專利名稱：3-芳基香豆素衍生物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及香豆素衍生物，特別涉及3-芳基香豆素衍生物及其制備方 法和用途。
背景技術(shù)：
香豆素(Coumarin， 2H-1-苯并吡喃-2-酮，結(jié)構(gòu)如式1所示)是一類天 然產(chǎn)物的基本結(jié)構(gòu)，廣泛存在于自然界中。研究表明，香豆素類化合物具有 明顯的生理活性，如抗腫瘤、抗HIV、抗真菌、抗血管硬化、抗氧化、增強 人體免疫力等(華西藥學(xué)雜志，2001， 16 (4): 285-288;合成化學(xué)，2003， 12 (4): 340-347)。香豆素類化合物不僅能直接抑制癌細胞，而且可以通 過增強機體免役力產(chǎn)生抗癌作用。
天然二苯乙烯(結(jié)構(gòu)如式1所示)是一類具有高生理活性的化合物，在 自然界中以順式和反式兩種立體構(gòu)型存在，其中反式二苯乙烯類代表化合物 有白藜戸醇、紫檀芪、氧化白藜蘆醇等。白藜蘆醇具有防癌抗癌、抗血栓、 降血脂、抗氧化、抗自由基、抗炎等多種有益作用(The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2005， 37:1709 - 1726; J Med Chem, 2003, 46: 3546-3554 ; Nature' 2003， 425:191-196; Nature, 2006， 444: 337-342);紫檀芪藥理作用除與白藜蘆醇有部分相似之外，還具有較強的 抗真菌活性、抗腫瘤活性、降血脂及PPARa激動活性等(J Agric Food Chem. 2005， 53， 3403-3407);氧化白藜蘆醇是一種很好的酪氨酸激酶抑制 劑，還具有抗HIV、抗炎、抗氧化、抗凋亡和神經(jīng)保護作用。
異黃酮(isoflavone，結(jié)構(gòu)如式1所示)是一類具有06-(:3-(:6基本母核 的天然產(chǎn)物，由A、 B、 C三部分組成，A和B為取代的苯環(huán)，C環(huán)是a， p—不飽和的羰基六元環(huán)，與A環(huán)形成一個苯并大吡喃酮環(huán)。異黃酮類化合 物可用于多種疾病包括腫瘤、心血管系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病和骨質(zhì)疏松 癥等的預(yù)防和治療；還與黃酮類化合物有相似的生物活性，具有雌激素作用 和很強的殺菌作用；在抗糖尿病、抗癌、抗氧化和抗炎等方面也具有很好的 活性。3-芳基香豆素 反式二苯乙烯 異黃酮
式1
本發(fā)明涉及的3-芳基香豆素衍生物是在對二苯乙烯和香豆素類化合物 的結(jié)構(gòu)修飾基礎(chǔ)上得到。從結(jié)構(gòu)上看，該類化合物是反式二苯乙烯和香豆素 的拼合物，也可看成是異黃酮類化合物的同分異構(gòu)體。鑒于反式二苯乙烯、 香豆素、異黃酮類化合物均具有廣泛而重要的藥理活性，本發(fā)明所涉及的 3-芳基香豆素類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與反式二苯乙烯類衍生物、香豆素類衍生 物及異黃酮類化合物具有高度的相似性。將幾種活性分子有機的拼合于一個 分子結(jié)構(gòu)中，符合現(xiàn)代藥物設(shè)計的原理和方法。因此，3-芳基香豆素衍生物 的生物活性可能與上述幾類化合物具有高度相關(guān)性，非常值得關(guān)注。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點，提供兩類3-芳基香豆 素衍生物。
本發(fā)明的另一 目的在于提供上述兩類3-芳基香豆素衍生物的制備方法。 本發(fā)明的再一 目的在于提供上述兩類3-芳基香豆素衍生物在制備抗腫 瘤、抗血管異常增生、抗氧化、抗衰老、降血糖的藥物方面的用途。 本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn) 一類3-芳基香豆素衍生物，其結(jié)構(gòu)用下述式2表示
<formula>formula see original document page 5</formula>
式2
式2中，Ri R2、 R3、 R4、 R5、 Rs為H、 OCH3或OAc，且至少有一 個為OAc。另一類3-芳基香豆素衍生物，其結(jié)構(gòu)用下述式3表示
<formula>formula see original document page 6</formula>式3
