專利名稱：一種聚離子復(fù)合物膠束載藥材料及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種聚離子復(fù)合物膠東載藥材料及其制 備方法和應(yīng)用，具體涉及利用共聚物聚乙二醇-接技-聚天冬酰肼
(raPEG'-g-PAHy)帶正電荷的特性與帶負(fù)電荷的核酸類藥物形成聚離子復(fù)合 物膠東載藥系統(tǒng)及其制備方法和應(yīng)用，還涉及該共聚物的制備方法。
背景技術(shù)：
聚離子復(fù)合物膠束(polyion complex micelles, PIC)作為一種新 型給藥體系，近年來受到了廣泛的關(guān)注。這種膠東是由一些帶有親水性鏈 段和帶電荷鏈段的嵌段共聚物或接技共聚物與藥物在水溶液中自發(fā)組裝成 的納米粒子，其形成膠東的原因在于，帶電荷的藥物與帶相反電荷的共聚 物通過靜電作用相結(jié)合形成膠束的內(nèi)核，內(nèi)核外包裹著親水性的PEG外殼。 膠東獨特的核殼結(jié)構(gòu)可以保護禽物，延長藥物的血漿半衰期。因此聚離子 復(fù)合楊膠東被廣泛用于荷電的藥物，如基因藥物或蛋白多肽類藥物等。
基因治療是將有一定功能的外源基因?qū)肴梭w細(xì)胞，以補充機體所缺 失的基因或糾正機體異常表達(dá)的基因。隨著基因治療這種新的治療手段的 出現(xiàn)，基因藥物也成為藥學(xué)領(lǐng)域中的一個焦點，與傳統(tǒng)藥物的不同之處在 于，它是將一種特殊的活性物質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞內(nèi)，使其在特定的部位，特定 的時間進行表達(dá)，從而達(dá)到治療的目的?；蛑委熤羞x擇合適的基因載體 將其ll送到靶組織，并進入特定的細(xì)胞，是十分關(guān)鍵的問題。目前，應(yīng)用
于基因治療的載體主要有病毒載體和非病毒載體。其中病毒載體已被廣泛 而有效的應(yīng)用，但病毒載體存在毒性大，具有免疫原性，靶向性差，制備 復(fù)雜，費用高等不足之處。所以近年來，人工合成的非病毒載體越來越受 到關(guān)注。研究最多的非病毒載體是陽離子脂質(zhì)體，陽離子脂質(zhì)體可以安全 有效的攜帶較大的DNA分子，制備簡單，無免疫源性，但其體內(nèi)轉(zhuǎn)染率卻
極低。'這主要是因為陽離子脂質(zhì)體在體內(nèi)環(huán)境中不夠穩(wěn)定，且很容易與體 內(nèi)正常細(xì)胞如血細(xì)胞(帶負(fù)電荷)發(fā)生非特異性結(jié)合，降低脂質(zhì)體的穩(wěn)定性， 影響其對基因藥物的保護和傳遞。可生物降解的聚合物材料為骨架的納米 粒，作為基因藥物的非病毒載體得到了廣泛的關(guān)注和研究，由于基因藥物 不能有效的主動進入細(xì)胞，必須進行縮合或依賴其他技術(shù)的支持。納米粒 具有結(jié)合并濃縮基因藥物，將藥物高效導(dǎo)入各種細(xì)胞的能力，體外顯示無 明顯的細(xì)胞毒性。同時動物實驗證明，納米載體可以使藥物獲得有效的基 因轉(zhuǎn)移率。聚乙二醇-接技-聚天冬酰肼在水溶液中帶正電荷，可以通過靜 電作用將帶負(fù)電荷的基因藥物濃縮并包裹起來進行保護，除了具有陽離子 脂質(zhì)體的一般優(yōu)點外，還克服了脂質(zhì)體穩(wěn)定性差，靜注后迅速被肝脾攝取 并清除等不足，并且還可以在載體表面連接特異性配體，使其有效的達(dá)到 乾組織。
#隨著分子生物學(xué)、生物化學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，肽類和蛋白質(zhì)類藥物 的研究取得了劃時代的進展，涌現(xiàn)出了許多優(yōu)良的蛋白質(zhì)、肽類藥物，主 要包括酶、細(xì)胞因子等一些具有特殊功能的蛋白質(zhì)。由于其高生物活性、高特異性等優(yōu)點而備受關(guān)注，但是這類藥物普遍存在著體內(nèi)穩(wěn)定性差、極 易變性失活、易于從血液循環(huán)中清除等缺陷，限制了蛋白多肽類藥物在臨 床上的應(yīng)用。特別是，蛋白多肽類藥物作為一種異源性的蛋白，具有很強 的免疫源性，容易被機體免疫系統(tǒng)識別并清除，導(dǎo)致藥物的血漿半衰期縮 短。為了獲得理想的治療效果，不得不增加給藥劑量和給藥次數(shù)，導(dǎo)致嚴(yán) 重的毒副作用，降低患者的順應(yīng)性。因此，如何將此類藥物制成穩(wěn)定、安 全、有效的制劑，已成為一個極富挑戰(zhàn)性和具有實用價值的研究熱點。目 前，聚離子復(fù)合物膠束已被應(yīng)用于包載蛋白多肽類的藥物，由于蛋白、多 肽類藥物在偏離了等電點的情況下會帶電荷，所以可以選取帶相反電荷的 共聚物與藥物通過靜電作用自發(fā)形成膠束。
