專利名稱：：含金屬的殺病毒組合物及其用途的制作方法含金屬的殺病毒組合物及其用途本發(fā)明涉及殺病毒組合物及其在預防和/或治療一系列病毒種屬，特別是預防和/或治療引起人或動物呼吸道疾病的病毒中的用途。這里使用的術(shù)語"治療"和"處理"包括殺滅病毒或病毒的顆?；蚩刂?阻止病毒復制。更具體地，本發(fā)明的所有方面涉及用于治療和/或預防普通感冒和/或流感和/或引起肺炎的病毒的組合物。甚至更具體地，本發(fā)明的所有方面涉及用于治療和/或預防包括例如H1N1、H7N7、H9N2或H5N1病毒抹在內(nèi)的流感病毒林的組合物，后者導致高死亡率的禽流感。已知H5N1流感病毒林引起的感染，例如，對肺產(chǎn)生如后所述的有害和嚴重的影響。禽流感(或其他H5N1病毒林)有傳播到感染區(qū)域以外的趨勢。病毒傳播被限制在從感染的禽類傳播給人類的同時，考慮到最近有限的證據(jù)人們擔心通過病毒變異成可在不同動物種屬間傳播的形式，人與人之間傳播。由于禽"流感，，與高死亡率有關(guān)，其變異到高感染性、可在人類之間傳染的形式這一事件提高了人們對能產(chǎn)生真實災難的"廣泛流行"的后果的恐懼。同時，高度希望治療和在可能時預防呼吸道病毒感染，特別需要提供能有效治療和/或預防更嚴重的呼吸道病毒感染的制劑，包括例如H5N1呼吸道病毒林引起的最嚴重的此類感染。與多數(shù)能被已知的常規(guī)抗菌藥如抗生素治療的細菌感染不同，呼吸道病毒感染，如普通感冒或流感，不能使用抗生素治療。對大部分的呼吸道病毒感染來說，絕大多數(shù)現(xiàn)有的抗病毒藥物是無效的，機體自身的免疫防御系統(tǒng)不得不對抗病毒感染。同時，這是普通感冒和流感的典型情況，特別是H5N1流感病毒林，H1N1和H7N7流感病毒林也是這種情況。在相關(guān)的醫(yī)學文獻中，有很多關(guān)于H5N1病毒感染的作用模式和人體天然免疫防御系統(tǒng)抵御病毒的弱點的知識。然而，只提供了非常有限的治療方法。一個能夠用于禽流感的預防和/或感染后治療的抗病毒藥物是磷酸奧塞米韋，由羅氏以商品名達菲(TAMIFLU)上市銷售。然而，該藥品的供應有限；它的價格特別昂貴并且具有潛在的副作用。此外，在禽流感大面積流行期間儲備了達菲(TamifluTM)的很多國家大量使用該藥物時，人們擔心病毒對達菲產(chǎn)生耐藥性。達菲的活性代謝物非常穩(wěn)定，它們在水中的累積會很快導致流感病毒的耐藥性。盡管有疫苗可以作為預防的手段對抗特定的有限的流感病毒林，目前市場上沒有有效的疫苗能夠作為預防手段對抗人類感染，如H5N1流感病毒林感染。H5N1病毒誘導產(chǎn)生一種促炎性的"細胞因子風暴，，，它們是高耐藥性的并對肺產(chǎn)生嚴重損傷，并危及了對抗病毒感染的免疫功能。這些因素單獨使H5N1病毒林特別難以用大多數(shù)的現(xiàn)有抗病毒藥物預防或治療?，F(xiàn)在，我們驚奇的發(fā)現(xiàn)含有一種特定的窄范圍的礦物質(zhì)，或其他金屬元素的如我們早期公開的專利W001/15554中公開的作為寬范圍的多功能產(chǎn)物的組合物，及其組合，在包括預防性處理HSN1病毒林感染的呼吸道病毒感染的治療中具有意料不到的用途。我們還吃驚的發(fā)現(xiàn)這些選定的組合物，特別是這些金屬離子的組合，可以被混合到新的凝膠劑或其他載體制劑中，并以噴霧劑或手部擦劑的形式使用以提供如下所示的以下本發(fā)明實施方式(i)作為預防性處理手段對呼吸道病毒，特別是流感病毒H5N1病毒林感染的預防起到支持作用的鼻噴霧劑和凝膠載體制劑；在優(yōu)選的實施方式中，粘度小于4750厘泊，例如小于4500厘泊，優(yōu)選小于4000厘泊，理想的是小于3000厘泊，例如在l-2500厘泊的范圍內(nèi)。