專利名稱：一種治療肝病的中藥組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體涉及一種治療肝病的中藥組合物及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
乙型病毒性肝炎是威脅人類健康的一個(gè)重大疾病，全世界乙型肝炎病毒(HBV)感 染者約3. 5億人，約75%分布在亞太地區(qū)，每年約100萬(wàn)人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝 硬化和原發(fā)性肝癌。中國(guó)大陸HBV感染率高達(dá)57. 63%，即全國(guó)至少有6億人感染過(guò)HBV。 HBsAg陽(yáng)性率9. 75%，約有1. 2億人，占全球的1/3 ;其中約1/4將發(fā)展為慢性肝病，部分患 者可發(fā)展為肝硬化，甚至演變?yōu)楦伟?。每年?3. 7萬(wàn)人死于乙型肝炎相關(guān)的疾病，其中有 15.6萬(wàn)人死于肝癌。加強(qiáng)病毒性肝炎的預(yù)防，研究慢性肝炎的有效治療藥物，是當(dāng)前亟待解 決的重大問(wèn)題。 目前對(duì)慢性乙型肝炎的治療包括抗病毒治療、免疫調(diào)節(jié)治療、中醫(yī)藥治療、"保 肝"藥物對(duì)癥治療、基因治療、心理治療及基礎(chǔ)治療。 世界各國(guó)對(duì)采用化學(xué)藥品治療慢性乙肝作了大量的研究工作，但至今尚無(wú)特效藥 問(wèn)世，且由于化學(xué)藥品具有毒副作用，以及新藥的開(kāi)發(fā)耗時(shí)長(zhǎng)、耗資巨大，發(fā)展速度日漸緩 慢，特別是從分子學(xué)角度研究乙肝病毒更是困難。 在中醫(yī)藥治療中，治療慢性乙肝的單味中藥多采用人參、黨參、白術(shù)、鹿茸等調(diào)節(jié) 機(jī)體免疫功能，北山豆根、虎杖、丹參等可抗HBV達(dá)到改善患者癥狀、增強(qiáng)患者免疫力及加 強(qiáng)抑制HBV的作用。 近年來(lái)中成藥治療慢性乙肝的藥物也很多，但難盡人意，常用的有云芝肝泰、乙肝 寧沖劑、慢性養(yǎng)陰膠囊、復(fù)方蟲(chóng)草珍珠膠囊、香菇多糖片、乙肝散、小柴胡片等。云芝肝泰是 最早用于治療乙肝的中成藥，經(jīng)過(guò)臨床應(yīng)用，療效欠佳；乙肝寧沖劑是目前對(duì)乙肝病毒有一 定療效的中成藥，遠(yuǎn)期轉(zhuǎn)陰率還有待進(jìn)一步觀察；慢性養(yǎng)陰膠囊是一種以補(bǔ)肝腎健脾祛濕 治療方法為主的中成藥，但對(duì)乙肝病毒轉(zhuǎn)陰率有待長(zhǎng)期臨床驗(yàn)證；香菇多糖片是真菌香菇 菌的提取物，主要成分是甘露醇多肽，具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能，調(diào)節(jié)體液免 疫的作用，其服藥時(shí)間需較長(zhǎng)，療效及轉(zhuǎn)陰率、有效率和保肝降酶效果才較明顯；乙肝散具 有清熱解毒、健脾化濕、舒肝利膽、免疫調(diào)節(jié)的功能，臨床顯示降酶效果與齊墩果酸類似，對(duì) 抑制病毒復(fù)制有一定作用。 除了以上列舉的中成藥品種，還有古藺肝蘇顆粒、疏肝理脾片、速立特、龍膽泄肝 丸、甘草甜素片、乙肝扶正膠囊、乙肝解毒膠囊、逍遙沖劑等在臨床上也有使用，但效果均存
在一定局限。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種治療肝病的中藥組合物。 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種制備本發(fā)明中藥組合物的制備方法。
本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供一種本發(fā)明中藥組合物在制備用于治療急性肝損傷 及慢性乙型肝炎的藥物中的用途。 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的一個(gè)技術(shù)方案提供了 一種治療肝病的中藥組合物， 其中該中藥組合物是主要由按下列配比的下述中藥材制成的人參2-4重量份、鹿茸2-4重 量份、淫羊藿30-34重量份、蛤蚧1-3重量份、菟絲子15-19重量份、韭菜子15-19重量份、 蛇床子13-16重量份、吳茱萸9-12重量份、山柰0. 6-0. 9重量份。 中藥材的配比優(yōu)選為人參2-3重量份、鹿茸2-3重量份、淫羊藿31-32重量份、 蛤階1-2重量份、菟絲子17-18重量份、韭菜子17-18重量份、蛇床子14-15重量份、吳茱萸 10-11重量份、山柰0. 6-0. 8重量份。 優(yōu)選的是，本發(fā)明的中藥組合物中所含人參以人參皂苷Rl^計(jì)，不少于0. 017重量份。 還優(yōu)選的是，本發(fā)明的中藥組合物中所含淫羊藿以淫羊藿苷計(jì)，不少于0. 085重 量份。 本發(fā)明的中藥組合物優(yōu)選被制為栓劑。 本發(fā)明的另一個(gè)技術(shù)方案提供了一種制備本發(fā)明中藥組合物的方法，該方法包括 以下步驟(1)將30-34重量份的淫羊藿、15-19重量份的菟絲子、15-19重量份的韭菜子、 13-16重量份的蛇床子、9-12重量份的吳茱萸加水煎煮并過(guò)濾；(2)將由步驟(1)得到的濾 液濃縮至清膏；(3)將2-4重量份的人參、2-4重量份的鹿茸、l-3重量份的蛤蚧、0. 6_0. 9重
量份的山柰與清膏混合。 優(yōu)選的是，在步驟(3)中，在混合之前，將人參、鹿茸、蛤蚧、山柰制成細(xì)粉。所述細(xì) 粉指的是全部通過(guò)80目篩，并含通過(guò)100目篩不少于95%的粉末。 還優(yōu)選的是，在步驟(3)中，在混合之后，將所得混合物進(jìn)行干燥并制成最細(xì)粉。 所述最細(xì)粉指的是全部通過(guò)100目篩，并含通過(guò)120目篩不少于95%的粉末。
