專利名稱：麥冬和細辛腦的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種主要由麥冬或其提取物和細辛腦制成的藥物組合物及其制備方法和用途，屬于醫(yī)藥技術領域。
2、背景技術呼吸系統(tǒng)疾病主要包括上呼吸道感染，急、慢性支氣管炎，肺炎等癥，是人們所熟悉的病種之一，發(fā)生在人體呼吸道(包括咽喉、氣管、支氣管和肺部)內，以咳、痰、喘、炎為其共同的特點，而炎癥則是疾病的起因，咳、痰、喘是繼發(fā)的癥狀。這些癥狀會影響病人的休息和健康，如果長期不愈，還可能發(fā)展成肺氣腫、支氣管擴張及肺源性心臟病等。呼吸系統(tǒng)疾病多發(fā)于冬春季，多先由病毒感染引起，少數由細菌直接感染所致。中醫(yī)理論認為，哮喘的病機關鍵是脾虛或肺、脾、腎三氣俱虛，而現(xiàn)代藥理和臨床研究則進一步認為虛癥的共同特點之一就是免疫功能低下，尤其是脾虛，主要是免疫調節(jié)和屏障功能異常。因此，中醫(yī)藥預防支氣管哮喘的一個重要的方面就是提高患者的免疫功能。在我國人口統(tǒng)計中，呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)病率和病死率日趨增多，成為了第二死因，應當引起足夠的重視。呼吸系統(tǒng)疾病具有反復發(fā)作、病程長的特點，臨床上可供選擇的藥物不多，且起效較慢。
麥冬為百合科植物麥冬Ophiopogon japonicus(Thunb)Ker-Gawl的干燥塊根，其味甘、微苦，性微寒，歸肺、胃、心經。具有養(yǎng)陰生津，潤肺清心的功效，用于肺燥干咳、虛癆咳嗽、津傷口渴、心煩失眠、內熱消渴、腸燥便秘、咽白喉等癥。國內外研究表明，麥冬具有多種藥效功能，主要集中在抗心肌缺血、抗血栓形成、免疫調節(jié)、耐缺氧、抗衰老、降血糖等方面。麥冬多糖是麥冬的主要有效成分之一，能顯著增加小鼠脾重量、增強小鼠碳粒廓清作用、刺激小鼠血清中溶血素的產生、對抗環(huán)磷酰胺和鈷照射引起的白血球下降、拮抗乙酰膽堿和組胺混合引起的正常豚鼠和卵白蛋白引起的致敏豚鼠支氣管平滑肌收縮、及對正常小鼠血糖和試驗性高血糖的降低作用，藥效持久且無副作用。
細辛腦主要成份為α-細辛腦，化學名稱為2，4，5-三甲氧基-1-丙烯基苯，能對抗組胺、乙酰膽堿，緩解支氣管痙攣，起到平喘作用，對咳嗽中樞也有較強的抑制作用，細辛腦可引起分泌物增加，使?jié)馓底兿?，降低痰液黏滯，易于咳出；有類似氨茶堿松弛支氣管平滑肌作用；還能提高大腦皮質的電刺激閾，抑制電刺激的突觸傳導及癲癇性電的擴散，適用于支氣管炎和支氣管哮喘。細辛腦結構式如下 細辛腦結構式目前，利用麥冬或其提取物和細辛腦的相互作用，配伍組方，用于制備治療肺炎、支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病伴咳嗽、咯痰、喘息等疾病的藥物，尚未見報道。
3、發(fā)明內容為了滿足臨床需要，擴大用藥品種，更好的治療呼吸系統(tǒng)疾病，提高患者的生活質量，本發(fā)明提供了一種新的藥物組合物及其制備方法和用途，該組合物主要由麥冬和細辛腦制成，其重量份數為麥冬2000～50000份、細辛腦1～300份；優(yōu)選為麥冬5000～20000份、細辛腦4～120份；最優(yōu)為麥冬10000份、細辛腦16份。
本發(fā)明藥物組合物中的麥冬可以用適宜的溶劑和方法經過提取加工得到麥冬提取物，麥冬提取物再與細辛腦以及藥學上可接受的輔料混合制成任一制劑。提取溶劑優(yōu)選水和乙醇，提取方法可以為浸漬法、滲漏法、煎煮法、回流提取法或連續(xù)提取法。所得麥冬提取物的主要有效成分為麥冬多糖，主要有效成分的含量不低于40％，最好不低于80％。
本發(fā)明提供了一種優(yōu)選的麥冬提取工藝，具體如下取干燥的麥冬塊根，乙醇回流提取三次，棄去醇提液，藥渣揮干溶劑后，加水煎煮三次，每次加水6倍量，提取時間分別為2小時、1小時、1小時，合并水提液，過濾，加入0.5％活性炭脫色2次，抽濾，濾液減壓濃縮至原體積的1/5，置冰箱中放置24小時以上，離心，過濾，濾液加乙醇至含醇量為80％，置冰箱中靜置過夜，濾過，濾渣用無水乙醇洗滌數次，揮干乙醇，加水加熱溶解，靜置過夜，離心去沉淀。上清液調pH至2.5～5，加入1％的胃蛋白酶或1％木瓜蛋白酶，35℃水解2小時，再煮沸5分鐘，靜置過夜，離心去沉淀。上清液加乙醇至含醇量為80％，過濾，沉淀用50℃的70％乙醇、丙酮洗滌數次，減壓干燥，即得。
通過本工藝制備的麥冬提取物的得率為1～1.5％，麥冬提取物中多糖的含量不低于80％。
麥冬除采用上述方法提取外，還可以通過以下方法提取制備，但不僅限于下列方法方法一取干燥的麥冬塊根，加水煮沸三次，均加水5倍量，提取時間分別為2小時、2小時、1小時，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.02～1.05時，過濾，濾液用Sevage法除蛋白，再用60％、70％、80％乙醇剃度醇沉，抽濾，沉淀用丙酮、乙醚、乙酸乙脂洗滌脫脂，再加水溶解，離心去沉淀，滴加10％的TCA至濃度為1％，混勻，沉淀，離心去沉淀，加乙醇至含醇量為70％，過濾得沉淀。以50℃的70％乙醇洗滌沉淀去單糖，再以丙酮清洗，減壓干燥，即得。
