專利名稱：一種能增強(qiáng)免疫功能的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種由蜂膠、紅景天組成的能增強(qiáng)免疫的組合物及其制備方法，屬醫(yī)藥保健用途領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
紅景天是景天科紅景天屬植物高山紅景天(R hodioal Sachalinensis.A.Bor.)或狹葉紅景天(R.Kirilowii(Regel)Regel[Sedum Ki rilowii Regel])的干燥全草。最早載于《四部醫(yī)典》，為常用的藏族用藥，藏名“掃羅瑪爾布”，民間用于治療肺熱咳嗽、咳血、白帶、跌打損傷等。西藏紅景天藥用植物種類甚多，有長(zhǎng)鞭紅景天、喜馬紅景天、圓齒紅景天、全瓣紅景天(圣地紅景天)、背藥紅景天等。紅景天具有扶正固本、調(diào)和陰陽(yáng)、益氣補(bǔ)血、通脈養(yǎng)心、促腦益智、滋補(bǔ)強(qiáng)身的功效。近代藥理學(xué)研究表明紅景天制刑具有抗衰老、抗疲勞、抗病毒、抗缺氧、抗微波輻射作用。
近年來(lái)的研究顯示紅景天的主要活性成分是紅景天甙及其甙元酪醇，另外還分離得到化學(xué)成分主要有酚類、黃酮及其二者的甙類。除此之外，還有香豆素、有機(jī)酸、蒽醌、甾類、萜類、生物堿、內(nèi)酯、鞋質(zhì)、脂肪、蛋白質(zhì)以及K、Na、Ca、Mg、Fe、Cu、Zn、Cr等微量元素。田軍等通過(guò)對(duì)云南紅景天的揮發(fā)油研究發(fā)現(xiàn)揮發(fā)油主要成分為正辛醉、牛兒醉、里哪醇、桃金娘醉、正葵醉、及橙花醉乙酸酯等。
蜂膠是蜜蜂從植物的嫩芽和樹(shù)皮或莖干傷口采集的粘性分泌物——樹(shù)脂，與其上鄂腺分泌物及花粉、蜂蠟相混調(diào)合而成的具有芳香氣味的天然膠狀固體物質(zhì)，是蜜蜂用于筑巢用的一種填充和粘合材料。蜂膠是植物藥用成分的高度濃縮物，它所含的藥用成分之多、濃度之高是一般藥用植物無(wú)法相比的，因而具有多種藥理作用。蜂膠早已引起眾多國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視和關(guān)注，并已成功地在臨床上應(yīng)用于多種疾病的防治，被譽(yù)為“天然藥物”。目前，蜂膠在動(dòng)物保健中應(yīng)用日益廣泛，在作為飼料添加劑和藥物上取得重大成果。
蜂膠是褐色、固體狀的粘性物質(zhì)，帶有芳香氣味，味苦，在低溫條件下變硬、脆；65℃時(shí)熔化。蜂膠所含成分，目前已知的有樹(shù)脂、蜂蠟、芳香油、花粉及20余種酮類化合物，其中2種黃酮類(5，7——二羥基-3，4-二甲基黃酮和5-羥基-4，7-二甲氧基黃酮)是首次發(fā)現(xiàn)的。研究表明，新采集的蜂膠約含55％的樹(shù)脂和香脂、30％的蜂蠟、10％的芳香揮發(fā)油和5％的花粉夾雜物。蜂膠中還含有多種維生素、氨基酸、酶和多糖等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公布了一種具有增強(qiáng)免疫功能的組合物，是以蜂膠、紅景天為原料制成的制劑。
紅景天對(duì)機(jī)體的免疫系統(tǒng)具有廣泛的調(diào)節(jié)作用。在用COXB3(柯薩奇B3)病毒建立的小鼠病毒性心肌炎模型中，孫寒等發(fā)現(xiàn)高山紅景天復(fù)方制劑通過(guò)免疫機(jī)制的調(diào)節(jié)和體內(nèi)自由基的快速清除而起到對(duì)病毒性心肌炎的治療作用。王福俤等以T淋巴細(xì)胞、胸腺和脾臟重量及指數(shù)為指標(biāo)對(duì)紅景天的免疫功能進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)胸腺、脾臟重量及其指數(shù)均高于對(duì)照組切能提高外用血T淋巴細(xì)胞百分率，表明紅景天對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞免疫功能有增強(qiáng)作用。高山紅景天甙在體外實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)能直接致小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，表明具有絲裂原樣作用；同時(shí)具有殺瘤作用，紅景天甙免疫小鼠的PEM(腹腔巨噬細(xì)胞)殺傷肝癌的效率高達(dá)72.3％，其可能的機(jī)制是紅景天甙通過(guò)iNOS介導(dǎo)的NO合成進(jìn)而達(dá)到殺瘤的效應(yīng)。