用膠東作為基因、蛋白、多肽類藥物的載體可以在一定程度上克服這 些藥物的缺點 一方面，親水性外殼可以使藥物及載體免受體內(nèi)蛋白的吸 附，避免載體被吸附后降解，產(chǎn)生藥物的泄露，保護藥物不被酶水解。同 時，膠東不易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬，降低藥物經(jīng)肝臟的清除幾率，從而提 高其穩(wěn)定性，維持其活性，延長藥物的血漿半衰期，提高其生物利用度，
另一方面，PEG層的存在使得膠東不易被血液中的蛋白識別，降低藥物免
疫反應(yīng)，因此降低蛋白多肽類藥物的免疫源性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種在水溶液中帶正電荷的接技共聚物材料聚
乙二醇-接枝-聚天冬酰肼(mPEG-g-PAHy)及其制備方法。本發(fā)明的另一目 的在于提供用此共聚物材料包載帶負(fù)電荷的藥物(如基因藥物、蛋白、多 肽類藥物等)，在水溶液中自組裝形成納米級的聚離子復(fù)合物膠東。其中， PAHy帶正電荷，與帶負(fù)電荷的藥物聚集形成膠束內(nèi)核，PEG伸展成為親水
性的外殼，維持膠束的穩(wěn)定性并保護內(nèi)核中藥物，有效的逃避生物體內(nèi)網(wǎng) 狀內(nèi)皮系統(tǒng)對藥物的吞噬和血漿蛋白對藥物的吸附作用，因此這類聚離子 復(fù)合物膠束是一類優(yōu)良的藥物載體。
本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的
聚乙二醇-接枝-聚天冬酰肼的結(jié)構(gòu)如下<formula>formula see original document page 4</formula>
其中n+m=200-400,聚乙二醇的接枝率為n/(n+m) x 100%=3%-25%。 該接枝共聚物的制備方法稱取1.367gPAHy溶于蒸餾水中，再加入適 量一端為醛基另一端為單甲醚的聚乙二醇(mPEG-CHO),用pH值調(diào)節(jié)劑調(diào) 節(jié)反應(yīng)體系的pH值為5-6,室溫25。C,攪拌反應(yīng)20- 36h，加入還原劑， 再次用pH值調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH值到5-6,室溫，反應(yīng)24—8h。反應(yīng)溶液透析3d,冷凍干燥得到產(chǎn)品。上述還原劑為氰基硼氫化鈉(NaBH3CN)。
上述pH值調(diào)節(jié)劑為鹽酸、磷酸、枸櫞酸(鈉)、冰醋酸、緩沖劑如磷
酸二氫鈉與磷酸氫二鈉中的一種或兩種以上的混合物。
PAHy和mPEG-CH0的比例決定了聚乙二醇-接技-聚天冬酰肼中聚乙二
醇的接枝率的不同，mPEG-CH0的用量為PAHy的1-12倍，即1. 36-16g。 其形成聚離子復(fù)合物膠東的方案如下
該共聚物在水中特別是在偏酸性條件下帶正電荷能與帶負(fù)電荷的藥物 通過靜電作用結(jié)合，并自組裝形成納米膠束，將聚乙二醇-接枝-聚天冬酰 肼溶解于蒸餾水中，濃度為0. 01-5%w/v，調(diào)節(jié)pH值為3-5,向體系中逐滴 加入負(fù)電荷藥物的水溶液，濃度為0. 001-2%w/v,室溫下攪拌IO-15 min, 即得到載藥的聚離子復(fù)合物膠東，粒徑在20-300 nm。共聚物的粒徑取決 于共聚物中PEG的接枝率。接枝率6-24%，其粒徑132 nm-176 nm。 本發(fā)明的優(yōu)點在于
1. 本發(fā)明所述的聚離子復(fù)合物納米膠東，粒徑小分布窄(根據(jù)共聚物 分子量不同，載藥膠東的粒徑從10-200 nm不等)。
2. 共聚物的分子量可控，從而形成膠東的大小、載藥量和釋藥速率可 控，為藥物控釋載體的研究提供依據(jù)。
