專利名稱：：一種動(dòng)物干擾素液體噴霧劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及動(dòng)物用干擾素的液體噴霧劑及其制備方法，屬于藥物制劑領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：干擾素(Interferon,簡(jiǎn)稱IFN)是在特定的抗原剌激下由細(xì)胞分泌的一類具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)功能等生物活性的糖蛋白。自1957年Isaacs和Lindenma皿發(fā)現(xiàn)干擾素以來，干擾素已經(jīng)顯示出了極強(qiáng)的抗病毒、抗腫瘤以及免疫調(diào)節(jié)活性和應(yīng)用前景。因而干擾素的研究越來越受到人們的廣泛關(guān)注。目前動(dòng)物干擾素主要停留在基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)階段，且大多數(shù)集中于豬、雞、魚等少數(shù)動(dòng)物，近年來也取得了不小的進(jìn)展。IFN的抗病毒活性是通過宿主細(xì)胞間接完成的，并具有嚴(yán)格的種屬特異性和選擇性。根據(jù)其來源和結(jié)構(gòu)，IFN可分為a、13、Y三種類型，近年來，還發(fā)現(xiàn)了"、t等類型的干擾素。IFN-a主要由單核細(xì)胞產(chǎn)生；IFN-P主要由纖維母細(xì)胞產(chǎn)生，血管內(nèi)皮細(xì)胞也可產(chǎn)生；IFN-y由抗原及PHA等有絲分裂原剌激T細(xì)胞后產(chǎn)生，此外，NK細(xì)胞也可產(chǎn)生。IFN-t是反芻動(dòng)物孕體附植時(shí)滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的特有的妊娠識(shí)別信號(hào)因子，在妊娠識(shí)別中發(fā)揮著重要的作用。動(dòng)物呼吸道疾病已成為我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)十分關(guān)注的問題，呼吸道疾病具有流行普遍、危害大、發(fā)病率高、死亡率高，造成經(jīng)濟(jì)損失大，而且難于控制等特點(diǎn)。呼吸道疾病一般是由病毒、細(xì)菌、支原體、免疫抑制病病原、常規(guī)活疫苗接種反應(yīng)和不利環(huán)境因素等多種原因或混合感染引起的。目前治療動(dòng)物呼吸道疾病采取的主要措施是使用抗生素，而大量實(shí)踐實(shí)施表明，抗生素的大量常期使用會(huì)造成有害菌種的耐藥性及畜產(chǎn)品藥殘，從而影響人類健康。作為抗生素的良好替代品干擾素不僅對(duì)防治呼吸道病毒感染有明顯療效，可顯著縮短病程，減輕癥狀，并減少或防止復(fù)發(fā)，且無藥殘并不會(huì)產(chǎn)生耐藥性。呼吸道病毒的多樣性和可變性，同樣說明采用具有廣譜的抗病毒活性的干擾素制劑是適宜的。而在臨床應(yīng)用中，干擾素的給藥方式是影響干擾素作用的一個(gè)重要因素。噴霧劑具有藥量小，療效好，見效快，安全，易行，適于臨床推廣等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于治療動(dòng)物呼吸道疾病。本發(fā)明將動(dòng)物干擾素制成液體噴霧劑與其他劑型相比具有制造工藝和設(shè)備簡(jiǎn)單、生產(chǎn)周期短、成本低、藥物用量少、見效快、療效好、使用方便等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明制備的動(dòng)物干擾素液體噴霧劑主要用于防治呼吸道病毒感染噴于動(dòng)物口腔或鼻腔，藥物迅速進(jìn)入呼吸系統(tǒng)，發(fā)揮藥效。我國(guó)是動(dòng)物養(yǎng)殖大國(guó)，每年因呼吸道疾病的爆發(fā)給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大損失，研制出快速、高效的預(yù)防和治療動(dòng)物呼吸道疾病的藥物無疑在養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展和進(jìn)步上具有十分重要的意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的本發(fā)明目的之一是提供一種動(dòng)物干擾素噴霧劑的水溶性配方。