通過本工藝制備的麥冬提取物的得率為1.5～2.5％，麥冬提取物中多糖的含量不低于60％。
方法二取干燥的麥冬塊根，加水煮沸提取三次，加水量分別為8倍量、6倍量、6倍量，提取時間分別為2小時、1小時、1小時，合并提取液，3000r/min，離心10分鐘，過濾，濾液濃縮至相對密度為1.02～1.05，置冰箱中放置24小時，離心過濾去沉淀，濾液用Sevage法脫蛋白，反復3次。再加乙醇至含醇量為60％，靜置24小時，抽濾，濾渣用無水乙醇、丙酮分別洗滌5次，再加水加熱溶解，離心過濾去沉淀，所得沉淀用50℃的70％乙醇洗滌去單糖，再用丙酮洗滌，減壓干燥，即得。
通過本工藝制備的麥冬提取物的得率為2～3.5％，麥冬提取物中多糖的含量不低于40％。
本發(fā)明藥物組合物還可用麥冬多糖和細辛腦直接投料制備，根據提取物相對于藥材的得率計算，本發(fā)明藥物組合物的原料藥重量份數為麥冬多糖20～750份、細辛腦1～300份；優(yōu)選為麥冬多糖50～300份、細辛腦4～120份；最優(yōu)為麥冬多糖100～150份、細辛腦16份。
上述藥物組合物中麥冬多糖中多糖的含量不低于40％，最好不低于80％。
以上組成是按重量份作為配比的，在生產時可按照相應比例增大或減小，如大規(guī)模生產可以以千克為單位，或以噸為單位，小規(guī)模生產也可以以克為單位，重量可以增大或者減小，但各組成之間的重量配比不變。以上組成，若以克為單位，可以制成100～10000次用量的制劑，如作為注射劑，可制成100～10000支，每次用量1～10支。如作為片劑，可制成100～10000片，每次服用1～10片。
以上重量配比的比例是經過科學篩選得到的，對于特殊病人，可以相應調整組成的比例，增加或者減少不超過100％。
本發(fā)明藥物組分的用量是經過發(fā)明人進行大量摸索總結得出的，各組分用量在上述重量份范圍內都具有較好療效。
本發(fā)明藥物組合物可用于制備治療肺炎、支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病伴咳嗽、咯痰、喘息等疾病的藥物。
本發(fā)明藥物組合物可以加一種或多種藥學上可接受的載體，以口服、鼻吸入或腸胃外給藥的方式施用于需要這種治療的患者。用于口服時，可將其制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、膠囊、軟膠囊、分散片、口服液、顆粒、咀嚼片、口崩片、滴丸、緩釋片、緩釋膠囊、控釋片、控釋膠囊，制成液體制劑如水或油懸浮劑或其它液體制劑如糖漿等；用于腸胃外給藥時，可將其制成注射用的溶液、水或油懸浮劑等，如水針、凍干粉針、無菌粉針、輸液等。本發(fā)明藥物組合物的優(yōu)選的劑型是注射劑利口服制劑。
本發(fā)明藥物組合物可采用現(xiàn)有制藥領域中的常規(guī)方法生產，需要的時候可以添加各種藥學上可接受的載體。所述的載體包括藥學領域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等。
本發(fā)明藥物組合物在制成口服制劑時，可選擇的填充劑有淀粉、糖粉、磷酸鈣、硫酸鈣二水物、糊精、微晶纖維素、乳糖、預膠化淀粉、甘露醇等；可選擇的粘合劑有羧甲基纖維素鈉、PVP-K30、羥丙基纖維素、淀粉漿、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙甲纖維素、預膠化淀粉等；可選擇的崩解劑有干淀粉、交聯(lián)聚維酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素等；可選擇的潤滑劑有硬脂酸鎂、滑石粉、十二烷基硫酸鈉、微粉硅膠等。
本發(fā)明藥物組合物在制成注射劑時，為了增加其溶解度，可以加入聚山梨酯80等助溶劑。輸液中可以加入用于調節(jié)滲透壓的等滲調節(jié)劑，例如，氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、乳酸鈉、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖苷等，優(yōu)選葡萄糖。粉針中可加入賦形劑，例如，甘露醇、葡萄糖、乳糖、右旋糖酐、山梨醇、蔗糖、甘氨酸、氯化鈉等。
本發(fā)明藥物組合物具有以下優(yōu)點(1)首次提供了一種由麥冬或其提取物和細辛腦配伍用于治療呼吸系統(tǒng)疾病的藥物組合物及其制備方法和用途，滿足了臨床急需；(2)首次對本發(fā)明藥物組合物的相互作用和配伍組方進行了藥理藥效學實驗研究，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明組合物對脂多糖所致大鼠急性肺損傷有明顯的防治作用，使肺系數極顯著降低、肺NF-kB相對灰度明顯升高、血清NO濃度極明顯降低、血清MDA濃度極明顯降低，能夠拮抗乙酰膽堿和組胺混合引起的正常豚鼠和卵白蛋白引起的致敏豚鼠支氣管平滑肌收縮、延長哮喘潛伏期，可顯著增加家兔呼吸道痰液分泌量，表明麥冬或其提取物和細辛腦兩藥合用治療呼吸系統(tǒng)疾病效果顯著，其結果是本技術領域的普通技術人員所意想不到的；(3)對本發(fā)明藥物組合物各配比進行了篩選研究，得出了本發(fā)明藥物組合物的最優(yōu)配比；(4)本發(fā)明制備工藝簡單，藥品質量均勻穩(wěn)定；(5)進行的穩(wěn)定性實驗表明本發(fā)明藥物組合物注射液各項指標均比較穩(wěn)定，保證了臨床用藥的安全；(6)本發(fā)明藥物組合物合并用藥療效確切，且減小了相對用藥劑量，具有廣泛的應用前景。
