專利名稱：一種新復(fù)方大青葉制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物制劑的質(zhì)量控制方法，具體是涉及新復(fù)方大青葉制劑的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
新復(fù)方大青葉片是一種已經(jīng)上市的中西藥復(fù)方制劑，具有清瘟，消炎，解熱作用。但因其生產(chǎn)工藝限定，本品為全浸膏制片，片劑硬度大，常出現(xiàn)崩解不符合國家標(biāo)準(zhǔn)的現(xiàn)象，限制了藥品療效的發(fā)揮。同時由于需要壓片、包衣，制粒、壓片、包衣又要加入輔料做黏合劑、填充劑、崩解劑、遮蓋劑，增加了工藝過程，浪費能源，增加了成本。另一方面，現(xiàn)有新復(fù)方大青葉片存在質(zhì)量控制方法落后，產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的缺點?，F(xiàn)有質(zhì)量控制方法中并沒有對其成分進行鑒別，或?qū)ζ涑煞诌M行含量測定的內(nèi)容。故現(xiàn)有質(zhì)量控制方法不能有效控制新復(fù)方大青葉片的質(zhì)量，從而將影響產(chǎn)品的生產(chǎn)和保證質(zhì)量。
為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們建立了新復(fù)方大青葉制劑的新的質(zhì)量控制方法，該方法采用薄層色譜法對其中的成分進行鑒別，采用高效液相色譜法對其中的成分進行含量測定。到目前為止沒有報道對該產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行全面研究，僅有個別研究者對其中的綠原酸、對乙酰氨基酚作過單獨研究，象我們所采用的高效液相聯(lián)動同時測定三個活性成分的報道更沒有。該質(zhì)量控制方法精密度、靈敏度、穩(wěn)定性均好，而且方法更簡單，可以最大程度的確保產(chǎn)品質(zhì)量的“安全、均一、穩(wěn)定、有效、可控”。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種服用方便、療效更好、質(zhì)量可控的新復(fù)方大青葉膠囊制劑的制備方法和質(zhì)量控制方法。
一、該品種膠囊比片劑的優(yōu)點有1、減少生產(chǎn)壓片、包衣工序，節(jié)省工藝時間，減少動力消耗；2、減少壓片所增加的崩解劑等輔料，節(jié)約資源；3、減少片劑包衣所需大量輔料，節(jié)約資源，減少患者對無效輔料的攝入；4、縮短崩解過程，利于藥物的溶解吸收。
試驗6、抗代謝藥物和細胞毒藥物(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗對象，將2×105個前列腺腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為陰性對照(空白)、單藥治療組(抗代謝藥物或細胞毒藥物)和聯(lián)合治療組(抗代謝藥物和細胞毒藥物)。藥物經(jīng)瘤內(nèi)注射。劑量均為5mg/kg。治療后第10天測量腫瘤體積大小，用腫瘤生長抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見表4)。
表4

