專利名稱：作為pai－1的雜環(huán)基－或芳基氧基、－硫基或－氨基取代的吲哚－2－甲酸或其酯的制作方法
相關(guān)申請的交叉引用本申請要求2004年9月23日申請的美國申請?zhí)枺撸叩膬?yōu)先權(quán)，該申請又要求2003年9月25日申請的美國臨時申請60/506,099的優(yōu)先權(quán)，上述申請的全部公開內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
背景技術(shù)：
本發(fā)明總的來講涉及取代的吲哚及其使用方法。
絲氨酸蛋白酶抑制劑PAI-1是纖維蛋白溶解系統(tǒng)的主要抑制劑之一。纖維蛋白溶解系統(tǒng)包括血纖維蛋白溶酶原，該酶原通過兩種組織型血纖維蛋白溶酶原激活物t-PA和u-PA之一轉(zhuǎn)化為活性酶，即纖維蛋白溶酶。PAI-1是t-PA和u-PA的主要生理性抑制劑。纖維蛋白溶解系統(tǒng)中纖維蛋白溶酶的主要作用之一是在血管損傷部位消化纖維蛋白。然而，纖維蛋白溶解系統(tǒng)不但負(fù)責(zé)從循環(huán)除去纖維蛋白，而且參與多種其它生物學(xué)過程，包括排卵、胚胎發(fā)生、內(nèi)膜增生、血管生成、腫瘤發(fā)生和動脈粥樣硬化。
高濃度PAI-1與多種疾病和病癥有關(guān)，包括與纖維蛋白溶解系統(tǒng)障礙相關(guān)的疾病和病癥。例如，高濃度的PAI-1涉及血栓性疾病，例如特征為血栓形成、阻塞局部血管的血流或脫落成栓子堵塞下游血流(血栓栓塞)的疾病。(Krishnamurti，Blood，69，798(1987)；Reilly，Arteriosclerosis and Thrombosis，11，1276(1991)；Carmeliet，Journalof Clinical Investigation，92，2756(1993)，Rocha，F(xiàn)ibrinolysis，8，294，1994；Aznar，Haemostasis 24，243(1994))。PAI-1活性的抗體中和作用促進內(nèi)源性血栓溶解和再灌注(Biemond，Circulation，91，1175(1995)；Levi，Circulation 85，305，(1992))。在例如以下疾病中也涉及高濃度PAI-1多囊卵巢綜合征(Nordt，Journal of clinicalEndocrinology and Metabolism，85，4，1563(2000))、雌激素缺乏癥誘發(fā)的骨丟失(Daci，Journal of Bone and Mineral Research，15，8，1510(2000))、囊性纖維化、糖尿病、慢性牙周炎、淋巴瘤、胞外基質(zhì)累積相關(guān)性疾病、新血管形成相關(guān)性惡性腫瘤和疾病、炎性疾病、伴隨感染的血管損傷以及伴隨uPA濃度增高的疾病(例如乳腺癌和卵巢癌)。
考慮到以上原因，有需要鑒定PAI-1活性抑制劑，并且需要利用所鑒定的抑制劑調(diào)節(jié)患者PAI-1的表達或活性從而治療高濃度PAI-1相關(guān)性疾病的方法。
發(fā)明概述本發(fā)明提供取代的吲哚及其使用方法。在某些實施方案中，提供取代的吲哚，包括下式化合物 式1其中X為O、S或NH；R1為氫、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、-CO2C1-C6烷基、C6-C10芳基、芳基烷基或雜環(huán)基；R2為氫、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、C6-C10芳基或雜環(huán)基；R3為氫、鹵素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環(huán)烷基或-C(＝O)C1-C3烷基；A1為氫、C6-C10芳基或雜環(huán)基；
A2為C6-C10芳基或雜環(huán)基。
這樣的取代吲哚包括下式的芳基氨基-1H-吲哚-2-甲酸衍生物 式2 式3其中R1、R2、R3、A1和A2的定義同上式1中的定義。
本發(fā)明還提供尤其是式1-3的藥物可接受的鹽或酯形式。
本發(fā)明還進一步提供取代吲哚的使用方法。在本發(fā)明的一個方面，將治療有效量的一種或多種取代吲哚給予患者，從而通過例如抑制患者的PAI-1活性而治療PAI-1相關(guān)性疾病。PAI-1活性與許多疾病和病癥相關(guān)。例如，在本發(fā)明一個實施方案中，PAI-1活性與纖維蛋白溶解系統(tǒng)障礙相關(guān)。在其它實施方案中，PAI-1活性與以下疾病和病癥相關(guān)血栓形成(例如靜脈血栓形成、動脈血栓形成、腦血栓形成和深靜脈血栓形成)、心房纖維性顫動、肺纖維化、外科手術(shù)的血栓栓塞性并發(fā)癥、心血管疾病例如心肌缺血、動脈粥樣硬化斑塊形成、慢性阻塞性肺病、腎纖維化、多囊卵巢綜合征、阿爾茨海默病(Alzheimer′s disease)或癌癥。
發(fā)明詳述A.總論本發(fā)明提供抑制PAI-1活性的化合物、制備這樣的化合物的方法、包含這樣的化合物的藥物組合物以及在醫(yī)學(xué)治療中使用這樣的化合物的方法。本發(fā)明化合物具有可用于治療(包括預(yù)防和抑制)多種不同疾病和病癥的特性，所述疾病和病癥包括涉及PAI-1的產(chǎn)生和/或作用的疾病和病癥。它們包括纖維蛋白溶解系統(tǒng)障礙導(dǎo)致的疾病，包括但不限于血栓形成、冠心病、腎纖維化、動脈粥樣硬化斑塊形成、肺病、心肌缺血、心房纖維性顫動、凝血綜合征、外科手術(shù)的血栓栓塞性并發(fā)癥、外周動脈閉塞和肺纖維化。其它疾病包括但不限于多囊卵巢綜合征、阿爾茨海默病以及癌癥。
無論是單獨使用還是作為另一基團的組成部分使用，本文使用的術(shù)語“烷基”和“亞烷基”均指取代或未取代的脂族烴鏈，區(qū)別在于烷基本質(zhì)上是單價的(即端基)，而亞烷基是二價的并且通常作為連接基。除非另有明確的說明，否則這兩種基團均包括但不限于含1個至約12個碳原子、優(yōu)選1個至約6個碳原子的直鏈和支鏈。例如，術(shù)語“烷基”包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基和叔丁基?！巴榛钡亩x明確包括那些任選取代的脂族烴鏈。在本發(fā)明某些實施方案中，任選取代基包括C1-C6烷基、鹵素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、芳烷基、任選被R4取代的芳基、任選被R4取代的雜環(huán)基、羥基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-雜環(huán)。
R4為C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、鹵素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、羥基、-C(＝O)C1-C7烷基、-SO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基或烷氧基羰基烷基。在某些實施方案中，R4包括C2-7?；?br> 本文定義中的碳數(shù)目是指主鏈碳和支鏈碳，但是不包括取代基(例如烷氧基取代基等)的碳原子。
無論是單獨使用還是作為另一基團的組成部分使用，本文使用的術(shù)語“烯基”是指取代或未取代的脂族烴鏈，包括但不限于含有2個至約10個碳原子(除非另有明確的說明)以及至少一個雙鍵的直鏈和支鏈。優(yōu)選烯基部分含有1-2個雙鍵。這樣的烯基部分可以為E型或Z型構(gòu)象，本發(fā)明化合物包括這兩種構(gòu)象?！跋┗钡亩x明確包括那些任選取代的脂族烴鏈。在本發(fā)明某些實施方案中，任選取代基包括例如C1-C6烷基、鹵素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、芳烷基、任選被R4取代的芳基、任選被R4取代的雜環(huán)基、羥基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-雜環(huán)。連接烯基的雜原子(例如O或S)不應(yīng)該與連接雙鍵的碳原子連接。
除非另有說明，否則本文定義的單獨使用或結(jié)合其它術(shù)語使用的術(shù)語“?；?，是指共價連接至指定化學(xué)結(jié)構(gòu)的碳原子被氧化為羰基氧化態(tài)的芳基烷基、雜芳基烷基、(C2-C10)直鏈或(C4-C11)支鏈單價烴基。這樣的烴基可以是單不飽和或多不飽和的，并且可以為E或Z構(gòu)型。本發(fā)明化合物包括所有可能的E和Z構(gòu)型。?；膶嵗ǖ幌抻谶@樣的化學(xué)基團乙?；?、丙?；⒍□；?、3，3-二甲基丁?；⑷阴；?、新戊?；⒓乎；?、己烯?；?、癸酰基、苯甲酰基、煙?；?、異煙?；捌渫滴?、異構(gòu)體等。
無論是單獨使用還是作為另一基團的組成部分使用，本文使用的術(shù)語“炔基”是指取代或未取代的脂族烴鏈，包括但不限于含有2個至約10個碳原子(除非另有明確的說明)以及至少一個三鍵的直鏈和支鏈。優(yōu)選炔基部分含有約2個至約7個碳原子。在某些實施方案中，炔基可以包含不止一個三鍵，在這樣的情況下，炔基必須包含至少三個碳原子?！叭不钡亩x明確包括那些任選取代的脂族烴鏈。在本發(fā)明代表性實施方案中，任選取代基包括C1-C6烷基、鹵素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、芳烷基、任選被R4取代的芳基、任選被R4取代的雜環(huán)基、羥基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-雜環(huán)。連接炔基的雜原子(例如O或S)不應(yīng)該與連接三鍵的碳原子連接。
無論是單獨使用還是作為另一基團的組成部分使用，本文使用的術(shù)語“環(huán)烷基”是指含有3個至約20個碳原子(除非另有明確的說明)、優(yōu)選3個至約8個碳原子的取代或未取代的脂環(huán)烴基?！碍h(huán)烷基”的定義明確包括那些任選取代的脂環(huán)烴基。在本發(fā)明某些實施方案中，任選取代基包括C1-C6烷基、鹵素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、芳烷基、任選被R4取代的芳基、任選被R4取代的雜環(huán)基、羥基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-雜環(huán)。