以下通過實驗例來進一步闡述本發(fā)明所述的藥物組合物的有益效果。下列實驗例中麥冬或麥冬多糖和細辛腦的組合物簡稱MX組合物，實驗例中所用的麥冬多糖均取自實施例1。
實驗例1 MX組合物的藥效學研究——對脂多糖所致大鼠急性肺損傷的防治作用供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，市購；肺損傷模型組脂多糖(LPS)；麥冬多糖組麥冬多糖注射液，規(guī)格2ml:50mg，自制；細辛腦組細辛腦注射液，規(guī)格2ml:8mg，北京雙鶴藥業(yè)股份有限公司；MX組合物組MX組合物注射液(不同配比)，自制(制備方法參見實施例3)。
實驗動物分組健康雄性SD大鼠130只，體重180～250g，隨機分成13組。分別為空白對照組、大鼠肺損傷模型組(LPS組)、麥冬多糖組、細辛腦組、MX組合物組(不同配比)9組，每組10只。
實驗方法大鼠急性肺損傷模型采用大鼠尾靜脈注射LPS(5mg/kg，LPS O55B5，Sigma)方法建立。注入LPS前1h，麥冬多糖組(50mg/kg)、細辛腦組(20mg/kg)和MX組合物不同配比組(20mg/kg)分別腹腔注射麥冬多糖、細辛腦和MX組合物注射液，空白對照組相應注射等量生理鹽水。
各組動物注射LPS或生理鹽水后4h腹腔注射鹽酸氯胺酮(100mg/kg)麻醉，摘取眼球取血，收集血清置-70℃冰箱保存待測一氧化氮(nitric oxide，NO)、丙二醛(malondialdehyde，NDA)(NO及NDA測試試劑盒均購自南京建成生物工程研究所)。取血后，腹主動脈放血快速處死動物，速取肺，觀察并稱肺濕重，計算肺系數(肺系數肺濕重(g)/大鼠體重(g)×100)。取左肺下部固定、包埋、切片、H-E染色觀察肺改變，免疫組織化學法檢測核因子(NF)-kB染色強度按SABC試劑盒說明行ABC染色，一抗用兔抗大鼠NF-kB P65抗體，DAB顯色(SABC、DAB試劑盒、兔抗大鼠NF-kB P65抗體均購自武漢博士德公司)，同時以PBS代替一抗作陰性對照。然后以多功能真彩病理圖像分析系統(tǒng)測定各組NF-kB免疫組化片及相應陰性對照片高倍視野下平均灰度值，計算相對灰度(相對灰度＝NF-kB免疫組化片平均灰度值/相應陰性對照片平均灰度值)，相對灰度越大，染色強度越小。
統(tǒng)計學分析處理各組定量資料均采用x±s表示，兩組間比較用t檢驗，顯著性檢驗水平a＝0.05，資料計算應用SPSS軟件。
表1各組大鼠肺系數、肺NF-kB相對灰度、血清NO、MDA濃度比較(x±s，n＝10)
注*p＜0.05，**p＜0.01，與空白對照組相比；#p＜0.05，##p＜0.01，與LPS組相比；&p＜0.05，與麥冬多糖組相比；$p＜0.05，與細辛腦組相比。
實驗結果見表1。
(1)肺組織病理學檢查肺大體觀察 空白對照組肺外觀無明顯異常改變；LPS組肺體積增大，表面暗紅，包膜下點狀、片狀出血，切面疏松，有黃色或淡紅色液體溢出；麥冬多糖組與細辛腦組病變較LPS組明顯減輕，但較空白對照組仍有明顯差別；MX組合物不同配比組病變與LPS組相比差異顯著，與麥冬多糖組或細辛腦組比較有明顯差異，與空白對照組相比無明顯差異。光鏡下，空白對照組肺組織結構完整，肺泡隔無水腫、炎癥，肺泡腔清晰；LPS組肺泡隔增寬，部分肺泡內見出血，肺間質見多量炎癥細胞浸潤；麥冬多糖組與細辛腦組肺部炎癥細胞浸潤、滲出、出血較LPS組明顯減輕但較空白對照組仍有明顯差別；MX組合物不同配比組與LPS組相比差異顯著，與麥冬多糖組或細辛腦組比較有明顯差異，與空白照組相比無明顯差異。
(2)肺系數變化 LPS組與空白對照組比較，肺系數顯著增加(p＜0.01)；麥冬多糖組或細辛腦組與LPS組比較明顯降低(p＜0.05)；但與空白對照組比較仍有明顯差異(p＜0.05)；MX組合物不同配比組與LPS組比較顯著降低(p＜0.01)，與麥冬多糖組或細辛腦組比較均有明顯差異(p＜0.05)，且與空白對照組相比無明顯差異(p＞0.05)。
(3)肺組織NF-kB免疫組化檢測 陽性染色為棕黃色?？瞻讓φ战M見胞漿有陽性著色，胞核著色較少；LPS組胞核明顯陽性著色，胞漿亦見陽性著色；麥冬多糖組或細辛腦組胞核著色較LPS組明顯降低，較空白對照組略高；MX組合物不同配比組與LPS組比較顯著降低，較空白對照組無顯著差異。LPS組NF-kB染色相對灰度值較空白對照組顯著減小(p＜0.01)，表示LPS組較空白對照組NF-kB染色強度顯著增加；麥冬多糖組或細辛腦組較LPS組染色強度明顯降低(p＜0.05)；但與空白對照組比較仍有明顯差異(p＜0.05)；MX組合物不同配比組與LPS組比較顯著降低(p＜0.01)，與麥冬多糖組或細辛腦組比較均有顯著差異(p＜0.05)，且與空白對照組相比無明顯差異(p＞0.05)。
