性腫瘤和疾病、炎性疾病、與感染有關(guān)的血管損傷及與uPA水平提高有關(guān)的疾病如乳腺癌和卵巢癌。
鑒于以上所述，需要對PAI-1活性抑制劑的鑒定和使用經(jīng)鑒定抑制劑來調(diào)節(jié)對象中PAI-1的表達或活性以治療與PAI-1水平升高有關(guān)的疾患(disorder)的方法。
概述本發(fā)明提供取代的雜芳基苯并呋喃酸和使用它們的方法。在某些實施方案中，本發(fā)明的取代的雜芳基苯并呋喃酸包括下式的化合物 式1其中R、R1、R2和R3獨立為氫、烷基、環(huán)烷基、烷?；?、鹵素、羥基、芳基、全氟烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基或全氟烷氧基；R4為氫、烷基、全氟烷基、烯基、炔基、芳基烯基、芳基炔基、芳基、-C(＝O)R5、-C(＝S)R5、-CH2R5或-CH(OH)R5；R5為氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、全氟烷基、芳基、烯基、炔基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、烷基芳基、烯基芳基或炔基芳基；
R6為氫、烷基、芳基或芳基烷基；x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8獨立為碳或氮，其中至少x1-x8之一為氮原子；n為0-6的整數(shù)，優(yōu)選1-6；A為COOH或酸模擬物。
在某些實施方案中當A為羧酸時，n為1-6的整數(shù)。
本發(fā)明尤其還提供式1的藥物可接受鹽或酯形式。
本發(fā)明尤其還提供取代的雜芳基苯并呋喃酸的使用方法。在本發(fā)明的一方面，給予對象治療有效量的一種或多種取代的雜芳基苯并呋喃酸，以治療相關(guān)疾患，例如通過抑制對象中的PAI-1活性。PAI-1活性與多種疾病和病癥相關(guān)。例如，在本方面的一個實施方案中，PAI-1活性與纖維蛋白溶解系統(tǒng)的損害有關(guān)。在其他實施方案中，PAI-1活性與以下疾病有關(guān)血栓形成如靜脈血栓形成、動脈血栓形成、腦血栓形成和深部靜脈血栓形成、心房纖維性顫動、肺纖維變性、外科手術(shù)的血栓栓塞并發(fā)癥、心血管疾病如心肌缺血、動脈粥樣硬化斑塊形成、慢性阻塞性肺病、腎纖維變性、多囊卵巢綜合征、阿爾茨海默病或癌癥。
詳述A.概述本發(fā)明提供抑制PAI-1活性的化合物、制備這種化合物的方法、含有這種化合物的藥物組合物以及在醫(yī)學治療中使用這種化合物的方法。所述化合物具有用于治療(包括預防和抑制)多種涉及PAI-1產(chǎn)生和/或作用的疾病和疾患的性質(zhì)。這些疾病包括由纖維蛋白溶解系統(tǒng)的損害引起的疾患，包括但不限于血栓形成、冠心病、腎纖維變性、動脈粥樣硬化斑塊形成、肺病、心肌缺血、心房纖維性顫動、凝固綜合征、外科手術(shù)的血栓栓塞并發(fā)癥、外周動脈阻塞和肺纖維變性。其他疾患包括但不限于多囊卵巢綜合征、阿爾茨海默病和癌癥。
本文所用術(shù)語“烷基”和“亞烷基”無論單獨使用或者作為另一種基團的一部分使用，均指取代的或未取代的脂族烴鏈，區(qū)別在于烷基本質(zhì)上是單價的(即末端的)，而亞烷基是二價的，通常充當連接基團。兩者均包括但不限于含1至約12個，優(yōu)選1-6個碳原子的直鏈和支鏈，除非另有明確規(guī)定。例如，甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基和叔丁基為術(shù)語“烷基”所涵括。具體包括在“烷基”定義當中的是任選被取代的脂族烴鏈。代表性的任選取代基包括但不限于芳基、鹵素、羥基、酰氧基、烷氧基、氨基、一個或兩個1-6個碳原子的烷基取代的氨基、氨基?；?、?；被?、1-6個碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6個碳原子的硫代烷氧基和三鹵甲基。優(yōu)選的取代基包括鹵素、三鹵甲基、1-6個碳原子的烷基、1-6個碳原子的烷氧基和1-6個碳原子的硫代烷氧基。優(yōu)選烷基和亞烷基未取代。
用于本文定義的碳數(shù)目指碳主鏈和碳支鏈的碳數(shù)目，但不包括取代基如烷氧基取代等的碳數(shù)目。
本文所用術(shù)語“烯基”無論單獨使用或者作為另一種基團的一部分使用，均指取代的或未取代的脂族烴鏈，包括但不限于具有2至約10個碳原子并含有至少一個雙鍵的直鏈和支鏈。優(yōu)選烯基部分具有1或2個雙鍵。這種烯基部分可以以E或Z構(gòu)象存在，本發(fā)明的化合物包括這兩種構(gòu)象。具體包括在“烯基”的定義當中的是任選被取代的脂族烴鏈。代表性的任選取代基包括但不限于芳基、鹵素、氧代(＝O)、羥基、酰氧基、烷氧基、氨基、一個或兩個1-6個碳原子的烷基取代的氨基、氨基?；Ⅴ；被?、1-6個碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6個碳原子的硫代烷氧基和三鹵甲基。優(yōu)選的取代基包括鹵素、三鹵甲基、1-6個碳原子的烷基、1-6個碳原子的烷氧基和1-6個碳原子的硫代烷氧基。連接烯基的雜原子如O或S不應連接與雙鍵鍵合的碳原子。優(yōu)選烯基未被取代。
本文所用術(shù)語“炔基”無論單獨使用或者作為另一種基團的一部分使用，均指取代的或未取代的脂族烴鏈，包括但不限于具有2-10個碳原子和含有至少一個三鍵的直鏈和支鏈。優(yōu)選炔基部分具有3-6個碳原子。在某些實施方案中，炔基可含有不只一個三鍵，在這種情況下，烷基必須含有至少三個碳原子。具體包括在“炔基”定義當中的是任選被取代的脂族烴鏈。代表性的任選取代基包括但不限于芳基、鹵素、羥基、酰氧基、烷氧基、氨基、一個或兩個1-6個碳原子的烷基取代的氨基、氨基?；?、?；被?、1-6個碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6個碳原子的硫代烷氧基和三鹵甲基。連接炔基的雜原子如O或S不應連接與三鍵鍵合的碳。優(yōu)選炔基未被取代。
本文所用術(shù)語“環(huán)烷基”無論單獨使用或者作為另一種基團的一部分使用，均指取代或未取代的具有3至約20個碳原子、優(yōu)選3-8個碳原子的脂環(huán)烴基。具體包括在“環(huán)烷基”的定義當中的是任選被取代的脂環(huán)烴基。示例性環(huán)烷基包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)辛基、金剛烷基、2-[4-異丙基-1-甲基-7-氧雜-二環(huán)[2.2.1]庚烷基]和2-[1，2，3，4-四氫萘基]。代表性的任選取代基包括但不限于芳基、鹵素、羥基、酰氧基、烷氧基、氨基、一個或兩個1-6個碳原子的烷基取代的氨基、氨基酰基、?；被?、1-6個碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6個碳原子的硫代烷氧基和三鹵甲基。優(yōu)選環(huán)烷基未被取代。
本文所用術(shù)語“芳基”無論單獨使用或者作為另一種基團的一部分使用，均定義為取代或未取代的具有5至約50個碳原子、優(yōu)選6至約14個碳原子的芳族烴環(huán)基團?！胺蓟笨删哂袉蝹€環(huán)或多個稠環(huán)。術(shù)語“芳基”包括但不限于苯基、α-萘基、β-萘基、聯(lián)苯基、蒽基、四氫萘基、芴基、2，3-二氫化茚基、亞聯(lián)苯基和苊基。具體包括在“芳基”的定義當中的是任選被取代的芳族基團。因此，本文所述的芳基指未取代或取代的芳基。例如，在本發(fā)明的代表性實施方案中，“芳基”任選被1-5個選自以下的取代基取代酰氧基、羥基、酰基、1-6個碳原子的烷基、1-6個碳原子的烷氧基、2-6個碳原子的烯基、2-6個碳原子的炔基、氨基、一個或兩個1-6個碳原子的烷基取代的氨基、氨基?；Ⅴ；被?、疊氮基、氰基、鹵素、硝基、1-6個碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6個碳原子的硫代烷氧基、三鹵甲基和芳基。優(yōu)選的取代基包括鹵素、三鹵甲基、1-6個碳原子的烷基、1-6個碳原子的烷氧基、1-6個碳原子的硫代烷氧基和芳基。
本文所用術(shù)語“雜芳基”無論單獨使用或者作為另一種基團的一部分使用，均定義為取代或未取代的芳族雜環(huán)系統(tǒng)(單環(huán)或雙環(huán))。雜芳基可具有例如約3至約50個碳原子(除非另有明確規(guī)定)，優(yōu)選約4至約10個碳原子。在某些實施方案中，雜芳基是具有約4至約14個環(huán)原子的芳族雜環(huán)系統(tǒng)，其包含碳原子和1、2、3或4個選自氧、氮或硫的雜原子。代表性雜芳基為呋喃、噻吩、吲哚、氮雜吲哚、唑、噻唑、異唑、異噻唑、咪唑、N-甲基咪唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、吡咯、N-甲基吡咯、吡唑、N-甲基吡唑、1，3，4-二唑、1，2，4-三唑、1-甲基-1，2，4-三唑、1H-四唑、1-甲基四唑、苯并唑、苯并噻唑、苯并呋喃、苯并異唑、苯并咪唑、N-甲基苯并咪唑、氮雜苯并咪唑、吲唑、喹唑啉、喹啉和異喹啉。雙環(huán)芳族雜芳基包括如下的苯環(huán)、吡啶環(huán)、嘧啶環(huán)或噠嗪(pyridizine)環(huán)，它們(a)稠合到具有一個氮原子的6元芳族(不飽和)雜環(huán)；(b)稠合到具有兩個氮原子的5元或6元芳族(不飽和)雜環(huán)；(c)稠合到具有一個氮原子及一個氧原子或一個硫原子的5元芳族(不飽和)雜環(huán)；或者(d)稠合到具有一個選自O、N或S的雜原子的5元芳族(不飽和)雜環(huán)。具體包括在“雜芳基”定義當中的是被取代的芳族雜環(huán)，例如被1-5個選自以下的取代基取代酰氧基、羥基、?；?、1-6個碳原子的烷基、1-6個碳原子的烷氧基、2-6個碳原子的烯基、2-6個碳原子的炔基、氨基、一個或兩個1-6個碳原子的烷基取代的氨基、氨基酰基、?；被?、疊氮基、氰基、鹵素、硝基、1-6個碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6個碳原子的硫代烷氧基和三鹵甲基。
本文所用的術(shù)語“烷氧基”指基團Ra-O-，其中Ra是如本文定義的烷基。具體包括在“烷氧基”定義當中的是任選取代的烷氧基。
本文所用的術(shù)語“全氟烷基”無論單獨使用或者作為另一種基團的一部分使用，均指具有1至約10個碳原子、優(yōu)選1至約6個碳原子和兩個或更多個氟原子的飽和脂族烴，包括但不限于直鏈或支鏈，如-CF3、-CH2CF3、-CF2CF3和CH(CF3)2。
本文所用的術(shù)語“全氟烷氧基”指基團Ra-O-，其中Ra是如本文定義的全氟烷基。
本文所用的術(shù)語“烷基芳基”無論單獨使用或者作為另一種基團的一部分使用，均指基團-Ra-Rb，其中Ra為被Rb取代的以上定義的芳基，Rb為以上定義的烷基。烷基芳基可任選被取代。
術(shù)語“芳基烷基”或“芳烷基”指基團-Ra-Rb，其中Ra為被Rb取代的以上定義的亞烷基，Rb為以上定義的芳基。優(yōu)選該烷基基團具有1-6個碳原子。芳基烷基部分的實例包括但不限于芐基、1-苯基乙基、2-苯基乙基、3-苯基丙基、2-苯基丙基等。芳基烷基可任選被取代。
本文所用的術(shù)語“芳基烯基”指基團-Ra-Rb，其中Ra為被Rb取代的以上定義的烯基，Rb為以上定義的芳基。芳基烯基可任選被取代。