以上結(jié)果表明，所用抗代謝藥物(卡培他濱)及細胞毒藥物(福莫司汀、洛莫司汀、雌莫司汀、薩莫司汀)在該濃度單獨應(yīng)用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
以上新復(fù)方大青葉配方組成是按重量份作為配比的，在生產(chǎn)時可按照相應(yīng)比例增大或減少，最多不超過100％。
大規(guī)模生產(chǎn)可以以公斤為單位，或以噸為單位。以上組成可制成藥物制劑1000劑，所述1000劑指，制成的成品藥物制劑，如制成膠囊制劑1000粒，片劑1000片，顆粒劑1000g等，本發(fā)明的新復(fù)方大青葉制劑，在制成制劑時根據(jù)需要可以加入藥物可接受的載體，這些載體可以是任何適合制成本發(fā)明制劑的載體，如淀粉、蔗糖、乳糖、纖維素及其衍生物、滑石粉、鈦白粉、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、乙醇、β-環(huán)糊精等。
本發(fā)明的新復(fù)方大青葉制劑，特別是膠囊制劑，其功能主治用法用量如下功能主治清瘟，消炎，解熱。用于傷風(fēng)感冒，發(fā)熱頭痛，鼻流清涕，骨節(jié)酸痛。
用法用量口服，一次3-4粒，一日2次。
本發(fā)明提供的是針對以上新復(fù)方大青葉制劑的質(zhì)量控制方法，特別是膠囊制劑，為控制新復(fù)方大青葉制劑的質(zhì)量。針對的其特點及本發(fā)明配方，我們提供了如下質(zhì)量控制方法本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法包括以下步驟內(nèi)容物的鑒別，對含有的成分進行含量測定，因此，本發(fā)明的質(zhì)量控制方法主要的步驟是內(nèi)容物的鑒別，步驟是鑒別(1)大青葉的鑒別取本品內(nèi)容物約5g，加水80ml水浴溫浸(80℃)30分鐘使溶解，靜置放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯萃取3次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，用1％氫氧化鈉溶液洗滌3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加0.5ml乙酸乙酯使溶解，作為供試品溶液。另取靛玉紅對照品適量，加乙酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液5～10μ1，對照品溶液5μl，分別點于同一以羧甲基淀粉鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(5∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置，顯相同顏色的淡紫色斑點。
(2)大黃的鑒別取本品內(nèi)容物約1.5g，加甲醇30ml超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，再加鹽酸1ml，置水浴(80℃)中溫浸30min，立即冷卻，用乙酸乙酯振搖提取兩次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。取大黃對照藥材0.5g，加甲醇20ml，照供試品制備方法制備對照藥材溶液。另取大黃酚對照品，加甲醇制成1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液及對照品溶液各2μl、供試品溶液5μl，分別點于同一以羧甲基淀粉鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。
(3)維生素C的鑒別取本品內(nèi)容物3g，加0.1mol/l鹽酸溶液50ml，振搖30分鐘，濾過，取續(xù)濾液10ml，加入鹽酸苯肼0.1g，60℃水浴溫浸1小時(時時振搖)，放冷，濾過，作為供試品溶液。另取維生素C對照品50mg，加0.1mol/l鹽酸溶液10ml與鹽酸苯肼0.1g，同法制得，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的亮黃色斑點。
(4)羌活的鑒別取本品內(nèi)容物3g，用乙酸乙酯提取4次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。同法制成陰性供試品溶液。另取羌活對照藥材粉末1.0g，加乙醇30ml，浸漬1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml溶解作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(10∶2∶3)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
對含有的成分進行含量測定，步驟是含量測定1、綠原酸 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)為流動相；檢測波長327nm。理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不得低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取綠原酸對照品適量，置棕色量瓶中，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液。
供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.3g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每克含山銀花和拳參按綠原酸(C16H18O9)計不得少于3.0mg。
2、對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(50∶50)為流動相；檢測波長215nm。理論板數(shù)按對乙酰氨基酚峰、咖啡因峰峰及異戊巴比妥峰計算均應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備精密稱取對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥對照品適量，加50％甲醇制成每1ml含對乙酰氨基酚500μg和含咖啡因與異戊巴比妥各50μg的對照品混合溶液，即得。
供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥均應(yīng)為標(biāo)示量的85％～115％。