(4)血清NO濃度變化 LPS組與空白對照組比較，血清NO濃度顯著增加(p＜0.01)；麥冬多糖組或細辛腦組與LPS組比較明顯降低(p＜0.05)；但與空白對照組比較仍有明顯差異(p＜0.05)；MX組合物不同配比組與LPS組比較顯著降低(p＜0.01)，與麥冬多糖組或細辛腦組比較均有明顯差異(p＜0.05)，且與空白對照組相比無明顯差異(p＞0.05)。
(5)血清MDA濃度變化 LPS組血清MDA濃度較空白對照組顯著增高(p＜0.01)；麥冬多糖組或細辛腦組與LPS組比較明顯降低(p＜0.05)；但與空白對照組比較仍有明顯差異(p＜0.05)；MX組合物不同配比組與LPS組比較顯著降低(p＜0.01)，與麥冬多糖組或細辛腦組比較均有明顯差異(p＜0.05)，且與空白對照組相比無明顯差異(p＞0.05)。
結論以上實驗結果表明，麥冬多糖和細辛腦組方配伍、聯(lián)合應用，有協(xié)同增效作用，且與配比有關，以麥冬多糖(100～150mg)+細辛腦(16mg)時效果較佳，以麥冬多糖+細辛腦＝125mg+16mg時效果最佳。
實驗例2 MX組合物對乙酰膽堿和組胺噴霧引起的正常豚鼠和卵蛋白引起的致敏豚鼠哮喘的影響供試品與材料卵白蛋白(OA)自制；空白對照組0.9％生理鹽水注射液，市購；賽庚啶組賽庚啶，上海第十一制藥廠；麥冬多糖組麥冬多糖注射液，規(guī)格2ml:50mg，自制；細辛腦組細辛腦注射液，規(guī)格2ml:8mg，北京雙鶴藥業(yè)股份有限公司；MX組合物組MX組合物注射液高、中、低三個劑量組，自制(制備方法參見實施例3處方1)。
實驗動物分組豚鼠84只，用于正常動物實驗42只，用于過敏性動物實驗42只，雌雄兼用，體重在200g左右，隨機分為7個組，分別為空白對照組，賽庚啶細，麥冬多糖組，細辛腦組、MX組合物高、中、低劑量組，每組6只。
實驗方法(1)各給藥組所給藥物用藥前均稀釋成3ml/只，腹腔注射，空白對照組給等體積生理鹽水。連續(xù)給藥3天，于末次給藥后1h，分別置于4L容積的密閉玻璃罩內，以最大霧量檔次噴2％乙酰膽堿和0.1％組胺等量混合液，每次噴霧15s。噴霧停止后，觀察豚鼠出現(xiàn)喘息性抽搐、翻倒的潛伏期。結果見表2。
(2)將0.1mg卵白蛋白(OA)和100mgAl(OH)3，溶于1ml生理鹽水中，配制成凝膠液，在豚鼠足跖下、腰、頸、腹股溝處對稱共10點分別皮下注射50μl，同時腹腔注射0.5ml致敏動物，共致敏3周。從致敏結束前3天起，各給藥組分別腹腔給藥，于致敏最后一天，將豚鼠置于密閉容器內，進行引喘試驗。實驗前1h時，各組動物先腹腔注射相應藥物，1h后分別吸入0.25％OA氣霧0.5min，測定不同藥物對引喘率、引喘潛伏期的影響。結果見表3。
表2對乙酰膽堿和組胺噴霧引起豚鼠哮喘的影響(x±s，n＝6)
注*p＜0.01，**p＜0.001，與空白對照組比較；&p＜0.05，與麥冬多糖組比較；#p＜0.05，與細辛腦組比較。
表3對卵蛋白引起豚鼠過敏性哮喘的影響(x±s，n＝6)
注*p＜0.01，**p＜0.001，與空白對照組比較；&p＜0.05，與麥冬多糖組比較；#p＜0.05，與細辛腦組比較。
實驗結果正常豚鼠的實驗結果見表2，顯示(1)與空白對照組比較，麥冬多糖組、細辛腦組均可顯著延長豚鼠哮喘潛伏期(p＜0.01)，賽庚啶組可極顯著延長豚鼠哮喘潛伏期(p＜0.001)，MX組合物各劑量組均可極顯著延長豚鼠哮喘潛伏期(p＜0.001)，作用與賽庚啶組相似；(2)與麥冬多糖組或細辛腦組比較，MX組合物高、中、低劑量組均可明顯延長豚鼠哮喘潛伏期(p＜0.05)；致敏性豚鼠的實驗結果見表3，顯示(3)與空白對照組比較，麥冬多糖組、細辛腦組均可顯著延長豚鼠過敏性哮喘潛伏期(p＜0.01)，賽庚啶組可極顯著延長豚鼠過敏性哮喘潛伏期(p＜0.001)，MX各劑量組均可極顯著延長豚鼠過敏性哮喘潛伏期(p＜0.001)，作用與賽庚啶組相似；(4)與麥冬多糖組或細辛腦組比較，MX組合物各劑量組均可明顯延長豚鼠過敏性哮喘潛伏期(p＜0.05)；結論與單用麥冬多糖或細辛腦相比，MX組合物注射液對正常豚鼠和致敏性豚鼠的哮喘潛伏期均能夠顯著延長，表明麥冬多糖和細辛腦配伍合用具有很好的協(xié)同作用。
實驗例3 MX組合物的免疫活性供試品與材料空白對照組0.9％生理鹽水注射液，市購；麥冬多糖組麥冬多糖注射液，規(guī)格2ml:50mg，自制；細辛腦組細辛腦注射液，規(guī)格2ml:8mg，北京雙鶴藥業(yè)股份有限公司；MX組合物組MX組合物注射液高、中、低三個劑量組，自制(制備方法參見實施例3處方1)；實驗動物分組昆明種幼鼠60只，雌雄兼用，體重11g～15g，隨機分為6組，分別為空白對照組，麥冬多糖組，細辛腦組，MX組合物高、中、低劑量組，每組10只。
實驗方法各實驗組幼鼠分別腹腔注射相應藥物，所有劑量均配置成0.3ml/只，對照組腹腔注射等量生理鹽水，給藥7d，每天1次。于末次給藥24h后，摘眼球放血處死，稱體重及胸腺、脾臟重量，計算胸腺或脾指數，胸腺或脾指數＝胸腺或脾重(mg)/體重(g)，結果見表4。
表4各組對小鼠免疫器官重量的影響(x±s，n＝10)
注*p＜0.05，**p＜0.01，與空白對照組比較；&p＜0.05，與麥冬多糖組比較；#p＜0.05，##p＜0.01，與細辛腦組比較。
實驗結果見表4。
