專利名稱：一種提取分離高純度柴胡皂苷a的制備工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于中藥部位或成分的提取分離方法，具體而言，本發(fā)明涉及中藥柴胡中有效成 分柴胡皂苷A的提取分離制備方法。
背景技術：
柴胡為常用中藥，在對全國330位國家級名中醫(yī)進行臨床經驗的調査研究發(fā)現(xiàn)，各名中
醫(yī)擅長使用的藥物序列中，柴胡位居第三。柴胡具有和解退熱，疏肝解郁、升舉陽氣之功效。
柴胡主要有效成分為柴胡皂苷及柴胡揮發(fā)油。據文獻研究發(fā)現(xiàn)在柴胡皂苷中，柴,皂苷A、 D含量最高，藥理作用最為顯著，具有明顯的抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛及保肝等作用；柴胡皂苷B 藥理作用較弱；柴胡皂苷C在體內無藥理活性?，F(xiàn)常采用水提取、醇提取、溶劑萃取、簡單 柱分離等對柴胡皂苷A進行提取分離，由于技術落后，市售品柴胡皂苷A的含量僅有10%， 難以滿足需要，本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術中的不足，提供了一種提取分離高純度柴胡皂苷A的 制備工藝。

發(fā)明內容
本發(fā)明的貝的是提供一種制備高純度的柴胡皂苷A的提取分離方法。成品中柴胡皂苷A 含量高，采用高效液相法測定柴胡皂苷A為979i以上。 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案
取柴胡藥材，粉碎過10目篩，加入5 25倍量的提取溶劑1，加熱提取1 4次，每次 0.5 3小時，濾過，合并濾液，減壓濃縮成相對密度1.10 1.20 (65"C測)的濃縮液，將 濃縮液置入大孔吸附樹脂分離柱中，采用濕法裝柱，用溶劑2洗滌樹脂柱至水洗液呈無色， 洗液棄去，用溶劑3以進行洗脫收集第1條色帶的洗脫液，減壓濃縮至相對密度1. 10 1. 20 (65'C測)的濃縮液。然后采用高速逆流色譜分離濃縮液，在室溫下將系統(tǒng)l、系統(tǒng)2分別 置于兩個分液漏斗中振搖，放置，分別取上、下相，將上相作為固定相，下相作為流動相， 將固定相泵入色譜柱中，使柱中充滿固定相后，再讓儀器以800 1500r/miri轉動，同時將 流動相以0 5ml/min的流速泵入。待流動相從出液端流出且兩相在色譜中達到動態(tài)平衡后， 將樣品溶液注入色譜系統(tǒng)中，同時在出液端接紫外檢測器。在210nm波長處對流出液連續(xù)檢 測，與柴胡皂苷A標準圖譜對應，收集液蒸除溶劑，干燥，得樣品。
溶劑l包括但不限于水、乙醇、甲醇、丙酮等及各溶劑的混合溶劑。溶劑2包括但不限 于苯、乙醚、石油醚等及各溶劑的混合溶劑。溶劑3包括但不限于水、乙醇、甲醇、丙酮等
及各溶劑的混合溶劑。系統(tǒng)1包括但不限于水、甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、正己烷、環(huán)己垸、乙醚等各溶劑的混合溶劑。系統(tǒng)2包括但不限于水、甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、正己烷、環(huán)己烷、乙醚等各溶劑的混合溶劑。
具體實施方式
-為更好的理解本發(fā)明，下面通過具體的實施例進一步闡述本發(fā)明，但不應被理解為對本 發(fā)明有任何的限制。實施例1 :取柴胡藥材，粉碎過10目篩，加入10倍量的75%乙醇，加熱提取3次，每 次1小時，濾過，合并濾液，減壓濃縮成相對密度1.10 1.20 (65'C測)的濃縮液Z將濃縮 液置入大孔吸附樹脂分離柱中，采用濕法裝柱，用乙醚一石油醚=5: 3洗滌樹脂柱至水洗液 呈無色，洗液棄去，用95%乙醇以進行洗脫，收集第1條色帶的洗脫液，減壓濃縮至相對密 度1.10 L20 (65'C測)的濃縮液。