專利名稱：5’-磷酸吡哆醛的靜脈制劑以及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及5’-磷酸吡哆醛的藥用制劑，并且尤其是適合于靜脈給藥的制劑。

背景技術(shù)：
5’-磷酸吡哆醛(P5P)可用于治療和預(yù)防多種疾病，例如高血壓、腦血管疾病、心血管疾病以及糖尿病。參見例如美國(guó)專利第6,051,587；6,417,204；6,548,519；6,586,414；6,605,612；6,667,315；6,780,997；6,677,356；6,489,348以及6,043,259號(hào)。
5’-磷酸吡哆醛的靜脈制劑在現(xiàn)有技術(shù)中是已知的。然而，5’-磷酸吡哆醛水溶液的穩(wěn)定性很差。而且，其在溶液中高度光敏感，并且在粉末形式下程度(degree)更差。因此，現(xiàn)有技術(shù)的5’-磷酸吡哆醛靜脈制劑需要包含防腐劑，用于改善穩(wěn)定性并用于增長(zhǎng)保存期。然而，這樣的防腐劑常常引起不期望的副作用并且未解決5’-磷酸吡哆醛的光敏感性問題。而且，這樣的防腐劑常常不適用于藥品注冊(cè)審批(regulatory approval)。
本發(fā)明提供了新型5’-磷酸吡哆醛的靜脈制劑，其不易于降解并且不需要包含防腐劑。該靜脈制劑表現(xiàn)出改善的藥物代謝動(dòng)力學(xué)分布(圖)。


發(fā)明內(nèi)容
一方面，本發(fā)明提供了一種5’-磷酸吡哆醛的凍干制劑，其通過凍干濃度高于添加物濃度的5’-磷酸吡哆醛和氫氧化鈉的已冷凍的無菌水溶液而制備。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該溶液的pH值在7.0和7.3之間。
在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該凍干制劑進(jìn)一步包含甘露醇。
另一方面，本發(fā)明提供了一種包含5’-磷酸吡哆醛的可注射制劑，其利用適合于靜脈給藥的無菌載體由根據(jù)本發(fā)明的凍干制劑重組。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該無菌載體是注射用水。
另一方面，本發(fā)明提供了一種用于制備5’-磷酸吡哆醛的冷凍制劑的方法，包括以下步驟(a)制備包含5’-磷酸吡哆醛、氫氧化鈉的無菌溶液，所述溶液具有在7.0和7.3之間的pH值；(b)冷凍該溶液；以及(c)凍干該已冷凍的溶液。
在本發(fā)明的另-個(gè)具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液進(jìn)一步包括甘露醇。
在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液包含濃度高于添加物濃度的5’-磷酸吡哆醛。
另一方面，本發(fā)明提供了一種試劑盒，可用于制備根據(jù)本發(fā)明的可注射制劑，該試劑盒包括說明書及分裝在容器中的(a)根據(jù)本發(fā)明的5’-磷酸吡哆醛的凍干制劑；以及(b)適合于靜脈給藥的無菌載體。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該試劑盒包括作為無菌載體的注射用水。
在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該試劑盒進(jìn)一步包括用于所述可注射制劑的容器，確定所述容器的尺寸以有助于制備所選體積和濃度的所述制劑。
另一方面，本發(fā)明提供了根據(jù)本發(fā)明的凍干制劑的用途，用于制備適合于向需要用5’-磷酸吡哆醛治療的患者給藥的可注射制劑。
另一方面，本發(fā)明提供了一種治療需要用5’-磷酸吡哆醛治療的患者的方法，包括靜脈給予根據(jù)本發(fā)明的可注射制劑。
另一方面，本發(fā)明提供了一種降低與口服5’-磷酸吡哆醛或其藥用鹽相關(guān)的惡心和嘔吐發(fā)生率的方法，所述方法包括給予有效量的根據(jù)本發(fā)明的可注射制劑的步驟。
另一方面，本發(fā)明提供了根據(jù)本發(fā)明的可注射制劑的用途，用于降低與口服5’-磷酸吡哆醛或其藥用鹽相關(guān)的惡心和嘔吐發(fā)生率。
另一方面，本發(fā)明提供了一種治療經(jīng)受外科手術(shù)且需要用5’-磷酸吡哆醛治療的患者的方法，包括靜脈給予根據(jù)本發(fā)明的可注射制劑。
另一方面，本發(fā)明提供了根據(jù)本發(fā)明的凍干制劑的用途，用于制備適合于給予經(jīng)受外科手術(shù)且需要用5’-磷酸吡哆醛治療的患者的可注射制劑。
在發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該外科手術(shù)是冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(CABG)或經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)(PCI)。



圖1是對(duì)于單次靜脈劑量為1、5、10以及20mg/kg的血漿5’-磷酸吡哆醛，對(duì)比了所測(cè)得的平均血漿5’-磷酸吡哆醛濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖2是對(duì)于單次靜脈劑量為1、5、10以及20mg/kg的血漿5’-磷酸吡哆醛，對(duì)比了基線調(diào)整的平均血漿5’-磷酸吡哆醛濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖3是對(duì)于單次靜脈劑量為1、5、10以及20mg/kg的血漿5’-磷酸吡哆醛，對(duì)比了基線調(diào)整的平均血漿5’-磷酸吡哆醛對(duì)數(shù)濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖4是對(duì)于單次靜脈劑量為1、5、10以及20mg/kg的血漿5’-磷酸吡哆醛，對(duì)比了所測(cè)得的平均血漿吡哆醛濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖5是對(duì)于單次靜脈劑量為1、5、10以及20mg/kg的血漿5’-磷酸吡哆醛，對(duì)比了基線調(diào)整的平均血漿吡哆醛濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖6是對(duì)于單次靜脈劑量為1、5、10以及20mg/kg的血漿5’-磷酸吡哆醛，對(duì)比了基線調(diào)整的平均血漿吡哆醛對(duì)數(shù)濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖7是對(duì)于單次靜脈劑量為1、5、10以及20mg/kg的血漿5’-磷酸吡哆醛，對(duì)比了測(cè)得的平均血漿4-吡哆酸濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖8是對(duì)于單次靜脈劑量為1、5、10以及20mg/kg的血漿5’-磷酸吡哆醛，對(duì)比了基線調(diào)整的平均血漿4-吡哆酸濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖9是對(duì)于單次靜脈劑量為1、5、10以及20mg/kg的血漿5’-磷酸吡哆醛，對(duì)比了基線調(diào)整的平均血漿4-吡哆酸對(duì)數(shù)濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖10是對(duì)比第1天和第4天測(cè)得的基線校正的血漿5’-磷酸吡哆醛平均濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖11是對(duì)比第1天和第4天測(cè)得的基線校正的血漿5’-磷酸吡哆醛經(jīng)ln轉(zhuǎn)化的平均濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖12是對(duì)比第1天和第4天測(cè)得的未校正的血漿5’-磷酸吡哆醛平均濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖13是對(duì)比第1天和第4天測(cè)得的未校正的血漿5’-磷酸吡哆醛經(jīng)ln轉(zhuǎn)化的平均濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖14是對(duì)比第1天和第4天測(cè)得的血漿吡哆醛平均濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖15是對(duì)比第1天和第4天測(cè)得的血漿4吡哆酸經(jīng)ln轉(zhuǎn)化的平均濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖16是對(duì)比第1天和第4天測(cè)得的血漿4吡哆酸平均濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。
圖17是對(duì)比第1天和第4天測(cè)得的血漿吡哆醛經(jīng)ln轉(zhuǎn)化的平均濃度與時(shí)間的一個(gè)線圖。

具體實(shí)施例方式 本發(fā)明提供了新型的5’-磷酸吡哆醛凍干制劑和可注射制劑及其用途。該5’-磷酸吡哆醛的可注射制劑適合于靜脈給予需要用5’-磷酸吡哆醛治療的患者。本發(fā)明的可注射制劑具有改善的藥物動(dòng)力學(xué)而無任何明顯的副作用。相比于現(xiàn)有技術(shù)的制劑，靜脈給予本發(fā)明的可注射制劑提供了增高而持久的5’-磷酸吡哆醛血漿水平。
之前用于制備穩(wěn)定的5’-磷酸吡哆醛靜脈制劑的嘗試，需要加入潛在有毒或者潛在致癌的防腐劑。在沒有防腐劑時(shí)，5’-磷酸吡哆醛的水溶液迅速降解，因而不適合于靜脈給藥。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)新型5’-磷酸吡哆醛的凍干制劑可重組以制備穩(wěn)定的可注射制劑，而不需要加入任何常規(guī)的防腐劑。令人驚奇的是，在使用適當(dāng)?shù)妮d體重組前通過用甘露醇凍干5’-磷酸吡哆醛，顯著提高了5’-磷酸吡哆醛靜脈制劑的穩(wěn)定性。而且，如此制備的靜脈制劑表現(xiàn)出改善的穩(wěn)定性而未損害其活性成分的藥物動(dòng)力學(xué)性能，且沒有任何明顯的副作用。
