專利名稱：：含有普拉格雷的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種包含原花青素和普拉格雷或其藥理上可接受的鹽作為活性成分的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：花青素(anthocyaniri)屬酚類化合物中的類黃酮類，是一種水溶性色素，是一類廣泛存在于植物中的主要呈色物質(zhì)，可以隨著細胞液的酸堿改變顏色(細胞液呈酸性則偏紅，細胞液呈堿性則偏藍)，多存在于葡萄、蘋果、髙粱和櫻桃等植物中，其中以葡萄(籽和皮)含量最為豐富?；ㄇ嗨厥菢?gòu)成花瓣和果實顏色的主要色素之一，它是由不同數(shù)量的兒茶素或表兒茶素結(jié)合而成，自然條件下游離的花青素極少見，原花青素是由不同數(shù)量的兒茶素或表兒茶素結(jié)合而成，最簡單的原花青素是兒茶素或表兒茶素或兒茶素與表兒茶素形成的二聚體，此外還有三聚體、四聚體等直至十聚體。按聚合度的大小，通常將二至四聚體稱為低聚體(OPC)，將五聚體以上的稱為髙聚體(PPC)。原花青素具有廣泛的生物活性，近年來的研究發(fā)現(xiàn)其在抗氧化、抗動脈粥樣硬化、抗病毒、抗腫瘤、抗輻射、抗炎癥、抗過敏、保健功效等許多功能上均顯示了一定效果，作用廣泛、使用時幾乎無任何副作用。陳著年齡的增長，動脈中的彈性纖維由于遂漸氧化而變硬，而動脈硬化是導致老年人心腦血管疾病的一個主要原因，機體內(nèi)的低密度酯蛋白，膽固醇增加也是導致動脈硬化和心臟病的關(guān)鍵因素。動物實驗和臨床研究發(fā)現(xiàn)，葡萄籽提取物原花青素可以有效地降低膽固醇和低密度脂蛋白水平，預(yù)防血栓形成，有助于預(yù)防心腦血管疾病的發(fā)生。普拉格雷(Prasugrel)是一種新型的噻吩并吡啶P2Y12拮抗劑，結(jié)構(gòu)式如下普拉格雷是通過研究者的名字CS-747而聞名的，由關(guān)國禮來公司和Fi本三共公司共同3開發(fā)，目前JH處于研究階段的一種血小板ADP受體阻斷劑，研究表明普拉格雷的預(yù)防血栓的作用比氯吡格雷的作用還要強，在試驗中發(fā)現(xiàn)普拉格雷能更快起作用，而且有更好的效果，普拉格雷組的患者用藥后血液中的血栓比氯吡格雷組更少，普拉格雷組缺血事件的發(fā)生率比氯吡格雷組降低，普拉格雷抗血小板聚積的作用明顯而且迅速。來自約翰斯霍普金斯大學的研究表明普拉格雷顯然比氯吡格雷在抗血小板方面更有潛力，普拉格雷比目前批準劑量的氯吡格雷在抑制ADP誘導血小板凝聚上的效果更強勁，且在普拉格雷臨床研究的代號為JUMB0"TIMI26第二階段研究中，普拉格雷的確比氯吡格雷更快和更統(tǒng)一的抑制了血小板。國際專家己達成"抗血小板制劑越有效越容易導致出血"的共識，同時這也是臨床上的治療矛盾，普拉格雷相對氯吡格雷來說，抗凝活性更強、更有效，作用迅速，但也不可避免的增加了出血危險性。在JUMBO-TIMI26研究中應(yīng)用普拉格雷治療的患者中有兩例出現(xiàn)了較重的血小板抑制，特別是在長期使用普拉格雷后，使出血傾向的風險加大。如果藥物引發(fā)出血風險增加，即便出血不嚴重，也會顯著降低患者的依從性，依從性降低或者出血風險在抗血小板制劑中很重要,..這可能會導致心血管事件的反彈。因此在應(yīng)用抗血小板制劑普拉格雷治療血栓性疾病時如何有效降低出血風險成為臨床治療中迫切需要解決的問題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種含有活性成分原花青素和普拉格雷或其藥理上可接受的鹽的藥物組合物。