本文所用的術(shù)語“芳基炔基”指基團-Ra-Rb，其中Ra為被Rb取代的以上定義的炔基，Rb為以上定義的芳基。芳基炔基可任選被取代。
本文所用的術(shù)語“烷基芳基”指基團-Rb-Ra，其中Rb為被Ra取代的以上定義的芳基，Ra為以上定義的烷基。烷基芳基可任選被取代。
本文所用的術(shù)語“烯基芳基”指基團-Rb-Ra，其中Rb為被Ra取代的以上定義的芳基，Ra為以上定義的烯基。烯基芳基可任選被取代。
本文所用的術(shù)語“炔基芳基”指基團-Rb-Ra，其中Rb為被Ra取代的以上定義的芳基，Ra為以上定義的炔基。炔基芳基可任選被取代。
本文所用的術(shù)語“烷?；敝富鶊F-C(＝O)-烷基，其中烷基如上定義。示例性烷?；ǖ幌抻谝阴；?、正丙?；?、正丁?；?、2-甲基丙?；⒄祯；?-甲基丁?；?、3-甲基丁酰基、2，2-二甲基丙?；⒏；凸秕；?。烷酰基的烷基部分可任選被取代。
術(shù)語“芳?；敝隔驶?C(＝O)-芳基，其中芳基如上定義。芳?；姆蓟糠挚扇芜x被取代。示例性芳?；ǖ幌抻诒郊柞；?。
術(shù)語“烷基氨基”指基團Rc-NH-，其中Rc為以上定義的烷基，優(yōu)選具有1-6個碳原子。
術(shù)語“二烷基氨基”指基團-N(C1-C6烷基)2。
術(shù)語“鹵素”指氯、溴、氟和碘。
術(shù)語“治療”指損傷、病理或病癥的改善方面的任何成功標志，包括任何客觀或主觀特征，如減輕；好轉(zhuǎn)；癥狀減少或者使患者更能忍受損傷、病理或病癥；減慢惡化或下降的速率；使惡化終點造成的虛弱較低；或者改進對象的身體和精神安定狀態(tài)。治療或癥狀的改善可基于客觀或主觀參數(shù)；包括身體檢查、神經(jīng)學檢查和/或精神病學評估的結(jié)果?！癙AI-1相關(guān)疾患的治療”包括防止癥狀在對象中發(fā)作(預防性治療)，所述對象可傾向于發(fā)生PAI-1相關(guān)疾患，但尚未經(jīng)歷或顯示所述疾患的癥狀；抑制所述疾患的癥狀(減慢或阻止其發(fā)展)；使所述疾患的癥狀或副作用減輕(包括姑息療法)；和/或解除所述疾患的癥狀(導致恢復)。因此，術(shù)語“治療”包括給予對象本發(fā)明化合物或藥物，以防止、延遲、減輕、阻止或抑制與PAI-1相關(guān)疾患有關(guān)的癥狀或病癥(如與癌癥有關(guān)的腫瘤生長)的發(fā)展。熟練的醫(yī)療從業(yè)人員會知道如何使用標準方法來鑒別需要這種治療的患者，例如通過檢查患者并確定患者是否患有已知與PAI-1水平或活性提高有關(guān)的疾病，或者通過檢測懷疑患PAI-1相關(guān)疾病的個體的血漿或組織中的PAI-1水平，并將懷疑患PAI-1相關(guān)疾病的個體的血漿或組織中的PAI-1水平與健康個體的血漿或組織中的PAI-1水平比較來確定。因此，本發(fā)明尤其提供給予對象本發(fā)明化合物并確定對象中的PAI-1水平的方法。對象中的PAI-1水平可在給予化合物之前和/或之后確定。
在健康個體中，PAI-1在血漿中以低水平存在(例如約5-26ng/mL)，但在許多PAI-1相關(guān)疾患中其水平提高，所述疾患包括例如動脈粥樣硬化(Schneiderman J.等，Proc Natl Acad Sci 896998-7002，1992)、深部靜脈血栓形成(Juhan-Vague I.等，Thromb Haemost 5767-72，1987)和非胰島素依賴性糖尿病(Juhan-Vague I.等，Thromb Haemost 78565-660，1997)。PAI-1使動脈血栓和靜脈血栓穩(wěn)定，分別促成心肌梗塞后的冠狀動脈阻塞(Hamsten A.等，Lancet 23-9，1987)和矯形外科手術(shù)恢復后的靜脈血栓形成(Siemens HJ.等，J.Clin Anesthesia 11622-629，1999)。血漿PAI-1在例如絕經(jīng)后婦女中也升高，已提出其造成此人群中心血管疾病發(fā)生率提高(Koh K等，N Engl J Med 336683-690，1997)。
術(shù)語“PAI-1相關(guān)疾患或疾病”指與PAI-1的表達或活性提高或增強或者PAI-1編碼基因的表達或活性提高或增強有關(guān)的任何疾病或病癥。這種活性或表達提高的實例可包括以下一項或多項蛋白質(zhì)的活性或編碼該蛋白質(zhì)的基因的表達高過正常對象中的水平；蛋白質(zhì)的活性或編碼該蛋白質(zhì)的基因的表達出現(xiàn)于其在正常對象中通常不被檢出的器官、組織或細胞(即蛋白質(zhì)或編碼該蛋白質(zhì)的基因的表達的空間分布發(fā)生改變)；當?shù)鞍踪|(zhì)的活性或編碼該蛋白質(zhì)的基因的表達在器官、組織或細胞中存在的時間比在正常對象中更長時，蛋白質(zhì)的活性或編碼該蛋白質(zhì)的基因的表達提高(即蛋白質(zhì)的活性或編碼該蛋白質(zhì)的基因的表達的持續(xù)時間增加)。正?；蚪】祵ο笫菦]有患PAI-1相關(guān)疾患或疾病的對象。在本發(fā)明的某些實施方案中，相關(guān)疾患與高血糖無關(guān)。與高血糖無關(guān)的PAI-1相關(guān)疾患為，例如，不是由血中葡萄糖水平升高引起的疾患。
術(shù)語“藥物可接受的賦形劑”意指可用于制備藥物組合物的賦形劑，其通常安全、無毒和符合需要，包括獸醫(yī)用途及人類藥物用途可接受的賦形劑。這種賦形劑可以是固體、液體、半固體，或者在氣霧劑組合物情況下是氣體。
“藥物可接受鹽和酯”指藥物可接受且具有所需藥物學性質(zhì)的鹽和酯。這種鹽包括例如化合物中存在的酸性質(zhì)子能夠與無機堿或有機堿反應情況下可形成的鹽。合適的無機鹽包括例如與堿金屬或堿土金屬如鈉、鉀、鎂、鈣和鋁所形成的鹽。合適的有機鹽包括例如與有機堿如胺堿，例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等所形成的鹽。藥物可接受的鹽還可包括母體化合物中的堿性部分(如胺)與無機酸(例如鹽酸和氫溴酸)和有機酸(例如乙酸、檸檬酸、馬來酸及鏈烷磺酸和芳烴磺酸如甲磺酸和苯磺酸)反應所形成的酸加成鹽。藥物可接受的酯包括由化合物中存在的羧基、磺酰氧基、膦酰氧基所形成的酯，如C1-6烷基酯。當存在兩個酸性團時，藥物可接受的鹽或酯可以是單酸單鹽或酯，或者是二鹽或二酯；類似地，當存在兩個以上酸性團時，某些或所有這種基團可成鹽或酯化。本發(fā)明中所命名的化合物可以以未成鹽或未酯化形式存在，或者以成鹽和/或酯化形式存在，這種化合物的命名意在包括原始(未成鹽和未酯化)化合物及其藥物可接受的鹽和酯。而且，本發(fā)明中命名的某些化合物可以以一種以上的立體異構(gòu)體形式存在，這種化合物的命名意在包括所有單個立體異構(gòu)體和這種立體異構(gòu)體的所有混合物(無論外消旋與否)。
表達或活性的“抑制劑”、“激活物”和“調(diào)節(jié)劑”用以分別指用表達或活性的體外和體內(nèi)測定法鑒定的抑制性、激活性或調(diào)節(jié)性分子。本發(fā)明的抑制劑是以下成分，其抑制PAI-1的表達，或者結(jié)合、部分或完全阻斷刺激、降低、防止、延遲激活、失活、脫敏或負調(diào)節(jié)PAI-1的活性。包含PAI-1的樣品或化驗物可用本發(fā)明組合物處理，并與無本發(fā)明組合物的對照樣品比較?？芍付▽φ諛悠?不經(jīng)本發(fā)明組合物處理)的相對活性值為100％。在某些實施方案中，當PAI-1相對于對照樣品的活性值為約80％或更低，任選50％、25％、10％、5％或1％時，實現(xiàn)PAI-1的抑制。
術(shù)語“藥物可接受的”、“生理可耐受的”及它們的語法變化形式當指組合物、載體、稀釋劑和試劑時可互換使用，表示能將所述材料給予人，而不產(chǎn)生會妨礙給予化合物的程度的不需要生理效果，如惡心、暈眩、胃部不適等。
“治療有效量”或“藥物有效量”意指當給予對象時產(chǎn)生給予其所要獲得的效果的量。例如，“治療有效量”當給予對象以抑制PAI-1活性時，足以抑制PAI-1活性?！爸委熡行Я俊碑斀o予對象以治療疾病時，足以實現(xiàn)所述疾病的治療。
除非有所指明，術(shù)語“對象”或“患者”可互換使用，指哺乳動物如人患者和非人靈長目動物，以及實驗動物如兔、大鼠和小鼠及其他動物。因此，本文所用的術(shù)語“對象”或“患者”意指可給予本發(fā)明化合物的任何哺乳動物患者或?qū)ο蟆Ｔ诒景l(fā)明的示例性實施方案中，為鑒別對象患者以按本發(fā)明方法進行治療，采用公認的篩選方法來確定與目標或懷疑疾病或病癥有關(guān)的風險因素，或者確定對象中現(xiàn)有疾病或病癥的狀態(tài)。這些篩選方法包括例如用以確定可能與目標或懷疑疾病或病癥有關(guān)的風險因素的常規(guī)病情檢查。這些和其他常規(guī)方法使得臨床醫(yī)生可以挑選出需要使用本發(fā)明方法和制劑治療的患者。在本發(fā)明的某些實施方案中，待用本發(fā)明方法治療的對象沒有高血糖和/或高血糖導致的疾病。確定對象是否具有高血糖的方法是本領(lǐng)域已知的，包括例如，進行測定血中葡萄糖水平的葡萄糖測試?？捎糜跍y定血中葡萄糖過高水平存在的兩種示例性測試包括，禁食過夜后測定血中葡萄糖量的測試和飲用高葡萄糖測試物后測定身體處理存在的過量糖的能力的測試。典型地，具有約64至約110mg/dl的禁食糖水平(禁食過夜后的糖水平)的對象沒有高血糖，而具有大于110mg/dl的禁食糖水平的人具有升高的血糖水平。至少兩個場合下大于約140mg/dl的值通常象征該對象具有糖尿病。在某些實施方案中，待用本發(fā)明方法治療的對象不需要用白三烯拮抗劑治療。
當任何變量在任何組分或在任何式中出現(xiàn)一次以上時，其每次出現(xiàn)時的定義獨立于其在其他每次出現(xiàn)時的定義。取代基和/或變量的組合只有在這種組合導致出現(xiàn)穩(wěn)定化合物時才是允許的。
B.取代的雜芳基苯并呋喃酸本發(fā)明提供取代的雜芳基苯并呋喃酸。優(yōu)選給予這種衍生物來抑制對象中的PAI-1表達或活性，并最終用于治療疾病或病癥，包括與對象中PAI-1活性提高有關(guān)的疾病或病癥，例如PAI-1相關(guān)疾患。
取代的雜芳基苯并呋喃酸包括下式的化合物 式1其中R、R1、R2和R3獨立為氫、烷基、環(huán)烷基、烷?；?、鹵素、羥基、芳基、全氟烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基或全氟烷氧基；R4為氫、烷基、全氟烷基、烯基、炔基、芳基烯基、芳基炔基、芳基、-C(＝O)R5、-C(＝S)R5、-CH2R5或-CH(OH)R5；R5為氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、全氟烷基、芳基、烯基、炔基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、烷基芳基、烯基芳基或炔基芳基；R6為氫、烷基、芳基或芳基烷基；
x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8獨立為碳或氮，其中至少x1-x8之一為氮原子；n為0-6的整數(shù)；A為COOH或酸模擬物。
本發(fā)明的化合物也包括式1的前體藥物、立體異構(gòu)體或者藥物可接受的鹽或酯形式。
在本發(fā)明的某些示例性化合物中，R和R1為氫，R4為氫、烷基或芳基。在某些優(yōu)選的實施方案中，R和R1為氫，R4為氫、C5烷基或苯基。在這種實施方案中，R2、R3、R5、R6、n、A以及x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8如本文對式1化合物的定義。
