專利名稱：：端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物、制備方法、載藥納米膠束及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物，以及該共聚物的制備方法及載藥納米膠束及應(yīng)用。技術(shù)背景近年來，兩親性高分子形成的自組裝體系由于在催化劑、藥物控制釋放體系、微反應(yīng)器、自組裝材料等領(lǐng)域潛在的應(yīng)用前景而引起人們廣泛的關(guān)注和研究興趣。其中，以兩親性嵌段共聚物膠束為藥物載體的研究仍是目前的熱點之一。通過調(diào)控共聚物中親/疏水鏈段長度及自組裝條件，可得到直徑約為10-100nm的膠束。當(dāng)作為藥物載體用于系統(tǒng)給藥時，這類尺寸小，具有親水性外殼的高分子膠束可有效減少或避免快速的腎臟清除和被網(wǎng)狀內(nèi)皮組織(RES)吞噬的幾率，從而達到較長的循環(huán)周期，并通過增滲作用(EPReffect)促進其在腫瘤組織的富集，達到被動靶向的目的。另外，與常規(guī)使用小分子表面活性劑的方法相比，高分子膠束還具有臨界聚集濃度較低，穩(wěn)定性好，對疏水藥物的容載能力高等特點。目前，用于藥物控釋載體研究的兩親性嵌段共聚物研究較多的是聚酯/聚乙二醇類嵌段共聚物。聚乙二醇被作為親水鏈段引入生物降解型聚酯鏈中。聚乙二醇與聚乳酸共聚形成的聚乳酸/聚乙二醇嵌段共聚物在水溶液中能形成殼核結(jié)構(gòu)的納米微球，殼層為親水性的聚乙二醇鏈段，它可以使納米微球避免被人體網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)及肝、脾、腎等器官識別捕獲，并具有較長的血液循環(huán)時間。從藥物活性角度分析，由聚乙二醇形成的微環(huán)境也有利于多肽和蛋白質(zhì)藥物在儲存和給藥過程中保持其活性。聚合物降解后，親水的聚乙二醇可通過腎臟排出體外。因此這種兩親性嵌段共聚物載藥納米粒子在多肽、蛋白質(zhì)類藥物的非腸胃給藥控制系統(tǒng)中有很大的應(yīng)用潛力。對于高分子膠束藥物釋放體系而言，一個重要的問題是如何定時、定點、定量地釋放藥物。耙向性高分子藥物輸送體系是解決該問題的重要而有效的途徑之一。而具有很多優(yōu)點的聚酯/聚乙二醇類嵌段共聚物并不適合作為靶向性藥物載體。因為，其缺乏可修飾位點無法連接一些具有生物活性的靶向小分子或多肽，而其唯一的端羥基基團卻處于疏水性鏈段-聚乳酸中，因此即使連接上靶向基團，其活性也必然很低。有的研究工作者在聚乳酸的微球表面修飾多糖類聚合物如，殼聚糖等，使得聚乳酸的表面帶有功能基團，從而可以進行后修飾，這種方法雖然可行但是卻喪失了聚酯/聚乙二醇膠束的長循環(huán)功能。綜上，研究合成一種具有親水性端基功能基團的聚乙丙交酯/聚乙二醇類嵌段共聚物將是一種非常有理論價值和應(yīng)用前景的工作。常用的聚乙二醇(PEG)/聚乙丙交酯(PLGA)類嵌段共聚物為線型共聚物，但線型共聚物具有較少的可修飾端基基團，對于藥物的包封率較低。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種具有豐富的可修飾端基基團的端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物。本發(fā)明的第二個目的是提供一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物的制備方法。本發(fā)明的第三個目的是提供一種由端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物制成的載藥納米膠束。