本發(fā)明的制劑對(duì)于心血管和腦血管并發(fā)癥的治療特別有用。冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(CABG)和經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)(PCI)是北美最經(jīng)常實(shí)施的兩種方法。在手術(shù)過程中，患者輸入抗血小板和抗血栓形成的治療劑，以降低局部缺血并發(fā)癥的頻率。特別地，所用的治療劑是肝素、阿昔單抗、依替巴肽。它們可以單獨(dú)使用或者彼此組合使用。本發(fā)明提供的5’-磷酸吡哆醛制劑可以在CABG或PCI過程中經(jīng)靜脈給藥，以進(jìn)一步降低局部缺血并發(fā)癥。
根據(jù)本發(fā)明的制劑也適合于對(duì)無法吞咽口服形式5’-磷酸吡哆醛例如片劑的中風(fēng)患者給藥。而且，在醫(yī)院環(huán)境下，與口服制劑相反，5’-磷酸吡哆醛的靜脈制劑提供的優(yōu)勢(shì)在于提供更高的5’-磷酸吡哆醛血漿水平而不引起可能與口服5’-磷酸吡哆醛有關(guān)的胃刺激、惡心、嘔吐和腹瀉。此外，靜脈制劑在幾分鐘內(nèi)達(dá)到較高的血漿水平而口服制劑可能需要幾個(gè)小時(shí)才達(dá)到類似水平。這使得靜脈制劑對(duì)于口服給藥不可能或不理想的緊急情況(例如，治療MI或中風(fēng)，急診PCI或分流術(shù)(旁路))最為理想。
5’-磷酸吡哆醛的凍干制劑以及制備方法 一方面，本發(fā)明提供了一種5’-磷酸吡哆醛的凍干制劑，其通過凍干5’-磷酸吡哆醛、氫氧化鈉以及可選的甘露醇的冷凍無菌水溶液而制備。
5’-磷酸吡哆醛的凍干制劑包括濃度高于添加物濃度的5’-磷酸吡哆醛的凍干無菌水溶液。
如在本文中使用的“添加物濃度”定義為將患維生素或代謝物缺乏的患者的維生素或代謝物水平恢復(fù)到正常水平的濃度平均化，且排除適合于將維生素或代謝物水平增加到高于正常代謝水平的濃度。
該凍干制劑可以使用5’-磷酸吡哆醛或其藥用鹽來制備。5’-磷酸吡哆醛的一水化物以及無水形式都適合于制備本發(fā)明的藥用組合物。該5’-磷酸吡哆醛可以以鹽的形式提供，且具有藥物可配伍的抗衡離子(相反離子，counterion)，例如但不限于檸檬酸鹽、酒石酸鹽、重硫酸鹽等。該藥物可配伍鹽可以用多種酸來形成，包括但不限于鹽酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、琥珀酸等。該鹽形式在含水溶劑或其它質(zhì)子溶劑中比相應(yīng)的游離堿形式更易溶。
制備5’-磷酸吡哆醛凍干制劑的第一步是制備包含5’-磷酸吡哆醛和氫氧化鈉的無菌溶液。
在優(yōu)選的具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液具有的pH在約7.0和7.3之間。該溶液通過首先在適宜量的水中溶解5’-磷酸吡哆醛和氫氧化鈉并調(diào)節(jié)pH來制備。
如在本文中使用的術(shù)語“重量/重量百分比(％w/w)”指的是特定化合物或載體相對(duì)于組合物總重量的重量百分比，而該化合物或載體是所述組合物的組分。
在一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約1至25％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
在一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約1至15％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
在另一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約1至10％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
在又一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約5％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
在另一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約0.1至10％w/w的氫氧化鈉。
在一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約0.5至5％w/w的氫氧化鈉。
在另一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約0.5至3％w/w的氫氧化鈉。
在又一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約1.5％w/w的氫氧化鈉。
在另一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液可以進(jìn)一步包括甘露醇。在無菌溶液包括甘露醇的具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液通過首先在適宜量的水中溶解該5’-磷酸吡哆醛和氫氧化鈉并調(diào)節(jié)pH，隨后在該5’-磷酸吡哆醛/氫氧化鈉溶液中溶解甘露醇來制備。然后將得到的溶液滅菌，例如通過過濾滅菌。
在一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約0.2至10％w/w的甘露醇。
在一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約0.5至5％w/w的甘露醇。
在一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約3％w/w的甘露醇。
在一個(gè)更優(yōu)選的具體實(shí)施方式
中，該無菌溶液將包含約5％w/w的5’-磷酸吡哆醛、約1.5％w/w的氫氧化鈉以及約2.8％w/w的甘露醇。
然后該無菌溶液可以以合適的體積分裝入無菌的塑料容器或玻璃容器例如安瓿或小瓶中。
裝入單個(gè)小瓶中的5’-磷酸吡哆醛的量可以在25mg和1000mg之間，50和1000mg之間以及更優(yōu)選地在100和750mg之間變化。氫氧化鈉和甘露醇的量將取決于5’-磷酸吡哆醛的量。在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式
中，該凍干制劑的單一單位劑型包括約250mg的5’-磷酸吡哆醛、80.5mg的氫氧化鈉、150mg的甘露醇以及5.0mlWFI(注射用水)。
一旦該無菌溶液已經(jīng)等份裝入容器中，則該溶液在-20和-45℃之間的溫度下冷凍?？梢栽谠摐囟认戮S持基本上已經(jīng)冷凍的水溶液直至開始凍干。
可以實(shí)施該基本上已冷凍的水溶液的凍干，包括例如初級(jí)干燥和次級(jí)干燥(secondary drying)。初級(jí)干燥可通過使用可控的施加真空和加熱經(jīng)由升華而完成，例如在約0.1至0.5托實(shí)際真空條件下進(jìn)行足夠時(shí)間以達(dá)到除去基本上所有的冷凍水和/或其它溶劑。隨后優(yōu)選在基本類似的真空下完成次級(jí)干燥，以盡可能多的除去最后的痕量的吸附水(adsorbed water)或其它溶劑，由此提供了干燥的塊狀物或粉末。
完成初級(jí)干燥的溫度在該過程開始時(shí)范圍在-10至0℃之間，以維持溶液于基本或完全冷凍的形式。隨著該過程的進(jìn)展且該產(chǎn)物溫度達(dá)到期望的儲(chǔ)存溫度，初級(jí)干燥期完成。完成次級(jí)干燥的溫度范圍在25至35℃之間，以除去任何吸附水和/或其它溶劑。得到的塊狀物或粉末的含水量?jī)?yōu)選以重量計(jì)低于2.5％。一旦凍干完成，隨后可將含有該凍干制劑的無菌塑料或玻璃容器塞住或密封。
當(dāng)儲(chǔ)存于低光條件下且溫度為2至8℃之間時(shí)，得到的凍干制劑在物理和化學(xué)上是穩(wěn)定的。
5’-磷酸吡哆醛的可注射制劑以及制備方法 另一方面，本發(fā)明提供了一種含有濃度高于添加物濃度的5’-磷酸吡哆醛的可注射制劑，其利用適合于靜脈給藥的無菌載體從根據(jù)本發(fā)明的凍干制劑重組而成。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的凍干制劑在適當(dāng)體積的WFI(注射用水)中重組，以提供該可注射制劑。得到的可注射制劑特別適合于推注給藥。優(yōu)選地，該可注射制劑中5’-磷酸吡哆醛的濃度在1至100mg/ml、5至75mg/ml，并且更優(yōu)選在10和50mg/ml之間的范圍。
用于制備5’-磷酸吡哆醛的可注射制劑的試型盒 另一方面，本發(fā)明提供了一種可用于制備根據(jù)本發(fā)明的可注射制劑的試劑盒，包括用于制備可注射制劑的說明書(instruction)以及分裝在容器中的(a)根據(jù)本發(fā)明的5’-磷酸吡哆醛的凍干制劑；以及(b)一種適合于靜脈給藥的無菌載體。在一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式
中，該無菌載體是WFI。在另一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式
中，該試劑盒進(jìn)一步包括用于該可注射制劑的容器，確定所述容器的尺寸以有助于制備所選體積和濃度的可注射制劑。
該凍干制劑和無菌載體可以等分成適合于單次推注的體積。該凍干制劑和無菌載體可以等分成適合于加量給藥(或長(zhǎng)期給藥，extended administration)的體積。該試劑盒可以包括容器，確定該容器的尺寸以有助于制備用于注射無需另外的測(cè)量的指定濃度和體積的制劑。該容器可以是注射器本體或者適用于注射器。
5’-磷酸吡哆醛的可注射制劑的用途 對(duì)高劑量5’-磷酸吡哆醛耐受性的限制因素是胃腸道不適，主要表現(xiàn)在惡心和嘔吐。本發(fā)明提供了新型的可注射制劑，適合于靜脈給予高劑量的5’-磷酸吡哆醛，并且與口服給藥相關(guān)的胃腸道副作用最低。根據(jù)本發(fā)明的可注射制劑克服了現(xiàn)有技術(shù)中5’-磷酸吡哆醛靜脈制劑的穩(wěn)定性問題。包含在本發(fā)明可注射制劑中的5’-磷酸吡哆醛的水溶液的穩(wěn)定性相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)的在溶液中高度光敏感且粉末形式程度更差的5’-磷酸吡哆醛制劑有所改善。相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)的制劑，根據(jù)本發(fā)明的靜脈制劑不需要或較低程度地需要含有用于改善穩(wěn)定性和用于增加儲(chǔ)存時(shí)間的防腐劑。