在某些示例性式1化合物中，R2和R3獨立為氫或全氟烷基。在某些優(yōu)選的實施方案中，R2和R3獨立為氫或CF3。在這種實施方案中，R、R1、R4、R5、R6、n、A以及x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8如本文對式1化合物的定義。
A可為COOH或酸模擬物。在某些優(yōu)選的式1化合物實施方案中，A為COOH或四唑。在這種實施方案中，R、R1、R2、R3、R4、R5、R6、n以及x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8如本文對式1化合物的定義。
在本發(fā)明的某些優(yōu)選化合物中，R6為氫。在這種實施方案中，R、R1、R2、R3、R4、R5、n、A以及x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8如本文對式1化合物的定義。
在式1化合物的示例性實施方案中，R4為全氟烷基、烯基、芳基烯基、芳基、-C(＝O)R5、-C(＝S)R5、-CH3R5或-CH2(OH)R5，R、R1、R2、R3、R5、R6、n、A以及x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8如本文對式1化合物的定義。
在其它實施方案中，本發(fā)明的取代的雜芳基苯并呋喃酸包括下式的化合物
式2其中R、R1、R2和R3獨立為氫、烷基、環(huán)烷基、烷酰基、鹵素、羥基、芳基、全氟烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基或全氟烷氧基；R4為氫、烷基、全氟烷基、烯基、炔基、芳基烯基、芳基炔基、芳基、-C(＝O)R5、-C(＝S)R5、-CH2R5或-CH(OH)R5；R5為氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、全氟烷基、芳基、烯基、炔基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、烷基芳基、烯基芳基或炔基芳基；R6為氫、烷基、芳基或芳基烷基；x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8獨立為碳或氮，其中至少x1-x8之一為氮原子；A為酸模擬物。
本發(fā)明的化合物也包括式2的前體藥物、立體異構(gòu)體或者藥物可接受的鹽或酯形式。
在某些示例性式2化合物中，R和R1為氫，R4為氫、烷基或芳基。在某些優(yōu)選的實施方案中，R和R1為氫，R4為氫、C5或苯基。在這種實施方案中，R2、R3、R5、R6、A以及x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8如本文對式2化合物的定義。
在某些示例性式2化合物中，R2和R3獨立為氫或全氟烷基。在某些優(yōu)選的實施方案中，R2和R3獨立為氫或CF3。在這種實施方案中，R、R1、R4、R5、R6、A以及x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8如本文對式2化合物的定義。
在某些式2化合物的優(yōu)選實施方案中，A為四唑。在這種實施方案中，R、R1、R2、R3、R4、R5、R6以及x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8如本文對式2化合物的定義。
在式2化合物的示例性實施方案中，R4為全氟烷基、烯基、芳基烯基、芳基、-C(＝O)R5、-C(＝S)R5、-CH3R5或-CH2(OH)R5，R、R1、R2、R3、R5、R6、n、A以及x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8如本文對式2化合物的定義。
本發(fā)明示例性取代的雜芳基苯并呋喃酸包括但不限于，6-(1-苯并呋喃-2-基)-2-(三氟甲基)喹啉-4-基1H-四唑-5-基甲基醚或其藥物可接受的鹽或酯形式；6-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-4-(1H-四唑-5-基甲氧基)-2-(三氟甲基)-喹啉或其藥物可接受的鹽或酯形式；5-(1-苯并呋喃-2-基)-8-(1H-四唑-5-基甲氧基)喹啉或其藥物可接受的鹽或酯形式；5-(3-苯基-1-苯并呋喃-2-基)-8-喹啉基1H-四唑-5-基甲基醚或其藥物可接受的鹽或酯形式；5-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-8-(1H-四唑-5-基甲氧基)喹啉或其藥物可接受的鹽或酯形式。
本發(fā)明還提供包含取代的雜芳基苯并呋喃酸的組合物，包括式1和2的化合物或其立體異構(gòu)體或藥物可接受鹽，以及一種或多種藥物可接受載體、賦形劑或稀釋劑。這種組合物包括用以治療或控制與PAI-1活性提高有關(guān)的疾病狀態(tài)或病癥的藥物組合物。在某些實施方案中，所述組合物包含一種或多種取代的雜芳基苯并呋喃酸的混合物。
某些式1和2化合物含有手性(stereogenic)碳原子或其他手性(chiral)元素，因此產(chǎn)生立體異構(gòu)體，包括對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體。本發(fā)明包括式1和2的所有立體異構(gòu)體以及異構(gòu)體的混合物。在本申請當中，在未標示非對稱中心的絕對構(gòu)型的情況下，產(chǎn)物的名稱意在包括單個立體異構(gòu)體以及立體異構(gòu)體的混合物。當有必要使對映異構(gòu)體相互區(qū)別和與外消旋物相區(qū)別時，使用旋光性符號[(+)、(-)和(±)]。此外，在本中請當中，采用化學文摘(Chemical Abstracts)慣例，用標記R*和S*表示相對立體化學，所述慣例自動將R*分配給編號最低的非對稱中心。
在優(yōu)選某對映異構(gòu)體的情況下，它在某些實施方案中可以以基本無對應的對映異構(gòu)體的形式提供。因此，基本無對應的對映異構(gòu)體的某對映異構(gòu)體指這樣的化合物，其是通過分離技術(shù)分離成，或者被制備成無相應的對映異構(gòu)體。本文所用的“基本無”意指化合物由明顯較大比例的一種對映異構(gòu)體組成。在優(yōu)選的實施方案中，化合物由至少約90％(重量)的優(yōu)選對映異構(gòu)體組成。在本發(fā)明的其他實施方案中，化合物由至少約99％(重量)的優(yōu)選對映異構(gòu)體組成。可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的任何方法，包括高效液相色譜(HPLC)和手性鹽的形成和結(jié)晶，從外消旋混合物單離出優(yōu)選的對映異構(gòu)體，或者可通過本文描述的方法來制備優(yōu)選的對映異構(gòu)體。制備優(yōu)選的對映異構(gòu)體的方法描述于例如Jacques等，Enantiomers，Racemates andResolutions(Wiley Interscience，New York，1981)；Wilen，S.H.等，Tetrahedron 332725(1977)；Eliel，E.L.Stereochemistry of CarbonCompounds(McGraw-Hill，NY，1962)；和Wilen，S.H.Tables ofResolving Agents and Optical Resolutions，第268頁(E.L.Eliel編輯，Univ.of Notre Dame Press，Notre Dame，IN 1972)。
本文化合物的示例性鹽形式包括但不限于鈉鹽和鉀鹽。這些化合物的其他示例性鹽形式包括但不限于與本領(lǐng)域公知的藥物可接受無機堿和有機堿形成的鹽形式。用無機堿制備的鹽形式包括治療上可接受的堿金屬或堿土金屬如鈉、鉀、鎂、鈣等的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽。可接受的有機堿包括胺如芐胺、一烷基胺、二烷基胺和三烷基胺(優(yōu)選具有1-6個碳原子，更優(yōu)選1-3個碳原子的烷基的一烷基胺、二烷基胺和三烷基胺)，如甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、二乙胺、三乙胺、一乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺。示例性的鹽還包括含最多6個碳原子的烷撐二胺，如六亞甲基二胺；含最多6個碳原子的環(huán)狀飽和或不飽和堿，包括吡咯烷、哌啶、嗎啉、哌嗪和它們的N-烷基和N-羥基烷基衍生物，如N-甲基-嗎啉和N-(2-羥乙基)-哌啶或吡啶。也可形成季胺鹽，例如四烷基形式如四甲基形式、烷基-鏈烷醇形式，如甲基-三乙醇或三甲基-一乙醇形式，及環(huán)狀銨鹽形式如N-甲基吡啶、N-甲基-N-(2-羥乙基)-嗎啉、N，N-二甲基嗎啉、N-甲基-N-(2-羥乙基)-嗎啉或N，N-二甲基-哌啶鹽形式?？捎檬?和2的酸性化合物和本領(lǐng)域公知的方法，來制備這些鹽形式。
本發(fā)明化合物的示例性酯形式包括但不限于具有1-6個碳原子的直鏈烷基酯或者含有1-6個碳原子的支鏈烷基酯，包括甲酯、乙酯、丙酯、丁酯、2-甲基丙酯、1，1-二甲基乙酯、環(huán)烷基酯、烷基芳基酯、芐酯等。其他示例性的酯包括但不限于式-COOR10的酯，其中R10選自下式 其中R11、R12、R13、R14獨立選自氫、1-10個碳原子的烷基、6-12個碳原子的芳基、6-12個碳原子的芳基烷基；雜芳基或烷基雜芳基，其中雜芳基環(huán)與1-6個碳原子的烷基鏈連接。
1.本發(fā)明的酸和酸模擬物定義為給質(zhì)子或給氫基團。本發(fā)明的示例性酸模擬物包括本領(lǐng)域已知的藥學有用的羧酸和酸模擬物，如R.Silverman，The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action，Academic Press(1992)和其它中所述。示例性酸模擬物包括四唑、特窗酸、酰基特窗酸或具有下式的基團
其中R15為C1-C6烷基、C2-C6烯基、C3-C6環(huán)烷基、-CH2-(C3-C6環(huán)烷基)、C3-C6環(huán)烯基、-CH2-(C3-C6環(huán)烯基)、任選取代的芳基或雜芳基、任選取代的芳基(C1-C6)烷基或雜芳基(C1-C6)烷基，其中芳基和雜芳基如本文的定義。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物抑制PAI-1活性。因此，所述化合物可用以治療(包括防止、抑制和/或改善)對象中的PAI-1相關(guān)疾患，包括例如用以治療非胰島素依賴性糖尿病，用以治療心血管疾病和用以治療與冠狀動脈和腦血管疾病有關(guān)的血栓事件。熟練的醫(yī)療從業(yè)人員使用本發(fā)明的方法，會知道如何將取代的雜芳基苯并呋喃酸衍生物(包括式1和2所示的)給予患有任何與PAI-1活性或表達增高有關(guān)的疾病(例如糖尿病或心血管疾病)的患者，以實現(xiàn)該疾病的治療。
在一個示例性的實施方案中，給予患者取代的雜芳基苯并呋喃酸，以治療涉及血栓和前血栓狀態(tài)的疾病過程，所述疾病過程包括但不限于動脈粥樣硬化斑塊的形成、靜脈和動脈血栓形成、心肌缺血、心房纖維性顫動、深部靜脈血栓形成、凝固綜合征、肺血栓形成、腦血栓形成、外科手術(shù)(關(guān)節(jié)或髖置換術(shù))的血栓栓塞并發(fā)癥和外周動脈阻塞。