本發(fā)明的第四個目的是提供一種載藥納米膠束在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物，用下述方法制成(1)在聚合封管中加入組成單體的摩爾比為l:110的乙交酯和丙交酯，再加入與所述單體的摩爾比為l:30100的多羥基引發(fā)劑構(gòu)成反應(yīng)物，加入辛酸亞錫為催化劑，所述催化劑的加入質(zhì)量為所述反應(yīng)物質(zhì)量的O.l%，抽真空氮氣置換24次，在真空度為580Pa封管，在110150'C，反應(yīng)2460小時，得到端羥基星型聚乙丙交酯；(2)將端羥基星型聚乙丙交酯與丁二酸酐按照所述端羥基星型聚乙丙交酯分子中的羥基與丁二酸酐的摩爾比為l:920的比例，在203(TC，反應(yīng)2040小時，得到端羧基星型聚乙丙交酯；(3)按質(zhì)量比為1:1030的比例，將所述端羧基星型聚乙丙交酯溶于無水甲苯中，加入雙端胺基聚乙二醇，使所述雙端胺基聚乙二醇分子中的端胺基與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基的摩爾比為2040:1，加入與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基等當(dāng)量的N，N'-二環(huán)己基碳二亞胺，在-5。C5。C反應(yīng)2048小時，蒸干溶劑，加入乙醚沉淀，即可得到一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物。所述多羥基引發(fā)劑為肌醇、丙三醇或聚酰胺-胺型-OH樹枝狀大分子。所述步驟(1)中反應(yīng)溫度最好是135'C，反應(yīng)時間為48小時。一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物的制備方法，由下述步驟組成(1)在聚合封管中加入組成單體的摩爾比為l:110的乙交酯和丙交酯，再加入與所述單體的摩爾比為l:30100的多羥基引發(fā)劑構(gòu)成反應(yīng)物，加入辛酸亞錫為催化劑，所述催化劑的加入質(zhì)量為所述反應(yīng)物質(zhì)量的O.l%，抽真空氮氣置換24次，在真空度為580Pa封管，在110150。C，反應(yīng)2460小時，得到端羥基星型聚乙丙交酯；(2)將端羥基星型聚乙丙交酯與丁二酸酐按照所述端羥基星型聚乙丙交酯分子中的羥基與丁二酸酐的摩爾比為l:920的比例，在2030。C，反應(yīng)2040小時，得到端羧基星型聚乙丙交酯；(3)按質(zhì)量比為1:1030的比例，將所述端羧基星型聚乙丙交酯溶于無水甲苯中，加入雙端胺基聚乙二醇，使所述雙端胺基聚乙二醇分子中的端胺基與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基的摩爾比為2040:1，加入與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基等當(dāng)量的N，N'-二環(huán)己基碳二亞胺，在-5。C5。C反應(yīng)2048小時，蒸干溶劑，加入乙醚沉淀，即得到一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物。所述多羥基引發(fā)劑為肌醇、丙三醇或聚酰胺-胺型-OH樹枝狀大分子。所述步驟(1)中反應(yīng)溫度最好是135'C，反應(yīng)時間為48小時。一種載藥納米膠束，用下述方法制成(1)在聚合封管中加入組成單體的摩爾比為h110的乙交酯和丙交酯，再加入與所述單體的摩爾比為l:30100的多羥基引發(fā)劑構(gòu)成反應(yīng)物，加入辛酸亞錫為催化劑，所述催化劑的加入質(zhì)量為所述反應(yīng)物質(zhì)量的O.l%，抽真空氮氣置換24次，在真空度為580Pa封管，在11015(TC，反應(yīng)2460小時，得到端羥基星型聚乙丙交酯；(2)將端羥基星型聚乙丙交酯與丁二酸酐按照所述端羥基星型聚乙丙交酯分子中的羥基與丁二酸酐的摩爾比為l:920的比例，在2030。C，反應(yīng)2040小時，得到端羧基星型聚乙丙交酯；(3)按質(zhì)量比為1:1030的比例，將所述端羧基星型聚乙丙交酯溶于無水甲苯中，加入雙端胺基聚乙二醇，使所述雙端胺基聚乙二醇分子中的端胺基與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基的摩爾比為2040:1，.加入與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基等當(dāng)量的N，N'-二環(huán)己基碳二亞胺，在-5。