專利名稱：一種烏苯美司脂肪乳注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種烏苯美司脂肪乳注射液及其制備方法，屬于醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
目前，征服癌癥的有效措施有手術(shù)、放療、化療等，但都有其局限性，如放療和化療普 遍存在殺傷健康紅白細胞、肝腎中毒、神經(jīng)系統(tǒng)受損等毒副作用。因此開發(fā)有效的抗癌藥物 成為世界各國醫(yī)藥界長期以來重點研究攻關(guān)的課題。在癌癥的第四種治療模式-生物療法受到 關(guān)注時，烏苯美司原料藥及膠囊(商品名百士欣)，在該領(lǐng)域取得了重大突破，作為生物反應 調(diào)節(jié)劑，烏苯美司具有療效確切、作用機制清楚、毒性極低、用藥方便的特點。
烏苯美司是從鏈霉菌屬的培養(yǎng)液中分離所得的化合物，可競爭性地抑制氨肽酶 B(aminopeptidase B)及亮氨酸肽酶(leucineaminopeptidase)，增強T細胞的功能，使NK細胞的 殺傷活力增強，且可使集落刺激因子合成增加而刺激骨髓細胞的再生及分化。烏苯美司具有 增強免疫的功能，是臨床上唯一的CD13拮抗劑，可全面阻擊多種腫瘤細胞的發(fā)生和發(fā)展， 從而抑制腫瘤轉(zhuǎn)移和復發(fā)，抑制腫瘤新生血管形成及腫瘤細胞增生，促進腫瘤細胞凋亡，可 配合化療、放療及聯(lián)合應用于白血病、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合癥及造血干細胞移 植后，以及其它實體瘤患者；以及肺癌、胃癌、鼻咽癌、肝癌、食道癌、腸癌、乳腺癌、黑 色素細胞瘤、膀胱癌、陰莖癌等其它實體瘤患者，各種因素引起的免疫功能低下，且能有效 改善患者的生活質(zhì)量。
然而對患腫瘤的病人進行化療和放療時，通常會引起消化系統(tǒng)不良反應是惡性腫瘤化療 時最常見的不良反應，主要表現(xiàn)為食欲減退、惡心、嘔吐、黏膜炎、腹痛和腹瀉等，這些不 良反應直接影響患者的生活質(zhì)量，妨礙化療的順利實施和藥物劑量的提高，嚴重時還會危及 生命。用一些抗腫瘤藥物進行配合治療時，化療造成的惡心嘔吐現(xiàn)象直接影響抗腫瘤藥物的 口服給藥效率，病人的順應性也很差。因此抗腫瘤藥物注射給藥很有必要，可提高病人的順 應性。
目前上市的烏苯美司產(chǎn)品僅有其膠囊劑(百士欣)，作為一種口服制劑，存在一定的局限
性，因為(1)藥物經(jīng)口吞服后，須經(jīng)過胃腸道內(nèi)溶化、崩解、溶出，吸收，然后隨血液循
環(huán)分布到全身，最后作用于病患部位而發(fā)揮治療作用，然而烏苯美司的水溶性很差，對于難 溶性的藥物，藥物的溶出速度很慢，吸收過程往往受到限制，雖然烏苯美司口服吸收良好， 但是化療時引起的消化系統(tǒng)不良反應增加了口服給藥的難度，惡心嘔吐現(xiàn)象使病人不愿直接口服藥物。(2)藥物易受食物影響，并需經(jīng)過胃的排空進入小腸后才被吸收，發(fā)揮作用較慢， 而消化道內(nèi)存在各種消化酶和腸道菌叢產(chǎn)生的酶，可使藥物尚未被吸收就發(fā)生代謝失去活性。 (3)烏苯美司還有一些胃腸道不良反應。
由上可知，開發(fā)烏苯美司及其合適的注射劑劑型是市場所需，將烏苯美司口服給藥改為
注射給藥其優(yōu)點有(1)作為注射劑，其藥效迅速，到臨床應用時將液體狀態(tài)直接注射入人
體的組織、血管或器官內(nèi)，吸收快，作用迅速。(2)注射給藥不經(jīng)胃腸道，故不受消化系統(tǒng) 及食物的影響，不經(jīng)過吸收直接入血，生物利用度高，作用可靠，藥效也易于控制。(3)對 于不能吞咽或處于昏迷狀態(tài)的病人，及患消化系統(tǒng)障礙的患者不能口服給藥，采用注射劑則 是有效的給藥途徑。