3. 聚氨基酸類接枝共聚物，由于其主鏈上眾多的肽鍵，使其在體內(nèi)能 被蛋白酶水解，生成無毒的小分子物質(zhì)，可以被機體代謝排除，因此這類 共聚物具有較高的安全性和生物相容性。
4. 整個膠束的制備過程十分簡單，易于大規(guī)模生產(chǎn)。傳統(tǒng)的親疏水性 膠東制備過程中都有大量有機溶劑的加入，而聚離子復(fù)合物膠束的載藥過 程完全在水溶液中進行，無有機物的加入，確保膠束制劑中無有機殘留， 進一步提高制劑的安全性。
具體實施例方式
#以下通過實施例對本發(fā)明進行進一步闡述，但并不影響本發(fā)明的保護 范圍。 實施例1
稱取l. 367gPAHy溶于蒸餾水中，加入4g —端為醛基的另一端為單甲 醚的聚乙二醇(mPEG-CHO),用10%醋酸溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)的pH值為6,室 溫?fù)璋璺磻?yīng)24h，加入0. 5 3gNaBH3CN,再次用10%醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到6, 室溫反應(yīng)48h。反應(yīng)溶液透析3d，冷凍干燥得到mPEG-g-PAHy。
<formula>formula see original document page 5</formula>將25mg接枝共聚物溶于12mL蒸餾水中，用醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到3. 5， 小干擾RNA 5 0mg溶于pH5. 0-8. 0緩沖溶液中，將小干擾RNA溶液在室溫攪 拌下，逐滴加入接技共聚物溶液中，攪拌15min,冷凍干燥后即得到聚離子 復(fù)合物載藥膠束。用動態(tài)光散射法對其粒徑及分布進行測定，膠東的平均 粒徑'(強度徑)為132nm,載藥量為8.02%,在模擬體液(pH 7.4磷酸鹽 緩沖溶液)中，lh、 2h、 3h、 4h、 6h、 12h、 24h藥物的累計釋放量為3.41%、 7.33%、 14.79%、 20.85%、 25.69%、 62.58%、 94.01%。 實施例2
稱取1. 367g PAHy溶于蒸餾水中，加入8g mPEG-CHO，用10%醋酸溶液 調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)的pH值為6,室溫攪拌反應(yīng)24h,加入1. 06gNaBH3CN,界次 用10%醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到6，室溫反應(yīng)48h。反應(yīng)溶液透析3d,冷凍干 燥得到mPEG-g-PAHy。
O廣NH—NH 呵
_HC~CO~N
■Hp~H2C—CO~NH-0(>~NHh"NH2
m
(其中n+n^250, n/(n+m) x 100%=12%)
.將25mg接枝共聚物溶于'12mL蒸餾水中，用醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到3. 5, 小干擾RNA 50mg溶于pH5. 0-8. 0緩沖溶液中，將小干擾RNA溶液在室溫攪 拌下，逐滴加入接枝共聚物溶液中，攪拌15min，冷凍干燥后即得到聚離子 復(fù)合物載藥膠束。用動態(tài)光散射法對其粒徑及分布進行測定，膠東的平均 粒徑(強度徑)為148nm,載藥量為8.11%,在模擬體液(pH 7. 4磷酸鹽 緩沖溶液)中，lh、 2h、 3h、 4h、 6h、 12h、 24h藥物的累計釋放量為2.67%、 6.7, 11.12%、 17.04%、 20.45%、 60.33%、 93.22%。 實^例3
稱取1. 367g PAHy溶于30mL蒸餾水中，加入12g mPEG-CHO，用10% 醋酸溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)的pH值為6，室溫攪拌反應(yīng)24h,加入NaBH3CN1. 59g, 再次用10%醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到6,室溫反應(yīng)48h。反應(yīng)溶液透析3d,冷 凍干燥得到mPEG-g-PAHy。
