專利名稱：：曲恩汀和青霉胺作為金屬污染對抗物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明總體上涉及過度暴露于金屬污染物的負(fù)效應(yīng)的緩解、預(yù)防和治療，具體而言，本發(fā)明涉及曲恩汀和/或青霉胺作為金屬污染對抗物的用途。
背景技術(shù)：
：金屬污染物(例如重金屬)對野生動物和家畜造成危險(xiǎn)并且導(dǎo)致傷害，還對哺乳動物(包括人類)造成健康危害。眾所周知，重金屬污染物基于人體內(nèi)或動物體內(nèi)的吸收形成配合物。然后，這些配合物與重要的氨基酸結(jié)合，沉淀蛋白質(zhì)，抑制酶或直接進(jìn)入細(xì)胞，通常引起細(xì)胞衰退或甚至死亡。另外，如果包含所述金屬的放射性同位素，這些效應(yīng)通常會被擴(kuò)大。在這種情況下，由于重要細(xì)胞或器官的輻射，金屬量的積累(否則這將不會是過度毒性的)是使人衰弱或致命的。金屬污染物的來源包括被污染的水、被污染的野生動物(例如魚)、涂料和工業(yè)制造過程。諸如放射性炸彈的放射擴(kuò)散裝置(RDD)的軍事或恐怖主義用途有目的地散播放射性材料(幾乎所有的都為金屬)引起伴隨物理損傷的輻射污染和金屬污染。當(dāng)放射性同位素以氣體、液體或固體形式被釋放到環(huán)境中，然后被攝取、吸入或沉積在人體表面或通過由放射性碎片引起的傷口進(jìn)入人體時(shí)，產(chǎn)生放射性污染。鹽酸曲恩汀(SYPRINE,AT0NPHARMA,INC.)是一種已知的化合物，該化合物由食品藥品管理局(FoodandDrugAdministration)批準(zhǔn)用于治療Wilson氏疾病。Wilson氏疾病(肝豆?fàn)詈俗冃?是常染色體遺傳性代謝缺陷，其導(dǎo)致不能維持銅的近零平衡。過量的銅積累可能是由于肝臟缺乏排泄游離的銅進(jìn)入膽汁的機(jī)制。肝細(xì)胞存儲過量的銅通常導(dǎo)致肝炎或急性肝功能衰竭，并且當(dāng)銅超過了肝細(xì)胞的容量時(shí)，銅被釋放進(jìn)入血液并被吸收進(jìn)入肝外的位置。當(dāng)銅在腦部積累時(shí)，它引起神經(jīng)上的損傷和癥狀。Wilson氏疾病用低銅飲食并使用如曲恩汀的螯合劑治療，該螯合劑與銅結(jié)合以有利于銅從體內(nèi)排泄。青霉胺(CUPRIMINE，ATONPHARMAINC.)是另一種已知的化合物，該化合物也由食品藥品管理局批準(zhǔn)用于Wilson氏疾病病人體內(nèi)過量銅的去除。它也用于降低胱氨酸尿癥中胱氨酸排泄和治療對傳統(tǒng)療法無反應(yīng)的、嚴(yán)重的活動期類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎。美國專利第6，441，009號已公開用于預(yù)防和治療重金屬暴露和毒性的制劑和方法，其公開的內(nèi)容在此通過引用并入本文。隨著金屬污染負(fù)效應(yīng)的緩解、預(yù)防和治療受到持續(xù)關(guān)注，需要進(jìn)一步的發(fā)展以滿足遭受這種負(fù)效應(yīng)(特別是大規(guī)模的負(fù)效應(yīng))的受體需求。
發(fā)明內(nèi)容一方面，將例如曲恩汀、青霉胺、它們的衍生物和藥學(xué)上可接受的鹽和溶劑化物(和酯(如果為青霉胺的話))的螯合劑用于遭受過度暴露于金屬污染物的一種或一種以上負(fù)效應(yīng)的哺乳動物的預(yù)防和治療。可包括一種或一種以上金屬的所述金屬污染物包括選自元素周期表的IA族、IIA族、VIB族、VIIB族、VIII族、IB族、IIB族、IIIA族、IVA族、VA族、VIA族、鑭系和錒系金屬中的至少一種金屬，其中，所述至少一種金屬不是銅。將治療有效量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物給藥于受感染的哺乳動物。在一些實(shí)施方式中，將治療有效量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物給藥于遭受過度暴露于金屬的一種或一種以上負(fù)效應(yīng)的哺乳動物，所述金屬選自汞、鎳、鉍、鈀、鋅、鎘、鉛、鈷、鉻、鐵、銀和銫。在一些實(shí)施方式中，所述金屬污染物是鈀或鈷。所述金屬污染物可以是任何金屬，該金屬在哺乳動物體內(nèi)的過量存在可以是不期望的、有害的或在其他方面對哺乳動物的短期健康或長期健康造成不可接受的危險(xiǎn)。在一種實(shí)施方式中，所述金屬污染物是放射性同位素，例如選自镅、锎、鈷、銥、鈀、钚、釙和鈾的金屬的放射性同位素。在一種實(shí)施方式中，所述放射性同位素是鈷-60和/或釙-210。曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的給藥可為腸內(nèi)實(shí)施或腸外實(shí)施。齊IJ量依賴于金屬污染的嚴(yán)重性并且可在每天每千克哺乳動物約4mg自由基(freebase)至每天每千克哺乳動物約25mg自由基的范圍內(nèi)變化。在一種特定的實(shí)施方式中，將有效量的曲恩汀以它的鹽酸鹽給藥。在一些實(shí)施方式中，將曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物與有效量的青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物順序地或伴隨地給藥于受感染的哺乳動物。青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物可以每天每千克哺乳動物約2mg青霉胺至每天每千克哺乳動物約60mg青霉胺范圍內(nèi)的劑量給藥。在一些特定的實(shí)施方式中，有效量的鹽酸曲恩汀和D-青霉胺被聯(lián)合給藥。