(1)與空白對照組比較，麥冬多糖組、細辛腦組均可明顯增加幼鼠的胸腺和脾臟重量(p＜0.05)，MX各劑量組均可顯著增加幼鼠的胸腺和脾臟重量(p＜0.01)；(2)與麥冬多糖組比較，MX組合物各劑量組均可明顯增加幼鼠的胸腺和脾臟重量(p＜0.05)，與細辛腦組比較，MX組合物各劑量組均可顯著增加幼鼠的胸腺和脾臟重量(p＜0.01)；結論與單用麥冬多糖或細辛腦相比，MX組合物注射液的免疫作用明顯增強，表明麥冬多糖和細辛腦配伍合用具有很好的協(xié)同作用。
實驗例4 MX組合物對家兔痰液分泌的影響供試品與材料空白對照組0.9％生理鹽水注射液，市購；麥冬多糖組麥冬多糖注射液，規(guī)格2ml:50mg，自制；細辛腦組細辛腦注射液，規(guī)格2ml:8mg，北京雙鶴藥業(yè)股份有限公司；MX組合物組MX組合物注射液高、中、低三個劑量組，自制(制備方法參見實施例3處方1)。
實驗動物及分組家兔60只，隨機分為6組，每組10只，分別為空白對照組、麥冬多糖組、細辛腦組、MX組合物高、中、低三個劑量組。
實驗方法將家兔用烏拉坦耳緣靜脈麻醉，插上氣管導管，與一個恒定提供預熱(37℃)和恒溫(80％)呼吸空氣的裝置連接，在十字形氣管插管的下端連接一個固定好的刻度量筒，用于收集分泌物。為防止產生冷凝水，采用一個用棉花隔開的裝置，所有的動物均自由呼吸并保證其所需的呼吸空氣量。經過2小時的穩(wěn)定觀察，將實驗動物經腹腔注射給藥，給藥劑量見下表。給藥后立即連續(xù)收集3個小時分泌物，測定分泌量。計算出痰液分泌的變化率。變化率＝(各試驗組痰液量均值-生理鹽水組痰液量均值)/生理鹽水組痰液量均值×100％，統(tǒng)計分析所有數據用均數±標準差(x±s)表示，數據的統(tǒng)計分析用t檢驗。
表5MX組合物對家兔痰液分泌的影響(x±s，n＝10)
注*p＜0.05，**p＜0.01，與空白對照組相比；&p＜0.05，&&p＜0.01與麥冬多糖組相比；△p＜0.05，△△p＜0.01與細辛腦組相比。
實驗結果見表5。
實驗結果表明，各給藥組均能增加家兔呼吸道痰液分泌量，與空白對照組相比，麥冬多糖組、細辛腦組的分泌量變化率顯著(p＜0.05)，MX組合物低、中、高三個劑量組的分泌量變化率極其顯著(p＜0.01)；與麥冬多糖組或細辛腦組比較，MX組合物低劑量組的分泌量明顯增多(p＜0.05)，MX組合物高、中劑量組的分泌量顯著增多(p＜0.01)。
結論MX組合物各劑量組均有明顯的劑量依賴性的促痰液分泌作用，與單用麥冬多糖或細辛腦比較作用顯著增強，表明，麥冬多糖和細辛腦合用有協(xié)同增效作用。
實驗例5小鼠注射給藥急性毒性實驗(1)實驗方法供試品MX組合物注射液(自制，5ml麥冬多糖+細辛腦＝125mg+16mg)。
受試動物小鼠，每組雌雄各5只，雄性體重25～28g，雌性體重21～24g。
給藥途徑靜脈注射、腹腔注射。
觀察項目死亡數、一般狀態(tài)、體重、剖檢、半數致死量。
(2)實驗結果按照急性毒性實驗要求進行預試，腹腔注射及靜脈注射兩給藥途徑皆無法測出藥物的半數致死量，也未見明顯的毒性反應，故進行一日內最大給藥量實驗。給藥劑量尾靜脈注射0.3ml/10g，腹腔注射0.3ml/10g，一日2次。
死亡數未出現(xiàn)死亡。
一般狀態(tài)未見異常變化。
體重于給藥前1天、給藥日、給藥后1、3、7、14天測量；未見異常變化。
剖檢心、肝、肺、腎等組織未見異常變化。
(3)結論本實驗中未出現(xiàn)死亡，推測MX組合物注射液對雌雄小鼠靜脈和腹腔注射給藥的最大耐受量均為0.6ml/10g，相當于60kg體重人日最大用量30ml的120倍。表明本品低毒，安全性高。
實驗例6 MX組合物注射液穩(wěn)定性實驗供試品MX組合物注射液(自制，5ml麥冬多糖+細辛腦＝125mg+16mg)。
考察項目性狀、pH值、澄明度。
長期穩(wěn)定性實驗方法及結果將本品各組合物置溫度25℃±2℃、相對濕度60％±10％的條件下放置3個月、6個月、12個月，各項指標均無明顯變化，實驗結果表明本品組合物注射液長期放置基本穩(wěn)定。
具體實施方式
以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發(fā)明的上述內容作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發(fā)明上述內容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。以下實施例中各劑型的輔料可以用藥學上可接受的輔料替換，或者減少、增加。下列實施例中麥冬或麥冬多糖和細辛腦的組合物簡稱MX組合物，實施例2～8中所用的麥冬多糖均取自實施例1。
實施例1麥冬多糖的制備取干燥的麥冬塊根，乙醇回流提取三次，棄去醇提液，藥渣揮干溶劑后，加水煎煮三次，每次加水6倍量，提取時間分別為2小時、1小時、1小時，合并水提液，過濾，加入0.5％活性炭脫色2次，抽濾，濾液減壓濃縮至原體積的1/5，置冰箱中放置24小時以上，離心，過濾，濾液加乙醇至含醇量為80％，置冰箱中靜置過夜，濾過，濾渣用無水乙醇洗滌數次，揮干乙醇，加水加熱溶解，靜置過夜，離心去沉淀。上清液調pH至2.5～5，加入1％的胃蛋白酶或1％木瓜蛋白酶，35℃水解2小時，再煮沸5分鐘，靜置過夜，離心去沉淀。上清液加乙醇至含醇量為80％，過濾，沉淀用50℃的70％乙醇、丙酮洗滌數次，減壓干燥，即得。