(ii)具有強大殺病毒能力的、用于控制(例如殺死、變?yōu)闊o害的或其他影響復制的)活病毒或病毒顆粒的清潔凝膠，和(iii)手部擦劑，例如浸漬了組合物的可一次性使用的擦劑，并且可選擇性的使用增稠劑或穩(wěn)定劑來進行改良。我們還提供了適宜的口服劑量形式的實施方式，例如，(iv)基于液體水性組合物的口服給藥制劑。水性組合物可以具有選自特定范圍的單一或多種金屬離子。水性組合物可以全部由活性成分組成，或者也可以是主要由所述活性成分組成。在其他實施方式中，金屬離子組合物可以包括可選的添加劑例如一種或多種賦形劑和/或稀釋劑。因此，本發(fā)明在一個方面提供了一種用于治療呼吸道病毒的組合物，其含有(a)至少一種能在水溶液中解離為鋅、銅、硒和/或錳離子的水溶性的鋅、銅、硒和/或錳化合物；(b)至少一種能在水溶液中解離為銨離子的水溶性的銨試劑；(c)至少一種酸，和(d)水所述組合物優(yōu)選具有小于4的pH值，并且優(yōu)選電勢超過50毫伏。本發(fā)明在另一個方面提供了一種如上述定義的、用于治療流感病毒的組合物，例如流感病毒H1N1、H7N7、H9N2或HW1病毒林，優(yōu)選H5N1病毒林。本發(fā)明的又一個方面提供了一種如上述定義的、用于治療引起普通感冒癥狀的病毒的組合物。本發(fā)明進一步的一個方面提供了一種如上述定義的組合物在制備用于治療呼吸道病毒，如流感病毒，優(yōu)選流感病毒H5N1病毒抹，或者普通感冒病毒或肺炎病毒感染的藥物中的用途。60%的普通感冒由鼻病毒引起。其他由冠狀病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸合胞病毒、腺病毒和腸道病毒引起。此外，肺炎支原體和肺炎衣原體也可能引起普通感冒癥狀。上述定義的組合物可以含有一種或多種選自維生素Bl、B、B5、B6、C、蘋果酸、天然利尿劑、褪黑激素和纈草屬植物鎮(zhèn)靜劑的添加劑。所述組合物可以基本上或優(yōu)選全部由所述成分組成。最優(yōu)選所述的水是蒸餾水。優(yōu)選鋅、銅、硒和/或錳化合物是其無機鹽，例如磷酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽或鹽酸鹽。能夠結(jié)合、復合或另外掩蔽鋅、銅和/或竭離子的銨試劑是能夠方便的在水溶液中解離成銨離子的無機銨鹽或氫氧化銨。例如，一種或多種以下物質(zhì)可以出現(xiàn)在組合物中氫氧化銨、硫酸銨、氯化銨、磷酸銨、硝酸銨、檸檬酸銨和酒石酸銨。所述至少一種酸方便的選自下組硫酸、鹽酸、硝酸、磷酸、檸檬酸和酒石酸。例如，所述至少一種酸可以是濃的硫酸、鹽酸、硝酸或磷酸0組合物的pH可以小于4，例如3.5或更低，3或更低，2.5或更低，例如2或更低例如在1或更小的范圍內(nèi)。電勢可以是例如超過100毫伏，或超過150亳伏，或超過200毫伏，或超過250毫伏，或超過300毫伏，或超過340毫伏例如在高至400毫伏的范圍內(nèi)。本發(fā)明包括的組合物可以通過我們早期公開的專利的"一般方法，，部分描述的方法制備，象其中舉例說明的那樣，示例的表格中的金屬或其他礦物元素至少是銅、鋅、硒和錳中的一種。當使用含有多于一種金屬離子的組合物時，銅和鋅可以與或不與竭共存；頓和鋅可以共同使用，與或不與銅共同使用。銅和硒可以共存，與或不與鋅共同使用。所有都可以與錳共同使用，或者錳單獨使用。適合的錳制劑可以由上述描述的一般方法外推的方法制備，使用例如硫酸錳、硫酸和硫酸銨來制得pH值為2或更小、電勢超過250毫伏的組合物。本發(fā)明進一步提供了如上述定義的對包括季節(jié)性流感、H5N1或禽流感、急性鼻炎在內(nèi)的呼吸道感染有抗病毒活性的抗病毒組合物。這樣的組合物可以包括一種或多種傳統(tǒng)的藥學可接受的載體、稀釋劑和/或賦形劑，例如作為稀釋劑的鹽水。