無論是單獨使用還是作為另一基團的組成部分使用，本文使用的術(shù)語“芳基”定義為含有5個至約50個碳原子、優(yōu)選約6個至約10個碳原子的取代或未取代的芳烴環(huán)基?！胺蓟笨梢杂幸粋€環(huán)或多個稠環(huán)。術(shù)語“芳基”包括但不限于苯基、α-萘基、β-萘基、聯(lián)苯基、蒽基、四氫萘基、芴基、茚滿基、亞聯(lián)苯基和苊基。“芳基”的定義明確包括那些任選取代的芳族基團。例如，在本發(fā)明某些實施方案中，“芳基”可以任選被1-5個選自以下的取代基取代酰氧基、羥基、酰基、烷?；?、1-6個碳原子的烷基、1-6個碳原子的烷氧基、2-6個碳原子的烯基、2-6個碳原子的炔基、取代烷基、取代烷氧基、取代烯基、取代炔基、芳基、氨基、被1-2個含有1-6個碳原子的烷基取代的氨基、氨基?；?、氨基、疊氮基、氰基、鹵素、硝基、1-6個碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6個碳原子的硫代烷氧基和三鹵代甲基。在本發(fā)明示例性實施方案中，任選取代基包括C1-C6烷基、鹵素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、芳烷基、任選被R4取代的芳基、任選被R4取代的雜環(huán)基、羥基、C1-C6烷氧基、C1-C6全氟烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-雜環(huán)。
本文使用的術(shù)語“烷氧基”是指Ra-O-，其中Ra為上文定義的烷基?！巴檠趸钡亩x明確包括那些任選取代的烷氧基。
本文使用的術(shù)語“芳基-氧基”是指Rb-O-，其中Rb為上文定義的芳基。
本文使用的術(shù)語“烷氧基羰基烷基”是指Rc-O-C(＝O)Rc-，其中Rc為上文定義的烷基。本發(fā)明的烷氧基羰基烷基具有約3個至約13個碳原子。
本文使用的術(shù)語“烷?；笔侵?C(＝O)-烷基，其中烷基的定義同上。示例性烷?；ǖ幌抻谝阴；⒄；?、正丁?；?-甲基丙?；⒄祯；?-甲基丁?；?-甲基丁?；?、2，2-二甲基丙?；⒏；凸秕；?。烷酰基的烷基部分可以任選被取代。
術(shù)語“芳基烷基”或“芳烷基”是指-Ra-Rb，其中Ra是被上文定義的芳基Rb取代的上文定義的烷基。優(yōu)選所述烷基具有1-6個碳原子。芳基烷基的實例包括但不限于芐基、1-苯基乙基、2-苯基乙基、3-苯基丙基、2-苯基丙基等。
本文使用的術(shù)語“烷基氨基”是指Rc-NH-，其中Rc為上文定義的烷基，并且優(yōu)選具有1-6個碳原子。
本文使用的術(shù)語“二烷基氨基”是指-N(C1-C6烷基)2。
本文使用的術(shù)語“羧基烷基”是指-Rc-COOH，其中Rc為上文定義的烷基，并且優(yōu)選具有1-6個碳原子。
術(shù)語“二環(huán)烷基”是指結(jié)構(gòu)中具有2個橋接環(huán)并且包含約7個至約20個碳原子(除非另有明確的說明)(以及各范圍的所有組合與再組合以及其中的具體碳原子數(shù)目)、優(yōu)選約7個至約11個碳原子的任選取代的烷基。示例性二環(huán)烷基環(huán)結(jié)構(gòu)包括但不限于降冰片基、冰片基、[2.2.2]-二環(huán)辛基、順蒎烷基、反蒎烷基、莰基、異冰片基和葑基。代表性的取代基包括例如C1-C6烷基、鹵素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、芳烷基、任選被R4取代的芳基、任選被R4取代的雜環(huán)基、羥基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-雜環(huán)。
無論是單獨使用還是作為另一基團的組成部分使用，本文使用的術(shù)語“雜環(huán)”是指穩(wěn)定的含碳原子和1-4個選自氮、氧和硫的雜原子的3元環(huán)至約20元環(huán)、優(yōu)選5-13元環(huán)或5-10元環(huán)。本發(fā)明的雜環(huán)可以是單環(huán)或二環(huán)系統(tǒng)，并且可以是飽和、不飽和或部分飽和的。雜環(huán)可以任選與苯環(huán)稠合。雜環(huán)基包括但不限于吖丙啶基、氮雜環(huán)丁烷基、1，4-二烷基、六氫吖庚因基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異唑基、二氫異噻唑基、二氫二唑基、二氫唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁烷基、二氫-1，4-二烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫喹啉基和四氫異喹啉基。優(yōu)選的雜環(huán)部分包括(a)含1-2個氮原子的飽和、部分不飽和或不飽和的6元雜環(huán)，任選稠合苯環(huán)；(b)含1-3個氮原子、氧原子或硫原子的飽和、部分飽和或不飽和的5元雜環(huán)，任選稠合苯環(huán)；(c)含1-4個氮原子、氧原子或硫原子的飽和、部分不飽和或不飽和的二環(huán)雜環(huán)；(d)咔唑、二苯并呋喃和二苯并噻吩?！半s環(huán)”的定義明確包括那些任選取代的雜環(huán)。代表性的取代基包括C1-C6烷基、鹵素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、芳烷基、任選被R4取代的芳基、任選被R4取代的雜環(huán)基、羥基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-雜環(huán)。
本文使用的術(shù)語“雜芳基”定義為取代或未取代的芳族雜環(huán)系(單環(huán)或二環(huán))。雜芳基可以具有例如約3個至約50個碳原子(除非另有明確的說明)，優(yōu)選約4個至約10個碳原子。在某些實施方案中，雜芳基是具有約4個至約14個環(huán)原子(包括碳原子和1-4個選自氧、氮或硫的雜原子)的芳族雜環(huán)系。代表性雜芳基基團為呋喃、噻吩、吲哚、氮雜吲哚、唑、噻唑、異唑、異噻唑、咪唑、N-甲基咪唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、吡咯、N-甲基吡咯、吡唑、N-甲基吡唑、1，3，4-二唑、1，2，4-三唑、1-甲基-1，2，4-三唑、1H-四唑、1-甲基四唑、苯并唑、苯并噻唑、苯并呋喃、苯并異唑、苯并咪唑、N-甲基苯并咪唑、氮雜苯并咪唑、吲唑、喹唑啉、喹啉和異喹啉。二環(huán)芳族雜芳基包括稠合以下環(huán)的苯基、吡啶、嘧啶或噠嗪(pyridizine)環(huán)(a)含1個氮原子的6元芳族(不飽和)雜環(huán)；(b)含2個氮原子的5-6元芳族(不飽和)雜環(huán)；(c)含1個氮原子以及1個氧原子或1個硫原子的5元芳族(不飽和)雜環(huán)；或(d)含1個選自O(shè)、N或S的雜原子的5元芳族(不飽和)雜環(huán)。“雜芳基”的定義明確包括那些任選取代的芳族基團。因此，本文描述的雜芳基(例如吡啶基)是指未取代或取代的基團。在本發(fā)明代表性實施方案中，“雜芳基”任選被1-5個選自以下的取代基取代酰氧基、羥基、?；?、1-6個碳原子的烷基、1-6個碳原子的烷氧基、2-6個碳原子的烯基、2-6個碳原子的炔基、取代烷基、取代烷氧基、取代烯基、取代炔基、氨基、被1-2個含1-6個碳原子的烷基取代的氨基、氨基酰基、?；被?、疊氮基、氰基、鹵素、硝基、1-6個碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6個碳原子的硫代烷氧基和三鹵代甲基。
無論是單獨使用還是作為另一基團的組成部分使用，本文使用的術(shù)語“全氟烷基”是指含1-6個碳原子以及2個或2個以上的氟原子的飽和脂族烴基，包括但不限于直鏈或支鏈，例如-CF3、-CH2CF3、-CF2CF3和-CH(CF3)2。
術(shù)語“鹵素”或“鹵代”是指氯、溴、氟和碘。
術(shù)語“治療”是指任何成功改善損傷、病理或疾病的指征，包括任何客觀或主觀參數(shù)，例如癥狀的減輕、緩解或減少，或者使患者更能忍受損傷、病理或疾??；減慢變性或衰退速率；減弱最終的變性點；或者改善患者的身體或精神健康狀況。癥狀的治療或改善可以基于客觀或主觀參數(shù)；包括身體檢查、神經(jīng)病學(xué)檢查和/或精神病學(xué)評價的結(jié)果。“治療PAI-1相關(guān)性疾病”包括預(yù)防患者(可能易患PAI-1相關(guān)性疾病，但是還沒有感覺或出現(xiàn)該病癥狀的患者)癥狀的發(fā)生(預(yù)防性治療)、抑制該病的癥狀(減慢或阻止其發(fā)展)、緩解該病的癥狀或副作用(包括姑息療法)和/或消除該病的癥狀(使癥狀消退)。因此，術(shù)語“治療”包括將本發(fā)明化合物或藥物給予患者以預(yù)防或延遲、減輕、阻止或抑制PAI-1相關(guān)性疾病的癥狀或病癥(例如癌癥相關(guān)的腫瘤生長)的發(fā)展。熟練的醫(yī)務(wù)人員知道如何利用標(biāo)準(zhǔn)方法確定患者是否患有與PAI-1的濃度和/或活性提高相關(guān)的疾病，例如通過檢查患者后確定患者是否患有已知與PAI-1的濃度和/或活性提高有關(guān)的疾病，或者分析懷疑患有PAI-1相關(guān)性疾病個體的血漿或組織的PAI-1濃度，然后與健康個體的血漿或組織的PAI-1濃度相比較。PAI-1濃度增高表示有病。因此，本發(fā)明還特別提供將本發(fā)明化合物給予患者的方法以及測定患者PAI-1濃度的方法。患者的PAI-1濃度可以在給予化合物之前和/或之后進行測定。
在健康個體中，PAI-1在血漿中的濃度低(約5-26ng/ml)，但是在許多PAI-1相關(guān)性疾病中的濃度升高，包括例如動脈粥樣硬化(Schneiderman J.等，Proc Natl Acad Sci 896998-7002，1992)、深靜脈血栓形成(Juhan-Vague I等，Thromb Haemost 5767-72，1987)以及非胰島素依賴性糖尿病(Juhan-Vague I等，Thromb Haemost 78565-660，1997)。PAI-1使動脈血栓以及靜脈血栓穩(wěn)定，分別促使心肌梗塞后冠狀動脈閉塞(Hamsten A等，Lancet 23-9，1987)以及矯形外科手術(shù)痊愈后的靜脈血栓形成。(Siemens HJ等，J Clin Anesthesia11622-629，1999)。例如，絕經(jīng)后婦女的血漿PAI-1也會升高，因此認(rèn)為這是造成此類人群心血管疾病的發(fā)病率提高的原因(Koh K等，N Engl J Med 336683-690，1997)。
術(shù)語“PAI-1相關(guān)性疾病”是指與PAI-1表達或活性提高或增強相關(guān)的、或者與編碼PAI-1的基因的表達或活性提高或增強相關(guān)的任何疾病或病癥。這樣的活性或表達的提高的實例可能包括一種或多種下述情況蛋白活性或蛋白編碼基因表達超過正常受治療者的相應(yīng)水平；在正常受治療者通常不能檢出蛋白活性或蛋白編碼基因表達的器官、組織或細(xì)胞中檢測到蛋白活性或蛋白編碼基因表達(即蛋白的空間分布或蛋白編碼基因的表達發(fā)生改變)；當(dāng)?shù)鞍谆钚曰虻鞍拙幋a基因表達在器官、組織或細(xì)胞中存在的時間比在正常受治療者中存在的時間長時，蛋白活性或蛋白編碼基因表達增強(即蛋白活性或蛋白編碼基因表達的持續(xù)時間增加)。正常或健康受治療者是沒有患PAI-1相關(guān)性疾病的受治療者。
