專利名稱：：一種絞股藍皂苷的制備方法一種絞股藍皂苷的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及絞股藍皂苷
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體地說，是一種絞股藍皂苷的制備方法。
背景技術(shù)：
：絞股藍(C^"ostemma;e"tap/^〃i/m(Thunb)Makino.)為葫盧科多年生草質(zhì)藤本植物，又名七葉膽，小苦藥等。因與吉林人參有異物同功之效，故有"南方人參"、"第二人參"之美稱，同時也被中外學(xué)術(shù)界譽為"綠色的金子"、"人參寶草"。其主要有效成分為絞股藍皂苷，具有顯著的降血糖、降血脂、平衡血壓、抗癌、抗疲勞、抗缺氧、抗熱、抗衰老、促進細胞新陳代謝、止咳祛痰、提高免疫力、美白等功能。由于絞股藍皂苷生理活性的多樣性和重要性，優(yōu)化其提取分離方法一直是相關(guān)研究的核心和基礎(chǔ)。絞股藍皂苷的提取多采用醇浸泡、醇回流等水醇提取法，之后再進行進一步分離和純化。由于絞股藍皂苷極性大，且與色素不易分離，現(xiàn)多采用正丁醇萃取(張慧麗，宋有濤，辛如等.超聲提取絞股藍總皂苷及抗氧化作用的研究[J].遼寧大學(xué)學(xué)報，2006，33(4):346-348)、氧化鋁柱層析(范文成，葉曉紅，羅志宏等.中性氧化鋁住對絞股藍總皂苷含量測定結(jié)果的影響[J].藥物分析，2005，27(2):125)、大孔吸附樹脂柱層析(沈宏偉，消彥春，車仁國等.絞股藍中總皂苷的提取及含量研究[J].提取物及應(yīng)用，2008，4:158-160)等方法進行分離富集。萃取法使用有毒有機溶劑，如正丁醇，會造成環(huán)境污染；氧化鋁柱層析法成本高且操作繁瑣。而大孔吸附樹脂分離技術(shù)是20世紀60年代末發(fā)展起來新技術(shù)，在天然產(chǎn)物的提純等方面顯示出獨特的優(yōu)勢，近年來已廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物中有效物質(zhì)、尤其是水溶性物質(zhì)的分離。將大孔吸附樹脂技術(shù)用于絞股藍皂苷的提純可以避免有毒有機溶劑的使用，從而降低環(huán)境污染。但大孔吸附樹脂吸附分離技術(shù)為固定床模式，最大缺點是不能直接處理含固體顆粒的進料，因此，在用于絞股藍皂苷的提取時，不得不在上柱操作之前加上一系列的預(yù)處理過程，如提取、離心、過濾、濃縮和液固分離等過程，仍存在操作繁瑣、提取時間長、提取效率低、設(shè)備及空間占用多、人力物力耗費量大，廢物排放量多，生產(chǎn)成本高等弊端。擴張床吸附(ExpandedBedAdsorption,EBA)技術(shù)出現(xiàn)于上個世紀九十年代，最初用于蛋白質(zhì)的分離純化。在擴張床中，吸附劑的大小和密度有一定的分布，顆粒大的或密度大的顆粒會分布在底部，而顆粒小的或密度小的則分布在上部，這種分層現(xiàn)象限制了顆粒的運動。只要適當控制流速和填料的徑高比就能形成穩(wěn)定的分層的床層，這是擴張床操作的基礎(chǔ)。較之于固定床，擴張床可直接處理含有固體顆粒的料液，省去了離心、過濾等操作。80年代以來，在生物化工領(lǐng)域，為高效簡便地分離純化生物活性物質(zhì)，國內(nèi)外一些學(xué)者提出了過程集成的概念，即將常規(guī)分離中的幾個單元操作集成在一步操作中完成。英國劍橋大學(xué)的H.A.Chase等在研究流化床吸附的基礎(chǔ)上，發(fā)展了能在床層膨松狀態(tài)下實現(xiàn)平推流的擴張床吸附技術(shù)。