因此，本發(fā)明提供了一種治療需要用5’-磷酸吡哆醛治療的患者的方法，包括靜脈給予根據(jù)本發(fā)明的可注射制劑。
另一方面，本發(fā)明提供了一種降低與口服5’-磷酸吡哆醛或其藥用鹽相關(guān)的惡心和嘔吐的發(fā)生率的方法，所述方法包括給予有效量的根據(jù)本發(fā)明的可注射制劑的步驟。
5’-磷酸吡哆醛的靜脈給藥對(duì)于經(jīng)受外科手術(shù)且需要抗血小板和抗血栓形成治療劑以減少局部缺血并發(fā)癥頻率的患者的治療特別有用。另一方面，本發(fā)明提供了一種治療經(jīng)受外科手術(shù)且需要用5’-磷酸吡哆醛治療的患者的方法，包括靜脈給予根據(jù)本發(fā)明的可注射制劑。該外科手術(shù)可以是心血管相關(guān)手術(shù)例如冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(CABG)或經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)(PCI)。
單一劑量的可注射制劑可含有10和1000mg之間的5’-磷酸吡哆醛，優(yōu)選含有50mg和100mg之間，100和1000mg之間的5’-磷酸吡哆醛，并且更優(yōu)選地含有250和1000mg之間的5’-磷酸吡哆醛。根據(jù)本發(fā)明的可注射制劑適合于每天給藥一次或兩次，例如單次推注。該可注射制劑還可以用于長(zhǎng)期(extended)或持續(xù)給藥。
該可注射制劑通常以用于治療或預(yù)防一種或多種特定指征(specific indication)的有效量給予。應(yīng)該理解，最佳劑量將通過用于每種處理藥征和指征的標(biāo)準(zhǔn)方法來確定，考慮該指征、其嚴(yán)重性、并發(fā)條件等。治療有效劑量還指足夠引起與這樣的疾病相關(guān)的癥狀的改善的化合物量。用于配制和給予該即時(shí)施用化合物的技術(shù)可以在最新版的“Remington’s Pharmaceutical Sciences，”MackPublishing Co.，Easton，Pa.，中查到。為了對(duì)哺乳動(dòng)物尤其是人類給藥，期望活性劑的每日劑量水平為100至1000mg，通常為約200至500mg。在任何情況下，醫(yī)師可決定最適合于個(gè)體的實(shí)際劑量，且將隨著年齡、體重和特定個(gè)體的反應(yīng)而變化。上述劑量是示例性的一般情況。當(dāng)然，可能存在某些需要使用較高或較低劑量范圍的個(gè)別情況，并且這種情況在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
盡管已經(jīng)參照示例的具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但應(yīng)該理解，本發(fā)明并不限于這些明確的具體實(shí)施方式
，且可以由本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員實(shí)現(xiàn)其中的多種變化和更改。所有這些變化和更改均包括在所附的權(quán)利要求書中。
實(shí)施例 實(shí)施例1-5’-磷酸吡哆醛(P5P)凍干制劑的制備 表1列出了用于單次劑量的5’-磷酸吡哆醛凍干制劑的配方。每個(gè)小瓶提供250mg的P5P。
表1-配方 下列程序(步驟)用于制備5L批量的5’-磷酸吡哆醛凍干制劑?？梢酝ㄟ^按比例增加或減少相對(duì)量而按比例擴(kuò)大或縮小批量大小。
玻璃器皿和小瓶的制備-玻璃小瓶在250℃±15℃的溫度下洗滌并除去熱原。所有用于制備該凍干制劑的玻璃器皿和設(shè)備包括磁力攪拌棒、移液管、愛倫美氏(燒)瓶(錐形瓶)、細(xì)頸瓶、過濾器、塞子以及封口(密封)，都通過在121℃±3℃的溫度下進(jìn)行45分鐘高壓滅菌處理(autoclaving)而滅菌。
P5P溶液的制備-計(jì)算制備每小瓶250mg的最終濃度所需的P5P量時(shí)，使用校正系數(shù)1.08，因?yàn)樵摶钚运幬锍煞种械暮渴?.71％。
用于每5L批量的4kg的WFI(總需量的80％)在溶液的中心用氮沖洗。通過磁力徹底攪拌，將80.6g的氫氧化鈉和270.4g的P5P溶于該4kg的WFI中以提供清澈溶液。用1N NaOH或1N HCl將該溶液的pH相應(yīng)的調(diào)整為7.0至7.3的pH。pH調(diào)整后，將150.3mg的甘露醇溶于P5P/NaOH溶液中同時(shí)進(jìn)行持續(xù)的磁力攪拌，直至溶液清澈。隨后加入另外的WFI，以將溶液的重量調(diào)節(jié)至5.245kg(密度1.049g/ml)。該溶液隨后經(jīng)過0.2μm Milipack K40伽馬金模式過濾器(gamma gold model filter)進(jìn)行無菌過濾，并檢測(cè)過濾器的完整。
凍干-將單個(gè)小瓶在等級(jí)100的清潔室內(nèi)利用劑量體積設(shè)置為5.10-5.30ml(以重量計(jì)相當(dāng)于5.35-5.56g/小瓶)的范圍的分配泵進(jìn)行無菌填充。該小瓶用不含2-巰基苯并噻唑的溴化丁基塞子(bromobutyl stopper)部分堵塞。部分堵塞的小瓶托架放入已預(yù)冷至4℃的凍干室中。凍干采用以下參數(shù)進(jìn)行冷卻溫度-45℃；初級(jí)冷卻時(shí)間-6小時(shí)；初級(jí)干燥時(shí)間(在氮?dú)鈿夥罩?-50小時(shí)；次級(jí)干燥溫度35℃；次級(jí)干燥時(shí)間-48小時(shí)。
凍干后，小瓶用具有連接的塑料扣的鋁封條束縛，該小瓶在2-8℃下保存。
實(shí)施例2-靜脈與口服給予5’-磷酸吡哆醛(P5P)的生物利用度比較 進(jìn)行了一次臨床試驗(yàn)，以比較靜脈給予P5P和口服給予P5P的藥物動(dòng)力學(xué)。該試驗(yàn)是一個(gè)單次劑量遞增的研究。
對(duì)于靜脈給藥，P5P是在禁食的條件下通過推注來給予的。研究了P5P的下列劑量1、5、10和20mg/kg。6個(gè)受試者被分配到每個(gè)劑量組。
對(duì)于口服給藥，P5P是在禁食的條件下作為單一的無包衣片或者作為單一的腸溶片來給予的。對(duì)于無包衣片，研究了P5P的下列劑量5、10、17.5和25mg/kg。對(duì)于腸溶片，研究了P5P的下列劑量15、30和60mg/kg。
在靜脈或口服給藥后經(jīng)過24小時(shí)的時(shí)間間隔評(píng)價(jià)血漿和尿中的P5P、吡哆醛和4-吡哆酸。結(jié)果列于下面的表2和表3中。
表2-P5P單次靜脈劑量的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù) 表3-P5P單次口服劑量的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù) 結(jié)果表明，P5P的生物利用度在靜脈給藥時(shí)比口服給藥高。
實(shí)施例3-比較5’-磷酸吡哆醛(P5P)的單次靜脈劑量1，5，10和20mg/kg時(shí)的藥物動(dòng)力學(xué)和不良事件的發(fā)生率 方法學(xué)-這是一個(gè)單盲法、單次劑量遞增、非隨機(jī)的4-階段(phase)非交換型研究，其設(shè)計(jì)為在禁食條件下給予四組健康的男性和女性受試者，評(píng)估在劑量為1，5，10，20mg/kg時(shí)的P5P可靜脈注射溶液的安全性和耐受性，并估計(jì)P5P的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
在禁食條件下，將受試者分配到四個(gè)組(每組6個(gè)受試者)之一。
在每一階段給藥(dosing)后測(cè)量經(jīng)過24小時(shí)時(shí)間間隔收集的血漿樣品中的5’-磷酸吡哆醛(P5P)濃度。
基于最終數(shù)據(jù)集(data set)中的每一個(gè)受試者的5’-磷酸吡哆醛(P5P)的血漿水平，估計(jì)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)AUCt、AUCinf、Cmax、Tmax、Kel、Thalf、Vd、CL、MRT和F。
在整個(gè)研究中，通過記錄生命體征、ECG和已報(bào)道過的不良事件，收集對(duì)于每個(gè)受試者的安全數(shù)據(jù)。
受試者個(gè)數(shù)(計(jì)劃的和分析的) 給第1組中6個(gè)受試者服藥(1mg/kg)。6個(gè)受試者完成了該研究的階段1并作了分析。
給第2組中6個(gè)受試者服藥(5mg/kg)。6個(gè)受試者完成了該研究的階段2并作了分析。
給第3組中6個(gè)受試者服藥(10mg/kg)。6個(gè)受試者完成了該研究的階段3并作了分析。
給第4組中6個(gè)受試者服藥(20mg/kg)。5個(gè)受試者完成了該研究的階段4并作了分析。
診斷和入選的主要標(biāo)準(zhǔn) 在給藥前的21天內(nèi)，受試者符合下列所有包括的標(biāo)準(zhǔn)。
1)健康不吸煙的男性和女性受試者，年齡在18到55歲(包括18歲和55歲)。
2)體重在對(duì)于受試者的身高和體型為適當(dāng)體重±10％之內(nèi)(如統(tǒng)計(jì)局1983年公布的都市人壽保險(xiǎn)公司標(biāo)準(zhǔn)(Metropolitan LifeInsurance Company Scale，Statistical Bureau))。
3)對(duì)于以下為陰性HIV；乙肝表面抗原和丙肝抗體；濫用藥物的尿檢測(cè)(大麻、安非他命、巴比妥酸鹽、可卡因、阿片劑、苯并二氮類(benzodiazepine)和美沙酮)；可替寧(尿檢)；血清HCG(僅女性)。
4)體格檢查中無明顯的疾病或者臨床上的明顯發(fā)現(xiàn)。
5)無明顯異常的臨床實(shí)驗(yàn)室值。
6)在生命體征測(cè)定和12導(dǎo)聯(lián)心電圖(ECG)中，無臨床明顯發(fā)現(xiàn)。
7)在接受任何研究步驟前，均被告知該研究的性質(zhì)，并給出書面許可。
8)參加本研究的女性不能生孩子(例如絕經(jīng)后、輸卵管結(jié)扎、子宮切除術(shù))或者愿意保持禁欲(不進(jìn)行性交)或者愿意采用有效的雙重屏障節(jié)育方法(伴侶使用避孕套而女性使用陰道隔膜(diaphragm)、避孕海綿、殺精子藥或IUD)或者愿意使用激素避孕藥(口服、埋入皮下、貼片或注射)。
9)參與本研究的女性處于非哺乳期。