在又一些其他的實(shí)施方式中，將治療有效量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物給藥于過度暴露于至少兩種金屬的受感染的哺乳動物。例如，所述至少兩種金屬可包括銦或釙。在一些實(shí)施方式中，將治療有效量的曲恩汀和青霉胺或它們各自的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物給藥于過度暴露于至少兩種金屬的受感染的哺乳動物。本發(fā)明也擬用曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物針對過度暴露于大規(guī)模金屬污染的負(fù)效應(yīng)治療個(gè)體群的應(yīng)用。在這方面，提供一定劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療這種過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的數(shù)量為5，000個(gè)體至1，000,000個(gè)體的群體的每個(gè)成員。在一些情況下，提供一定劑量的青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述群體的每個(gè)暴露的成員(或至少大部分暴露的成員)。本發(fā)明進(jìn)一步擬用在針對過度暴露于大規(guī)模金屬污染的負(fù)效應(yīng)為群體做準(zhǔn)備方面儲存曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。在這方面，儲存一定劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療這種過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的所述群體的每個(gè)成員?？蓛Υ嫠鰟┝康那魍』蛩乃帉W(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以為具有成員為5，000個(gè)體至1，000,000個(gè)體的群體做準(zhǔn)備。在一些情況下，儲存一定劑量的青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物的劑型。在一些情況下，青霉胺和曲恩汀以單一聯(lián)合劑型被一同給藥。在另一方面，提供藥物劑量，所述藥物劑量包括有效量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物和有效量的青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物以及任選地包括一種或一種以上藥學(xué)上可接受的載體。在另一方面，提供治療遭受過度暴露于釙的一種或一種以上負(fù)效應(yīng)的哺乳動物的方法，所述方法包括將治療有效量的青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物給藥于受感染的哺乳動物。在一些方面，所述給藥為腸內(nèi)實(shí)施或腸外實(shí)施。在其他一些方面，所述青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物以每天每千克哺乳動物約2mg青霉胺至每天每千克哺乳動物約60mg青霉胺范圍內(nèi)的劑量給藥。圖1顯示在暴露于鈷-60及隨后的青霉胺或曲恩汀的給藥4天之后大鼠的各種不同器官中鈷-60的放射性同位素的含量。圖2顯示在暴露于釙-210及隨后的青霉胺或曲恩汀的口服給藥5天之后大鼠的各種不同器官中釙-210的放射性同位素的含量。具體實(shí)施例方式本發(fā)明的各種不同的實(shí)施方式在下文中描述。應(yīng)該注意的是，具體的實(shí)施方式無意作為本發(fā)明的窮盡的描述或作為對本發(fā)明的范圍的限制。結(jié)合本發(fā)明的特定實(shí)施方式描述的一個(gè)方面不需限定于該實(shí)施方式，并且該方面可與本發(fā)明的任何其他實(shí)施方式實(shí)行。在一種實(shí)施方式中，提供治療遭受過度暴露于金屬污染物的負(fù)效應(yīng)的哺乳動物的方法。所述金屬污染物可以是元素周期表的IA族、IIA族、VIB族、VIIB族、VIII族、IB族、IIB族、IIIA族、IVA族、VA族、VIA族、鑭系和錒系中的除銅外的一種或一種以上金屬。本發(fā)明擬用將治療有效量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物給藥于受感染的哺乳動物。曲恩汀是N，N'-雙(2-氨乙基)-1，2-乙二胺(N，N'-bis(2-aminoethyl)_1，2-ethanediamine)。它具有如下的結(jié)構(gòu)式(I)NH2(CH2)2NH(CH2)2NH(CH2)2NH2(I)曲恩汀是已知的螯合化合物并且是商業(yè)上可獲取的，例如從AtonPharmaInc.,Lawrenceville,NewJersey可購得。一種典型的藥學(xué)上可接受的鹽(鹽酸曲恩汀(SYPRINE,ATONPHARMA,INC.))是二鹽酸N，N'-雙(2-氨乙基)-1，2-乙二胺(N，N'-bis(2-aminoethyl)-1,2-ethanediaminedihydrochloride)。曲恩汀是白色至淺黃色結(jié)晶的易吸濕的粉末，具有219.2的分子量。它易溶于水，可溶于甲醇，微溶于乙醇并且不溶于氯仿和乙醚。除非另有說明，在此使用的術(shù)語“曲恩汀”指代曲恩汀自由基和它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物?？傮w而言，螯合劑的“治療上有效”量可由金屬污染物毒性的抑制或緩解或促進(jìn)從人體中排泄該金屬污染物來決定。合適的劑量取決于諸如污染的類型、污染的嚴(yán)重性和污染的時(shí)間以及給藥模式而當(dāng)然有所不同。