為了例舉本發(fā)明，下列完全但非限制性的、記載在我們早期公開的專利WO01/015554中的實施例用于制備合適的組合物。它們可以根據(jù)我們早期公開的所述專利中描述的相同一般方法制備。在下面的表1中，本發(fā)明的下列實施例與標明的在前實施例的編號相對應。<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>如上述定義和示例的組合物可以以至少3種治療方案來對抗呼吸道，特別是流感，更特別的是H5N1流感病毒。它們可以作為預防性處理來阻止病毒侵入鼻粘膜[通常最常見的侵入部位]和/或殺死病毒或病毒顆粒。這樣的阻止通過使用鼻凝膠或水性噴霧劑，即含至少一種如上述定義和/或示例的組合物的藥學可接受的凝膠或噴霧劑載體介質(zhì)來實現(xiàn)。當病毒出現(xiàn)時，其可被抗感染凝膠制劑如凈手凝膠控制，即，將組合物加入本身已知的局部用載體基質(zhì)中，實質(zhì)上是通過混合兩種已知實體來得到新的抗病毒凝膠或噴霧制劑。此外，浸漬或包衣了組合物的一次性使用的擦手物質(zhì)可以選擇性的進行改造以提高其粘附性。優(yōu)選使用至少含銅的組合物在鼻凝膠、清潔凝膠和擦手物質(zhì)的方式來作為阻止病毒侵入和/或殺死或控制病毒或病毒顆粒的手段。為證明本發(fā)明組合物的抗呼吸道病毒活性，制備了一些組合物并在體外和體內(nèi)檢測其抗H5N1流感病毒的活性以顯示其管理禽流感的能力。含硒組合物的抗氧化性質(zhì)直接指示了其殺病毒活性的潛力。列出了涉及只含鋅、銅和硒的組合物的三個主要的實施方式，第四個實施方式涉及依次使用錳、鋅和硒金屬離子組合物1)鼠科動物體外抗人H5N1病毒活性研究(鋅，銅和硒)2)小鼠毒理學和劑量范圍研究(鋅)3)對感染了致命性H5N1流感病毒的小鼠的預防活性(鋅)和4)人病例研究，其中依次內(nèi)服給藥錳、鋅和硒組合物聯(lián)合療法緩解傳統(tǒng)流感病毒感染。實施例1體外對人H5N1的殺病毒活性研究在體外殺病毒實驗中，A/Vietnam/1203/04(H5N1)xAnnArbor/6/60流感病毒與銅金屬離子組合物(相當于銅元素3ppm)，鋅金屬離子組合物(相當于鋅元素2ppm)和硒金屬離子組合物(相當于硒元素1ppm)或水(對照)在室溫下作用IO分鐘。然后使用標準MDCK細胞分析法測定處理過的病毒的感染性。下面表2中的結(jié)果表明，盡管鋅和硒組合物在它們異常低的濃度下未顯示明顯直接的抗病毒作用，銅組合物盡管在類似的異常低濃度下卻引起了病毒計數(shù)大于90%的減少。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>"與水有顯著性差異(p<0.001)這些結(jié)果表明含有至少3ppm(-3jag/ml)離子修飾銅的組合物的鼻凝膠可以不僅提供了阻止病毒侵入上呼吸道的屏障，而且可能還殺死了大部分接觸到凝膠的病毒顆粒。由于流感病毒可以從感染的表面脫離并在侵入時向鼻子和眼睛的部位轉(zhuǎn)移，使用含有至少3ppm銅組合物的擦手物質(zhì)或手用凝膠作為預防手段對減少或預防感染，特別是大面積流行具有實質(zhì)性的益處。表3口服ZnAL42治療流感病毒A(H5N1)感染小鼠的效果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>'初始體重和最后一次治療18小時后體重的差值。b21天內(nèi)小鼠平均死亡天數(shù)。與鹽水治療的對照組相比'P〈0.05;"P<0.01;"'P<0.001實施例2小鼠毒理學和劑量范圍研究初步進行了小鼠體內(nèi)毒理學/劑量范圍研究以便在開始預防研究前確定鋅金屬離子組合物在不同劑量水平的安全性。3只小鼠的組以以下劑量每天一次，口服，共14天接受鋅制劑，(i)四倍人推薦每日允許劑量(人的RDA是每天15mg鋅元素)(ii)十二倍人RDA(相當于1倍小鼠RDA)和(iii)三十六倍人RDA。