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      一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(aids)病毒的藥物中的應(yīng)用的制作方法

      文檔序號:1086695閱讀:292來源:國知局
      專利名稱:一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(aids)病毒的藥物中的應(yīng)用的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及一種純植物中藥制劑的新用途,具體地說,本發(fā)明涉及一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用。
      背景技術(shù)
      艾滋病從發(fā)現(xiàn)至今還不到20年,但它在全球所引起的廣泛流行,已使3860多萬人受到感染,2500萬人失去了生命。目前,世界上每天有萬余人新感染上艾滋病病毒。不但醫(yī)學(xué)界在竭盡全力研究預(yù)防治療艾滋病,各國政府,社會各階層也都紛紛投入了對抗艾滋病的運(yùn)動。但到目前為止,我們?nèi)祟愡€沒有找到一種治療此病的有效藥物。艾滋病專家們在第16屆世界艾滋病大會上的共同看法是,艾滋病科研領(lǐng)域缺少能扭轉(zhuǎn)乾坤的實(shí)質(zhì)性突破,令人焦慮。因而研究治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的有效藥物變得十分迫切。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明為了治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒,有效殺滅和抑制艾滋病(AIDS)病毒,運(yùn)用祖國中藥學(xué)的基本原理,提出了一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用。
      一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,所述的藥物是由包含下述重量百分比的原料制成一枝黃花50~100%。
      所述的藥物是由所述單一原料制成將所述單一原料一枝黃花與水按重量比為1∶50~100的比例放入浸提器中沸煮10~30分鐘,按常規(guī)方法過濾純化得到所述的中藥原液。
      所述的中藥原液經(jīng)過常規(guī)純化制成口服液、或沖劑。
      所述的藥物是由下述重量百分比的原料制成一枝黃花50~90%,甘草10~50%。
      所述的藥物是由下述重量百分比的原料制成一枝黃花50~90%,金銀花5~25%,板藍(lán)根5~25%。
      一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,所述的藥物是由含有一枝黃花的原料經(jīng)超微粉碎制成沖劑、膠囊或中藥飲片,一枝黃花的重量百分比含量為50~100%。
      所述的藥物是由下述重量百分比的原料制成一枝黃花50~90%,甘草10~50%。
      所述的藥物是由下述重量百分比的原料制成一枝黃花50~90%,金銀花25%,板藍(lán)根25%。
      一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,是由含有一枝黃花的原料經(jīng)超臨界CO2流體萃取技術(shù)進(jìn)行提取分離純化制成針劑、沖劑、噴劑、膠囊或滴丸,一枝黃花的重量百分比含量為50~100%。
      所述的藥物是由下述重量百分比的原料制成一枝黃花50~90%,甘草10~50%。
      所述的藥物是由下述重量百分比的原料制成一枝黃花50~90%,金銀花5~25%,板藍(lán)根5~25%。
      所述的原料一枝黃花選用全草一枝黃花。
      常規(guī)的純化方法大致為(1)浸提液純化技術(shù)常用的設(shè)備是沉降罐或離心機(jī)及超濾器、超濾膜等。
      (2)工藝過程沉降分離工藝是根據(jù)固體微粒本身重力在液體介質(zhì)中自然下沉使之與液體分離的原理,將水提液置沉降罐內(nèi)靜置一定時(shí)間,用虹吸法吸取上層澄清液,必要時(shí)還可采用降溫和加沉降劑—電解質(zhì)(如明礬)的方法以達(dá)到高效、優(yōu)質(zhì)的目的。
      現(xiàn)有的超微粉碎破壁技術(shù)是由上海交大昂立天然藥物工程技術(shù)有限公司開發(fā)制造的“氣流粉碎機(jī)”納米級粉碎、破壁—?dú)夂铣稍O(shè)備完成。其原理當(dāng)原料進(jìn)入氣流粉碎機(jī)粉碎室后,在粉碎室內(nèi)有數(shù)個(gè)粉碎噴咀,噴咀超音速氣流使粉碎物料受到氣流高速沖擊以及粉料互相碰撞,由于氣流速度快、撞擊力大粉碎效果達(dá)到0.5~10微米粒子(500納米~10000納米)同時(shí)達(dá)到物理破壁的目的,使人體能夠完全吸收有效物質(zhì)。