對含有的成分進行含量測定，也可以采用以下步驟含量測定1、綠原酸 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)為流動相；檢測波長327nm。理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不得低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取綠原酸對照品適量，置棕色量瓶中，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液。
供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.3g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每克含山銀花和拳參按綠原酸(C16H18O9)計不得少于3.0mg。
咖啡因與異戊巴比妥照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(50∶50)為流動相；檢測波長215nm。理論板數(shù)按咖啡因峰與異戊巴比妥峰計算均應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備精密稱取咖啡因與異戊巴比妥對照品適量，加50％甲醇溶液制成每1ml各含50μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.1g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇溶液50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含咖啡因與異戊巴比妥均應(yīng)為標(biāo)示量的85％～115％。
維生素C與對乙酰氨基酚照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4磷酸溶液(13∶87)為流動相；檢測波長242nm。理論板數(shù)按維生素C峰及對乙酰氨基酚峰計算均應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備精密稱取維生素C與對乙酰氨基酚對照品適量，加流動相制成每1ml含維生素C30μg與含對乙酰氨基酚250μg的混合溶液，即得。
供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加流動相50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用流動相補足減失重量，搖勻，濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含維生素C應(yīng)不低于標(biāo)示量的70％，含對乙酰氨基酚為標(biāo)示量的85％～115％。
本發(fā)明的方法是經(jīng)過篩選得到的，篩選過程說明如下鑒別(1)大青葉的TLC鑒別試驗曾參照《中國藥典一部》2000年版第615頁“感冒退熱顆?！敝写笄嗳~的鑒別，以靛玉紅為對照，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在樣品中靛玉紅斑點處有一黃色斑點干擾嚴(yán)重，根據(jù)該產(chǎn)品的藥物組成，選用1％氫氧化鈉溶液對萃取液進行洗滌處理后制備樣品，結(jié)果色譜中黃色干擾消失，色譜清晰。經(jīng)多批樣品試驗表明，該法穩(wěn)定可行，重復(fù)性良好，可作為方中大青葉的鑒別。
(2)大黃的TLC鑒別參照《中國藥典一部》2000年版第18頁“大黃”項下的鑒別，以大黃藥材與大黃酚為對照，照薄層色譜法(中國藥典2005版附錄VIB)試驗，吸取對照藥材及對照品溶液2μl，供試品溶液5μl，分別點于同一以羧甲基淀粉鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜及對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。
(3)維生素C的薄層鑒別試驗曾參照藥典方法，用二氯靛酚鈉試液對維生素C進行理化鑒別，結(jié)果陰性有干擾。通過篩選對維生素C進行了薄層鑒別，照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，將供試品與對照品分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的亮黃色斑點。經(jīng)多批樣品試驗表明，該法穩(wěn)定可行，重復(fù)性良好，可作為方中維生素C的鑒別。
(4)羌活的TLC鑒別試驗曾參照治感佳膠囊中羌活與穿心蓮水溶性成分的薄層鑒別方法，用正丁醇萃取，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇(4∶5∶2)為展開劑進行鑒別，結(jié)果供試與對照中對應(yīng)色譜斑點不明顯。后來用乙酸乙酯提取，以乙酸乙酯-甲醇-水(10∶2∶3)為展開劑，供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
含量測定一、山銀花與拳參中綠原酸的含量測定綠原酸是山銀花的主要成分，也是新復(fù)方大青葉片抗菌消炎的主要成分，建立其含量測定很有必要。但復(fù)方大青葉浸膏方中的拳參也同樣含有少量綠原酸，為此，采用高效液相色譜法同時測定山銀花和拳參中綠原酸的含量。參照中國藥典2005年版一部第21頁山銀花項下的含量測定方法及有關(guān)文獻，確定用高效液相色譜法測定山銀花和拳參中綠原酸的含量，方法簡單，準(zhǔn)確性高。
1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)為流動相；檢測波長327nm，流速l/min。理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不得低于2000。
試驗中曾篩選的流動相有甲醇-0.4％磷酸溶液(15∶85)結(jié)果TR＝45min，對照品及樣品峰形良好，但保留時間太長；乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)結(jié)果TR＝10min，對照品及樣品評價良好。
故選擇流動相為乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)。
2線性范圍考察取綠原酸對照品適量，精密稱定，加50％甲醇制成每1ml含37μg的溶液，分別精密吸取20μl、15μl、10μl、8μl、5μl進樣，測定其峰面積。結(jié)果見表15-1。以峰面積(Y)對進樣量(X)進行回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。Y＝57.659X-0.1899(r＝0.9998)。以上結(jié)果表明在0.185μg～0.740μg范圍內(nèi)，綠原酸峰面積值與進樣量有良好的線性關(guān)系。
表1綠原酸對照品測定結(jié)果