本發(fā)明的目的在于利用原花青素和普拉格雷這兩者的協(xié)同聯(lián)合用藥發(fā)明一種更有效治療血栓性疾病的方法?；谀壳芭R床上關(guān)于"抗血小板制劑越有效越容易導致出血"的共識，普拉格雷在抗血小板聚集中抗凝活性越好、越有效、，用越迅速，其出血風險越大。尋找一種即能保持抗凝活性的迅速強勁又能有效降低出血風險的復(fù)方藥物組合物成為治療血栓性疾病的研究方向。普拉格雷是通過抑制血小板聚集發(fā)揮抗凝效果的藥物，而原花青素卻是從植物中提取的類黃酮類物質(zhì)，這兩種藥物的組合應(yīng)用效果不是顯而易見的，本發(fā)明人通過認真反復(fù)的試驗摸索創(chuàng)造性地把化學藥物普拉格雷和中藥提取物原花青素有效組合在一起，并發(fā)現(xiàn)在應(yīng)用普拉格雷治療血栓類疾病的同時聯(lián)合應(yīng)用原花青素在抑制血栓形成中效果出乎意外，原花青素不但沒有影響普拉格雷的抗凝效果，兩者合用后在降低出血不良反應(yīng)上取得了非常好的效果，這樣就在充分發(fā)揮普拉格雷在抗血小板聚集中抗凝活性好、作用迅速的優(yōu)勢的同時，出血率大大降低，有效降低了普拉格雷在4抗血小板聚集中帶來的出血風險，大大降低了普拉格雷的不良反應(yīng)。實施例9采用組胺致大鼠背部皮膚急性炎癥反應(yīng)，使血漿蛋白透入血管外組織速率加快，致毛細血管通透性增加，然后注入伊文思藍，通過比較藍染面積和其丙酮生理鹽水浸出液吸光度值來反應(yīng)本發(fā)明藥物組合物在降低毛細血管通透性的作用。本發(fā)明的藥物組合物的優(yōu)勢體現(xiàn)在下列幾個方面一、普拉格雷和原花青素的聯(lián)合應(yīng)用產(chǎn)生了很好的協(xié)同效果，取得了意想不到的療效。普拉格雷能有效抑制血小板聚集，但同時會引發(fā)出血風險，我們通過設(shè)計不同的實驗，證實了合用花青素不但沒有影響到普拉格雷的抗凝活性，反而使普拉格雷的抗凝活性有所增強，更為可貴的是使普拉格雷的出血率減小，降低出血風險可使普拉格雷的抗凝活性發(fā)揮的更有效、更迅速徹底。二、長期使用本發(fā)明的藥物組合物，對血栓性疾病患者的長期生存率具有有益的影響，對患者的預(yù)后產(chǎn)生積極的影響，這也是本發(fā)明所解決的最具有意義的臨床治療問題。本發(fā)明要求保護的是一種含有活性成分原花青素和普拉格雷或其藥理上可接受的鹽的藥物組合物。根據(jù)藥物的性質(zhì)和患者用藥方便的需要，我們將本發(fā)明的藥物組合物制備成固體藥物制劑，如片劑、膠奧劑、顆粒劑、滴丸劑、散劑、膜劑等。其中片劑包括普通片劑、分散片、緩釋片、崩解片、咀嚼片、泡騰片、腸溶衣片等劑型。普拉格雷藥理上可接受的鹽為其煙酸鹽、枸櫞酸鹽、硫酸氫鹽、鹽酸鹽、馬來酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽等。所述的原花青素為花青素單體、低聚體或高聚體中的一種或多種，原花青素單體為兒茶素或表兒茶素或者其混合物，原花青素二聚體為兒茶素、表兒茶素或兒茶素與表兒茶素形成的二聚體或其混合物。藥物組合物中普拉格雷或普拉格雷可藥用鹽中的游離普拉格雷和原花青素的重量比為1:0.5~1:200。普拉格雷或普拉格雷可藥用鹽中的游離普拉格雷和原花青素的重量比優(yōu)選為1:11:100。