在趙文等的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)薔薇紅景天能提高機(jī)體的細(xì)胞脂免疫、體液免疫及非特異性免疫功能，表現(xiàn)在(1)增加小鼠外用血T淋巴紉胞細(xì)胞數(shù)并能使動(dòng)物因產(chǎn)生遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)而致的足趾腫脹度增加；(2)能增加小鼠脾臟的相對(duì)重量及由脾臟產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞；(3)機(jī)體巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)有所增加。而且在1250-5000mg劑量范圍內(nèi)對(duì)小鼠體內(nèi)S-180生長(zhǎng)有非常顯著的抑瘤作用。
也有文獻(xiàn)報(bào)道，蜂膠能增強(qiáng)機(jī)體非特異和特異性免疫功能，于曉紅等采用氫化考的松免疫功能低下小鼠模型(HC小鼠模型)，觀察蜂膠乙醇提取液(EEP)對(duì)HC小鼠的免疫功能的影響，結(jié)果表明，EEP能增強(qiáng)小鼠體液免疫功能，提高溶血素含量，增強(qiáng)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能。高春義等觀察了蜂膠提取物對(duì)移植了S180肉瘤小鼠免疫功能的影響，表明蜂膠提取物能使胸腺/體重比值增大(P＜0.05)，WBC(血白細(xì)胞計(jì)數(shù))維持在正常水平，脾細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞能力增強(qiáng)(P＜0.05)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，蜂膠還可抑制由化學(xué)致癌物誘發(fā)的腫瘤。韓國(guó)學(xué)者1999年報(bào)道了sigma蜂膠(#1010)對(duì)人腫瘤細(xì)胞有明顯的誘導(dǎo)凋亡作用；我國(guó)郭秀蟬等也證實(shí)國(guó)產(chǎn)醇提取蜂膠對(duì)Hep-II人肝癌細(xì)胞在體外有很強(qiáng)的殺傷作用。免疫調(diào)節(jié)是慢性肝病尤其是慢性病毒性肝炎治療的重要環(huán)節(jié)，流行病學(xué)資料證明，HBV、HCV感染是患肝癌主要危險(xiǎn)因素，HBV攜帶者、乙型肝炎肝硬化者患肝癌的可能性增加數(shù)百倍，因此，蜂膠可對(duì)慢性乙型肝炎和慢性丙型肝炎進(jìn)行肝癌的二級(jí)預(yù)防。
因此，本發(fā)明結(jié)合現(xiàn)代藥理研究，利用紅景天與蜂膠在增強(qiáng)免疫功能方面互補(bǔ)的優(yōu)勢(shì)，組成一個(gè)能提高免疫功能的組合物。
本發(fā)明組合物是按下述重量配比的原料組成的蜂膠1-100份 紅景天1-100份本發(fā)明組合物優(yōu)選方案是
蜂膠2.5份紅景天3份本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的(1)取蜂膠，用30-90％乙醇溶解，靜置，過(guò)濾，收集濾液，減壓濃縮，得蜂膠提取物；(2)取紅景天，加4-10倍水煮沸1-4小時(shí)，過(guò)濾，收集濾液，濃縮，加70-100％乙醇，靜置，過(guò)濾，收集濾液，濃縮，得紅景天提取物；(3)將蜂膠提取物、紅景天提取物混合，并加入一定的輔料，得本發(fā)明組合物。
本發(fā)明組合物可根據(jù)臨床應(yīng)用需要，研制成各種藥物劑型，如注射劑(注射液、注射用粉針劑、大輸液)、丸劑、散劑、片劑、栓劑、顆粒劑、膜劑、膠囊劑、滴丸劑、氣霧劑、微囊劑、膏劑、酒劑、糖漿劑、口服溶液劑。因此，本發(fā)明組合物可以研制成藥物，也符合保健食品要求，可開(kāi)發(fā)成保健食品。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施范例1蜂膠2份 紅景天4份實(shí)施范例2蜂膠2.5份紅景天3份實(shí)施范例3(1)取蜂膠，用90％乙醇溶解，靜置，過(guò)濾，收集濾液，減壓濃縮，得蜂膠提取物；(2)取紅景天，加8倍水煮沸2小時(shí)，過(guò)濾，收集濾液，濃縮，加80％乙醇，靜置，過(guò)濾，收集濾液，濃縮，得紅景天提取物；