所用的檢測(cè)產(chǎn)品是P5P靜脈可注射溶液，50mg/ml，可以按照實(shí)施例1中的方法進(jìn)行制備(CanAm BioResearch Inc，Canada)；批號(hào)LP1459；生產(chǎn)日期12/03。通過靜脈注射給予單次1，5，10或20mg/kg的劑量。治療的持續(xù)時(shí)間是根據(jù)單次的劑量。
評(píng)估標(biāo)準(zhǔn) 初級(jí)終點(diǎn)-安全參數(shù)-在本研究中研究的安全參數(shù)是生命體征測(cè)量值(血壓、脈搏率)、ECG測(cè)量值(服藥后1，2和12個(gè)小時(shí))、血小板功能檢測(cè)、以及在研究期間和實(shí)驗(yàn)室評(píng)估(臨床化學(xué)、血液學(xué)、尿分析)過程中受試者經(jīng)歷的不良事件嚴(yán)重度和因果關(guān)系。
次級(jí)終點(diǎn)-藥物動(dòng)力學(xué)(PK)參數(shù)-通過有效的分析方法測(cè)定5’-磷酸吡哆醛的血漿濃度?；谶@些濃度水平，評(píng)估AUCt、AUCinf、Cmax、Tmax、Kel、Thalf、Vd、CL、MRT和F。
統(tǒng)計(jì)方法-對(duì)該評(píng)估的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)，通過處理進(jìn)行描述統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算。
討論和結(jié)論 總的說來，在該臨床研究中建立的P5P可注射溶液的安全曲線(安全分布圖，safety profile)表明，當(dāng)單次劑量給藥達(dá)到20mg/kg的劑量時(shí)，該產(chǎn)品耐受良好，無嚴(yán)重或持久的治療相關(guān)影響。在本研究中觀察到的P5P常見副作用包括惡心、嘔吐和胃不適。沒有不良事件對(duì)受試者的安全性或研究結(jié)果的完整性產(chǎn)生明顯影響。
基于從本研究結(jié)果產(chǎn)生的不良事件分布圖(profile)，P5P在達(dá)到20mg/kg的劑量下是安全且良好耐受的。
P5P的給藥前濃度非常低，低于相應(yīng)Cmax值的1％(范圍0.01％到0.44％)。吡哆醛(PAL)的給藥前濃度稍大，在Cmax值的0.06％和2.47％之間。
僅一個(gè)受試者(第23號(hào)受試者)表現(xiàn)出4-吡哆酸(PA)的非零給藥前水平，占Cmax參數(shù)的0.06％。注意，需要在數(shù)據(jù)的藥物動(dòng)力學(xué)分析之前，在可用的情況下，從測(cè)得的分析物水平中減去基線值(給藥前水平的平均值)。
在最初的迅速增加后，P5P濃度-時(shí)間分布表現(xiàn)出中度的下降，主要由于在分布階段之后是一個(gè)較慢的消除階段(圖1至3)。終末線性階段(terminal linear phase)僅考慮三個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)并用于估計(jì)表觀的消除半衰期。為了捕獲P5P的真實(shí)消除階段，可能24小時(shí)的取樣間隔還不足夠長(zhǎng)。在5和6小時(shí)之間(表4)，全部劑量的估計(jì)值均一致。
表4-P5P的血漿藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù) 對(duì)于兩種代謝產(chǎn)物，吡哆醛(PAL)和4-吡哆酸(PA)，未明顯觀察到分布支配的階段。對(duì)于PAL，表觀消除半衰期為約4小時(shí)(表5)，而對(duì)于PA為約2到3.5小時(shí)(表6)。
表5-PAL的血漿藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù) 表6-PA的血漿藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù) 在靜脈輸注開始后，PAL在約0.30到0.70小時(shí)達(dá)到最大血漿水平(圖4至圖6)，而PA在約0.70到1.0小時(shí)達(dá)到最大濃度(圖7至圖9)。這些值與這些代謝物的相繼形成一致。
未改變的P5P的尿排泄可以忽略不計(jì)，尿液中發(fā)現(xiàn)低于給藥劑量0.5％的P5P(表10)。類似地，幾乎很少劑量的PAL排泄在尿液中，在整個(gè)劑量的約2到3％之間(表10)。
尿液中PA占最大量。超過24小時(shí)的時(shí)間間隔，所給劑量的30％和52％之間在尿液中以4-吡哆酸的形式排泄。
藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)與劑量之間關(guān)聯(lián)性的分析結(jié)果總結(jié)于下面的表7中。
表7-尿排泄總結(jié) 表8-藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)與劑量的關(guān)聯(lián)等式的總結(jié) 所有分析物的血漿AUCinf和Cmax參數(shù)均呈劑量依賴性。線性回歸的測(cè)定系數(shù)(R2)非常高，并且估計(jì)的劑量系數(shù)(b1)明顯不同于零。
可清楚地表示出血漿P5P Cmax參數(shù)的劑量正比常數(shù)(proportionality)，因?yàn)閎1的95％置信區(qū)間(CI)包含1。在P5P的血漿AUCinf似乎輕微偏離正比常數(shù)的情況下，b1的95％CI，085-0.96，不包含值1。然而，偏差似乎非常小，并且可以用實(shí)驗(yàn)誤差解釋。該偏差可能是清除(CL)觀察到的劑量依賴性的原因。b1系數(shù)明顯不同于0，但測(cè)定的系數(shù)非常低(0.26048)，而且b1的值也非常低(0.10)。
在代謝物PAL和PA的情況下，兩個(gè)參數(shù)AUCinf和Cmax，似乎增加高于基于劑量的預(yù)期。b1系數(shù)的95％置信區(qū)間高于值1。對(duì)于PAL分析物，這種偏差更顯著。
對(duì)于所有三個(gè)分析物，表觀消除半衰期(Thalf)以及平均滯留時(shí)間(MRT)均不依賴于劑量。劑量系數(shù)(b1)并非顯著不同于0，因此可以推斷，消除半衰期和平均滯留時(shí)間在1mg/kg到20mg/kg的劑量范圍內(nèi)是恒定的。
實(shí)施例4-經(jīng)過4天時(shí)間，單次靜脈劑量10mg/kg的5’-磷酸吡哆醛(P5P)的生物利用度和不良事件的發(fā)生率 分析的數(shù)據(jù)集-連續(xù)4天經(jīng)靜脈給予6名健康成年不吸煙者每日單一劑量10mg/kg的P5P，并完成了該研究。按照研究的實(shí)驗(yàn)記錄，所有完成研究的受試者的數(shù)據(jù)用于藥物動(dòng)力學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
人口統(tǒng)計(jì)學(xué)-年齡(歲)平均值＝33±10；范圍＝19-49；中位數(shù)＝32。身高(cm)平均值＝168.7±4.8；范圍＝163.0-175.5；中位數(shù)＝68.75。體重(kg)平均值＝70.9±10.0；范圍＝56.0-83.2；中位數(shù)＝68.75。BMI(kg/m2)平均值＝24.9±3.0；范圍＝20.6-29.3；中位數(shù)＝25。
分析方法-血漿和尿樣品用于分析。通過HPLC/FLD測(cè)定P5P、PAL和PA水平。對(duì)于血漿，定量水平是5ng/ml，而對(duì)于尿液，定量水平是100ng/ml。對(duì)于血漿，樣品分析的校準(zhǔn)曲線范圍為5ng/ml到5000ng/ml，而對(duì)于尿液是100ng/ml到50,000ng/ml。
安全性方法-本研究中研究的安全性參數(shù)為不良事件、生命體征測(cè)量值、ECG、體格檢查和標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室評(píng)估。
治療順應(yīng)性的測(cè)量值 因?yàn)槭茉囌咴谥苯佑^察下給藥，所以治療順應(yīng)性的測(cè)量值是100％；確認(rèn)受試者身份，并用預(yù)先分配給藥法進(jìn)行交叉檢查。此外，從第0天注射安慰劑前至少10小時(shí)直到第5天的第4次給藥抽血后24小時(shí)，受試者被限制在SFBC Anapharm的臨床研究機(jī)構(gòu)。
統(tǒng)計(jì)方法 每個(gè)受試者的P5P、PAL和PA血漿濃度、取樣時(shí)間以及治療日，從BRI生物藥劑學(xué)研究公司(BRI Biopharmaceutical ResearchInc.)電子傳送到SFBC An.apbam1的統(tǒng)計(jì)部門。并對(duì)照復(fù)印件進(jìn)行數(shù)據(jù)的交叉檢查。
取樣過程中的時(shí)間偏差作如下處理對(duì)于所有的取樣時(shí)間，如果計(jì)劃和實(shí)際取樣時(shí)間之間的差異低于1分鐘，則認(rèn)為可接受。當(dāng)差異超過了這個(gè)時(shí)間限制時(shí)，實(shí)際取樣時(shí)間(四舍五入到小數(shù)點(diǎn)后三位)可用來計(jì)算除給藥前樣品(無論時(shí)間偏差如何，其一直報(bào)告為零，即0.000)之外的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。計(jì)劃取樣時(shí)間示于本報(bào)告統(tǒng)計(jì)部分的濃度表和曲線中。
在濃度表中，不存在的樣品記錄為NS(無樣品)。這些樣品不進(jìn)行藥物動(dòng)力學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
在SFBC Anapharm進(jìn)行藥物動(dòng)力學(xué)分析(非分區(qū)和分區(qū))。利用Bioequiv(release 3.40)或WinNonLinTM(release 4.0.1)計(jì)算藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。Bioequiv是SFBC Anapharm的一個(gè)專有軟件，開發(fā)并檢測(cè)用于生物等效性研究。根據(jù)FDA、HPFB和BMEA指導(dǎo)(手冊(cè)，guide)，該軟件實(shí)施藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的非分區(qū)分析和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(借助于SAS release 6.12)。