但是，烏苯美司本身水溶性很差，不易制成一般的注射劑，傳統(tǒng)的難溶性抗腫瘤藥物注 射劑方法通常采用復合溶媒、增溶劑等，但這會增加處方的刺激性或毒性。如目前常用的抗 腫瘤藥物紫杉醇適用于轉(zhuǎn)移性卵巢癌和乳腺癌，對肺癌也有較好的療效，但由于其幾乎不溶 于水(O. 006 pg/ml)，故現(xiàn)用于臨床的紫杉醇制劑多為采用聚氧乙基蓖麻油+乙醇各50%制成 的注射劑，該處方給藥數(shù)分鐘后，部分病人會出現(xiàn)藥物性皮疹、呼吸急促、支氣管痙攣、低 血壓等過敏反應，這主要是因處方中聚氧乙基蓖麻油和乙醇引起體內(nèi)組胺釋放所致。多西紫 杉醇水溶性也比較差,目前臨床上應用的唯一劑型是由40 mg/mL多西紫杉醇和1040 mg/mL Tween80組成的注射劑，臨用前用含乙醇為13%的專用溶劑復溶。由于Tween 80在體內(nèi)會產(chǎn) 生嚴重的變態(tài)反應，臨床上需預先服用抗組胺劑和糖皮質(zhì)激素，加之Tween 80會干擾DTX 與血清白蛋白以濃度依賴的形式結(jié)合，改變藥物的體內(nèi)行為，使其呈非線性藥物動力學。這 些給患者和醫(yī)生都造成了諸多的不便，增加了患者的痛苦和醫(yī)療成本。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)中難溶性抗腫瘤藥物注射制劑中增溶劑所帶來的毒副作用，本發(fā)明提供了 一種烏苯美司脂肪乳注射液，其不含吐溫-80和乙醇等增溶劑，無毒副作用，大大提高了其臨
床應用價值。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的
一種烏苯美司脂肪乳注射液，包括以下組分烏苯美司、注射用油、乳化劑、穩(wěn)定劑、 等滲調(diào)節(jié)劑和水，其中，各組分的濃度為烏苯美司0.05 10mg/ml，注射用油5 30g/ml， 乳化劑0.8 3.0g/ml，穩(wěn)定劑0.1 2.0g/ml，等滲調(diào)節(jié)劑2 3g/ml。
所述脂肪酸注射液還包括pH調(diào)節(jié)劑，其用于調(diào)節(jié)pH至5.0~9.0,其濃度不宜大于O.l g/ml。所述注射用油為長鏈甘油三酯或中鏈甘油三酯或兩者任意比例的混合物。
所述長鏈甘油三酯為大豆油、花生油、麻油、紅花油、棉子油、玉米油、藏紅花油、蓖 麻油、向日葵油、茶油或椰子油中的一種或任何兩種或兩種以后任意比例的混合物。
所述乳化劑為大豆磷脂、卵磷脂、合成磷脂、泊洛沙姆、甘油單油酸酯、普朗尼克F68 或聚氧乙烯蓖麻油中的一種或任幾種的混合物。
所述穩(wěn)定劑為油酸、油酸鈉、膽酸、膽酸鈉、甘膽酸鈉或膽固醇中的一種或任幾種的混 合物。
所述等滲調(diào)節(jié)劑為甘油、丙二醇、聚乙二醇、山梨醇、木糖醇、葡萄糖或氯化鈉中的一 種或任幾種的混合物。
所述pH調(diào)節(jié)劑為鹽酸、檸檬酸、氫氧化鈉、磷酸鹽或碳酸鹽中的一種。 一種烏苯美司脂肪乳注射液的制備方法，包括以下步驟-
1) 將注射用油和穩(wěn)定劑混合，攪拌均勻，制成油相；
2) 將乳化劑和等滲調(diào)節(jié)劑混合，加入適量水(以20倍體積為宜)，攪拌均勻，制成水相；
3) 將油相在攪拌下倒入水相中，高速剪切制成初乳；
4) 將烏苯美司加入到分散有乳化劑的水中，其中，乳化劑的體積分數(shù)為0.3% 0.8%, 高速剪切，得藥物混懸液；
5) 將藥物混懸液加入到初乳中，高速剪切，得載藥初乳，測pH，若pH〈5.0或pH〉9.0， 則用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)pH至5.0 9.0;
6) 將上述載藥初乳移入高壓乳勻機，勻化；
7) 過濾，灌裝于安瓿中，通氮，熔封，高壓滅菌，即得烏苯美司脂肪乳注射液。 所述高速剪切采用組織搗碎機進行。 所述采用高壓勻質(zhì)機進行高壓乳勻的次數(shù)為5 30次。 所述高壓滅菌為蒸氣消毒，溫度為100 12rC，時間為10 30min。 本發(fā)明將烏苯美司制成油與水能均勻混合的脂肪乳劑，經(jīng)檢測其質(zhì)量外觀均一，平均粒