曲恩汀以有效抑制或緩解金屬污染物毒性或有效促進(jìn)金屬污染物從人體排泄的量給藥于受感染的哺乳動物?；诮饘傥廴镜膰?yán)重性，曲恩汀可以每天每千克哺乳動物體重約4mg自由基至每天每千克哺乳動物體重約25mg自由基范圍內(nèi)的劑量給藥。在此推薦最少約連續(xù)七天以有效量的曲恩汀治療受感染的哺乳動物，或直到合適的檢測(例如血液檢測或尿液分析)表明不期望的金屬污染物水平已基本消退，或另降至被視為對受體短期或長期健康過量或威脅受體短期或長期健康的水平之下。曲恩汀可以任何藥學(xué)上可接受的方式和任何藥學(xué)上可接受的形式給藥。例如，曲恩汀可以液體或固體的形式口服給藥。曲恩汀可以是溶液、懸浮液、片劑、膠囊、口服速溶齊U、散劑、噴劑的形式。對于口服給藥而言，曲恩汀優(yōu)選地與一種或一種以上藥學(xué)上可接受的賦形劑、填充料和/或稀釋劑結(jié)合。片劑或藥丸可以由傳統(tǒng)技術(shù)來包裹以控制在胃腸道中曲恩汀的分解和吸收。曲恩汀也可腸外給藥(例如，靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)或皮下)。對于腸外給藥而言，曲恩汀優(yōu)選地溶于合適的溶劑形成可被注射的溶液。舉例來說，可用鹽酸曲恩汀(SYPRINE)作為250mg膠囊口服給藥。曲恩汀膠囊含有凝膠、氧化鐵、硬脂酸和二氧化鈦?zhàn)鳛檩o料。在一些情況下，曲恩汀可以與諸如青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物的其他螯合劑按順序給藥或伴隨給藥。青霉胺的藥物形式是3-巰基-D-纈氨酸(D-青霉胺)。它是白色或幾乎白色結(jié)晶粉末，易溶于水，微溶于醇類，不溶于乙醚、丙酮、苯和四氯化碳。青霉胺具有以下結(jié)構(gòu)式(II)SHNH2,Il(II)(CH3)2C—CHCOOH青霉胺是商業(yè)上可獲取的，例如從AtonPharmaInc.，Lawrenceville,Newjersey(CUPRIMINE)獲取。除非另有說明，在此使用的術(shù)語“青霉胺”指代青霉胺自由基(或兩性離子形式)和它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物。青霉胺可以每天每千克哺乳動物體重約2mg青霉胺至每天每千克哺乳動物體重約30mg青霉胺范圍內(nèi)的劑量給藥。青霉胺可以任何藥學(xué)上可接受的方式以及任何藥學(xué)上可接受的形式給藥。例如，青霉胺可以液體或固體的形式口服給藥。青霉胺可以是溶液、懸浮液、片劑、膠囊、口服速溶齊U、散劑、噴劑的形式。對于口服給藥而言，青霉胺優(yōu)選地與一種或一種以上藥學(xué)上可接受的賦形劑、填充料和/或稀釋劑結(jié)合。片劑或藥丸可以由傳統(tǒng)技術(shù)來包裹以控制在胃腸道中青霉胺的分解和吸收。青霉胺也可腸外給藥(例如，靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)或皮下)。對于腸外給藥而言，將青霉胺溶于合適的溶劑形成可被注射的溶液。舉例來說，可用青霉胺(CUPRIMINE)作為250mg膠囊口服給藥。青霉胺膠囊含有凝膠、乳糖、鎂、硬脂酸鹽和二氧化鈦?zhàn)鳛檩o料。青霉胺以有效地抑制或緩解金屬污染物毒性的量給藥于受感染的哺乳動物。基于金屬污染的嚴(yán)重性，青霉胺可以每天每千克哺乳動物體重約2mg至每天每千克哺乳動物體重約25mg自由基范圍內(nèi)的劑量給藥。在此推薦，最少連續(xù)約七天以青霉胺的有效量來治療受感染的哺乳動物，或直到合適的檢測(例如血液檢測或尿分析)表明不期望的金屬污染物的水平已基本消退，或另降至被視為對受體短期或長期健康過量或威脅受體短期或長期健康的水平之下。本發(fā)明進(jìn)一步涉及藥物劑型，該藥物劑型包括治療有效量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物以及治療有效量的青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物和任選地包括一種或一種以上藥學(xué)上可接受的載體。所述藥物劑型可以是任何合適的形式，例如溶液、懸浮液、片劑、膠囊、口服速溶劑、散劑或噴劑。所述藥物劑型可用于治療遭受金屬污染(包括放射性金屬污染)的病人。如上所指出的，本發(fā)明適用于治療遭受金屬污染(包括重金屬污染)的病人。所述金屬包括選自元素周期表的IA族、IIA族、VIB族、VIIB族、VIII族、IB族、IIB族、IIIA族、IVA族、VA族、VIA族、鑭系和錒系中的金屬。這些金屬的例子包括鉻、錳、鐵、鈷、鎳、銅、鋅、鍶、鈀、銀、鎘、銦、銫、銥、汞、鉈、鉛、鉍、釙、鐳、鈰、鈾、钚、镅和锎。雖然本發(fā)明不限于任何特殊的理論，人們相信金屬污染物與螯合物曲恩汀和/或青霉胺形成配合物。所述螯合的金屬配合物是非活化的并且通過尿液或糞便排出。本發(fā)明適于用作重金屬污染的對抗物，所述重金屬例如鈀、汞、鉍、銅、銥、鎳、鋅、鎘、鉛、鈷和銀。舉例而言，表1提供在體外曲恩汀和青霉胺與一些典型的重金屬的結(jié)合穩(wěn)定常數(shù)(logK)(嚴(yán)格選擇的金屬配合物穩(wěn)定常數(shù)，NISTStd.Ref.Database46,Dec.1997；重要穩(wěn)定常數(shù)，A.E.Martell&R.M.Smith,Vols.2,5,6(NY=Plenum,1974,1982,1989)；金屬配體熱量手冊，3rded.J.J.Christensen&R.Μ.Izatt(NY=MarcelDekker,Inc.1983))。表1金屬離子曲恩汀青霉胺銅20.05(Cu2+)18.18(Cu1+)鈀(Pd2+)39Λ汞(Hg2+)2451673鉍(Bi3+)ΕΓ9鎳(Ni2+)1^810.70鋅(Zn2+)129ΓΤ鎘(Cd2+)οΓθ11.55鈷(Co2+)οΓθ898<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>表1中的數(shù)據(jù)顯示曲恩汀與鈀、汞、鉍、銅和鎳結(jié)合非常緊固。