對(duì)于每個(gè)取樣時(shí)間和處理，均計(jì)算P5P(基線校正和未校正)、PAL和PA的血漿濃度的平均值、標(biāo)準(zhǔn)差(SD)、變異系數(shù)(CV(％))和范圍(最小值和最大值)。
對(duì)于非分區(qū)藥物動(dòng)力學(xué)分析，計(jì)算AUC0-t(ng·h/mL)、AUC0-τ(ng·h/mL)、AUC0-inf(ng·h/mL)、Cmax(ng/mL)、Cmin(ng/mL)、Cavg(ng/mL)、Fl(％)、Ae0-t(ng)、AUCt/inf(％)、Tmax(h)、T1/2el(h)、Kel(h-1)、TLIN(h)、LQCT(h)、CLT(L/h)、CLR(L/h)、Vβ(L)、MRT(h)以及累積率的均值、SD、CV(％)、范圍(最小值和最大值)、中位數(shù)以及四分位數(shù)范圍(四分位數(shù)間距)。這些藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的計(jì)算在下文加以解釋。
最大觀測(cè)濃度、最小觀測(cè)濃度、平均濃度以及觀測(cè)到的峰濃度的時(shí)間 對(duì)于每個(gè)受試者和每個(gè)分析物，均確定最大觀測(cè)濃度Cmax以及達(dá)到峰濃度的時(shí)間Tmax。對(duì)于第四天的數(shù)據(jù)，需確定對(duì)于每個(gè)受試者和每個(gè)分析物的最小觀測(cè)濃度Cmin，并根據(jù)AUC0-τ/τ計(jì)算Cavg。
波動(dòng)百分比-對(duì)于第4天的數(shù)據(jù)，根據(jù)100*([Cmax-Cmin]/Cavg)計(jì)算經(jīng)過一次給藥間隔(F1(％))的波動(dòng)的峰-谷(peak-throuth)百分比。
半衰期和消除速率常數(shù)-為了計(jì)算消除速率常數(shù)(Kel)，對(duì)血漿濃度值(y)相對(duì)時(shí)間(x)的自然對(duì)數(shù)(Ln)進(jìn)行回歸分析。在對(duì)數(shù)線性消除階段開始的時(shí)間點(diǎn)(TLIN)與在定量限值以上最后濃度出現(xiàn)的時(shí)間(LQCT)之間進(jìn)行計(jì)算。Kel由斜率乘以(-1)得到，而表觀半衰期(T1/2el)由(ln2)/Kel得到。
TLIN和LQCT-科學(xué)家(根據(jù)SFBC Anapharm的標(biāo)準(zhǔn)操作程序)確定每一個(gè)受試者和每一次治療的ln-線性Kel計(jì)算開始的時(shí)間點(diǎn)TLIN和用來估計(jì)該Kel的最后可定量濃度的取樣時(shí)間LQCT。在終點(diǎn)的消除階段過程中的至少4個(gè)非零觀測(cè)值用來計(jì)算Kel。如果少于4個(gè)觀測(cè)值是可用的，則采用3個(gè)觀測(cè)值中的最小值。
濃度-時(shí)間曲線下的區(qū)域-從0.000h的時(shí)間直到最后非零濃度利用線性梯形法則計(jì)算AUC0-t。
從0.000h的時(shí)間至24.0h利用線性梯形法則計(jì)算AUC0-τ。
AUC0-inf計(jì)算如下 AUC0-t+Ct/Kel 其中，Ct＝對(duì)于那種治療的最后觀測(cè)到的非零濃度，AUC0-t＝從時(shí)間零至對(duì)于該分析物的最后非零濃度的時(shí)間的AUC，以及Kel＝消除速率常數(shù)。
AUCt/inf根據(jù)AUC0-t(或AUC0-τ)與AUC0-inf的比值來計(jì)算。
總清除率和腎臟清除率-估計(jì)了P5P的總體清除率，并根據(jù)劑量/AUC0-inf進(jìn)行計(jì)算。估計(jì)所有分析物的腎臟清除率，并根據(jù)Ae0-t/AUC0-inf進(jìn)行計(jì)算，其中Ae0-t是從0.000 h至24.0 h的累積尿排泄。
分布體積-基于終點(diǎn)階段的分布體積(Vβ)根據(jù)P5P的劑量/(Kel*AUC0-inf)以及PAL和PA的Ae0-t/(Kel*AUC0-inf)計(jì)算。對(duì)于第4天的數(shù)據(jù)，使用AUC0-τ替換AUC0-inf。
平均滯留時(shí)間-平均滯留時(shí)間根據(jù)AUMC/AUC0-inf進(jìn)行計(jì)算。
累積率-對(duì)于第4天的數(shù)據(jù)，理論累計(jì)率(使用研究的給藥間隔并且假設(shè)劑量-線性動(dòng)力學(xué))根據(jù)1/[1-e(-Kel*τ)]進(jìn)行計(jì)算。
統(tǒng)計(jì)分析-對(duì)于所有的分析物，均對(duì)AUC0-t、AUC0-inf和Cmax的轉(zhuǎn)化數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析。所有的ANOVA均完成了SAS(視窗下運(yùn)行的release 6.12)的常用線性模型程序(GLM)。該模型包括受試者和治療日。報(bào)告平方(I型、II型、III型和IV型)的所有總數(shù)。對(duì)照剩余均方差(residual mean square error)檢驗(yàn)受試者和治療日效果。概率(P)值衍生自III型的平方和。對(duì)于所有的分析物，如果與“F”相關(guān)的概率小于0.050，則認(rèn)為該效果是統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的?；诔蓪?duì)比較ln轉(zhuǎn)化的AUC0-t、AUC0-inf和Cmax數(shù)據(jù)，測(cè)定最小均方(least square mean)(根據(jù)公式“e(X-Y)×100”計(jì)算)的比例以及l(fā)n-轉(zhuǎn)化的AUC0-t、AUC0-inf和Cmax的90％幾何置信區(qū)間。最后，還確定了受試者體內(nèi)(intrasubject)的CV。
藥物動(dòng)力學(xué)和統(tǒng)計(jì)問題分析 非分區(qū)藥物動(dòng)力學(xué)分析 用于本研究的主要非分區(qū)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)為AUC0-t、AUC0-inf和Cmax，而次要藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)為AUCt/inf、Tmax、Kel、Tl/2el、CLT(用于P5P)、CLR、Vβ、MRT以及Ae0-t。對(duì)于第4天的數(shù)據(jù)，還計(jì)算下列參數(shù)Cmin、Cavg、Fl(％)、AUC0-τ以及累計(jì)率。
第1天和第4天的用于藥物動(dòng)力學(xué)分析的血樣，在每一天給藥前和給藥后0.083、0.167、0.250、0.500、0.750、1.00、1.50、2.00、3.00、4.00、6.00、8.00、12.0，和24.0小時(shí)收集。在8個(gè)時(shí)間間隔第1天和第4天給藥后的0.000-4.00、4.00-8.00、8.00-12.0和12.0-24.0小時(shí)收集尿液樣品。
按照治療日，將每個(gè)受試者在每次取樣時(shí)間測(cè)得的基線校正P5P的血漿濃度示于表9和表10中，未校正P5P的血漿濃度示于表11和表12中，PAL的血漿濃度示于表13和表14，以及PA的血漿濃度示于表14和表15中。對(duì)于基線校正的P5P，圖10-11給出了其在取樣期間的平均血漿水平曲線(未轉(zhuǎn)化水平以及l(fā)n-轉(zhuǎn)化的水平)，圖12-13給出了未校正P5P的相應(yīng)水平，圖14-15給出了PAL的相應(yīng)水平，以及圖16-17給出了PA的相應(yīng)水平。ln-轉(zhuǎn)化的數(shù)據(jù)圖中的線表示用來估計(jì)Kel的回歸線。
表9-P5P(校正的)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié) 表10-P5P(校正)的非分區(qū)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié) 1利用最小均方，根據(jù)公式e(P5P(第4天)(B)-P5P(第1天)(A))×100計(jì)算。
2利用ln-轉(zhuǎn)化的數(shù)據(jù)的90％幾何置信區(qū)間 表11-P5P(未校正)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié) 表12-P5P(未校正)的非分區(qū)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié) 1利用最小均方，根據(jù)公式e(P5P(第4天)(B)-P5P(第1天)(A))×100計(jì)算。
2利用ln-轉(zhuǎn)化的數(shù)據(jù)的90％幾何置信區(qū)間 表13-PAL的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié) 表14-PAL的非分區(qū)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié) 1利用最小均方，根據(jù)公式e(PAL(第4天)(B)-PAL(第1天)(A))×100計(jì)算。
2利用ln-轉(zhuǎn)化的數(shù)據(jù)的90％幾何置信區(qū)間 表15-PA的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié) 表16-PA的非分區(qū)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié) 1利用最小均方，根據(jù)公式e(PA(第4天)(B)-PA(第1天)(A))×100計(jì)算。
2利用ln-轉(zhuǎn)化的數(shù)據(jù)的90％幾何置信區(qū)間 對(duì)于每個(gè)受試者根據(jù)治療日計(jì)算的非分區(qū)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)示于表10、表12、表14和表16中，用于校正和未校正的P5P、PAL和PA。