(3)將蜂膠提取物、紅景天提取物混合，并加入一定的輔料，得本發(fā)明組合物。
免疫藥理學(xué)研究實(shí)驗(yàn)材料〔一〕動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄兼用，體重20±1g；豚鼠250g，雞1.5kg，雌雄不拘，均由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供。
(二)藥物及試劑氫化可的松山東新華制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)040824；鹽酸左旋咪唑上海延安制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)040515；本發(fā)明組合物(以下簡(jiǎn)稱組合物)不加賦形劑，含原生藥0.2g/ml；組分一不加賦形劑，含紅景天生藥量0.13g/ml；組分二不加賦形劑，含蜂膠生藥量0.7g/ml；印度墨汁英國(guó)Winson&Newto廠產(chǎn)品；豚鼠血清取3只豚鼠血清混合用于補(bǔ)體制備；雞紅細(xì)胞(CRBC)懸液制備CRBC在4℃冰箱中保存于Alsever’s液中，臨用時(shí)生理鹽水離心洗滌三次，配成5％混懸液；植物血凝素(PHA)上海市醫(yī)學(xué)化驗(yàn)所產(chǎn)品，批號(hào)040612。
(三)儀器722光柵分光光度計(jì)上海光學(xué)儀器廠生產(chǎn)；SMY-2型數(shù)字測(cè)溫儀德州電子設(shè)備廠產(chǎn)品；LXJH離心沉淀機(jī)，上海醫(yī)療器械三廠產(chǎn)品；S658電熱恒溫水浴箱，溫州永強(qiáng)醫(yī)療器械廠生產(chǎn)。
方法與結(jié)果(一)對(duì)免疫功能的影響1.對(duì)小鼠單核醫(yī)噬細(xì)胞吞噬功能的影響
小鼠50只，隨機(jī)分為5組，組合物2g/kg，組分一1.3g/kg，組分二0.7g/kg，左旋咪唑25mg/kg，對(duì)照組給予常水，灌胃給藥，每日一次，連續(xù)8d，末次給藥后，每鼠尾靜脈注射20％印度墨汁0.1ml/log，注射后分別在2min，10min從眼眶靜脈叢取血20ul計(jì)算單核巨噬細(xì)胞碳粒廓清指數(shù)K值，結(jié)果表明，本發(fā)明組合物能明顯提高小鼠單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力，與左旋咪哇比較差異無(wú)顯著性意義(P＞0.05)；作用明顯強(qiáng)于組分一和組分二(P＞0.05)。提示本發(fā)明組合物中組分一和組分二能增強(qiáng)小鼠單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力，且具有協(xié)同作用。
2.對(duì)雞紅細(xì)胞(CRBC)致敏小鼠血清溶血素(IgM)形成的影響(1)對(duì)CRBC致敏的正常小鼠IgM形成的影響小鼠50只，隨機(jī)分為本發(fā)明組合物組2g/kg，組分一1.3g/kg，組分二0.7g/kg，左旋咪唑25mg/kg，空白對(duì)照等5組。每天灌胃給藥1次，連續(xù)8d，在給藥4d時(shí)每鼠ip5％CRBC懸液0.2ml致敏。末次給藥24h后，摘取眼球取血，分離血清，測(cè)其光密度(OD)值。結(jié)果表明，本發(fā)明組合物和各組分對(duì)CRBC致敏的正常小鼠IgM形成未見(jiàn)明顯影響。
(2)對(duì)CRBC致敏免疫功能低下的小鼠IgM形成的影響小鼠60只，隨機(jī)分成正常對(duì)照組，氫考模型組，本發(fā)明組合物組2g/kg，組分一1.3g/kg，組分二0.7g/kg，左旋咪唑25mg/kg，等六組，每日灌胃給藥1次，連續(xù)8d，在給藥第5d正常對(duì)照組im生理鹽水，其余5組im氫考33mg/kg，每日一次，連續(xù)4d，末次藥后24h摘取眼球取血，分離血清，測(cè)其OD值。本發(fā)明組合物組與空白組比較無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明本發(fā)明組合物能使氫考所致免疫功能低下小鼠IgM調(diào)節(jié)至正常水平，而組分一和組分二與空白組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