本發(fā)明的另一目的是提供一種動(dòng)物干擾素液體噴霧劑。本發(fā)明的又一目的是提供動(dòng)物干擾素噴霧劑水溶性配方的應(yīng)用。本發(fā)明的其他目的，在下面對(duì)本發(fā)明的具體描述中體現(xiàn)出來。發(fā)明效果(1)動(dòng)物干擾素液體噴霧劑治療動(dòng)物多種呼吸道疾病具有見效快，療效好，易于推廣等優(yōu)勢(shì)。(2)動(dòng)物干擾素液體噴霧劑具有制備方便，成本低廉，無毒副作用及使用方便等特點(diǎn)。本發(fā)明為達(dá)到上述效果，提供了一種動(dòng)物干擾素液體噴霧劑的制備方法。其特征在于用稀釋液稀釋干擾素原液，過濾除菌，分裝在噴霧瓶中，無菌封口。其中，稀釋液的組分如下氯化鈉聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯(吐溫-80)甘油苯酚注射用水調(diào)整pH值0.l-lg4-16g20-150mL20-100g0.1-1.0mL至lOOOmL6.0-8.0具體實(shí)施例方式——下面通過實(shí)施例進(jìn)一步詳述本發(fā)明實(shí)施例1:通過細(xì)胞病變抑制法，雞胚成纖維細(xì)胞/VSV檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定雞a-干擾素原液的生物學(xué)活性為1.2Xl(^IU/ml，取雞a-干擾素原液5ml，用稀釋液稀釋至1L，0.22iim膜除菌過濾，后分裝于10ml噴霧瓶中，無菌封口。稀釋液組方為檸檬酸0.2g氯化鈉8g聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯(吐溫_80)50ml甘油50g苯酚1.OmL注射用水至1000ml調(diào)整pH值7.2實(shí)施例2:通過細(xì)胞病變抑制法，雞胚成纖維細(xì)胞/VSV檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定雞Y_干擾素原液的生物學(xué)活性為1.5Xl(^IU/ml，取雞Y-干擾素原液5ml，用稀釋液稀釋至1L，0.22iim膜除菌過濾，后分裝于10ml噴霧瓶中，無菌封口。稀釋液組方為檸檬酸0.2g氯化鈉8g聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯(吐溫-80)45ml甘油48g苯酚1.OmL注射用水至1000ml調(diào)整pH值7.2實(shí)施例3:通過細(xì)胞病變抑制法，MDBK細(xì)胞,/VSV檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定豬a-干擾素原液的生物學(xué)活性為1.4X109IU/ml，取豬a-干擾素原液5ml，用稀釋液稀釋至1L，0.22ym膜除菌過濾，后分裝于10ml噴霧瓶中，無菌封口。稀釋液組方為檸檬酸0.2g氯化鈉8g聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯(吐溫-80)40ml甘油45g苯酚1.OmL注射用水至1000ml調(diào)整pH值7.2實(shí)施例4:通過細(xì)胞病變抑制法，MDBK細(xì)胞,/vsv檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定豬e-干擾素原液的生物學(xué)活性為1.8Xl(^IU/ml，取豬P-干擾素原液5ml，用稀釋液稀釋至IL，O.22ym膜除菌過濾，后分裝于10ml噴霧瓶中，無菌封口。稀釋液組方為檸檬酸0.2g氯化鈉8g聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯(吐溫-80)45ml甘油45g苯酚1.OmL注射用水至1000ml調(diào)整pH值7.2本發(fā)明動(dòng)物用干擾素噴霧劑的穩(wěn)定性試驗(yàn)材料和方法一、材料本發(fā)明的動(dòng)物干擾素液體噴霧劑采用本公司生產(chǎn)的重組干擾素，試驗(yàn)前保存于26t:冰箱。