呵
Hp~H2C-CO~NH-OC~NH~NH，
m
(其中n+m=300, n/ (n+m) x 100%=18°/。)將0. 025g接技共聚物溶于12mL蒸餾水中，用醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到 3.5,小干擾RNA 50mg溶于pH5. 0-8. 0緩沖溶液中，將小干擾RNA溶液在 室溫攪拌下，逐滴加入接枝共聚物溶液中，攪拌15min，冷凍干燥后即得到 聚離子復(fù)合物載藥膠束。用動態(tài)光散射法對其粒徑及分布進行測定，膠東 的平均粒徑(強度徑)為159nm,載藥量為18.69%,在模擬體液(pH 7.4 磷酸鹽緩沖溶液)中，lh、. 2h、 3h、 4h、 6h、 12h、 24h藥物的累計釋放量 為2.54%、 5.02%、 10.13%、 18.74%、 54.97%、 88.38%。 實施例4稱取1. 367 g PAHy溶于蒸餾水中，加入16g mPEG-CHO,用10%醋酸溶 液調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)的pH值為6,室溫攪拌反應(yīng)24 h,加入NaBH3CN2. 12 g， 再次用10%醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到6，室溫反應(yīng)48 h。反應(yīng)溶液透析3 d， 冷凍干燥得到mPEG-g-PAHy。OJ>~NH_NH， . —HC~CO—NH-H,C_CO—NH-m(其中n+m=400, n/ (n+m) .x 100%=24% )"將0. 025g接技共聚物溶于12mL蒸餾水中，用醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到 3.5,小干擾RNA 50mg溶于pH5. 0-8. 0緩沖溶液中，將小干擾RNA溶液在 室溫攪拌下，逐滴加入接枝共聚物溶液中，攪拌15min，冷凍干燥后即得到 納米級載藥膠束。用動態(tài)光散射法對其粒徑及分布進行測定，膠束的平均 粒徑(強度徑)為182nm,載藥量為25.34%,在磷酸鹽緩沖溶液模擬體液 中(pH7. 4)， lh、 2h、 3h、 4h、 6h、 12h、 24h藥物的累計釋放量為2. 32%、 4.65%、 9.10%、 17.55%、 49.68%、 85.23%。 實施例5稱取1. 367 g PAHy溶于30 mL蒸餾水中，加入12 g mPEG-CHO,用10% 醋酸溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)的pH值為6,室溫攪拌反應(yīng)24 h,加入NaBH3CNl. 59 g，再次用10%醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到6,室溫反應(yīng)48h。反應(yīng)溶液透析3d, 冷凍干燥得到mPEG-g-PAHy。<formula>formula see original document page 7</formula>(其中n+m=300， n/ (n+m) x 100%=18% )將25 mg接枝共聚物溶于12 mL蒸餾水中，用醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到3.3,小干擾RNA50mg溶于pH5. 0-8. 0緩沖溶液中,將小千擾RNA溶液在 室溫攪拌下，逐滴加入接技共聚物溶液中，攪拌15min,冷凍干燥后即得 到聚離子復(fù)合物膠束。用動態(tài)光散射法對其粒徑及分布進行測定，膠束的 平均粒徑(強度徑)為149 nm,載藥量為19.25%。 實施例6
稱取1.367 g PAHy溶于蒸鎦水中，加入16 g mPEG-CHO,用10%醋酸 溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)的pH值為6,室溫攪拌反應(yīng)24h,加入NaBH3CN2.12g, 再次用10%醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到6,室溫反應(yīng)48 h。反應(yīng)溶液透析3 d, 冷凍干燥得到mPEG-g-PAHy。.
