專利名稱：一種絞股藍(lán)總皂苷的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種絞股藍(lán)總皂苷的提取方法。
背景技術(shù)：
絞股藍(lán)是我國中藥的寶貴財富，素有"南方人參"之稱，在日本被稱作"福音草"。 祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為絞股藍(lán)具有清熱解毒、祛痰止咳、鎮(zhèn)靜安神、益氣強(qiáng)身的功效。絞股藍(lán)含有80 多種絞股藍(lán)皂苷，有4種皂苷分別與人參皂苷Rbl、 Rb3、 Rd、 F2的結(jié)構(gòu)完全相同，其人參皂 苷的含量是人參的8倍，11種皂甙是高麗參的3倍，總皂苷含量是人參的3倍，同時還富含 絞股藍(lán)多糖、18種氨基酸、多種微量元素、豐富的維生素、果酸等。絞股藍(lán)皂苷與人參皂苷作 用相似，且無過量服用的副作用，是一種新的藥食兩用植物資源。現(xiàn)代藥學(xué)研究證實絞股藍(lán) 皂苷具有降血脂、降血糖、抗?jié)儭⒖鼓[瘤、抗疲勞、抗衰老、保肝及增強(qiáng)免疫功能等作用。
目前，對絞股藍(lán)的研究雖然是遍地開花，但主要采用水提法和醇提法制備純度不 高的絞股藍(lán)總皂苷提取物，也有極少一部分生產(chǎn)廠家采用大孔樹脂進(jìn)行絞股藍(lán)總皂苷分離 純化。其中，水提法和醇提法存在絞股藍(lán)皂苷活性損失大、耗時長、溶劑耗費(fèi)量大、易污染環(huán) 境、分離成本高及在提取過程中有效成分損失嚴(yán)重等缺點(diǎn)，收率一般在0. 3%左右。而采用 大孔吸附樹脂處理時，由于絞股藍(lán)所含皂苷的極性大，且與色素不易分離，使得所用樹脂柱 的分離效果不佳，所得的總皂苷提取率低，且色澤不好，含量不高，給工業(yè)化利用大孔樹脂 柱為分離和純化絞股藍(lán)總皂苷帶來許多問題。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問題，本發(fā)明提供一種絞股藍(lán)總皂苷的提取方法，利用堿液煮沸提 取及樹脂層析法從絞股藍(lán)中提取高純度的調(diào)節(jié)脂肪代謝的絞股藍(lán)皂苷，用以預(yù)防高脂血 癥、動脈粥樣硬化等病變。
本發(fā)明提供的絞股藍(lán)總皂苷的提取方法，包括下述步驟
(1)將絞股藍(lán)粉碎，得到絞股藍(lán)粉末； (2)取步驟(1)得到的絞股藍(lán)粉末，加入NaOH水溶液煮沸，過濾，取濾液；
(3)步驟(2)所述濾液通過大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，然后以NaOH水溶液對所述大 孔吸附樹脂進(jìn)行洗脫至無色，收集NaOH洗脫液，再以純化水洗至中性，最后以乙醇解吸，收 集乙醇解吸液； (4)步驟(3)所述NaOH洗脫液以活性炭吸附，脫去色素后，循環(huán)用于步驟(2);
(5)步驟(4)所述的乙醇液，減壓蒸餾，回收乙醇，固體烘干，得總皂苷。
作為優(yōu)選，步驟(1)所述絞股藍(lán)粉末粒徑大小為2 4mm。
作為優(yōu)選，上述的NaOH水溶液PH = 9 11 。 上述大孔吸附樹脂優(yōu)選ADS-7型大孔樹脂與AB-8型大孔吸附樹脂任意比的混合
物，更優(yōu)選ADS-7型大孔吸附樹脂與AB-8型大孔吸附樹脂質(zhì)量比2 : 1的混合物。 步驟(3)所述乙醇優(yōu)選質(zhì)量濃度大于等于50%的乙醇溶液，更優(yōu)選質(zhì)量濃度為50 70%的乙醇水溶液。