術(shù)語“藥物可接受的賦形劑”是指可用于制備藥物組合物的賦形劑，通常安全、無毒且符合要求，包括獸用及人用藥物可接受的賦形劑。這樣的賦形劑可以是固體、液體、半固體，或者就氣霧劑組合物而論還可以為氣體。
“藥物可接受的鹽和酯”是指藥物可接受的并且具有所需藥理學(xué)性質(zhì)的鹽和酯。例如，這樣的鹽包括在化合物中存在酸性質(zhì)子時能與無機堿或有機堿反應(yīng)形成的鹽。合適的無機鹽包括例如與堿金屬或堿土金屬(例如鈉和鉀，鎂、鈣和鋁)形成的鹽。合適的有機鹽包括例如與有機堿(例如胺堿，例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等)形成的鹽。藥物可接受的鹽還可以包括酸加成鹽，酸加成鹽通過母體化合物中的堿性部分(例如胺)與無機酸(例如鹽酸和氫溴酸)以及有機酸(例如乙酸、檸檬酸、馬來酸、烷烴磺酸和芳烴磺酸，例如甲磺酸和苯磺酸)反應(yīng)生成。藥物可接受的酯包括由本發(fā)明化合物中存在的羧基、磺酰氧基和膦酰氧基形成的酯，例如C1-6烷基酯。當(dāng)存在兩個酸性基團時，藥物可接受的鹽或酯可以為單酸單鹽、單酸單酯、二鹽或二酯；類似地，當(dāng)存在兩個以上酸性基團時，部分或全部這樣的基團可以被鹽化或酯化。本發(fā)明中命名的化合物可以未鹽化或未酯化形式、或者鹽化和/或酯化形式存在，并且這樣的化合物命名包括原化合物(未鹽化未酯化)及其藥物可接受的鹽和酯。另外，本發(fā)明中命名的某些化合物可能存在一種以上立體異構(gòu)形式，這樣的化合物命名包括所有單一立體異構(gòu)體和這樣的立體異構(gòu)體的所有混合物(不管是外消旋的還是其它形式的)。
表達或活性的“抑制劑”、“激活物”和“調(diào)節(jié)劑”分別是指采用表達或活性的體外及體內(nèi)試驗所鑒定的抑制性、激活性或調(diào)節(jié)性分子。本發(fā)明抑制劑是具有下述功能的組合物抑制PAI-1表達或者抑制結(jié)合PAI-1，部分或完全阻斷PAI-1活性的刺激作用，降低PAI-1活性，阻止PAI-1活性，延遲PAI-1活性的激活作用，鈍化PAI-1活性，脫敏PAI-1活性，或者下調(diào)PAI-1活性。包含PAI-1的樣品或被分析物可以用本發(fā)明組合物處理，然后與沒有本發(fā)明組合物的對照樣品比較。可以指定對照樣品(未用本發(fā)明組合物處理)的相對活性值為100％。在某些實施方案中，當(dāng)相對于對照的活性值為約80％或80％以下時，任選為50％、25％、10％、5％或1％時，則實現(xiàn)對PAI-1的抑制。
在涉及組合物、載體、稀釋劑和試劑時，術(shù)語“藥物可接受的”、“生理上可耐受的”以及它們的其它說法可互換使用，并且表示所述材料能夠給予人，而不會產(chǎn)生可能達到禁止給予本發(fā)明化合物程度的不良生理作用，例如惡心、頭暈、胃部不適等。
“治療有效量”或“藥用有效量”是指給予患者后產(chǎn)生所需作用的劑量。舉例來講，為了抑制PAI-1活性而給予患者時，“治療有效量”足以抑制PAI-1活性。為了治療某種疾病而給予患者時，“治療有效量”足以有效治療該種疾病。
除非另有說明，否則術(shù)語“受治療者”或“患者”可互換使用，并且是指哺乳動物，例如病人和非人類靈長類以及實驗動物(例如兔、大鼠和小鼠)和其它動物。因此，本文使用的術(shù)語“受治療者”或“患者”是指可以給予本發(fā)明化合物的任何哺乳動物患者或受治療者。在本發(fā)明示例性實施方案中，為了確定用本發(fā)明方法治療的患者，采用公認(rèn)的篩選方法確定與目標(biāo)或懷疑的疾病或病癥相關(guān)的風(fēng)險因素，或者確定患者現(xiàn)有疾病或病癥的狀態(tài)。例如，這些篩選方法包括用于確定可能與目標(biāo)或懷疑的疾病或病癥相關(guān)的風(fēng)險因素的常規(guī)檢查。以上方法及其它常規(guī)方法允許臨床醫(yī)師選出需要使用本發(fā)明方法和制劑治療的患者。
當(dāng)任何變量在任何組分或結(jié)構(gòu)式中不止出現(xiàn)一次時，該變量在每次出現(xiàn)時的定義獨立于其在其它每次出現(xiàn)時的定義。取代基和/或變量的組合只有在這樣的組合能產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物時才被允許。
B.取代的吲哚本發(fā)明提供取代的吲哚。優(yōu)選給予這樣的化合物用于抑制患者的PAI-1表達或活性，最終治療患者的與PAI-1活性增強相關(guān)的疾病或病癥，例如PAI-1相關(guān)性疾病。
取代的吲哚包括下式的化合物 式1其中
X為O、S或NH；R1為氫、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、-CO2C1-C6烷基、C6-C10芳基、芳基烷基或雜環(huán)基；R2為氫、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、C6-C10芳基或雜環(huán)基；R3為氫、鹵素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環(huán)烷基或-C(＝O)C1-C3烷基；A1為氫、C6-C10芳基或雜環(huán)基；A2為C6-C10芳基或雜環(huán)基。
這樣的取代吲哚包括下式的芳基氨基-1H-吲哚-2-甲酸衍生物 式2 式3其中R1、R2、R3、A1和A2的定義同上式1中的定義。
本發(fā)明化合物還包括式1-3的前藥、立體異構(gòu)體或者藥物可接受的鹽或酯形式。
對于本發(fā)明的用途來講，取代吲哚由式1-3之一表示時，R1可以為氫、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、芳基烷基、-CO2C1-C6烷基、雜環(huán)基或芳基。在本發(fā)明某些實施方案中，R1為C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、-CO2C1-C6烷基、雜環(huán)基或未取代的芳基。在某些優(yōu)選實施方案中，R1為未取代的芳烷基或被芳基取代的芳烷基。例如，在某些實施方案中，R1為芐基或被苯基取代的芐基。在這樣的實施方案中，R2、R3、X、A1和A2為本文中用于式1-3化合物的定義。
對于本發(fā)明的用途來講，取代吲哚由式1-3之一表示時，R2可以為氫、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、雜環(huán)基或芳基。在本發(fā)明部分實施方案中，R2為C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基或雜環(huán)基。在某些優(yōu)選實施方案中，R2為氫。在這樣的實施方案中，R1、R3、X、A1和A2為本文中用于式1-3化合物的定義。
X可以為O、S或NH。在本發(fā)明部分優(yōu)選實施方案中，X為NH。
對于本發(fā)明的用途來講，取代吲哚由式1-3之一表示時，A2可以為芳基或雜環(huán)基。在本發(fā)明部分實施方案中，A2為雜環(huán)。例如，A2為二苯并噻吩。在某些實施方案中，A2為未取代的芳基或被烷基或芳基取代的芳基。例如，在某些實施方案中，A2為未取代的芳基或被甲基、叔丁基或苯基取代的苯基。在這樣的實施方案中，R1、R2、R3、X和A1為本文中用于式1-3化合物的定義。
對于本發(fā)明的用途來講，取代吲哚由式1-3之一表示時，R3可以為氫、鹵素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環(huán)烷基或-C(＝O)C1-C3烷基。在本發(fā)明部分實施方案中，R3為任選被鹵素、-CN或C1-C3烷氧基取代的C1-C6烷基。在某些優(yōu)選實施方案中，R3為氫。在這樣的實施方案中，R1、R2、X、A1和A2為本文中用于式1-3化合物的定義。
對于本發(fā)明的用途來講，取代吲哚由式1-3之一表示時，A1可以為氫、芳基或雜環(huán)基。在本發(fā)明部分實施方案中，A1為雜環(huán)基或未取代的芳基。例如，A1為苯基。在這樣的實施方案中，R1、R2、R3、X和A1為本文中用于式1-3化合物的定義。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物包括這樣的化合物其中X為O、S或NH；R1為氫、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基、C6-C10芳基、芳基烷基或雜環(huán)基，其中所述C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、C6-C10芳基、芳基烷基或雜環(huán)基任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、未取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的芳烷基、羥基、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、未取代的-OCO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基、未取代的-CO2-芳基、未取代的-CO2(C1-C6烷基)芳基、未取代的-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、未取代的氨基、未取代的烷基氨基、未取代的二烷基氨基、未取代的-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-芳基、未取代的-NHSO2-雜環(huán)、芳基(任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羥基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)或雜環(huán)基(任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羥基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)；R2為氫、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、C6-C10芳基或雜環(huán)基，其中所述C1-C6烷基、C2-C7烯基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、C6-C10芳基或雜環(huán)基任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、未取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的芳烷基、羥基、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、未取代的-OCO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