二、方法將實(shí)施例中四種干擾素液體噴霧劑成品分別置于2_8°C、25t:和37°C三個(gè)溫度條件下，定期進(jìn)行無菌檢測(cè)、生物活性測(cè)定、外觀和PH值測(cè)定。1、干擾素生物活性的測(cè)定雞干擾素采用雞胚成纖維細(xì)胞/VSV檢測(cè)系統(tǒng)溜干擾素采用MDBK細(xì)胞/VSV檢測(cè)系統(tǒng)。2、無菌檢驗(yàn)按《中華人民共和國(guó)獸藥典2005年版中的要求進(jìn)行。3、外觀檢查按《中華人民共和國(guó)獸藥典2005年版中的要求進(jìn)行檢驗(yàn)。結(jié)果表1:不同干擾素液體噴霧劑在2『C保存的穩(wěn)定性(生物學(xué)活性106IU/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表2:不同干擾素液體噴霧劑在25t:保存的穩(wěn)定性(生物學(xué)活性106IU/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表3:不同干擾素液體噴霧劑在37t:保存的穩(wěn)定性(生物學(xué)活性106IU/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>1、由表一可以看出，列舉的四種干擾素液體噴霧劑在2『C能保存2年，干擾素活性基本上不降低；2、由表二可以看出，在25t:存放條件下，干擾素活力下降比較快，存放12個(gè)月，活力下降一個(gè)數(shù)量級(jí)；3、由表三可以看出，在37t:存放條件下，干擾素活力下降的最快，大約存放8個(gè)月時(shí)活力就下降了一個(gè)數(shù)量級(jí)；4、定期對(duì)存放的樣品進(jìn)行無菌檢驗(yàn)，結(jié)果均呈陰性；5、同時(shí)對(duì)外觀和pH值進(jìn)行觀察和檢測(cè)，在28t:和25。C存放條件下，樣品的外觀和pH值均沒有變化，符合《中華人民共和國(guó)獸藥典》2005年版中的要求；在37t:存放條件下存放8個(gè)月時(shí)出現(xiàn)少量絮狀物，pH值降至6.3;上述結(jié)果表明動(dòng)物干擾素液體噴霧劑在2『C條件下保存，其生物活性、無菌、pH值以及外觀都十分穩(wěn)定，說明該制劑生產(chǎn)工藝穩(wěn)定、可靠。本發(fā)明相關(guān)動(dòng)物試驗(yàn)試驗(yàn)藥品重組豬a-干擾素液體噴霧劑，重組雞a-干擾素液體噴霧劑，重組雞a_干擾素注射液，試驗(yàn)前保存于26t:冰箱。試驗(yàn)方法1、預(yù)防試驗(yàn)天津某養(yǎng)豬場(chǎng)，取2-10日齡仔豬11窩，共102頭，每窩仔豬隨機(jī)分成兩組，試驗(yàn)組仔豬用重組豬a-干擾素液體噴霧劑，每天噴霧l次，連續(xù)使用3天。對(duì)照組仔豬不使用本發(fā)明藥物，試驗(yàn)組和對(duì)照組在相同的飼養(yǎng)條件下觀察20天。20天后試驗(yàn)組的仔豬均未發(fā)病，精神及身體狀況良好，而對(duì)照組的仔豬則有28頭表現(xiàn)為精神沉郁、食欲減退、呼吸急促等癥狀，有明顯的呼吸道癥狀。2、療效試驗(yàn)取重組豬a-干擾素液體噴霧劑，在天津某豬場(chǎng)做臨床療效試驗(yàn)，用于治療豬圓環(huán)病毒病及繼發(fā)感染，主要臨床癥狀表現(xiàn)為精神萎頓，食欲減退，腹式呼吸，呼吸急促，咳嗽等。每頭每天噴霧1次，連續(xù)使用3天。一個(gè)療程后有效率達(dá)95%，治愈率達(dá)70%。取重組雞a-干擾素液體噴霧劑，在天津某雞場(chǎng)做臨床療效試驗(yàn)，用于治療雞傳染性支氣管炎，主要臨床癥狀表現(xiàn)為精神沉郁，呼吸時(shí)有濕性啰音，咳嗽等。每只每天噴霧1次，連續(xù)使用3天。一個(gè)療程后有效率達(dá)90%以上，治愈率達(dá)76%。3、效果對(duì)比試驗(yàn)取重組雞a-干擾素液體噴霧劑和重組雞a-干擾素注射液，在天津某雞場(chǎng)做治療效果對(duì)比試驗(yàn)，用于治療雞傳染性支氣管炎，主要臨床癥狀表現(xiàn)為精神沉郁，呼吸時(shí)有濕性啰音，咳嗽等。