在此優(yōu)選比例中普拉格雷和原花青素聯(lián)合應(yīng)用在藥效試驗中發(fā)現(xiàn)效果最好，并能更大程度充分發(fā)揮普拉格雷在抗血小板聚集中抗凝活性好、作用迅速的優(yōu)勢，同時出血風險大大降低，有效降低了普拉格雷在抗血小板聚集中帶來的出血風險，并降低了普拉格雷的不良反應(yīng)。本發(fā)明采用固體藥物制劑，具有攜帶、使用方便，給藥途徑簡單、易行的優(yōu)點，易于為患者接受。本發(fā)明的藥物組合物可以按照以下所述制藥技術(shù)配制，可以使用以下添加劑制備賦形劑(例如乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇、山梨糖醇、淀粉、糊精、結(jié)晶纖維素、阿拉伯膠、葡聚糖等)，潤滑劑(硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、滑石粉、微粉硅膠、硼酸、十二垸基硫酸鈉等)，粘合劑(羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯垸酮、聚乙二醇等)，崩解劑(低取代羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基淀粉、交聯(lián)聚乙烯吡咯垸酮等)，乳化劑(膨潤土、氫氧化鎂、氫氧化鋁、十二烷基硫酸鈉等)，穩(wěn)定劑(對羥基苯甲酸甲酯、苯甲醇、苯乙醇、苯酚、山梨酸、脫氫乙酸等)，矯味劑(蔗糖、香料、阿斯巴甜、環(huán)糊精等)，稀釋劑等。具體實施例方式現(xiàn)通過'以下實施例詳細闡述本發(fā)明，但本發(fā)明的范圍并不僅限于此。以下實施例中所述的普拉格雷的可藥用鹽的重量均是以普拉格雷的重量計。實施例1普通片劑原花青素200g普拉格雷馬來酸鹽10g微晶纖維素250g乳糖40g10%淀粉漿適量硬脂酸鎂4g制備工藝稱取處方量的原花青素、普拉格雷馬來酸鹽、微晶纖維素、乳糖混合均勻。另將適量的10%淀粉漿加入于混合粉末中，混合均勻，制軟材，通過18目尼龍篩制成濕粒，601C左右干燥，干粒水分應(yīng)控制在1.596以下。20目篩整粒，再與硬脂酸鎂混勻，壓片，即得。實旌例2普通片劑兒茶素50g普拉格雷鹽酸鹽5g淀粉140g糊精50g50%乙醇適量硬脂酸鎂lg制備工藝稱取處方量的兒茶素、普拉格雷鹽酸鹽、淀粉、糊精混合均勻。另將適量的50%乙醇加入預(yù)混合粉末中，混合均勻，制軟材，通過18目尼龍篩制成濕粒，60TC左右干燥，干粒水分應(yīng)控制在1.5%以下。20目篩整粒，再與硬脂酸鎂混勻，壓片，即得。實施例3分散片表兒茶素500g普拉格雷5g交聯(lián)羧甲基纖維素鈉80g微晶纖維素750g聚乙烯吡咯垸酮55g5MPVP60X乙醇溶液適量微粉硅膠20g制備工藝按處方量稱取表兒茶素、普拉格雷，以微晶纖維素為填充劑，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮為崩解劑，5MPVP60M乙醇溶液為黏合劑，微粉硅膠為助流劑，用流化床一歩制粒，然后壓片，即得。實施例4緩釋片原花青素10g普拉格雷10g羥丙基甲基纖維素20g乳糖25g80%乙醇溶液適量硬脂酸鎂1.5g制備工藝先將原花青素、普拉格雷、乳糖粉碎過100目篩；羥丙基甲基纖維素過80目篩。然后按處方量稱取原花青素、普拉格雷、羥丙基甲基纖維素及乳糖將其混勻，加80%乙醇溶液制軟材，過18目篩制粒，濕顆粒在6(TC左右干燥，干顆粒經(jīng)16目篩整粒，加硬脂酸鎂混勻，混勻壓片，即得。