本發(fā)明的制備方法優(yōu)選還包括(4)將由步驟(3)得到的混合物與混合脂肪酸甘 油酯混合；(5)將由步驟(4)得到的混合物制成栓劑。 本發(fā)明的再一個(gè)技術(shù)方案提供了本發(fā)明中藥組合物在制備用于治療急性肝損傷 或慢性乙型肝炎的藥物中的用途。 本發(fā)明的中藥組合物具有溫補(bǔ)脾腎、疏肝解郁的功效。本發(fā)明的中藥組合物可用 于急性肝損傷及慢性乙型肝炎脾腎陽(yáng)虛，肝氣郁結(jié)證，癥見(jiàn)食欲不振，食后腹脹，脅肋脹痛， 畏寒肢冷，腰膝酸軟，倦怠乏力，尿清便溏，面色晦暗，舌淡胖苔白，脈沉細(xì)或沉遲。本發(fā)明的 中藥組合物無(wú)明顯不良反應(yīng)，且療效確切。 本發(fā)明還提供了一種治療急性肝損傷或慢性乙型肝炎的方法，該方法包括給需要 治療的患者施用有效劑量的本發(fā)明中藥組合物。所述的患者包括人，也包括貓、狗等動(dòng)物。 所述的有效劑量會(huì)隨患者的疾病嚴(yán)重程度、體重、體質(zhì)、年齡、患病歷史等因素有所變化。但 是，醫(yī)師或藥劑師有能力為不同的患者確定出合適的施用量。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明的中藥組合物主要由人參、鹿茸、淫羊藿、蛤蚧、菟絲子、韭菜子、蛇床子、吳 茱萸和山柰九味中藥材組成，以人參和鹿茸為君藥，以淫羊藿和蛤蚧為臣藥，以菟絲子、韭菜子、蛇床子、吳茱萸和山柰為佐藥。 本發(fā)明的中藥組合物中的各中藥材具有本領(lǐng)域內(nèi)所使用的相應(yīng)名稱的一般含義。 各中藥材的主要成分如下。 人參含皂苷、糖類、酶、氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、有機(jī)酸、生物堿、揮發(fā)油等。其中人 參總皂苷為其主要有效成分，具有促進(jìn)肝內(nèi)核酸合成、提高機(jī)體免疫力、抗腫瘤、抗心律失 常、抗衰老和益智作用。 鹿茸主含磷脂類、酯類、多胺類、前列腺素類化學(xué)成分與氨基酸、膽固醇等。
淫羊藿主含黃酮類、木脂體類化學(xué)成分以及少量的揮發(fā)油、蠟醇、三十一烷、植物 甾醇、鞣質(zhì)及油脂等。其中淫羊藿苷為其主要有效成分之一，具有促進(jìn)性腺功能、抗病原微 生物、降血糖、抗炎與提高免疫力等作用。 蛤蚧主含膽固醇、膽固醇酯、甘油酯、糖脂、磷脂和脂肪酸，尚含多肽成分和肌酸 等活性成分。 菟絲子主含香豆精、甾萜、黃酮類化合物、糖樹(shù)脂、淀粉、蛋白質(zhì)、糖類、有機(jī)酸、脂 肪酸、蛋白酶等。
韭菜子主含生物堿與皂苷類成分。尚含豐富的氨基酸與大量的微量元素。
蛇床子主含揮發(fā)油、香豆素類成分。
吳茱萸主含生物堿、揮發(fā)油、檸檬苦素類等成分。
山柰主含揮發(fā)油、黃酮類成分。 本發(fā)明的中藥組合物中，淫羊藿、菟絲子、韭菜子、蛇床子和吳茱萸五味中藥材的 主要有效成分多為水溶性成分，宜水提；其余人參等四味中藥材中有貴細(xì)藥材，有處方量極 小的藥材，有含非水溶性藥效成分的藥材，宜粉碎入藥。 本發(fā)明的中藥組合物可以被制成各種劑型，例如栓劑、顆粒劑、合劑、片劑、散劑、 蜜丸、膠囊、注射齊U、滴劑、貼劑等劑型。制備這些劑型的方法和所用的助劑是本領(lǐng)域的技術(shù) 人員已知的，例如，可參見(jiàn)《中藥藥劑學(xué)》(上海科學(xué)技術(shù)出版社，1986年11月出版)、《藥用 輔料大全》(四川科學(xué)技術(shù)出版社，1995年1月出版)、《中國(guó)藥典》2005年版一部(化學(xué)工 業(yè)出版社，2005年1月出版)等。本發(fā)明的中藥組合物優(yōu)選被制為栓劑。
對(duì)于本發(fā)明中藥組合物的給藥途徑也沒(méi)有過(guò)多的限制，例如可以通過(guò)口服、注射、 透皮、鼻腔給藥、直腸給藥等方式，優(yōu)選直腸給藥方式。 本發(fā)明的制備方法包括以下步驟(1)將30-34重量份的淫羊藿、15-19重量份的 菟絲子、15-19重量份的韭菜子，13-16重量份的蛇床子，9-12重量份的吳茱萸加水煎煮并 過(guò)濾；(2)將由步驟(1)得到的濾液濃縮至清膏；(3)將清膏與2-4重量份的人參、2-4重量 份的鹿茸、l-3重量份的蛤蚧、和0. 6-0. 9重量份的山柰混合。本發(fā)明的制備方法還可以包 括(4)將由步驟(3)得到的混合物與混合脂肪酸甘油酯混合；(5)將由步驟(4)得到的混 合物制成栓劑。 在本發(fā)明方法的步驟(1)中，加水煎煮過(guò)程可進(jìn)行1-3次，優(yōu)選2次；每次可進(jìn)行 2-3小時(shí)，例如第1次進(jìn)行3小時(shí)，第2次進(jìn)行2小時(shí)；另外，所加的水量可為步驟(1)中所 用藥材的8-14倍(重量)，優(yōu)選10倍；煎煮溫度可為90°C -IO(TC。 在本發(fā)明方法的步驟(2)中，可將由步驟(1)得到的濾液在40-8(TC減壓濃縮至清 膏，該清膏可為相對(duì)密度為1. 10-1. 15(50°C )的清膏。
