專利名稱：：經(jīng)脫水縮合反應可發(fā)生相轉(zhuǎn)移的分子集合體及其相轉(zhuǎn)移方法
技術(shù)領域：
：本發(fā)明涉及通過水界面的脫水縮合反應可以發(fā)生相轉(zhuǎn)移的分子集合體及其相轉(zhuǎn)移方法。更詳細地說，本發(fā)明涉及誘發(fā)脂質(zhì)體等水界面分子集合體的融合或分裂的方法。
背景技術(shù)：
：為了引起分子集合狀態(tài)的變化，通常來說要改變表面活性劑的濃度或溫度。在膠束等平衡體系中，如果添加不同種類的表面活性劑，則快速地發(fā)生狀態(tài)變化。另一方面，在以脂質(zhì)體為代表的雙分子膜小泡之類的分散體系中，由于構(gòu)成它們的脂質(zhì)處于比較穩(wěn)定的狀態(tài)，因此其移動非常緩慢。為了誘發(fā)這些集合體的融合或分裂，通常來說要引起界面的物理狀態(tài)變化。此時，對所使用的脂質(zhì)或反應條件等的依賴性很高，多有限制。例如，由磷脂酰絲氨酸等構(gòu)成的脂質(zhì)體由于Ca"的添加而誘發(fā)膜融合等的相轉(zhuǎn)移(Duzgunes等、Biochemistry,1987年，26巻，8435-8442頁)。認為其原因在于，由于Ca^而發(fā)生了電荷的中和、脂質(zhì)間的交聯(lián)、脫水縮合等，膜變得不穩(wěn)定。但是，該方法并不能適用于僅由中性磷脂質(zhì)構(gòu)成的脂質(zhì)體。另外，報告指出，通過在含有磷脂酰絲氨酸的脂質(zhì)體中添加高濃度的聚乙二醇，會發(fā)生膜融合(Lentz等、Biochemistry,1992年，31巻，2643-2653頁和Yang等、BiophysicalJournal,1997年，73巻，277-282頁)。這是由于膜的自由水消失、膜變得不穩(wěn)定所導致的。進而，還提出了利用病毒的膜融合法(Blume她al等、ChemistryandPhysicsofLipids,2002年，116巻，39-55頁)。該方法中，在膜的外側(cè)上必需病毒的受體。還報告了介由電脈沖的物理刺激的膜融合謙發(fā)法(Sugar等、BiophysicalChemistry,1987年，26巻，321頁)或者利用在接觸的脂質(zhì)體上照射UV光的膜融合法(Kulin等、Langmuir，2003年，19巻，8206-8210頁)。還有通過添加蛋白質(zhì)或肽，引起由于pH依賴性的質(zhì)子化所導致的高級結(jié)構(gòu)的變化，從而誘發(fā)膜融合的方法(Kim等、Biochemistry,1986年，25巻，7867-7874頁)。這些各種融合方法均是以形成分子集合體的脂質(zhì)的物理狀態(tài)變化為基礎，在融合前階段必須產(chǎn)生凝集。即，當單獨分散時，分子集合體的脂質(zhì)處于完全未活化的狀態(tài)。另一方面，有關于以化學反應為基礎的相轉(zhuǎn)移，例如融合和分裂的報告(Takakura等、ChemistryLetters,2002年，404-405頁和Toyota等、ChemistryLetters,2004年，33巻，1442-1443頁)。具體地說，通過小泡的雙分子膜中的脫水縮合所導致的亞胺形成及其水解反應，小泡的形態(tài)發(fā)生變化，由此發(fā)生膜融合和分裂。例如，如果在由具有疏水性反應性基團(醛基)的雙親性脂質(zhì)形成的小泡的分散液中加入具有親水性反應性基團(氨基)的雙親性脂質(zhì)的膠束分散液，則由于雙分子膜中的反應性基團之間的可逆性脫水縮合反應，產(chǎn)生亞胺，小泡變大(Takakura等、前述)。另外，對應于這些具有各反應性基團的脂質(zhì)和脫水縮合的雙親性脂質(zhì)的存在比，可以觀察到小泡的可逆形態(tài)變化(Toyota等、前述)。但是，這些方法中，不能控制小泡的雙分子膜狀態(tài)。還有通過使用了酶的生物學手法改變脂質(zhì)結(jié)構(gòu)，從而引起融合的方法。具體地說，通過使用磷脂酶C水解磷脂酰膽堿或磷脂酰乙醇胺(Nieva，J.隱L.等、Biochemistry,1989年，28巻，7364-7367頁)，或者使用鞘磷脂酶水解鞘磷脂(大木和夫、生物物理、2004年，44巻，161-165頁)，將構(gòu)成小泡的雙分子膜的磷脂質(zhì)的磷酸基除去，分別生成二?；视突蛏窠?jīng)酰胺的方法。分子的形狀均由倒錐形向極性頭部的分子面積小的圓柱型變化(臨界填充參數(shù)變化)、曲率改變，發(fā)生融合。作為生物學研究，報道了當引起膜的融合或分裂時，將單鏈的磷脂質(zhì)酰化向雙鏈磷脂質(zhì)轉(zhuǎn)變的酶的活性提高(Schmidt,A.等、Nature,1999年，401巻，133-141頁)。即，提示在神經(jīng)末稍的突觸上再次形成突觸小泡時，必需溶血磷脂酸(LPA)?；D(zhuǎn)移酶。該酶將?；D(zhuǎn)移至鍵合有磷酸的單?；视?單鏈的磷脂質(zhì))的LPA上，向雙鏈磷脂質(zhì)轉(zhuǎn)變。由于是在發(fā)生膜變化時進行該反應，因此說明這種酶的化學反應所導致的膜曲率變化是很重要的。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供通過形成分子集合體的脂質(zhì)的化學變化，能夠使其物理性質(zhì)或形態(tài)改變、調(diào)節(jié)膜融合等相轉(zhuǎn)移的時機等的方法。本發(fā)明的誘發(fā)雙分子膜小泡相轉(zhuǎn)移的方法的基礎在于在含有具有胺或羧酸鹽的極性頭部的表面活性劑的分子集合體(脂質(zhì)體)中，化學地進行它們的脫水縮合反應，從而改變脂質(zhì)的臨界填充參數(shù)，結(jié)果脂質(zhì)體的雙分子膜的曲率發(fā)生改變，發(fā)生由此產(chǎn)生的扭曲。