'L
H2f
-He~CO~NH-
HC~H2C—CO—NH-
m
(其中n+m=400， n/(n+m) x畫=24%)
將25 mg接技共聚物溶于12 mL蒸餾水中，用醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到 3.8，小干擾RNA50mg溶于pH5. 0-8. 0緩沖溶液中，將小干擾RNA溶液在 室溫攪拌下，逐滴加入接枝共聚物溶液中，攪拌15min,冷凍干燥后即得 到聚離子復(fù)合物膠東。用動態(tài)光散射法對其粒徑及分布進行測定，膠東的 平均粒徑(強度徑)為188 nm,載藥量為22. 03%。 實施例7
稱取1.367 g PAHy溶于蒸餾水中，加入16 g mPEG-CHO,用10%醋酸 溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)的pH值為6,室溫攪拌反應(yīng)24h,加入NaBH3CN2. 12 g， 再次調(diào)10%醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到6，室溫反應(yīng)48 h。反應(yīng)溶液透析3 d, 冷凍干燥得到mPEG-g-PAHy。
O廣NH—NH H2<p
—HC~CO~NH
H|3~H2C—CO—NH-
m
(其中n+m=400, n/ (n+m) x 100%=24% )
將25 mg接技共聚物溶于12 mL蒸餾水中，用醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到 3.3,小干擾RNA50mg溶于pH5. 0-8. 0緩沖溶液中，將小干擾RNA溶液在 室溫攪拌下，逐滴加入接枝共聚物溶液中，攪拌15min，冷凍干燥后即得 到聚漓子復(fù)合物膠東。用動態(tài)光散射法對其粒徑及分布進行測定，膠束的 平均粒徑(強度徑)為176 nm,載藥量為30.85%。 實施例8稱取1.367 g PAHy溶于蒸餾水中，加入16 g mPEG-CHO,用10%醋酸 溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)的pH值為5. 5，室溫攪拌反應(yīng)24h，加入NaBH3CN2. 12g， 再次用1W醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到5. 5,室溫反應(yīng)48h。反應(yīng)溶液透析3d, 冷凍干燥得到mPEG-g-PAHy。
Op"NH-NH H2f
-HC~CO~NR
Hj>H2C-CO-NH-OC~M^NH2
m
(其中n+m=400, n/ (n+m) x簡=22% )
將25 mg接技共聚物溶于12 mL蒸餾水中，用醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到 3.3，小干擾RNA 50mg溶于pH5. 0-8. O緩沖溶液中，將小干擾RNA溶液在 室溫攪拌下，逐滴加入接枝共聚物溶液中，攪拌15 min，冷凍干燥后即得 到納米級載藥膠束。用動態(tài)光散射法對其粒徑及分布進行測定，得到的聚 離子復(fù)合物膠東的平均粒徑(強度徑)為160 nm,載藥量為28.46%。 實施例9
稱取1.367 g PAHy溶于蒸餾水中，加入16 g mPEG-CHO,用10%醋酸 溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)的pH值為5，室溫攪拌反應(yīng)24h，加入NaBH3CN2. 12 g, 再次用10°/。醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到5,室溫反應(yīng)48 h。反應(yīng)溶液透析3 d, 冷凍干燥得到mPEG-g-PAHy。
O廣NH—NH H2<p
-HC~CO~NR
H,C—CO"NH—
OC"NH"NH'
m
(其中n+m=400， n/ (n+m) x 100%=20% )
將25 mg接技共聚物溶于12 jnL蒸餾水中，用醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到 3.3，小千擾RNA50mg溶于pH5. 0—8. 0緩沖溶液中，將小干擾RNA溶液在 室溫攪拌下，逐滴加入接枝共聚物溶液中，攪拌15 min,冷凍干燥后即得 到納.米級載藥膠束。用動態(tài)光散射法對其粒徑及分布進行測定，膠束的平 均粒徑(強度徑)為163 nm,.載藥量為24. 59%。 實施例10