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在本發(fā)明方法的步驟(3)中，可在混合之前將人參、鹿茸、蛤蚧、和山柰制成細(xì)粉， 例如通過(guò)冷凍粉碎的方式制成細(xì)粉。在步驟(3)中，可在混合之后將所得混合物進(jìn)行干燥， 例如在60-8(TC下減壓干燥，優(yōu)選在7(TC下減壓干燥。在步驟(3)中，可將干燥后的混合物 粉碎，過(guò)IOO目篩，以制得細(xì)粉。 在本發(fā)明方法的步驟(4)中所用混合脂肪酸甘油酯是月桂酸、硬脂酸與甘油酯化 而成的脂肪酸甘油酯混合物。在本發(fā)明方法的步驟(4)中，混合脂肪酸甘油酯與由步驟(3) 得到的混合物的重量之比為20 : 2-20 : 18，優(yōu)選為20 : 2-20 : 6，最優(yōu)選為20 : 3。在 本發(fā)明方法的步驟(4)中，在混合之前混合脂肪酸甘油酯的溫度可保持在45-85t:，優(yōu)選保 持在55-65 °C。 在本發(fā)明方法的步驟(5)中，可將由步驟(4)得到的混合物灌入栓劑模中，冷卻 (例如，在ot:冷卻30分鐘)后取出，脫模，以得到栓劑。 以下參照實(shí)施例和試驗(yàn)例來(lái)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說(shuō)明，應(yīng)該理解本發(fā)明不限于這 些例子。 實(shí)施例1 本實(shí)施例的中藥組合物各組分用量為人參40g、鹿茸40g、淫羊藿450g、蛤蚧20g、 菟絲子250g、韭菜子250g、蛇床子200g、吳茱萸150g、山柰10g。 步驟取上述用量的淫羊藿、菟絲子、韭菜子、蛇床子、吳茱萸加水煎煮2次，其中 第一次加水16920g，煎煮3. 0小時(shí)，第二次加水l棚g，煎煮2. 0小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾 液濃縮至相對(duì)密度為1. 10-1. 15(50°C )的清膏，冷卻；將人參、鹿茸、蛤蚧、山柰分別冷凍粉 碎成細(xì)粉(處方用量以細(xì)粉計(jì))；將上述清膏和細(xì)粉混勻，干燥，粉碎成最細(xì)粉。取混合脂肪 酸甘油酯2000g(可購(gòu)自湖南富日醫(yī)藥化工有限公司)，加熱溶化，溫度保持在6(TC ±5°C， 加入上述藥物最細(xì)粉300g，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻后取出，制成1000粒，即得。規(guī)格為每 粒2. 3g(含藥物細(xì)粉(即，最終的藥物最細(xì)粉)0. 3g或相當(dāng)于原生藥材1. 41g)。
實(shí)施例1的成分檢測(cè)
供試品溶液的制備 取實(shí)施例l所得藥品5粒，置索氏提取器中，加三氯甲烷50ml，加熱回流2小時(shí)， 棄去三氯甲烷液，藥渣揮干溶劑，加水飽和正丁醇100ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液用氨 試液洗滌3次，每次30ml，放置分層，取上層液蒸干，殘?jiān)蛹状糽ml使溶解，作為供試品溶 液。
(1)人參有效成分的鑒別 取人參對(duì)照藥材0. 2g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取人參皂苷Rbp人參皂苷Re、 人參皂苷Rgl對(duì)照品，加甲醇制成每lml各含2mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色 譜法(《中國(guó)藥典》2005版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一 硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15 : 40 : 22 : IO)I(TC以下放置的
下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105t:加熱至斑點(diǎn)顯色清
晰，分別置日光及紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相
應(yīng)位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)。 (2)淫羊藿有效成分的鑒別 取淫羊藿苷對(duì)照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2005版一部附錄VI B)試驗(yàn)，分別吸取上述兩種溶液各2iU，分別點(diǎn) 于同一用0. lmol/L磷酸二氫鈉制成的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯_三氯甲烷_(kāi)甲酸_水
(io : i : i : i)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，i05t:加熱i5分鐘，置紫
外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光 斑點(diǎn)。 (3)吳茱萸有效成分的鑒別 取吳茱萸對(duì)照藥材O. 6g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取吳茱萸次堿對(duì)照品，加甲醇 制成每lml含0. 2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2005版一部附 錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3ia，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-三氯
甲烷-乙酸乙酯(5 : i : i)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，晾干，置
紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相