      超臨界CO2流體萃取新技術(shù)是由沈陽東宇集團(tuán)開發(fā)制造的“1000L自動化大型超臨界機(jī)組”萃取能力強(qiáng),提取率高、質(zhì)量可控制。其原理CO2的臨界溫度和臨界壓力分別為31.05℃和7.38MPa,當(dāng)處于這個(gè)臨界點(diǎn)以上時(shí),此時(shí)的CO2同時(shí)具有氣體和液體雙重特性。它既近似于氣體,粘度與氣體相近;又近似于液體,密度與液體相近,但其擴(kuò)散系數(shù)卻比液體大得多。是一個(gè)優(yōu)良的溶劑,能通過分子間的相互作用和擴(kuò)散作用將許多物質(zhì)溶解。同時(shí),在稍高于臨界點(diǎn)的區(qū)域內(nèi),壓力稍有變化,即引起其密度的很大變化,從而引起溶解度的較大變化。因此,超臨界CO2可以從基體中將物質(zhì)溶解出來,形成超臨界CO2負(fù)載相,然后降低載氣的壓力或升高溫度,超臨界CO2的溶解度降低,這些物質(zhì)就沉淀出來(解析)與CO2分離,從而達(dá)到提取分離的目的。
      本發(fā)明的藥品的使用方法和有效量為所述的中藥原液,飲用劑量為,成人每日二~四次,每次100~300ml。所述的口服液,成人每日二~四次,每次10~20ml。
      所述的沖劑、膠囊或飲片,成人每日三~四次,每次2~6克。
      所述的針劑,成人每日二次,每次5~10ml。
      所述的滴丸,成人每日三次,每次8丸。
      所述的噴劑,噴于口腔,每日數(shù)次。
      《中藥大辭典》(上冊)(江蘇新醫(yī)學(xué)院編)的第8-9頁記載所述的一枝黃花為菊科植物,一般利用其全草或帶根全草。性味辛苦、涼。全草一枝黃花含酚性成分、鞣質(zhì)、揮發(fā)油、皂甙、黃酮類等。功用主治疏風(fēng)清熱,消腫解毒,感冒頭痛,咽喉腫痛,黃疸,百日咳,小兒驚風(fēng),跌打損傷,癰腫發(fā)背,鵝掌風(fēng)。對金黃色葡萄球菌、肺炎球菌、綠膿桿菌、痢疾桿菌等均有明顯的殺滅和抑制作用。
      一枝黃花藥效疏風(fēng)清熱,消炎解毒;藥理入肝、膽經(jīng);藥性涼。
      甘草瀉火解毒、潤肺止咳;藥理通行十二經(jīng)絡(luò);藥性平和、調(diào)和諸藥。
      金銀花藥效清熱解毒,消炎止痛;藥理入肺、胃、大腸經(jīng);藥性寒。
      板藍(lán)根藥效涼血清火,消炎解毒;藥理入心、肺經(jīng);藥性寒。
      一枝黃花和甘草配伍,能調(diào)和一枝黃花藥性,增強(qiáng)了藥物的適應(yīng)性。
      一枝黃花和金銀花、板藍(lán)根配伍,能提高主治功效,增加藥物的廣普性。
      經(jīng)本發(fā)明人多年研究及廣州中醫(yī)藥大學(xué)熱帶醫(yī)學(xué)研究所艾滋病研究中心實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證所述的中藥原液具有明顯的抗艾滋病病毒作用。
      本發(fā)明中藥是按雙盲的要求將植物一枝黃花加水1∶120比例再按煎煮提取濃度時(shí)間,制作成HH2A(煎煮10分鐘)和HH2B(煎煮30分鐘)兩份微量濃度的標(biāo)本送交廣州中醫(yī)藥大學(xué)熱帶醫(yī)學(xué)研究所艾滋病研究中心做艾滋病毒株SIV病毒的藥效學(xué)研究。
      抗艾滋病毒株SIV體外試驗(yàn)報(bào)告如下送檢日期;2006年03月24日報(bào)告日期2006年05月25日送檢單位浙江省杭州市采荷東區(qū)17-3-1-601送檢標(biāo)本藥液HH2A、HH2B。
      送檢目的用SIVmac-CEM×174系統(tǒng)檢測送檢藥液樣品抗SIVmac試管的活性。
      一、材料1、細(xì)胞系CEM×174來源于美國Aarond Diamond艾滋病研究中心,北京醫(yī)科院實(shí)驗(yàn)動物所轉(zhuǎn)贈。
      2、毒株SIVmac來源于美國Aarond Diamond艾滋病研究中心,北京醫(yī)科院實(shí)驗(yàn)動物所轉(zhuǎn)贈。
      3、細(xì)胞培養(yǎng)液含10%小牛血清RPMI1640培養(yǎng)液。
      4、待測樣品藥液HH2A、HH2B。
      5、陽性對照藥AZT由CALBIOCHEM出品,專供試驗(yàn)用。
      6、抗猴IgG熒光E.Y.出品。
      7、抗SIV猴陽性血清SIV感染猴恢復(fù)期血清。
      8、其他96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,24孔培養(yǎng)板。