3精密度試驗吸取對照品溶液(20μg/ml)和同一份樣品溶液分別重復(fù)進樣6次，每次各20μl，分別計算兩者峰面積的RSD，結(jié)果見表2。
表2精密度試驗結(jié)果

結(jié)果表明對照品峰面積RSD為0.25％，供試品峰面積RSD為0.56％，精密度良好。
4重現(xiàn)性試驗取041001批的樣品6份，分別按供試品制備項下制備、測定，結(jié)果見表3。
表3重現(xiàn)性試驗結(jié)果

結(jié)果表明6份供試品的平均含量為4.23mg/g，RSD為0.93％，試驗方法的重現(xiàn)性良好。
5回收率試驗(采用加樣回收法)精密稱取041001批(已知含量為4.21mg/g)細粉0.15g，共稱取5份，分別加入相同的綠原酸對照品，測定總含量，計算回收率。回收率＝(總量-樣品中量)/加入純品量。結(jié)果見表4。
表4回收率試驗結(jié)果

結(jié)果表明平均回收率為97.5％，RSD為0.76％，加樣回收率良好。
6樣品測定取十批樣品，按擬訂方法測定，綠原酸含量見表5。
表5新復(fù)方大青葉膠囊中綠原酸含量測定結(jié)果表

根據(jù)上述試驗結(jié)果，以上十批樣品含量最低的為041103批，含量為3.81mg/g，考慮到藥材的來源，以及制劑生產(chǎn)、貯藏等因素的影響，暫定本品綠原酸含量為不得少于3.0mg/g。
二、咖啡因與異戊巴比妥含量的測定該方是中西藥復(fù)方制劑，建立西藥的定量標(biāo)準(zhǔn)非常必要。我們參考有關(guān)文獻，通過篩選色譜條件、樣品進行純化處理方法，建立了咖啡因、異戊巴比妥的聯(lián)測方法。
1、色譜條件的選擇用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；檢測波長215nm。理論板數(shù)按咖啡因峰與異戊巴比妥峰計算均應(yīng)不低于3000。流速1ml/min，曾試用以下流動相及波長甲醇-水(75∶25)，結(jié)果咖啡因保留時間為3.17min，異戊巴比妥保留時間為3.95min，對照品及樣品峰均拖尾。
甲醇-水(50∶50)，結(jié)果咖啡因保留時間為4.45min，異戊巴比妥保留時間為15.26min，樣品和對照品在三個波長下，峰形均好，各波長下樣品中標(biāo)示量相差不大，在215nm下咖啡因與異戊巴比妥均有較大吸收。
故將流動相確定為甲醇∶水(50∶50)，檢測波長確定為215nm。
2、線性范圍考察取咖啡因與異戊巴比妥對照品適量，精密稱定，加50％甲醇制成每1ml含咖啡因102μg和含異戊巴比妥97μg的混合溶液，分別精密吸取5μl、8μl、10μl、15μl、20μl進樣，測定其峰面積。結(jié)果見表6、7。以峰面積(Y)對進樣量(X)進行回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程?？Х纫験＝72.828X+3.1176(r＝0.9997)。以上結(jié)果表明咖啡因在0.510μg～2.040μg范圍內(nèi)，咖啡因峰面積值與進樣量有良好的線性關(guān)系；異戊巴比妥Y＝33.92X-0.7237(r＝0.9999)在0.458μg～1.940μg范圍內(nèi)，異戊巴比妥峰面積值與進樣量有良好的線性關(guān)系。
表6咖啡因?qū)φ掌窚y定結(jié)果

表7異戊巴比妥對照品測定結(jié)果

3、精密度試驗吸取對照品溶液和同一份樣品溶液分別重復(fù)進樣6次，每次各20μl，分別計算兩者峰面積的RSD，結(jié)果見表8及9。
表8咖啡因精密度試驗結(jié)果

結(jié)果表明對照品峰面積RSD為0.11％，供試品峰面積RSD為0.26％，精密度良好。
表9異戊巴比妥精密度試驗結(jié)果

結(jié)果表明對照品峰面積RSD為0.37％，供試品峰面積RSD為0.26％，精密度良好。
4、重現(xiàn)性試驗取050105批的樣品6份，分別按供試品制備項下制備、測定結(jié)果，咖啡因與異戊巴比妥含量見表10及11。
表10咖啡因重現(xiàn)性試驗結(jié)果

結(jié)果表明6份供試品的咖啡因平均含量為25.8mg/g，RSD為0.20％，試驗方法的重現(xiàn)性良好。
表11異戊巴比妥重現(xiàn)性試驗結(jié)果

結(jié)果表明6份供試品的異戊巴比妥平均含量為22.2mg/g，RSD為0.23％，試驗方法的重現(xiàn)性良好。
5、回收率試驗(采用加樣回收法)精密稱取041002批(已知咖啡因含量為25.7mg/g，異戊巴比妥含量為22.2mg/g)新復(fù)方大青葉膠囊細粉0.05g，共稱取5份，分別加入相同的咖啡因及異戊巴比妥對照品，測定總含量，計算回收率?；厥章剩?總量-樣品中量)/加入純品量。結(jié)果見表12及13。
表12咖啡因回收率試驗結(jié)果

結(jié)果表明平均回收率為99％，RSD為0.65％，加樣回收率良好。
表13異戊巴比妥回收率試驗結(jié)果

結(jié)果表明平均回收率為100.6％，RSD為2.1％，加樣回收率良好6、樣品測定取十批樣品，按擬訂方法測定，咖啡因和異戊巴比妥含量見表14和表15。
表14十批樣品咖啡因含量測定結(jié)果表