可用取代的雜芳基苯并呋喃酸治療與對象中PAI-1活性或表達增高有關(guān)的任何疾病或病癥。示例性的疾病和病癥包括中風，例如與心房纖維性顫動有關(guān)或由其引起的中風；與胞外基質(zhì)積累有關(guān)的疾病，包括但不限于腎纖維變性、慢性阻塞性肺病、多囊卵巢綜合征、再狹窄、腎血管疾病和器官移植排斥；與新血管生成有關(guān)的疾病，包括但不限于糖尿病性視網(wǎng)膜?。话柎暮Ｄ?，例如由對象中纖溶酶濃度水平提高或正常化引起；骨髓纖維化伴髓樣化生，例如由調(diào)節(jié)間質(zhì)細胞增生和胞外基質(zhì)蛋白增加引起。
本發(fā)明化合物可用于治療，例如，糖尿病性腎病和由腎病引起的腎透析；惡性腫瘤或癌癥，包括但不限于白血病、乳腺癌和卵巢癌；腫瘤，包括但不限于脂肉瘤和上皮瘤；敗血?。环逝职Y；胰島素抗性；增殖性疾病，包括但不限于牛皮癬；與異常凝固平衡有關(guān)的病癥；低等級血管炎癥；腦血管疾病；高血壓；癡呆；骨質(zhì)疏松癥；關(guān)節(jié)炎；呼吸道疾病，如哮喘；心力衰竭；心律失常；絞痛，包括但不限于心絞痛；動脈粥樣硬化及后遺癥；腎衰竭；多發(fā)性硬化；骨質(zhì)疏松癥；骨量減少；癡呆；外周血管疾??；外周動脈疾病；急性血管綜合征；微血管疾病，包括但不限于腎病、神經(jīng)病、視網(wǎng)膜病和腎病綜合征；高血壓；I型和II型糖尿病及相關(guān)疾病；高血糖癥；高胰島素血癥；惡性病變；惡化前病變；胃腸惡性腫瘤；冠心病，包括但不限于心肌梗塞的一級和二級預防、穩(wěn)定性和非穩(wěn)定性絞痛、冠狀事件的一級預防和心血管事件的二級；和炎性疾病，包括但不限于敗血癥性休克和與感染有關(guān)的血管損害。
本發(fā)明的化合物也可與第二治療藥物組合給予對象，或者與其他療法組合給予對象，所述第二治療藥物包括但不限于促血栓溶解藥物、纖維蛋白溶解藥物和抗凝藥物，所述其他療法例如包含蛋白酶抑制劑的高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療(HAART)，其用以治療HIV-1感染患者的纖維蛋白溶解損害和過高凝固性引起的疾病。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物可與涉及維持血管開放的過程或方法聯(lián)合給予，和/或在其之后給予，所述過程或方法包括血管外科手術(shù)、血管移植和支架開放、器官、組織和細胞的植入和移植。本發(fā)明的化合物也可用以處理透析中使用的血液和血液制品、液相的血液儲藏，尤其用于活體外血小板聚集。也可將本發(fā)明的化合物給予對象，以作為激素替代藥物，或者減少炎性標記或C活性蛋白?？山o予所述化合物，以改善凝固平衡、改善內(nèi)皮功能或者局部應用于傷口愈合，例如防止結(jié)疤。可將本發(fā)明的化合物給予對象，以降低進行心肌血管重建術(shù)的風險。也可在醫(yī)院裝置中分析血液化學時將本發(fā)明的化合物加入到人血漿中，以確定其纖維蛋白溶解能力。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物可用作造影劑，以鑒定轉(zhuǎn)移性癌。
C.取代的雜芳基苯并呋喃酸的合成可由有機合成領(lǐng)域的技術(shù)人員采用常規(guī)方法制備本發(fā)明的化合物，該常規(guī)方法利用容易得到的試劑和原料?？捎靡韵潞铣闪鞒讨苽浔景l(fā)明的代表性化合物。熟練專業(yè)人員會知道如何利用這些過程步驟的變化形式，所述變化形式本身是本領(lǐng)域公知的。
在本發(fā)明的某些實施方案中，取代的雜芳基苯并呋喃酸可用流程1來制備流程1
其中R2、R3和R4如上文對式1或2的定義，R8為氫、烷基、環(huán)烷基、全氟烷基、烯基、炔基、芳基烯基、芳基炔基或芳基。
在流程I中，鹵素-羥基-喹啉2與甲基碘在DMF中堿性條件下的反應獲得甲基醚2a。2a與苯并呋喃硼酸在Pd(OAc)2、KF和2-(二叔丁基膦基)-聯(lián)苯存在下在溶劑如THF(J.P.Wolfe；S.L.Buchwald.Angew.Chem.Int.Ed.，38，1999，2413-2416)中偶聯(lián)，獲得化合物3。苯并呋喃的3位用溴在乙酸鈉存在下在乙酸中溴化，獲得溴代苯并呋喃衍生物4。4與1-烯烴在標準Heck反應條件下偶聯(lián)，然后氫化，獲得烷基苯并呋喃衍生物5?；衔?轉(zhuǎn)化為所需衍生物1a分三步進行。使用堿如碳酸鉀或碳酸銫在溶劑如丙酮中用溴乙腈進行烷基化，獲得相應的腈。通過在氯化銨存在下在溶劑如DMF中，在80-100℃的溫度下與疊氮化鈉反應，將腈轉(zhuǎn)化為四唑衍生物1a?；蛘撸宕讲⑦秽苌?與芳基硼酸反應，獲得芳基苯并呋喃衍生物6，其被轉(zhuǎn)化為所需的衍生物1b。
D.取代的雜芳基苯并呋喃酸作為藥物組合物本發(fā)明提供取代的雜芳基苯并呋喃酸作為藥品。在優(yōu)選的實施方案中，取代的雜芳基苯并呋喃酸配制成藥品，用以例如通過抑制對象中的PAI-1活性治療與PAI-1活性增高有關(guān)的疾病。
一般來說，可通過本領(lǐng)域公知的任何給予治療性藥物的方法，包括口服、口腔內(nèi)、局部、全身(例如透皮、鼻內(nèi)或通過栓劑)或胃腸外(例如肌內(nèi)、皮下或靜脈內(nèi)注射)給藥，將取代的雜芳基苯并呋喃酸作為藥物組合物給予。組合物可采取片劑、丸劑、膠囊劑、半固體劑、散劑、緩釋劑型、溶液劑、混懸劑、乳劑、糖漿劑、酏劑、氣霧劑或任何其他適當組合物的形式；包含至少一種本發(fā)明化合物與至少一種藥物可接受賦形劑的組合。合適的賦形劑是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的，它們及配制組合物的方法可在標準參考資料例如Alfonso ARRemington′s Pharmaceutical Sciences，第17版，MackPublishing Company，Easton PA，1985中找到。合適的液體載體(特別是用于可注射溶液)包括水、鹽水溶液、葡萄糖水溶液和乙二醇。在本發(fā)明的一些實施方案中，適合用于實施本發(fā)明的取代的雜芳基苯并呋喃酸將單獨給予，或者與至少一種本發(fā)明的其他化合物組合給予。適合用于實施本發(fā)明的取代的雜芳基苯并呋喃酸也可與至少一種用于待治療疾病的其他常規(guī)治療性藥物一起給予。
本發(fā)明的含水混懸劑可含有雜芳基苯并呋喃酸，其與適合于生產(chǎn)含水混懸劑的賦形劑混合。這種賦形劑可包括懸浮劑如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃芪膠和阿拉伯膠，以及分散劑或濕潤劑如天然磷脂(例如卵磷脂)、環(huán)氧烷與脂肪酸的縮合產(chǎn)物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物(例如十七乙烯氧基鯨蠟醇)、源自脂肪酸和己糖醇的偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物(例如聚氧乙烯山梨醇單油酸酯)或衍自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物(例如聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯)。含水混懸劑還可含有一種或多種防腐劑如對羥基苯甲酸乙酯或正丙酯、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑及一種或多種甜味劑如蔗糖、阿司帕坦或糖精?？烧{(diào)節(jié)配方的摩爾滲透壓濃度。
可通過將雜芳基苯并呋喃酸懸浮于植物油如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油中，或者懸浮于礦物油如液狀石蠟中，或者懸浮于它們的混合物中，來配制油混懸劑。所述油混懸劑可含有增稠劑如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇?？杉尤胩鹞秳┤绺视?、山梨醇或蔗糖，以提供可口的口服配方?？赏ㄟ^添加抗氧化劑如抗壞血酸來保存這些制劑。作為可注射油載體(vehicle)的一個實例，參見Minto，J.Pharmacol.Exp.Ther.28193-102，1997。本發(fā)明的藥物制劑也可為水包油乳劑的形式。油相可以是上述植物油或礦物油或它們的混合物。合適的乳化劑包括天然樹膠如阿拉伯膠和黃芪膠、天然磷脂如大豆卵磷脂、衍自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯如山梨醇酐單油酸酯及這些偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物如聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯。如在糖漿劑和酏劑的制劑中一樣，乳劑也可含有甜味劑和矯味劑。這種制劑也可含有緩和劑、防腐劑或著色劑。
選擇的化合物可單獨或與其他合適的成分組合，制成氣霧劑制劑(即它們可“霧化”)，以供吸入給藥?？蓪忪F劑制劑置于加壓的可接受推進劑中，如二氯二氟甲烷、丙烷、氮氣等。
適合胃腸外給藥如通過關(guān)節(jié)內(nèi)(在關(guān)節(jié)中)、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)和皮下途徑給藥的制劑，包括含水和非水等滲無菌注射溶液劑，其可含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和使制劑與預定接受者的血液等滲的溶質(zhì)，還包括含水和非水等滲無菌混懸劑，其可包含懸浮劑、增溶劑、增稠劑、穩(wěn)定劑和防腐劑?？梢圆捎玫目山邮茌d體和溶劑當中有水和林格氏液(一種等滲氯化鈉溶液)。此外，可按常規(guī)將無菌不揮發(fā)油用作溶劑或懸浮介質(zhì)。對于此目的，可使用溫和的不揮發(fā)油，包括合成的甘油一酯或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸同樣可用于注射劑的制備。這些溶液是無菌的，通常不含不需要的物質(zhì)。在化合物充分可溶的情況下，可使用或不使用合適的有機溶劑如丙二醇或聚乙二醇，將它們直接溶解在普通鹽水中?？稍诘矸刍螋燃谆w維素鈉水溶液中，或者在合適的油如花生油中，制成微細化合物的分散劑。這些制劑可通過常規(guī)的公知滅菌技術(shù)滅菌。所述制劑可含有為接近生理條件所需的藥物可接受輔助物質(zhì)，如pH調(diào)節(jié)劑和緩沖劑、毒性調(diào)節(jié)劑，例如乙酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、乳酸鈉等。這些制劑中取代的雜芳基苯并呋喃酸的濃度可有很大變化，主要根據(jù)液體體積、粘度、體重等，依照所選擇的具體給藥方式和患者的需要來加以選擇。對于靜脈內(nèi)給藥，制劑可以是無菌可注射制品，如無菌可注射含水或含油混懸劑?？砂凑展募夹g(shù)，使用合適的分散劑或濕潤劑和懸浮劑，來配制這種混懸劑。無菌可注射制品也可以是在無毒胃腸外可接受稀釋劑或溶劑如1，3-丁二醇中的無菌可注射溶液劑或混懸劑。推薦的制劑可在單位劑量或多重劑量密閉容器如安瓿和小瓶中提供。
可從上述種類的無菌散劑、顆粒劑和片劑制備注射溶液劑和混懸劑。