      二、實(shí)驗(yàn)方法1、待測樣品對CEM×174細(xì)胞系的毒性實(shí)驗(yàn)(1)待測樣品的稀釋以待測樣品原濃度為基礎(chǔ),實(shí)驗(yàn)前用10%小牛血清RPMI1640培養(yǎng)液將藥物稀釋10倍。
      (2)對CEM×174細(xì)胞毒性的測定,藥物以為10倍稀釋液作系列2倍稀釋,即1∶10,1∶20,1∶40,1∶80,1∶160,1∶320,1∶640,1∶1280。稀釋好的各待測樣品加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,100ul/孔。加3.0×105/ml的CEM×174細(xì)胞,100ul/孔。置37℃,5%co2飽和濕度培養(yǎng)箱培養(yǎng),4天觀察結(jié)果。
      (3)毒性試驗(yàn)結(jié)果判定。見表1毒性判定依據(jù)以細(xì)胞死亡和細(xì)胞生長情況為依據(jù)判定,表內(nèi)“++++”、“+++”、“++”、“+”和“-”分別代表“++++”種入的細(xì)胞全部死亡;“+++”種入的細(xì)胞大部分死亡,少數(shù)細(xì)胞有暫時(shí)性分裂“++”增殖的細(xì)胞少于細(xì)胞對照孔約50%,死亡細(xì)胞較多;“+”增殖的細(xì)胞少于細(xì)胞對照孔約25%;“-”細(xì)胞生長良好,與細(xì)胞對照孔比較無明顯差異。
      表1 HH2A、HH2B毒性試驗(yàn)結(jié)果

      2、正式試驗(yàn)用24孔板進(jìn)行,每項(xiàng)均用復(fù)孔。試驗(yàn)重復(fù)2次。
      (1)藥物以無毒濃度系列稀釋,病毒按試驗(yàn)要求稀釋,細(xì)胞配制成3×105/ml單細(xì)胞懸液,各孔按表2所列順序加入各試劑(藥物、病毒、細(xì)胞、培養(yǎng)液),另設(shè)AZT陽性藥及SIV對照孔。置37℃,5%CO2,飽和濕度培養(yǎng)箱,3天換一次原稀釋度藥液,6-7天待SIV對照孔CPE出現(xiàn)+++~++++時(shí)測定結(jié)果。
      (2)試驗(yàn)板先觀察病變(C PE),培養(yǎng)上清作2倍系列稀釋來滴定病毒滴度,計(jì)算病毒產(chǎn)量下降數(shù),余下細(xì)胞用PBS洗兩遍,涂片,用間接免疫熒光法計(jì)算熒光陽性細(xì)胞數(shù),即病毒抗原陽性細(xì)胞數(shù)。
      表2正式試驗(yàn)各孔加樣情況

      (3)結(jié)果判定指標(biāo)

      2)病毒產(chǎn)量下降以log10計(jì)算,試驗(yàn)孔與病毒對照孔相比較。如試驗(yàn)孔病毒滴度下降1個(gè)稀釋度,即病毒產(chǎn)量下降0.3log10,如病毒滴度下降2個(gè)稀釋毒,即病毒產(chǎn)量下降0.6log10,余以類推。例如試驗(yàn)孔病毒滴度為1∶320,病毒對照孔為1∶2560,則判定試驗(yàn)孔病毒產(chǎn)量下降0.9log10。
      3)細(xì)胞病變(CPE),融合細(xì)胞,每視野≤25%,為+;每視野≤50%,為++;每視野≤75%,為+++;每視野>75%,為++++。
      4)結(jié)果判定以熒光陽性細(xì)胞抑制率,病毒產(chǎn)量下降互相參考判定,細(xì)胞病變程度僅作參考。無抑制熒光陽性細(xì)胞抑制率<30%,病毒產(chǎn)量下降<0.6log10輕度抑制熒光陽性細(xì)胞抑制率≥30%,病毒產(chǎn)量下降≥0.6log10;中度抑制熒光陽性細(xì)胞抑制率≥50%,病毒產(chǎn)量下降≥1.2log10;高度抑制熒光陽性細(xì)胞抑制率≥60%,病毒產(chǎn)量下降≥2.1log10;三、試驗(yàn)結(jié)果見表3表3.HH2A、HH2B體外抗SIV病毒試驗(yàn)結(jié)果

      從表上結(jié)果看,檢測樣品HH2A在經(jīng)過40倍稀釋后有輕度的體外抑制SIV的作用,但往下再稀釋4倍到1∶160時(shí)則失去了抗SIV的作用;HH2B在1∶10濃度是對CEM×174細(xì)胞有輕微的毒性作用,此濃度也表現(xiàn)出接近中度抗SIV的作用,但此藥液不耐稀釋,在1∶40濃度時(shí)則失去了抗SIV的作用。
      研究結(jié)論根據(jù)上述實(shí)驗(yàn),只要將一枝黃花和水的配比從1∶120往下遞減,或改變提取方式如采用目前最先進(jìn)的超臨界CO2流體萃取新技術(shù),就能獲得高濃度的提取液,取得符合實(shí)際理想的抗艾滋病(AIDS)病毒的效果。從而達(dá)到治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)的目的。
      具體實(shí)施例方式
      下面用實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
      實(shí)例1
      將100克一枝黃花和5000ml水放入浸提器中沸煮10分鐘,即可得到所述中藥原液4800ml。按常規(guī)方法過濾濃縮配制成口服液或制成沖劑。