表15十批樣品異戊巴比妥含量測定結(jié)果表

根據(jù)上述試驗結(jié)果，以上十批樣品咖啡因含量最低的為041103批，含量為92.8％，異戊巴比妥含量最低的為041103批，含量為85.3％。為保證制劑的安全有效，暫定咖啡因與異戊巴比妥含量為標(biāo)示量的85％～115％。
三、對乙酰氨基酚、咖啡因、異戊巴比妥含量的測定因為該產(chǎn)品中有四味西藥，試驗中我們發(fā)現(xiàn)，還可用同一方法同時測定三個成分的含量，這樣即可減少測定程序，節(jié)約資源和時間，使方法更簡單。因此我們對色譜條件、樣品的處理條件進行篩選，建立了可行的方法。
1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(50∶50)為流動相；檢測波長215nm。流速1ml/min；理論板數(shù)按對乙酰氨基酚峰、咖啡因峰峰及異戊巴比妥峰計算均應(yīng)不低于3000。
曾試用以下流動相及波長甲醇-水(25∶75)結(jié)果對乙酰氨基酚保留時間為5.9min，在波長215nm、218nm、248nm、257nm下，對照與樣品圖譜評價良好。
咖啡因保留時間為15.7min，在波長215nm與218nm下，對照與樣品圖譜評價良好；在248nm與257nm下，對照與樣品評價一般。
異戊巴比妥對照及樣品在運行63min后，仍未見圖譜出現(xiàn)。該方案不可行。
甲醇-水(50∶50)結(jié)果對乙酰氨基酚保留時間為3.1min，在波長215nm與218nm下，對照與樣品圖譜評價良好；在248nm與257nm下，由于樣品濃度過大而出現(xiàn)色譜柱過載，圖譜評價不好；咖啡因保留時間為4.2min，在波長215nm與218nm下，圖譜評價良好；在248nm與257nm下，圖譜評價一般。
異戊巴比妥保留時間為14.1min，在波長215nm與218nm下，對照與樣品圖譜評價良好；在248nm與257nm下，對照與樣品均無吸收。
從試驗可知，以甲醇-水(50∶50)為流動相時，樣品和對照品在215nm與218nm波長下，圖譜評價良好，在215nm下咖啡因與異戊巴比妥均有較大吸收，故將流動相確定為甲醇∶水(50∶50)，檢測波長確定為215nm。
2、線性范圍考察取對乙酰氨基酚、咖啡因、異戊巴比妥對照品適量，精密稱定，加50％甲醇制成每1ml含對乙酰氨基酚779μg，含咖啡因82μg，含異戊巴比妥75μg的混合對照品溶液，分別精密吸取20μl、15μl、10μl、8μl、5μl進樣，測定其峰面積。以峰面積(y)對進樣量(x)進行回歸，得對乙酰氨基酚標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y＝24.152x+0.9007(r＝0.9998)，得咖啡因標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y＝67.028x-0.2375(r＝0.9999)，得異戊巴比妥標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y＝32.14x-0.3509(r＝0.9998)。以上結(jié)果表明對乙酰氨基酚在3.895μg～15.580μg范圍內(nèi)，咖啡因在0.410μg～1.640μg范圍內(nèi)，異戊巴比妥在0.375μg～1.500μg范圍內(nèi)，峰面積值與進樣量有良好的線性關(guān)系。結(jié)果見下表。
表16對乙酰氨基酚標(biāo)準(zhǔn)曲線測定結(jié)果

表17咖啡因標(biāo)準(zhǔn)曲線測定結(jié)果

2實驗結(jié)果益腦膠囊對記憶獲得障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響(跳臺法)表1 益腦膠囊對記憶獲得障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響(X±SD)

注與模型對照組比較*P＜0.05 **P＜0.01益腦膠囊對小鼠腦膽堿脂酶活性的影響表2 益腦膠囊對小鼠腦膽堿脂酶活性的影響(X±SD)

注與模型對照組比較*P＜0.05 **P＜0.01益腦膠囊對方向辨別障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響(水迷路法)表3 益腦膠囊對辨別障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響(X±SD)

注與模型對照組比較*P＜0.05 **P＜0.01

結(jié)果表明對照品峰面積RSD為0.25％，供試品峰面積RSD為0.22％，精密度良好。
4重現(xiàn)性試驗取041002批的樣品6份，分別按供試品制備項下制備、測定結(jié)果，對乙酰氨基酚、咖啡因、異戊巴比妥含量見下表。
表22對乙酰氨基酚重現(xiàn)性試驗結(jié)果

結(jié)果表明6份供試品的對乙酰氨基酚平均含量為227.5mg/g，RSD為0.30％，試驗方法的重現(xiàn)性良好。
表23咖啡因重現(xiàn)性試驗結(jié)果


結(jié)果表明6份供試品的咖啡因平均含量為24.6mg/g，RSD為1.05％，試驗方法的重現(xiàn)性良好。
表24異戊巴比妥重現(xiàn)性試驗結(jié)果

結(jié)果表明6份供試品的異勿巴比妥平均含量為24.3mg/g，RSD為1.20％，試驗方法的重現(xiàn)性良好。
5回收率試驗(采用加樣回收法)精密稱取041002批新復(fù)方大青葉膠囊細粉0.05g，共稱取5份，分別加入相同的對照品，測定總含量，計算回收率?；厥章剩?總量-樣品中量)/加入純品量。結(jié)果見下表。
表25對乙酰氨基酚回收率試驗結(jié)果

結(jié)果表明平均回收率為98.6％，RSD為0.38％，加樣回收率良好。
表26回收率試驗結(jié)果


結(jié)果表明平均回收率為98.2％，RSD為0.53％，加樣回收率良好。
表27回收率試驗結(jié)果

結(jié)果表明平均回收率為99.1％，RSD為0.58％，加樣回收率良好。
6樣品測定取十批樣品，按擬定方法測定，測定結(jié)果見下表。
表28十批樣品對乙酰氨基酚含量測定結(jié)果表