式3中，F(xiàn)^、 R2、 R3、 R4、 R5、 Re為H、 0013或OH，且至少有一 個為OH，或其藥學(xué)上可接受的鹽。
上述3-芳基香豆素衍生物的制備方法，包括下述步驟
(1) 以取代苯乙酸(結(jié)構(gòu)式4)和取代2-羥基苯甲醛(結(jié)構(gòu)式5)為 原料，在三乙胺和乙酸酐存在條件下加熱，發(fā)生Perkin縮合和關(guān)環(huán)反應(yīng)， 反應(yīng)溫度為100~140°C，反應(yīng)時間為5 12小時，然后分離純化，得到結(jié)構(gòu) 為式2的3-芳基香豆素衍生物；
(2) 在弱堿性條件下，將步驟1制備得到的結(jié)構(gòu)為式2的3-芳基香豆 素衍生物水解脫去乙酰基，然后分離純化，得到結(jié)構(gòu)為式3的3-芳基香豆 素衍生物。
步驟1中，取代苯乙酸與取代2-羥基苯甲醛的摩爾比為1: 1 1.2;取
代苯乙酸與三乙胺的摩爾比為1: 2 3;三乙胺與乙酸酐的摩爾比為1: 1 4。
步驟1中，所述分離純化是將反應(yīng)物倒入水中攪拌，析出固體，然后靜 置抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，將濾餅晾干后再用有機溶劑重結(jié)晶。步驟
1的產(chǎn)率為50% 85%。
步驟2中，所述弱堿性條件為K2C03、 CH30H和H20組成的體系。 步驟2中，所述步驟1制備得到的結(jié)構(gòu)為式2的3-芳基香豆素衍生物
<2〇03的摩爾比為1: 2~4; CH3OH: H20的體積比為1: 1 2;結(jié)構(gòu)為式
2的3-芳基香豆素衍生物CH30H的體積比1: 10 12。 步驟2中，在水解反應(yīng)時進行攪拌，反應(yīng)5 8小時。 步驟2中，所述分離純化是將反應(yīng)物倒入冰水中，在攪拌下加濃鹽酸酸
化，析出固體，然后靜置抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，將濾餅晾干后再用
有機溶劑重結(jié)晶。步驟2的產(chǎn)率為90% 98%。本發(fā)明的合成路線如下:
<formula>formula see original document page 7</formula>
一種藥物組合物，其活性組分是結(jié)構(gòu)式2或結(jié)構(gòu)式3所述的3-芳基香 豆素衍生物，還含有一種或多種惰性無毒可藥用載體。
本發(fā)明的3-芳基香豆素衍生物可用于制備抗腫瘤、抗血管異常增生、 抗氧化、抗衰老、降血糖的藥物。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點和效果
(1) 提供了兩類兼具反式二苯乙烯、香豆素及異黃酮結(jié)構(gòu)特征的新的
結(jié)構(gòu)類型；這兩類3-芳基香豆素結(jié)構(gòu)類型的化合物具有與反式二苯乙烯、 香豆素及異黃酮相關(guān)的生物活性；
(2) 提供了兩類3-芳基香豆素類化合物的合成方法，具有收率較高、 操作簡便等優(yōu)點。
具體實施例方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不 限于此。
實施例1
(1) 3-(3'，4', 5'-三甲氧基苯基)-7-甲氧基-8-乙酰氧基香豆素的制備 在裝有溫度計、回流冷凝管的50ml三口瓶中加入3， 4， 5—三甲氧基 苯乙酸2.26g(10mmo1)， 2, 3-二羥基~4-甲氧基苯甲醛1.68g(10mmo1)，三 乙胺2.53g(25mmo1),乙酸酐5.10g(50mmo1),在120。C下攪拌6h, TLC
監(jiān)測反應(yīng)進程，反應(yīng)停止后，將反應(yīng)液倒入水中攪拌，析出大量固體，靜置后抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，濾餅晾干后有機溶劑重結(jié)晶即得3-(3'，4'， 5'-三甲氧基苯基)-7-甲氧基-8-乙酰氧基香豆素純品3.40g，產(chǎn)率85%。
1HNMR (400MHz, CDCI3): 5:7.71 (s， 1H， 4畫H), 7.38 (d， 1H， J=8,8Hz, 5-H)， 6.92 (d， 1H， J=8.8Hz， 6-H), 6.86 (s, 2H， 2'，6'國ArH)， 3.92 (s， 3H, 7-OCH3)， 3.89 (s, 6H， 3',5'-OCH3), 3.87 (s， 3H, 4'-OCH3), 2.42 (s, 3H, OAc); Ms, m/Z: 400(M+), 358(M畫Ac)， 343(M-Ac-CH3).