徑在300nm左右，pH5.0 9.0,可供注射使用，制備方法簡單，所制得的烏苯美司脂肪乳注 射液具有顯著的抗腫瘤作用，根據(jù)一般脂肪乳劑特點，本發(fā)明的抗腫瘤藥物烏苯美司脂肪乳 劑還具有緩釋、靶向、為機體提供能量等作用。
本發(fā)明提供的注射用烏苯美司脂肪乳劑載藥量大，無毒副作用，其具有良好的穩(wěn)定性和 水溶性，克服了由于烏苯美司水溶性低的缺點。該乳劑制備工藝方法簡單易行，可適用于大 量制備和工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明的靜脈注射用脂肪乳劑是以長鏈甘油三酸酯或中鏈甘油三酸酯為油相，精制天然
卵磷脂為乳化劑，甘油為等滲劑，經(jīng)高壓均質(zhì)制成的o/w型乳劑。長期以來，脂肪乳劑主要
作為一種濃縮高能量腸外營養(yǎng)液用于臨床，為不能進食和嚴重缺乏營養(yǎng)的患者(如腫瘤患者) 提供熱能和必需脂肪酸，能完全被機體代謝與利用。大部分腫瘤患者在應用藥物同時需補充 營養(yǎng)，脂肪乳可為患者提供所需能量，因此將烏苯美司制成注射用脂肪乳在治療癌癥的同時 為患者提供一定的營養(yǎng)成分。
烏苯美司本身水溶性很差，不易制成一般的注射劑。在靜脈注射劑中改善藥物溶解問題
的方法主要有混合溶劑法、形成膠束與脂質(zhì)體、環(huán)糊精包合物和OAV型乳劑等，前3種方法 的主要缺點有溶劑毒性、輔料本身引發(fā)的不良反應(如環(huán)糊精引發(fā)脾腫大和共濟失調(diào))及高 昂的造價。0/W乳劑作為靜脈注射藥物載體具有增加藥物溶解度、降低不良反應、造價低、 可經(jīng)高壓滅菌和長期穩(wěn)定性較高等優(yōu)點。由于烏苯美司在長鏈甘油三酸酯或中鏈甘油三酸酯 中的溶解度很低，因此將烏苯美司開成發(fā)脂肪乳注射劑，可大大提高其臨床應用價值。
制備時將藥物加到一定量分散有大豆磷脂的水中，用組織搗碎機高速剪切之后，然后與 空白脂肪乳混合，然后在高壓勻質(zhì)的作用力下，使藥物從溶液中進入乳劑磷脂層，從而得到 載藥脂肪乳。該技術(shù)是一種借助高壓均質(zhì)技術(shù)、無需有機溶劑就能大幅增溶藥物的技術(shù)，基 本原理在于通過高速均質(zhì)作用加速藥物從溶液中進入乳劑磷脂層的分配過程，而使藥物增溶。
本發(fā)明的烏苯美司靜脈注射用脂肪乳劑不含有機溶劑，對血管剌激性較小；外水相中藥 物較少，從而減輕了刺激性反應，以及溶血、過敏副反應，增強患者的順應性；并具有靶向 作用，提高了藥效。此外，烏苯美司靜脈注射用脂肪乳性質(zhì)穩(wěn)定，可耐高壓滅菌操作。同時， 還具有以下優(yōu)勢①已具備擴大生產(chǎn)的條件和技術(shù)，更易實現(xiàn)產(chǎn)品化；②有長期臨床實踐經(jīng) 驗，易為臨床所接受；③穩(wěn)定性大大改進，無需苛刻的貯運條件，使用方便。


圖1為脂肪乳透射電鏡照片。
具體實施例方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明，但本發(fā)明并不局限在這些實施例中。
實施例l 一種烏苯美司脂肪乳劑，其組成為-
烏苯美司 100 mg
注射用大豆油 10 g
中鏈油 10 g
油酸 l.Og大豆磷脂 1.2 g
甘油 2.2 g
注射用水加至 100 ml 上述脂肪乳劑的制備方法如下
1) 將注射用大豆油和中鏈油和穩(wěn)定劑油酸混合，攪拌均勻，制成油相；
2) 將乳化劑大豆磷脂和等滲調(diào)節(jié)劑甘油混合，加適量水，攪拌均勻，制成水相；
3) 將油相在攪拌下倒入水相中，高速剪切制成初乳；
4) 將烏苯美司加到分散有乳化劑的水中，高速剪切，得藥物混懸液；
5) 將藥物混懸液加入到初乳中，高速剪切，得載藥初乳，觀ijpH，若pH".0或pH〉9.0， 則用氫氧化鈉調(diào)pH至5.0 9.0;加水至100ml;
6) 將上述載藥初乳移入高壓乳勻機，100 mpa乳勻20次；
7) 以0.45 pm微孔濾膜過濾，灌裝于安瓿中，通氮，熔封，高壓滅菌(12rC條件下滅 菌20min)，即得烏苯美司脂肪乳注射液，脂肪乳粒徑為240.0 nm。