小鼠在治療開始前(和最后一次治療結(jié)束后18小時)稱重，在給藥期間觀察毒性征候。沒有毒性征候被記錄下來。在給藥期結(jié)束后進行了小鼠體內(nèi)器官的全面檢查，未觀察到明顯的異常。實施例3對感染了致命性H5N1流感病毒，即適用于小鼠的流感病毒A/鴨/MN/1525/81(H5N1)的小鼠的預防活性。為進行預防活性研究，10只雌性BALB/c小鼠的組(6-8周大，體重大約20g)以l倍和36倍人RDA(相當于1/12和3倍小鼠RDA)的劑量口服接受以蒸餾水稀釋的鋅金屬離子組合物，持續(xù)給藥3天，每天2次給藥，即上午和下午各給藥l次。安慰劑組(20只小鼠)每天2次給予蒸餾水。最后一次給藥后四小時，給小鼠鼻內(nèi)接種前述的致命性HSN1病毒。持續(xù)每天兩次給藥直到研究結(jié)束(21天或小鼠死亡)。另一組10只小鼠在鼻內(nèi)接種病毒后四小時，以10mg/kg的劑量每天兩次口服給藥達菲(TaminUTM)(磷酸奧塞米韋)，持續(xù)5天。每天測定血氧水平(提供肺功能的衡量指標)，在研究開始和結(jié)束時給小鼠稱重。截至第l9天的結(jié)果總結(jié)于下面的表3A中，全部結(jié)果列于表3中。表3A<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>關(guān)鍵詞ZnAL42=實施例7,SePC33=實施例5MnAL42=根據(jù)前述方法制備的含可溶性錳化合物的錳金屬離子制劑在四個不同的場合發(fā)現(xiàn)，一個深受呼吸道病毒感染之苦的啤喘病人，在感冒或流感開始時(以典型感冒和流感的前驅(qū)癥狀和哮喘確定)以RDA的劑量，每天3次，共3-4天聯(lián)合服用ZnAL42，MnAL42和SePC33能徹底阻止感冒和流感的發(fā)展。沒有聯(lián)合使用金屬離子制劑的此個體通常需要4-6天的臥床休息，并通常發(fā)展成進一步惡化為呼吸困難的胸部感染，使患病時間延長到2周。一些其他非哮喘的、有規(guī)律使用ZnAL42產(chǎn)品的病人發(fā)現(xiàn)，當感冒或流感的癥狀開始出現(xiàn)時，增大ZnAL42的劑量到3倍RDA可以將感染期縮短2到5天。Johnston的研究小組報告，感染鼻病毒的哞喘病人的支氣管上皮細胞產(chǎn)生的P和入干擾素比非哮喘病人的少。因此，假定并未受理論束縛的是，ZnAL42或聯(lián)合使用ZnAL42，MnAL42和SePC33能增強抗病毒干擾素的產(chǎn)生，因此改善了病毒感染及其在肺部的致病效果。這里現(xiàn)在提供了含銅金屬離子組合物的凝膠基質(zhì)組合物的實施例。實施例33(凝膠基組合物)表5<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>制備方法步驟1.將B相加入A相，混合均勻N.B.蘆薈凝膠基質(zhì)優(yōu)選通過以下方法制備水解200:1的翠綠蘆薈片，以O.5%黃原膠增稠，澄清后加入0.1%山梨酸鉀和0.1%苯甲酸鈉。*注釋見后面的實施例34實施例34(改進的凝膠基組合物)表6<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>制備方法步驟l.在A相的水中緩慢溶解蘆薈片步驟2.加熱A相到38-40。C步驟3.將黃原膠緩慢加入渦旋震蕩的水相中。用45分鐘使黃原膠徹底溶解。步驟4.加入預先溶解的山梨酸鉀和苯甲酸鈉一C相一至凝膠混合物?；旌暇?。步驟5.加入D相一CUAL42—混合均勻'注釋與水溶性制劑相比，明顯過量的銅金屬離子組合物被加入凝膠制劑中。盡管濃度較高，當應用于例如鼻腔時，蘆薈基質(zhì)能夠掩飾不希望有的金屬余味。