(2) 3-(3'， 4', 5'-三甲氧基苯基)-7-甲氧基-8-羥基香豆素的制備
在裝有溫度計、回流冷凝管的50ml三口瓶中加入3-(3'，4'， 5'-三甲氧基 苯基)-7-甲氧基-8-乙酰氧基香豆素0.50g(1.25mmo1) ， K2C03 0.79g(5mmo1)，水10mL,甲醇5mL，室溫攪拌5h，反應(yīng)完全后，將反應(yīng) 液倒入大量冰水中，攪拌下加濃鹽酸酸化，析出大量固體，靜置一段時間后 抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，濾餅晾干后有機溶劑重結(jié)晶即得3-(3', 4', 5'-三甲氧基苯基)-7-甲氧基-8-羥基香豆素純品0.40g，去乙?；a(chǎn)率為90%。
1HNMR (400MHz, CDCI3): 5:7.71 (s, 1H, 4國H)， 7.06 (d， 1H, J=8.8Hz， 5國H)， 6.89 (s， 2H' 2',6'國ArH)， 6.87 (d, 1H， J=8.8Hz， 6-H)， 3.99 (s, 3H， 7-OCH3)， 3.90 (s， 6H， 3',5'-OCH3), 3.87 (s， 3H, 4'-OCH3); m/Z: 358(M+)， 343(M-CH3).
實施例2
(1) 3-(3'， 4'， 5'-三甲氧基苯基)-7-甲氧基-8-乙酰氧基香豆素的制備 在裝有溫度計、回流冷凝管的50ml三口瓶中加入3， 4， 5—三甲氧基
苯乙酸2.26g(10mmo1)， 2， 3-二羥基~4-甲氧基苯甲醛1.68g(10mmo1),三 乙胺2.53g(25mmo1)，乙酸酐6.12g(60mmo1)，在140。C下攪拌5h, TLC
監(jiān)測反應(yīng)進程，反應(yīng)停止后，將反應(yīng)液倒入水中攪拌，析出大量固體，靜置 一段時間后抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，濾餅晾干后有機溶劑重結(jié)晶即得 3-(3'， 4'， 5'-三甲氧基苯基)-7-甲氧基-8-乙酰氧基香豆素純品3.28g，產(chǎn)率 82%。
(2) 3-(3',4'， 5'-三甲氧基苯基)-7-甲氧基-8-羥基香豆素的制備 在裝有溫度計、回流冷凝管的50ml三口瓶中加入3-(3'， 4', 5'-三甲氧基
苯基)-7-甲氧基-8-乙酰氧基香豆素0.50g(1.25mmo1) , K2C03 0.345g(2.5mmo1)，水10 mL，甲醇6mL，室溫攪拌5h，反應(yīng)完全后，將 反應(yīng)液倒入大量冰水中，攪拌下加濃鹽酸酸化，析出大量固體，靜置一段時
8間后抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，濾餅晾干后有機溶劑重結(jié)晶即得3-(3'， 4'， 5'-三甲氧基苯基)-7-甲氧基-8-羥基香豆素純品0.42g，產(chǎn)率為93%。
實施例3
3-(3'，4'，5'-三甲氧基苯基)-7-乙酰氧基香豆素的制備
在裝有溫度計、回流冷凝管的50ml三口瓶中加入3， 4， 5—三甲氧基 苯乙酸2.26g(10mmo1)， 2， 4-二羥基苯甲醛1.38g(10mmo1)，三乙胺 2.53g(25mmo1)，乙酸酐10.2g(100mmo1)，在140。C下攪拌5h， TLC監(jiān)測 反應(yīng)進程，反應(yīng)停止后，將反應(yīng)液倒入水中攪拌，析出大量固體，靜置一段 時間后抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，濾餅晾干后有機溶劑重結(jié)晶即得 3-(3'，4'，5'-三甲氧基苯基)-7-乙酰氧基香豆素純品3.00g，產(chǎn)率81%。
1HNMR (400MHz， CDCI3): 5:7.76 (s， 1H， 4-H)， 7.53 (d， 1H， J=8.4Hz， 5國H)， 7.14(d， 1H， J=2.0Hz, 8國H)， 7.05 (dd， 1H，山8.4Hz， J2=2.0Hz, 6畫H)， 6.91 (s， 2H， 2，，6'墨ArH)' 3.91 (s， 6H, 3，'5'-OCH3), 3.88 (s, 3H, 4'-OCH3)， 2.33(s， 3H， 7-OAc); Ms， m/Z: 370(M+)， 328(M畫Ac)' 313(M-Ac-CH3). (2) 3-(3'，4',5'-三甲氧基苯基)-7-羥基香豆素的制備