表29十批樣品咖啡因含量測定結(jié)果表


表30十批樣品異戊巴比妥含量測定結(jié)果表

根據(jù)上述試驗結(jié)果，以上十批樣品對乙酰氨基酚含量最低的為041106批，含量為91.7％；咖啡因含量最低的為041106批，含量為96.6％，異戊巴比妥含量最低的為041106批，含量為96.9％。為保證制劑的安全有效，同時考慮到生產(chǎn)等各方面的影響，暫定對乙酰氨基酚、咖啡因、異戊巴比妥含量均為標(biāo)示量的85％～115％。
以上本發(fā)明的質(zhì)量控制方法中所述本品，是指依本發(fā)明工藝制備的新復(fù)方大青葉膠囊，在對其他劑型進行測定的時候，指相應(yīng)的其他劑型。
具體實施例方式以下通過實施例進一步說明本發(fā)明，但不作為對本發(fā)明的限制。
實施例1新復(fù)方大青葉膠囊劑的質(zhì)量控制，包括以下步驟內(nèi)容物的鑒別，步驟是鑒別(1)大青葉的鑒別取本品內(nèi)容物約5g，加水80ml水浴溫浸(80℃)30分鐘使溶解，靜置放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯萃取3次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，用1％氫氧化鈉溶液洗滌3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加0.5ml乙酸乙酯使溶解，作為供試品溶液。另取靛玉紅對照品適量，加乙酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液5～10μl，對照品溶液5μl，分別點于同一以羧甲基淀粉鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(5∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置，顯相同顏色的淡紫色斑點。
(2)大黃的鑒別取本品內(nèi)容物約1.5g，加甲醇30ml超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，再加鹽酸1ml，置水浴(80℃)中溫浸30min，立即冷卻，用乙酸乙酯振搖提取兩次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。取大黃對照藥材0.5g，加甲醇20ml，照供試品制備方法制備對照藥材溶液。另取大黃酚對照品，加甲醇制成1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液及對照品溶液各2μl、供試品溶液5μl，分別點于同一以羧甲基淀粉鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。
(3)維生素C的鑒別取本品內(nèi)容物3g，加0.1mol/l鹽酸溶液50ml，振搖30分鐘，濾過，取續(xù)濾液10ml，加入鹽酸苯肼0.1g，60℃水浴溫浸1小時(時時振搖)，放冷，濾過，作為供試品溶液。另取維生素C對照品50mg，加0.1mol/l鹽酸溶液10ml與鹽酸苯肼0.1g，同法制得，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的亮黃色斑點。
(4)羌活的鑒別取本品內(nèi)容物3g，用乙酸乙酯提取4次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。同法制成陰性供試品溶液。另取羌活對照藥材粉末1.0g，加乙醇30ml，浸漬1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml溶解作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(10∶2∶3)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
對含有的成分進行含量測定，步驟是含量測定1、綠原酸 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)為流動相；檢測波長327nm。理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不得低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取綠原酸對照品適量，置棕色量瓶中，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液。
供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.3g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每克含山銀花和拳參按綠原酸(C16H18O9)計不得少于3.0mg。
2、對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(50∶50)為流動相；檢測波長215nm。理論板數(shù)按對乙酰氨基酚峰、咖啡因峰峰及異戊巴比妥峰計算均應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備精密稱取對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥對照品適量，加50％甲醇制成每1ml含對乙酰氨基酚500μg和含咖啡因與異戊巴比妥各50μg的對照品混合溶液，即得。
供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥均應(yīng)為標(biāo)示量的85％～115％。
實施例2，新復(fù)方大青葉膠囊的另一種含量測定方法如下對含有的成分進行含量測定，也可以采用以下步驟含量測定1、綠原酸照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)為流動相；檢測波長327nm。理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不得低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取綠原酸對照品適量，置棕色量瓶中，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液。
供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.3g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每克含山銀花和拳參按綠原酸(C16H18O9)計不得少于3.0mg。
咖啡因與異戊巴比妥照高效液相色譜法(中國藥典2005一部附錄VID)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(50∶50)為流動相；檢測波長215nm。理論板數(shù)按咖啡因峰與異戊巴比妥峰計算均應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備精密稱取咖啡因與異戊巴比妥對照品適量，加50％甲醇溶液制成每1ml各含50μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.1g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇溶液50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μ1，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含咖啡因與異戊巴比妥均應(yīng)為標(biāo)示量的85％～115％。