曲恩汀與鋅、鎘、鉛和鈷的結(jié)合也相當(dāng)緊固。表1進(jìn)一步顯示青霉胺與銅、汞和銦結(jié)合非常緊固。青霉胺與鎘、鋅、鉛、鎳和銀的結(jié)合也相當(dāng)緊固。放射性核素或放射性同位素是具有不穩(wěn)定原子核的原子。放射性核素會放射性衰減和放射對人體和動物有害的Y射線和/或亞原子微粒。過度暴露于放射性核素可導(dǎo)致放射中毒引起器官損傷。典型的放射性核素包括镅-241、鈀-103、锎-252、磷-32、銫-137、钚-238、钚-239、鈷-60、釙-210、錯(cuò)-226、鍶-90(Sr-90/Y-90)、釔-90、銥-192和鈾-234、鈾-235。放射性核素引起了恐怖分子的興趣，因?yàn)榉派湫院怂乜杀挥糜谥圃炖绱蠓秶⒉シ派湫圆牧系姆派湫哉◤椀姆派浒l(fā)散裝置(RDD)。本發(fā)明擬用曲恩汀和/或青霉胺作為放射性核素(包括上面列舉的放射性同位素)的對抗物。治療有效量的曲恩汀和/或青霉胺可給藥于受感染的病人以消退或緩解這種暴露的負(fù)效應(yīng)。曲恩汀和/或青霉胺不僅僅可被用于去除放射性核素而且還可被用于去除它們的分解產(chǎn)物。例如，釔-90是鍶-90的放射性分解產(chǎn)物，釙-210是氡-222的分解產(chǎn)物，氡-222本身來自鈾-238。使用放射性核素的恐怖襲擊是在美國受到日益關(guān)注的問題。例如放射性炸彈的RDD的爆炸產(chǎn)生放射性和非放射性碎片以及放射性塵埃，引起放射污染、物理傷害、燒傷以及人口密集區(qū)的恐慌和畏懼。由RDD引起的放射污染可影響的范圍從例如街道、單個(gè)樓房或城市街區(qū)的小的局部區(qū)域至高達(dá)數(shù)平方英里的大面積區(qū)域。美國在意識到對國家恐怖襲擊作出快速反應(yīng)的需要后已建立國家策略儲備(StrategicNationalStockpile,SNS)計(jì)劃以確保對抗化學(xué)、放射學(xué)和生物病菌和制劑的負(fù)效應(yīng)所必需的救生藥物、解毒劑和其他醫(yī)藥用品和設(shè)備的可用性。本發(fā)明擬用曲恩汀和/或青霉胺在針對大范圍放射污染為群體或區(qū)域做準(zhǔn)備的方面的用途。本發(fā)明包括儲存一定劑量的曲恩汀劑型足以治療這種暴露于放射污染在一周內(nèi)或少于一周，優(yōu)選地在三天內(nèi)或少于三天，更優(yōu)選地在兩天內(nèi)或少于兩天或者在一天內(nèi)或少于一天的群體的每個(gè)成員。所述劑型的儲存可足以治療數(shù)量為5，OOO個(gè)體至1百萬個(gè)體，或10，000個(gè)體至1百萬個(gè)體，或25，000個(gè)體至1百萬個(gè)體，或100，000個(gè)體至1百萬個(gè)體范圍內(nèi)的群體的每個(gè)成員。在一些情況下，所述劑型的儲存可足以治療具有500，000個(gè)體至1百萬個(gè)體的群體的每個(gè)成員。根據(jù)放射污染的程度，可以以每天4劑量至8劑量的28天療程治療嚴(yán)重暴露于RDD感染的人。每個(gè)劑量可包含例如在一個(gè)膠囊內(nèi)的250mg鹽酸曲恩汀。因此，在28天療程中一個(gè)個(gè)體的治療需要大約112至224劑量或膠囊?；谶@種治療方案，為了治療具有約5，000個(gè)體的群體的每個(gè)成員需要大約560，000劑量至1.1百萬劑量或膠囊的曲恩汀。考慮到目前在美國曲恩汀的大約60天的交貨期和生產(chǎn)能力，大約560，000至1.1百萬劑量或膠囊應(yīng)儲存以為被例如放射性炸彈的RDD襲擊的這種群體做準(zhǔn)備。一定劑量的青霉胺的劑型也可儲存并且與曲恩汀按順序給藥或伴隨給藥。青霉胺可以與曲恩汀聯(lián)合的單一劑型儲存，或可選地，以獨(dú)立的劑型儲存。青霉胺的儲存可足以治療對于數(shù)量為5，000個(gè)體至1百萬個(gè)體，或10，000個(gè)體至1百萬個(gè)體，或15，000個(gè)體至1百萬個(gè)體，或25，000個(gè)體至1百萬個(gè)體，或100，000個(gè)體至1百萬個(gè)體范圍內(nèi)的群體的每個(gè)成員。在一些情況中，青霉胺劑型的儲存足以用于對于具有500，000個(gè)體至1百萬個(gè)體的群體。為治療受嚴(yán)重暴露感染的人，每天3劑量至6劑量的28天治療療程需要大約84劑量至168劑量。基于這種治療方案，為治療約15，000成員的受感染的群體中的每個(gè)人需要大約1，260，000劑量至2，520，000劑量的青霉胺?？紤]到目前在美國青霉胺約73天的交貨期和生產(chǎn)能力，應(yīng)儲存大約1，260，000劑量至2，520，000劑量以為被例如放射性炸彈之類的RDD襲擊的約15，000成員的群體做準(zhǔn)備。下表2提供推薦的對于不同大小的群體用于儲存的曲恩汀和青霉胺的劑型數(shù)量。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>在另一種實(shí)施方式中，曲恩汀和/或青霉胺與在治療放射性核素污染中使用的一種或一種以上添加的促排劑聯(lián)合給藥。所述促排劑包括氯化銨、鈣、Ca-DTPA(二乙烯三胺五乙酸(diethylenetriaminepentaaceticacid))、葡萄糖酸鈣、二巰基丙醇、碘化鉀、磷酸鉀、丙硫氧嘧啶、普魯士藍(lán)、海藻酸鈉、酸式碳酸鈉、磷酸鈉和Zn-DTPA。在其他一些實(shí)施方式中，添加的促排劑是與釙-210結(jié)合的螯合劑。