在裝有溫度計、回流冷凝管的50ml三口瓶中加入3-(3',4'，5'-三甲氧基 苯基)-7-乙酰氧基香豆素0.46g(1.25mmo1)， K2CO30.46g(3.3mmol)，水10 mL，甲醇5mL，室溫攪拌5h，反應(yīng)完全后，將反應(yīng)液倒入大量冰水中，攪 拌下加濃鹽酸酸化，析出大量固體，靜置一段時間后抽濾，水洗濾餅至濾液 近中性，濾餅晾干后有機溶劑重結(jié)晶即得3-(3'，4'，5'-三甲氧基苯基)-7-羥基 香豆素純品0.37g，產(chǎn)率為90%。
1HNMR (400MHz' CDCI3): 5:7.73 (s， 1H， 4畫H)' 7.41 (d， 1H' J=8.4Hz， 5-H)， 6.89 (s， 2H， 2'，6'畫ArH)， 6,88(d， 1H, J=2.0Hz， 8-H)， 6.81 (dd， 1H， 山-8.4Hz， J2=2.0Hz, 6-H)， 3.89 (s, 6H, 3'，5'-OCH3), 3.87 (s, 3H， 4'-OCH3); Ms， m/Z: 328 (M+)， 313 (M-CH3).
實施例4
(1) 3-(3',4'，5'-三甲氧基苯基)-7-乙酰氧基香豆素的制備 在裝有溫度計、回流冷凝管的50ml三口瓶中加入3， 4， 5—三甲氧基 苯乙酸2.26g(10mmo1)， 2， 4-二羥基苯甲醛1.38g(10mmo1)，三乙胺 3夠(30mmo1)，乙酸酐5,10g(50mmo1)，在120。C下攪拌6h， TLC監(jiān)測反
9應(yīng)進程，反應(yīng)停止后，將反應(yīng)液倒入水中攪拌，析出大量固體，靜置一段時 間后抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，濾餅晾干后有機溶劑重結(jié)晶即得
3-(3'，4',5'-三甲氧基苯基)-7-乙酰氧基香豆素純品2.88g，產(chǎn)率78%。 (2) 3-(3',4'，5'-三甲氧基苯基)-7-羥基香豆素的制備 在裝有溫度計、回流冷凝管的50ml三口瓶中加入3-(3',4'，5'-三甲氧基 苯基)-7-乙酰氧基香豆素0.46g(1.25mmo1)， K2CO3 0.345g(2.5mmol)配制的 50%水溶液，甲醇10mL，室溫攪拌5h，反應(yīng)完全后，將反應(yīng)液倒入大量冰 水中，攪拌下加濃鹽酸酸化，析出大量固體，靜置一段時間后抽濾，水洗濾 餅至濾液近中性，濾餅晾干后有機溶劑重結(jié)晶即得3-(3'，4'，5'-三甲氧基苯 基)-7-羥基香豆素純品0.38g，產(chǎn)率為93%。
實施例5
3-(4'-乙酰氧基苯基)-7-甲氧基-8-乙酰氧基香豆素的制備 在裝有溫度計、回流冷凝管的50ml三口瓶中加入4一羥基苯乙酸 1.52g(10mmo1)， 2， 3-二羥基-4-甲氧基苯甲醛2.02g(12mmo1)，三乙胺 2.53g(25mmo1)，乙酸酐3.06g(30mmo1)，在100。C下攪拌12h， TLC監(jiān)測 反應(yīng)進程，反應(yīng)停止后，將反應(yīng)液倒入水中攪拌，析出大量固體，靜置一段 時間后抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，濾餅晾干后有機溶劑重結(jié)晶即得3-(4'-乙酰氧基苯基)-7-甲氧基-8-乙酰氧基香豆素純品1.84g，產(chǎn)率50%。
1HNMR (400MHz， CDCI3): 5:7.70 (s， 1H， 4國H)， 7.65 (d， 2H， J=8.4Hz， 2'，6'-ArH), 7.34(d， 1H， J=8.8Hz， 5畫H), 7.13(d， 1H， J=8.4Hz， 3'，5'-ArH)， 6.90(d， 1H， J=8.4Hz， 6畫H), 3.88(s, 3H, 7-OCH3) 2.41 (s， 3H， 8-OAc)， 2.30(s, 3H， 4'-OAc); Ms， m/Z: 368(M+), 326(M-Ac)， 312(M-Ac-CH3).