C5t:反應(yīng)2048小時，蒸干溶劑，加入乙醚沉淀，即得到一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物；(4)將質(zhì)量比為104:l的所述一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物與疏水性藥物為溶質(zhì)，溶于丙酮中制成質(zhì)量百分比濃度為0.1%1.0%的溶液，以0.5—5ml/min的速度，加入到與所述溶液的體積比為1020:l的雙蒸水中，在203(TC,超聲乳化形成穩(wěn)定乳液后，持續(xù)攪拌24-40小時揮發(fā)出丙酮，在26t、15000-25000rpm下超速離心30-50min，收集固化物，冷凍干燥，即制成一種載藥納米束。優(yōu)選的疏水性藥物為紫杉醇、康普瑞汀、阿霉素、曲普瑞林或那法瑞林。還可以選其它的臨床上常用的疏水性藥物制成載藥納米束。所述疏水性藥物還可以選用摩爾比為4:11:4的紫杉醇和康普瑞汀。選用摩爾比為4:4的紫杉醇和康普瑞汀制成的載藥納米膠束在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的優(yōu)點1.設(shè)計合成了新型端胺基星型PLGA-^PEG嵌段共聚物，該共聚物的親水性鏈端具有高活性高空間自由度的端胺基。2.本發(fā)明制備的一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物在水溶液中可自發(fā)形成粒度100nm左右的膠束結(jié)構(gòu)，膠束的核可包載疏水性藥物，膠束的殼表面富含高活性高自由度的端胺基手臂，可用于與多種生物活性物質(zhì)偶聯(lián)，達到靶向控釋效果。3.本發(fā)明制備的紫杉醇-康普瑞汀納米膠束，膠束的表面帶正電有利于膠束聚集于腫瘤組織血管內(nèi)壁，而膠束中包埋的兩種藥物分別發(fā)揮化療作用及抑制腫瘤血管再生作用，從兩方面對腫瘤進行復(fù)合治療。動物乳腺癌模型證實這種治療方式與單獨給藥方式相比對于乳腺癌的抑制率顯著提高。'圖l為一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物分子結(jié)構(gòu)示意圖。圖2為紫杉醇-康普瑞汀納米膠束的透射電鏡照片。圖3為HE染色*400，空白對照組結(jié)果。圖4為HE染色M00，紫杉醇-康普瑞汀納米膠束高劑量組結(jié)果。圖5為一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物的核磁氫譜。圖6為一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物的紅外譜圖。具體實施方式本發(fā)明采用多羥基官能團的引發(fā)劑肌醇，引發(fā)一定比例的乙丙交酯的聚合從而合成出六臂端羥基聚乙丙交酯材料。所得材料再與丁二酸酐反應(yīng)后開環(huán)，得到端羧基星型聚己內(nèi)酉旨。利用該材料端基的羧基與N-羥基琥珀酰亞胺在DCC的存在下低溫縮和，形成N-羥基琥珀酰亞胺酯中間體。然后再與雙端胺基聚乙二醇分子反應(yīng)，從而得到最終產(chǎn)物-端胺基星型嵌段聚己內(nèi)酯-聚醚共聚物。我們的前期研究中已經(jīng)證明了的這種星型共聚物合成路線的可行性。常用的聚乙二醇(PEG)/聚乙丙交酯(PLGA)類嵌段共聚物為線型共聚物，而本發(fā)明設(shè)計星型共聚物的目的在于使這種兩親性共聚物具有更加豐富的可修飾端基基團。有報道顯示，相同分子量的星型共聚物對于藥物的包封率要高于線型共聚物。PEG具有優(yōu)異的水溶性和生物相容性，PLGA具有優(yōu)越的藥物控釋性能、生物安全性和生物可降解性，PEG和PLGA均為FDA和SFDA批準(zhǔn)人體內(nèi)使用的藥用輔料，這兩種材料都有很長的成功醫(yī)學(xué)應(yīng)用歷史，是應(yīng)用最廣泛、認知度和認可度最高的兩種藥物控釋載體輔料。本發(fā)明所設(shè)計的星型嵌段共聚物以PEG為親水性部分，PLGA為疏水部分，通過分子設(shè)計，不改變其化學(xué)成分，而是通過分子構(gòu)型結(jié)構(gòu)調(diào)控其性能。在本發(fā)明中賦予了嵌段共聚物固有的生物安全性和性能可控性?；窘Y(jié)構(gòu)示意見圖1。