本發(fā)明提供的絞股藍(lán)總皂苷的提取方法，有益效果如下 1、以NaOH溶液煮沸提取絞股藍(lán)皂苷，提取率高，成本低，不僅使絞股藍(lán)皂苷更好 地溶解于溶液中，同時還使得色素形成沉淀，過濾后可除去絕大多數(shù)的色素雜質(zhì)，為后續(xù)處 理減輕了色素除去的壓力； 2、用NaOH溶液洗脫樹脂柱至無色，除去了所有難于除去的色素，所得產(chǎn)品純度高 (> 97% )，顏色為白色。由于采用堿溶液洗脫色素，堿溶液本身就有樹脂再生功能，因此省 去了樹脂再生過程，且每批次大孔樹脂可循環(huán)使用300次以上，節(jié)省了時間和大量多次購 買樹脂的成本，創(chuàng)造了效益； 3、層析過程所采用的NaOH溶液用活性炭柱脫去色素，循環(huán)至提取和層析使用，因 此整個過程只需要第1次處理所需的水即可，該過程并沒有增加生產(chǎn)成本，節(jié)省出來的水 成本反而大大的降低了整個過程的生產(chǎn)成本； 4、用高于50%的乙醇解吸效率很高，其解析率達(dá)96. 2%以上；
5、整個過程無污水排放，無毒，無有害物質(zhì)產(chǎn)生。


圖1是絞股藍(lán)總皂苷提取方法的工藝流程具體實施例方式
下面結(jié)合附圖1和具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，以使本領(lǐng)域的技術(shù)人員可
以更好的理解本發(fā)明并能予以實施，但所舉實施例不作為對本發(fā)明的限定。 實施例1 (1)取干燥的絞股藍(lán)，粉碎至粒徑為2 4mm的粉末。此粒徑下的粉末有利于總皂 苷的提取及過濾分離。 (2)稱取絞股藍(lán)粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸攪拌 提取3次，每次2h，過濾，合并濾液。 用堿水提取省去了醇提取濃縮過程，既節(jié)省了時間又節(jié)省了濃縮過程中的電能損 耗和試劑回收過程中的試劑損耗，同時提取率高達(dá)93.2%，成本低，易于實現(xiàn)低成本大規(guī)模 生產(chǎn)。而且，經(jīng)長期的生產(chǎn)跟蹤檢測顯示，絞股藍(lán)總皂苷在整個提取過程中活性穩(wěn)定，沒有 因為堿性環(huán)境和水環(huán)境而影響其絞股藍(lán)總皂苷活性。 (3)步驟(2)所述濾液通過ADS-7大孔吸附樹脂，比吸附量為40. 3mg/g，然后以pH
=9 11的NaOH水溶液對所述大孔吸附樹脂進(jìn)行洗脫至無色，收集NaOH洗脫液，再以純
化水洗至中性，最后以70%的乙醇水溶液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率達(dá)96. 2%。 (4)步驟(3)所述NaOH洗脫液以活性炭吸附，脫去色素后，循環(huán)用于步驟(2)。 堿水用活性炭柱脫去色素循環(huán)使用，提取過程堿水零排放，省水節(jié)能； (5)步驟(4)所述的乙醇液，減壓蒸餾，回收乙醇，固體烘干，得總皂苷干粉，顏色
為白色。
(6)總皂苷含量測定
①對照品的制備
稱取干燥的絞股藍(lán)，以甲醇為溶劑，回流提取3次，每次2h。合并過提取液，濃縮至 浸膏，用水溶解，分別用石油醚、氯仿、正丁醇萃取，回收石油醚、氯仿、正丁醇后得到不同的 萃取物。將正丁醇萃取物用少量水溶解后，過ADS-7大孔吸附樹脂柱層析，先用pH二 10堿 液洗至無色，再純化水洗至中性最后用純度高于50%的乙醇洗脫，收集乙醇液，減壓回收乙 醇，干燥后作為對照品。
②標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 精密稱取對照品10mg，置于干燥的lOmL容量瓶中，用乙醇溶解并稀釋至刻度，精 密吸取O. 06， 0. 12， 0. 18， 0. 24， 0. 30mL分別注入具塞試管中，水浴加熱揮去溶劑，冷卻，各 加入0. 40mL 5%香草醛一冰醋酸(新配)和1. 6mL高氯酸，搖勻，塞緊試管，放入7(TC恒溫 水浴15min后取出，冷卻至室溫，加入冰醋酸10mL，搖勻，用紫外分光光度計在波長529nm處 測量吸收度。隨行試劑作空白。得回歸曲線方程為Y = 6. 58X-0. 0006， r = 0.9998。
