專利名稱：一種參附凍干粉針劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術領域，具體涉及一種參附凍干粉針劑及其制備方法。
背景技術：
注射用參附是由古方參附湯衍變而來，古人取人參能大補元氣、固脫生津，附片能溫壯真陽、通陽運氣，故二藥配伍有回陽救逆、益氣固脫功效，臨床可用于治療陽氣虛脫所致的厥脫癥(休克)；根據(jù)人參、附片的藥理作用，古人還用其治療臨床其他由陽氣虛弱所致的多種疾病。如心陽氣虛損所致的胸痹、怔忡；肺腎陽虛的喘咳；脾胃陽虛的胃疼、泄瀉；腎陽虛衰的水腫、陽痿；陽氣不足、寒濕內(nèi)阻經(jīng)脈的腰腿疼痛、痹癥等。由于其藥簡效宏，因此亦可在此方基礎上加減藥味以治病，故備受后世醫(yī)家所推崇如《嬰童類萃》、《景岳全書》、《胎產(chǎn)心法》、《雜證會心錄》、《方劑學》等書中對參附藥方均有記載。
現(xiàn)代研究表明參附注射液中主要成分為人參皂苷和烏頭堿。人參性甘，微苦，微溫。具有大補元氣，生津止渴，安神等功能。《本經(jīng)》記載“補五臟，安精神，定動魂魄，止驚悸，除邪氣，明目，開心益智”；烏頭堿具鎮(zhèn)痛、麻醉、消炎、降壓等作用，但由于其有毒，因此臨床應用的均為經(jīng)炮制后減毒但藥理作用不變的制附子(黑附片)。
經(jīng)研究證實，人參皂苷具有抗應激、抗氧化、抗心肌缺血等作用；參附注射液對心肌缺血損傷具有保護作用也得到證實，并在臨床廣泛用于休克、各種心衰、心律失常等疾病的防治。
將參附制劑改為凍干粉針劑可解決中藥注射液不穩(wěn)定的問題，使產(chǎn)品更加穩(wěn)定，便于貯藏、運輸和使用。
中國專利，申請?zhí)枮?3135699.0的專利申請公開了一種參附凍干粉針劑制備方法，但用此方法制備出的參附凍干粉針劑的溶解性還不夠理想。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種安全、有效、質量穩(wěn)定、便于貯存、溶解性好、，溶解速度快的參附凍干粉針劑及其制備方法。
本發(fā)明的參附粉針劑由紅參、附片與適宜的賦型劑組成。本發(fā)明的粉針劑采用冷凍干燥法進行凍干，以去除藥液中的水分，克服了藥物在水中的不穩(wěn)定性，同時，與原有專利凍干工藝方法比較，凍型更好，更穩(wěn)定。依照此法制備的參附凍干粉針劑，能夠保證藥效穩(wěn)定，療效確切。
本發(fā)明是通過以下技術方案實現(xiàn)的一種參附凍干粉針劑，其特征在于其中制成有效成分的原料為紅參、附片、甘露醇，其中紅參、附片、甘露醇的質量比為100∶200∶20-30。
一種權利要求1所述的參附凍干粉針劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟按所述質量比選取紅參、附片；將所取紅參粉碎成粗粉，加乙醇浸泡12小時，濾過，藥渣加乙醇超聲提取，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得紅參提取物，備用；將所取附片粉碎成粗粉，加乙醇浸泡12小時，濾過，濾渣加乙醇超聲提取，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得附子提取物，備用；將紅參提取物、附片提取物加注射用水溶解，超濾；將甘露醇加部分注射用水溶解，混勻以上兩種溶液，調(diào)pH4.5～7.0，加注射用水，過濾、分裝、凍干即得。
所述的乙醇濃度為75％，提取次數(shù)為3次，提取時間為每次20分鐘。
所述的甘露醇加部分注射用水溶解至10％甘露醇溶液。
所述的大孔樹脂型號為D101型，樹脂徑高比為1∶10。