本發(fā)明提供雙分子膜小泡，該雙分子膜小泡含有以下物質(zhì)作為膜的構(gòu)成成分U)碳原子數(shù)6~20的脂肪酸鹽；(b)具有碳原子數(shù)6~20的脂肪鏈的醇或胺化合物；(c)可以形成雙分子膜的人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)。在某實施方式中，上述(b)醇或胺化合物為下式I所示的二元醇。R1—NH—CH2—CH(OH)-CH20H(I)(式中，Ri為碳原子數(shù)620的烷基、碳原子數(shù)6~20的烯基、或者碳原子數(shù)6~20的炔基)。更優(yōu)選的實施方式中，上述雙分子膜小泡還含有(d)下述式II所示的叔胺作為上述膜的構(gòu)成成分，/N-R4(II)(式中，R2、113和114中的l個或2個為甲基，剩余的R2、RS和I^各自獨立，為-CH2COOCnH2n小國CnH2n+i或誦C6H4-p國CnH2^，其中n為6~20的整數(shù)，-CnH2n+i為直鏈狀)。在1個實施方式中，上述(a)脂肪酸鹽和上述(b)醇或胺化合物的摩爾比為1:1。另一個實施方式中，上述(a)脂肪酸鹽和(b)醇或胺化合物以及上述(c)能夠形成雙分子膜的人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)的摩爾比為某個實施方式中，上述(C)能夠形成雙分子膜的人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)為磷脂質(zhì)。本發(fā)明還提供誘發(fā)雙分子膜小泡的相轉(zhuǎn)移的方法，該方法包括調(diào)制雙分子膜小泡的工序，即該雙分子膜小泡含有U)碳原子數(shù)6~20的脂肪酸鹽，(b)具有碳原子數(shù)6~20的脂肪鏈的醇或胺化合物和(c)可以形成雙分子膜的人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)作為膜的構(gòu)成成分的工序；以及在該雙分子膜小泡中添加脫水縮合劑或脫水縮合劑前體的工序。在一個實施方式中，上述(b)醇或胺化合物為下式I所示的二元醇，上述脫水縮合劑前體為下式III所示的氰尿酸衍生物。R1—NH—CH廣CH(OH)-CH2OH(I)(式中，Rt為碳原子數(shù)620的烷基、碳原子數(shù)6~20的烯基、或者碳原子數(shù)6~20的炔基)。更優(yōu)選的實施方式中，上述雙分子膜小泡還含有(d)下述式II所示的叔胺作為上述膜的構(gòu)成成分。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>(式中，R2、RS和R"中的l個或2個為曱基，剩余的R2、RS和R"各自獨立，為-CH2COOCnH2n+b-CnH2nW或-C6H4-p-CnH2^，其中n為6~20的整數(shù)，-CnH2n+i為直鏈狀)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>(III)(式中，rS和I^各自獨立，為甲基、乙基、碳原子數(shù)2~5的羥烷基，-(CH2CH20)mR7(這里，m為l120的整數(shù)，R7為氫原子、曱基、乙基或丙基)、-(CH2CH2NR8)mH(這里，m為l120的整數(shù)，118為碳原子數(shù)2-5的烷基、N，N-二烷基氨基乙基、或者-CH2CH2N+(CH3)3)、-CH2CH2S03-、-CH2CH2N+(CH3)3、或碳原子數(shù)6~20的烷基，但R5和116不同時為碳原子數(shù)6~20的烷基，X為卣原子)。某個實施方式中，上述式III中的R5和R6的至少一者為甲基或乙基。在l個實施方式中，上述式II中的n為12~16。通過本發(fā)明的方法，可以利用脫水縮合反應使形成含有雙分子膜小泡的分子集合體的脂質(zhì)發(fā)生化學變化，改變其物理性質(zhì)或形態(tài)，調(diào)節(jié)膜融合等相轉(zhuǎn)移的時機。即，可以在雙分子膜小泡中誘發(fā)分子集合體的相轉(zhuǎn)移(融合或分裂)。因此，能夠提供活化狀態(tài)或準穩(wěn)定狀態(tài)的小泡。另外，本發(fā)明的雙分子膜小泡由于誘發(fā)這種相轉(zhuǎn)移而能夠優(yōu)選使用。圖1為用于說明本發(fā)明原理的模式圖。圖2為從NBD-PE向Rh-PE的熒光能量轉(zhuǎn)移的熒光譜圖。圖3為顯示在MLV中產(chǎn)生的假神經(jīng)酰胺收率的經(jīng)時變化的曲線圖。圖4為顯示SUV的膜結(jié)合所導致的F值經(jīng)時變化的曲線圖。圖5為顯示利用熒光稀釋法的SUV膜融合所導致的F值經(jīng)時變化的曲線圖。圖6為添加CDMT之前的SUV的電子顯微鏡照片。圖7為添加CDMT之后的SUV(GUV)的電子顯微鏡照片。圖8為僅添加甲醇后的SUV電子顯微鏡照片。具體實施例方式本發(fā)明中，通過脫水縮合劑使導入到小泡雙分子膜中的適當雙親性物質(zhì)發(fā)生脫水縮合反應，可以改變雙分子膜的狀態(tài)。根據(jù)圖1說明本發(fā)明的原理。在一般的表面活性劑中，如圖中的倒三角形所示，具有電荷的胺或羧酸鹽是極性頭部很大的倒錐型表面活性劑。它們脫水縮合而得的神經(jīng)酰胺由于在該反應前后，雙親性物質(zhì)的?；?或烷基鏈)的數(shù)量和極性頭部的電荷或官能團的種類發(fā)生變化，例如電荷消失導致極性頭部變小，因此成為圖中長方形所示的圓柱或錐型的脂質(zhì)。因而，如果在含有這些胺和羧酸鹽的分子集合體(脂質(zhì)體等)中進行這些化合物的脫水縮合反應，則由于臨界填充參數(shù)的增加和膜間排斥力的降低，發(fā)生膜曲率的變化等，為了緩和上述現(xiàn)象，膜最終發(fā)生融合。具體地說，可以舉出由鞘氨醇合成神經(jīng)酰胺。