適合用于實施本發(fā)明的取代的雜芳基苯并呋喃酸可口服給予。取決于組合物的類型、單位劑量的大小、賦形劑的種類和本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的其他因素，組合物中的本發(fā)明化合物的量可有很大變化。一般來說，最終組合物可包含例如0.000001重量百分比(％w)至10％w的取代的雜芳基苯并呋喃酸，優(yōu)選0.00001％w至1％w，其余的是一種或多種賦形劑。
可用本領(lǐng)域公知的藥物可接受載體以適合于口服給藥的劑量配制供口服給藥的藥物制劑。這種載體使得藥物制劑能夠配制成適合由患者咽下的單位劑量形式，如片劑、丸劑、散劑、糖衣劑、膠囊劑、液體劑、錠劑、凝膠劑、糖漿劑、漿液劑、混懸劑等。適合口服給藥的制劑可由以下組成(a)液體溶液劑，如懸浮于稀釋劑如水、鹽水或PEG 400的有效量的包裝核酸；(b)膠囊劑、扁囊劑或片劑，各含有預定量的活性成分，如液體、固體、顆?；蛎髂z；(c)適當?shù)囊后w中的混懸劑；和(d)合適的乳劑。
可如下獲得供口服使用的藥物制品將本發(fā)明的化合物與固體賦形劑合并，任選碾磨所得的混合物，并在加入合適的另外化合物后(如需要)，加工顆?；旌衔?，以獲得片劑或糖衣劑核心。合適的固體賦形劑是碳水化合物或蛋白質(zhì)填充劑，包括但不限于糖類，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；來自玉米、小麥、大米、馬鈴薯或其他植物的淀粉；纖維素，如甲基纖維素、羥甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉；樹膠，包括阿拉伯膠和黃芪膠；以及蛋白質(zhì)如明膠和膠原。如需要，可加入崩解劑或增溶劑，如交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、海藻酸或其鹽如海藻酸鈉。片劑形式可包含乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、磷酸鈣、玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、微晶纖維素、明膠、膠體二氧化硅、滑石粉、硬脂酸鎂、硬脂酸中的一種或多種，以及其他賦形劑、著色劑、填充劑、黏合劑、稀釋劑、緩沖劑、增濕劑、防腐劑、矯味劑、染劑、崩解劑和藥物相容性載體。錠劑形式可包含活性成分于矯味劑如蔗糖中，以及軟錠劑包含活性成分于惰性基質(zhì)中，所述惰性基質(zhì)如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠乳狀液、凝膠等，其除含有活性成分外，還含有本領(lǐng)域公知的載體。
本發(fā)明的取代的雜芳基苯并呋喃酸也可以以供直腸給藥的栓劑形式給予?？赏ㄟ^將藥物與在常溫下為固體但在直腸溫度下為液體從而會在直腸中熔化釋放出藥物的合適非刺激性賦形劑混合，來制備這些制劑。這種材料為可可脂和聚乙二醇。
本發(fā)明的化合物也可通過鼻內(nèi)、眼內(nèi)、陰道內(nèi)和直腸內(nèi)途徑給予，包括栓劑、吸入劑、散劑和氣霧劑制劑(有關(guān)類固醇吸入劑的實例參見Rohatagi，J.Clin.Pharmacol.351187-1193，1995；Tjwa，Ann.Allergy Asthma Immunol.75107-111，1995)。
本發(fā)明的取代的雜芳基苯并呋喃酸可配制成施用棒、溶液劑、混懸劑、乳劑、凝膠劑、霜劑、軟膏劑、糊劑、膠凍劑、涂劑、散劑和氣霧劑，通過局部途徑透皮遞藥。
膠囊材料也可與本發(fā)明的化合物一起使用，術(shù)語“組合物”意在包括與膠囊材料組合作為制劑的活性成分，含有或不含其他載體。例如，本發(fā)明的化合物也可作為微球體遞藥，以供在體內(nèi)緩慢釋放。在一個實施方案中，微球體可通過皮內(nèi)注射在皮下緩慢釋放的含藥物微球體來給予(參見Rao，J.Biomater Sci.Polym.Ed.7623-645，1995)；作為生物可降解和可注射的凝膠劑制劑來給予(參見例如Gao，Pharm Res.12857-863，1995)；或者作為供口服給藥的微球體來給予(參見例如Eyles，J.Pharm Pharmacol.49669-674，1997)。透皮和皮內(nèi)途徑均提供幾個星期或幾個月的恒定遞藥。也可將扁囊劑用于本發(fā)明化合物的遞藥，例如抗動脈粥樣硬化藥物。
在另一個實施方案中，可通過使用與細胞膜融合或被胞吞的脂質(zhì)體來遞送本發(fā)明的化合物，所述作用即通過使用連接脂質(zhì)體或直接連接寡核苷酸的配體，配體結(jié)合細胞的表面膜蛋白受體而導致胞吞。通過使用脂質(zhì)體，特別是在脂質(zhì)體表面攜帶靶細胞特異性的配體或者優(yōu)先導向具體器官的配體的情況下，可使化合物的遞送集中于體內(nèi)靶細胞。(參見例如Al-Muhammed，J.Microencapsul.13293-306，1996；Chonn，Curr.Opin.Biotechnol.6698-708，1995；Ostro，Am.J.Hosp.Pharm.461576-1587，1989)。
在其他情況下，優(yōu)選的制品可以是以下中的凍干粉1mM-50mM組氨酸、0.1％-2％蔗糖、2％-7％甘露醇、pH范圍4.5-5.5，其臨用前與緩沖劑合并。
本發(fā)明的藥物組合物除含有取代的雜芳基苯并呋喃酸之外，還任選含有至少一種可用于治療與PAI-1活性提高有關(guān)的疾病或病癥的其他治療性藥物。
藥物組合物通常配制成無菌的基本等滲的組合物，且完全符合美國食品與藥物管理局的所有生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)條例。
E.確定取代的雜芳基苯并呋喃酸的給藥方案本發(fā)明提供使用取代的雜芳基苯并呋喃酸來抑制哺乳動物中的PAI-1活性，以治療與PAI-1活性提高有關(guān)的疾病和病癥的方法。
對于治療目的，本文公開的組合物或化合物可以以單一大劑量遞送形式通過長時間連續(xù)遞送(例如連續(xù)透皮、粘膜或靜脈內(nèi)遞送)給予對象，或者按多次給藥方案(例如通過每小時、每日或每周多次給藥方案)給予對象。本發(fā)明的藥物制劑可例如每日給予一次或多次，每周給予3次或1次。在本發(fā)明的示例性實施方案中，本發(fā)明的藥物制劑每日一次或兩次口服給予。
就此而論，生物活性劑的治療有效劑量可包括長期治療方案當中的多次劑量，其會產(chǎn)生臨床上顯著的效果，以減輕與PAI-1活性提高有關(guān)的一種或多種癥狀或可檢測病癥。這種情況下有效劑量的確定通?；趧游锬Ｐ脱芯考半S后的人體臨床試驗，通過確定顯著降低對象中目標暴露癥狀或病癥的發(fā)生或嚴重性的有效劑量和給藥方案來指導。在這方面，合適的模型包括例如鼠、大鼠、豬、貓、非人靈長目動物和本領(lǐng)域公知的其他公認動物模型對象。另外，有效劑量也可用體外模型(例如免疫學和組織病理學試驗)來確定。使用這種模型，通常只需要進行一般計算和調(diào)整即可確定給予治療有效量(例如引起所需反應的鼻內(nèi)有效量、透皮有效量、靜脈內(nèi)有效量或肌肉內(nèi)有效量)的生物活性劑的適當濃度和劑量。在替代性實施方案中，對于治療目的或診斷目的，生物活性劑的“有效量”或“治療有效量”將只是抑制或提高上文所述的與疾病或病癥相關(guān)的一種或多種所選生物活性。
當然，生物活性劑的實際劑量將根據(jù)例如對象的暴露程度及具體狀態(tài)(例如對象的年齡、大小、健康情況、癥狀的程度、敏感性因素等)、給藥時間與途徑以及同時給予的其他藥物或治療而變化?？烧{(diào)整劑量方案，以提供最佳的預防或治療反應。本文所說的“治療有效量”是指產(chǎn)生給予其所要獲得的效果的量。更具體的說，本發(fā)明化合物的治療有效量優(yōu)選減輕與PAI-1活性提高有關(guān)的疾病的癥狀、并發(fā)癥或生化指征。準確劑量將決定于治療的目的，并可由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用公知的技術(shù)來確定(參見例如Lieberman，Pharmaceutical Dosage Forms(第1-3卷，1992)；Lloyd，1999，The Art，Science，and Technology of Pharmaceutical Compounding；和Pickar，1999，Dosage Calculations)。治療有效量也是這樣的劑量，其中以臨床觀點來看，活性劑的治療有益效果超過其任何有毒或有害的副作用。還要指出的是，對于每個特定對象，應根據(jù)對象個體的需要和化合物給予的執(zhí)行或監(jiān)督人員的專業(yè)判斷，來隨時評估和調(diào)整具體的劑量方案。
在本發(fā)明的一個示例性實施方案中，為標準的給藥方案制備化合物的單位劑量形式。這樣，可在醫(yī)師指導下容易地將組合物再分成更小的劑量。例如，將可單位劑量制備成包裝的散劑、小瓶或安瓿，優(yōu)選為膠囊劑或片劑形式。根據(jù)患者的具體需要，這些組合物單位劑量形式中的活性化合物可以以，例如約一克至約十五克或更多的量存在，以供每日單次或多次給藥。通過以約一克的最低日劑量開始治療方案，可利用對PAI-1的血液水平和患者癥狀減輕的分析，來確定是否表明需要更大或更小的劑量?？梢砸岳缂s0.1mg/kg/日至約1,000mg/kg/日的口服劑量，進行本發(fā)明化合物的有效給藥。優(yōu)選以約10/mg/kg/日至約600mg/kg/日，更優(yōu)選以約25至約200mg/kg/日，甚至更優(yōu)選以約50mg/kg/日至約100mg/kg/日進行給藥。在某些實施方案中，提供約1/mg/kg至約250mg/kg的日劑量。
在某些實施方案中，本發(fā)明涉及式1和2化合物的前體藥物。本文所用的術(shù)語“前體藥物”意指可在體內(nèi)通過代謝途徑(例如通過水解)轉(zhuǎn)化為式1和2化合物的化合物。各種形式的前體藥物為本領(lǐng)域所公知，例如在以下文獻中討論的前體藥物Bundgaard(編輯)，Design of Prodrugs，Elsevier(1985)；Widder等(編輯)，Methods inEnzymology，第4卷，Academic Press(1985)；Krogsgaard-Larsen等(編輯).“Design and Application of Prodrugs，Textbook of Drug Design andDevelopment，第5章，113-191(1991)，Bundgaard等，Journal of DrugDelivery Reviews，81-38(1992)，Bundgaard，J.of PharmaceuticalSciences，77285以及下列等等(1988)；及Higuchi和Stella(編輯)Prodrugs as Novel Drug Delivery Systems，American Chemical Society(1975)。
F.藥盒包含取代的雜芳基苯并呋喃酸藥物在合適的載體中配制后，可裝入適當?shù)娜萜髦?，并標記為用以治療PAI-1相關(guān)疾患，例如白血病。另外，也可將包含至少一種用于治療PAI-1相關(guān)疾患的其他治療劑的另一種藥物裝入容器中，并標記為用以治療指示的疾病?；蛘?，也可將包含取代的雜芳基苯并呋喃酸和至少一種用于治療PAI-1相關(guān)疾患的其他治療劑的單一藥物裝入合適的容器中，并標記為用于治療。為給予包含取代的雜芳基苯并呋喃酸的藥物，以及于單一藥物中包含取代的雜芳基苯并呋喃酸和至少一種用于治療PAI-1相關(guān)疾患的其他治療劑的藥物，這種標記包括例如有關(guān)給藥的用量、頻率和方法的說明。類似地，為給予在容器中提供的多種藥物。這種標記常包括例如有關(guān)給予每種藥物的用量、頻率和方法的說明。