稱取1.367 g PAHy溶于蒸餾水中，加入16 g mPEG-CHO，用10%醋酸 溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)的pH值為5，室溫攪拌反應(yīng)2化，加入NaBH3CN2. 12 g， 再次用10°/。醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值到5,室溫反應(yīng)48 h。反應(yīng)溶液透析3 d, 冷凍千燥得到mPEG-g-PAHy。Op~<formula>formula see original document page 10</formula>(其中n+m=400， n/(n+m) x面0=20%)將25 mg接技共聚物溶于12 mL蒸餾水中，用醋酸溶液調(diào)節(jié)pH值至i 3.3,胰島素50mg溶于pH5. 0-8. O緩沖溶液中，將胰島素溶液在室溫攪拌 下，逐滴加入接技共聚物溶液中，攪拌15 min,冷凍干燥后即得到納米級 載藥膠束。用動態(tài)光散射法對其粒徑及分布進行測定，得到的聚離子復(fù)合 物膠束的平均粒徑(強度徑)為147nm,載藥量為30.53%,在模擬體液(pH 7. 4磷酸鹽緩沖溶液)中，lh、 3h、 8h、 12h、 24h藥物的累計釋放量為1. 56%、 10.73%、 18.05%、 48.52%、 7^.72%。
權(quán)利要求
1.一種聚離子復(fù)合物膠束載藥材料，其特征在于該載藥材料為單甲醚聚乙二醇修飾聚天冬酰肼形成的接枝共聚物聚乙二醇-接枝-聚天冬酰肼，其結(jié)構(gòu)如下
2. 如權(quán)利要求l所述的一種聚離子復(fù)合物膠束載藥材料，其特征在 于所述的聚乙二醇-接技-聚天冬酰肼結(jié)構(gòu)中的n+m=200-400。
3. 如權(quán)利要求l所述的一種聚離子復(fù)合物膠束載藥材料，其特征在 于所述的聚乙二醇-接枝-聚天冬酰肼結(jié)構(gòu)中的R為分子量在 3000-10000之間的單甲醚聚乙二醇，聚天冬酰肼主鏈的分子量為3-10 萬。
4.如權(quán)利要求l所述的一種聚離子復(fù)合物膠束載藥材料，其特征在 于聚乙二醇-接枝-聚天冬酰肼中聚乙二醇的接枝率n/(n+m) ><100%的范 圍為3—25°/。。
5. —種如權(quán)利要求1所述的聚離子復(fù)合物膠東載藥材料的制備方 法，其特征在于.稱取l. 367g聚天冬酰肼溶于蒸餾水中，再加入適量的 一端為醛基另一端為單甲醚的聚乙二醇，用PH值調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)的 pH值為5-6,室溫，攪拌反應(yīng)20-36 h,加入氰基硼氫化鈉，再次用pH 值調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH值到5-6，室溫，反應(yīng)24-48h;反應(yīng)溶液透析3d,冷凍 干燥得到產(chǎn)品。
6. 如權(quán)利要求5所述的一種聚離子復(fù)合物膠東載藥材料的制備方 法，其特征在于所述的一端為醛基另一端為單甲醚的聚乙二醇的用量為 聚天冬酰肼的1-12倍，即l. 36-16g。
7.如權(quán)利要求5所述的一種聚離子復(fù)合物膠東載藥材料的制備方 法，其特征在于所述的pH值調(diào)節(jié)劑為鹽酸、磷酸、枸櫞酸、枸櫞酸鈉、 冰醋酸、磷酸二氫鈉與磷酸氫二鈉中的一種或兩種以上的混合物。
8. 如權(quán)利要求1所述的一種聚離子復(fù)合物膠束載藥材料，其特征在 于所述的聚離子復(fù)合物膠束是通過如下方法制備的將聚乙二醇-接技-聚天冬酰肼溶解于蒸餾水中，濃度為0. 001-5%w/v ,調(diào)節(jié)pH值為3-5， 向溶液體系中逐滴加入帶負(fù)電荷藥物的水溶液濃度為0. 0001-2% w/v,室 溫下攪拌10-15 min,即得到聚乙二醇-接枝-聚天冬酰肼的載藥膠東。'
9. 如權(quán)利要求8所述的一種聚離子復(fù)合物膠東載藥材料,其特征在于:共聚物與帶負(fù)電荷的藥物在水溶液中通過靜電作用形成聚離子復(fù)合物膠 東，復(fù)合物膠束的粒徑取決于共聚物中PEG的接技率，接枝率6%-24%， 膠束粒徑在20-300 nm。
10. 聚離子復(fù)合物膠束載藥材料在制備帶負(fù)電荷的蛋白多肽類、核酸 類藥物的血管或肌肉注射的聚離子復(fù)合物膠束中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明是一種聚離子復(fù)合物膠束載藥材料。其共聚物的分子量可控，從而形成膠束的大小、載藥量和釋藥速率可控，為藥物控釋載體的研究提供依據(jù)。該載藥材料為單甲醚聚乙二醇修飾聚天冬酰肼形成的接枝共聚物聚乙二醇-接枝-聚天冬酰肼，見其結(jié)構(gòu)式所述的聚乙二醇-接枝-聚天冬酰肼結(jié)構(gòu)中的n+m＝200-400。整個膠束的制備過程十分簡單，易于大規(guī)模生產(chǎn)。聚離子復(fù)合物膠束載藥材料可以在制備帶負(fù)電荷的蛋白多肽類、核酸類藥物的血管或肌肉注射的聚離子復(fù)合物膠束中應(yīng)用。
文檔編號A61K47/34GK101314040SQ200810011350
公開日2008年12月3日 申請日期2008年5月9日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月9日
發(fā)明者佳 劉, 姜同英, 王思玲 申請人:沈陽藥科大學(xué)