麥冬多糖的鑒別對照品溶液的制備精密稱取D-葡萄糖、D-果糖對照品適量，加70％的乙醇定容至5ml，使D-葡萄糖的濃度為10mg/ml，D-果糖的濃度為20mg/ml。
供試品溶液的制備取麥冬多糖3mg，加5ml水溶解，加入D101大孔樹脂柱中凈化處理，用蒸餾水洗脫，收集水洗脫液20ml，水浴蒸干，用70％乙醇溶解定容至5ml。
將上述兩種溶液分別點于同一塊硅膠G-0.3mol/L NaH2PO4的3％CMC-Na板上，用正丁醇-丙酮-水(10∶10∶2.5)或正丁醇-甲醇-丙酮-水(10∶4∶8∶2.5)飽和30min，展開，取出，涼干后噴苯胺-鄰苯二甲酸-正丁醇試劑，于105℃烘10min。色譜中，在與對照品相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
麥冬多糖的含量測定標準曲線的制備精密稱取D-葡萄糖對照品(105℃干燥至恒重)約50mg，置100ml容量瓶中，加蒸餾水溶解并稀釋至刻度。
精密吸取上述溶液1.0、2.0、3.0、4.0和5.0ml，分別置于50ml容量瓶中，加水至刻度搖勻。精密吸取上述各濃度溶液各2.0ml，另精密吸取蒸餾水2ml作為空白對照，置具塞試管中，分別加入5％苯酚溶液1.0ml混勻，迅速加入濃硫酸5.0ml，搖勻后放置5min，置沸水浴中加熱15min，然后置冷水浴中冷卻30min，在波長490nm處測定吸收度，以濃度為橫坐標，吸收度為縱坐標，繪標準曲線。
供試品的制備精密稱取105℃干燥至恒重的麥冬多糖50mg，共3份，置小燒杯中加熱溶解，移入1000ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。
測定精密吸取上述3種供試品溶液各2ml，按標準曲線自“精密吸取上述各濃度溶液各2.0ml”之后方法操作，測定吸收度，帶入標準曲線中，讀數，即得。
按照上述方法制備三批麥冬多糖，多糖含量和得率見表6。從結果可以看出，通過本工藝得到的麥冬多糖的得率為1～1.5％，麥冬多糖的含量不低于80％。
表6麥冬提取物的含量測定結果和得率
實施例2 MX組合物粉針劑的制備1、處方處方1
麥冬多糖125g(相當于麥冬10kg)細辛腦 16g聚山梨酯80 45g甘露醇 500g山梨醇 50g無菌注射用水加至5000ml共制備 1000支處方2麥冬多糖75g(相當于麥冬6kg)細辛腦 90g聚山梨酯80 50g甘露醇 500g山梨醇 50g無菌注射用水加至5000ml共制備 1000支處方3麥冬多糖200g(相當于麥冬16kg)細辛腦 10g聚山梨酯80 100g甘露醇 500g山梨醇 50g無菌注射用水加至5000ml共制備 1000支2、具體步驟1)首先將配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，膠塞等進行無菌處理。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)取配液量60％的無菌注射用水，將麥冬多糖和甘露醇加入加熱攪拌溶解完全，取配液量20％的無菌注射用水加入，處方量的聚山梨酯80和山梨醇加熱攪拌溶解完全，再加入細辛腦攪拌溶解完全，兩溶液混合均勻，補加無菌注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經砂濾棒過濾脫炭。測定并調節(jié)溶液的pH值。
6)經0.22μm的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)分裝于抗生素玻璃瓶中，半壓塞。將樣品放入凍干機中冷凍干燥。預凍-40℃3小時，低溫真空干燥-40℃～0℃35小時，然后升溫至25℃真空干燥3小時。
9)凍干結束，壓塞，軋蓋。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例3 MX組合物水針劑的制備1、處方處方1麥冬多糖125g(相當于麥冬10kg)細辛腦 16g乙醇200ml注射用水加至5000ml共制備 1000支處方2麥冬多糖100g(相當于麥冬8kg)細辛腦 24g乙醇200ml注射用水加至5000ml共制備 1000支處方3麥冬多糖150g(相當于麥冬12kg)細辛腦 12g乙醇200ml注射用水加至5000ml共制備 1000支2、具體步驟1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)取配液量60％的注射用水，加入處方量的乙醇攪拌混勻，加入處方量的細辛腦和麥冬多糖攪拌溶解，補加注射用水至全量。
3)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
4)經砂濾棒過濾脫炭。測定并調節(jié)溶液的pH值。
5)經0.45μm的微孔濾膜精濾。
6)檢查溶液的澄明度，半成品檢驗。
7)將藥液灌裝、熔封于玻璃安瓿中。
8)100℃流通蒸汽滅菌30分鐘。
9)趁熱將樣品放入0.01％的亞甲藍溶液中檢漏。