維生素C與對乙酰氨基酚 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4磷酸溶液(13∶87)為流動相；檢測波長242nm。理論板數(shù)按維生素C峰及對乙酰氨基酚峰計算均應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備精密稱取維生素C與對乙酰氨基酚對照品適量，加流動相制成每1ml含維生素C30μg與含對乙酰氨基酚250μg的混合溶液，即得。供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加流動相50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用流動相補足減失重量，搖勻，濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μ1，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含維生素C應(yīng)不低于標(biāo)示量的70％，含對乙酰氨基酚為標(biāo)示量的85％～115％。
實施例3，新復(fù)方大青葉片劑的質(zhì)量控制，方法同實施例1，將檢測對象膠囊劑改為片劑，檢測方法不變。
實施例4，新復(fù)方大青葉片劑的質(zhì)量控制，方法同實施例2，將檢測對象膠囊劑改為片劑，檢測方法不變。
實施例5，新復(fù)方大青葉顆粒劑的質(zhì)量控制，方法同實施例1，將檢測對象膠囊劑改為顆粒劑，檢測方法不變。
權(quán)利要求
1.一種新復(fù)方大青葉制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于，包括內(nèi)容物的鑒別，對含有的成分進行含量測定的步驟。
2.權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述新復(fù)方大青葉制劑是口服制劑。
3.權(quán)利要求2的方法，其特征在于，所述口服制劑是膠囊劑、顆粒劑或片劑。
4.權(quán)利要求2的方法，其特征在于，所述口服制劑是膠囊劑。
5.權(quán)利要求4的方法，其特征在于，所述方法步驟如下內(nèi)容物的鑒別，步驟是鑒別(1)大青葉的鑒別取本品內(nèi)容物約5g，加水80ml水浴溫浸(80℃)30分鐘使溶解，靜置放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯萃取3次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，用1％氫氧化鈉溶液洗滌3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加0.5ml乙酸乙酯使溶解，作為供試品溶液；另取靛玉紅對照品適量，加乙酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液5~10μl，對照品溶液5μl，分別點于同一以羧甲基淀粉鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(5∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置，顯相同顏色的淡紫色斑點；(2)大黃的鑒別取本品內(nèi)容物約1.5g，加甲醇30ml超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，再加鹽酸1ml，置水浴(80℃)中溫浸30min，立即冷卻，用乙酸乙酯振搖提取兩次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；取大黃對照藥材0.5g，加甲醇20ml，照供試品制備方法制備對照藥材溶液；另取大黃酚對照品，加甲醇制成1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液及對照品溶液各2μl、供試品溶液5μl，分別點于同一以羧甲基淀粉鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點；(3)維生素C的鑒別取本品內(nèi)容物3g，加0.1mol/l鹽酸溶液50ml，振搖30分鐘，濾過，取續(xù)濾液10ml，加入鹽酸苯肼0.1g，60℃水浴溫浸1小時(時時振搖)，放冷，濾過，作為供試品溶液；另取維生素C對照品50mg，加0.1mol/l鹽酸溶液10ml與鹽酸苯肼0.1g，同法制得，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的亮黃色斑點；(4)羌活的鑒別取本品內(nèi)容物3g，用乙酸乙酯提取4次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；同法制成陰性供試品溶液；另取羌活對照藥材粉末1.0g，加乙醇30ml，浸漬1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml溶解作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(10∶2∶3)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；
6.權(quán)利要求4的方法，其特征在于，所述方法步驟如下對含有的成分進行含量測定，步驟是含量測定1、綠原酸 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)為流動相；檢測波長327nm。理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不得低于2000。對照品溶液的制備精密稱取綠原酸對照品適量，置棕色量瓶中，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液。供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.3g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每克含山銀花和拳參按綠原酸(C16H1809)計不得少于3.0mg。2、對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(50∶50)為流動相；檢測波長215nm。理論板數(shù)按對乙酰氨基酚峰、咖啡因峰峰及異戊巴比妥峰計算均應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備精密稱取對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥對照品適量，加50％甲醇制成每1ml含對乙酰氨基酚500μg和含咖啡因與異戊巴比妥各50μg的對照品混合溶液，即得。供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品含對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥均應(yīng)為標(biāo)示量的85％～115％。
