專利名稱：從土鱉蟲提取抗腫瘤有效部位脂肪酸的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗腫瘤物質(zhì)，特別涉及一種從中藥土鱉蟲中分離、提取的抗腫瘤有效部位脂肪酸。
背景技術(shù)：
目前，抗腫瘤化療新藥的研制與應(yīng)用發(fā)展迅速，特別是取自于天然藥物經(jīng)修飾、人工合成等方法研制的化療藥物不斷問市，如紫杉醇、多希紫杉醇、草酸鉑、健擇、異長春花堿、開普拓、希羅達(dá)、阿里米塔等藥物，具有一定的治療效果。其中，中藥是我國獨(dú)特的天然藥物寶庫。
在本發(fā)明之前，醫(yī)藥界已經(jīng)認(rèn)識(shí)到單味中藥土鱉蟲具有抗腫瘤作用和療效，在體外對(duì)白血病細(xì)胞有抑制作用，但到底是土鱉蟲中的哪個(gè)具體成份能夠有效抑制腫瘤發(fā)展不清楚，對(duì)其抗腫瘤機(jī)理也認(rèn)識(shí)不清?，F(xiàn)階段的認(rèn)識(shí)多數(shù)停留在推測(cè)上，有說是土鱉蟲中β-谷甾醇成份和以油酸為主的不飽和脂肪酸很有可能有抗癌作用，又一說土鱉蟲在治療體外肝癌、胃癌等方面具有抗突變及抗腫瘤功能。但這些推測(cè)和說法均缺乏理論依據(jù)和機(jī)理分析，更缺乏實(shí)驗(yàn)證實(shí)。因而，就無法將其真正能夠抗腫瘤的有效成份提取、分離出來，研制專門治療抗腫瘤藥物，并實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就在于克服上述缺陷，分離、提取土鱉蟲中抗腫瘤的有效部位脂肪酸。
本發(fā)明的技術(shù)方案是從土鱉蟲提取抗腫瘤有效部位脂肪酸，其主要技術(shù)特征在于從土鱉蟲中提取有效部位脂肪酸。
本發(fā)明的進(jìn)一步技術(shù)方案是有效部位主要為不飽和脂肪酸。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和效果在于采用簡單的方法分離、提取到土鱉蟲中真正具有抗腫瘤作用和療效的脂肪酸，并經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)具有廣譜殺瘤作用，對(duì)多種惡性腫瘤細(xì)胞具有較強(qiáng)的抑制作用。制備方法簡單，藥物成本低。
具體實(shí)施例方式
首先進(jìn)行有機(jī)溶劑提取以無水乙醇或石油醚等有機(jī)溶劑回流提取，經(jīng)皂化反應(yīng)后得脂肪酸。具體過程及步驟取1000g，無水乙醇或石油醚等有機(jī)溶劑回流提取，得提取液；回收溶劑，得粗脂肪；還可以取1000g，超臨界提取得粗脂肪；再加無水乙醇或甲醇、KOH，熱回流，蒸干溶劑，得固體物；然后水溶解，用少量乙醚萃取，取水層，加入HCL，調(diào)節(jié)PH值至酸性，乙醚萃取，取乙醚層；揮去溶劑，得粗脂肪酸；再進(jìn)行柱層析法以硅膠等為吸附劑，用于分離脂肪酸；以石油醚、氯仿、甲醇、乙醚、乙酸乙酯、丙酮和乙酸等有機(jī)溶劑及任何比例組合溶劑為洗脫劑進(jìn)行層析分離，得到有效部位脂肪酸。
成份分析主要為7-十八碳烯酸、十六烷酸、9-十六碳烯酸、十八酸，該四種物質(zhì)以單個(gè)至多個(gè)任意比例組合。
除含上述7-十八碳烯酸、十六烷酸、9-十六碳烯酸、十八酸外，還含有肉豆蔻酸、二十酸、油酸等。
細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)體外實(shí)驗(yàn)通過體外細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明所述的有效部位的有效性。
實(shí)驗(yàn)用藥物本發(fā)明有效部位實(shí)驗(yàn)方法采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)顯色法確定藥物濃度土鱉蟲有效部位脂肪酸在100μg/ml的劑量對(duì)人胃低分化腺癌細(xì)胞株BGC-823、腸癌細(xì)胞株LOVO和原發(fā)性肝癌細(xì)胞株HepG-II即有明顯的抑制作用，抑制率達(dá)80％以上。2-4小時(shí)即開始起作用，至24小時(shí)后達(dá)最大作用效果并該效果隨時(shí)間延長保持穩(wěn)定。
權(quán)利要求
1.從土鱉蟲提取抗腫瘤有效部位脂肪酸，其特征在于從土鱉蟲中提取有效部位脂肪酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從土鱉蟲提取抗腫瘤有效部位脂肪酸，其特征在于有效部位主要為不飽和脂肪酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從土鱉蟲提取抗腫瘤有效部位脂肪酸，其特征在于有效部位為含有7-十八碳烯酸、十六烷酸、9-十六碳烯酸、十八酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從中藥土鱉蟲中分離、提取的抗腫瘤有效成分脂肪酸。本發(fā)明采用有機(jī)溶劑及柱層析法從土鱉蟲提取抗腫瘤有效成分脂肪酸且為不飽和脂肪酸，主要成分為7，十八碳烯酸、十六烷酸、9，十六碳烯酸、十八酸，可以單個(gè)至多個(gè)任意比例組合。解決了現(xiàn)有技術(shù)不知土鱉蟲中到底哪個(gè)成分具有殺腫瘤及機(jī)理所存在的盲目性，無法制成專門的抗腫瘤藥物的缺陷。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，無毒性，具有廣譜殺瘤作用，對(duì)多種惡性腫瘤具有抑制作用和抗腫瘤、抗突變作用。本發(fā)明藥物成本低，可形成產(chǎn)業(yè)化。
文檔編號(hào)A61K35/64GK1709284SQ20051004066
公開日2005年12月21日 申請(qǐng)日期2005年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月23日
發(fā)明者劉寶瑞, 鄒璽, 錢曉萍 申請(qǐng)人:南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院