10)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例4 MX組合物氯化鈉輸液的制備1、處方處方1麥冬多糖125g(相當于麥冬10kg)細辛腦 16g聚山梨酯80 100g氯化鈉 900g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶處方2麥冬多糖50g(相當于麥冬4kg)細辛腦 120g聚山梨酯80 100g氯化鈉 900g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶處方3麥冬多糖250g(相當于麥冬20kg)細辛腦 8g聚山梨酯80 100g氯化鈉 900g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶2、具體步驟1)前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)將聚山梨酯80用注射用水配成20％的溶液，將麥冬多糖和細辛腦加入加熱攪拌溶解完全，將氯化鈉用配液量30％的注射用水溶解完全。合并上述溶液，補加注射用水至全量。
3)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
4)經砂濾棒過濾脫炭。測定并調節(jié)溶液的pH值。
5)經0.45μm的微孔濾膜精濾。
6)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
7)灌裝于相應容積的輸液瓶中。
8)115℃熱壓滅菌30分鐘。
9)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例5 MX組合物葡萄糖輸液的制備1、處方處方1麥冬多糖125g(相當于麥冬10kg)細辛腦 16g聚山梨酯80 100g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶處方2麥冬多糖100g(相當于麥冬8kg)細辛腦 24g聚山梨酯80 100g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶處方3麥冬多糖300g(相當于麥冬24kg)細辛腦 4g聚山梨酯80 100g葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制備 1000瓶2、具體步驟1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)將聚山梨酯80用注射用水配成20％的溶液，將麥冬多糖和細辛腦加入加熱攪拌溶解完全，將葡萄糖用配液量30％的注射用水溶解完全。合并上述溶液，補加注射用水至全量。
3)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
4)經砂濾棒過濾脫炭。測定并調節(jié)溶液的pH值。
5)經0.45μm的微孔濾膜精濾。
6)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
7)灌裝于相應容積的輸液瓶中。
8)115℃熱壓滅菌30分鐘。
9)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例6 MX組合物片劑的制備1、處方處方1麥冬多糖125g(相當于麥冬10kg)細辛腦 16g預膠化淀粉 120.0g低取代羥丙基纖維素 20g微晶纖維素 60.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂2.0g羧甲淀粉鈉 10.0g共制備 1000片處方2麥冬多糖100g(相當于麥冬8kg)細辛腦 24g預膠化淀粉 120.0g低取代羥丙基纖維素 20g微晶纖維素 60.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂2.0g羧甲淀粉鈉 10.0g共制備 1000片處方3麥冬多糖150g(相當于麥冬12kg)細辛腦 12g預膠化淀粉 120.0g低取代羥丙基纖維素 20g微晶纖維素 60.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂2.0g羧甲淀粉鈉 10.0g共制備 1000片2、具體步驟1)將麥冬多糖和細辛腦粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將麥冬多糖、細辛腦、預膠化淀粉、低取代羥丙基纖維素、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗。