7.權(quán)利要求4的方法，其特征在于，所述方法步驟如下對含有的成分進行含量測定，步驟是含量測定1、綠原酸 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)為流動相；檢測波長327nm；理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不得低于2000；對照品溶液的制備精密稱取綠原酸對照品適量，置棕色量瓶中，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液；供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.3g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每克含山銀花和拳參按綠原酸(C16H1809)計不得少于3.0mg；咖啡因與異戊巴比妥照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(50∶50)為流動相；檢測波長215nm；理論板數(shù)按咖啡因峰與異戊巴比妥峰計算均應(yīng)不低于3000；對照品溶液的制備精密稱取咖啡因與異戊巴比妥對照品適量，加50％甲醇溶液制成每1ml各含50μg的溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.1g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇溶液50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品含咖啡因與異戊巴比妥均應(yīng)為標(biāo)示量的85％～115％。維生素C與對乙酰氨基酚 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4磷酸溶液(13∶87)為流動相；檢測波長242nm；理論板數(shù)按維生素C峰及對乙酰氨基酚峰計算均應(yīng)不低于3000；對照品溶液的制備精密稱取維生素C與對乙酰氨基酚對照品適量，加流動相制成每1ml含維生素C30μg與含對乙酰氨基酚250μg的混合溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加流動相50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用流動相補足減失重量，搖勻，濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品含維生素C應(yīng)不低于標(biāo)示量的70％，含對乙酰氨基酚為標(biāo)示量的85％～115％。
8.權(quán)利要求4的方法，其特征在于，所述方法步驟如下內(nèi)容物的鑒別，步驟是鑒別(1)大青葉的鑒別取本品內(nèi)容物約5g，加水80ml水浴溫浸(80℃)30分鐘使溶解，靜置放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯萃取3次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，用1％氫氧化鈉溶液洗滌3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加0.5ml乙酸乙酯使溶解，作為供試品溶液；另取靛玉紅對照品適量，加乙酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液5~10μl，對照品溶液5μl，分別點于同一以羧甲基淀粉鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(5∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置，顯相同顏色的淡紫色斑點；(2)大黃的鑒別取本品內(nèi)容物約1.5g，加甲醇30ml超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，再加鹽酸1ml，置水浴(80℃)中溫浸30min，立即冷卻，用乙酸乙酯振搖提取兩次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；取大黃對照藥材0.5g，加甲醇20ml，照供試品制備方法制備對照藥材溶液；另取大黃酚對照品，加甲醇制成1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液及對照品溶液各2μl、供試品溶液5μl，分別點于同一以羧甲基淀粉鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點；(3)維生素C的鑒別取本品內(nèi)容物3g，加0.1mol/l鹽酸溶液50ml，振搖30分鐘，濾過，取續(xù)濾液10ml，加入鹽酸苯肼0.1g，60℃水浴溫浸1小時(時時振搖)，放冷，濾過，作為供試品溶液；另取維生素C對照品50mg，加0.1mol/l鹽酸溶液10ml與鹽酸苯肼0.1g，同法制得，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的亮黃色斑點；(4)羌活的鑒別取本品內(nèi)容物3g，用乙酸乙酯提取4次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；同法制成陰性供試品溶液；另取羌活對照藥材粉末1.0g，加乙醇30ml，浸漬1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml溶解作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(10∶2∶3)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；對含有的成分進行含量測定，步驟是含量測定1、綠原酸 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)為流動相；檢測波長327nm；理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不得低于2000；對照品溶液的制備精密稱取綠原酸對照品適量，置棕色量瓶中，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液；供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.3g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每克含山銀花和拳參按綠原酸(C16H1809)計不得少于3.0mg；2、對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥 照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(50∶50)為流動相；檢測波長215nm；理論板數(shù)按對乙酰氨基酚峰、咖啡因峰峰及異戊巴比妥峰計算均應(yīng)不低于3000；對照品溶液的制備精密稱取對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥對照品適量，加50％甲醇制成每1ml含對乙酰氨基酚500μg和含咖啡因與異戊巴比妥各50μg的對照品混合溶液，即得；供試品溶液的制備精密稱取本品粉末0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品含對乙酰氨基酚、咖啡因與異戊巴比妥均應(yīng)為標(biāo)示量的85％～115％。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述的新復(fù)方大青葉制劑是由如下重量的原料制成的復(fù)方大青葉提取物200g，對乙酰氨基酚75g，咖啡因7.5g，異戊巴比妥7.5g，維生素C10g。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述的膠囊制劑是通過以下方法制備的復(fù)方大青葉提取物200g，對乙酰氨基酚75g，咖啡因7.5g，異戊巴比妥7.5g，維生素C10g，分別粉碎，混勻，加輔料適量，制成顆粒，裝成膠囊1000粒，即得。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新復(fù)方大青葉制劑的質(zhì)量控制方法，新復(fù)方大青葉膠囊處方組成為復(fù)方大青葉提取物200g、對乙酰氨基酚75g、咖啡因7.5g、異戊巴比妥7.5g、維生素C 10g所述質(zhì)量控制方法包括以下步驟內(nèi)容物的鑒別，對含有的成分進行含量測定。
文檔編號A61K9/48GK1857434SQ20061007299
公開日2006年11月8日 申請日期2006年4月10日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月10日
發(fā)明者翟勇, 郭桂秋, 陳樹恩, 高紅, 王麗慶 申請人:山東魯泰環(huán)中制藥有限公司