      實(shí)例2將100克一枝黃花和10000ml水放入浸提器中沸煮25分鐘,得到所述的中藥原液9500ml。按常規(guī)方法過濾濃縮配制成口服液或制成沖劑。
      實(shí)例3將90克一枝黃花和10克甘草和5000ml水放入浸提器中沸煮30分鐘,過濾即可得到所述中藥4400ml。
      實(shí)例4將50克一枝黃花和25克金銀花25克板藍(lán)根和5000ml水放入浸提器中沸煮30分鐘,過濾即可得到所述中藥4400ml。
      實(shí)例5將100克一枝黃花按常規(guī)方法經(jīng)超微粉碎后制成本發(fā)明的沖劑、膠囊或飲。
      實(shí)例6將90克一枝黃花和10克甘草按常規(guī)方法經(jīng)超微粉碎后制成本發(fā)明的沖劑、膠囊或飲片。
      實(shí)例7將50克一枝黃花、25克金銀花、25克板藍(lán)根按常規(guī)方法經(jīng)超微粉碎后制成本發(fā)明的沖劑、膠囊或飲片。
      實(shí)例8將100克一枝黃花經(jīng)按常規(guī)方法經(jīng)超臨界CO2流體萃取后制成本發(fā)明針劑、沖劑、噴劑、膠囊或滴丸。
      實(shí)例9將90克一枝黃花和10克甘草按常規(guī)方法經(jīng)超臨界CO2流體萃取后制成本發(fā)明針劑、沖劑、噴劑、膠囊或滴丸。
      實(shí)例10將50克一枝黃花、25克金銀花、25克板藍(lán)根按常規(guī)方法經(jīng)超臨界CO2流體萃取后制成本發(fā)明針劑、沖劑、噴劑、膠囊或滴丸。
      權(quán)利要求
      1.一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,所述的藥物是由包含下述重量百分比的原料制成一枝黃花50~100%。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述的藥物是由所述單一原料制成將所述單一原料一枝黃花與水按重量比為1∶50-100的比例放入浸提器中沸煮10~30分鐘,按常規(guī)方法過濾純化得到所述的中藥原液。
      3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述的中藥原液經(jīng)過常規(guī)純化濃縮制成口服液或沖劑。
      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,所述的原料一枝黃花選用全草一枝黃花。
      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述的藥物是由下述重量百分比的原料制成一枝黃花50~90%,甘草10~50%。
      6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述的藥物是由下述重量百分比的原料制成;一枝黃花50~90%,金銀花5~25%,板藍(lán)根5~25%。
      7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述的藥物是由含有一枝黃花的原料經(jīng)超微粉碎后制成沖劑、膠囊或中藥飲片,一枝黃花的重量百分比含量為50~100%。
      8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述的藥物是由下述重量百分比的原料制成,一枝黃花50~90%,甘草10~50%。
      9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述的藥物是由下述重量百分比的原料制成一枝黃花50~90%,金銀花5~25%,板藍(lán)根5~25%。。
      10.一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,其特征在于所述的藥物是由含有一枝黃花的原料經(jīng)超臨界CO2流體萃取后制成針劑、沖劑、噴劑、膠囊或滴丸,一枝黃花的重量百分比含量為50~100%。
      全文摘要
      本發(fā)明公開了一枝黃花在制備治療和預(yù)防艾滋病(AIDS)病毒的藥物中的應(yīng)用,從天然植物一枝黃花中提取的中藥原液,經(jīng)藥效學(xué)研究證明其具有明顯的抗艾滋病(AIDS)病毒活性,將具有該活性的植物提取液,根據(jù)不同要求加入賦形劑、輔劑或載體,配制成不同劑型的原料??稍谥苽渲委熀皖A(yù)防艾滋病(AIDS)的藥物中應(yīng)用。
      文檔編號A61P31/18GK1927245SQ200610127150
      公開日2007年3月14日 申請日期2006年9月7日 優(yōu)先權(quán)日2006年9月7日
      發(fā)明者樓士榮 申請人:樓士榮
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