同顏色的熒光斑點(diǎn)。 (4)蛇床子有效成分的鑒別 取蛇床子對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取蛇床子素對(duì)照品，加甲醇制 成每lml含0. 2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2005版一部附錄 VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3ia，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-三氯甲 烷-乙酸乙酯(5:1:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試 品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(5)鹿茸有效成分的鑒別 取在供試品溶液的制備過(guò)程中得到的濾渣少許，以5%氫氧化鈉溶液封片，置顯微 鏡下觀察粉末黃棕色或紅棕色，表皮角質(zhì)層可見(jiàn)，凹凸不平。茸毛脫落后的毛窩呈圓洞狀， 邊緣較平整。骨碎片棕色或棕黃色，呈不規(guī)則碎塊，骨陷窩較多，呈類圓形，橫斷面可見(jiàn)大的 圓形空洞，邊緣凹凸不平。 (6)經(jīng)檢查，實(shí)施例1所得藥品符合《中國(guó)藥典》2005版一部附錄I W栓劑項(xiàng)下有
關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。 (7)人參含量的測(cè)定 人參含量照高效液相色譜法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng) 相A，以水為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm。理論板數(shù)按人參皂苷Rl^ 峰計(jì)算應(yīng)不低于8000。人參皂苷Rl^主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。
時(shí)間(分鐘)流動(dòng)相A(Q/iO流動(dòng)相B(Q/iO
0 10 10 25 25 3510 10 — 25 2590 90 — 75 75
35 7025 — 3975 — 61 對(duì)照品溶液的制備取人參皂苷Rl^對(duì)照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每lml含0. 4mg的溶液，搖勻，即得。 供試品溶液的制備取實(shí)施例1所得藥品10粒，精密稱定，加三氯甲烷100ml，超 聲處理30分鐘，棄去三氯甲烷液，藥渣揮干溶劑，加甲醇100ml，加熱回流90分鐘，放冷，濾 過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，濾過(guò)，濾液通過(guò)DIOI型大孔吸附樹(shù)脂柱(內(nèi)徑1. 5cm， 長(zhǎng)18cm)，以水50ml洗脫，棄去水液；再用30%乙醇100ml洗脫，棄去30%乙醇洗脫液；繼 用80%乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?0%甲醇溶解并定量轉(zhuǎn)移至10ml量瓶 中，加50 %甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得。 實(shí)施例1所得藥品每粒含人參以人參皂苷Rt^ (C54H92023)計(jì)，不少于0. 25mg。
(8)淫羊藿含量的測(cè)定 淫羊藿含量照高效液相色譜法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄VID)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈_水 (28 : 72)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。淫 羊藿苷主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。 對(duì)照品溶液的制備取淫羊藿苷對(duì)照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每lml含 50iig的溶液，搖勻，即得。 供試品溶液的制備取實(shí)施例1所得藥品10粒，精密稱定，剪碎，取約2. 3g，精密 稱定，加入三氯甲烷與水各50ml，于8(TC加熱回流60分鐘，放冷，溶液定量轉(zhuǎn)移至分液漏斗 中，靜置分層，分取水層，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)?0 %甲醇溶解并定量轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中， 加50 %甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得。 實(shí)施例1所得藥品每粒含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H4。015)計(jì)，不少于1. 2mg。