所述的凍干工藝為取經(jīng)上述配液灌裝的參附藥液，于凍干箱內(nèi)進行凍干，預凍溫度為-40～-35℃，預凍時間為4小時，升華溫度為-40～-10℃，升華時間10小時，干燥溫度-10～45℃，干燥時間6小時，再干燥時間4小時。
本發(fā)明的優(yōu)點和效果如下本發(fā)明參附凍干粉針劑安全、有效、質量穩(wěn)定、便于貯存，為淺棕色疏松均勻粉末，溶解性好，溶解速度快。通過藥效學試驗表明本發(fā)明藥物對內(nèi)毒素性小鼠休克的死亡有明顯保護作用、對失血性休克貓存活時間及存活率均有明顯的增加、對于急性心肌缺血-再灌注模型犬有減慢心率的效果。本發(fā)明參附凍干粉針劑具有回陽救逆，益氣固脫及治療胸痹的藥理作用。
我們參照中國專利申請(專利)號03135699.0上所述凍干方法及本方法對參附進行凍干，試驗方法及結果如下1.試驗方法參附藥液的配制方法
取相同藥材量(紅參1000g，附片2000g)兩份，分別以相同提取純化方法進行純化后，再分別進行如下步驟加注射用水2000ml溶解后進行超濾除熱原，超濾液稱量體積；另取250g無熱原甘露醇，加2500ml注射用水使溶解成10％甘露醇溶液，稱量體積數(shù)；將參附超濾液與10％甘露醇液混合，攪拌均勻，測定pH值，并用氫氧化鈉或鹽酸調(diào)節(jié)pH值，使pH值在4.5～7.0；補加注射用水至總體積5000ml，除菌過濾后，進行灌裝專利方法試驗組中托盤中液體厚度12mm；本方法分裝于西林瓶中，每支裝量為5.0ml。
凍干方法1.專利方法(專利號03135699.0)取經(jīng)上述配液的參附藥液，于干燥干塔中進行噴霧干燥，經(jīng)干燥后的粉末分裝于不銹鋼托盤容器中，托盤容器液體厚度為12mm，低溫冷凍12h，再于冷凍干燥機中干燥22h。
具體參數(shù)如下

2.方法二(本發(fā)明方法)取經(jīng)上述配液灌裝的參附藥液，于凍干箱內(nèi)進行凍干，預凍溫度為-40～-35℃，預凍時間為4小時，升華溫度為-40～-10℃，升華時間10小時，干燥溫度-10～45℃，干燥時間6小時，再干燥時間4小時。
凍干過程中數(shù)據(jù)如下


將方法一、二凍干后的樣品進行如下試驗，結果如下1.性狀觀察經(jīng)不同凍干工藝進行凍干的樣品，外觀有無差異2.溶解性將經(jīng)不同凍干工藝進行凍干的樣品，分別取5只，每支加5ml注射用水，觀察制品完全溶解的時間。
1.性狀檢查結果

由此得出結論(1)二個制品從性狀上，制法二(本方法)雖然不能形成飽滿的塊狀物，但形成的疏松粉末均勻，而專利制法制品雖然形成了塊狀物，但塊狀物不規(guī)則，影響產(chǎn)品應用時的溶解效果，從總體來講，本方法制品性狀優(yōu)于專利方法。
(2)從二個制品溶解性上，本方法制品在加入溶劑的同時即完全、快速溶解，而專利凍干方法所得制品分別在加入溶劑后72s后才溶解完全。因為制品的溶解好壞影響到臨床應用時藥效作用的發(fā)揮，且如果有未溶解的成份在靜脈滴注時容易阻塞針頭，注入人體內(nèi)的有效成份相對減少，造成相同劑量時治療效果降低等，因此，我們的凍干工藝與現(xiàn)有兩個專利凍干工藝相比，在溶解性上有明顯的優(yōu)勢。
經(jīng)以上試驗結果總結如下

由此可知，制品從性狀及溶解性上我們的工藝明顯優(yōu)于現(xiàn)有專利工藝。
以下通過具體藥效學試驗對本發(fā)明效果作進一步說明1.實驗材料與方法1.1實驗用藥注射用參附，規(guī)格5mg/支(以人參總皂苷計)，批號20041120，沈陽格林藥業(yè)有限公司提供。
臨用時以5％葡萄糖注射液稀釋到各濃度。
1.2試劑5％葡萄糖注射液 規(guī)格250ml12.5g，批號05031502，生產(chǎn)單位沈陽志鷹制藥廠。