基、未取代的-CO2-芳基、未取代的-CO2(C1-C6烷基)芳基、未取代的-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、未取代的氨基、未取代的烷基氨基、未取代的二烷基氨基、未取代的-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-芳基、未取代的-NHSO2-雜環(huán)、芳基(任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羥基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)或雜環(huán)基(任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羥基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)；R3為氫、鹵素、未取代的C1-C3全氟烷基、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C3-C8環(huán)烷基或未取代的-C(＝O)C1-C3烷基或任選被鹵素、-CN或C1-C3烷氧基取代的C1-C6烷基；A1為氫、C6-C10芳基或雜環(huán)基，其中所述芳基或雜環(huán)基任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、未取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的芳烷基、羥基、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、未取代的-OCO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基、未取代的-CO2-芳基、未取代的-CO2(C1-C6烷基)芳基、未取代的-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、未取代的氨基、未取代的烷基氨基、未取代的二烷基氨基、未取代的-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-芳基、未取代的-NHSO2-雜環(huán)、芳基(任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羥基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)或雜環(huán)基(任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羥基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)；A2為C6-C10芳基或雜環(huán)基，
其中所述芳基或雜環(huán)基任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、未取代的C3-C8環(huán)烷基、未取代的芳烷基、羥基、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、未取代的-OCO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基、未取代的-CO2-芳基、未取代的-CO2(C1-C6烷基)芳基、未取代的-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、未取代的氨基、未取代的烷基氨基、未取代的二烷基氨基、未取代的-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-芳基、未取代的-NHSO2-雜環(huán)、芳基(任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羥基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)或雜環(huán)基(任選被以下基團取代未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、鹵素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羥基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2C1-C6烷基、未取代的-CO2C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)。
本發(fā)明示例性的取代吲哚包括但不限于(1)1-芐基-5-[(3-甲基苯基)氨基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其藥物可接受的鹽或酯形式；(2)1-芐基-5-[(4-叔丁基苯基)氨基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其藥物可接受的鹽或酯形式；(3)1-芐基-5-(1，1′-聯(lián)苯-4-基氨基)-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其藥物可接受的鹽或酯形式；(4)1-芐基-5-(二苯并[b，d]噻吩-4-基氨基)-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其藥物可接受的鹽或酯形式；(5)1-(1，1′-聯(lián)苯-4-基甲基)-5-[(4-叔丁基苯基)氨基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其藥物可接受的鹽或酯形式。
本發(fā)明還提供組合物，該組合物包含取代吲哚(包括式1-3的化合物或其立體異構(gòu)體或藥物可接受的鹽)以及一種或多種藥物可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。這樣的組合物包括用于治療或控制與PAI-1活性增強相關(guān)的疾病或病癥的藥物組合物。在某些實施方案中，所述組合物包含一種或多種取代吲哚的混合物。
部分式1-3化合物包含手性(stereogenic)碳原子或其它手性元素，由此產(chǎn)生立體異構(gòu)體，包括對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體。本發(fā)明包括式1-3的所有立體異構(gòu)體以及這些立體異構(gòu)體的混合物。在本申請全文中，未指出不對稱中心的絕對構(gòu)型時，產(chǎn)品名稱包括各立體異構(gòu)體以及立體異構(gòu)體混合物。
在優(yōu)選某種對映異構(gòu)體時，在部分實施方案中可以提供基本沒有相應(yīng)對映異構(gòu)體的優(yōu)選對映異構(gòu)體。因此，基本沒有相應(yīng)對映異構(gòu)體的對映異構(gòu)體，是指經(jīng)分離技術(shù)分離的或者制備的沒有相應(yīng)對映異構(gòu)體的化合物。本文使用的“基本沒有”是指所述化合物由占很大比例的一種對映異構(gòu)體組成。在優(yōu)選的實施方案中，所述化合物含至少約90％(重量)的優(yōu)選對映異構(gòu)體。在本發(fā)明其它實施方案中，所述化合物含至少約99％(重量)的優(yōu)選對映異構(gòu)體。優(yōu)選的對映異構(gòu)體可以通過采用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法從外消旋混合物分離出來，包括高效液相色譜法(HPLC)以及形成并結(jié)晶手性鹽，或者優(yōu)選的對映異構(gòu)體可以通過本文介紹的方法制備。優(yōu)選對映異構(gòu)體的制備方法在例如以下文獻中有描述Jacques等，Enantiomers，Racemates and Resolutions(Wiley Interscience，New York，1981)；Wilen，S.H.等，Tetrahedron 332725(1977)；Eliel，E.L.Stereochemistryof Carbon Compounds(McGraw-Hill，NY，1962)；Wilen，S.H.Tablesof Resolving Agents and Optical Resolutions第268頁(E.L.Eliel編輯，Univ.of Notre Dame Press，Notre Dame，IN 1972)。
本發(fā)明化合物的示例性鹽形式包括但不限于鈉鹽和鉀鹽。這些化合物的其它示例性鹽形式包括但不限于與本領(lǐng)域已知的藥物可接受的無機堿、有機堿、無機酸或有機酸形成的鹽。當(dāng)本發(fā)明化合物包含堿性部分時，所述酸包括例如乙酸、丙酸、乳酸、檸檬酸、酒石酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、丙二酸、扁桃酸、蘋果酸、苯二甲酸、鹽酸、氫溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、萘磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、樟腦磺酸以及已知的類似可接受的酸。用無機堿制備的鹽形式包括治療上可接受的堿金屬或堿土金屬(例如鈉、鉀、鎂、鈣等)的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽?？山邮艿挠袡C堿包括胺，例如芐胺、單烷基胺、二烷基胺和三烷基胺(其中烷基優(yōu)選具有1-6個碳原子，更優(yōu)選1-3個碳原子)，例如甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、二乙胺、三乙胺、單乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺。示例性的鹽還包括最多含6個碳原子的亞烷基二胺，例如六亞甲基二胺；最多含6個碳原子的環(huán)狀飽和或不飽和的堿，包括吡咯烷、哌啶、嗎啉、哌嗪及其N-烷基和N-羥基烷基衍生物，例如N-甲基-嗎啉和N-(2-羥乙基)-哌啶，或吡啶。也可形成季銨鹽，例如四烷基形式(例如四甲基形式)、烷基-烷醇形式(例如甲基-三乙醇或三甲基-單乙醇形式)以及環(huán)狀銨鹽形式(例如N-甲基吡啶鹽、N-甲基-N-(2-羥乙基)-嗎啉鹽、N，N-二甲基嗎啉鹽、N-甲基-N-(2-羥乙基)-嗎啉鹽或N，N-二甲基-哌啶鹽形式)。這些鹽形式可以用式1-3的酸性化合物和本領(lǐng)域已知的方法制備。
本發(fā)明化合物的示例性酯形式包括但不限于含1-6個碳原子的直鏈烷基酯或含1-6個碳原子的支鏈烷基酯(包括甲基酯、乙基酯、丙基酯、丁基酯、2-甲基丙基酯和1，1-二甲基乙基酯)、環(huán)烷基酯、烷基芳基酯、芐基酯等。其它示例性酯包括但不限于式-COOR5的酯，其中R5選自下式