實(shí)施例2 本實(shí)施例的中藥組合物各組分用量為人參45g、鹿茸50g、淫羊藿470g、蛤蚧20g、 菟絲子230g、韭菜子240g、蛇床子190g、吳茱萸155g、山柰10g。 步驟取上述用量的淫羊藿、菟絲子、韭菜子、蛇床子、吳茱萸加水煎煮2次，其中 第一次加水16920g，煎煮3. 0小時(shí)，第二次加水l棚g，煎煮2. 0小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾 液濃縮至相對(duì)密度為1. 10-1. 15(50°C )的清膏，冷卻；將人參、鹿茸、蛤蚧、山柰分別冷凍粉 碎成細(xì)粉(處方用量以細(xì)粉計(jì))；將上述清膏和細(xì)粉混勻，干燥，粉碎成最細(xì)粉。取混合脂肪 酸甘油酯2000g(可購(gòu)自湖南富日醫(yī)藥化工有限公司)，加熱溶化，溫度保持在6(TC ±5°C， 加入上述藥物最細(xì)粉300g，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻后取出，制成1000粒，即得。規(guī)格為每 粒2. 3g(含藥物細(xì)粉(即，最終的藥物最細(xì)粉)0. 3g或相當(dāng)于原生藥材1. 41g)。
實(shí)施例3 本實(shí)施例的中藥組合物各組分用量為人參35g、鹿茸38g、淫羊藿452g、蛤蚧22g、 菟絲子247g、韭菜子246g、蛇床子205g、吳茱萸153g、山柰12g。 步驟取上述用量的淫羊藿、菟絲子、韭菜子、蛇床子、吳茱萸加水煎煮2次，其中 第一次加水16920g，煎煮3. 0小時(shí)，第二次加水l棚g，煎煮2. 0小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 10-1. 15(50°C )的清膏，冷卻；將人參、鹿茸、蛤蚧、山柰分別冷凍粉 碎成細(xì)粉(處方用量以細(xì)粉計(jì))；將上述清膏和細(xì)粉混勻，干燥，粉碎成最細(xì)粉。取混合脂肪 酸甘油酯2000g(可購(gòu)自湖南富日醫(yī)藥化工有限公司)，加熱溶化，溫度保持在60°C ±5°C， 加入上述藥物最細(xì)粉300g，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻后取出，制成1000粒，即得。規(guī)格為每 粒2. 3g(含藥物細(xì)粉(即，最終的藥物最細(xì)粉)0. 3g或相當(dāng)于原生藥材1. 41g)。
以上實(shí)施例2、3按照實(shí)驗(yàn)例1中所述的方法進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)論如下
實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3
人參有效成分的鑒別檢出檢出檢出
淫羊藿有效成分的鑒別檢出檢出檢出
吳茱萸有效成分的鑒別檢出檢出檢出
蛇床子有效成分的鑒別檢出檢出檢出
鹿茸有效成分的鑒別檢出檢出檢出
栓劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定
人參含量的測(cè)定0. 31mg/粒0. 33mg/粒0. 27mg/粒
淫羊藿含量的測(cè)定2. 0mg/粒2. 4mg/粒1. 5mg/粒 試驗(yàn)例1藥效學(xué)試驗(yàn) (1)實(shí)施例1所得藥品對(duì)四氯化碳(CC14)所致大鼠急性肝損傷的影響 連續(xù)ig(灌胃)實(shí)施例l所得藥品O. l、0.2、0.4g/kg.d 7d(天)，按體表等效量推 算，分別相當(dāng)于臨床使用劑量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，對(duì)CC14致大鼠急性肝損傷的ALT 和LDH兩項(xiàng)指標(biāo)，實(shí)施例1所得藥品中、高劑量組與ig聯(lián)苯雙酯0. 05g/(kg. d) —樣均有顯 著(P < 0. 05)或非常顯著(P < 0. 01)的抑制作用，此外實(shí)施例1所得藥品高劑量組對(duì)TBA 亦有降低作用(P〈0.05)，對(duì)T-BIL有下降趨勢(shì)。提示實(shí)施例1所得藥品能有效減輕肝細(xì) 胞的損傷程度，對(duì)CC14急性肝損傷有一定保護(hù)作用。 (2)實(shí)施例1所得藥品對(duì)BCG+LPS誘導(dǎo)小鼠免疫性肝損傷的影響
連續(xù)ig實(shí)施例l所得藥品O. 2、0. 4、0. 8g/kg. d 10d，按體表等效量推算，分別相當(dāng) 于臨床使用劑量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，對(duì)BCG+LPS所致小鼠免疫性肝損傷的ALT、AST、 T-BIL、肝脾系數(shù)升高均有不同程度的抑制作用，且對(duì)10h動(dòng)物存活率有不同程度的提高， 其中高劑量組存活率顯著提高，15只小鼠中存活了 9只，而模型組15只小鼠僅存活2只，并 且這2只處于瀕臨死亡的邊緣。病理切片結(jié)果顯示高劑量組肝巨噬細(xì)胞大量增生動(dòng)物數(shù) 較模型對(duì)照組明顯減少，與陽(yáng)性對(duì)照組相等；而巨噬細(xì)胞中等量增生動(dòng)物數(shù)較陽(yáng)性對(duì)照組
9明顯減少，低劑量組巨噬細(xì)胞大量增生動(dòng)物數(shù)亦顯著低于模型對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組，甚至 低于高劑量組。表明實(shí)施例l所得藥品防止小鼠免疫性肝損傷的發(fā)生效果明顯。在該模型 中還做了肛灌給藥途經(jīng)，發(fā)現(xiàn)肛灌O. 8g/(kg. d)給藥組肝脾系數(shù)和肝功的各種指標(biāo)與ig給 藥組比較均無(wú)明顯差異，提示ig與肛灌給藥以免疫性肝損傷的療效相近。
(3)實(shí)施例1所得藥品對(duì)D-氨基半乳糖(D-GalN)致小鼠急性肝細(xì)胞損傷的影響