③樣品溶液的制備及測量 精密稱取步驟(5)所得的總皂苷干粉10mg，分別置于10mL的容量瓶中，用乙醇溶 解并稀釋至刻度。精密吸取O. 12mL分別注入具塞試管中，水浴加熱揮去溶劑，冷卻，各加入 0. 40mL 5%香草醛一冰醋酸(新配)和1. 6mL高氯酸，搖勻，塞緊試管，在7(TC恒溫水浴中 加熱15min后取出，冷卻至室溫，加入冰醋酸10mL，搖勻。同標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作，在同一條件下 測量吸收度，由回歸曲線方程計算得總皂苷含量為98. 5%。
實施例2 (1)取干燥的絞股藍(lán)，粉碎至粒徑為2 4mm的粉末。此粒徑下的粉末有利于總皂 苷的提取及過濾分離。 (2)稱取絞股藍(lán)粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸攪拌 提取3次，每次2h，過濾，合并濾液。 用堿水提取省去了醇提取濃縮過程，既節(jié)省了時間又節(jié)省了濃縮過程中的電能損 耗和試劑回收過程中的試劑損耗，同時提取率高達(dá)93.2%，成本低，易于實現(xiàn)低成本大規(guī)模 生產(chǎn)。而且，絞股藍(lán)總皂苷在整個提取過程中活性穩(wěn)定，沒有因為堿性環(huán)境和水環(huán)境而影響 其絞股藍(lán)總皂苷活性。 (3)步驟(2)所述濾液通過AB-8大孔吸附樹脂，比吸附量為40. 5mg/g，然后以pH
=9 11的NaOH水溶液對所述大孔吸附樹脂進(jìn)行洗脫至無色，收集NaOH洗脫液，再以純
化水洗至中性，最后以90%的乙醇水溶液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率達(dá)97. 4%。 (4)步驟(3)所述NaOH洗脫液以活性炭吸附，脫去色素后，循環(huán)用于步驟(2)。 堿水用活性炭柱脫去色素循環(huán)使用，提取過程堿水零排放，省水節(jié)能； (5)步驟(4)所述的乙醇液，減壓蒸餾，回收乙醇，固體烘干，得總皂苷干粉，顏色
為白色。 (6)總皂苷含量測定步驟① ③同實施例l，計算得總皂苷含量為98. 0%。
實施例3 (1)取干燥的絞股藍(lán)，粉碎至粒徑為2 4mm的粉末。此粒徑下的粉末有利于總皂 苷的提取及過濾分離。 (2)稱取絞股藍(lán)粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸攪拌 提取3次，每次2h，過濾，合并濾液。
用堿水提取省去了醇提取濃縮過程，既節(jié)省了時間又節(jié)省了濃縮過程中的電能損 耗和試劑回收過程中的試劑損耗，同時提取率高達(dá)93.2%，成本低，易于實現(xiàn)低成本大規(guī)模 生產(chǎn)。而且，絞股藍(lán)總皂苷在整個提取過程中活性穩(wěn)定，沒有因為堿性環(huán)境和水環(huán)境而影響 其絞股藍(lán)總皂苷活性。 (3)步驟(2)所述濾液通過ADS-7型大孔吸附樹脂與AB-8型大孔吸附樹脂質(zhì)量比 2 : 1的混合物，比吸附量為45. 5mg/g，然后以pH = 9 11的NaOH水溶液對所述大孔吸 附樹脂進(jìn)行洗脫至無色，收集NaOH洗脫液，再以純化水洗至中性，最后以50%的乙醇水溶 液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率達(dá)99. 1 % 。 (4)步驟(3)所述NaOH洗脫液以活性炭吸附，脫去色素后，循環(huán)用于步驟(2)。 堿水用活性炭柱脫去色素循環(huán)使用，提取過程堿水零排放，省水節(jié)能； (5)步驟(4)所述的乙醇液，減壓蒸餾，回收乙醇，固體烘干，得總皂苷干粉，顏色
為白色。 (6)總皂苷含量測定步驟① ③同實施例l，計算得總皂苷含量為99. 3%。