所述螯合劑包括但不限于，2，3-二巰基丙醇(BAL)，2，3-二巰基丙烷-1-磺酸鹽(2，3-dimercaptopropane-l-sulfonate)(DMPS)、2_(2，3-二巰基丙氧基)-乙磺酸鹽(2-(2，3-dimercaptopropoxy)-ethanesulfonate)(DMPS,Unithol)、2_(2，3_二疏基丙氧基)-乙石黃酸鹽(2_(2,3-dimercaptopropoxy)-ethanesulphonate)(Oxathiol)、N-(2,3_二疏基丙基)-鄰甲酰胺苯甲酸(N-(2,3-dimercaptopropyl)-phthalamidicacid)(DMPA)、內(nèi)消方-二巰基琥拍酸(meso-dimercaptosuccinicacid)(meso-DMSA)、二乙基二硫氰酸鹽(diethyldithiocarbamate)(DDTC)、內(nèi)消旋_2，3_二巰基琥珀酰胺(meso-2，3-dimercaptosuccinamide)(Mi-BDMA)和N，N，-二(2-羥乙基)-乙烯基二胺-N，N，-雙二硫代甲酸酯(N，N，-di(2-hydroxyethyl)-ethylenediamine-N,N'-biscarbodithioate)(HOEtTTC)。實(shí)施例實(shí)施例1.鈷-60的排出材料。例如6tlCoCl2之類的6tlCo的氯化物原溶液用無菌鹽溶液稀釋以調(diào)節(jié)至所期望的活度并用于IV給藥。給藥溶液的活度用裝配了3英寸NaI(Tl)水晶屏蔽檢測器的自動Wallac1480(PerkinElmer)γ計(jì)數(shù)器確定。在緊接給藥之前使用去離子(DI)水制備青霉胺(CUPRIMINE)和曲恩汀(SYPRINE)口服給藥溶液，這樣單一給藥劑量將含有目標(biāo)藥物15mg/kg。將含有青霉胺(0.350g)或曲恩汀(0.270g，使用前儲藏在4°C至6°C冰箱中)的一個(gè)膠囊的稱重的容納物溶解于20mL的DI水中并且過濾以制備給藥溶液。接著，用DI水將2.5mL和3.5mL等份青霉胺和曲恩汀溶液分別稀釋至6mL。將含有5.0mg/mL或5.2mg/mL青霉胺或曲恩汀的0.5mL所得溶液分別經(jīng)口服管飼給藥于雄性Wistar-Han大鼠°動物。具有頸內(nèi)靜脈留置導(dǎo)管的雄性Wistar-Han大鼠從CharlesRiverBreeding實(shí)驗(yàn)室(Raleigh，NC)獲得。在適應(yīng)期間，給動物提供隨意的食物和水。光循環(huán)為12小時(shí)亮/12小時(shí)暗并且相對濕度和溫度保持為50士15%和22士2°C。所有的動物使用方案由在Battelle,PacificNorthwestDivision的InstitutionalAnimalCare禾口UseCommittee批準(zhǔn)并且根據(jù)"GuidefortheCareandUseofLaboratoryAnimals"(NationalResearchCouncil,WashingtonDC,1996)執(zhí)行研究。給藥方案。在暴露之前的整夜限制動物進(jìn)食。在暴露時(shí)，動物組(N=6)通過頸內(nèi)靜脈留置導(dǎo)管以無菌鹽水中14.0士0.6KBq的劑量接受6tlCo溶液的單一的靜脈(IV)注射(0.2mL)。緊接著IV注射之后，兩組動物以15mg/kg的單一目標(biāo)日劑量接受0.5mL青霉胺或曲恩汀水溶液的口服管飼給藥。實(shí)際遞送的劑量基于個(gè)體動物的重量計(jì)算(表3)。一組動物用放射性核素給藥而沒有螯合作用材料隨后給藥以作為對照組。給藥之后，動物放置在Nalgene代謝籠中分別收集尿液和糞便。用青霉胺或曲恩汀給藥后，限制動物進(jìn)食一個(gè)小時(shí)。在放射性核素給藥后48小時(shí)將動物宰殺。宰殺時(shí)，血液和組織(肝臟、腎臟、脾臟、胃腸道、肌肉、骨骼、骨髓和肺)被收集、稱重并且用Wallac1480γ計(jì)數(shù)器計(jì)算放射活度。在調(diào)整組織(被收集用于計(jì)算總器官質(zhì)量)的克數(shù)之后，Y計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)被標(biāo)準(zhǔn)化為給藥劑量百分?jǐn)?shù)。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)評估。每個(gè)數(shù)據(jù)組根據(jù)Dixon’sQ-測試評估潛在的異常值。在這個(gè)測試中，使用0.625的Q參數(shù)(N=6，95%可信水平，a=0.05)(I)0對于每個(gè)組織而言，使用Excel軟件執(zhí)行用于對照組和每個(gè)治療組的方差齊性的初步F-測試(95%可信水平，a=0.05)。如果計(jì)算出的可能性ρ值小于0.05，方差被假定不相等?；谶@個(gè)信息，使用Excel軟件執(zhí)行“Τ-測試假定不相等方差的兩個(gè)樣品”或“Τ-測試假定相等方差的兩個(gè)樣品”(95%可信水平，a=0.05)。計(jì)算出的小于0.05的ρ值提供證據(jù)以否定等同方法的無效假設(shè)。得到的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)列于表4用作數(shù)據(jù)評估指南(表5;估算假定總骨骼、血液或肌肉分別為動物體重的大約7.3%、6%或40%；骨骼中的Co-60基于股骨數(shù)據(jù)計(jì)算得出-R.P.Brown,Μ.D.Delp,S.L.Undstedt,L.R.Rhomberg和R.P.Beliles,PhysiologicalParameterValuesforPhysiologicallyBasedPharmacokineticModels.ToxicologyandIndustrialHealth,1997，13(4):407_484)。表4.統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)評估的總結(jié)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>表5.