實施例5膠囊劑原花青素低聚體500g普拉格雷2.5g微晶纖維素300g7微分硅膠20g制備工藝將原花青素低聚體、普拉格雷、.微晶纖維素、微分硅膠粉碎過100目篩混勻，直接填裝膠囊即得。實施例6顆粒劑原花青素高聚體5g普拉格雷10g淀粉40g糊精25g蔗糖粉30g80%乙醇適量制備工藝稱取處方量的原花青素髙聚體、普拉格雷、淀粉、糊精、蔗糖粉混合均勻。另將適量的80%乙醇加入預(yù)混合粉末中，.混合均勻，制軟材，通過18目尼龍篩制成濕粒，60"左右干燥，20目篩整粒，分裝，即得。實施例7滴丸劑原花青素二聚體500g.普拉格雷10g聚乙二醇4000210g聚乙二醇6000100g制備工藝將聚乙二醇4000和聚乙二醇6000置容器中，加熱至90TC100"C，待全部熔融后，加入原花青素二聚體及普拉格雷攪拌至熔解，轉(zhuǎn)移至貯液瓶中，密閉并保溫在80^C901C，調(diào)節(jié)滴液定量閥門，由上往下，滴入10"15TC的液狀石蠟中，將成形的滴丸瀝盡并擦除液狀石蠟，置石灰缸里干燥，即得。實施例8普拉格笛原花青素藥物組^Mr對大鼠血小板聚集的抑制作用1.試驗方法取SD大鼠64只，雄性，重量200-300g，山東新時代藥業(yè)新藥藥理中心提供，隨機分8組，每組8只，預(yù)養(yǎng)一周。對照組(生理鹽水)、普拉格雷劑量組(lmg^kg)、原花青素劑量組(6mg/kg)、兒茶素劑量組(6mg/kg)、表兒茶素劑量組(6mg/kg)、原花青素加普拉格8雷劑量(6mg/kg+lmg/kg)組、兒茶素加普拉格雷劑量(6mg/kg+l呢/kg)組、表兒茶素加普拉格雷劑量(6mg/kg+lmg/kg)組，灌胃給藥，每閂一次，共7天?？寡“寰奂饔玫臏y定動物經(jīng)上述給藥2天后，隔夜禁食，于次R給藥1小時候后，用烏拉坦腹腔注射麻醉后剖腹分離腹主動脈，插入聚乙烯管取血5ml于食管內(nèi)(管內(nèi)按抗凝劑和血l:9預(yù)置3.8%枸櫞酸鈉溶液0.5ml)，將全血按1000轉(zhuǎn)/分離心4min，取富血小板血漿(PRP)lml。再將余液淳3000轉(zhuǎn)/分離心8min,取貧血小板血漿(PPP)lml，分置兩塑料試管內(nèi)。調(diào)劑后恒溫(37±0.1)1C。用ADP(30ul/管)和膠原(30ul/管)做聚集誘導劑，描計最大聚集強度，并計算其抑制率。聚集抑制率=(對照組聚集強度一試驗組聚集強度)/對照組聚集強度乂100%2.試驗結(jié)果表1對ADP和膠原引起的火鼠血小板聚集的抑制作用(；土s',n-8)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注"與對照組比較，fXO.Ol:#與普拉格雷組比較，JXO.OS;由表l可見，原花青素、兒茶素以及表兒茶素和普拉格雷聯(lián)合用藥后，對ADP或者膠原引起的大鼠血小板聚集有明顯的抑制作用，聯(lián)合應(yīng)用產(chǎn)生了很好的協(xié)同作用，且隨著藥物劑量的增加，其抑制率也增髙呈劑量依賴性。實施例9原花青素普拉格雷組合物對大鼠皮膚毛細血管通透性的影響1.試驗方法SD大鼠，雄性，體重(200±20)g，山東新時代藥業(yè)新藥藥理中心提供，按體重隨機分為模型組、普拉格雷組(lmg/kg)、原花青素普拉格雷低劑量組(18mg/kg+lmg/kg)及原花青素普拉格雷高劑量組(36mg/kg+2mg/kg)，每組10只。