實施例2—種烏苯美司脂肪乳劑，其組成為
烏苯美司 300 mg
注射用大豆油 10 g
中鏈油 10 g
油酸 l.Og
大豆磷脂' 1.2 g
甘油 2.2 g
注射用水加至 100 ml
制備方法同實施例l，高壓乳勻次數(shù)20次，得到的脂肪乳粒徑為228.4 nm。
實施例3 —種烏苯美司脂肪乳劑，其組成同實施例1,制備方法同實施例1,但pH調(diào) 節(jié)劑為碳酸氫鈉，且高壓乳勻次數(shù)為5次，得到的脂肪乳粒徑為285.6nm，如圖1所示。
實施例4 一種烏苯美司脂肪乳劑，其組成同實施例3，制備方法同實施例l，但高壓 乳勻次數(shù)為5次，得到的脂肪乳粒徑為280.0 nm。
實施例5 —種烏苯美司脂肪乳劑，由以下組分組成烏苯美司，花生油，卵磷脂，膽 酸，丙二醇和水；其中，各組分的濃度為烏苯美司0.05mg/ml，花生油20g/ml，卵磷脂0.8g/ml, 膽酸0.7g/ml，丙二醇2g/ml。
制備方法同實施例1 ，制得的脂肪乳粒徑為297.0 nm。實施例6 —種烏苯美司脂肪乳劑，由以下組分組成烏苯美司，麻油，泊洛沙姆，膽
固醇，聚乙二醇和水，其中，各組分的濃度為烏苯美司lmg/ml，麻油30g/ml，泊洛沙姆 3.0g/ml，膽固醇1.5g/ml，聚乙二醇3g/ml。
制備方法同實施例1，制得的脂肪乳粒徑為340.0 nm。
實施例7—種烏苯美司脂肪乳劑，由以下組分組成烏苯美司，紅花油，甘油單油酸 酯，油酸鈉，山梨醇和水，其中，各組分的濃度為烏苯美司3mg/ml，紅花油5g/ml，甘油 單油酸酯1.0g/ml，油酸鈉1.0g/ml，山梨醇2.5g/ml。
制備方法同實施例1,制得的脂肪乳粒徑為313.3 nm。
實施例8 —種烏苯美司脂肪乳劑，由以下組分組成烏苯美司，棉子油，普朗尼克F68， 膽酸鈉，木糖醇和水，其中，各組分的濃度為烏苯美司5mg/ml，棉子油15g/ml，普朗尼克 F68 2.0g/ml，膽酸鈉0.5g/ml，木糖醇2.3g/ml。
制備方法同實施例1，制得的脂肪乳粒徑為293.4 nm。
實施例9一種烏苯美司脂肪乳劑，由以下組分組成烏苯美司，玉米油，聚氧乙烯蓖 麻油，甘膽酸鈉，葡萄糖和水，其中，各組分的濃度為烏苯美司7mg/ml，玉米油10g/ml， 聚氧乙烯蓖麻油1.5g/ml，甘膽酸鈉2.0g/ml，葡萄糖2.8g/ml。
制備方法同實施例1 ，制得的脂肪乳粒徑為268.2 nm。
實施例IO —種烏苯美司脂肪乳劑，由以下組分組成烏苯美司，向日葵油，卵磷脂， 膽固醇，氯化鈉和水，其中，各組分的濃度為烏苯美司10mg/ml，向日葵油25g/ml，卵磷 月旨2.5g/ml，膽固醇0.1g/ml，氯化鈉3g/ml。
制備方法同實施例1，制得的脂肪乳粒徑為389.9nm。
將制備的脂肪乳劑置具塞離心管中，4000卬m離心20min后，未見分層，也未見藥物結(jié) 晶析出。將制備的脂肪乳劑置安瓿中于121'C高壓滅菌前后，藥物成分未見降解。結(jié)論本 發(fā)明的烏苯美司脂肪乳劑較穩(wěn)定。
權(quán)利要求
1.一種烏苯美司脂肪乳注射液，其特征在于，包括以下組分烏苯美司，注射用油，乳化劑，穩(wěn)定劑，等滲調(diào)節(jié)劑和水，其中，各組分的濃度為烏苯美司0.05～10mg/ml，注射用油5～30g/ml，乳化劑0.8～3.0g/ml，穩(wěn)定劑0.1～2.0g/ml，等滲調(diào)節(jié)劑2～3g/ml。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種烏苯美司脂肪乳注射液，其特征在于還包括pH調(diào)節(jié)劑，其 用于調(diào)節(jié)pH至5.0 9.0。