在Wistar-Han大鼠中IV給藥的Co_60的組織分布用青霉胺和曲恩汀口服治療的效果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>單一IV注射之后，Co-60的消除被監(jiān)測兩天。結(jié)果如圖1和表4至表5所示。表達(dá)為每克總排泄物中CO-60的放射活度(每分鐘衰變-DPM)的結(jié)合了尿液和糞便的排泄物在暴露之后的第一天最高，在第二天降低了3.6倍。排泄的主要途徑是經(jīng)過尿液排泄，在暴露之后的第一天和第二天內(nèi)，在尿液中分別排泄出約47%和9%的所施加的放射活度(administeredradioactivity)。相比較而言，在同樣的時(shí)間間隔內(nèi)，糞便排泄占給藥放射活度的大約9%和4.4%。青霉胺或曲恩汀的給藥表明加速了總的Co-60排泄，然而這個(gè)結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)上不是十分顯著。暴露于Co-60之后第二天收集死后的所有組織(除了骨髓)被發(fā)現(xiàn)含有可檢測量的放射活度(表5)，其中在肝臟中放射活度最大，其后是肌肉、腸、腎臟和脾臟。在假設(shè)股骨代表整體骨骼的情況下，基于股骨的數(shù)據(jù)計(jì)算整個(gè)骨骼的給藥放射活度百分?jǐn)?shù)。肺、脾臟和胃組織被發(fā)現(xiàn)含有較少量的放射活度。在IV注射之后第二天血液中含有殘留的放射活度(表5)。在CO-60IV給藥之后立即口服給藥青霉胺和曲恩汀。實(shí)際的劑量(mg藥物/千克體重)列于表3。青霉胺和曲恩汀的平均劑量分別為14.6士0.6和15.2士0.8。盡管給藥確實(shí)增加了在暴露之后第一天的約3%Co-60的糞便排泄，但青霉胺沒有改變Co-60的尿液排泄，這樣總排泄略有增加。曲恩汀顯著提高了第一天的尿液排泄。然而，糞便排泄降低，并且在排泄方面總體效果與青霉胺在排泄方面的總體效果類似。對于用口服青霉胺治療的動物而言，觀察到組織中放射活度的分布顯著減少。例如，在給藥僅單一劑量的青霉胺之后，青霉胺的給藥導(dǎo)致在骨骼(基于股骨數(shù)據(jù))、肝臟、腎臟中的給藥的劑量分?jǐn)?shù)減小51%至56%(表5)。類似地，在胃和肌肉中分別觀察到具有相應(yīng)的減小45%和39%的較低水平的給藥劑量百分?jǐn)?shù)。青霉胺略微降低了Co-60的血液水平。盡管曲恩汀的給藥導(dǎo)致Co-60在血液中升高(表5)，曲恩汀使骨骼組織中的Co-60水平降低了35%，并且使腸中的Co-60水平降低了44%，以及在循環(huán)中表現(xiàn)出維持Co-60，這對于保護(hù)Co-60會另有沉積的器官可以是有價(jià)值的。曲恩汀的使用可因此有利于排斥D-青霉胺的病人。另外，青霉胺和曲恩汀的伴隨使用或按順序使用相比單一制劑的使用可去除更多的Co-60。曲恩汀可幫助在循環(huán)中維持Co-60，相比當(dāng)Co-60沉積在器官內(nèi)時(shí)，由青霉胺從循環(huán)中去除Co-60更容易。實(shí)施例2.釙-210的排出動物接受Po-210的單一IV給藥(大約90kBq/動物)，隨后口服給藥青霉胺或曲恩汀(15mg/kg)。以24小時(shí)的間隔重復(fù)給藥，總的劑量數(shù)為5。動物在給藥前一個(gè)小時(shí)和給藥后一個(gè)小時(shí)禁食。在放射暴露后第六天宰殺動物，并且組織被收集、稱重并被處理用于分析。樣品的相關(guān)a活度由液體閃爍計(jì)數(shù)(LSC)使用PackardTriCarb2260XL儀器確定。從暴露于Po-210的動物中收集的血液、糞便和肝臟樣品在室溫下使用過氧化氫和濃縮硝酸分解。分解的樣品用蒸餾水稀釋以降低硝酸濃度至大約1M。將等份的所得溶液加入至UltimaGoldXR液體閃爍試劑(PackardBioscience，Meriden，CN)，計(jì)數(shù)并修正可能的淬滅。如表6和圖2所示，青霉胺降低脾臟、股骨和肺中的Po-210，而曲恩汀降低脾臟、股骨和肝臟中Po-210水平。表6.在Wistar-Han大鼠中IV給藥Po_210的組織分布用青霉胺和曲恩汀口服治療的效果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>實(shí)施例3.評價(jià)其他金屬排出的一般方法根據(jù)實(shí)施例1來制備青霉胺(CUPRIMINE)和曲恩汀(SYPRINE)口服給藥溶液。雄性Wistar-Han大鼠在暴露之前整夜禁食并且給予單一靜脈(IV)注射含金屬污染物的溶液，所述金屬污染物溶液含有例如鍶、銫、鐳、鈀、銥、鈾、钚、镅、鋦、锎和/或它們的組合物或它們的同位素。緊接著IV注射之后，以單一目標(biāo)日劑量15mg/kg給予兩組動物口服管飼劑量0.5mL青霉胺或曲恩汀的水溶液。放射性核素給藥后48小時(shí)宰殺動物。在宰殺時(shí)，血液和組織(肝臟、腎臟、脾臟、胃腸道、肌肉、骨骼、骨髓和肺)被收集、稱重并且分析存在的金屬污染物。由如前所述可以理解，雖然為了舉例說明的目的在此描述了本發(fā)明的具體實(shí)施方式，但是，在不偏離權(quán)利要求書中要求保護(hù)的本發(fā)明的精神和范圍的情況下可進(jìn)行各種變化。權(quán)利要求一種治療遭受過度暴露于金屬污染物的一種或一種以上負(fù)效應(yīng)的哺乳動物的方法，所述方法包括將治療有效量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物給藥于受感染的哺乳動物，所述金屬污染物包括選自元素周期表的IA族、IIA族、VIB族、VIIB族、VIII族、IB族、IIB族、IIIA族、IVA族、VA族、VIA族、鑭系和錒系金屬中的至少一種金屬，其中所述至少一種金屬不是銅。