實施例化合物1-5的合成分別在實施例1-5中描述。
實施例16-(1-苯并呋喃-2-基)-2-(三氟甲基)喹啉-4-基1H-四唑-5-基甲基醚的合成步驟16-(1-苯并呋喃-2-基)-4-羥基-2-(三氟甲基)喹啉的合成向裝有6-溴-4-羥基-2-三氟甲基-喹啉(1.00g，3.42mmol)的燒瓶中加入K2CO3(8.55mL，H2O中1.0M，8.55mmol)，然后加入二烷(85.5mL)。然后加入苯并呋喃-2-硼酸(0.665g，4.10mmol)和PdCl2(dppf)(0.028g，0.0342mmol)。反應化合物在室溫下攪拌0.5小時，然后加熱至65℃，持續(xù)18小時。濃縮后，反應物用EtOAc(200mL)稀釋。有機層用1N HCl(20mL)，飽和NaHCO3水溶液(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，然后干燥(MgSO4)。濃縮后，殘留物用EtOAc重結(jié)晶，得到產(chǎn)物(0.770g，68％)的固體。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 330。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.68(s，1H)，8.37(d，1H，J＝9.3Hz)，8.07(d，1H，J＝9.3Hz)，7.65-7.75(m，3H)，7.38(t，1H，J＝7.7Hz)，7.30(t，1H，J＝7.7Hz)和7.06ppm(s，1H)。
步驟2{[6-(1-苯并呋喃-2-基)-2-(三氟甲基)喹啉-4-基]氧基}乙腈的合成室溫下向攪拌的6-(1-苯并呋喃-2-基)-4-羥基-2-(三氟甲基)喹啉(0.770g，2.34mmol)的丙酮溶液(40mL)中加入Cs2CO3(0.839g，2.57mmol)，然后滴加溴乙腈(0.326mL，4.68mmol)。反應在該溫度下攪拌18小時，然后用EtOAc(200mL)稀釋。有機層用1N HCl(20mL)、飽和NaHCO3水溶液(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，然后干燥(MgSO4)。濃縮后，殘留物用EtOAc己烷重結(jié)晶，得到產(chǎn)物(0.711g，82％)的黃白色固體，mp 174-176℃。質(zhì)譜(+APCI，[M+H]+)m/z 369。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.61(d，1H，J＝2.0)，8.48(dd，1H，J＝2.0，8.8Hz)，8.23(d，1H，J＝8.8Hz)，7.78(s，1H)，7.70-7.75(m，2H)，7.67(s，1H)，7.39(t，1H，J＝7.2Hz)，7.30(t，1H，J＝7.6Hz)和5.70ppm(s，2H)，C20H11F3N2O2的元素分析計算值C，65.22；H，3.01；N，7.61；測定值C，65.02；H，2.87；N，7.51。
步驟36-(1-苯并呋喃-2-基)-2-(三氟甲基)喹啉-4-基1H-四唑-5-基甲基醚的合成室溫下向攪拌的{[6-(1-苯并呋喃-2-基)-2-(三氟甲基)喹啉-4-基]氧基}乙腈(0.200g，0.543mmol)的DMF溶液(10mL)中加入疊氮化鈉(0.177g，2.72mmol)，然后加入NH4Cl(0.145g，2.72mmol)。反應加熱至100℃，持續(xù)2小時。濃縮混合物，用2N HCl(～5mL)稀釋。該混合物在室溫下攪拌1小時。過濾形成的固體，然后用過量H2O和己烷洗滌，高真空下干燥，得到產(chǎn)物(0.173g，78％)的黃色固體，mp＞225℃(分解)，mp＞225℃(分解)。質(zhì)譜(+APCI，[M+H]+)m/z 412。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ15.44-17.96(br s，1H)，8.72(d，1H，J＝2.0Hz)，8.46(dd，1H，J＝2.0，9.0Hz)，8.21(d，1H，J＝8.8Hz)，7.70-7.75(m，3H)，7.76(s，1H)，7.38(t，1H，J＝7.7Hz)，7.30(t，1H，J＝7.9Hz)和6.04ppm(s，2H)。C20H12F3N5O2·0.5H2O的元素分析計算值C，57.15；H，3.12；N，16.66；測定值C，57.43；H，2.72；N，16.53。
實施例26-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-4-(1H-四唑-5-基甲氧基)-2-(三氟甲基)-喹啉的合成步驟16-(1-苯并呋喃-2-基)-4-甲氧基-2-(三氟甲基)喹啉的合成室溫下向攪拌的6-(1-苯并呋喃-2-基)-4-羥基-2-(三氟甲基)-喹啉(1.33g，4.04mmol)的DMF溶液(40mL)中加入K2CO3(0.670g，4.85mmol)，然后滴加甲基碘(0.276mL，4.44mmol)。反應混合物攪拌4小時，然后濃縮，殘留物用EtOAc(200mL)稀釋。有機層用H2O(20mL)、飽和NaHCO3水溶液(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，然后干燥(Na2SO4)。濃縮后，殘留物在Biotage Flash 40裝置上純化(5-15％EtOAc石油醚)，得到產(chǎn)物(0.930g)的固體。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 344。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.67(s，1H)，8.46(d，1H，J＝9.1Hz)，8.19(d，1H，J＝9.1Hz)，7.68-7.79(m，3H)，7.48(s，1H)，7.40(t，1H，J＝7.8Hz)，7.32(t，1H，J＝7.8Hz)和4.26ppm(s，3H)。
步驟26-(3-溴-1-苯并呋喃-2-基)-4-甲氧基-2-(三氟甲基)喹啉的合成0℃下向攪拌的6-(1-苯并呋喃-2-基)-4-甲氧基-2-(三氟甲基)喹啉(0.930g，2.71mmol)的HOAc溶液(30mL)中加入KOAc(0.319g，325mmol)。該反應在此溫度下攪拌10分鐘，然后在～10分鐘內(nèi)向其中滴加Br2(0.154mL，2.98mmol)的HOAc溶液(5mL)。反應混合物允許升至室溫，攪拌2.5小時。然后反應混合物用H2O(10mL)稀釋。過濾形成的固體，用過量H2O和己烷洗滌。該固體用EtOAc∶己烷重結(jié)晶，得到產(chǎn)物(0.750g，66％)的固體。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z422/424。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.95(s，1H)，8.65(d，1H，J＝8.9Hz)，8.29(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(d，1H，J＝8.1Hz)，7.66(d，1H，J＝8.1Hz)，7.36-7.58(m，3H)和4.26ppm(s，3H)。
步驟36-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-4-甲氧基-2-(三氟甲基)喹啉的合成6-(3-溴-1-苯并呋喃-2-基)-4-甲氧基-2-(三氟甲基)喹啉(0.747g，1.77mmol)、1-戊烯(0.233mL，2.12mmol)、Et3N(7.4mL，53.1mmol)、Pd(OAc)2(0.004g，0.0177mmol)和P(o-tol)3(0.022g，0.0708mmol)在DMF(7.4mL)中的混合物在密封試管內(nèi)在100℃下加熱18小時。然后混合物冷卻至室溫，用H2O(20mL)猝滅，用EtOAc(200mL)稀釋。有機層用H2O(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，然后干燥(Na2SO4)。濃縮后，殘留物在Biotage Flash 40裝置上純化(5-10％EtOAc∶石油醚)，得到6-(3-戊-1-烯基-苯并呋喃-2-基)-4-甲氧基-2-(三氟甲基)喹啉(0.273g)的油。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 412。室溫下向該中間體的EtOAc∶MeOH(1∶1，16mL)溶液中加入Pd/C(0.041g，1.91imnol)。該混合物在H2氣氛下攪拌5小時。然后通過celite過濾該混合物，celite床用過量EtOAc∶MeOH(1∶1)洗滌。濃縮后，殘留物在高真空下干燥，得到產(chǎn)物(0.258g)的油。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 414。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.58(s，1H)，8.18-8.35(m，2H)，7.74(d，1H，J＝8.7Hz)，7.68(d，1H，J＝8.7Hz)，7.50(s，1H)，7.27-7.46(m，2H)，4.26(s，3H)，3.05(t，2H，J＝8.3Hz)，1.71-1.87(m，2H)，1.30-1.53(m，4H)和0.89ppm(t，3H，J＝7.5Hz)。
步驟4{[6-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-2-(三氟甲基)喹啉-4-基]氧基}乙腈的合成攪拌下向冷卻至78℃的6-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-4-甲氧基-2-(三氟甲基)喹啉(0.258g，0.624mmol)的CH2Cl2溶液(10mL)中滴加BBr3(1.68mL，CH2Cl2中1.0M，1.68mmol)。該反應在此溫度下攪拌0.5小時，然后升至室溫，持續(xù)18小時。然后在回流下加熱反應混合物4小時。在此時，加入BCl3(1.68mL，CH2Cl2中1.0M，1.68mmol)和Bu4N+I-(1.24g，3.37mmol)，混合物允許在室溫下攪拌3天。用MeOH(～5mL)猝滅反應混合物，然后用H2O(20mL)和EtOAc(200mL)稀釋。有機層用鹽水(20mL)洗滌，然后干燥(Na2SO4)。濃縮后，殘留物在高真空下干燥，得到產(chǎn)物(0.247g，99％)的油。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 400。該中間體[6-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-4-羥基-2-(三氟甲基)喹啉]與溴乙腈根據(jù)實施例1步驟2中所述的方法反應；獲得標題化合物的固體。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 439。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.60(s，1H)，8.18-8.33(m，2H)，7.55-7.77(m，3H)，7.29-7.42(m，2H)，5.68(s，2H)，3.04(t，2H，J＝8.2Hz)，1.73-1.86(m，2H)，1.31-1.51(m，4H)和0.89ppm(t，3H，J＝7.6Hz)。