按體重灌胃給藥，模型組灌胃生理鹽水，試驗前1天將大鼠背部毛除凈，給藥1小時后，將大鼠背部皮下注入200ug組胺(lmg/ml)，立即在尾靜脈注射1%伊文思藍0.4ml/100mg，20min后斷頭處死，剝皮測著色皮斑面積，以圓面積計算公式計算，然后用標準的2cm直徑打孔器打下藍染皮片。將大鼠皮膚藍染皮片放入7:3丙酮與生理鹽水混合液(4ml)中，分兩次浸泡，每次2小時，合并浸液，加上述混合液至5ml，放置電熱恒溫水槽，在65^C孵宵36小時，直至皮膚藍色完全消失。在用離心機離心10min，取上清液，用紫外可見光光度計測定吸光度。運用SPSS統(tǒng)計軟件處理，藍染面積采用多樣品組間兩兩比較檢驗，多個樣本吸光度數(shù)據(jù)間比較采用非參數(shù)檢驗。2.試驗結(jié)果表2花靑素辨拉格雷藥物組合物對大鼠皮膚通透性的影響(；±s)組別n劑榮(mg/kg)藍染面積吸光度模型組10202.38±12.72普拉格雷組101256.13±13.54'原+粋低劑量組1018+1146.24土10.35'原+普高劑量組10'36+2.110.55士7.86"注"與模型組比較，P<0.01:**與普拉格雷組比較，PO.Ol。實驗表明，原花青素普拉格雷藥物組合物對組胺所致的大鼠皮膚毛細血管通透性的發(fā)生有明顯的抑制作用，隨著劑量的增加，其抑制程度增高呈劑量依賴性，與模型組比較，原花青素普拉格雷藥物組合物低、高劑量組均有顯著性差異，單獨使用普拉格雷藍染面積增大，吸光度增加，使毛細血管通透性增加更嚴重，與文獻報道一致，但應(yīng)用原花青素與普拉格雷藥物組合物后吸光度減小，表明組合物有效降低了大鼠皮膚毛細血管通透性。實施例10原花青素普拉格雷藥物組合物對實驗大鼠頸動-靜脈旁路血栓形成的抑制作用1.試驗方法取大鼠,300只，雄性，體重200-250g,隨機分為6組，每組50只，預(yù)養(yǎng)一周。共設(shè)對照組(生理鹽水)、普拉格雷組(lmg/kg)、原花青素高聚體組(50mg/kg)、原花青素低聚體組(50mg/kg)、原花青素高聚體普拉格雷劑量組(50mg/kg+lrag/kg)及原花青素低聚體普拉格雷劑量組(50mg/kg+lmg/kg)。0.101±0.010.149±0.02"0.054±0.01"w0.022±0.01"**血栓形成抑制率的測定取大鼠稱重，灌胃給藥后60min，用烏拉坦腹腔注射麻醉后，分離左頸外靜脈和右頸總動脈，取三段聚乙烯管組成的套管，其中間一段置一根5cm長的稱重絲線，以肝素生理鹽水(50u/ml)充滿聚乙烯管。當管的一端插入頸外靜脈后，夾住管的一端，將絲線固定的一端套管插入右頸總動脈，手術(shù)完成后立即開放血流。15min后中斷血流，迅速取出絲線稱重?？傊亓繙p去絲線重量即為血栓濕重。按以下公式計算血栓形成抑制率。血栓形成抑制率=(對瑪組血栓重一試驗組血栓重)/對照組血栓重X1000/0測定完血栓濕重后處死大鼠，解剖，借助放大鏡觀察胃粘膜充血、水腫、出血情況，有胃粘膜充血、水腫、出血現(xiàn)象的大鼠，記入相應(yīng)的實驗組胃粘膜出血例。2.試驗結(jié)果表3花靑素咎拉格雷對實驗火鼠頸動-靜脈旁路血栓形成的抑制作用(5±s,ri=50)組別劑量血栓濕重(mg)抑制率(％)山血例數(shù)出血率(mg/kg)對照組NS37.61±5.73普拉格雷組123.04±5.52**38.7612%原花青素i^聚體組5033.82±5.4910.10tm"原花青素低聚體組5032.80±4.6612.800"原花靑素髙聚體+辨組50+116,79±3.52****55.40()原花青素低聚體+袢組50+114.54±3.39**"61.30()注##與對照組比較，PO.01;與普拉格雷組比較，P<0.01。