應(yīng)用該技術(shù)可直接從細胞破碎液中提取出較純的目標產(chǎn)物，固液分離和吸附同時進行。目前還很少將該技術(shù)應(yīng)用于中藥的提取分離上。集成化擴張床技術(shù)就是要將過濾、濃縮和初步純化等多個操作步驟集成于一步操作中完成，能大大縮短操作時間、提高收率、降低生產(chǎn)成本。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種絞股藍皂苷的制備方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的一種絞股藍皂苷的制備方法，具體步驟為，(1)將提取溶劑和絞股藍藥材置于超聲提取器中進行提取，提取時間為0.51.5h;提取時間優(yōu)選為lh;所述的溶劑為乙醇；所述的絞股藍藥材為未經(jīng)粉碎的絞股藍藥材或者不同粒徑的絞股藍細粉；(2)提取的同時開啟輸液泵，將提取液自下而上輸送至擴張床柱體內(nèi)，被樹脂吸附后，吸附余液流回至超聲提取器中繼續(xù)參與提?。辉诖藙討B(tài)提取過程中，絞股藍中的有效成分由藥材中不斷轉(zhuǎn)移至柱床內(nèi)的樹脂上；所述的樹脂為非極性或弱極性大孔吸附樹脂；所述的絞股藍中的有效成分為絞股藍皂苷；本發(fā)明采用超聲波提取，利用超聲波產(chǎn)生的強烈振動、高的加速度、強烈的空化效應(yīng)等，加強了胞內(nèi)物質(zhì)的釋放擴散及溶解，加速了藥物有效成分進入溶劑，從而提高了提出率，縮短了提取時間，節(jié)約了溶劑使用量。并且超聲波破碎過程是一個物理過程，提取過程中無化學(xué)反應(yīng)，被浸提的生物活性物質(zhì)在短時間內(nèi)保持不變，生物活性不減弱，降低了高溫對有效成分的影響。并輔助進行均勻攪拌，提高中藥有效成分的溶出速度和溶出次數(shù)，從而增加有效成分的擴散，縮短提取時間，加速提取過程；在此集成化提取過程中，不需要冷凝裝置和換熱器等，簡化了裝置，操作簡便；傳統(tǒng)的方式為回流提取的缺點回流提取溫度較高，不僅造成許多中藥熱敏性成分的破壞，而且還大量帶出很多無效雜質(zhì)，給后續(xù)分離純化造成了困難和麻煩，從而降低了收率，增加了消耗和成本；由于雜質(zhì)含量過多使得分離純化難度大且效果不好，造成產(chǎn)品中(特別是中藥注射劑)殘留異物超標，這也是形成中藥注射劑不良反應(yīng)的重要原因之一；(3)提取完畢，關(guān)閉超聲提取器，通過輸液泵將沖洗液自上而下輸入擴張床的柱體內(nèi)，待沖洗液澄清后，通過輸液泵將洗脫劑自上而下輸入擴張床的柱體內(nèi)，同時收集于自動收集器內(nèi)；所述的沖洗液為去離子水或低濃度低級醇；所述的洗脫劑為50%95%低級醇，洗脫劑用量不少于樹脂體積的35倍；(4)洗脫完畢，通過輸液泵將另一洗脫劑從擴張床頂部自上而下輸送至擴張床的柱體內(nèi)，完成柱的再生過程。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點是(1)本發(fā)明集成化提取絞股藍皂苷，省去了傳統(tǒng)提取分離過程中的離心、過濾、濃縮等步驟，將提取、離心、過濾和純化的操作集中于一個單元操作中，能直接從含固體顆粒的提取液中分離出有效成分，具有效率高，步驟簡化，成本低的特點；(2)本發(fā)明將提取裝置與擴張床集成，克服了固定床不能直接處理含有固體顆粒的進料的缺點，節(jié)省了人力物力，提高了提取率和提取效率，減少了環(huán)境污染；(3)傳統(tǒng)方法為回流提取提取時間長(2.5h)，能耗大，對絞股藍有效成分破壞較嚴重，考慮到工業(yè)應(yīng)用，人力成本較高；本發(fā)明為超聲波常溫輔助提取法，提取時間短(0.51.0h)，能耗低(不需要冷凝水)，提取條件溫和，對有效成分破壞小，浸提液雜質(zhì)含量少，提取率高于傳統(tǒng)方法，而提取率達到回流提取的95%。