實施例6
3-(4'-乙酰氧基苯基)-7， 8-二乙酰氧基香豆素的制備
在裝有溫度計、回流冷凝管的50ml三口瓶中加入4一羥基苯乙酸 1.52g(10mmo1)， 2, 3， 4-三羥基苯甲醛1.54g(10mmo1)，三乙胺 4.05g(40mmo1)，乙酸酐7.14g(70mmo1)，在115。C下攪拌9h, TLC監(jiān)測反
應(yīng)進程，反應(yīng)停止后，將反應(yīng)液倒入水中攪拌，析出大量固體，靜置一段時 間后抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，濾餅晾干后有機溶劑重結(jié)晶即得3-(4'-乙酰氧基苯基)-7， 8-二乙酰氧基香豆素純品2.57g，產(chǎn)率65%。，HNMR (400MHz， CDCI3): 5:7.75 (s, 1H， 4-H), 7.67 (dd' 2H， 山8.8Hz, J2=2.0Hz， 2'，6'國ArH), 7.50(d， 1H, J=8.4Hz， 5-H)， 7.15(dd, 1H， 山8.4Hz， J2=2.0Hz， 3'，5'國ArH)， 7.12(d， 1H' J=8,4Hz， 6-H)， 2.40(s, 3H， 4'-OAc) 2.32(s, 3H, 8-OAc)， 2.30(s， 3H， 7國OAc); Ms， m/Z: 396(M+)， 354(M畫Ac)， 312(M-2Ac)， 270(M國3Ac).
實施例7
3-(4'-甲氧基苯基)-7-乙酰氧基香豆素的制備
在裝有溫度計、回流冷凝管的50ml三口瓶中加入4一甲氧基苯乙酸 1.66g(10mmo1) ， 2， 4-二羥基苯甲醛 1.38g(10mmo1)，三乙胺 2.53g(25mmo1)，乙酸酐8.16g(80mmo1)，在130。C下攪拌6h， TLC監(jiān)測反 應(yīng)進程，反應(yīng)停止后，將反應(yīng)液倒入水中攪拌，析出大量固體，靜置一段時 間后抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，濾餅晾干后有機溶劑重結(jié)晶即得3-(4'-甲氧基苯基)-7-乙酰氧基香豆素純品2.17g，產(chǎn)率70%。
1HNMR (400MHz, CDCI3): 5:7.72 (s， 1H, 4-H)， 7.64 (dd， 2H， 山8.8Hz, J2=2.0Hz， 2'，6'-ArH), 7.50(d, 1H, J=8.4Hz， 5國H)， 7.11(d， 1H, J=2.0Hz， 8畫H)， 7.04(dd， 1H， J^8.4Hz， J2=2.0Hz， 6畫H)， 6.95 (dd, 2H, 山8.8Hz， J2=2.0Hz, 3'，5'陽ArH), 3.83 (s' 3H， 4'-OCH3)， 2.33(s' 3H, 7國OAc); Ms， m/Z: 310(M+)' 268(M畫Ac), 253(M-Ac-CH3).