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述至少一種金屬選自汞、鎳、鉍、鈀、鋅、鎘、鉛、鈷、鉻、鐵、銀和銫。3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述至少一種金屬是鈀。4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述至少一種金屬是鈷。5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述至少一種金屬是放射性同位素。6.如權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述至少一種金屬是放射性同位素。7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述至少一種金屬是選自镅、锎、鈷、銥、鈀、钚、釙和鈾的金屬的放射性同位素。8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中，所述至少一種金屬是釙。9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述給藥為腸內(nèi)實(shí)施。10.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述給藥為腸外實(shí)施。11.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物以每天每千克哺乳動物約4mg自由基至每天每千克哺乳動物約25mg自由基范圍內(nèi)的劑量給藥。12.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述給藥與有效量的青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物的給藥按順序?qū)嵤┗虬殡S實(shí)施。13.如權(quán)利要求12所述的方法，其中，所述青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物以每天每千克哺乳動物約2mg青霉胺至每天每千克哺乳動物約30mg青霉胺范圍內(nèi)的劑量給藥。14.如權(quán)利要求12所述的方法，其中，所述受感染的哺乳動物過度暴露于至少兩種金屬。15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中，所述至少兩種金屬包括銦。16.如權(quán)利要求12所述的方法，其中，將有效量的鹽酸曲恩汀和d-青霉胺聯(lián)合給藥。17.—種針對過度暴露于大規(guī)模金屬污染的負(fù)效應(yīng)治療個(gè)體群的方法，所述方法包括提供一定劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的數(shù)量為5，000個(gè)體至1，000，000個(gè)體的群體的每個(gè)成員O18.如權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述方法還提供一定劑量的青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的數(shù)量為15，000個(gè)體至1，000，000個(gè)體的群體的每個(gè)成員。19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中，曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的所述劑型和青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物的所述劑型以聯(lián)合的單一劑型提供。20.如權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述方法提供所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在三天內(nèi)或少于三天的所述群體的每個(gè)成員。21.如權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述方法提供所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，該劑量足以治療所述過度暴露在兩天內(nèi)或少于兩天的所述群體的每個(gè)成員。22.如權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述方法提供所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在一天內(nèi)或少于一天的所述群體的每個(gè)成員。23.如權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述方法提供所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的數(shù)量為15，OOO個(gè)體至1，000，000個(gè)體的群體的每個(gè)成員。24.如權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述方法提供所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的數(shù)量為100，000個(gè)體至1，000，000個(gè)體的群體的每個(gè)成員。25.