9)按照化驗確定的片重壓片。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例7 MX組合物膠囊劑的制備1、處方處方1麥冬多糖125g(相當于麥冬10kg)細辛腦 16g預膠化淀粉 100.0g微晶纖維素 40.0g低取代羥丙基纖維素 10g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂3.0g共制備 1000粒處方2麥冬多糖75g(相當于麥冬6kg)細辛腦 90g預膠化淀粉 100.0g微晶纖維素 40.0g低取代羥丙基纖維素 10g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂3.0g共制備 1000粒處方3麥冬多糖300g(相當于麥冬24kg)細辛腦 4g預膠化淀粉 100.0g微晶纖維素 40.0g低取代羥丙基纖維素 10g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂3.0g共制備 1000粒2、具體步驟1)將麥冬多糖和細辛腦粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將麥冬多糖、細辛腦、預膠化淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙基纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗。
9)按照化驗確定的裝量裝入膠囊。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例8 MX組合物顆粒劑的制備1、處方處方1麥冬多糖125g(相當于麥冬10kg)細辛腦 16g糖粉4000.0g固體桔子香精20g50％乙醇適量共制備 1000包處方2麥冬多糖50g(相當于麥冬4kg)細辛腦 120g糖粉4000.0g固體桔子香精20g50％乙醇適量共制備 1000包處方3麥冬多糖250g(相當于麥冬20kg)細辛腦 8g糖粉4000.0g固體桔子香精20g50％乙醇適量共制備 1000包2、具體步驟1)將蔗糖粉碎過100目篩備用。將麥冬多糖和細辛腦粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原料和輔料。
3)將麥冬多糖、細辛腦、固體桔子香精與糖粉以等量遞加的方法混合均勻，加入50％乙醇適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
4)過20目篩制顆粒。
5)顆粒在60℃的條件下烘干。
6)干顆粒過18目篩整粒。
7)篩除過粗或過細的顆粒。
8)取樣，半成品化驗顆粒中主藥的含量，確定裝量。
9)包裝，成品全檢，包裝入庫。
權利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物主要由下列重量份的原料藥制成麥冬2000～50000份、細辛腦1～300份。
2.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物主要由下列重量份的原料藥制成麥冬5000～20000份、細辛腦4～120份。
3.如權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物主要由下列重量份的原料藥制成麥冬10000份、細辛腦16份。
4.如權利要求1～3所述的任一藥物組合物的制備方法，其特征在于，麥冬可以用適宜的溶劑和方法提取加工得到麥冬提取物，麥冬提取物再與細辛腦以及藥學上可接受的輔料混合制成任一制劑。
5.如權利要求4所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于，所得麥冬提取物的主要有效成分為麥冬多糖，其有效成分的含量不低于40％。
6.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物還可以由下列原料藥制成麥冬多糖和細辛腦，其重量份數為麥冬多糖20～750份、細辛腦1～300份。
7.如權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物的原料藥的重量份數為麥冬多糖50～300份、細辛腦4～120份。
8.如權利要求7所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物的原料藥的重量份數麥冬多糖100～150份、細辛腦16份。
9.如權利要求6～8所述的任一藥物組合物，其特征在于，所述的麥冬多糖中多糖的含量不低于40％。
10.如權利要求1、2、3、6、7、8所述的任一藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物可以與藥學上可接受的輔料混合制成任何一種臨床上或藥學上可接受的劑型。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，公開了一種新的用于治療呼吸系統(tǒng)疾病的藥物組合物及其制備方法和用途，該藥物組合物主要由麥冬2000～50000份或麥冬多糖20～750份、細辛腦1～300份與藥學上可接受的輔料制成各種藥學上可接受的劑型，優(yōu)選注射劑或口服制劑；對于治療肺炎、支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病伴咳嗽、咯痰、喘息等疾病，具有良好的療效，產生了意想不到的效果，具有廣泛的應用前景。
文檔編號A61K31/09GK101062262SQ20061004385
公開日2007年10月31日 申請日期2006年4月24日 優(yōu)先權日2006年4月24日
發(fā)明者黃振華 申請人:黃振華