其中R6、R7、R8和R9獨立選自氫、1-10個碳原子的烷基、6-12個碳原子的芳基、6-12個碳原子的芳基烷基；雜芳基或烷基雜芳基(其中雜芳基環(huán)連接1-6個碳原子的烷基鏈)。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物抑制PAI-1活性。因此，本發(fā)明化合物可用于治療(包括預(yù)防、抑制和/或改善)患者的PAI-1相關(guān)性疾病，包括例如非胰島素依賴性糖尿病、心血管疾病以及與冠狀動脈和腦血管病相關(guān)的血栓形成事件。采用本發(fā)明方法，熟練的醫(yī)務(wù)人員知道如何將取代吲哚(包括式1-3表示的化合物)給予患有與PAI-1活性或表達增強相關(guān)的任何疾病(例如糖尿病或心血管疾病)的患者，以便有效治療該種疾病。
在一個示例性實施方案中，將本發(fā)明化合物給予患者以便治療涉及血栓形成以及血栓形成前狀態(tài)的疾病過程，包括但不限于動脈粥樣硬化斑塊形成、靜脈和動脈血栓形成、心肌缺血、心房纖維性顫動、深靜脈血栓形成、凝血綜合征、肺血栓形成、腦血栓形成、外科手術(shù)(例如關(guān)節(jié)或髖關(guān)節(jié)置換手術(shù))的血栓栓塞性并發(fā)癥以及外周動脈閉塞。
患者的任何與PAI-1活性或表達增強相關(guān)的疾病或病癥都可以用取代吲哚進行治療。示例性的疾病和病癥包括中風(fēng)，例如與心房纖維性顫動相關(guān)的或心房纖維性顫動導(dǎo)致的中風(fēng)；胞外基質(zhì)累積相關(guān)性疾病，包括但不限于腎纖維化、慢性阻塞性肺病、多囊卵巢綜合征、再狹窄、腎血管病以及器官移植排斥反應(yīng)；與新血管生成相關(guān)的疾病，包括但不限于糖尿病性視網(wǎng)膜??；阿爾茨海默病，例如通過使患者的纖維蛋白溶酶濃度水平升高或恢復(fù)正常進行治療；伴隨骨髓外化生的骨髓纖維化，例如通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞增殖以及胞外基質(zhì)蛋白增多進行治療。
本發(fā)明化合物可以用于治療例如糖尿病性腎病以及伴隨腎病的腎透析??；惡性腫瘤或癌癥，包括但不限于白血病、乳腺癌和卵巢癌；腫瘤，包括但不限于脂肉瘤和上皮瘤；敗血癥；肥胖癥；胰島素抵抗；增殖性疾病，包括但不限于牛皮癬；伴隨凝血平衡異常的疾??；低惡性度血管炎癥；腦血管疾病；高血壓；癡呆；骨質(zhì)疏松癥；關(guān)節(jié)炎；呼吸道疾病，例如哮喘；心力衰竭；心律失常；絞痛，包括但不限于心絞痛；動脈粥樣硬化及其后遺癥；腎衰竭；多發(fā)性硬化；骨質(zhì)疏松癥；骨質(zhì)減少；癡呆；外周血管疾??；外周動脈疾病；急性血管綜合癥；微脈管疾病，包括但不限于腎病、神經(jīng)病、視網(wǎng)膜病和腎病綜合征；高血壓；I型和II型糖尿病及相關(guān)疾?。桓哐前Y；高胰島素血癥；惡性病變；癌前病變；胃腸惡性腫瘤；冠心病，包括但不限于一級及二級預(yù)防心肌梗塞、穩(wěn)定和不穩(wěn)定心絞痛，一級預(yù)防冠狀事件以及二級預(yù)防心血管事件；炎性疾病，包括但不限于敗血癥性休克和伴隨感染的血管損傷。
本發(fā)明化合物還可以聯(lián)合第二種治療藥物(包括但不限于促溶血栓藥(prothrombolytic)、溶纖維蛋白藥和抗凝血藥)給予患者，或者結(jié)合其它療法治療，例如含蛋白酶抑制劑的高活性抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法(HAART)，該療法用于治療由纖維蛋白溶解障礙以及HIV-1感染者的高凝固性引起的疾病。在某些實施方案中，本發(fā)明化合物可以結(jié)合涉及維持血管開放的療法和/或在所述療法之后給藥，所述療法包括但不限于血管手術(shù)、血管移植、置入支架(stent patency)、器官、組織和細(xì)胞植入法和移植術(shù)。本發(fā)明化合物還可用于處理透析中使用的血液和血液制品、液態(tài)儲存的血液，尤其用于離體血小板聚集。本發(fā)明化合物還可以作為激素替代藥物給予患者，或者用于減少炎癥標(biāo)志或C反應(yīng)蛋白?？梢越o予本發(fā)明化合物以改善凝血平衡、內(nèi)皮功能或者局部用于傷口愈合(例如預(yù)防瘢疤形成)。本發(fā)明化合物可以給予患者以降低進行心肌換血管術(shù)的風(fēng)險。本發(fā)明化合物也可在用醫(yī)院裝置進行血液化學(xué)分析以測定血漿纖維蛋白溶解能力時加入人血漿中。在某些實施方案中，本發(fā)明化合物可以作為造影劑用于確認(rèn)轉(zhuǎn)移性癌。
C.取代吲哚的合成有機合成領(lǐng)域技術(shù)人員可以通過采用常規(guī)方法及容易獲得的試劑和原料，制備本發(fā)明化合物。本發(fā)明代表性化合物可以按照以下合成流程制備。技術(shù)人員知道如何變化這些方法步驟，這些變化本身是本領(lǐng)域公知的。
在本發(fā)明某些實施方案中，取代吲哚可以按照流程1制備。R1-R3、A1和A2選自以上定義的基團。
流程1 將取代吲哚1首先用已知的鹵化劑(例如氯、溴、N-氯代丁二酰亞胺、N-溴代丁二酰亞胺等)在吲哚C-3位鹵化，溶劑使用例如四氯化碳、氯仿、二甲基甲酰胺(DMF)或N-甲基吡咯烷酮(NMP)，反應(yīng)溫度為0-30℃?；衔?中鹵素為氯、溴或碘?？梢酝ㄟ^與硼酸在堿(優(yōu)選Na2CO3)和Pd(PPh3)4存在下進行Suzuki偶合反應(yīng)而引入C3-A1基團，使用惰性溶劑例如甲苯，反應(yīng)溫度為80-100℃。1H-吲哚中間體3可以用烷基、芐基、苯乙基或萘基甲基的碘化物、溴化物、氯化物或三氟甲磺酸酯在堿(例如K2CO3、Cs2CO3、KOH或NaH)存在下烷基化，使用惰性溶劑例如THF、二烷、吡啶、DMF、NMP或DMSO，反應(yīng)溫度為-40℃至100℃。所得硝基中間體4可以用Raney鎳在肼與乙醇的混合物中于0-40℃處理，還原為胺5。在堿(優(yōu)選2，6-二甲基吡啶)、添加劑(例如肉豆蔻酸)和Cu(OAc)2存在下，可以將胺5用硼酸在惰性溶劑(例如甲苯)中于室溫芳基化。堿水解相應(yīng)的酯6，得到最終產(chǎn)物酸7。在此反應(yīng)中，氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀等可以用作堿，水或者水與甲醇、乙醇、二烷等的混合物可以用作溶劑。最終產(chǎn)物可以通過重結(jié)晶、研磨、制備型薄層色譜法、硅膠快速柱色譜法或高效液相色譜法純化。中間體的純化可以通過相同的方法實現(xiàn)。任選通過加入酸或堿(例如氯化氫氣體或鹽酸)制備鹽。
D.用作藥物組合物的取代吲哚本發(fā)明提供用作藥物的取代吲哚。在一個優(yōu)選實施方案中，取代吲哚被配制為藥物，從而通過例如抑制患者的PAI-1活性而治療與PAI-1活性增加相關(guān)的疾病。
通常，取代吲哚可以通過給予治療藥物領(lǐng)域已知的任何方法以藥物組合物給予，包括口服、含服、局部、全身性(例如透皮、鼻內(nèi)或通過栓劑給藥)或胃腸外(例如肌內(nèi)、皮下或靜脈注射)給藥。組合物可以采用片劑、丸劑、膠囊劑、半固體制劑、散劑、緩釋制劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、糖漿劑、酏劑、氣霧劑或任何其它合適的組合物形式；并且包含至少一種本發(fā)明化合物以及至少一種藥物可接受的賦形劑。合適的賦形劑為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知，合適的賦形劑以及配制組合物的方法可以參見例如以下標(biāo)準(zhǔn)參考文獻Alfonso AR，Remington′s Pharmaceutical Sciences，第17版，MackPublishing Company，Easton PA，1985。合適的液體載體(尤其是用于注射溶液劑的液體載體)包括水、鹽水溶液、葡萄糖水溶液和乙二醇。在本發(fā)明部分實施方案中，適合用于本發(fā)明實踐的取代吲哚將被單獨給予或者聯(lián)合至少一種本發(fā)明其它化合物給予。適合用于本發(fā)明實踐的取代吲哚還可與至少一種用于所治療疾病的其它常規(guī)治療藥物聯(lián)合用藥。
本發(fā)明水性混懸劑可以包含取代吲哚以及適合制備水性混懸劑的賦形劑。這樣的賦形劑可以包括懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、西黃蓍膠和阿拉伯樹膠；以及分散劑或潤濕劑，例如天然的磷脂(例如卵磷脂)、環(huán)氧烷烴與脂肪酸的縮合產(chǎn)物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物(例如十七碳乙烯氧基鯨蠟醇(heptadecaethylene oxycetanol))、環(huán)氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的縮合產(chǎn)物(例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯)、或者環(huán)氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的縮合產(chǎn)物(例如聚氧乙烯山梨聚糖單油酸酯)。水性混懸劑還可包含一種或多種防腐劑(例如對羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸正丙酯)、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑以及一種或多種甜味劑(例如蔗糖、阿司帕坦或糖精)。可以調(diào)節(jié)制劑的摩爾滲透壓濃度。
將取代吲哚-羧酸衍生物懸浮于植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)、礦物油(例如液體石蠟)或它們的混合物中，可以配制油性混懸劑。油性混懸劑可以包含增稠劑，例如蜂蠟、固體石蠟或鯨蠟醇?？梢约尤胩鹞秳├绺视汀⑸嚼嫣谴蓟蛘崽?，以提供適口的口服制劑。這些制劑可以通過加入抗氧化劑(例如抗壞血酸)保存。注射用油性溶媒的實例參見Minto，J.Pharmacol.Exp.Ther.28193-102，1997。本發(fā)明藥物制劑也可為水包油型乳劑。油相可以為上述的植物油或礦物油或其混合物。合適的乳化劑包括天然樹膠(例如阿拉伯樹膠和西黃蓍膠)、天然磷脂(例如大豆卵磷脂)、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如山梨聚糖單油酸酯)、以及這些偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物(例如聚氧乙烯山梨聚糖單油酸酯)。乳劑還可以包含與糖漿劑和酏劑中一樣的甜味劑和矯味劑。這樣的制劑還可以包含緩和劑、防腐劑或著色劑。
所選化合物可以單獨或聯(lián)合其它合適的成分制備為氣霧劑(即它們可以被“霧化”)，用于吸入給藥?？梢詫忪F劑放置到可接受的加壓拋射劑，例如二氯二氟甲烷、丙烷、氮氣等。