在藥劑學(xué)領(lǐng)域一般將納米粒的尺寸界定在l一1000nm，藥劑學(xué)中的納米?？梢苑殖蓛深惣{米載體和納米藥物。納米載體是指溶解或分散有藥物的各種納米粒，如納米脂質(zhì)體、聚合物納米囊、納米球、聚合物膠束等。納米藥物則是指直接將原料藥物加工成的納米粒，實際上是微粉化技術(shù)、超細粉技術(shù)的發(fā)展。納米載體與抗癌藥物組成納米控釋系統(tǒng)，其突出優(yōu)點是納米粒比血紅細胞還小許多，可在血液中自由運行，具有穿過耙組織內(nèi)皮細胞的能力，可被腫瘤細胞攝取進入細胞內(nèi)，將所包含的化療藥物在細胞或亞細胞水平釋放，大大提高藥物療效。納米控釋系統(tǒng)中的藥物可通過表面擴散而釋放出來，也可通過基質(zhì)本身逐漸溶蝕降解而使其中的藥物釋放出來。納米微粒的高分子基質(zhì)可控制藥物的緩慢釋放，從而達到一次用藥長期有效的目的。與常規(guī)藥物相比，納米藥物有顆粒小、比表面積大、表面反應(yīng)活性高、活性中心多、催化效率高、吸附能力強等特性，因此它有許多常規(guī)藥物所不具有的優(yōu)點促進藥物溶解、改善吸收、提高耙向性從而提高有效性等。我們所合成的這種兩親性星型共聚物將注定成為一種復(fù)合功能的藥物控釋納米載體材料，不僅能完成藥物的包埋、緩控釋，而且能達到疾病的靶向治療。共聚物在水溶液中可自發(fā)形成小于100nm左右的納米膠束，膠束的疏水性核可包載疏水性藥物，膠束的外殼具有高活性高自由度的端胺基，不僅可提供高血管壁親和性的正電表面，而且可進行多種生物活性物質(zhì)的后修飾，達到不同疾病的耙向治療。由該共聚物形成的紫杉醇-康普瑞汀納米膠束對動物乳腺癌的治療結(jié)果證實這種載藥納米膠束對乳腺癌具有明顯的抑制作用。下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步的說明。實施例1一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物，用下述方法制成(1)在聚合封管中加入組成單體的摩爾比為l:5的乙交酯和丙交酯，再加入與所述單體的摩爾比為l:50的聚酰胺-胺型-OH樹枝狀大分子構(gòu)成反應(yīng)物，加入辛酸亞錫為催化劑，所述催化劑的加入質(zhì)量為所述反應(yīng)物質(zhì)量的O.l%，抽真空氮氣置換3次，在真空度為40Pa封管，在135。C，反應(yīng)48小時，得到端羥基星型聚乙丙交酯；(2)將端羥基星型聚乙丙交酯與丁二酸酐按照所述端羥基星型聚乙丙交酯分子中的羥基與丁二酸酐的摩爾比為l:14的比例，在25'C，反應(yīng)30小時，得到端羧基星型聚乙丙交酯；(3)按質(zhì)量比為1:20的比例，將所述端羧基星型聚乙丙交酯溶于無水甲苯中，加入雙端胺基聚乙二醇，使所述雙端胺基聚乙二醇分子中的端胺基與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基的摩爾比為30:1，加入與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基等當(dāng)量的N，N'-二環(huán)己基碳二亞胺，在(TC反應(yīng)36小時，蒸干溶劑，加入乙醚沉淀，即可得到一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物(見圖l)。端胺基星型聚合物的結(jié)構(gòu)由核磁及紅外譜圖驗證。端胺基星型聚合物的核磁譜峰歸屬如下3=3.18處為端胺基相聯(lián)的CH2的氫質(zhì)子的化學(xué)位移，3=4.07處為星型聚合物的核肌醇的氫質(zhì)子的化學(xué)位移，3=1.56，5.20，5.04ppm處為PLGA嵌段特征化學(xué)位移；5=3.78處多重峰為PEG嵌段特征化學(xué)位移。通過核磁氫譜的表征初步證明了我們所得到的星型聚合物是以6羥基肌醇為核，端基為胺基的六臂星型共聚物(見圖5)。聚合物的紅外譜圖在3350處有明顯的胺基伸縮振動峰出現(xiàn)，在1345處有明顯的C-N鍵彎曲振動吸收峰出現(xiàn)，這也證明了我們所得到的聚合物結(jié)果具有胺基端基功能基(見圖6)。