連續(xù)ig實(shí)施例1所得藥品0. 2、0. 4、0. 8g/kg. d 7d，按體表等效量推算，分別相當(dāng) 于臨床使用劑量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，對(duì)D-GalN所致小鼠急性肝細(xì)胞損傷所致的AST、 GGT、 LDH、 T-BIL、 TBA升高均有顯著或非常顯著的抑制作用(P < 0. 001)，高劑量對(duì)ALT的 升高亦有顯著抑制作用(P〈0.001)，這些作用與聯(lián)苯雙酯的作用相似。中、小劑量也呈現(xiàn) 出對(duì)AKP升高亦有良好抑制作用，而聯(lián)苯雙酯沒(méi)有對(duì)AKP的作用。用藥組可見(jiàn)肝組織病變 范圍較模型組小，病變程度顯著較模型組輕，但較陽(yáng)性對(duì)照組重。中劑量組病理觀察與高劑 量組基本相似，表明實(shí)施例1所得藥品對(duì)D-GalN所致肝細(xì)胞壞死有一定的保護(hù)作用。
(4)實(shí)施例1所得藥品對(duì)異硫氰酸苯酯(APIT)致小鼠阻塞性黃疸型肝損傷的影響
連續(xù)肛灌0. 8g/ (kg. d)或ig實(shí)施例1所得藥品0. 2、0. 4、0. 8g/ (kg. d) 7d，按體表 等效量推算，分別相當(dāng)于臨床使用劑量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，對(duì)APIT所致黃疸型肝損 傷小鼠的血清ALT、 AKP、 AST、 LDH、 TBA、 a-HDH均有不同程度抑制作用，且作用顯著；聯(lián)苯雙 酯僅對(duì)TP、ALT、TBA、AKP有抑制作用，表明實(shí)施例1所得藥品對(duì)APIT致動(dòng)物的肝損傷的修 復(fù)范圍更寬，作用更強(qiáng)。提示實(shí)施例l所得藥品對(duì)黃疸型肝炎可能有良好的抑制作用。實(shí) 施例1所得藥品對(duì)防止甲苯異氰酸酯致小鼠黃疸型肝損傷的發(fā)生有效，說(shuō)明實(shí)施例1所得 藥品具有抑制肝組織阻塞性黃疸的發(fā)生，及進(jìn)一步阻止肝細(xì)胞損傷和壞死。
(5)實(shí)施例1所得藥品對(duì)大鼠膽汁分泌量的影響 大鼠利膽試驗(yàn)表明，ig實(shí)施例1所得藥品0. 1、0. 2、0. 4g/kg 1次后，按體表等效 量推算，分別相當(dāng)于臨床使用劑量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，4小時(shí)內(nèi)，均有明顯的促進(jìn)膽 分泌作用，提示實(shí)施例1所得藥品良好的利膽作用。
(6)實(shí)施例1所得藥品對(duì)CC14所致大鼠慢性肝損傷的影響 連續(xù)ig不同劑量的實(shí)施例1所得藥品0. 1、0. 2、0.4g/(kg. d)X63d后，按體表等 效量推算，分別相當(dāng)于臨床使用劑量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，實(shí)施例1所得藥品各組在不 同期對(duì)CC14所致慢性肝損傷大鼠肝功能中的ALT、 AST、 GGT、 a-HDH及LDH有不同程度抑制 作用，對(duì)T-BIL和TBA亦有不同程度的抑制作用。 (7)實(shí)施例1所得藥品對(duì)二硝基氯苯所致小鼠遲發(fā)型皮膚過(guò)敏反應(yīng)和環(huán)磷酰胺致 小鼠免疫功能低下癥的影響 連續(xù)ig不同劑量的實(shí)施例1所得藥品0. 2、0. 4、0. 8g/(kg. d) 10-12d，按體表等效
量推算，分別相當(dāng)于臨床使用劑量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，對(duì)二硝基氯苯致小鼠的遲發(fā)
型過(guò)敏反應(yīng)的光密度均有顯著提高，提示實(shí)施例1所得藥品有增強(qiáng)T細(xì)胞免疫功能作用，且
對(duì)CY所致小鼠免疫低下癥有良好保護(hù)作用，各種劑量的保護(hù)系數(shù)均在有效范圍內(nèi)，提示實(shí)
施例1所得藥品對(duì)動(dòng)物的免疫功能有良好的影響。 (8)實(shí)施例1所得藥品在2215細(xì)胞上對(duì)HBsAg、 HBeAg的作用 實(shí)施例1所得藥品在2215細(xì)胞上對(duì)HBsAg、HBeAg的作用顯示，對(duì)HBeAg治療指數(shù)
TI = 8. 22，對(duì)HBsAg治療指數(shù)TI = 1. 60。提示該藥對(duì)HBeAg和HBsAg有一定的抑制作用。
(9)實(shí)施例1所得藥品抗鴨乙型肝炎病毒作用的實(shí)驗(yàn)研究 實(shí)施例1所得藥品抗鴨乙型肝炎病毒作用的試驗(yàn)研究表明受試藥物實(shí)施例1所 得藥品小、中劑量組(0. 1， 0. 2g/kg/d) 28天療程各時(shí)點(diǎn)血清DHBV-DNA變化差異不顯著，但 大劑量組(0. 4g/kg/d)給藥14， 21和28天均有抑制血清DHBV-DNA作用，其小、中、大劑量 分別相當(dāng)于臨床使用劑量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，與給藥前比較，P值< 0. 05 ;給藥中途 21天與對(duì)照組相同時(shí)間比較P值〈0. 05。大劑量組加拉米夫定(3TC) 20mg/kg/d可顯著抑 制血清DHBV-DNA。表明實(shí)施例1所得藥品中、小二個(gè)劑量組在鴨體內(nèi)對(duì)DHBV-DNA抑制作用 不顯著，但大劑量組有一定的抑制作用。 以上研究結(jié)果表明，實(shí)施例1所得藥品對(duì)CC14、 D-CalN、 APIT、 BCG+PLPS所引起的
急性肝損傷有明顯的保護(hù)作用；對(duì)CCl4所致大鼠慢性肝損傷有不同程度的抑制作用；ig或