但是，由于難以大量獲得鞘氨醇，因此優(yōu)選使用如圖所示的二元醇作為類似化合物，利用其縮合合成假神經(jīng)酰胺，從而確認上述原理。本發(fā)明的方法對于通過脫水縮合能夠形成神經(jīng)酰胺類似物質(zhì)的基質(zhì)可以廣泛地應用。作為這種基質(zhì)，可以舉出雙親性的多種脂肪酸鹽或者伯和仲胺類。特別是，為了維持作為產(chǎn)物的假神經(jīng)酰胺的雙親性，優(yōu)選至少在羧酸或胺或者醇化合物的任一個的極性頭部周圍具有與進行脫水縮合反應的羧基或氨基或者羥基不同的親水性官能團。作為該親水性官能團，優(yōu)選羥基或糖等中性基團，還可以是作為普通表面活性劑極性頭部的季銨離子、磷酸離子、磺酸離子、硫酸離子等離子。以下更加詳細地說明本發(fā)明。本發(fā)明如上所述提供能夠產(chǎn)生相轉(zhuǎn)移的雙分子膜小泡以及其相轉(zhuǎn)移方法。本發(fā)明中，"相轉(zhuǎn)移"并非限定于雙分子膜小泡的膜的相轉(zhuǎn)移。例如，還包括雙分子膜小泡膜融合或膜分裂、由雙分子膜小泡向平面雙分子膜或膠束的轉(zhuǎn)變、由膠束向雙分子膜小泡的轉(zhuǎn)變等各種分子集合相的形態(tài)變化。本發(fā)明的雙分子膜小泡含有以下物質(zhì)作為膜的構(gòu)成成分(a)碳原子數(shù)6~20的脂肪酸鹽；(b)具有碳原子數(shù)6~20的脂肪鏈的醇或胺化合物；(c)可以形成雙分子膜的人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)。上述(a)碳原子數(shù)6~20的脂肪酸鹽只要是具有聚集在水界面的能力的雙親性脂肪酸鹽則沒有特別限定。作為這種脂肪酸鹽，優(yōu)選為具有長鏈烷基之類脂溶性基團的脂肪酸鹽，更優(yōu)選為碳原子數(shù)約為10~20的直鏈、支鏈或環(huán)狀的脂肪酸鹽。具體地說，可以舉出羊蠟酸(癸酸)、十一烷酸、月桂酸(十二烷酸)、肉豆蔻酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、油酸、反油酸、巖芽酸、亞油酸、a-亞油酸、，亞油酸、二十烷酸、二十碳三烯酸、花生四烯酸等的鹽。作為這些鹽，通?？梢耘e出鈉鹽、鉀鹽等。根據(jù)需要，還可以在這些化合物的羧基的周圍或附近具有上述那樣的親水性官能團。上述(b)具有碳原子數(shù)6~20的脂肪鏈的醇或胺化合物只要是具有能夠與上述(a)脂肪酸鹽的羧基發(fā)生脫水縮合的基團(例如羥基或氨基)、且具有聚集在水界面的能力的雙親性化合物，則沒有特別限定。優(yōu)選具有長鏈烷基之類的脂溶性基團，更加優(yōu)選在能夠脫水縮合的基團的周圍或附近具有上述那樣的親水性官能團。需要說明的是，上述(a)脂肪酸鹽在除了進行脫水縮合反應的羧基以外沒有更多的親水性官能團時，該(b)化合物更優(yōu)選在極性頭部周圍進一步具有親水性官能團。作為這種化合物的優(yōu)選例子，可以舉出下式I所示的二元醇。在該二元醇中，胺部分是能夠脫水縮合的基團，醇部分相當于親水性官能團。R1—NH—CH2—CH(OH)-CH2OH(I)(式中，Ri為碳原子數(shù)620的烷基、碳原子數(shù)6~20的烯基、或者碳原子數(shù)6~20的炔基)。在上述式I所示的(b)二元醇中，當Ri為碳原子數(shù)620的烷基時，該烷基可以是直鏈狀、支鏈狀或環(huán)狀.優(yōu)選碳原子數(shù)約為10~20的直鏈狀。作為這種烷基，可以舉出正癸基、正十二烷基(月桂基)、正十六烷基、正十八烷基等.當1^為碳原子數(shù)6~20的烯基時，該烯基可以是直鏈狀、支鏈狀或環(huán)狀.優(yōu)選碳原子數(shù)約為10~20的直鏈狀.作為這種烯基，可以舉出l-癸烯、l-十二烯、9-十六烯、9-十八烯等。當1^為碳原子數(shù)6~20的炔基時，該炔基可以是直鏈狀、支鏈狀或環(huán)狀。優(yōu)選碳原子數(shù)約為10~20的直鏈狀。作為這種炔基，可以舉出1-癸炔、l-十二炔、9-十六炔、9-十八炔等。上述(c)能夠形成雙分子膜的人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)只要是能夠形成雙分子膜的化合物，則沒有特別限定。作為人工合成脂質(zhì)，可以舉出長鏈二烷基化合物、單烷基表面活性劑、三鏈型表面活性劑等。例如在《脂質(zhì)體》、野島莊七等編、南江堂、1988年、302-309頁中有所示例。通常來說，優(yōu)選在同一分子內(nèi)具有C12~C15的2根長鏈狀烷基和親水性官能團(陽離子性、陰離子性、非離子性等)的化合物，代表地可以舉出C12~C15的二烷基銨鹽。磷脂質(zhì)沒有特別限定，可以是甘油脂質(zhì)或鞘磷脂質(zhì)的任一種。作為這種磷脂質(zhì)，可以舉出磷脂酰膽堿(卵磷脂)、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、鞘磷脂等。優(yōu)選磷脂酰膽堿。本發(fā)明的雙分子膜小泡根據(jù)需要還含有(d)下式II所示的叔胺作為膜的構(gòu)成成分。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(式中，R2、113和114中的l個或2個為曱基，剩余的R2、113和114各自獨立，為國CH2COOCnH2nw、畫CnH加+i或誦C6H4誦p-Cja加+h其中n為6~20的整數(shù)，-CnH2n+i為直鏈狀)。在可以作為上述式II所示(d)叔胺的R2、R3和R4的-CH2COOCnH2n+1、CnH2n+i或-C6H4-p誦CnH2n+i中，n為6~20的整數(shù)，-CnH2n+i為直鏈狀。