主要參數(shù) 對(duì)于每個(gè)受試者和分析物，均計(jì)算濃度-時(shí)間曲線(0-t小時(shí))下的面積。P5P(基線校正)結(jié)果示于表9和表10中。AUC0-t的平均值(％CV)在第1天為277978.56ng·h/mL(19.72％)，而第4天為302742.00ng·h/mL(28.39％)。P5P(未校正)結(jié)果示于表11和表12中。AUC0-t的平均值(％CV)在第1天為278624.79ng·h/mL(19.85％)，而第4天為303393.72ng·h/mL(28.51％)。PAL結(jié)果示于表13和表14中。AUC0-t的平均值(％CV)在第1天為22292.93ng·h/mL(15.31％)，而第4天為29682.94ng·h/mL(16.92％)。PA結(jié)果示于表15和16中。AUC0-t的平均值(％CV)在第1天為20736.28ng·h/mL(17.29％)，而第4天為20704.80ng·h/mL(17.94％)。對(duì)ln-轉(zhuǎn)化的AUC0-t數(shù)據(jù)完成的ANOVA示于分別為P5P(基線校正)、P5P(未校正)、PAL和PA的表10、表12、表14和表16中。ANOVA未檢測(cè)到第4天和第1天之間P5P(基線校正和未校正)和PA的該參數(shù)的任何統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。ANOVA檢測(cè)到第4天和第1天之間PAL的該參數(shù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。還分別測(cè)定了P5P(基線校正)、P5P(未校正)、PAL和PA的最小均方比值、90％幾何置信區(qū)間以及受試者體內(nèi)CV。這些結(jié)果總結(jié)于表17中。
表17-AUC0-t的最小均方比值、90％幾何置信區(qū)間以及受試者體內(nèi)CV總結(jié) 計(jì)算了每一個(gè)受試者和分析物的濃度-時(shí)間曲線(0-無窮大)下的面積。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中，第1天的AUC0-inf平均值(％CV)為283108.04ng·h/mL(20.70％)，而第4天為311764.84ng·h/mL(29.09％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。第1天的AUC0-inf均值(％CV)是284071.57ng·h/mL(20.91％)，而第4天是312753.76ng·h/mL(29.27％)。PAL的結(jié)果示于表13中。第1天的AUC0-inf均值(％CV)是22444.06ng·h/mL(15.13％)，而第4天是30077.45ng·h/mL(1 6.66％)。PA的結(jié)果示于表15中。第1天的AUC0-inf均值(％CV)是21219.58ng·h/mL(17.37％)，而第4天是21097.95ng·h/mL(17.13％)。
ANOVA未檢測(cè)到第4天和第1天之間P5P(基線校正和未校正)和PA的該參數(shù)的任何統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。ANOVA檢測(cè)到第4天和第1天之間PAL的該參數(shù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。另外，分別測(cè)定了P5P(基線校正)、P5P(未校正)、PAL和PA的最小均方比值、90％幾何置信區(qū)間以及受試者體內(nèi)CV。這些結(jié)果總結(jié)于表18中。
表18-AUC0-inf的最小均方比值、90％幾何置信區(qū)間以及受試者體內(nèi)CV總結(jié) 計(jì)算了對(duì)于每一個(gè)受試者和分析物的峰值或最大血漿濃度。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中，第1天的Cmax均值(％CV)是190536ng/mL(14.69％)，而第4天是213392ng/mL(21.92％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中，第1天的Cmax均值(％CV)是190564ng/mL(14.69％)，而第4天是213419ng/mL(21.92％)。PAL的結(jié)果示于表13中。第1天的Cmax均值(％CV)是7629ng/mL(79.63％)，而第4天是6902ng/mL(42.54％)。PA的結(jié)果示于表15中。第1天的Cmax均值(％CV)是4362ng/mL(18.27％)，而第4天是4238ng/mL(18.20％)。ANOVA未檢測(cè)到對(duì)于所有分析物的該參數(shù)在治療之間的任何統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。還分別測(cè)定了P5P(基線校正)、P5P(未校正)、PAL和PA的最小均方比值、90％幾何置信區(qū)間以及受試者體內(nèi)CV。這些結(jié)果總結(jié)于表19中。
表19-Cmax的最小均方比值、90％幾何置信區(qū)間以及受試者體內(nèi)CV總結(jié) 第1天和第4天共有的次要參數(shù) 計(jì)算了對(duì)于每一個(gè)受試者和每一個(gè)分析物的AUC0-t與AUC0-inf的比率。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中。第1天的AUCt/inf均值(％CV)是98.33％(0.96％)，而第4天是97.23％(1.05％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。第1天的AUCt/inf均值(％CV)是98.24％(1.03％)，而第4天是97.1 4％(1.07％)。PAL的結(jié)果示于表13中。第1天的AUCt/inf均值(％CV)是99.31％(0.41％)，而第4天是98.66％(0.89％)。PA的結(jié)果示于表15中。第1天的AUCt/inf均值(％CV)是97.73％(1.24％)，而第4天是98.01％(1.45％)。所有分析物在第1天和第4天的平均AUCt/inf均大于80％，表明取樣持續(xù)時(shí)間是充足的。
計(jì)算了對(duì)于每一個(gè)受試者和每一個(gè)分析物(除P5P基線校正的數(shù)據(jù))的尿液(0-t小時(shí))中排泄總量。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。第1天的Ae0-t均值(％CV)是848625ng(72.13％)，而第4天是558650ng(74.20％)。PAL的結(jié)果示于表13中。第1天的Ae0-t均值(％CV)是18583712ng(37.13％)，而第4天是21011635ng(21.38％)。PA的結(jié)果示于表15中。第1天的Ae0-t均值(％CV)是172950596ng(38.45％)，而第4天是225885311ng(20.95％)。
測(cè)定了對(duì)于每一個(gè)受試者和分析物達(dá)到峰值濃度的時(shí)間。P5P(基線校正和未校正)的結(jié)果分別總結(jié)于表9和表11中。第1天的Tmax平均值(％CV)是0.089h(45.25％)，而第4天是0.081h(41.92％)。PAL的結(jié)果總結(jié)于表13中。第1天的Tmax平均值(％CV)是0.525h(19.45％)，而第4天是0.691h(27.22％)。PA的結(jié)果總結(jié)于表15中。第1天的Tmax平均值(％CV)是0.611h(35.24％)，而第4天是0.528h(19.13％)。
計(jì)算了對(duì)于每一個(gè)受試者和分析物的消除速率常數(shù)。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中。第1天的Kel均值(％CV)是0.1381h-1(16.38％)，而第4天是0.1183h-1(14.41％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。第1天的Kel均值(％CV)是0.1360h-1(16.60％)，而第4天是0.1170 h-1(14.35％)。PAL的結(jié)果示于表13中。第1天的Kel均值(％CV)是0.2064h-1(12.70％)，而第4天是0.1775h-1(13.27％)。PA的結(jié)果示于表15中。第1天的Kel均值(％CV)是0.3092h-1(17.01％)，而第4天是0.2547h-1(20.59％)。
計(jì)算了對(duì)于每一個(gè)受試者和治療日的表觀半衰期。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中。第1天的T1/2el均值(％CV)是5.14h(17.65％)，而第4天是5.96h(14.3 3％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。第1天的T1/2el均值(％CV)是5.22h(18.00％)，而第4天是6.02h(14.14％)。PAL的結(jié)果示于表13中。第1天的T1/2el均值(％CV)是3.40h(12.11％)，而第4天是3.96h(13.56％)。PA的結(jié)果示于表15中。第1天的T1/2el均值(％CV)是2.30h(19.38％)，而第4天是2.83h(23.55％)。
計(jì)算了對(duì)于每一個(gè)受試者的P5P(基線校正和未校正)總的體清除率。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中。第1天的CLT均值(％CV)是2.55L/h(14.75％)，而第4天是2.42L/h(15.82％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。第1天的CLT均值(％CV)是2.55L/h(14.92％)，而第4天是2.42L/h(15.92％)。
計(jì)算了對(duì)于每一個(gè)受試者和分析物(基線校正的P5P除外)的腎清除率。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。第1天的CLR均值(％CV)是0.00279 L/h(65.53％)，而第4天是0.00174L/h(44.71％)。PAL的結(jié)果示于表13中。第1天的CLR均值(％CV)是0.85952L/h(43.20％)，而第4天是0.72392L/h(27.23％)。PA的結(jié)果示于表15中。第1天的CLR均值(％CV)是8.61246 L/h(49.20％)，而第4天是10.75339 L/h(20.36％)。