步驟56-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-4-(1H-四唑-5-基甲氧基)-2-(三氟甲基)-喹啉的合成按照實施例1步驟3中所述的方法，從{[6-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-2-(三氟甲基)喹啉-4-基]氧基}乙腈制備標題化合物的白色固體(0.054g，99％)，mp 207-209℃(分解)。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 482。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ16.30-17.90(br s，1H)，8.60(d，1H，J＝1.7Hz)，8.32(dd，1H，J＝2.0，8.9Hz)，8.27(d，1H，J＝8.9Hz)，7.72-7.76(m，2H)，7.66(d，1H，J＝8.1Hz)，7.39(t，1H，J＝7.6Hz)，7.32(t，1H，J＝7.8Hz)，6.01(s，2H)，2.99(t，2H，J＝7.6Hz)，1.64-1.72(m，2H)，1.19-1.33(m，4H)和0.77ppm(t，3H，J＝7.2Hz)，C25H22F3N5O2·0.25H2O的元素分析計算值C，61.79；H，4.67；N，14.41；測定值C，61.91；H，4.31；N，14.51。
實施例35-(1-苯并呋喃-2-基)-8-(1H-四唑-5-基甲氧基)喹啉的合成步驟15-氯-8-甲氧基-喹啉的合成按照實施例2步驟1中所述的方法，從5-氯-8-羥基-喹啉制備標題化合物的固體(0.768g，71％)。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 194。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.95(d，1H，J＝2.1Hz)，8.51(d，1H，J＝8.5Hz)，7.68-7.76(m，2H)，7.21(d，1H，J＝7.8Hz)和3.98ppm(s，3H)。
步驟25-(1-苯并呋喃-2-基)-8-甲氧基-喹啉的合成室溫下向攪拌的5-氯-8-甲氧基-喹啉(0.330g，1.70ramol)的THF溶液(2mL)中加入苯并呋喃-2-硼酸(0.413g，2.55mmol)，然后加入KF(0.296mL，5.10mmol)、Pd(OAc)2(0.0382g，0.170mmol)和2-(二叔丁基-膦基)聯(lián)苯(0.101g，0.340mmol)。反應混合物在室溫下攪拌18小時，然后用EtOAc(200mL)稀釋。有機層用H2O(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，然后干燥(Na2SO4)。濃縮后，殘留物在Biotage Flash 40裝置上純化(30-70％EtOAc∶石油醚)，得到產(chǎn)物(0.291g，62％)的固體。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 276。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.94(d，1H，J＝2.2Hz)，8.83(d，1H，J＝9.4Hz)，7.99(d，1H，J＝8.6Hz)，7.66-7.77(m，3H)，7.27-7.41(m，4H)和4.6ppm(s，3H)。
步驟3{[5-(1-苯并呋喃-2-基)-喹啉-8-基]氧基}乙腈的合成按照實施例2步驟4第一部分中所述的方法，從5-(1-苯并呋喃-2-基)-8-甲氧基-喹啉制備5-(1-苯并呋喃-2-基)-8-羥基-喹啉的固體(0.264g，99％)。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 262。按照實施例1步驟2中所述的方法，5-(1-苯并呋喃-2-基)-8-羥基-喹啉與溴乙腈反應，獲得標題化合物的固體(0.104g，34％)。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 301。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ9.02(d，1H，J＝1.4Hz)，8.99(d，1H，J＝9.3Hz)，8.07(d，1H，J＝8.3Hz)，7.68-7.81(m，3H)，7.54(d，1H，J＝8.3Hz)，7.28-7.46(m，3H)和5.51ppm(s，2H)。
步驟45-(1-苯并呋喃-2-基)-8-(1H-四唑-5-基甲氧基)喹啉的合成按照實施例1步驟3中所述的方法，從{[5-(1-苯并呋喃-2-基)-喹啉-8-基]氧基}乙腈制備標題化合物的橙色固體(0.087g，73％)，mp＞240℃(分解)。質(zhì)譜(+APCI，[M+H]+)m/z 344。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ15.30-17.90(br s，1H)，8.99-9.05(m，2H)，8.07(d，1H，J＝8.3Hz)，7.81(dd，1H，J＝4.4，8.5Hz)，7.72-7.75(m，1H)，7.69(d，1H，J＝7.8Hz)，7.63(d，1H，J＝8.3Hz)，7.40(s，1H)，7.38(td，1H，J＝1.7，8.3Hz)，7.32(td，1H，J＝1.0，7.3Hz)和5.83ppm(s，2H)。C19H13N5O2·HCl的元素分析，計算值C，60.09；H，3.72；N，18.44；測定值C，60.31；H，3.59；N，18.65。
實施例45-(3-苯基-1-苯并呋喃-2-基)-8-喹啉1H-四唑-5-基甲基醚的合成步驟15-(3-溴-1-苯并呋喃-2-基)-8-甲氧基-喹啉的合成按照實施例2步驟2中所述的方法，從5-(1-苯并呋喃-2-基)-8-甲氧基-喹啉制備標題化合物的固體(0.963g，74％)。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z354/356。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.95(d，1H，J＝2.2Hz)，8.29(d，1H，J＝8.7Hz)，7.92(d，1H，J＝8.1Hz)，7.76(d，1H，J＝8.1Hz)，7.58-7.72(m，2H)，7.31-7.58(m，3H)和4.07ppm(s，3H)。
步驟25-(3-苯基-1-苯并呋喃-2-基)-8-甲氧基-喹啉的合成按照實施例1步驟1中所述的方法，通過偶聯(lián)5-(3-溴-1-苯并呋喃-2-基)-8-甲氧基-喹啉和苯基硼酸，制備標題化合物的固體(0.202g，68％)。質(zhì)譜(+FSI，[M+H]+)m/z 352。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.87(d，1H，J＝1.6Hz)，8.13(d，1H，J＝8.2Hz)，7.73(t，2H，J＝7.8Hz)，7.68(d，1H，J＝8.2Hz)，7.38-7.52(m，3H)，7.21-7.38(m，6H)和4.00ppm(s，3H)。
步驟3{[5-(3-苯基-1-苯并呋喃-2-基)-喹啉-8-基]氧基}乙腈的合成按照實施例2步驟4第一部分中所述的方法，從5-(3-苯基-1-苯并呋喃-2-基)-8-甲氧基-喹啉制備5-(3-苯基-1-苯并呋喃-2-基)-8-羥基-喹啉的固體(0.185g，99％)；質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 338。按照實施例1步驟2中所述的方法，5-(3-苯基-1-苯并呋喃-2-基)-8-羥基-喹啉與溴乙腈反應，獲得標題化合物的固體(0.148g，74％)。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 377。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.90-8.96(m，1H)，819(d，1H，J＝8.1Hz)，7.71-7.81(m，3H)，7.39-7.65(m，4H)，7.25-7.39(m，5H)和5.48ppm(s，2H)。
步驟45-(3-苯基-1-苯并呋喃-2-基)-8-喹啉基1H-四唑-5-基甲基醚的合成按照實施例1步驟3中所述的方法，從{[5-(3-苯基-1-苯并呋喃-2-基)-喹啉-8-基]氧基}乙腈制備標題化合物的黃色固體(0.125g，84％)，mp＞273℃(分解)。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 420。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ15.30-17.90(br s，1H)，8.96(d，1H，J＝3.8Hz)，8.38(d，1H，J＝8.6Hz)，7.73-7.82(m，3H)，7.62(dd，1H，J＝4.3，8.6Hz)，7.57(d，1H，J＝8.2Hz)，7.47(t，1H，J＝7.8Hz)，7.40(t，1H，J＝7.7Hz)，7.31-7.37(m，4H)，7.25-7.31(m，1H)和5.80ppm(s，2H)。C25H17N5O2·HCl的元素分析計算值C，65.86；H，3.98；N，15.36；測定值C，66.07；H，4.02；N，15.31。
實施例55-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-8-(1H-四唑-5-基甲氧基)喹啉的合成步驟15-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-8-甲氧基-喹啉的合成按照實施例2步驟3中所述的方法，從5-(3-溴-1-苯并呋喃-2-基)-8-甲氧基-喹啉制備標題化合物的固體(0.132g，41％)。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 346。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.92(d，1H，J＝1.9Hz)，8.13(d，1H，J＝8.8Hz)，7.54-7.67(m，2H)，7.69-7.78(m，2H)，4.06(s，3H)，7.28-7.42(m，3H)，2.67(t，2H，J＝8.4Hz)，1.02-1.20(m，4H)，1.51-1.66(m，2H)和0.67ppm(t，3H，J＝6.9Hz)。