取病雞40只，分為2組，每組20只，分別采用重組雞a-干擾素液體噴霧劑和注射液進(jìn)行治療。使用噴霧劑組每只每天噴霧1次，連續(xù)使用3天；使用注射液組每只每天注射1次，連續(xù)注射三天。一個(gè)療程后使用噴霧劑組有效率達(dá)90%，治愈率達(dá)80%;使用注射液組有效率為75%，治愈率僅為60%。有益效果通過以上試驗(yàn)結(jié)果分析，可得出動(dòng)物干擾素液體噴霧劑在預(yù)防和治療畜禽呼吸道疾病方面有顯著的療效。同時(shí)本發(fā)明藥物為噴霧劑，在畜禽呼吸道疾病的治療過程中，利于吸收，效果明顯強(qiáng)于其他制劑，且在臨床使用中極為方便，大生產(chǎn)時(shí)成本較低，適于在畜牧業(yè)中推廣應(yīng)用。權(quán)利要求一種動(dòng)物干擾素溶液的噴霧劑，其中包含動(dòng)物干擾素和稀釋液。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物干擾素液體噴霧劑，其特征在于，所述的動(dòng)物干擾素包括自然或重組的干擾素a，或P，或Y，或"，或t等。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物干擾素液體噴霧劑，其治療和預(yù)防的動(dòng)物疾病為由病毒、細(xì)菌、支原體、免疫抑制病病原、常規(guī)活疫苗接種反應(yīng)和不利環(huán)境因素等原因或混合感染引起的動(dòng)物呼吸道疾病。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的噴霧劑，其中動(dòng)物干擾素的含量為20000-50000000IU/mL。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的噴霧劑的稀釋液，其中組分含有穩(wěn)定劑、分散劑、防腐劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、緩沖體系和注射用水。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的稀釋液，其中的穩(wěn)定劑是聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯(吐溫-80)，分散劑是甘油、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)或二者的組合物，防腐劑是苯酚、間甲苯酚、苯甲酸鈉或其任意組合物，滲透壓調(diào)節(jié)劑是氯化鈉，緩沖體系是檸檬酸、磷酸氫二鈉或其組合物。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的動(dòng)物干擾素液體噴霧劑的稀釋液，其中一組方及其含量為擰檬酸0.l-lg氯化鈉4-16g聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯(吐溫-80)20-150mL甘油20-100g苯酚0.1-1.0mL注射用水至1000mL調(diào)整pH值6.0-8.08.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動(dòng)物干擾素液體噴霧劑的制備方法，其特征在于用稀釋液稀釋干擾素原液，過濾除菌，分裝在噴霧瓶中，無菌封口。全文摘要本發(fā)明公開了動(dòng)物干擾素液體噴霧劑組方及其制備方法，提供了一種噴霧劑型的動(dòng)物干擾素。本發(fā)明的制劑是用動(dòng)物干擾素原液配以適當(dāng)?shù)南♂屢褐瞥傻囊后w制劑，pH在6.0-8.0。該制劑通過壓力噴霧器使干擾素液體變成霧化顆粒，霧化微粒通過動(dòng)物的呼吸作用進(jìn)入咽喉、肺等部位并直接吸收，用量少，見效快?？捎糜趧?dòng)物多種呼吸道疾病的預(yù)防和治療。文檔編號(hào)A61P11/00GK101721685SQ20081015277公開日2010年6月9日申請(qǐng)日期2008年11月4日優(yōu)先權(quán)日2008年11月4日發(fā)明者王麗娟,管于平申請(qǐng)人:天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司