適合胃腸外(例如關(guān)節(jié)內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、真皮內(nèi)、腹膜內(nèi)以及皮下)途徑給藥的制劑，包括水性及非水性等滲無菌注射溶液劑(它們可以包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑以及使制劑與預(yù)定接受者血液等滲的溶質(zhì))以及水性和非水性無菌混懸劑(它們可以包含懸浮劑、增溶劑、增稠劑、穩(wěn)定劑和防腐劑)?？梢允褂玫目山邮艿娜苊胶腿軇┯兴?、林格氏液和等滲氯化鈉。另外，無菌不揮發(fā)油通常可以用作溶劑或懸浮介質(zhì)。為此可以使用任何溫和不揮發(fā)油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。此外，脂肪酸(例如油酸)同樣可用于注射制劑。這些溶液是無菌的，并且通常不含不需要的物質(zhì)。當(dāng)化合物有足夠的溶解性時，它們可以直接溶于生理鹽水，可使用或不使用合適的有機溶劑(例如丙二醇或聚乙二醇)。微細(xì)化合物的分散體可以在淀粉或羧甲基纖維素鈉的水溶液、或合適的油(例如花生油)中制備。這些制劑可以通過常規(guī)公知的滅菌技術(shù)除菌。所述制劑可以包含接近生理條件所需的藥物可接受的輔助物質(zhì)，例如pH調(diào)節(jié)劑和緩沖劑、毒性調(diào)節(jié)劑，例如乙酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、乳酸鈉等。這些制劑中的取代吲哚濃度可以在較寬范圍內(nèi)變化，并且根據(jù)所選擇的具體給藥方式以及患者的需要，主要基于液體體積、粘度、體重等因素作出選擇。對于靜脈內(nèi)給藥，制劑可以為無菌注射制劑，例如無菌注射水性或油性混懸劑。這種混懸劑可以使用合適的分散劑或潤濕劑和懸浮劑按照已知技術(shù)配制。無菌注射制劑也可為無毒胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液劑或混懸劑，例如1，3-丁二醇中的溶液劑。所述制劑可以裝在單位劑量或多劑量密封容器例如安瓿和小瓶中。
注射溶液劑和混懸劑可以用前述類型的無菌粉針劑、顆粒劑和片劑制備。
適用于本發(fā)明實踐的取代吲哚可口服給予。根據(jù)組合物類型、單位劑量大小、賦形劑種類以及本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的其它因素，組合物中本發(fā)明化合物用量可在較寬范圍內(nèi)變化。通常，最終組合物可以包含例如0.000001％-10％重量(％w)的取代吲哚，優(yōu)選0.00001％w至1％w，其余的成分為一種或多種賦形劑。
口服藥物制劑可以用本領(lǐng)域公知的藥物可接受的載體以適合口服的劑量配制。這樣的載體使得藥物制劑能夠配制為適合患者攝入的單位劑型片劑、丸劑、散劑、糖錠劑、膠囊劑、液體制劑、錠劑、凝膠劑、糖漿劑、漿狀劑、混懸劑等。適合口服的制劑可包括(a)液體溶液劑，例如有效量的包裝核酸懸浮于稀釋劑，例如水、鹽水或PEG 400；(b)膠囊劑、小藥囊或片劑，各自包含預(yù)定量的為液體、固體、顆?；蛎髂z的活性成分；(c)適當(dāng)液體中的混懸劑；(d)合適的乳劑。
口服藥物制劑可以如下獲得如果需要，將本發(fā)明化合物與固體賦形劑混合，任選研磨所得混合物，然后加工顆?；旌衔?，酌情加入適宜的其它化合物后得到片劑或糖錠核。合適的固體賦形劑有糖類或蛋白質(zhì)填充劑，包括但不限于食糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇；玉米、小麥、水稻、馬鈴薯或其它植物的淀粉；纖維素，例如甲基纖維素、羥甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉；樹膠，包括阿拉伯樹膠和西黃蓍膠；以及蛋白質(zhì)，例如明膠和膠原。如果需要，可以加入崩解劑或增溶劑，例如交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、海藻酸或它們的鹽，例如海藻酸鈉。片劑可以包括一種或多種乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、磷酸鈣、玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、微晶纖維素、明膠、膠態(tài)二氧化硅、滑石粉、硬脂酸鎂、硬脂酸以及其它賦形劑、著色劑、填充劑、粘合劑、稀釋劑、緩沖劑、潤濕劑、防腐劑、矯味劑、染料、崩解劑以及藥物相容的載體。錠劑可以在矯味劑(例如蔗糖)中包含活性成分，也可在惰性基質(zhì)(例如明膠和甘油或者蔗糖和阿拉伯樹膠的乳狀液、凝膠等)中包含活性成分，除活性成分外，還包含本領(lǐng)域已知的載體。
本發(fā)明的取代吲哚還可以栓劑形式用于直腸給藥。這些制劑可以通過藥物與合適的非刺激性賦形劑混合制備，所述賦形劑在常溫是固體，而在直腸溫度是液體，因此將在直腸熔化釋放藥物。這樣的材料有可可脂和聚乙二醇。
本發(fā)明化合物還可以通過鼻內(nèi)、眼內(nèi)、陰道內(nèi)以及直腸內(nèi)途徑給藥，包括栓劑、吹入劑、散劑和氣霧劑(例如類固醇吸入劑，參見Rohatagi，J.Clin.Pharmacol.351187-1193，1995；Tjwa，Ann.AllergyAsthma Immunol.75107-111，1995)。
本發(fā)明的取代吲哚可以通過局部途徑透皮給藥，可以配制為涂藥棒、溶液劑、混懸劑、乳劑、凝膠劑、乳膏劑、軟膏劑、糊劑、膠凍劑(jellies)、涂劑、散劑和氣霧劑。
包囊材料也可與本發(fā)明化合物一起使用，術(shù)語“組合物”作為制劑可包括活性成分以及包囊材料，含有或不含其它載體。例如，本發(fā)明化合物還可以微球給藥，用于在體內(nèi)緩慢釋放。在一個實施方案中，微球可以通過真皮內(nèi)注射含藥物的微球給予，它們在皮下緩慢釋放藥物(參見Rao，J.Biomater Sci.Polym.Ed.7623-645，1995；作為生物可降解的注射凝膠劑(參見例如Gao，Pharm.Res.12857-863，1995)；或者作為口服微球(參見例如Eyles，J.Pharm.Pharmacol.49669-674，1997)。透皮以及真皮內(nèi)途徑給藥均提供數(shù)周或數(shù)月的恒定釋藥。扁囊劑也可用于給予本發(fā)明化合物，例如抗動脈粥樣硬化藥物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明化合物可以利用脂質(zhì)體給藥，脂質(zhì)體與細(xì)胞膜融合，或者被內(nèi)吞，即利用連接脂質(zhì)體的配體或直接連接寡核苷酸的配體結(jié)合到細(xì)胞的表面膜蛋白受體上，從而導(dǎo)致內(nèi)吞作用。通過利用脂質(zhì)體，尤其是在脂質(zhì)體表面載有靶細(xì)胞特異性配體或在其它方面優(yōu)先定向特定器官的時候，可以將化合物集中給予體內(nèi)的靶細(xì)胞。(參見例如Al-Muhammed，J.Microencapsul.13293-306，1996；Chonn，Curr.Opin.Biotechnol.6698-708，1995；Ostro，Am.J.Hosp.Pharm.461576-1587，1989)。
在其它情況下，優(yōu)選的制劑可以為凍干粉針劑，它可以包含例如以下任何或全部成分1mM-50mM組氨酸，0.1％-2％蔗糖，2％-7％甘露醇，pH 4.5-5.5，此制劑可在臨用前與緩沖液混合。
本發(fā)明藥物組合物除包含取代吲哚外，還可任選包含至少一種其它用于治療與PAI-1活性增加相關(guān)的疾病或病癥的治療藥物。
藥物組合物通常配制為無菌、基本等滲的，并且完全符合美國食品與藥品管理局的藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(Good ManufacturingPractice，GMP)的所有規(guī)定。
E.確定取代吲哚的劑量方案本發(fā)明提供采用取代吲哚抑制患者的PAI-1活性以治療與PAI-1活性增加相關(guān)的疾病和病癥的方法。在本發(fā)明示例性實施方案中，技術(shù)人員將用本發(fā)明化合物治療患有與PAI-1濃度和/或活性增加相關(guān)的疾病的患者。
對于治療目的來講，本文公開的組合物或化合物可按單次大劑量給藥，通過長時間連續(xù)給藥方式(例如連續(xù)透皮、粘膜或靜脈給藥)給予患者，或者按多次給藥方案給予患者(例如按每小時、每天、每周計的多次給藥方案)。例如，本發(fā)明藥物制劑可以每天給予一次或多次，每周3次或者每周1次。在本發(fā)明示例性實施方案中，本發(fā)明藥物制劑每天口服給藥1次或2次。
關(guān)于這點，生物活性藥物的治療有效劑量可以包括長期治療方案內(nèi)的多次劑量，所述方案將在臨床上獲得顯著療效，從而緩解一種或多種與PAI-1活性增加相關(guān)的癥狀或可檢出的病癥。就此而言，確定有效劑量通?；趧游锬Ｐ脱芯?，然后是人體臨床試驗，并且通過測定有效劑量和顯著減少患者目標(biāo)癥狀或疾病的發(fā)生或嚴(yán)重程度的給藥方案確定。在這方面，合適的模型包括例如鼠、大鼠、豬、貓、非人類靈長類動物以及本領(lǐng)域已知的其它可接受的動物模型?；蛘?，有效劑量可以用體外模型(例如免疫學(xué)分析和組織病理學(xué)分析)測定。使用這樣的模型時，通常只需要常規(guī)的計算和調(diào)整就可確定給予治療有效量(例如鼻內(nèi)、透皮、靜脈或肌內(nèi)有效引起所需反應(yīng)的量)的生物活性藥物所需的適當(dāng)濃度和劑量。在替代實施方案中，對于治療或診斷目的來講，生物活性藥物的“有效量”或“治療有效劑量”將僅僅抑制或增強一種或多種與上述疾病或病癥相關(guān)的所選生物活性。
當(dāng)然，生物活性藥物的實際劑量將根據(jù)各種因素而變化，例如作用范圍和患者的具體狀態(tài)(例如患者的年齡、體型、健康狀況、癥狀程度、敏感性因素等)、給藥時間、給藥途徑以及同時給予的其它藥物或療法?？梢哉{(diào)整劑量方案以獲得最佳預(yù)防性或治療性反應(yīng)。本文的“治療有效劑量”是指給藥后產(chǎn)生作用的劑量。更具體地講，本發(fā)明化合物的治療有效劑量優(yōu)選緩解與PAI-1活性增加相關(guān)的疾病的癥狀、并發(fā)癥或生化指標(biāo)。準(zhǔn)確劑量將取決于治療目的，并且由本領(lǐng)域技術(shù)人員用已知技術(shù)確定(參見例如Lieberman，PharmaceuticalDosage Forms(第1-3卷，1992)；Lloyd，1999，The Art，Science，andTechnology of Pharmaceutical Compounding；Pickar，1999，DosageCalculations)。治療有效劑量也是這樣的劑量用臨床術(shù)語來講，就是活性藥物的治療有益作用超過其任何毒性或有害副作用。需要進一步注意的是，對于每個具體患者，具體的劑量方案應(yīng)該根據(jù)個體需要以及監(jiān)管給予通透性肽(permeabilizing peptide)和其它生物活性藥物的專業(yè)人員的判斷進行評價并隨時間作出調(diào)整。