戊巴比妥鈉 規(guī)格25g，批號F20021216，生產(chǎn)單位中國醫(yī)藥(集團)上?；瘜W試劑公司。
肝素鈉注射液 規(guī)格2ml1.25萬單位，批號20040106，生產(chǎn)單位天津市生物化學制藥廠。
肌酸激酶(CK)試劑 規(guī)格18ml，批號G030408，上海復星-長征醫(yī)學科學有限公司生產(chǎn)。
乳酸脫氫酶(LDH-L)試劑規(guī)格18ml，批號G030408，上海復星-長征醫(yī)學科學有限公司生產(chǎn)。
氯化硝基四氮唑藍(N-BT)，規(guī)格0.25g，批號F20030525，中國醫(yī)藥(集團)上海生化試劑公司生產(chǎn)。
菌種 沙門氏菌接種于M-H肉湯培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)16～18小時，在110℃滅活20分鐘，備用。
培養(yǎng)基 M-H瓊脂培養(yǎng)基，批號041116；M-H肉湯培養(yǎng)基，批號040515，中國藥品生物制品檢定所提供。
其他試劑均為分析純。
1.3實驗動物昆明種小鼠，雌雄兼用，由遼寧省藥品檢驗所提供。實驗動物生產(chǎn)許可證號SCXK(遼)2003-0015；貓，體重3.0～5.0kg，雜種犬，體重10～20kg，雌雄兼用，沈陽市東陵區(qū)龍元經(jīng)濟動物養(yǎng)殖廠提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號SCXK(遼)2003-0012。實驗動物使用許可證號SYXK(遼)2003-0024。
1.4實驗儀器H51型電子天平，T1000型電子秤，美國產(chǎn)MP100WSW型BIOPAC十六道生理儀，SIGMA-2K15型低溫高速離心機，BT815A型半自動生化分析儀，XMTD-7000恒溫干燥箱，LB801型CH超級恒溫器，YXQ.SG4b.280手提式壓力蒸汽消毒器，TKR-200C小動物呼吸機。
2.實驗項目及內(nèi)容實驗一對內(nèi)毒素性小鼠休克死亡的保護作用試驗方法和步驟取18～20g健康小鼠，雌雄各半，按體重隨機分為5組，每組10只，分別為空白對照組，注射用參附4個劑量組。經(jīng)靜脈注射滅活的沙門氏菌原菌液0.2ml/10g，感染各組小鼠，在注射后30分鐘，各組分別靜脈注射不同劑量受試物，0.2ml/10g體重，給藥劑量見表1，空白對照組給同體積5％葡萄糖注射液，給藥后，每日觀察記錄小鼠死亡情況，連續(xù)14天。按Bliss法計算半數(shù)有效量(ED50)，結果見表2。
表1 注射用參附對內(nèi)毒素性小鼠休克死亡的保護作用預試驗

表2 注射用參附對內(nèi)毒素性小鼠休克死亡的保護作用

試驗結果注射用參附對內(nèi)毒素性小鼠休克的死亡有明顯保護作用，其ED50為21.8mg/kg。
實驗二對失血性休克貓的作用試驗方法及步驟取上述健康貓25只，隨機分為5組，分別為注射用參附高、中、低劑量組及5％葡萄糖液空白對照組，以戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，劑量為30mg/kg，背位固定，分離一側頸總動脈，動脈插管，連接于壓力傳感器，用BIOPAC十六道生理儀記錄分析系統(tǒng)同步記錄II導聯(lián)心電圖、收縮壓、舒張壓。分離一側股動脈，股靜脈，股動脈插管并連接儲血瓶供放血和儲血用，股靜脈插管供輸液或給藥用，全身肝素鈉10mg/kg抗凝。用肌張力換能器連接于BIOPAC十六道生理儀，用以記錄呼吸。