3.對(duì)PHA在免疫低下小鼠體內(nèi)誘發(fā)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響小鼠60只，隨機(jī)分成正常對(duì)照組與氫考模型組ig生理鹽水，本發(fā)明組合物組2g/kg，組分一1.3g/kg，組分二0.7g/kg，左旋咪唑25mg/kg，等六組，每日一次，連續(xù)9d。給藥第1天為d1，d2-d9，每日一次，正常對(duì)照im生理鹽水，其余4組imPHA6mg/kg及氫考50mg/kg，末次給藥24h后剪鼠尾采外周血涂片，計(jì)數(shù)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。結(jié)果表明，本發(fā)明組合物及各組分具有增加小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的作用，但本發(fā)明組合物作用明顯強(qiáng)于各組分，與左旋咪唑的作用的相當(dāng)。
結(jié)論本發(fā)明組合物及其各組分能明顯促進(jìn)非特異性免疫單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力，使免疫功能低下小鼠模型IgM調(diào)節(jié)接近正常水平，尤其可增強(qiáng)PHA在免疫功能低下小鼠體內(nèi)誘發(fā)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的作用；但本發(fā)明組合物的作用明顯強(qiáng)于各組分，表明，蜂膠與紅景天配伍在增強(qiáng)免疫方面具有協(xié)同作用，體現(xiàn)了本發(fā)明在制備增強(qiáng)免疫功能醫(yī)藥保健品的重要性。
權(quán)利要求
1.一種能增強(qiáng)免疫功能的組合物，其特征在于，能增強(qiáng)免疫功能的組合物在用于制備增強(qiáng)免疫功能保健食品及藥物中的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種能增強(qiáng)免疫功能的組合物，其特征在于，是按下述重量配比的原料制成的藥劑蜂膠1-100份、紅景天1-100份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種能增強(qiáng)免疫功能的組合物，其特征在于，是按下述重量配比的原料制成的藥劑蜂膠2.5份、紅景天3份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的一種能增強(qiáng)免疫功能的組合物，其特征在于，可研制成適用于臨床的各種藥物劑型，如注射劑(注射液、注射用粉針劑、大輸液)、丸劑、散劑、片劑、栓劑、顆粒劑、膜劑、膠囊劑、滴丸劑、氣霧劑、微囊劑、膏劑、酒劑、糖漿劑、口服溶液劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種由蜂膠、紅景天組成的能增強(qiáng)免疫功能的組合物及其制備方法，屬醫(yī)藥保健用途領(lǐng)域，本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是公開(kāi)一種由蜂膠、紅景天組成的組合物，明顯促進(jìn)非特異性免疫單核巨噬細(xì)胞的吞噬能力，使免疫功能低下小鼠模型IgM調(diào)節(jié)接近正常水平，尤其可增強(qiáng)PHA在免疫功能低上小鼠體內(nèi)誘發(fā)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的作用；且本發(fā)明組合物的作用明顯強(qiáng)于各組分，表明蜂膠與紅景天配伍在增強(qiáng)免疫方面具有協(xié)同作用，體現(xiàn)了本發(fā)明在制備增強(qiáng)免疫功能醫(yī)藥保健品的重要性。
文檔編號(hào)A61K35/56GK1861108SQ200510068040
公開(kāi)日2006年11月15日 申請(qǐng)日期2005年5月9日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月9日
發(fā)明者孫毅, 高紅, 王曉玲, 張健 申請(qǐng)人:孫毅