作為它們的取代基，例如可以舉出正辛氧基羰基亞甲基、正癸氧基羰基亞曱基、正十二烷氧基羰基亞甲基、正十六烷氧基羰基亞甲基；正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、正十一烷基、正十二烷基、正十三烷基、正十四烷基、正十五烷基、正十六烷基、正十七烷基、正十八烷基、正十九烷基、正二十烷基；對-(正己基)亞苯基、對-(正辛基)亞苯基、對-(正癸基)亞苯基、對-(正十二烷基)亞苯基、對-(正十四烷基)亞苯基、對-(正十六烷基)亞苯基、對-(正十八烷基)亞苯基等。如果考慮向本發(fā)明的雙分子膜小泡的導入容易性，優(yōu)選上述式II的R2、113和114中的n為8~18，更優(yōu)選為12~16。對于上述式II的R2、議3和R4，如果考慮本發(fā)明方法的脫水縮合反應性，則R2、113和114中的l個或2個為甲基，剩余的R2、W和R4為具有碳原子數(shù)6~20的直鏈烷基的基團。更優(yōu)選R2、113和114中的2個為曱基。當R2、113和114全部為具有碳原子數(shù)6~20的直鏈烷基的基團時，反應效率不好，因此不優(yōu)選。含有上述式II所示的叔胺作為雙分子膜小泡的膜構(gòu)成成分時，優(yōu)選使用作為脫水縮合劑前體的、以下詳述的、式III所示的氰尿酸衍生物o本發(fā)明的雙分子膜小泡中的上述(a)~(d)的比例只要是能夠形成小泡，則沒有特別限定。作為脫水縮合反應基質(zhì)的(a)脂肪酸鹽和(b)醇或胺化合物優(yōu)選為約1:1的摩爾比。更優(yōu)選(a)脂肪酸鹽與(b)醇或胺化合物與(c)人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)的摩爾比為約1:1:1。(d)叔胺通常相對于l摩爾(a)脂肪酸鹽以0.01~1.0摩爾、優(yōu)選0.1~0.5摩爾的比例含有。上述(a)~(d)可以分別單獨使用，還可以混合2種以上〗吏用。本發(fā)明的雙分子膜小泡還可以根據(jù)需要含有具有其他界面聚集性的化合物或者雖然沒有界面聚集性但可以含有在雙分子膜中的化合物.例如，如下所述，可以舉出用于觀察膜融合的熒光物質(zhì)等。本發(fā)明的雙分子膜小泡可以是多層小泡(MLV:通常0.2~5pm大小)或者單層膜小泡(SUV:100nm以下；LUV和REV:100~1000nm;GUV:1000nm以上)的任何一種，它們可以通過本領域技術(shù)人員使用的普通方法制造。例如，MLV可以如下制造將上述(a)~(d)分別溶解在適當?shù)挠袡C溶劑(例如曱醇、氯仿等)中，在容器中混合，蒸餾除去有機溶劑。接著，使形成在內(nèi)壁上的薄膜干燥后，加入適當?shù)乃芤?例如磷酸緩沖液、Tris-HCl緩沖液、碳酸緩沖液等)，通過約30秒鐘左右的超聲波照射使其膨潤。進而，利用渦流混合機等進行攪拌振蕩，剝?nèi)ケ∧?，從而可以以混懸液的狀態(tài)獲得MLV.SUV例如可以通過進一步以高功率強力地照射超聲波(例如冰凍下約20分鐘)而作為SUV的分散液獲得(超聲波處理法)?；蛘哌€可以通過在相轉(zhuǎn)移溫度以上的溫度下利用微注射器注入溶解在乙醇中的脂質(zhì)的乙醇注入法、或者通過將MLV放入在弗氏壓碎器中進行擠出的弗氏壓碎法等來調(diào)制SUV。LUV可以通過瞇注入法、表面活性劑法、Ca^融合法、冷凍-溶解法等本領域技術(shù)人員通常使用的方法調(diào)制。REV可以通過反相蒸發(fā)法獲得。GUV例如可以通過使曱基葡萄糖甙和脂質(zhì)的乙醇溶液相對于多量的緩沖液進行透析而獲得。誘發(fā)本發(fā)明的雙分子膜小泡相轉(zhuǎn)移(例如膜融合)的方法包括以下工序調(diào)制上述雙分子膜小泡的工序；以及在該雙分子膜小泡中添加脫水縮合劑或脫水縮合劑前體的工序。作為在上述方法中使用的脫水縮合劑，可以舉出水溶性的脫水縮合劑或界面聚集性的脫水縮合劑或脫水縮合劑前體。作為水溶性的脫水縮合劑，例如可以舉出下述式IV所示的季銨鹽(參照WO00/53544和Kunishima等、Tetrahedron,2001年，57巻，1551-1558頁)。具體地說，可以舉出4-(4，6-二甲氧基-1，3,5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎啉鹽酸鹽(DMT-MM)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>(IV)(這里，E為具有l(wèi)個或2個叔胺基的l價或2價誘發(fā)基團；n在E具有1個叔胺基時為1、在E具有2個叔胺基時為2;116和111()各自獨立，表示碳原子數(shù)1~4的烷基、或者碳原子數(shù)6~8的芳基；a為l或2、在n為1時為1;Z一"表示(n/a)價的抗衡陰離子)。作為表面聚集性的脫水縮合劑，可以舉出下式V所示的1，3，5-三噪型化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>(V)(式中，115和116各自獨立，為甲基、乙基、碳原子數(shù)2~5的羥烷基、-(CH2CH20)mR7(其中，m為l120的整數(shù)，R7為氫原子、曱基、乙基或丙基)、-(CH2CH2NR8)mH(其中，m為l"-120的整數(shù)，118為碳原子數(shù)2~5的烷基、N，N-二烷基氨基乙基或國CH2CH2N+(CH3)3)、國CH2CH2S03'、-0^20^^+((:83)3或碳原子數(shù)為6~20的烷基，r5和R6不同時為碳原子數(shù)6~20的烷基；R2、R3和R4中的1個或2個為甲基，剩余的R2、W和R4各自獨立，々-CH2COO-CnH2n+1、-(:3211+1或-C6H4-p-CnH2n+1，其中n為6-20的整數(shù)，-CnH2n+1為直鏈狀；X-為卣化物離子)。該式V所示的化合物通過在適當?shù)娜軇┲谢旌舷率絀II所示的氰尿酸衍生物和下式II所示的叔胺而獲得。