股動脈放血使血液流入儲血瓶，管道系統(tǒng)和儲血瓶用15肝素鈉濕潤，儲血瓶懸掛在高于心臟30cm的位置，開始放血2ml/分鐘，當血壓低于10kPa時，改為0.5ml/分鐘，放血使血壓降至5.3kPa時，此時血壓可能有回升，再慢慢放血維持血壓5.3kPa，此時為失血代償期。如血壓下降，抬高儲血瓶回輸血液，待儲血瓶內(nèi)最大放血量的40％的血液自動回輸機體時作為失代償期，此時再將全部放出的血液輸回機體，同時分別先靜脈推注1ml/kg注射液(分別為注射用參附3個劑量組推注0.5mg/ml注射用參附稀釋液，對照組推注同體積5％葡萄糖注射液)，接著靜脈滴注注射用參附12mg/kg、6mg/kg、3mg/kg，對照組給同體積5％葡萄糖注射液，給藥體積10ml/kg，每只貓給一個劑量藥物，給藥次序按拉丁方設計，記錄約藥前、失血代償期、給藥0、5、10、20、30、45、60、90min心電、血壓曲線及呼吸曲線，記錄失血代償期、失代償期時間及動物死亡時間，計算存活率((每組死亡動物數(shù)/每組動物總數(shù))*100％)，并用卡方檢驗進行比較，結果見表3、4，對各時間點的心率、QRS間期、PR間期、QT間期、ST波、T波電壓和血壓，呼吸頻率及深度進行測量，數(shù)據(jù)進行t檢驗，結果見附圖1-圖11既表5-14。
表3 注射用參附對失血性貓休克存活率的影響

與對照組比較，*P＜0.05**P＜0.01表4 注射用參附對失血性休克貓的存活時間的影響


實驗結果注射用參附對失血性休克貓存活時間及存活率均有明顯的增加，存活率與對照組比較差別有極顯著意義(P＜0.01)。
結果表明貓在失血性休克后心率、血壓、呼吸次數(shù)及深度與失血前比較均有減少的趨勢。
貓在失血性休克后心電圖QRS間期、PR間期、QT間期與失血前比較均有延長的趨勢。
貓在失血性休克后心電圖ST段、T波電位均有偏移趨勢，從各組的數(shù)值來看，對于心電圖ST段各劑量變化較接近，對于心電圖T波電位，從低劑量來看，或者不斷抬高，或者不斷下降，但有2只貓從倒置翻轉為正向，高劑量有2只貓T波倒置程度不斷減輕，2只從倒置翻轉為正向，陽性有3只從倒置翻轉為正向。
試驗三對麻醉犬開胸心肌缺血—再灌注的影響實驗方法及步驟注射用參附靜脈給藥對麻醉開胸犬血流動力學影響取25只雜種犬，隨機分成5組，每組5只，為5％葡萄糖注射液空白對照組，注射用參附高、中、低劑量組。以戊巴比妥鈉30mg/kg靜脈麻醉，分離一側頸動脈、插管、連接壓力換能器記錄動脈血壓(AP)及平均動脈壓(MAP)，左側臥位正壓呼吸機作用下，4～5肋間開胸，于迷走神經(jīng)2cm處打開心包，壁層做懸床將其縫合于胸壁，使心臟充分暴露。分離主動脈，在主動脈根部套入電磁流量計探頭(2～3mm)，將此二探頭連于電磁流量計上，分別測量心輸出量(CO)和測量冠狀動脈流量(CBF)；在冠狀動脈左前降支近1/2處，從冠狀動脈下引線備結扎用；將內(nèi)徑為2.5mm的心導管從心尖插入左心室通過壓力換能器，經(jīng)載波放大左室內(nèi)壓(LVEDP)，以LVSP電訊號經(jīng)直流放大器放大10倍，記錄左室舒張末期壓(LVEDP)，以LVSP電訊號再經(jīng)BMI型微分器微分記錄左室內(nèi)壓變化速率(dp/dtmax)，用針型電極插入受試動物四肢皮下，記錄II導聯(lián)心電圖以測量心率(HR)，上述各項指標變化均同步記錄于BIOPAC十六道生下儀。手術后觀察上述各項指標，穩(wěn)定后記錄給藥前的各項指標，將有側槽的聚乙烯管置于冠狀動脈前降支上，和前降支一起結扎，陰斷血流，結扎15min后，從側槽處剪開，記錄上述各項指標，分別靜脈滴注注射用參附6mg/kg、3mg/kg、1.5mg/kg，對照組給同體積5％葡萄糖注射液0.2mg/kg，連續(xù)給藥30min，在給藥后15min再次結扎冠狀動脈前降支，試驗中在給藥后0，15，30，60，90，135采集上述各項指標，并以給藥后各時間點各項指標變化率(％)與對照組各對應時間點各項指標變化率(％)做組間顯著性成對資料的t-test處理。結果見附圖12-圖13既表15-16。