如權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述方法提供所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的數(shù)量為500，000個(gè)體至1，000，000個(gè)體的群體的每個(gè)成員。26.—種針對過度暴露于大規(guī)模金屬污染的負(fù)效應(yīng)為群體做準(zhǔn)備的方法，所述方法包括儲存一定劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的數(shù)量為5，000個(gè)體至1，000，000個(gè)體的群體的每個(gè)成員O27.如權(quán)利要求26所述的方法，其中，所述方法還儲存一定劑量的青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的數(shù)量為15，000個(gè)體至1，000，000個(gè)體的群體的每個(gè)成員。28.如權(quán)利要求27所述的方法，其中，曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的所述劑型以及青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物的所述劑型以聯(lián)合的單一劑型儲存。29.如權(quán)利要求26所述的方法，其中，所述方法儲存所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在三天內(nèi)或少于三天的所述群體的每個(gè)成員。30.如權(quán)利要求26所述的方法，其中，所述方法儲存所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在兩天內(nèi)或少于兩天的所述群體的每個(gè)成員。31.如權(quán)利要求26所述的方法，其中，所述方法儲存所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以在治療所述過度暴露一天內(nèi)或少于一天的所述群體的每個(gè)成員。32.如權(quán)利要求26所述的方法，其中，所述方法儲存所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的數(shù)量為15，000個(gè)體至1，000，000個(gè)體的群體的每個(gè)成員。33.如權(quán)利要求26所述的方法，其中，所述方法儲存所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的數(shù)量為100，000個(gè)體至1，000，000個(gè)體的群體的每個(gè)成員。34.如權(quán)利要求26所述的方法，其中，所述方法儲存所述劑量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的劑型，所述劑量足以治療所述過度暴露在一周內(nèi)或少于一周的數(shù)量為500，000個(gè)體至1，000，000個(gè)體的群體的每個(gè)成員。35.如權(quán)利要求12所述的方法，其中，所述曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物和所述青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物以單一聯(lián)合劑型伴隨給藥。36.一種治療遭受過度暴露于金屬污染物的一種或一種以上負(fù)效應(yīng)的哺乳動物的方法，所述方法包括將治療有效量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物和青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物順序地或伴隨地給藥于受感染的哺乳動物，所述金屬污染物包括選自镅、锎、鈷、鋦、銥、鈀、钚、釙、鐳、鍶和鈾的金屬的至少一種放射性同位素37.如權(quán)利要求36所述的方法，其中，所述放射性同位素是鈷-60或釙-210或它們的組合物。38.一種藥物劑型，所述藥物劑型包含有效量的曲恩汀或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物以及有效量的青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物和任選地包括一種或一種以上藥學(xué)上可接受的載體。39.一種治療遭受過度暴露于釙的一種或一種以上負(fù)效應(yīng)的哺乳動物的方法，所述方法包括將治療有效量的青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽、酯或溶劑化物給藥于受感染的哺乳動物。40.如權(quán)利要求39所述的方法，其中，所述給藥為腸內(nèi)實(shí)施。41.如權(quán)利要求39所述的方法，其中，所述給藥為腸外實(shí)施。42.如權(quán)利要求39所述的方法，其中，所述青霉胺或它的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物以每天每千克哺乳動物約2mg自由基至每天每千克哺乳動物約30mg自由基范圍內(nèi)的劑量給藥。43.如權(quán)利要求14所述的方法，其中，所述至少兩種金屬包括釙。全文摘要本發(fā)明提供用于緩解、預(yù)防和治療過度暴露于金屬污染物的負(fù)效應(yīng)的方法。使用曲恩汀和/或青霉胺或它們的鹽、酯、溶劑化物可治療暴露于金屬污染物的受體。此外，群體通過提供足量的這種對抗物可保護(hù)其成員。文檔編號A61K31/132GK101820870SQ200880106678公開日2010年9月1日申請日期2008年7月25日優(yōu)先權(quán)日2007年7月27日發(fā)明者巴里·萊文森,邁克爾·韋爾斯申請人:阿托恩藥品公司