(式中，RS和RG各自獨立，為曱基、乙基、碳原子數(shù)2~5的羥烷基、-(CH2CH20)mR7(這里，m為l120的整數(shù)，117為氫原子、曱基、乙基或丙基)、-(CH2CH2NR8)mH(這里，m為l120的整數(shù)，議8為碳原子數(shù)2~5的烷基、N，N-二烷基氨基乙基、或者-CH2CH2N+(CH3)3)、CH2CH2S03、-CH2CH2N+(CH3)3、或碳原子數(shù)6~20的烷基，但R5和116不同時為碳原子數(shù)6~20的烷基，X為卣原子)，(式中，R2、113和114的定義如上)。特別優(yōu)選在混合待使其脫水縮合的至少2種化合物的同時，還混合這些氰尿酸衍生物和叔胺。作為脫水縮合劑，可以直接使用上式V所示的1，3，5-三嗪型化合物，但該化合物如上所述優(yōu)選在調(diào)制小泡的同時添加，因此難以調(diào)節(jié)融合或相轉(zhuǎn)移。因此，優(yōu)選在預先以含有(d)叔胺化合物作為膜的構(gòu)成成分的方式調(diào)制得到的小泡中添加作為脫水縮合劑前體的氰尿酸衍生物(化合物III)。此時，通過在調(diào)制脂質(zhì)體制后添加氰尿酸衍生物(化合物ni)，可以在體系內(nèi)(脂質(zhì)體界面)產(chǎn)生脫水縮合劑(化合物V)，引起界面的脫水縮合反應。因此，由于適當?shù)剡M行了目標的融合或相轉(zhuǎn)移，因此更為優(yōu)選。在上式III中，當115和116為碳原子數(shù)2~5的羥烷基時，該羥烷基可以是直鏈狀、支鏈狀或環(huán)狀，羥基的位置和數(shù)量沒有特別限定。優(yōu)選為直鏈狀，且為末端羥基。作為碳原子數(shù)2~5的羥烷基，例如可以舉出2-羥乙基、3-羥丙基、4-羥丁基、5-羥戊基。在上式III中，當R5和R6為-(CH2CH20)mR7時，m為1~120的整數(shù)、優(yōu)選為1~50的整數(shù)。iT為氫原子、甲基、乙基或丙基。此時，115和116的部分平均分子量優(yōu)選約為455000(相當于m為1~120)、更優(yōu)選約為45~2000(相當于m為1~50)。在上式III中，當R5和R6》-(CH2CH2NR8)mH時，m為1~120的整數(shù)、優(yōu)選為1~50的整數(shù)。r8為乙基或N，N-二烷基氨基乙基，該烷基的碳原子數(shù)為2~5。此時，W和116的部分平均分子量優(yōu)選約為45~5000(相當于m為1~120)、更優(yōu)選約為45~2000(相當于m為1~50)。在上式III中，當115和116為碳原子數(shù)6~20的烷基時，該烷基可以是直鏈狀、支鏈狀或環(huán)狀，優(yōu)選為直鏈狀。作為115和116的碳原子數(shù)6~20的烷基，可以舉出正己基、正戊基、正辛基、正壬基、正癸基、正十二烷基、正十六烷基等。對于上式iii的rs和r6，如果考慮該氰尿酸衍生物在水界面上的停留容易性，優(yōu)選1150-和1160-部分具有親水性。隨著上述R2、W和W的組合的不同而不同，優(yōu)選115和W的至少一者為甲基或乙基，更優(yōu)選兩者均為甲基。當115和116同時為碳原子數(shù)6~20的烷基時，該氰尿酸衍生物的疏水性變強，難以聚集在水界面上，因此不優(yōu)選。作為這種氰尿酸衍生物，例如可以舉出2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三溱(CDMT)。如上所述，為了使脫水縮合反應發(fā)生，從在雙分子膜小泡的界面上的聚集性良好、且在界面上能夠產(chǎn)生脫水縮合劑的方面出發(fā)，對于含有(d)叔胺作為雙分子膜小泡的膜構(gòu)成成分的小泡，特別優(yōu)選使用作為脫水縮合劑前體的氰尿酸衍生物(化合物ni)。在該工序中，上述脫水縮合劑或脫水縮合劑前體相對于(a)脂肪酸鹽或(b)醇或胺化合物使用1~100當量、優(yōu)選使用25~50當量。進行該工序的溫度根據(jù)目的適當決定，通常在室溫下進行。該工序所需要的時間隨著小泡的膜構(gòu)成成分、脫水縮合劑或脫水縮合劑前體的量、該工序的實施溫度等各種因素而改變，或者可以通過這些因素調(diào)節(jié)。在該工序中，當使用氰尿酸衍生物時，如以下路線所示，首先通過添加上式III的氰尿酸衍生物，形成存在于雙分子膜小泡的(d)叔胺和脫水縮合劑。接著，膜中的(a)羧酸與(b)胺化合物(二元醇)發(fā)生脫水縮合，形成假神經(jīng)酰胺。因此，如上所述，由于膜的臨界填充參數(shù)增加和膜間的排斥力降低，發(fā)生膜曲率的變化等，產(chǎn)生膜融合等的相轉(zhuǎn)移(參照圖1)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>作為用于評價和觀察膜融合等相轉(zhuǎn)移的方法，可以舉出利用電子顯微鏡進行的觀察、所產(chǎn)生的假神經(jīng)酰胺的定量(例如利用質(zhì)諳等)、熒光變化的測定等。當為熒光變化的測定時，將由于存在于附近而發(fā)生熒光能量轉(zhuǎn)移的化合物作為雙分子膜的構(gòu)成成分導入。作為這種化合物，例如可以舉出1，2-二肉豆蔻基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-(7-硝基-2-1，3-苯并喝二唑-4-基)(NBD-PE)和1，2-二肉豆蔻基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-(磺酰基麗絲胺羅丹明B)(Rh-PE)的組合。前者為能量供體，后者為能量受體。如圖2所示，如果NBD-PE和Rh-PE相鄰存在，則發(fā)生熒光能量轉(zhuǎn)移。熒光變化的評價可以使用通過下式獲得的熒光變化F。