步驟2{[5-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-喹啉-8-基]氧基}乙腈的合成按照實施例2步驟4第一部分中所述的方法，從5-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-8-甲氧基-喹啉制備5-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-8-羥基-喹啉的固體(0.113g，99％)。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 332。按照實施例1步驟2中所述的方法，5-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-8-羥基-喹啉與溴乙腈反應，獲得標題化合物的固體(0.059g，48％)。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 371。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.94-9.02(m，1H)，8.20(d，1H，J＝9.5Hz)，7.72-7.83(m，2H)，7.60-7.70(m，2H)，7.53(d，1H，J＝8.6Hz)，7.28-7.42(m，2H)，5.52(s，2H)，2.68(t，2H，J＝7.4Hz)，1.50-1.67(m，2H)，1.03-1.26(m，4H)和0.67ppm(t，3H，J＝7.0Hz)。
步驟35-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-8-(1H-四唑-5-基甲氧基)喹啉的合成按照實施例1步驟3中所述的方法，從{[5-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-喹啉-8-基]氧基}乙腈制備標題化合物的黃色固體(0.044g，67％)，mp 226-228℃(分解)。質(zhì)譜(+ESI，[M+H]+)m/z 414。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ14.95-17.95(br s，1H)，9.01(d，1H，J＝4.1Hz)，8.35(d，1H，J＝8.4Hz)，7.81(d，1H，J＝8.1Hz)，7.71-7.77(m，2H)，7.60-7.65(m，2H)，7.30-7.39(m，2H)，5.84(s，2H)，2.66(t，2H，J＝7.6Hz)，1.54-1.63(m，2H)，1.06-1.18(m，4H)和0.67ppm(t，3H，J＝7.0Hz)。C24H23N5O2·HCl的元素分析計算值C，64.07；H，5.38；N，15.57；測定值C，63.97；H，5.35；N，15.47。
實施例6抑制的初步篩選。
將試驗化合物溶于DMSO至終濃度為10mM，然后在生理緩沖液中稀釋100X。通過將試驗化合物(1-100μM終濃度，最大DMSO濃度為0.2％)加入到含140nM重組人纖溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1；Molecular Innovations，Royal Oak，MI)的pH6.6緩沖液中，開始抑制試驗。在室溫下溫育1小時后，加入70nM的重組人組織纖溶酶原激活物(tPA)，將試驗化合物、PAI-1和tPA的組合再溫育30分鐘。在第二次溫育之后，加入tPA的顯色底物Spectrozyme-tPA(AmericanDiagnostica，Greenwich，CT)，在0分鐘和60分鐘時于405nm讀取吸光度。相對PAI-1抑制等于試驗化合物和PAI-1存在下的殘余tPA活性。對照處理包括在所采用的摩爾比(2∶1)下PAI-1對tPA的完全抑制，以及試驗化合物單獨對tPA無任何作用。
實施例7確定PAI-1的抑制IC50的試驗。
此試驗基于tPA和活性PAI-1之間的非SDS可解離相互作用。首先將試驗板涂以人tPA(10μg/ml)。將試驗化合物以10Mm溶于DMSO，然后用生理緩沖液(pH7.5)稀釋至1-50μM的終濃度。在室溫下，將試驗化合物與人PAI-1(50ng/ml)一起溫育15分鐘。用0.05％Tween 20和0.1％BSA的溶液洗滌tPA涂布板，然后用3％BSA的溶液封閉所述板。然后將試驗化合物的PAI-1溶液的等分試樣加到tPA涂布板上，在室溫下溫育1小時，洗滌。通過加入1∶1000稀釋的抗人PAI-1的33B8單克隆抗體(Molecular Innovations，Royal Oak，MI)的等分試樣，并將板在室溫下溫育1小時，來評估結(jié)合板的活性PAI-1。再次洗滌所述板，加入以1∶50,000稀釋于山羊血清的山羊抗小鼠IgG堿性磷酸酶綴合物的溶液。將所述板在室溫下溫育30分鐘，洗滌，加入堿性磷酸酶底物溶液。將所述板在室溫下溫育45分鐘，于OD405nm測定顯色情況。使用各種濃度的試驗化合物下結(jié)合tPA的活性PAI-1定量來確定IC50。結(jié)果用對數(shù)最佳擬合方程分析。從0-100ng/ml范圍的標準曲線確定出試驗靈敏度為5ng/ml人PAI-1。
本發(fā)明化合物對纖溶酶原激活物抑制劑-1的抑制總結(jié)于表1。
表1

aIC50通過上述抗體試驗測定。
bIC50通過PAI-1抑制的初步篩選的修改測定。
雖然為了清楚理解的目的已通過示例的方式詳細描述了以上發(fā)明，對于技術(shù)人員顯而易見的是，后附權(quán)利要求的范圍內(nèi)的某些變化和修改包括在本公開中，可實施其而無需過多實驗，它們是以說明而非限制的方式給出。
對于所有目的，以上引用的所有出版物和專利文件通過引用整體結(jié)合到本文中，其程度如同它們各自單獨如此表示。
權(quán)利要求
1.一種下式的化合物或其藥物可接受的鹽或酯形式 式1其中R、R1、R2和R3獨立為氫、烷基、環(huán)烷基、烷?；Ⅺu素、羥基、芳基、全氟烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基或全氟烷氧基；R4為氫、烷基、全氟烷基、烯基、炔基、芳基烯基、芳基炔基、芳基、-C(＝O)R5、-C(＝S)R5、-CH2R5或-CH(OH)R5；R5為氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、全氟烷基、芳基、烯基、炔基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、烷基芳基、烯基芳基或炔基芳基；R6為氫、烷基、芳基或芳基烷基；x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8獨立為碳或氮，其中至少x1-x8之一為氮原子；n為0-6的整數(shù)；A為COOH或酸模擬物或其藥物可接受鹽。
2.一種下式的化合物 式2其中R、R1、R2和R3獨立為氫、烷基、環(huán)烷基、烷酰基、鹵素、羥基、芳基、全氟烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基或全氟烷氧基；R4為氫、烷基、全氟烷基、烯基、炔基、芳基烯基、芳基炔基、芳基、-C(＝O)R5、-C(＝S)R5、-CH2R5或-CH(OH)R5；R5為氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、全氟烷基、芳基、烯基、炔基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、烷基芳基、烯基芳基或炔基芳基；R6為氫、烷基、芳基或芳基烷基；x1、x2、x3、x4、x5、x6、x7和x8獨立為碳或氮，其中至少x1-x8之一為氮原子；A為酸模擬物或其藥物可接受的鹽。
3.權(quán)利要求1或2的化合物或其藥物可接受的鹽，其中A為四唑、特窗酸、酰基特窗酸或具有下式的基團 其中R15為C1-C6烷基、C2-C6烯基、C3-C6環(huán)烷基、-CH2-(C3-C6環(huán)烷基)、C3-C6環(huán)烯基、-CH2-(C3-C6環(huán)烯基)、任選取代的芳基或雜芳基、任選取代的芳基(C1-C6)烷基或雜芳基(C1-C6)烷基。
4.權(quán)利要求1-3中任一項的化合物或其藥物可接受鹽，其中A為四唑。
5.權(quán)利要求1-4中任一項的化合物或其藥物可接受鹽，其中R和R1為氫。
6.權(quán)利要求1-5中任一項的化合物或其藥物可接受鹽，其中R4為氫、烷基或芳基。
7.權(quán)利要求1-6中任一項的化合物或其藥物可接受鹽，其中R2和R3獨立為氫或全氟烷基。
8.權(quán)利要求1-5中任一項的化合物或其藥物可接受鹽，其中R4為全氟烷基、烯基、芳基烯基、芳基、-C(＝O)R5、-C(＝S)R5、-CH3R5或-CH2(OH)R5。
9.權(quán)利要求2的化合物，所述化合物為6-(1-苯并呋喃-2-基)-2-(三氟甲基)喹啉-4-基1H-四唑-5-基甲基醚或其藥物可接受的鹽或酯形式。
10.權(quán)利要求2的化合物，所述化合物為6-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-4-(1H-四唑-5-基甲氧基)-2-(三氟甲基)-喹啉或其藥物可接受的鹽或酯形式。
11.權(quán)利要求2的化合物，所述化合物為5-(1-苯并呋喃-2-基)-8-(1H-四唑-5-基甲氧基)喹啉或其藥物可接受的鹽或酯形式。
12.權(quán)利要求2的化合物，所述化合物為5-(3-苯基-1-苯并呋喃-2-基)-8-喹啉基1H-四唑-5-基甲基醚或其藥物可接受的鹽或酯形式。
13.權(quán)利要求2的化合物，所述化合物為5-(3-戊基-1-苯并呋喃-2-基)-8-(1H-四唑-5-基甲氧基)喹啉或其藥物可接受的鹽或酯形式。
14.一種抑制PAI-1活性的方法，所述方法包括給予有需要的對象治療有效量的權(quán)利要求1-13中任一項的化合物。
15.權(quán)利要求14的方法，其中治療有效量為25mg/kg/日至200mg/kg/日。
16.一種治療對象中PAI-1相關(guān)疾患的方法，所述方法包括鑒別具有PAI-1相關(guān)疾患的對象，并給予有需要的對象治療有效量的權(quán)利要求1-13中任一項的化合物。
17.權(quán)利要求16的方法，其中治療有效量為25mg/kg/日至200mg/kg/日。
18.權(quán)利要求16的方法，其中所述PAI-1相關(guān)疾患為纖維蛋白溶解系統(tǒng)的損害。
19.權(quán)利要求16的方法，其中所述PAI-1相關(guān)疾患為血栓形成、心房纖維性顫動、肺纖維變性、外科手術(shù)的血栓栓塞并發(fā)癥、心血管疾病、心肌缺血、中風、動脈粥樣硬化斑塊形成、慢性阻塞性肺病、腎纖維變性、多囊卵巢綜合征、糖尿病、阿爾茨海默病或癌癥。
20.權(quán)利要求19的方法，其中所述血栓形成選自靜脈血栓形成、動脈血栓形成、腦血栓形成和深部靜脈血栓形成。
21.權(quán)利要求19的方法，其中所述PAI-1相關(guān)疾患為哺乳動物中由非胰島素依賴性糖尿病引起的心血管疾病。
22.一種藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的權(quán)利要求1-13中任一項的化合物或其藥物可接受的鹽或酯形式，以及藥物可接受的賦形劑或載體。
全文摘要
本發(fā)明通常涉及取代的雜芳基苯并呋喃酸或其藥物可接受的鹽或酯形式和使用它們的方法(I)，其中R、R
文檔編號A61K31/4709GK1882579SQ200480034504
公開日2006年12月20日 申請日期2004年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月25日
發(fā)明者H·M·埃羅克達, G·R·麥法萊恩, S·C·邁爾 申請人:惠氏公司