同時我們對相同分子量的星型聚合物及線型聚合物的黏度進行了測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)星型聚合物的黏度低于相同分子量的線型聚合物，這進一步肯定了我們所得聚合物的星型結(jié)構(gòu)。實施例2一種端胺基星型聚乙丙交酯Z聚乙二醇嵌段共聚物，用下述方法制成(1)在聚合封管中加入組成單體的摩爾比為l:l的乙交酯和丙交酯，再加入與所述單體的摩爾比為l:30的肌醇構(gòu)成反應(yīng)物，加入辛酸亞錫為催化劑，所述催化劑的加入質(zhì)量為所述反應(yīng)物質(zhì)量的O.l%,抽真空氮氣置換2次，在真空度為80Pa封管，在I1(TC，反應(yīng)60小時，得到端羥基星型聚乙丙交酯；(2)將端羥基星型聚乙丙交酯與丁二酸酐按照所述端羥基星型聚乙丙交酯分子中的羥基與丁二酸酐的摩爾比為l:15的比例，在2(TC，反應(yīng)40小時，得到端羧基星型聚乙丙交酯；(3)按質(zhì)量比為1:10的比例，將所述端羧基星型聚乙丙交酯溶于無水甲苯中，加入雙端胺基聚乙二醇，使所述雙端胺基聚乙二醇分子中的端胺基與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基的摩爾比為20:1，加入與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基等當(dāng)量的N，N'-二環(huán)己基碳二亞胺，在-5。C反應(yīng)48小時，蒸干溶劑，加入乙醚沉淀，即可得到一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物。.實施例3一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物，用下述方法制成(1)在聚合封管中加入組成單體的摩爾比為l:IO的乙交酯和丙交酯，再加入與所述單體的摩爾比為l:IOO的丙三醇構(gòu)成反應(yīng)物，加入辛酸亞錫為催化劑，所述催化劑的加入質(zhì)量為所述反應(yīng)物質(zhì)量的O.l%，抽真空氮氣置換4次，在真空度為5Pa封管，在150'C，反應(yīng)24小時，得到端羥基星型聚乙丙交酯；.(2)將端羥基星型聚乙丙交酯與丁二酸酐按照所述端羥基星型聚乙丙交酯分子中的羥基與丁二酸酐的摩爾比為l:9的比例，在30'C，反應(yīng)20小時，得到端羧基星型聚乙丙交酯；(3)按質(zhì)量比為l:30的比例，將所述端羧基星型聚乙丙交酯溶于無水甲苯中，加入雙端胺基聚乙二醇，使所述雙端胺基聚乙二醇分子中的端胺基與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基的摩爾比為40:1，加入與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基等當(dāng)量的N，N'-二環(huán)己基碳二亞胺，在5。C反應(yīng)20小時，蒸干溶劑，加入乙醚沉淀，即可得到一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物。實施例4一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物，用下述方法制成(1)在聚合封管中加入組成單體的摩爾比為l:8的乙交酯和丙交酯，再加入與所述單體的摩爾比為l:80的聚酰胺-胺型-OH樹枝狀大分子構(gòu)成反應(yīng)物，加入辛酸亞錫為催化劑，所述催化劑的加入質(zhì)量為所述反應(yīng)物質(zhì)量的O.l%，抽真空氮氣置換3次，在真空度為60Pa封管，在135'C，反應(yīng)45小時，得到端羥基雖型聚乙丙交酯；(2)將端羥基星型聚乙丙交酯與丁二酸酐按照所述端羥基星型聚乙丙交酯分子中的羥基與丁二酸酐的摩爾比為l:20的比例，在22'C，反應(yīng)35小時，得到端羧基星型聚乙丙交酯；(3)按質(zhì)量比為1:25的比例，將所述端羧基星型聚乙丙交酯溶于無水甲苯中，加入雙端胺基聚乙二醇，使所述雙端胺基聚乙二醇分子中的端胺基與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基的摩爾比為35:1，加入與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基等當(dāng)量的N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺，在2。