在本發(fā)明示例性實施方案中，制備化合物的單位劑型用于標(biāo)準(zhǔn)給藥方案。這樣，在醫(yī)師指導(dǎo)下組合物很容易再分成更小的劑量。例如，單位劑量可以為包裝的散劑、小瓶或安瓿，優(yōu)選為膠囊劑或片劑。組合物的這些單位劑型中的活性化合物含量可以為例如約1克至約15克或更多，根據(jù)患者的具體需要每天一次或多次給藥。開始的治療方案用約1克的最小日劑量，可以利用PAI-1的血液濃度以及患者癥狀緩解分析確定是需要更大還是更小的劑量。例如，本發(fā)明化合物的有效口服劑量可以為約0.1mg/kg/天至約1,000mg/kg/天。優(yōu)選給予約10mg/kg/天至約600mg/kg/天，更優(yōu)選約25mg/kg/天至約200mg/kg/天，甚至更優(yōu)選約50mg/kg天至約100mg/kg/天。
在某些實施方案中，本發(fā)明涉及式1-3化合物的前藥。本文使用的術(shù)語“前藥”是指通過代謝方式(例如水解)在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為式1-3化合物的化合物。前藥的各種形式是本領(lǐng)域已知的，例如以下文獻闡述的形式Bundgaard(編輯)，Design of Prodrugs，Elsevier(1985)；Widder等(編輯)，Methods in Enzymology，第4卷，Academic Press(1985)；Krogsgaard-Larsen等(編輯)，“Design and Application ofProdrugs，Textbook of Drug Design and Development，第5章，113-191(1991)，Bundgaard等，Journal of Drug Delivery Reviews，81-38(1992)，Bundgaard，J.of Pharmaceutical Sciences，77285以及下列等等(1988)；Higuchi和Stella(編輯)，Prodrugs as Novel Drug DeliverySystems，American Chemical Society(1975)。
F.藥盒在包含取代吲哚的藥物配制于合適載體中后，可以將其裝入適當(dāng)?shù)娜萜鳎①N上用于治療PAI-1相關(guān)性疾病(例如白血病)的標(biāo)簽。另外，包含至少一種可用于治療PAI-1相關(guān)性疾病的其它治療藥物的另一藥物也可以裝入容器并貼上用于治療相應(yīng)適應(yīng)癥的標(biāo)簽?；蛘撸瑔我凰幬锇〈胚岷椭辽僖环N可用于治療PAI-1相關(guān)性疾病的其它治療藥物，將其裝入適當(dāng)?shù)娜萜鞑⑶屹N上治療用標(biāo)簽。對于包含取代吲哚的藥物以及在一種藥物中包含取代吲哚和至少一種可用于治療PAI-1相關(guān)性疾病的其它治療藥物的聯(lián)合藥物的給藥，這樣的標(biāo)簽將包括例如有關(guān)給藥劑量、給藥頻率及給藥方法的說明。類似地，對于容器中提供的多種藥物的給藥，這樣的標(biāo)簽將包括例如關(guān)于各藥物的給藥劑量、給藥頻率及給藥方法的說明。
實施例實施例1-5分別描述化合物1-5的合成。
實施例11-芐基-5-[(3-甲基苯基)氨基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸的合成步驟1將5-硝基-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(Parish ChemicalCompany，1.0g，3.23mmol)和芐基溴(0.60g，3.5mmol)的THF(50ml)溶液用Cs2CO3(3.26g，10mmol)處理，加熱至溫和回流16小時。在冷卻至室溫后，通過加入水猝滅反應(yīng)物，然后在水和EtOAc間分配。有機相經(jīng)硫酸鎂干燥，濃縮，得到1-芐基-5-硝基-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(1.20g，93％，淡黃色固體)1HNMR(DMSO-d6)δ0.93(t，J＝7.0Hz，3H)，4.11(q，J＝7.0Hz，2H)，5.91(s，2H)，7.12(d，J＝8.3Hz，2H)，7.30-7.32(m，3H)，7.50-7.55(m，5H)，7.92(d，J＝9.2Hz，1H)，8.22(dd，J＝9.2，2.0Hz，1H)，8.34(d，J＝2.0Hz，1H)；MS(EI)m/z 400.1(MH+)；C24H20N2O4分析計算值C，71.99；H，5.03；N，7.00。實測值C，71.77；H，5.14；N，6.71。
步驟2將大量過量的Raney鎳分批加入到1-芐基-5-硝基-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(1.20g，3mmol)和肼(1.5ml，47.9mmol)的50ml乙醇攪拌溶液中。在室溫攪拌2小時后，催化劑通過Celite521短墊過濾除去。濃縮濾液，得到5-氨基-1-芐基-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(1.0g，90％，灰白色固體)1H NMR(DMSO-d6)δ0.91(t，J＝7.0Hz，3H)，4.03(q，J＝7.0Hz，2H)，4.77(s，2H)，5.71(s，2H)，6.61(d，J＝1.8Hz，1H)，6.75(d，J＝2.2Hz，1H)，7.21-7.45(m，11H)；MS(EI)m/z 371.2(MH+)。
步驟3將3-甲基苯基硼酸(0.20g，1.5mmol)、Cu(OAc)2(0.036g，0.2mmol)和肉豆蔻酸(0.046g，0.2mmol)在配備大攪拌棒的100ml圓底燒瓶中混合。裝上橡膠隔片，依次加入無水甲苯(2ml)、2，6-二甲基吡啶(0.116ml，1.0mmol)和5-氨基-1-芐基-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(0.19g，0.5mmol)。將所得混合物高速攪拌24小時，用乙酸乙酯(10ml)稀釋，通過硅膠墊過濾，然后用柱色譜法純化(5-25％EtOAc/己烷)，得到樹膠狀固體。向攪拌的樹膠狀固體的15ml 2∶1∶1 THF/MeOH/水溶液中加入氫氧化鋰一水合物(0.2g，4.8mmol)。在40℃攪拌反應(yīng)物5小時。除去大部分有機溶劑，將反應(yīng)混合物用冰醋酸酸化(pH 6)，收集固體，用半制備型HPLC純化(色譜柱Phenomenex C18 Luna21.6mm×60mm，5μM；溶劑A水(0.1％TFA緩沖液)；溶劑B乙腈(0.1％TFA緩沖液)；溶劑梯度0分鐘0％B；10分鐘100％B；保持100％B 5分鐘。流速22.5ml/min)，根據(jù)UV吸收收集產(chǎn)物，濃縮，得到標(biāo)題化合物(0.11g，50％，褐色固體)1H NMR(DMSO-d6)δ2.18(s，3H)，5.81(s，2H)，6.51-6.53(m，1H)，6.70-6.72(m，1H)，6.75-6.80(m，1H)，7.00-7.60(m，13H)，7.88(s，1H)，12.86(s，1H)；MS(ESI)m/z 433(MH+)；MS(ESI)m/z 431([M-H]-)；C29H24N2O2·0.1H2O分析計算值C，80.20；H，5.62；N，6.45。實測值C，80.03；H，5.61；N，6.61。
實施例21-芐基-5-[(4-叔丁基苯基)氨基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸的合成按照實施例1步驟3的方法，使用5-氨基-1-芐基-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯和4-叔丁基苯硼酸，制備標(biāo)題化合物，得到淺綠色固體1H NMR(DMSO-d6)δ1.22(s，9H)，5.81(s，2H)，6.87(d，J＝6.7Hz，2H)，7.10-7.50(m，15H)，12.85(br s，1H)；MS(ESI)m/z 475(MH+)；MS(ESI)m/z 473([M-H]-)；C32H30N2O2·0.5H2O分析計算值C，79.78；H，6.46；N，6.02。實測值C，79.42；H，6.28；N，6.01。
實施例31-芐基-5-(1，1′-聯(lián)苯-4-基氨基)-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸的合成按照實施例1步驟3的方法，使用5-氨基-1-芐基-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯和4-雙苯基硼酸，制備標(biāo)題化合物，得到淺綠色固體1H NMR(DMSO-d6)δ5.83(s，2H)，7.00-7.80(m，21H)，12.89(s，1H)；MS(ESI)m/z 495(MH+)；MS(ESI)m/z 493([M-H]-)；C34H27N2O2HRMS計算值495.2084；實測值(ESI+)495.2063；C34H26N2O2·0.15TFA分析計算值C，80.51；H，5.15；N，5.48。實測值C，80.37；H，4.86；N，5.32。
實施例41-芐基-5-(二苯并[b，d]噻吩-4-基氨基)-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸的合成按照實施例1步驟3的方法，使用5-氨基-1-芐基-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯和4-二苯并噻吩硼酸，制備標(biāo)題化合物，得到黑色固體1H NMR(DMSO-d6)δ5.82(s，2H)，7.00-8.20(m，27H)；MS(ESI)m/z 525(MH+)；C34H25N2O2S HRMS計算值525.1637；實測值(ESI+)525.1622；C34H24N2O2S·0.3ACN分析計算值C，74.88；H，4.89；N，5.81。實測值C，75.14；H，4.53；N，5.82。
實施例51-(1，1′-聯(lián)苯-4-基甲基)-5-[(4-叔丁基苯基)氨基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸的合成步驟1按照實施例1步驟1的方法，使用5-硝基-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯和4-溴甲基聯(lián)苯，制備1-(1，1′-聯(lián)苯-4-基甲基)-5-硝基-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯，得到淡黃色固體