實施例8:抗腫瘤活性測試
體外抗腫瘤細胞增殖活性篩選一體外噻唑藍法(MTT) 取處于對數(shù)生長期的5-8F人鼻咽癌、HepG2人肝癌細胞、SGC7901 人胃癌、SW480人結(jié)腸癌、HL-60人急性早幼粒白血病細胞。分別制備為 細胞懸液，細胞密度約2x105/ml，加入96孔板中，每孔細胞數(shù)約2000。 待細胞貼壁后，將3-(3',4'，5'-三甲氧基苯基)-7-乙酰氧基香豆素和3-(3'，4',5'-三甲氧基苯基)-7-甲氧基-8-乙酰氧基香豆素按終濃度倍比稀釋加入各組中， 每組4個平行孔，設(shè)定0.1%二甲亞砜為溶劑對照。加藥后置于37°C、5%C02 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72小時。
實驗終止前4小時每孔加入20pl的5mg/ml的MTT溶液，再培養(yǎng)4小 時，測定前徹底去培養(yǎng)液部分，每孔加入200iJl二甲亞砜，常溫下振蕩10min， 待生成的紫色結(jié)晶完全溶解后，用酶標(biāo)儀在570nm/630nm雙波長測定每孔
iiOD值。數(shù)值運用下式計算，求出細胞增殖抑制率(IR)IR-1-OD「/ODc(ODc:
對照組OD值；ODr:用藥組OD值)，再計算IC5C)，結(jié)果用^土SD表示(表 1)。
表1部分3-芳基香豆素衍生物細胞增殖抑制活性
細胞株(IC5。 ， nM) ~" ^ HepG2^SW480 HL-60
123.7±36.5 67.6±0.9 >200 161.6±3.1 72.8±3.0
66.9±10.9 70.7±6.1 137.2±14.5 111.7±21.9 66.2±3.4
腫瘤細胞增殖抑制實驗表明，本發(fā)明所涉及的化合物具有明顯的細胞增 殖抑制作用。
實施 例9:抗氧化活性測試
準(zhǔn)確稱取二苯基苦味肼基自由基[DPPHJ 2.5mg，用甲醇定容到 100mL，配制成質(zhì)量濃度為2.5X10^mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，置冰箱保存?zhèn)溆谩?分別取0、 2、 4、 6、 8、 10mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，用甲醇定容至10mL，最終濃度 分別為0、 5、 10、 15、 20、 25|jg/mL。測定上述標(biāo)準(zhǔn)溶液在515nm波長 的吸光度，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
分別取適量的3-(3',4',5'-三甲氧基苯基)-7-羥基香豆素和3-(3',4',5'-三 甲氧基苯基)-7-甲氧基-8-羥基香豆素，以維生素C和蘆丁作對照樣。以甲醇 為溶劑，配制不同濃度的溶液，分別取0.1mL樣液，加入3.9mL質(zhì)量濃度 為25mg/L[DPPHJ標(biāo)準(zhǔn)液，以甲醇替代樣液為空白。將混合液搖勻，用比 色皿，在515nm波長處，測定其在不同時間的吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線換 算成[DPPH']的質(zhì)量濃度，計算[DPPH殘留率。[DPPH']rem= [DPPH-]t /[DPPH']t=0 "00% ([DPPH']t為自由基清除過程中某一時刻DPPH'的質(zhì)量 濃度，[DPP阡]t-o為DPPH'的原始質(zhì)量濃度)。根據(jù)抗氧化劑添加量與 DPPH竭留率，繪制關(guān)系曲線，經(jīng)回歸分析后，計算出抗氧化劑的半抑制量
化合物
OCH3EC50，進而計算出抗氧化劑清除自由基的能力AEM/EC5o(表2》
表2部分3-芳基香豆素的抗氧化活性
抗氧化劑
半抑制量 (g/Kg)
清除能力 添加量 殘留率達到穩(wěn)定 AE(g/Kg) 的時間/min
h3co.
h3co'
h3co.
h3co.