肛塞后可迅速抑制轉(zhuǎn)氨酶的升高；對(duì)肝損傷動(dòng)物的免疫功能有明顯的增強(qiáng)功能；且有一定
利膽作用；在2215細(xì)胞上對(duì)HBsAg和HBeAg有一定的抑制作用；大劑量(400mg/kg/d)在鴨
體內(nèi)對(duì)DHBV-DNA有一定的抑制作用。提示實(shí)施例l所得藥品用于治療急性肝炎和慢性肝
炎均有一定的療效。 試驗(yàn)例2—般藥理學(xué)試驗(yàn) 24只畢格犬隨機(jī)分為4組，每組6只，雌雄各半，分別直腸給予實(shí)施例1所得藥品 30、 120、480mg/kg/d三個(gè)劑量(分別相當(dāng)于臨床使用劑量的3、 12、48倍，按體表面積計(jì))和 空白栓劑陰性對(duì)照組1次，觀察對(duì)其行為的影響；小鼠灌服實(shí)施例1所得藥品原料粉200、 400、800mg/kg三個(gè)劑量(分別相當(dāng)于臨床使用劑量的4、8、16倍，按體表面積計(jì))1次，進(jìn)行 小鼠自主活動(dòng)試驗(yàn)；小鼠灌服實(shí)施例1所得藥品原料粉200、400、800mg/kg三個(gè)劑量(分別 相當(dāng)于臨床使用劑量的4、8、 16倍，按體表面積計(jì))1次，進(jìn)行小鼠戊巴比妥鈉閾下催眠劑量 試驗(yàn)；大鼠灌服實(shí)施例1所得藥品原料粉100、200、400mg/kg三個(gè)劑量(分別相當(dāng)于臨床使 用劑量的4、8、16倍，按體表面積計(jì))1次，進(jìn)行轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)；麻醉犬直腸給予實(shí)施例1所得藥 品30、120、480mg/kg三個(gè)劑量(分別相當(dāng)于臨床使用劑量的3、12、48倍，按體表面積計(jì))1 次，觀察測(cè)定收縮壓、舒張壓和平均壓等血壓指標(biāo)，P波、R波、T波、P-R間期、QRS間期、QT 間期、S-T段等心電指標(biāo)，呼吸頻率和呼吸深度等呼吸指標(biāo)。 結(jié)果顯示，在本實(shí)驗(yàn)條件下，通過(guò)犬一般行為影響試驗(yàn)、小鼠自主活動(dòng)試驗(yàn)、小鼠 閾下劑量催眠試驗(yàn)和大鼠轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)，表明實(shí)施例1所得藥品對(duì)小鼠、大鼠和犬的神經(jīng)系統(tǒng) 沒(méi)有明顯影響。通過(guò)對(duì)麻醉犬血壓、心電、呼吸試驗(yàn)，表明直腸給予實(shí)施例1所得藥品30、 120、480mg/kg三個(gè)劑量(分別相當(dāng)于臨床使用劑量的3、12、48倍，按體表面積計(jì))1次，對(duì) 血壓和呼吸沒(méi)有明顯影響，480mg/kg劑量給藥90、 120分鐘時(shí)QRS間期一過(guò)性延長(zhǎng)，稍后恢 復(fù)，對(duì)其余心電指標(biāo)未見(jiàn)明顯影響。提示臨床用藥時(shí)要注意對(duì)心電的監(jiān)控。
試驗(yàn)例3急性毒性試驗(yàn)
(1)家兔急性毒性試驗(yàn) 20只家兔隨機(jī)分為2組，其中陰性對(duì)照組10只，給藥組10只，雌雄各半，用最大耐 受量法進(jìn)行單次給藥毒性試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，家兔直腸給予實(shí)施例1所得藥品的最大耐 受量(MTD)大于5. 76g生藥/kg，約為臨床使用劑量的250倍。試驗(yàn)期間外觀體征未見(jiàn)明顯 異常，沒(méi)有動(dòng)物死亡，尸檢沒(méi)有發(fā)現(xiàn)明顯病變。
(2)犬急性毒性試驗(yàn)
11
6只畢格犬隨機(jī)分為2組，其中陰性對(duì)照組3只，給藥組3只，雌雄兼有，用最大給 藥量法進(jìn)行單次給藥毒性試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，犬直腸給予實(shí)施例l所得藥品的最大耐受 量(MTD)大于2. 16g/kg，約為臨床使用劑量的108倍。試驗(yàn)期間沒(méi)有動(dòng)物死亡，外觀體征未 見(jiàn)明顯異常，尸檢沒(méi)有發(fā)現(xiàn)明顯病變。
試驗(yàn)例4長(zhǎng)期毒性試驗(yàn) 32只畢格犬隨機(jī)分為4組，每組8只，雌雄各半，分別直腸給予實(shí)施例1所得藥品 60、240、960mg/kg/d三個(gè)劑量(分別相當(dāng)于臨床使用劑量的3、 12、48倍，按體表面積計(jì))和 空白栓劑陰性對(duì)照組，連續(xù)九個(gè)月。分別于給藥前(兩次)、給藥13周、給藥20周、給藥26 周、給藥34周、給藥39周及恢復(fù)6周做尿液分析檢查、心電圖檢查以及血常規(guī)、血凝、生化 指標(biāo)和電解質(zhì)指標(biāo)檢查。在末次給藥后24小時(shí)，每組處理犬4只，雌雄各半，作系統(tǒng)尸檢，取 12個(gè)臟器稱重計(jì)算臟器系數(shù)，30個(gè)臟器作病理學(xué)檢查。剩余動(dòng)物停藥作恢復(fù)期觀察6周， 然后處死作如上全部指標(biāo)檢測(cè)。 結(jié)果顯示，在本實(shí)驗(yàn)條件下，犬連續(xù)39周直腸給予實(shí)施例l所得藥品60、240、 960mg/kg/d三個(gè)劑量(分別相當(dāng)于臨床使用劑量的3、 12、48倍，按體表面積計(jì))，對(duì)動(dòng)物的 外觀、一般行為、體重增長(zhǎng)和體溫均無(wú)明顯影響。