C反應(yīng)30小時，蒸干溶劑，加入乙醚沉淀，即可得到一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物。實施例5一種載藥納米膠束，用下述方法制成步驟(1)、(2)、(3)同實施例l;(4)將質(zhì)量比為6:l的一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物與疏水性藥物紫杉醇和康普瑞汀(紫杉醇和康普瑞汀的摩爾比為l:1)為溶質(zhì)，溶于丙酮中制成質(zhì)量百分比濃度為0.5^的溶液，以2ml/min的速度，加入到與所述溶液的體積比為15:l的雙蒸水中，在25"C，超聲乳化形成穩(wěn)定乳液后，持續(xù)攪拌30小時揮發(fā)出丙酮，在4'C、20000rpm下超速離心40min，收集固化物，冷凍干燥，即制成一種紫杉醇-康普瑞汀納米膠束。見圖2。圖2為一種紫杉醇-康普瑞汀納米膠束透射電鏡照片，由圖中可以看出一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物所形成的納米膠束具有明顯的殼核結(jié)構(gòu)，并且包藥后膠束的粒徑仍能保持在IOOnm左右。實施例6一種載藥納米膠束，用下述方法制成步驟(1)、(2)、(3)同實施例2;(4)將質(zhì)量比為10:l的一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物與疏水性藥物阿霉素為溶質(zhì)，溶于丙酮中制成質(zhì)量百分比濃度為O.1%的溶液，以5ml/min的速度，加入到與所述溶液的體積比為10:l的雙蒸水中，在2(TC，超聲乳化形成穩(wěn)定乳液后，持續(xù)攪拌40小時揮發(fā)出丙酮，在6"C、15000rpm下超速離心50min，收集固化物，冷凍干燥，即制成一種載藥納米束。實施例7一種載藥納米膠束，用下述方法制成步驟(1)、(2)、(3)同實施例3;(4)將質(zhì)量比為8:l的一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物與疏水性藥物曲普瑞林為溶質(zhì)，溶于丙酮中制成質(zhì)量百分比濃度為1.0%的溶液，以0.5/min的速度，力口入到與所述溶液的體積比為14:l的雙蒸水中，在3(TC，超聲乳化形成穩(wěn)定乳液后，持續(xù)攪拌24小時揮發(fā)出丙酮，在2'C、25000rpm下超速離心30min，收集固化物，冷凍干燥，即制成一種載藥納米束。實施例8一種載藥納米膠束，用下述方法制成步驟(1)、(2)、(3)同實施例4;(4)將質(zhì)量比為4:l的一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物與疏水性藥物那法瑞林為溶質(zhì)，溶于丙酮中制成質(zhì)量百分比濃度為O.6%的溶液，以3ml/min的速度，加入到與所述溶液的體積比為20:l的雙蒸水中，在26'C，超聲乳化形成穩(wěn)定乳液后，持續(xù)攪拌36小時揮發(fā)出丙酮，在5'C、20000rpm下超速離心40min，收集固化物，冷凍干燥，即制成一種載藥納米束。實施例9一種載藥納米膠束，用下述方法制成步驟(1)、(2)、(3)、(4)同實施例5，不同的是疏水性藥物為摩爾比為4:l的紫杉醇和康普瑞汀。實施例10一種載藥納米膠束，用下述方法制成步驟(1)、(2)、(3)、(4)同實施例6，不同的是疏水性藥物為摩爾比為l:4的紫杉醇和康普瑞汀。還可以采用臨床常用的疏水性藥物組成新的實施例。實施例11紫杉醇-康普瑞汀納米膠束(實施例5)在局部注射治療乳腺癌中的應(yīng)用。(1)腫瘤生長抑制率的測定從表1各給藥組對TA2系小鼠乳腺癌肺轉(zhuǎn)移模型的生長抑制作用觀察結(jié)果可以看出，紫杉醇-康普瑞汀納米膠束高劑量給藥組小鼠腫瘤生長受到明顯抑制，該實驗動物組有3只小鼠的腫瘤完全消退?？瞻讓φ帐遣唤o藥物治療。表l小鼠乳腺腫瘤治療前后腫瘤體積變化結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>(2)小鼠乳腺癌病理切片HE染色后觀察可見，空白對照組(見圖3)腫瘤細胞生長良好，可見核分裂相。