實驗結果對于急性心肌缺血-再灌注模型犬，各劑量組與對照組相比均有減慢心率的趨勢；高、中劑量組與對照組相比有降低平均動脈壓的趨勢；中劑量組左室內(nèi)壓下降趨勢與空白對照組相比有緩解作用，但變化率沒有顯著性差別(P＞0.05)；對高劑量對左室舒張末期壓與對照組相比有減少趨勢(P＞0.05)；各劑量組對心輸出量下降趨勢與空白對照組相比有緩解作用。
注射用參附抗心肌缺血—再灌注作用的研究取25只雜種犬。分成5組，每組5只，為5％葡萄糖注射液空白對照組，注射用參附高、中、低劑量組。受試動物在戊巴比妥鈉(30mg/kg)靜脈麻醉下，先剖開一側股靜脈備給藥用，再進行氣管插管，人工呼吸，呼吸頻率為30次/分。動物在左側臥位正壓呼吸機作用下，左側第4～5肋間開胸，在距迷走神經(jīng)2cm處，沿迷走神經(jīng)剪開心包壁層做懸床(縫于胸壁)暴露心臟，在冠狀動脈左前降支近1/2處，從冠狀動脈下線線備結扎用。將有側槽的聚乙烯管置于冠狀動脈前降支上，和前降支一起結扎，阻斷血流，結扎15min后，從側槽處剪開，記錄上述各項指標，分別靜脈滴注注射用參附6mg/kg、3mg/kg、1.5mg/kg，對照組給同體積5％葡萄糖注射液，0.2ml/kg，連續(xù)給藥30min，在給藥后15min再次結扎冠狀動脈前降支，試驗中分別于結扎前，結扎15min，給藥后0，15，30，60，90，135min于股動脈處取血，測肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)活性，給藥后2.25hrs，取下心臟，稱重，剪除心房及右心室肌切成等厚的5片，將5片心室肌放于37℃N-BT染液中，染色15min，取出，梗死區(qū)染成藍色，非梗死區(qū)不著色，計算梗死區(qū)占缺血心室重量的百分比，結果如下表。
注射用參附靜脈滴注給藥對麻醉犬心肌缺血面積的影響(X±SD)

與對照組比較，*P＜0.05**P＜0.01實驗結果高、中、低劑量組對于結扎冠狀動脈犬在給藥后15min時開始肌酸激酶、乳酸脫氫酶值及變化率與對照組相應的值相比，增加值小于對照組，其中中劑量組在15min、135min肌酸激酶的變化率與對照組比較有顯著差異(P＜0.05或P＜0.01)。給藥后135min時間點的心肌梗死范圍的定量組織學測定結果表明各給藥組梗死心肌重量/心室重量的百分比明顯低于對照組，且有顯著性或非常顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)。
結論注射用參附靜脈注射給藥對內(nèi)毒素性小鼠休克死亡有明顯的保護作用，其LD50為21.8mg/kg；注射用參附對失血性休克貓呼吸、血壓、房室間，室間傳導阻滯程度有明顯的改善作用，緩解心肌缺血，對失血性休克貓的存活時間及存活率有明顯的增加，存活率與對照組比較差別有極顯著意義(P＜0.01)；注射用參附對麻醉開胸犬心肌缺血—再灌注的影響主要是減慢心率，增加心輸出量和冠脈流量，降低外周阻力、心肌耗氧量、頸動脈壓，從而使心臟指數(shù)、左室作功增加，對缺血—再灌注損傷的心肌細胞有很好的保護作用，減少心肌梗死范圍。綜上所述，注射用參附具有回陽救逆，益氣固脫及治療胸痹的藥理作用。


圖1是表5注射用參附靜脈滴注給藥對失血性休克貓心率(HR，X±SD，次/分)的影響數(shù)據(jù)表。