在20周時(shí)，三個(gè)劑量組動(dòng)物均出現(xiàn)一過(guò)性 P-R間期延長(zhǎng)，在以后的檢測(cè)中未出現(xiàn)該現(xiàn)象；低劑量有一定的升紅作用；尿液檢查發(fā)現(xiàn)有 一定的腎功異常，表現(xiàn)為尿比重降低，尿ra值增高，但血生化檢查卻未見(jiàn)相關(guān)指標(biāo)的異常。 以上毒副作用在停藥6周后基本恢復(fù)，是可逆的。中毒的靶器官為腎臟和心臟，臨床長(zhǎng)期 用藥時(shí)應(yīng)注意對(duì)尿液和心電的檢查。鑒于上述異常指標(biāo)均是一過(guò)性的、無(wú)明顯劑量關(guān)系的 或者沒(méi)有相應(yīng)佐證的，因此認(rèn)為該藥的三個(gè)劑量基本都是安全的，無(wú)毒副反應(yīng)的安全劑量 《960mg/kg/d(相當(dāng)于臨床使用劑量的48倍，按體表面積計(jì))。
試驗(yàn)例5剌激性試驗(yàn) 用家兔在GLP實(shí)驗(yàn)條件下，對(duì)實(shí)施例1所得藥品進(jìn)行直腸局部剌激試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié) 果顯示在本實(shí)驗(yàn)條件下，家兔直腸給藥，每日給藥1次，連續(xù)七天，O. 3g/粒規(guī)格(相當(dāng)于臨 床使用劑量的5倍)對(duì)家兔直腸及肛周無(wú)明顯剌激作用，而1.2g/粒規(guī)格(相當(dāng)于臨床使 用劑量的20倍)對(duì)家兔直腸及肛周有一定剌激作用，可引起直腸和肛管粘膜急慢性炎癥反 應(yīng)。 盡管結(jié)合優(yōu)選例子對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了說(shuō)明，但本發(fā)明并不局限于上述例子，應(yīng)該理 解，在本發(fā)明構(gòu)思的引導(dǎo)下，本領(lǐng)域技術(shù)人員可進(jìn)行各種修改和改進(jìn)，所附權(quán)利要求概括了 本發(fā)明的范圍。
權(quán)利要求
一種治療肝病的中藥組合物，其中該中藥組合物是主要由按下列配比的下述中藥材制成的人參2-4重量份、鹿茸2-4重量份、淫羊藿30-34重量份、蛤蚧1-3重量份、菟絲子15-19重量份、韭菜子15-19重量份、蛇床子13-16重量份、吳茱萸9-12重量份、山柰0.6-0.9重量份。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其中所述中藥材的配比為人參2-3重量份、鹿茸2-3重量份、淫羊藿31-32重量份、蛤階1_2重量份、菟絲子17-18 重量份、韭菜子17-18重量份、蛇床子14-15重量份、吳茱萸10-11重量份、山柰0. 6-0. 8重 量份。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的中藥組合物，其中該中藥組合物中所含人參以人參皂苷Rbl 計(jì)，不少于0.017重量份。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的中藥組合物，其中該中藥組合物中所含淫羊藿以淫羊藿苷 計(jì)，不少于O. 085重量份。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的中藥組合物，其中，該中藥組合物被制為栓劑。
6. —種制備權(quán)利要求1所述的中藥組合物的方法，該方法包括以下步驟(1) 將30-34重量份的淫羊藿、15-19重量份的菟絲子、15-19重量份的韭菜子、13-16 重量份的蛇床子、9-12重量份的吳茱萸加水煎煮并過(guò)濾；(2) 將由步驟(1)得到的濾液濃縮至清膏；(3) 將2-4重量份的人參、2-4重量份的鹿茸、l-3重量份的蛤階、0. 6-0. 9重量份的山 柰與所述清膏混合。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中在步驟(3)中，在所述混合之前，將人參、鹿茸、蛤 蚧、山柰制成細(xì)粉。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中在步驟(3)中，在所述混合之后，將所得混合物進(jìn) 行干燥并制成最細(xì)粉。
9. 根據(jù)權(quán)利要求6-8中任一項(xiàng)所述的方法，該方法還包括(4) 將由步驟(3)得到的混合物與混合脂肪酸甘油酯混合；(5) 將由步驟(4)得到的混合物制成栓劑。
10. 權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的中藥組合物在制備用于治療急性肝損傷或慢性乙型 肝炎的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供一種治療肝病的中藥組合物及其制備方法和用途。本發(fā)明的中藥組合物是主要由按下列配比的下述中藥材制成的人參2-4重量份、鹿茸2-4重量份、淫羊藿30-34重量份、蛤蚧1-3重量份、菟絲子15-19重量份、韭菜子15-19重量份、蛇床子13-16重量份、吳茱萸9-12重量份、山柰0.6-0.9重量份。本發(fā)明的中藥組合物具有溫補(bǔ)脾腎、疏肝解郁的功效。本發(fā)明的中藥組合物可用于治療急性肝損傷及慢性乙型肝炎等病癥。
文檔編號(hào)A61K35/56GK101721598SQ20081016734
公開(kāi)日2010年6月9日 申請(qǐng)日期2008年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月22日
發(fā)明者陸擎天 申請(qǐng)人:維康力(國(guó)際)有限公司