例如，當NBD-PE和Rh-PE分別含有在不同的小泡中時，如果發(fā)生它們的融合，則F值增大。相反，含有NBD-PE和Rh-PE兩者的小泡與不含它們的小泡融合時，NBD-PE和Rh-PE的距離增加，因此F值減少。熒光變化(F)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>ao-反應開始時的NBD-PE的熒光強度a產(chǎn)任意時間下的NBD-PE的熒光強度bo-反應開始時的Rh-PE的焚光強度b產(chǎn)任意時間下的Rh-PE的熒光強度利用本發(fā)明方法的膜融合等相轉(zhuǎn)移不僅可以在由本發(fā)明提供的含有脂肪酸鹽和胺作為膜構(gòu)成成分、且通過脫水縮合能夠被活化的不穩(wěn)定雙分子膜小泡之間產(chǎn)生，還可以在這種不穩(wěn)定雙分子膜小泡和未被活化的穩(wěn)定的雙分子膜小泡之間產(chǎn)生。而且，通過不穩(wěn)定的雙分子膜小泡與穩(wěn)定的雙分子膜小泡的量比、脫水縮合劑或脫水縮合劑前體的量等各種因素可以調(diào)節(jié)相轉(zhuǎn)移。通過本發(fā)明的方法，當誘發(fā)雙分子膜小泡之間的膜融合時，其內(nèi)容物可以不隨膜的融合而漏出(泄漏)地被融合。這樣，通過本發(fā)明的方法，例如能夠誘發(fā)細胞和由本發(fā)明提供的雙分子膜小泡之間的膜融合，還可以進行調(diào)節(jié)使得在適當?shù)臅r機將小泡的內(nèi)容物送入到細胞內(nèi)。實施例的二元醇1A的合成相同的方法合成(收率33%)。無色結(jié)晶熔點78~791C。工HNMR(CDC13)50.88(t，J=6.9Hz,3H),1.23—1.33(邁，18H),1.42—1.51(m,2H),2.54—2.73(m,3H),2.79—2.86(m,1H),3.59—3.65(m，1H〉，3.70—3.77(m，2H);IR(KBr)3323,3272,2916，2847cm-1;元素分析Ci5H33N02:計算值H,12.82;C,69.45.實測值H,12.83;C，69.42。ESI—MSm/z260[(M+l)+,C16H3302N]。二元醇1B相對于以下實施例中使用的緩沖液(5mMNaH2P04，0.15MNaCl，pH7.5)的溶解度約為0.2mM.。。2-23-(N-辛?；粱被?-1，2-丙二醇(假神經(jīng)酰胺2A)的合成利用與上述P-1的假神經(jīng)跣胺2B的合成相同的方法合成(收率52%)。無色油狀。丄HNMR(CDC13)SO.88(t,J=7,OHz'3H)，O.89(t,J=6.9Hz,3H)，1.22—1.37(m,18H)'1.52—1.70(m,4H),2.33(t,J=7.6Hz,2H),3.18—3.36(m,2H),3.39—3'59(m，4H)，3.71—3.79(m,1H);IR(neat)3378,2926，2855,1620cm-1;元素分析C19H3g03N:計算值H，11.93;C，69.25.實測值H,12.14;C,69.49。ESI-MSm/z330[(M+l)+,'C19H3B03N]。。IR(KBr)2923,1749cm-1。N，N-二曱基氨基-醋酸-l-辛酯(C8-叔胺)的合成除了使用1-辛醇代替1-十二烷醇之外，與上述[3-l同樣地操作，以外。/。的收率獲得N，N-二甲基氨基-醋酸-l-辛酯(C8-叔胺)。無色液體。丄HNMR(CDC13)50.88(t,J=6.9Hz,3H),1.24—1.33(m，10H〉，1.57—1.66(m，J=7.2Hz,2H),2.35(s,6H),3.16(s,2H),4.12",J=6.8Hz,2H)。ESI—MSm/z216[(M+1)+,C12H2502N]。IR(KBr)2928,1753cm-1。。IR(KBr)2923，1742cirT1。根據(jù)上述實施例6記載的SUV調(diào)制方法，通過表5所示的組成調(diào)制含有熒光劑的SUV分散液和不含熒光劑的SIJV分散液。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>*:磷酸緩沖液使用5mMNa2HPO4/0.15MNaCl，pH8.5在室溫下混合0.2mL調(diào)制好的含有熒光劑的suv分散液和1.8mL不含熒光劑的suv分散液。調(diào)制各三個檢體。在其中的各2個檢體中分別加入10.8|liL(25當量)或21.7pL(50當量)的CDMT(甲醇中300mM)，在室溫下放置。剩余1個加入21.7pL甲醇作為對照實驗，同樣地放置，每隔一定時間測定熒光。結(jié)果示于圖5中。當為該實施例8的熒光稀釋法時，與實施例7的混合法不同，F(xiàn)值隨著融合的發(fā)展而變小。如圖5所示，僅加入CDMT時可見熒光減弱，強烈啟示誘發(fā)膜融合。需要說明的是，在圖5所示的曲線圖中，在初期狀態(tài)下加有CDMT的曲線與對照曲線之間可見到差別。但是，這說明添加CDMT2小時后可見很大的熒光變化，在反應開始前的熒光中沒有差別。實施例9:伴隨著suv融合的粒徑變化使用月桂酸鈉和油酸鈉這2種作為脂肪酸鹽進行實驗。根據(jù)上述實施例6記載的suv調(diào)制方法，以表6所示的組成調(diào)制suv分散液。<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>*1:Z平均-平均流體力學直徑在3小時左右粒徑均顯著增大。由粒徑的變化，啟示在月桂酸中有十多個SUV融合，在油酸中有30~40個左右SUV融合。[實施例10:利用透射型電子顯微鏡觀察SUV1根據(jù)上述實施例6記載的suv調(diào)制法，以表8所示的組成調(diào)制suv分散液。