然后采用高速逆流色譜分離濃縮液，在室溫下分別將系統(tǒng)i (乙醚-正丁醇-乙醇-水=5 : 3 : 7 : 5),系統(tǒng)2 (乙醚-丙酮-乙醇-水=3 : 4 : 6 : 4)置于兩個分液漏斗中振搖，放置，分別取上、下相，將上相作為固定相，下相作為流動相，將固定相泵入色譜柱中，使柱中充滿固定相后，再讓儀器以lOOOr/min轉動，同時將流動相以 1.8ml/min的流速泵入。待流動相從出液端流出且兩相在色譜中達到動態(tài)平衡后，將樣品溶 液注入色譜系統(tǒng)中，同時在出液端接紫外檢測器。在210nm波長處對流出液連續(xù)檢測，與柴 胡皂苷A標準圖譜對應，收集液蒸除溶劑，干燥，得樣品。實施例2 :取柴胡藥材，粉碎過10目篩，加入15倍量的65%乙醇，加熱提取2次，每 次1.5小時，濾過，合并濾液，減壓濃縮成相對密度1.10 1.20 (65'C測)的濃縮液，將濃 縮液置入大孔吸附樹脂分離柱中，采用濕法裝柱，用苯一石油醚=7: 3洗滌樹脂柱至水洗液 呈無色，洗液棄去，用85%乙醇以進行洗脫，收集第1條色帶的洗脫液，減壓濃縮至相對密 度1.10 1.20 (65'C測)的濃縮液。然后采用高速逆流色譜分離濃縮液，在室溫下4別將系統(tǒng)i (乙醚-乙醇-水=5 : 6 : 3),系統(tǒng)2 (氯仿-乙醇-水=3 :7:3)置于兩個分液漏斗中振搖，放置，分別取上、下相，將上相作為固定相，下相作為流動相，將固定相泵入色譜柱中，使 柱中充滿固定相后，再讓儀器以1200r/min轉動，同時將流動相以2. Oml/min的流速泵入。 待流動相從出液端流出且兩相在色譜中達到動態(tài)平衡后，將樣品溶液注入色譜系統(tǒng)中，同時 在出液端接紫外檢測器。在210nra波長處對流出液連續(xù)檢測，與柴胡皂苷A標準圖譜對應， 收集液蒸除溶劑，干燥，得樣品。實施例3片劑的制備處方柴胡皂苷A20 g 糊精 125g微晶纖維素25mg 羧乙基纖維素鈉28g硬脂酸鎂 2. 0 g將柴胡皂苷A、糊精、微晶纖維素、羧乙基纖維素鈉粉碎過80目篩，混均，加入75% 乙醇適量制軟材，過20目篩制粒。50'C干燥。干顆粒過18目篩整粒，加入處方量的硬脂 酸鎂，混合均勻，壓成1000片。實施例4膠囊劑的制備處方柴胡皂苷A20 g 淀粉 128g羧甲基淀粉鈉20g 羧乙基纖維素鈉30g硬脂酸鎂 2. 0 g將柴胡皂苷A、糊精、微晶纖維素、羧乙基纖維素鈉粉碎過80目篩，混均，加入70% 乙醇適量制軟材，過40目篩制粒。50'C干燥。干顆粒過40目篩整粒，加入處方量的硬脂 酸鎂，混合均勻，制成膠囊1000粒。實施例5 分散片的制備 處方柴胡皂苷A20 g微晶纖維素 70g羧乙基纖維素鈉30g淀粉 58g 羧甲基淀粉鈉20g 硬脂酸鎂 2. 0 g將柴胡皂苷A、糊精、微晶纖維素、羧乙基纖維素鈉粉碎過80目篩，混均，加入85% 乙醇適量制軟材，過20目篩制粒。50'C干燥。干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的硬脂 酸鎂，混合均勻，制成膠囊1000粒。實施例6軟膠囊的制備處方柴胡皂苷A20 g pEG400 140g蜂蠟40g 明膠 100g甘油 35g 水 100g稱取處方量明膠、甘油、水置煮膠罐中，加熱至80'C，攪拌2小時，將膠液抽真空，除 去氣泡，60。C保溫待用。將處方量pEG400、蜂蠟加熱溶化，混合均勻，加入處方量的柴胡皂苷A，混勻，測試混合油密度U。利用公式0.2 (g) +11 (g/ml) X16.23計算出量滴，將 膠液和混合好的內容物裝入制囊機中，溫度控制在45'C 50'C，用計算好的量滴進行灌裝。 用95%乙醇清洗灌裝好的軟膠囊。實施例7注射劑的制備處方柴胡皂苷A 2g 丙三醇 40 g注射用水 1000 ml稱取處方量丙三醇加入約400ml注射用水混勻，攪拌加入處方量的柴胡皂苷AZ混勻使 成澄清透明溶液，加入注射用水至1000ml，經0.22um微孔濾膜過濾，分裝封口，于120 °C 流通蒸汽滅菌30分鐘即得。實施例8注射劑的制備處方柴胡皂苷A 2g 丙三醇 40 g注射用水 1000 ml 稱取處方量丙三醇加入約400ml注射用水混勻，攪拌加入處方量的柴胡皂苷A，混勻使 成澄清透明溶液，加入注射用水至1000ml，經0.22iim微孔濾膜過濾，分裝封口，于120 °C 流通蒸汽滅菌30分鐘即得。 實施例9 緩釋片的制備處方柴胡皂苷A 20g 玉米淀粉 108g微晶纖維素20g 羥乙基纖維素L型5g羥乙基纖維素H型45g 硬脂酸鎂2g將柴胡皂苷A溶于適量乙醇中，與玉米淀粉、微晶纖維素、羥乙基纖維素混合，以200r/min 的轉速攪拌3min。加入適量蒸餾水，再攪拌2min制成顆粒，干燥，壓成1000片。