計(jì)算了對(duì)于每一個(gè)受試者和分析物基于終點(diǎn)階段的分布體積。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中。第1天的Vβ均值(％CV)是18.59 L(10.05％)，而第4天是20.75L(19.65％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。第1天的Vβ均值(％CV)是18.82L(10.03％)，而第4天是20.92L(19.36％)。PAL的結(jié)果示于表13中。第1天的Vβ均值(％CV)是4.35L(50.05％)，而第4天是4.21L(38.82％)。PA的結(jié)果示于表15中。第1天的Vβ均值(％CV)是28.61 L(49.49％)，而第4天是44.45 L(33.63％)。
計(jì)算了對(duì)于每一個(gè)受試者和分析物的平均滯留時(shí)間。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中。第1天的MRT均值(％CV)是3.40h(20.68％)，而第4天是3.99h(16.84％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。第1天的MRT均值(％CV)是3.45h(21.20％)，而第4天是4.03h(16.93％)。PAL的結(jié)果示于表13中。第1天的MRT均值(％CV)是4.06h(17.24％)，而第4天是4.74h(20.29％)。PA的果示于表15中。第1天的MRT均值(％CV)是3.85h(15.94％)，而第4天是4.24h(21.69％)。
第4天的次要參數(shù)特性 第4天時(shí)得到每一個(gè)受試者和分析物的最低濃度或波谷濃度(通過濃度，through concentration)。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中。Cmin均值(％CV)是946ng/mL(61.50％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。Cmin均值(％CV)是974ng/mL(61.89％)。PAL的結(jié)果示于表13中。Cmin均值(％CV)是56.8ng/mL(49.95％)。PA的結(jié)果示于表15中。Cmin均值(％CV)是12.9ng/mL(194.30％)。
第4天時(shí)得到每一個(gè)受試者和分析物的平均濃度。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中。Cavg均值(％CV)是12614.42ng/mL(28.40％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。Cavg均值(％CV)是12641.59ng/mL(28.52％)。PAL的結(jié)果示于表13中。Cavg均值(％CV)是1236.81ng/mL(16.92％)。PA的結(jié)果示于表15中。Cavg均值(％CV)是885.04ng/mL(16.25％)。
第4天時(shí)得到每一個(gè)受試者和分析物的波動(dòng)百分比。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中。Fl(％)均值(％CV)是1734.69％(21.82％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。Fl(％)均值(％CV)是1731.62％(21.88％)。PAL的結(jié)果示于表13中。Fl(％)均值(％CV)是537.81％(28.22％)。PA的結(jié)果示于表15中。Fl(％)均值(％CV)是482.53％(17.05％)。
第4天時(shí)計(jì)算了每一個(gè)受試者和分析物的濃度-時(shí)間曲線(0-t(tau))下的面積。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中。AUC0-τ均值(％CV)是302742.00ng·h/mL(28.39％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。AUC0-τ均值(％CV)是303393.72ng·h/mL(28.51％)。PAL的結(jié)果示于表13中。AUC0-τ均值(％CV)是29682.94ng·h/mL(16.92％)。PA的結(jié)果示于表15中。AUC0-τ均值(％CV)是21240.85ng·h/mL(16.25％)。
第4天時(shí)計(jì)算了每一個(gè)受試者和分析物的理論累積率。P5P(基線校正)的結(jié)果示于表9中。該累積率均值(％CV)是1.07(2.62％)。P5P(未校正)的結(jié)果示于表11中。該累積率均值(％CV)是1.07(2.63％)。PAL的結(jié)果示于表13中。該累積率均值(％CV)是1.02(0.91％)。PA的結(jié)果示于表15中。該累積率均值(％CV)是1.00(0.58％)。
非分區(qū)藥物動(dòng)力學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)論 ANOVA未檢測(cè)到P5P(基線校正和未校正)和PA的ln-轉(zhuǎn)化的AUC0-t、AUC0-inf和Cmax在治療日之間任何統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。
利用ANOVA，檢測(cè)到PAL的ln-轉(zhuǎn)化的AUC0-t、AUC0-inf在治療日之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異，但未檢測(cè)到Cmax的顯著性差異。
所有分析物的平均AUCt/inf均大于80％，表明取樣持續(xù)時(shí)間足夠良好地表征其動(dòng)力學(xué)。AUC0-t、AUC0-inf和Cmax的受試者體內(nèi)CV對(duì)于P5P(基線校正)分別是7.56％、7.14％和9.84％；對(duì)于P5P(未校正)分別是7.54％、7.10％和9.84％；對(duì)于PAL分別是3.12％、3.18％和21.10％；而對(duì)于PA分別是3.39％、4.20％和2.71％。
本試驗(yàn)的最小均方與ln-轉(zhuǎn)化的AUC0-t、AUC0-inf和Cmax的參照產(chǎn)物的比率的90％幾何置信區(qū)間的結(jié)果，在P5P(基線校正和未校正)和PA而不是PAL的80.00％-125.00％的范圍內(nèi)。對(duì)于P5P和PA，這些結(jié)果表明根據(jù)每天一次的給藥方案，可能不會(huì)發(fā)生累積并且比率(速率，rate)變化以及吸收(對(duì)于P5P)或生物轉(zhuǎn)化的程度(對(duì)于PA)應(yīng)該不明顯。對(duì)于PAL，盡管理論累積率接近1，但觀察單個(gè)濃度-時(shí)間分布，很明顯在每天一次給藥P5P的四天后，發(fā)生了累積。
安全性評(píng)估 在本研究的過程中，6名受試者發(fā)生了共40次不良事件。3名(50.0％的受試者)受試者報(bào)告了注射部位的炎癥。然而，經(jīng)醫(yī)學(xué)助理研究者判斷，這些不良事件與程序有關(guān)，而與本研究的給藥方法不相關(guān)。在本研究中報(bào)告的可能相關(guān)的其余不良事件中，一個(gè)以上的受試者報(bào)告了以下不良事件惡心、眩暈(感到頭暈和眩暈)、感覺異常(感覺像別針或針扎在大拇指(右手)末端以及后頸有刺麻感、以及感覺寒冷(右手))，尿液中出現(xiàn)白細(xì)胞。僅有一個(gè)受試者報(bào)告其它的不良事件低血紅蛋白、感覺焦慮、導(dǎo)管部位瘀傷(右手)、尿中出現(xiàn)紅細(xì)胞、大腿肌肉抽筋、血液中中性粒細(xì)胞低、疼痛(雙腿)、背部下方疼痛、后頸疼痛、胸兩側(cè)丘疹、嘴里唾液多、身體出汗、暈厥、嘴里味道異常以及感覺發(fā)熱。
惡心、眩暈(感到頭暈和眩暈)以及嘴里味覺異常是預(yù)測(cè)到的不良事件。2名受試者(33.3％受試者)報(bào)告了眩暈(感到頭暈和眩暈)。3名受試者(50.0％受試者)報(bào)告了惡心。1個(gè)受試者(16.7％受試者)報(bào)告了嘴里味道異常；三名受試者(01到03號(hào)受試者)的最高嚴(yán)重度為輕微，一名受試者(04號(hào)受試者)為適度。在本研究的過程中，沒有人報(bào)告腹瀉或嘔吐。
兩名受試者觀察到尿液(膿尿)中白細(xì)胞(WBC)升高的臨床顯著的實(shí)驗(yàn)室結(jié)果。在篩查時(shí)以及第1到3天，有一名受試者(#03)的白細(xì)胞酯酶為陰性結(jié)果(因?yàn)榘准?xì)胞酯酶是陰性，當(dāng)時(shí)未實(shí)施顯微鏡評(píng)估)。第4天，該受試者表現(xiàn)出白細(xì)胞酯酶+以及WBC為3-5/HPF；第5天，白細(xì)胞酯酶保持+，但WBC升到10-20/HPF。約11天后進(jìn)行的隨訪實(shí)驗(yàn)為正常結(jié)果。另一個(gè)受試者(#06)在篩查時(shí)存在痕量白細(xì)胞酯酶和WBC為3-5/HPF，第1天白細(xì)胞酯酶為+并且WBC為0-2/HPF；第2天白細(xì)胞酯酶為+，并且WBC為陰性；然而，在第1天和第3天，白細(xì)胞酯酶的結(jié)果為陰性。第4天，該受試者表現(xiàn)出白細(xì)胞酯酶為++，而WBC為10-20/HPF；第5天，白細(xì)胞酯酶降至+，而WBC降至5-10/HPF。
結(jié)論 在本研究過程中，未報(bào)告嚴(yán)重、重大或明顯的不良事件。根據(jù)本研究臨床部分的結(jié)論，來自研究后實(shí)驗(yàn)室檢查、體檢、生命體征測(cè)定以及ECG的結(jié)果確認(rèn)了受試者的健康狀態(tài)無明顯改變?？傊?，在該臨床試驗(yàn)中建立的本制劑的安全模式(分布)表明該產(chǎn)品耐受良好，無嚴(yán)重或持續(xù)的治療相關(guān)影響。
本試驗(yàn)的最小均方與ln-轉(zhuǎn)化的AUC0-t、AUC0-inf和Cmax的參照產(chǎn)物的比率的90％幾何置信區(qū)間的結(jié)果，在P5P(基線校正和未校正)和PA而不是PAL的80.00％-125.00％的范圍內(nèi)。對(duì)于P5P和PA，這些結(jié)果表明每天一次的給藥方案，可能不會(huì)發(fā)生累積并且比率(速率，rate)變化以及吸收(對(duì)于P5P)或生物轉(zhuǎn)化的程度(對(duì)于PA)應(yīng)該不顯著。對(duì)于PAL，盡管理論累積率接近1，但觀察單個(gè)濃度-時(shí)間分布，很明顯在每天一次給藥P5P的四天后發(fā)生了累積。