由表3可見，原花青素髙聚體、原花青素低聚體和普拉格雷聯(lián)合用藥后，在抑制血栓形成上取得了很好的協(xié)同性作用，和對照組比較均有顯著性羑異，和普拉格雷組比較有顯著性差異，對血栓抑制作用呈劑量依賴性，而且在聯(lián)合用藥后，對普拉格雷的主要不良反應(yīng)，出血危險性增加有了很好的抑制作用，使得出血率明顯降低，說明原花青素高聚體、原花青素低聚體和普拉格雷聯(lián)合用藥后，在抑制大鼠動-靜脈旁路血栓形成取得很好效果的同時，并沒有產(chǎn)生任何的出血風險。權(quán)利要求1.一種藥物組合物，其特征在于它含有原花青素和普拉格雷或其藥理上可接受的鹽。2.如權(quán)利要求l所述的藥物組合物，其特征在于其中所述的普拉格雷藥理上可接受的鹽為其煙酸鹽、枸櫞酸鹽、硫酸氫鹽、鹽酸鹽、馬來酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽或草酸鹽。3.如權(quán)利要求l所述的藥物組合物，其特征在于所述的原花青素為其單體、低聚體或高聚體中的一種或一種以上。4.如權(quán)利要求1-3中任一權(quán)利要求所述的原花青素，其特征在于所述的原花青素單體為兒茶素或表兒茶素。5.如權(quán)利要求l所述的原花青素，其特征在于它是兒茶素或表兒茶素形成的低聚體。6.如權(quán)利要求1所述的原花青素，其特征在于它是兒茶素形成的二聚體、表兒茶素形成的二聚體或兒茶素與表兒茶素形成的二聚體或其混合物。7.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物中普拉格雷或普拉格雷可藥用鹽中的游離普拉格雷和原花青素的重量比為1:0.51:200。8.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物中普拉格雷或普拉格雷可藥用鹽中的游離普拉格雷和原花青素的重量比為1:11:100。9.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物為固體藥物制劑。10.如權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥物組合物劑型為片劑、顆粒劑、膠囊劑、滴丸劑。全文摘要本發(fā)明提供了一種含有活性成分原花青素和普拉格雷或其藥理上可接受的鹽的藥物組合物，將原花青素和普拉格雷這兩者聯(lián)合用藥，找到了一種更為有效的治療血栓性疾病的方法，通過反復(fù)多次的試驗摸索，本發(fā)明創(chuàng)造性地把普拉格雷和中藥提取物原花青素有效組合在一起，發(fā)現(xiàn)在應(yīng)用普拉格雷治療血栓類疾病的同時聯(lián)合應(yīng)用原花青素在抑制血栓形成中效果出乎意外，原花青素不但沒有影響普拉格雷抗凝效果，兩者合用后在降低出血不良反應(yīng)上取得了非常好的效果，這樣就在充分發(fā)揮普拉格雷在抗血小板聚集中抗凝活性好、作用迅速的優(yōu)勢的同時，出血風險大大降低，有效降低了普拉格雷在抗血小板聚集中帶來的出血風險，大大降低了普拉格雷的不良反應(yīng)。文檔編號A61P7/02GK101554378SQ20081001498公開日2009年10月14日申請日期2008年4月9日優(yōu)先權(quán)日2008年4月9日發(fā)明者趙志全申請人:魯南制藥集團股份有限公司