130 0.77X10-2 26 200
0.5 1.2(中速抗
140 0.71X102 28 210
och3
vc
蘆丁
110
170
0.91X10—2 30~240
0.59x10-2 50~400
0.5 1.5(中速抗
氧化)
0.5~1(快速抗氧 化)
2~3 (慢速抗氧 化)
抗氧化活性測試實驗表明，本發(fā)明所涉及的化合物具有明顯的抗氧化作用。
實施例10:藥物組合物
制備每片含有10mg活性組分的100片片劑的配方:
3-(3，,4，，5，-三甲氧基苯基)-7-甲氧基-8-羥基香豆素...........................1.0g
羥丙基纖維素........................................................................0.2g
小麥淀粉..............................................................................1.0g
錯....................................................................................夠
硬脂酸鎂..............................................................................0.3g
滑石粉.................................................................................0.3g
1權(quán)利要求
1、一種3-芳基香豆素衍生物，其結(jié)構(gòu)式為式中，R1、R2、R3、R4、R5、R6為H、OCH3或OAc，且至少有一個為OAc。
2、 一種3-芳基香豆素衍生物，其結(jié)構(gòu)式為:<formula>formula see original document page 2</formula>式中，R、 R2、 R3、 R4、 R5、 Re為H、 OCH3或OAc，且至少有一個式中，R" R2、 R3、 R4、 R5、 Re為H、 OCH3或OH，且至少有一個為 OH，或其藥學(xué)上可接受的鹽。
3、 一種權(quán)利要求1或2所述的3-芳基香豆素衍生物的制備方法，其特 征在于包括下述步驟(1) 以取代苯乙酸和取代2-羥基苯甲醛為原料，在三乙胺和乙酸酐存 在條件下加熱，發(fā)生Perkin縮合和關(guān)環(huán)反應(yīng)，反應(yīng)溫度為100~140°C，反 應(yīng)時間為5 12小時，然后分離純化，得到權(quán)利要求1所述的3-芳基香豆素 衍生物；(2) 在弱堿性條件下，將步驟1制備得到的權(quán)利要求1所述的3-芳基 香豆素衍生物水解脫去乙?；缓蠓蛛x純化，得到權(quán)利要求2所述的3-芳基香豆素衍生物。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的3-芳基香豆素衍生物的制備方法，其特征在于步驟1中，取代苯乙酸與取代2-羥基苯甲醛的摩爾比為1: 1 1.2;取 代苯乙酸與三乙胺的摩爾比為1: 2 3;三乙胺與乙酸酐的摩爾比為1: 1
5、根據(jù)權(quán)利要求3所述的3-芳基香豆素衍生物的制備方法，其特征在為OACo于步驟1中，所述分離純化是將反應(yīng)物倒入水中攪拌，析出固體，然后靜 置抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，將濾餅晾干后再用有機溶劑重結(jié)晶。
6、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的3-芳基香豆素衍生物的制備方法，其特征在 于步驟2中，所述弱堿性條件為K2C03、 CH3OH和H20組成的體系。
7、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的3-芳基香豆素衍生物的制備方法，其特征在 于步驟2中，所述步驟1制備得到的權(quán)利要求1所述的3-芳基香豆素衍生物K2C03的摩爾比為1: 2~4; CH3OH: 1~120的體積比為1: 1 2;所述步驟1制備得到的權(quán)利要求1所述的3-芳基香豆素質(zhì)量CH3OH的體積比1: 10 12。
8、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的3-芳基香豆素衍生物的制備方法，其特征在于步驟2中，所述分離純化是將反應(yīng)物倒入冰水中，在攪拌下加濃鹽酸酸化，析出固體，然后靜置抽濾，水洗濾餅至濾液近中性，將濾餅晾干后再用 有機溶劑重結(jié)晶。
9、 一種藥物組合物，其特征在于活性組分是權(quán)利要求1或2所述的3-芳基香豆素衍生物，還含有一種或多種惰性無毒可藥用載體。
10、 一種權(quán)利要求1或2所述的3-芳基香豆素衍生物的用途，其特征在于在制備抗腫瘤、抗血管異常增生、抗氧化、抗衰老、降血糖的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了兩類3-芳基香豆素衍生物及其制備方法和用途，以取代苯乙酸和取代2-羥基苯甲醛為原料，在三乙胺和乙酸酐存在條件下加熱，發(fā)生Perkin縮合和關(guān)環(huán)反應(yīng)，得到一類含乙酰氧基的3-芳基香豆素衍生物；然后在堿性條件水解，可以進一步得到另一類含酚羥基的3-芳基香豆素衍生物。這兩類3-芳基香豆素衍生物可用于制備抗腫瘤、抗血管異常增生、抗氧化、抗衰老、降血糖的藥物。
文檔編號A61P3/00GK101519394SQ20091003824
公開日2009年9月2日 申請日期2009年3月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月27日
發(fā)明者孫洪宜, 肖春芬, 永 鄒, 文 魏 申請人:中國科學(xué)院廣州化學(xué)研究所