各給藥組腫瘤細胞出現(xiàn)凋亡形態(tài)改變細胞核內(nèi)染色質(zhì)濃縮聚集，呈團塊狀或花瓣狀；部分細胞可見核碎裂或核染色質(zhì)斷裂，形成大小不等的凋亡小體。復(fù)合功能紫杉醇-康普瑞汀納米膠束高劑量組(相當(dāng)紫杉醇總量為卯mg'kg")腫瘤細胞主要表現(xiàn)為大量核固縮、凋亡小體，細胞結(jié)構(gòu)完全消失。實驗結(jié)果顯示紫杉醇-康普瑞汀納米膠束對乳腺癌細胞模型有較好抑瘤作用，與紫杉醇注射液劑型相比，毒性較小，且療效持久，不需頻繁間斷給藥。權(quán)利要求1.一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物，其特征是用下述方法制成(1)在聚合封管中加入組成單體的摩爾比為1∶1～10的乙交酯和丙交酯，再加入與所述單體的摩爾比為1∶30～100的多羥基引發(fā)劑構(gòu)成反應(yīng)物，加入辛酸亞錫為催化劑，所述催化劑的加入質(zhì)量為所述反應(yīng)物質(zhì)量的0.1％，抽真空氮氣置換2～4次，在真空度為5～80Pa封管，在110～150℃，反應(yīng)24～60小時，得到端羥基星型聚乙丙交酯；(2)將端羥基星型聚乙丙交酯與丁二酸酐按照所述端羥基星型聚乙丙交酯分子中的羥基與丁二酸酐的摩爾比為1∶9～20的比例，在20～30℃，反應(yīng)20～40小時，得到端羧基星型聚乙丙交酯；(3)按質(zhì)量比為1∶10～30的比例，將所述端羧基星型聚乙丙交酯溶于無水甲苯中，加入雙端胺基聚乙二醇，使所述雙端胺基聚乙二醇分子中的端胺基與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基的摩爾比為20～40∶1，加入與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基等當(dāng)量的N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺，在-5℃～5℃反應(yīng)20～48小時，蒸干溶劑，加入乙醚沉淀，即可得到一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物，其特征是所述多羥基引發(fā)劑為肌醇、丙三醇或聚酰胺-胺型-OH樹枝狀大分子。3.根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物，其特征是所述步驟(1)中反應(yīng)溫度為135t:，所述反應(yīng)時間為48小時。4.一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物的制備方法，其特征是由下述步驟組成(1)在聚合封管中加入組成單體的摩爾比為l:110的乙交酯和丙交酯，再加入與所述單體的摩爾比為l:30100的多羥基引發(fā)劑構(gòu)成反應(yīng)物，加入辛酸亞錫為催化劑，所述催化劑的加入質(zhì)量為所述反應(yīng)物質(zhì)量的O.l%，抽真空氮氣置換24次，在真空度為580Pa封管，在11015(TC，反應(yīng)2460小時，得到端羥基星型聚乙丙交酯；(2)將端羥基星型聚乙丙交酯與丁二酸酐按照所述端羥基星型聚乙丙交酯分子中的羥基與丁二酸酐的摩爾比為l:920的比例，在2030。C，反應(yīng)2040小時，得到端羧基星型聚乙丙交酯;(3)按質(zhì)量比為1:1030的比例，將所述端羧基星型聚乙丙交酯溶于無水甲苯中，加入雙端胺基聚乙二醇，使所述雙端胺基聚乙二醇分子中的端胺基與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基的摩爾比為2040:1，加入與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基等當(dāng)量的N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺，在-5。C5'C反應(yīng)2048小時，蒸干溶劑，加入乙醚沉淀，即得到一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物的制備方法，其特征是所述多羥基引發(fā)劑為肌醇、丙三醇或聚酰胺-胺型-OH樹枝狀大分子。