表8<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>在5mL磷酸緩沖液(5mMNa2HPO4/0.15MNaCl，pH8.5)中調(diào)制取出200pL調(diào)制好的suv分散液，加入4.3pL的CDMT(甲醇中300mM)，在室溫下放置。作為對照實驗加入4.3pL甲醇代替CDMT，在室溫下放置。將數(shù)滴放置后的suv分散液滴加在栽玻片上，利用液氮冷凍，通過本領域技術(shù)人員通常進行的冷凍割斷法，調(diào)制電子顯微鏡試樣(復制品)(使用JEOLJFD-卯IO).利用TEM(JEOLJEM-1010)觀察所得試樣(加速電壓100kv)。電子顯微鏡照片示于圖6~8中，照片中的箭頭表示suv。當加入CDMT時，粒徑在添加CMDT前為數(shù)十~約100nm(圖6)，添加CDMT后達到lpM以上，而且粒子數(shù)顯著減少(圖7)。這是由于相互接近的數(shù)千個suv之間發(fā)生融合，形成巨大的guv。另一方面，當僅加入甲醇時，即便經(jīng)過1天以上，在粒徑和分布中也未見變化(圖8)。[實施例11:活化suv和惰性suv的融合實驗對于作為膜構(gòu)成成分含有脂肪酸鹽和胺、通過脫水縮合而活化的suv(以下稱為活化suv)和通常的suv(以下稱為惰性suv)，通過上述實施例6記載的suv調(diào)制方法，以下表9所示組成分別調(diào)制含有熒光劑的suv分散記和不含熒光劑的suv分散液。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>*:磷酸緩沖液使用5mMNa2HPO4/0.15MNaCl，pH8.5根據(jù)上述實施例8記載的熒光稀釋法，在室溫下混合0.2mL調(diào)制好的含有熒光劑的SUV分散液和1.8mL不含熒光劑的SUV分散液.在此，SUV的組合有以下4種類含有熒光劑的活化SUV和不含熒光劑的活化SUV的組合(第l輪)、含有熒光劑的惰性SUV和不含熒光劑的活化SUV的組合(第2輪)、含有熒光劑的活化SUV和不含熒光劑的惰性SUV的組合(第3輪)、含有熒光劑的惰性SUV和不含熒光劑的惰性SUV的組合。接著，加入15.2pL(4.55pmol:第1輪的總脂肪酸鹽的35當量)CDMT(甲醇中300mM)，在室溫下放置，通過熒光光度計測定F值的經(jīng)時變化.結(jié)果示于圖9中。由圖9可知，一方面即便是惰性SUV，F(xiàn)值也顯著地變化(第2輪和3)。對于相同的SUV之間的融合來說，理論上沒發(fā)生熒光變化，因此該F值的減少表明發(fā)生活化SUV和惰性SUV的融合。當活化SUV少時(第3輪)，F(xiàn)值的變化量小，這是由于通過一次融合SUV的不穩(wěn)定性被消除、不會進一步融合，熒光劑未被充分地稀釋。另一方面，當SUV的卯％為活化SUV時(第2輪)，融合多階段地發(fā)生，熒光劑被充分地稀釋，因此F值的變化很大。[實施例12:伴隨融合的SUV內(nèi)水相的泄漏研究]當將膜融合用在DDS或基因?qū)胫袝r，脂質(zhì)體內(nèi)容物必須被很好地導入到靶細胞的內(nèi)部。融合如果伴隨著膜的部分崩解時，則大量的內(nèi)容物會泄露到外部，不能達到該目的，其應用性有限，因此，進行融合時的內(nèi)容物的泄漏實驗。以下所示的鈣黃綠素(Calcein)這種熒光色素在高濃度下會自己消光，不會發(fā)出突光，但在低濃度下會發(fā)出熒光。因此，在本實施例中，利用該性質(zhì)，進行在內(nèi)部(內(nèi)水相)中預先放入有高濃度鈣黃綠素的脂質(zhì)體的融合實驗。伴隨著融合，如果內(nèi)容物泄露，則在外水相中呈現(xiàn)出稀釋的鈣黃綠素的熒光，但如果不發(fā)生泄露，則熒光沒有變化。SUV的調(diào)制根據(jù)實施例6所記載的方法進行。在磷酸緩沖液(5mMNaH2P04/Na2HP04，0.15MNaCl，pH8)中放入鈣黃綠素(75mM)，通過超聲波處理制作SUV。通過凝膠過濾(SephadexG-50、在流動相中同樣使用磷酸緩沖液)分離SUV，除去存在于外水相中的鈣黃綠素，獲得SUV分散液。在所得SUV分散液中添加CDMT(50當量)后，在室溫下放置，經(jīng)過一定時間后測定熒光(520nm)(Fs)、之后立即添加TritonX-100(10%、200pL)破壞SUV后，再次測定熒光(Ft)。沒有膜融合的對照實驗同樣使用SUV、不添加CDMT、每隔一定時間測定熒光，最后添加Triton-X100破壞脂質(zhì)體，測定熒光。根據(jù)下式計算泄露率。鈣黃綠素鈣黃綠素的泄露(％)Fsx1.01-F0x100x1."國F。F0:0小時的熒光強度Fs:各時間的熒光強度FT:添加Triton-XlOO后的焚光強度所得結(jié)果示于下表IO中。表IO時間泄露率(％)有融合沒有融合(對照)1小時6.51.32小時7.12.03小時8.32.2如表10所示可知，當添加CDMT發(fā)生膜融合時，直至融合基本完成的3小時可見泄露率有若干的增加(相對于對照實驗的2%，融合時為8%)，但焚光強度(Fs)在剛測定后與添加TrionX-lOO時的熒光(Ft)相比非常小，內(nèi)容物基本沒有泄露.產(chǎn)業(yè)實用性通過本發(fā)明的方法，能夠化學地改變利用脫水縮合反應形成分子集合體的脂質(zhì)，改變其物理性質(zhì)或形態(tài)，調(diào)整膜融合等相轉(zhuǎn)移的時機等。即，能夠誘發(fā)在雙分子膜小泡中分子集合體的相轉(zhuǎn)移，可以誘發(fā)脂質(zhì)體等水界面的分子集合體的融合或分裂。另外，本發(fā)明的雙分子膜小泡可以提供活化狀態(tài)或準穩(wěn)定狀態(tài)的小泡。進而，在脂質(zhì)體等的膜融合時，其內(nèi)容物也可能融合。因此，本發(fā)明的方法和雙分子膜小泡在利用脫水縮合反應的有機合成化學或界面化學的領域、或者利用脂質(zhì)體等小泡的領域等的研究中有用。