權(quán)利要求1.一種用于治療或預防呼吸道病毒的組合物，其含有(a)至少一種能在水溶液中解離為鋅、銅、硒和/或錳離子的水溶性的鋅、銅、硒和/或錳化合物；(b)至少一種能在水溶液中解離為銨離子的水溶性的銨試劑；(c)至少一種酸，和(d)水。2.—種用于治療或預防呼吸道病毒的組合物，主要由以下物質(zhì)組成(a)至少一種能在水溶液中解離為鋅、銅、硒和/或錳離子的水溶性的鋅、銅、硒和/或錳化合物；(b)至少一種能在水溶液中解離為銨離子的水溶性的銨試劑；(c)至少一種酸，和(d)水。3.—種用于制備用于治療或預防呼吸道病毒的藥物的組合物，該組合物含有(a)至少一種能在水溶液中解離為鋅、銅、硒和/或錳離子的水溶性的鋅、銅、硒和/或錳化合物；(b)至少一種能在水溶液中解離為銨離子的水溶性的銨試劑；(c)至少一種酸，和(d)水。4.一種用于制備用于治療或預防呼吸道病毒的藥物的組合物，該組合物主要由以下物質(zhì)組成(a)至少一種能在水溶液中解離為鋅、銅、頓和/或錳離子的水溶性的鋅、銅、硒和/或錳化合物；(b)至少一種能在水溶液中解離為銨離子的水溶性的銨試劑；(c)至少一種酸，和(d)水。5.前述任意一項權(quán)利要求所述的組合物，其具有的pH值小于4。6.前述任意一項權(quán)利要求所述的組合物，其具有的電勢超過50毫伏。7.前述任意一項權(quán)利要求所述的組合物，其進一步包括賦形劑或稀釋劑。8.權(quán)利要求7所述的組合物，其中所述稀釋劑包括鹽水。9.前述任意一項權(quán)利要求所述的組合物，其是抗病毒凝膠的形式。10.權(quán)利要求1-8任意一項所述的組合物，其是噴霧劑的形式，例如適合鼻用的噴霧劑。11.權(quán)利要求l-8任意一項所述的組合物，其是用組合物浸漬的物質(zhì)的形式。12.前述任意一項權(quán)利要求所述的組合物，其中治療或預防的病毒是流感病毒。13.權(quán)利要求12所述的組合物，其中所述病毒是H1N1、H7N7、H9N2或H5N1病毒林。14.前述任意一項權(quán)利要求所述的組合物，其中所述病毒林是H5N1并且與引起禽流感有關(guān)。15.權(quán)利要求1-11任意一項所述的組合物，其中治療或預防的病毒是引起普通感冒癥狀的呼吸道病毒。16.根據(jù)權(quán)利要求1-11任意一項所述的組合物，其與另一種抗病毒制劑合用。17.權(quán)利要求16所述的組合物，其中其他制劑是磷酸奧塞米韋。18.前述任意一項權(quán)利要求所述的組合物，其中至少存在兩種不同的所述金屬離子。19.權(quán)利要求18所述的組合物，其中鋅金屬離子與銅、硒和錳金屬離子中的一種或多種同時出現(xiàn)。20.權(quán)利要求9-19任意一項所述的組合物，其中所述凝膠以翠綠蘆薈為基質(zhì)。21.權(quán)利要求20所述的組合物，其中所述凝膠含有至少一種增稠劑，例如黃原膠。22.權(quán)利要求21所述的組合物，其中至少存在一種防腐劑。23.權(quán)利要求9或20-22任意一項所述的組合物，其中所述凝膠含有銅金屬離子。24.權(quán)利要求23所述的組合物，其中所述凝膠中存在的銅離子的量在100-500ppm范圍內(nèi)，優(yōu)選150-450ppm,更優(yōu)選200-350ppm。全文摘要一種用于治療或預防呼吸道病毒的組合物，包括(a)至少一種能在水溶液中解離為鋅、銅、硒和/或錳離子的水溶性的鋅、銅、硒和/或錳化合物；(b)至少一種能在水溶液中解離為銨離子的水溶性的銨試劑；(c)至少一種酸，和(d)水。文檔編號A61K31/19GK101437504SQ200780008763公開日2009年5月20日申請日期2007年2月6日優(yōu)先權(quán)日2006年2月6日發(fā)明者S·S·海柯克申請人:治療研究有限公司