圖2是表6注射用參附靜脈滴注給藥對失血性休克貓動脈收縮壓(SP，X±SD，kpa)的影響數(shù)據(jù)表。
圖3是表7注射用參附靜脈滴注給藥對失血性休克貓動脈舒張壓(DP，X±SD，kpa)的影響數(shù)據(jù)表。
圖4是表8注射用參附靜脈滴注給藥對失血性休克貓呼吸次數(shù)(X±SD，次/分)的影響數(shù)據(jù)表。
圖5是表9注射用參附靜脈滴注給藥對失血性休克貓呼吸深度(X±SD，g)的影響數(shù)據(jù)表。
圖6是表10注射用參附靜脈滴注給藥對失血性休克貓心電圖PR間期(X±SD，ms)的影響數(shù)據(jù)表。
圖7是表11注射用參附靜脈滴注給藥對失血性休克貓心電圖QRS間期(X±SD，ms)的影響數(shù)據(jù)表。
圖8是表12注射用參附靜脈滴注給藥對失血性休克貓心電圖QT間期(X±SD，ms)的影響數(shù)據(jù)表。
圖9是表13注射用參附靜脈滴注給藥對失血性休克貓心電圖ST段(X±SD，ms)的影響數(shù)據(jù)表。
圖10是表14注射用參附靜脈滴注給藥對失血性休克貓T波高度(X±SD，mv)的影響數(shù)據(jù)表。
圖11是表15注射用參附靜脈滴注給藥對麻醉犬心率(HR，X±SD，次/分)的影響數(shù)據(jù)表。
圖12是表16注射用參附靜脈滴注給藥對麻醉犬平均動脈壓(MBP，X±SD，kpa)的影響數(shù)據(jù)表。
具體實施實例實施例一1000支處方紅參1000g、附片2000g、甘露醇250g，加注射用水至總體積5000ml。
制備方法包括下述工藝步驟取1000g紅參藥材粉碎成粗粉，加6000ml 75％乙醇浸泡12小時，濾過，藥渣加6000ml75％乙醇超聲提取(功率100W、溫度30℃)3次，每次20分鐘，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，大孔樹脂型號為D101型，樹脂徑高比為1∶10，先以水、20％乙醇洗脫，棄去水、20％乙醇洗脫液，收集30％、50％、70％乙醇洗脫液(各洗脫溶劑用量均相當于3倍量柱體積)，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得紅參提取物，備用；取2000g附片粉碎成粗粉，用12000ml倍量75％乙醇浸泡12小時，濾過，濾渣加12000ml75％乙醇超聲提取3次(功率100W、溫度30℃)，每次20分鐘，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，大孔樹脂型號為D101型，樹脂徑高比為1∶10，先以水、20％乙醇洗脫，棄去水、20％乙醇沈脫液，收集70％、80％、90％乙醇洗脫液(各洗脫溶劑用量均相當于3倍量大孔樹脂柱體積)，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得附子提取物，備用；將上述紅參提取物、附子提取物加2000ml注射用水溶解后，超濾，得超濾液并稱量體積數(shù)；將無熱原甘露醇250g加2500ml注射用水使溶解成10％甘露醇溶液，稱量體積數(shù)；將參附超濾液與10％甘露醇液混合，攪拌均勻，測定pH值，并用氫氧化鈉或鹽酸調(diào)節(jié)pH值，使pH值在4.5～7.0；補加注射用水至總體積5000ml，過濾、分裝至配液灌、取經(jīng)上述配液灌裝的參附藥液，于凍干箱內(nèi)進行凍干，預凍溫度為-40℃，預凍時間為3小時，升華溫度為-40～-10℃，升華時間10小時，干燥溫度-10～45℃，干燥時間6小時，再干燥時間4小時即得。