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種烏苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述注射用油為長鏈甘 油三酯或中鏈甘油三酯或兩者任意比例的混合物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種烏苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述長鏈甘油三酯為大豆油、花生油、麻油、紅花油、棉子油、玉米油、藏紅花油、蓖麻油、向日葵油、茶油或 椰子油中的一種或任何兩種或兩種以后任意比例的混合物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種烏苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述乳化劑為大豆磷脂、 卵磷脂、合成磷脂、泊洛沙姆、甘油單油酸酯、普朗尼克F68、或聚氧乙烯蓖麻油中的一 種或任幾種的混合物。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種烏苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述穩(wěn)定劑為油酸、油酸鈉、膽酸、膽酸鈉、甘膽酸鈉或膽固醇中的一種或任幾種的混合物。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種烏苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述等滲調(diào)節(jié)劑為甘油、丙二醇、聚乙二醇、山梨醇、木糖醇、葡萄糖或氯化鈉中的一種或任幾種的混合物。
8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種烏苯美司脂肪乳注射液，其特征在于所述pH調(diào)節(jié)劑為鹽酸、檸檬酸、氫氧化鈉、磷酸鹽或碳酸鹽中的一種。
9. 權(quán)利要求1所述的一種烏苯美司脂肪乳注射液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟-1) 將注射用油和穩(wěn)定劑混合，攪拌均勻，制成油相；2) 將乳化劑和等滲調(diào)節(jié)劑混合，加水，攪拌均勻，制成水相；3) 將油相在攪拌下倒入水相中，高速剪切制成初乳；4) 將烏苯美司加到分散有乳化劑的水中，高速剪切，得藥物混懸液；5) 將藥物混懸液加入到初乳中，高速剪切，得載藥初乳，測pH，若pH〈5.0或pH〉9.0， 則用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)pH至S.0 9.0;6) 將上述載藥初乳移入高壓乳勻機，勻化；7) 過濾，灌裝于安瓿中，通氮，熔封，高壓滅菌，即得烏苯美司脂肪乳注射液。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于:.所述步驟4)中，分散有乳化劑的水中乳 化劑的體積分數(shù)為0.3% 0.8%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種烏苯美司脂肪乳注射液，包括以下組分烏苯美司、注射用油、乳化劑、穩(wěn)定劑、等滲調(diào)節(jié)劑和水，其中，各組分的濃度為烏苯美司0.05～10g/ml，注射用油5～30g/ml，乳化劑0.8～3.0g/ml，穩(wěn)定劑0.1～2.0g/ml，等滲調(diào)節(jié)劑2～3g/ml。本發(fā)明的脂肪乳劑，經(jīng)檢測其質(zhì)量外觀均一，平均粒徑在300nm左右，pH5.0～9.0，可供注射使用。烏苯美司脂肪乳注射液具有顯著的抗腫瘤作用，根據(jù)一般脂肪乳劑特點，本發(fā)明的抗腫瘤藥物烏苯美司脂肪乳劑還具有緩釋、靶向、為機體提供能量等作用。
文檔編號A61K9/107GK101601649SQ20091001730
公開日2009年12月16日 申請日期2009年7月20日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月20日
發(fā)明者劉東華, 孫曉利, 娜 張, 徐文方 申請人:山東大學