權利要求
1、一種制備高純度的柴胡皂苷A的提取分離工藝及柴胡皂苷A與藥學上可以接受的藥物載體混合形成的藥物組合物。其提取分離工藝特征在于將柴胡藥材，粉碎過10目篩，加入5～25倍量的提取溶劑1，加熱提取1～4次，每次0.5～3.5小時，濾過，合并濾液，減壓濃縮成相對密度1.10～1.20(65℃測)的濃縮液，濃縮液先后采用大孔樹脂柱色譜分離及高速逆流色譜分離制備高濃度的柴胡皂苷A，其成品中柴胡皂苷A含量按重量百分比計算為97％以上。其藥物組合物特征在于所述的柴胡皂苷A與藥學上可以接受的藥物載體混合形成的藥物組合物。
2、 權利要求1所述大孔樹脂柱色譜分離，其特征在于采用濕法裝柱，將濃縮液置入大孔吸附 樹脂柱中，用溶劑2洗滌樹脂柱至水洗液呈無色，洗液棄去，用溶劑3以進行洗脫，收集第 l條色帶的洗脫液，減壓濃縮至相對密度1.10 1.20 (65'C測)。
3、 權利要求1所述高速逆流色譜分離，其特征在于在室溫下將系統(tǒng)l、系統(tǒng)2分別置于兩個 分液漏斗中振搖，放置，分別取上、下相，將上相作為固定相，下相作為流動相，將固定相 泵入色譜柱中，使柱中充滿固定相后，再讓儀器以800 1500r/min轉動，同時將流動相以0 5ml/min的流速泵入。待流動相從出液端流出且兩相在色譜中達到動態(tài)平衡后，將樣品溶液 注入色譜系統(tǒng)中，同時在出液端接紫外檢測器。在210nm波長處對流出液連續(xù)檢測，與柴胡 皂苷A標準圖譜對應，收集液蒸除溶劑，干燥，得樣品。
4、 權利要求1所述溶劑1包括但不限于水、乙醇、甲醇、丙酮等及各溶劑的混合溶劑。
5、 權利要求2所述溶劑2包括但不限于苯、乙醚、石油醚等及各溶劑的混合溶劑。
6、 權利要求2所述溶劑3包括但不限于水、乙醇、甲醇、丙酮等及各溶劑的混合溶劑。
7、 權利要求3所述系統(tǒng)1包括但不限于水、甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、正己烷、 環(huán)己烷、乙醚等各溶劑的混合溶劑。
8、 權利要求3所述系統(tǒng)2包括但不限于水、甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、正己烷、 環(huán)己烷、乙醚等各溶劑的混合溶劑。
9、 權利要求1的藥物組合物包括但不限于丸劑、散劑、顆粒劑、片劑、分散片、滴丸劑、 膠囊劑、口服液、糖槳劑、軟膠囊劑、凝膠劑、軟膏劑、橡膠膏劑、巴布劑、貼劑、滴鼻劑、 滴眼劑、注射劑、氣霧劑、噴霧劑、栓劑、橡膠膏劑、緩釋制劑、速釋制劑、控釋制劑、靶 向給藥制劑。
10、 權利要求9所述的緩釋制劑、速釋制劑、控釋制劑、靶向給藥制劑為柴胡皂苷A與藥學 上可以接受的藥物載體混合形成的可用于口服、外用、注射用等不同給藥途徑的各種制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種提取分離高純度的柴胡皂苷A的制備工藝及柴胡皂苷A與藥學上可以接受的藥物載體混合形成的藥物組合物。柴胡皂苷A的制備工藝其特征在于將柴胡藥材，粉碎，加入適量溶劑提取，濾過，濃縮，濃縮液先后采用大孔樹脂柱色譜及高速逆流色譜進行分離制備高濃度的柴胡皂苷A。本發(fā)明工藝穩(wěn)定，成品中柴胡皂苷A含量高，采用高效液相法測定柴胡皂苷A為97％以上。
文檔編號A61K125/00GK101333240SQ200710015978
公開日2008年12月31日 申請日期2007年6月25日 優(yōu)先權日2007年6月25日
發(fā)明者曉 于, 任海勇, 蓉 孫, 尹建偉, 蓋新光, 艷 韓 申請人:蓉 孫