圖l本發(fā)明的裝置結(jié)構(gòu)示意圖。附圖中的標號分別為1、提取裝置，2、輸液泵，3、擴張床的柱體，4、自動收集器。具體實施方式以下提供本發(fā)明一種絞股藍皂苷的制備方法的具體實施方式。本發(fā)明所用的裝置為至少含有提取裝置1以及擴張床，提取裝置1通過管路與輸液泵2相連，提取裝置1通過管路與擴張床的柱體3相連，輸液泵2通過管路與擴張床的柱體3相連，自動收集器4分別與分離柱、收集容器相連。實施例l(1)將絞股藍藥材粉碎后過40目篩子，取絞股藍細粉3g，置于500ml圓底燒瓶中，按料液比1:50加入40%乙醇提取液150ml，開啟超聲器進行提??；(2)提取的同時開啟輸液泵2，將提取液自下而上輸送至己處理好的HZ-816大孔吸附樹脂的擴張床柱內(nèi)，柱床的擴張比為4:3;提取液被大孔吸附樹脂吸附后，吸附余液流回至提取裝置1中繼續(xù)參與提取，形成對提取液的動態(tài)提取，使有效成分吸附在柱床上；(3)提取lh后，關(guān)閉超聲器，通過輸液泵2將1BV(120ml)去離子水自上而下輸入至擴張床的柱體3內(nèi)，同時收集于自動收集器4內(nèi)，通過輸液泵2將3BV(360ml)75%乙醇洗脫劑自上而下輸入至擴張床的柱體3內(nèi)，同時收集于自動收集器4內(nèi)；(4)洗脫完畢，通過輸液泵2將95%低級醇從擴張床頂部自上而下輸送至擴張床的柱體3內(nèi)，完成柱的再生過程，同時收集洗脫液于自動收集器4內(nèi)。本發(fā)明對絞股藍總皂苷進行提取分離的結(jié)果，與常規(guī)提取分離方法相比，其提取分離的指標對比情況如下(如表1所示)表i本發(fā)明與常規(guī)方法在提取分離3g絞股藍總皂苷的指標對比<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>通量——藥材量/時間mg/h過程效率——總皂苷量/時間mg/h環(huán)境因子——乙醇用量/總皂苷量ml/mg總過程評價——過程效率/環(huán)境因子mg21111—111—1通過對比可以看出，應(yīng)用本發(fā)明提純絞股藍皂苷，具有提取時間短，溶劑用量少，過程效率高等優(yōu)點，環(huán)境友好，有望工業(yè)化。實施例2本實施例是對15g絞股藍藥材，應(yīng)用該裝置對絞股藍總皂苷進行集成化提取，具體操作步驟為(1)將絞股藍藥材粉碎后過40目篩子，取絞股藍細粉15g，置于500ml圓底燒瓶中，按料液比l:30加入40。/。乙醇提取液450ml，開啟超聲器進行提??；(2)提取的同時開啟輸液泵2，將提取液自下而上輸送至已處理好的HZ-816大孔吸附樹脂的擴張床柱內(nèi)，柱床的擴張比為3:2;提取液被大孔吸附樹脂吸附后，吸附余液流回至提取裝置1中繼續(xù)參與提取，形成對提取液的動態(tài)提取，使有效成分吸附在柱床上；其余操作同實施例l。與常規(guī)提取分離方法相比，其提取分離的指標對比情況，如表2所示表2本發(fā)明與常規(guī)方法在提取分離15g絞股藍總皂苷的指標對比<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>通過對比可以看出，應(yīng)用本發(fā)明提純絞股藍皂苷，具有提取時間短，溶劑用量少，提取率高等優(yōu)點，適合工業(yè)化。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當指出，對于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。