實施例二1000支處方紅參1000g、附片2000g、甘露醇200g，加注射用水至總體積5000ml。
制備方法包括下述工藝步驟取1000g紅參藥材粉碎成粗粉，加4000ml 75％乙醇浸泡12小時，濾過，藥渣加8000ml75％乙醇超聲提取(功率100W，溫度30℃)3次，每次20分鐘，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，先以水、20％乙醇洗脫，棄去水、20％乙醇洗脫液，收集30％、50％、70％乙醇洗脫液(各洗脫溶劑用量均相當于3倍量大孔樹脂柱體積)，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得紅參提取物，備用；取2000g附片粉碎成粗粉，用15000ml倍量75％乙醇浸泡12小時，濾過，濾渣加10000ml75％乙醇超聲提取3次(功率100W，溫度30℃)，每次20分鐘，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，先以水、20％乙醇洗脫，棄去水、20％乙醇洗脫液，收集70％、80％、90％乙醇洗脫液(各洗脫溶劑用量均相當于3倍量大孔樹脂柱體積)，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得附子提取物，備用；將上述紅參提取物、附子提取物加2000ml注射用水溶解后，超濾，得超濾液并稱量體積數(shù)；將無熱原甘露醇200g加2000ml注射用水使溶解成10％甘露醇溶液，稱量體積數(shù)；將參附超濾液與甘露醇溶液混合，攪拌均勻，測定pH值，并用氫氧化鈉或鹽酸調(diào)節(jié)pH值，使pH值在4.5～7.0；補加注射用水至總體積5000ml，過濾、分裝至配液灌、取經(jīng)上述配液灌裝的參附藥液，于凍干箱內(nèi)進行凍干，預凍溫度為-35℃，預凍時間為4或5小時，升華溫度為-40～-10℃，升華時間10小時，干燥溫度-10～45℃，干燥時間6小時，再干燥時間4小時即得。
實施例三1000支處方紅參1000g、附片2000g、甘露醇300g，加注射用水至總體積5000ml。
其制備方法包括下述步驟取紅參粉碎成粗粉，加6倍量75％乙醇浸泡12小時，濾過，藥渣加6倍量75％乙醇超聲提取(功率100W，溫度30℃)3次，每次20分鐘，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得紅參提取物，備用；取黑附片粉碎成粗粉，用6倍量75％乙醇浸泡12小時，濾過，濾渣加6倍量75％乙醇超聲提取3次(功率100W，溫度30℃)，每次20分鐘，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，先以水、20％乙醇洗脫，棄去水、20％乙醇洗脫液，收集70％、80％、90％乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得附子提取物。
將紅參提取物、附子提取物加注射用水溶解，超濾；將甘露醇加部分注射用水溶解，混勻以上兩種溶液，調(diào)pH4.5～7.0，加注射用水至規(guī)定體積，過濾、分裝、凍干即得。
實施例四1000支處方紅參1000g、附片2000g、甘露醇280g，加注射用水至總體積5000ml。