權(quán)利要求
1.一種5’-磷酸吡哆醛的凍干制劑，其通過凍干濃度高于添加物濃度的5’-磷酸吡哆醛和氫氧化鈉的冷凍無菌水溶液來制備。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的凍干制劑，其中，所述溶液的pH在7.0和7.3之間。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的凍干制劑，進(jìn)一步包括甘露醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約1至25％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約1至15％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約1至10％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約5％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約0.1至10％w/w的氫氧化鈉。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約0.5至5％w/w的氫氧化鈉。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約0.5至3％w/w的氫氧化鈉。
11.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約1.5％w/w的氫氧化鈉。
12.根據(jù)權(quán)利要求3至11中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約0.1至15％w/w的甘露醇。
13.根據(jù)權(quán)利要求3至11中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約0.5至10％w/w的甘露醇。
14.根據(jù)權(quán)利要求3至11中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約0.5至5％w/w的甘露醇。
15.根據(jù)權(quán)利要求3至11中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約3％w/w的甘露醇。
16.根據(jù)權(quán)利要求3至15中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約5％w/w的5’-磷酸吡哆醛、約1.5％w/w的所述氫氧化鈉以及約2.8％w/w的所述甘露醇。
17.根據(jù)權(quán)利要求3至16中任一項(xiàng)所述的凍干制劑，其中，所述無菌溶液包含約250mg的5’-磷酸吡哆醛、約80.5mg的氫氧化鈉以及約150mg的甘露醇。
18.一種含5，-磷酸吡哆醛的可注射制劑，其利用適合于靜脈給藥的無菌載體由根據(jù)權(quán)利要求1至17中任一項(xiàng)所述的凍干制劑重組而成。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的可注射制劑，其中，所述無菌載體是注射用水。
20.一種用于制備5’-磷酸吡哆醛凍干制劑的方法，包括以下步驟
(a)制備包含5’-磷酸吡哆醛和氫氧化鈉的無菌溶液，所述溶液具有在7.0和7.3之間的pH；
(b)冷凍所述溶液；以及
(c)凍干所述冷凍的溶液。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中，步驟(a)進(jìn)一步包括在所述5’-磷酸吡哆醛和氫氧化鈉的無菌溶液中溶入甘露醇。
22.根據(jù)權(quán)利要求20或21所述的方法，其中，所述無菌溶液包含的5’-磷酸吡哆醛濃度高于添加物濃度。
23.根據(jù)權(quán)利要求20至22中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約1至25％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
24.根據(jù)權(quán)利要求20至22中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約1至15％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
25.根據(jù)權(quán)利要求20至22中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約1至10％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
26.根據(jù)權(quán)利要求20至22中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約5％w/w的5’-磷酸吡哆醛。
27.根據(jù)權(quán)利要求20至26中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約0.1至10％w/w的氫氧化鈉。
28.根據(jù)權(quán)利要求20至26中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約0.5至5％w/w的氫氧化鈉。
29.根據(jù)權(quán)利要求20至26中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約0.5至3％w/w的氫氧化鈉。
30.根據(jù)權(quán)利要求20至26中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約1.5％w/w的氫氧化鈉。
31.根據(jù)權(quán)利要求21至30中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約0.1至15％w/w的甘露醇。
32.根據(jù)權(quán)利要求21至30中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約0.5至10％w/w的甘露醇。
33.根據(jù)權(quán)利要求21至30中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約0.5至5％w/w的甘露醇。
34.根據(jù)權(quán)利要求21至30中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約3％w/w的甘露醇。
35.根據(jù)權(quán)利要求21至30中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約5％w/w的5’-磷酸吡哆醛、約1.5％w/w的所述氫氧化鈉以及約2.8％w/w的所述甘露醇。
36.根據(jù)權(quán)利要求21至30中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述無菌溶液包含約250mg的5’-磷酸吡哆醛、約80.5mg的氫氧化鈉以及約150mg的甘露醇。
37.一種試劑盒，用于制備根據(jù)權(quán)利要求18所述的可注射制劑，包含用于制備所述可注射制劑的說明書以及分裝在容器中的
(a)根據(jù)權(quán)利要求1至17中任一項(xiàng)所述的5’-磷酸吡哆醛的凍干制劑；以及
(b)適合于靜脈給藥的無菌載體。
38.根據(jù)權(quán)利要求37所述的試劑盒，其中，所述無菌載體是注射用水。
39.根據(jù)權(quán)利要求37或38所述的試劑盒，進(jìn)一步包括用于所述可注射制劑的容器，確定所述容器的尺寸以有助于制備所選體積和濃度的所述制劑。
40.根據(jù)權(quán)利要求1至17中任一項(xiàng)所述的凍干制劑在用于制備適合于對(duì)需要用5’-磷酸吡哆醛治療的患者給藥的可注射制劑中的應(yīng)用。
41.一種治療需要用5’-磷酸吡哆醛治療的患者的方法，包括靜脈給予根據(jù)權(quán)利要求18或19所述的可注射制劑。
42.一種降低與口服5’-磷酸吡哆醛或其藥用鹽相關(guān)的惡心和嘔吐發(fā)生率的方法，所述方法包括給予有效量的根據(jù)權(quán)利要求18或19所述的可注射制劑的步驟。
43.根據(jù)權(quán)利要求18或19所述的可注射制劑在用于降低與口服5’-磷酸吡哆醛或其藥用鹽相關(guān)的惡心和嘔吐發(fā)生率中的應(yīng)用。
44.一種用于治療經(jīng)受外科手術(shù)且需要用5’-磷酸吡哆醛治療的患者的方法，包括靜脈給予根據(jù)權(quán)利要求18或19所述的可注射制劑。
45.根據(jù)權(quán)利要求44所述的方法，其中，所述外科手術(shù)是冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(CABG)或經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)(PCI)。
46.根據(jù)權(quán)利要求1至17中任一項(xiàng)所述的凍干制劑在用于制備適合于對(duì)經(jīng)受外科手術(shù)且需要用5’-磷酸吡哆醛治療的患者給藥的可注射制劑中的應(yīng)用。
47.根據(jù)權(quán)利要求46所述的應(yīng)用，其中，所述外科手術(shù)是冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(CABG)或經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)(PCI)。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種5’-磷酸吡哆醛的凍干制劑及其制備方法。本發(fā)明還提供了一種由該凍干制劑重組的5’-磷酸吡哆醛的可注射制劑。本發(fā)明進(jìn)一步提供了凍干制劑以及可注射制劑的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K31/675GK101175498SQ200680017039
公開日2008年5月7日 申請(qǐng)日期2006年3月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月30日
發(fā)明者阿爾伯特·弗里森 申請(qǐng)人:麥迪庫瑞國(guó)際公司