權(quán)利要求1.一種絞股藍皂苷的制備方法，其特征在于，具體步驟為(1)將提取溶劑和絞股藍藥材置于超聲提取器中進行提取，提取時間為0.5～1.5h；(2)提取的同時開啟輸液泵，將提取液自下而上輸送至擴張床柱體內(nèi)，被大孔吸附樹脂吸附后，吸附余液流回至超聲提取器中繼續(xù)參與提??；在此動態(tài)提取過程中，絞股藍中的有效成分由藥材中不斷轉(zhuǎn)移至柱床內(nèi)的樹脂上；(3)提取完畢，關(guān)閉超聲提取器，通過輸液泵將沖洗液自上而下輸入擴張床的柱體內(nèi)，待沖洗液澄清后，通過輸液泵將洗脫劑自上而下輸入擴張床的柱體內(nèi)，同時收集于自動收集器內(nèi)；(4)洗脫完畢，通過輸液泵將另一洗脫劑從擴張床頂部自上而下輸送至擴張床的柱體內(nèi)，完成柱的再生過程。2.如權(quán)利要求1所述的一種絞股藍皂苷的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(1)中，提取時間為lh。3.如權(quán)利要求1所述的一種絞股藍皂苷的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(1)中，所述的溶劑為乙醇。4.如權(quán)利要求1所述的一種絞股藍皂苷的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(1)中，所述的絞股藍藥材為未經(jīng)粉碎的絞股藍藥材或者不同粒徑的絞股藍細粉。5.如權(quán)利要求1所述的一種絞股藍皂苷的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(2)中，所述的樹脂為非極性或弱極性大孔吸附樹脂。6.如權(quán)利要求1所述的一種絞股藍皂苷的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(2)中，所述的絞股藍中的有效成分為絞股藍皂苷。7.如權(quán)利要求1所述的一種絞股藍皂苷的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(3)中，所述的沖洗液為去離子水或低濃度低級醇。8.如權(quán)利要求1所述的一種絞股藍皂苷的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(3)中，所述的洗脫劑為50%95%低級醇，洗脫劑用量為樹脂體積的35倍。全文摘要本發(fā)明涉及一種絞股藍皂苷的制備方法，將提取溶劑和絞股藍藥材置于超聲提取器中進行提??；提取的同時開啟輸液泵，將提取液自下而上輸送至擴張床柱體內(nèi)，被樹脂吸附后，吸附余液流回至超聲提取器中繼續(xù)參與提取；在此動態(tài)提取過程中，絞股藍中的有效成分由藥材中不斷轉(zhuǎn)移至柱床內(nèi)的樹脂上；提取完畢，關(guān)閉超聲提取器，通過輸液泵將沖洗液自上而下輸入擴張床的柱體內(nèi)；待沖洗液澄清后，通過輸液泵將洗脫劑自上而下輸入擴張床的柱體內(nèi)，同時收集于自動收集器內(nèi)；洗脫完畢，通過輸液泵將另一洗脫劑從擴張床頂部自上而下輸送至擴張床的柱體內(nèi)，完成柱的再生過程。本發(fā)明的優(yōu)點效率高，步驟簡化，成本低的特點，能耗低。文檔編號A61P37/00GK101524393SQ20091004880公開日2009年9月9日申請日期2009年4月3日優(yōu)先權(quán)日2009年4月3日發(fā)明者敏張,祝付蘭,羅國安,坪胡申請人:華東理工大學(xué)