其制備方法包括下述步驟取紅參粉碎成粗粉，加6倍量75％乙醇浸泡12小時，濾過，藥渣加6倍量75％乙醇超聲提取(功率100W，溫度30℃)3次，每次20分鐘，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得紅參提取物，備用；取黑附片粉碎成粗粉，用6倍量75％乙醇浸泡12小時，濾過，濾渣加6倍量75％乙醇超聲提取3次(功率100W，溫度30℃)，每次20分鐘，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，先以水、20％乙醇洗脫，棄去水、20％乙醇洗脫液，收集70％、80％、90％乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得附子提取物。
將紅參提取物、附子提取物加注射用水溶解，超濾；將甘露醇加部分注射用水溶解，混勻以上兩種溶液，調(diào)pH4.5～7.0，加注射用水至規(guī)定體積，過濾、分裝、凍干即得。
權利要求
1.一種參附凍干粉針劑，其特征在于其中制成有效成分的原料為紅參、附片、甘露醇，其中紅參、附片、甘露醇的質量比為100∶200∶20-30。
2.一種權利要求1所述的參附凍干粉針劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟按所述質量比選取紅參、附片；將所取紅參粉碎成粗粉，加乙醇浸泡12小時，濾過，藥渣加乙醇超聲提取，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得紅參提取物，備用；將所取附片粉碎成粗粉，加乙醇浸泡12小時，濾過，濾渣加乙醇超聲提取，合并提取液，濾過，與浸泡濾過液合并，減壓回收乙醇，經(jīng)大孔樹脂洗脫，減壓回收溶劑至無醇味，干燥，得附子提取物，備用；將紅參提取物、附片提取物加注射用水溶解，超濾；將甘露醇加部分注射用水溶解，混勻以上兩種溶液，調(diào)節(jié)pH值，使pH值為4.5～7.0，加注射用水，過濾、分裝至配液灌、凍干即得。
3.根據(jù)權利要求2所述的參附凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述的乙醇濃度為75％，提取次數(shù)為3次，提取時間為每次20分鐘。
4.根據(jù)權利要求2所述的參附凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述的甘露醇加部分注射用水溶解至10％甘露醇溶液。
5.根據(jù)權利要求2所述的參附凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述的所述的大孔樹脂型號為D101型，樹脂徑高比為1∶10。
6.根據(jù)權利要求2所述的參附凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述的凍干工藝為取上述配液灌裝的參附藥液，于凍干箱內(nèi)進行凍干，預凍溫度為-40～-35℃，預凍時間為3-5小時，升華溫度為-40～-10℃，升華時間10小時，干燥溫度-10～45℃，干燥時間6小時，再干燥時間4小時。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種參附凍干粉針劑及其制備方法，屬于醫(yī)藥技術領域。其中制成有效成分的原料為紅參、附片、甘露醇，其中紅參、附片、甘露醇的質量比為100∶200∶20－30。本發(fā)明參附凍干粉針劑安全、有效、質量穩(wěn)定、便于貯存，為淺棕色疏松均勻粉末，溶解性好，溶解速度快。通過藥效學試驗表明本發(fā)明藥物具有回陽救逆，益氣固脫及治療胸痹的藥理作用。
文檔編號A61P1/00GK1785277SQ20051004770
公開日2006年6月14日 申請日期2005年11月14日 優(yōu)先權日2005年11月14日
發(fā)明者王光, 李莉, 馬紅萍 申請人:沈陽斯佳科技發(fā)展有限公司