6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物的制備方法，其特征是所述步驟(1)中反應(yīng)溫度為135'C，所述反應(yīng)時間為48小時。7.—種載藥納米膠束，其特征是用下述方法制成(1)在聚合封管中加入組成單體的摩爾比為l:110的乙交酯和丙交酯，再加入與所述單體的摩爾比為l:30100的多羥基引發(fā)劑構(gòu)成反應(yīng)物，加入辛酸亞錫為催化劑，所述催化劑的加入質(zhì)量為所述反應(yīng)物質(zhì)量的O.l%，抽真空氮氣置換24次，在真空度為580Pa封管，在11015(TC，反應(yīng)2460小時，得到端羥基星型聚乙丙交酯；(2)將端羥基星型聚乙丙交酯與丁二酸酐按照所述端羥基星型聚乙丙交酯分子中的羥基與丁二酸酐的摩爾比為l:920的比例，在203(TC，反應(yīng)2040小時，得到端羧基星型聚乙丙交酯；(3)按質(zhì)量比為1:1030的比例，將所述端羧基星型聚乙丙交酯溶于無水甲苯中，加入雙端胺基聚乙二醇，使所述雙端胺基聚乙二醇分子中的端胺基與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基的摩爾比為2040:1，加入與所述端羧基星型聚乙丙交酯分子中的端羧基等當(dāng)量的N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺，在-5'C5'C反應(yīng)2048小時，蒸干溶劑，加入乙醚沉淀，即得到一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物；(4)將質(zhì)量比為104:l的所述一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物與疏水性藥物為溶質(zhì)，溶于丙酮中制成質(zhì)量百分比濃度為O.1%1.0%的溶液，以O(shè).5—5ml/min的速度，加入到與所述溶液的體積比為1020:l的雙蒸水中，在203(TC，超聲乳化形成穩(wěn)定乳液后，持續(xù)攪拌24-40小時揮發(fā)出丙酮，在26'C、15000-25000rpm下超速離心30-50min，收集固化物，冷凍干燥，即制成一種載藥納米束。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種載藥納米膠束，其特征是所述疏水性藥物為紫杉醇、康普瑞汀、阿霉素、曲普瑞林或那法瑞林。9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種載藥納米膠束，其特征是所述疏水性藥物為摩爾比為4:1~1:4的紫杉醇和康普瑞汀。10.權(quán)利要求9所'述的一種載藥納米膠束在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物、制備方法、載藥納米膠束及應(yīng)用，端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物制備方法(1)在聚合封管中加入乙交酯和丙交酯，多羥基引發(fā)劑，辛酸亞錫，抽真空氮氣置換，反應(yīng)，得到端羥基星型聚乙丙交酯；(2)加入丁二酸酐反應(yīng)得到端羧基星型聚乙丙交酯；(3)溶于無水甲苯中，加入雙端胺基聚乙二醇，N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺，反應(yīng)，蒸干溶劑，加乙醚沉淀，得到端胺基星型聚乙丙交酯/聚乙二醇嵌段共聚物，它能在水溶液中自發(fā)形成100nm左右的膠束，膠束的核可包載疏水性藥，膠束的殼表面富含高活性高自由度的端胺基手臂，與多種生物活性物質(zhì)偶聯(lián)，達到靶向控釋效果。文檔編號A61K47/34GK101125926SQ200710058430公開日2008年2月20日申請日期2007年7月30日優(yōu)先權(quán)日2007年7月30日發(fā)明者宋存先,亮王申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程研究所