1HNMR(DMSO-d6)δ0.95(t，J＝7.0Hz，3H)，4.13(q，J＝7.0Hz，2H)，5.96(s，2H)，7.30-7.32(m，14H)，7.62(d，J＝2.3Hz，1H)，8.25(d，J＝2.8Hz，1H)，8.36(s，1H)；MS(ESI)m/z 477(MH+)；C30H25N2O4HRMS計算值477.1815；實測值(ESI+)477.1806；C30H24N2O4分析計算值C，75.62；H，5.08；N，5.88。實測值C，75.25；H，5.18；N，5.47。
步驟2按照實施例1步驟2的方法，使用5-硝基-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯，制備5-氨基-1-(1，1′-聯(lián)苯-4-基甲基)-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯，得到淡黃色固體1H NMR(CDCl3)δ0.96(t，J＝7.0Hz，3H)，4.12(q，J＝7.0Hz，2H)，5.79(s，2H)，6.75-6.85(m，2H)，7.15-7.60(m，17H)；MS(ESI)m/z 447(MH+)。
步驟3按照實施例1步驟3的方法，使用5-氨基-1-(1，1′-聯(lián)苯-4-基甲基)-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯和4-叔丁基苯硼酸，制備標(biāo)題化合物，得到淺綠色固體1H NMR(CDCl3)δ1.28(s，9H)，5.85(s，2H)，6.86(d，J＝8.6Hz，2H)，7.15-7.55(m，19H)；MS(ESI)m/z 551(MH+)；C38H34N2O2HRMS計算值551.2699；實測值(ESI+)551.2681；C38H34N2O2·0.5H2O分析計算值C，81.55；H，6.30；N，5.01。實測值C，81.91；H，6.39；N，4.65。
實施例6PAI-1抑制的初步篩選將試驗化合物溶于DMSO，終濃度為10mM，然后用生理緩沖液稀釋100倍。抑制試驗首先將試驗化合物(終濃度1-100μM，0.2％的最大DMSO濃度)加入到含140nM重組人血纖維蛋白溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1；Molecular Innovations，Royal Oak，MI)的緩沖液(pH 6.6)中。在室溫下溫育1小時后，加入70nM重組人組織血纖維蛋白溶酶原激活物(tPA)，將試驗化合物、PAI-1和tPA的混合物再溫育30分鐘。第二次溫育后，加入tPA的生色底物Spectrozyme-tPA(American Diagnostica，Greenwich，CT)，在第0分鐘和第60分鐘于405nm讀出吸光度。相對PAI-1抑制等于在試驗化合物和PAI-1存在下的殘留tPA活性。對照處理包括在沒有任何試驗化合物作用于tPA的情況下，TPA被PAI-1(摩爾比2∶1)完全抑制。
實施例7確定抑制PAI-1的IC50的試驗該試驗基于tPA與活性PAI-1之間的非SDS可解離相互作用。首先，將試驗板用人tPA(10μg/ml)包被。將本發(fā)明試驗化合物溶于DMSO，濃度為10mM，然后用生理緩沖液(pH 7.5)稀釋至終濃度為1-50μM。將試驗化合物與人PAI-1(50ng/ml)一起在室溫下溫育15分鐘。tPA包被板用0.05％吐溫(Tween)-20和0.1％BSA的溶液洗滌，然后將該板用3％BSA溶液封閉。向tPA包被板中加入取代吲哚/PAI-1溶液的等分試樣，室溫下溫育1小時，然后洗滌。如下評價結(jié)合板的活性PAI-1加入1∶1000稀釋度的抗人PAI-1的33B8單克隆抗體的等分試樣，將該板在室溫下溫育1小時(Molecular Innovations，RoyalOak，MI)。再次洗滌板，加入用山羊血清按1∶50,000稀釋的山羊抗小鼠IgG-堿性磷酸酶綴合物溶液。將該板在室溫下溫育30分鐘，洗滌，然后加入堿性磷酸酶底物溶液。將該板在室溫下溫育45分鐘，在OD405nm測定顯色。在不同試驗化合物濃度下定量測定結(jié)合tPA的活性PAI-1，以測定IC50。運用對數(shù)最佳擬合方程對結(jié)果進行分析。根據(jù)0-100ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出試驗靈敏度為5ng/ml人PAI-1。
本發(fā)明化合物抑制血纖維蛋白溶酶原激活物抑制劑-1，結(jié)果見表1。
表1
盡管為了清楚理解起見，上文通過實施例詳細(xì)描述了本發(fā)明，對于技術(shù)人員來說顯而易見的是，所公開內(nèi)容中包括某些變化和改進，這些變化和改進無需過多實驗就可付諸實施，因而落入所附權(quán)利要求書的范圍內(nèi)，實施例是說明性而非限制性的。
以上引用的所有出版物和專利文獻通過引用全部結(jié)合到本文中用于所有目的，其程度如同每個出版物或?qū)＠墨I單獨指明結(jié)合到本文中一樣。
權(quán)利要求
1.一種具有下式結(jié)構(gòu)的化合物 式1其中X為O、S或NH；R1為氫、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、-CO2C1-C6烷基、C6-C10芳基、芳基烷基或雜環(huán)基；R2為氫、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、C6-C10芳基或雜環(huán)基；R3為氫、鹵素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8環(huán)烷基或-C(＝O)C1-C3烷基；A1為氫、C6-C10芳基或雜環(huán)基；A2為C6-C10芳基或雜環(huán)基；所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基本身或者作為另一基團的組成部分時任選被取代。
2.權(quán)利要求1的化合物或其藥物可接受的鹽或酯形式，其中X為-NH-。
3.權(quán)利要求1或2的化合物或其藥物可接受的鹽或酯形式，其中R2為氫。
4.權(quán)利要求1或2的化合物，其中R2為C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基或雜環(huán)基。
5.權(quán)利要求1-4中任一項的化合物，其中R1為C3-C8環(huán)烷基、C7-C11二環(huán)烷基、-CO2Cz1-C6烷基、雜環(huán)基或未取代的芳基。
6.權(quán)利要求1-4中任一項的化合物，其中R1為未取代的芳烷基或被芳基取代的芳烷基。
7.權(quán)利要求1-6中任一項的化合物，其中R1為芐基。
8.權(quán)利要求1-7中任一項的化合物，其中A2為雜環(huán)。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中A2為二苯并噻吩。
10.權(quán)利要求1-7中任一項的化合物，其中A2為未取代的芳基或被烷基或芳基取代的芳基。
11.權(quán)利要求1-10中任一項的化合物，其中R3為氫、任選被鹵素、-CN或C1-C3烷氧基取代的C1-C6烷基。
12.權(quán)利要求1-10中任一項的化合物，其中A1為雜環(huán)基或未取代的芳基。
13.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物是1-芐基-5-[(3-甲基苯基)氨基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其藥物可接受的鹽或酯形式。
14.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物是1-芐基-5-[(4-叔丁基苯基)氨基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其藥物可接受的鹽或酯形式。
15.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物是1-芐基-5-(1，1′-聯(lián)苯-4-基氨基)-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其藥物可接受的鹽或酯形式。
16.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物是1-芐基-5-(二苯并[b，d]噻吩-4-基氨基)-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其藥物可接受的鹽或酯形式。
17.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物是1-(1，1′-聯(lián)苯-4-基甲基)-5-[(4-叔丁基苯基)氨基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其藥物可接受的鹽或酯形式。
18.一種抑制PAI-1活性的方法，該方法包括給予需要這種抑制的患者治療有效量的權(quán)利要求1-17中任一項的化合物。
19.一種治療PAI-1相關(guān)性疾病的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的權(quán)利要求1-17中任一項的化合物。
20.權(quán)利要求19的方法，其中所述PAI-1相關(guān)性疾病是纖維蛋白溶解系統(tǒng)障礙。
21.權(quán)利要求19的方法，其中所述PAI-1相關(guān)性疾病是血栓形成、心房纖維性顫動、肺纖維化、外科手術(shù)的血栓栓塞性并發(fā)癥、心血管疾病、心肌缺血、中風(fēng)、動脈粥樣硬化斑塊形成、慢性阻塞性肺病、腎纖維化、多囊卵巢綜合征、糖尿病、阿爾茨海默病或癌癥。
22.權(quán)利要求21的方法，其中所述血栓形成選自靜脈血栓形成、動脈血栓形成、腦血栓形成和深靜脈血栓形成。
23.權(quán)利要求20的方法，其中所述PAI-1相關(guān)性疾病是由患者的非胰島素依賴性糖尿病引起的心血管疾病。
24.權(quán)利要求19-23中任一項的方法，其中所述治療有效量為25mg/kg/天至200mg/kg/天。
25.一種藥物組合物，該組合物包含權(quán)利要求1-17中任一項的化合物或其藥物可接受的鹽或酯形式以及藥物可接受的賦形劑或載體。
26.一種治療血栓形成、心房纖維性顫動、肺纖維化、外科手術(shù)的血栓栓塞性并發(fā)癥、中風(fēng)、心肌缺血、動脈粥樣硬化斑塊形成、慢性阻塞性肺病或腎纖維化的方法，該方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
全文摘要
本發(fā)明總的來講涉及取代的吲哚例如取代的1H－吲哚－2－甲酸衍生物及其使用方法。
文檔編號A61P7/00GK1890214SQ200480034508
公開日2007年1月3日 申請日期2004年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月25日
發(fā)明者B·胡 申請人:惠氏公司