另外，作為用于研究關于細胞或細胞內(nèi)小器官的形成、分解、分裂或融合等生物的形態(tài)變化的模型體系，對于闡明伴隨著內(nèi)吞作用或胞吐作用的生物學機制、或者基因治療或藥物傳遞系統(tǒng)等的治療醫(yī)學的開發(fā)也有用。權(quán)利要求1.一種雙分子膜小泡，其中，含有如下物質(zhì)作為膜構(gòu)成成分(a)碳原子數(shù)6～20的脂肪酸鹽；(b)具有碳原子數(shù)6～20的脂肪鏈的醇或胺化合物；(c)能夠形成雙分子膜的人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)。2.權(quán)利要求l所述的雙分子膜小泡，其中，所述(b)醇或胺化合物為下式I所示的二元醇，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(I)式中，Rt為碳原子數(shù)620的烷基、碳原子數(shù)6~20的晞基、或者碳原子數(shù)6~20的炔基。3.權(quán)利要求1或2所述的雙分子膜小泡，其中，還含有(d)下式II所示的叔胺作為上述膜構(gòu)成成分，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>式中，R2、RS和R"中的l個或2個為甲基，剩余的R2、113和114各自獨立，為國CH2COOCnH2n+b-CnH2n+1或-C6H4畫p-CnH2^，其中n為6~2o的整數(shù)，-<:1^211+1為直鏈狀。4.權(quán)利要求1~3任一項所述的雙分子膜小泡，其中，所述(a)脂肪酸鹽和所述(b)醇或胺化合物的摩爾比為1:1。5.權(quán)利要求1~4任一項所述的雙分子膜小泡。其中，所述(a)脂肪酸鹽和所述(b)醇或胺化合物和所述(c)能夠形成雙分子膜的人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)的摩爾比為1:1:1。6.權(quán)利要求1~5任一項所述的雙分子膜小泡，其中，所述(c)能夠形成雙分子膜的人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)為磷脂質(zhì)。7.—種誘發(fā)雙分子膜小泡的相轉(zhuǎn)移的方法，其包括以下工序調(diào)制雙分子膜小泡的工序，該雙分子膜小泡含有如下物質(zhì)作為膜構(gòu)成成分(a)碳原子數(shù)6~20的脂肪酸鹽；(b)具有碳原子數(shù)6~20的脂肪鏈的醇或胺化合物；(c)能夠形成雙分子膜的人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)；以及在該雙分子膜小泡中添加脫水縮合劑或脫水縮合劑前體的工序。8.權(quán)利要求7所述的方法，其中，所述(b)醇或胺化合物為下式I所示的二元醇，R，一NH—CH2-CH(OH)—CH2OH(I)式中，1^為碳原子數(shù)6~20的烷基、碳原子數(shù)6~20的烯基、或者碳原子數(shù)6~20的炔基。9.權(quán)利要求7或8所述的方法，其中，所述雙分子膜小泡還含有(d)下式II所示的叔胺作為所述膜構(gòu)成成分，且所述脫水縮合劑前體為下式III所示的氰尿酸衍生物，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>式中，R2、113和114中的l個或2個為曱基，剩余的R2、113和114各自獨立，》-CH2COOCnH2n+1、漏CnH2n+i或國C6H4-p國CnH2n+h其中n為6~20的整數(shù)，-(^11211+1為直鏈狀；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(III)式中，R5和I^分別獨立，為甲基、乙基、碳原子數(shù)2~5的羥烷基、-(CH2CH20)mR7(這里，m為l-120的整數(shù)，if為氫原子、曱基、乙基或丙基)、-(CH2CH2NR8)mH(這里，m為l120的整數(shù)，118為碳原子數(shù)2~5的烷基、N，N-二烷基氨基乙基、或者-CH2CH2N+(CH3)3)、-CH2CH2S03-、-CH2CH2N+(CH3)3、或碳原子數(shù)6-20的烷基，但R5和116不同時為碳原子數(shù)6~20的烷基，X為卣原子。10.權(quán)利要求9所述的方法，其中，所述式III中的RS和I^的至少一個為曱基或乙基。11.權(quán)利要求9或IO所述的方法，其中，所述式II中的n為12~16。全文摘要本發(fā)明提供能夠產(chǎn)生相轉(zhuǎn)移的雙分子膜小泡，該雙分子膜小泡含有如下物質(zhì)作為膜的構(gòu)成成分(a)碳原子數(shù)6～20的脂肪酸鹽；(b)具有碳原子數(shù)6～20的脂肪鏈的醇或胺化合物；(c)能夠形成雙分子膜的人工合成脂質(zhì)或磷脂質(zhì)。優(yōu)選的是，該雙分子膜小泡還含有(d)叔胺作為膜的構(gòu)成成分。本發(fā)明還提供誘發(fā)雙分子膜小泡的相轉(zhuǎn)移的方法，該方法包括向所述雙分子膜小泡中添加界面聚集性脫水縮合劑和脫水縮合劑前體的工序。根據(jù)本發(fā)明，通過形成分子集合體的脂質(zhì)的化學變化，使其物理性質(zhì)或形態(tài)改變，能夠調(diào)制膜融合等相轉(zhuǎn)移的時機。另外，例如在膜融合時，雙分子膜小泡內(nèi)的內(nèi)容物也不會泄漏，可以被融合。文檔編號A61K47/18GK101111306SQ20058004744公開日2008年1月23日申請日期2005年12月12日優(yōu)先權(quán)日2005年1月28日發(fā)明者國島崇隆申請人:獨立行政法人科學技術(shù)振興機構(gòu)