實施例4 (1)取干燥的絞股藍(lán)，粉碎至粒徑為2 4mm的粉末。此粒徑下的粉末有利于總皂 苷的提取及過濾分離。 (2)稱取絞股藍(lán)粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸攪拌 提取3次，每次2h，過濾，合并濾液。 用堿水提取省去了醇提取濃縮過程，既節(jié)省了時間又節(jié)省了濃縮過程中的電能損 耗和試劑回收過程中的試劑損耗，同時提取率高達(dá)93.2%，成本低，易于實現(xiàn)低成本大規(guī)模 生產(chǎn)。而且，絞股藍(lán)總皂苷在整個提取過程中活性穩(wěn)定，沒有因為堿性環(huán)境和水環(huán)境而影響 其絞股藍(lán)總皂苷活性。 (3)步驟(2)所述濾液通過ADS-7型大孔吸附樹脂與AB-8型大孔吸附樹脂質(zhì)量比 1 : 1的混合物，比吸附量為41. 5mg/g，然后以pH = 9 11的NaOH水溶液對所述大孔吸 附樹脂進(jìn)行洗脫至無色，收集NaOH洗脫液，再以純化水洗至中性，最后以70 %的乙醇水溶 液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率達(dá)97. 1 % 。 (4)步驟(3)所述NaOH洗脫液以活性炭吸附，脫去色素后，循環(huán)用于步驟(2)。 堿水用活性炭柱脫去色素循環(huán)使用，提取過程堿水零排放，省水節(jié)能； (5)步驟(4)所述的乙醇液，減壓蒸餾，回收乙醇，固體烘干，得總皂苷干粉，顏色
為白色。 (6)總皂苷含量測定步驟① ③同實施例l，計算得總皂苷含量為97. 8%。
實施例5 (1)取干燥的絞股藍(lán)，粉碎至粒徑為2 4mm的粉末。此粒徑下的粉末有利于總皂 苷的提取及過濾分離。 (2)稱取絞股藍(lán)粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸攪拌 提取3次，每次2h，過濾，合并濾液。 用堿水提取省去了醇提取濃縮過程，既節(jié)省了時間又節(jié)省了濃縮過程中的電能損 耗和試劑回收過程中的試劑損耗，同時提取率高達(dá)93.2%，成本低，易于實現(xiàn)低成本大規(guī)模 生產(chǎn)。而且，絞股藍(lán)總皂苷在整個提取過程中活性穩(wěn)定，沒有因為堿性環(huán)境和水環(huán)境而影響其絞股藍(lán)總皂苷活性。 (3)步驟(2)所述濾液通過ADS-7型大孔吸附樹脂與AB-8型大孔吸附樹脂質(zhì)量比 1 : 4的混合物，比吸附量為45. 2mg/g，然后以pH = 9 11的NaOH水溶液對所述大孔吸 附樹脂進(jìn)行洗脫至無色，收集NaOH洗脫液，再以純化水洗至中性，最后以50%的乙醇水溶 液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率達(dá)96. 1 % 。 (4)步驟(3)所述NaOH洗脫液以活性炭吸附，脫去色素后，循環(huán)用于步驟(2)。 堿水用活性炭柱脫去色素循環(huán)使用，提取過程堿水零排放，省水節(jié)能； (5)步驟(4)所述的乙醇液，減壓蒸餾，回收乙醇，固體烘干，得總皂苷干粉，顏色
為白色。 (6)總皂苷含量測定步驟① ③同實施例l，計算得總皂苷含量為98. 3%。
對比實施例1 (1)取干燥的絞股藍(lán)，粉碎至粒徑為2 4mm的粉末。此粒徑下的粉末有利于總皂 苷的提取及過濾分離。 (2)稱取絞股藍(lán)粉末100Kg，置提取罐中，加入50 %乙醇水溶液煮沸攪拌提取3次， 每次2h，過濾，合并濾液。 (3)步驟(2)所述濾液通過ADS-7型大孔吸附樹脂與AB-8型大孔吸附樹脂質(zhì)量 比2 : 1的混合物，比吸附量為39. 5mg/g，以純化水洗至無色，最后以80%的乙醇水溶液解 吸，收集乙醇解吸液，解吸率達(dá)93. 1 % 。 (4)步驟(3)所述的乙醇解吸液，減壓蒸餾，回收乙醇，固體烘干，得總皂苷干粉， 顏色為淺綠色。 (6)總皂苷含量測定步驟① ③同實施例l，計算得總皂苷含量為87. 3%。
對比實施例2 (1)取干燥的絞股藍(lán)，粉碎至粒徑為2 4mm的粉末。此粒徑下的粉末有利于總皂 苷的提取及過濾分離。 (2)稱取絞股藍(lán)粉末100Kg，置提取罐中，加入pH = 9 11的NaOH溶液煮沸攪拌 提取3次，每次2h，過濾，合并濾液。 (3)步驟(2)所述濾液通過D-101型大孔吸附樹脂，比吸附量為37. lmg/g，然后以 pH = 9 n的Na0H水溶液對所述大孔吸附樹脂進(jìn)行洗脫至無色，收集NaOH洗脫液，再以 純化水洗至中性，最后以80%的乙醇水溶液解吸，收集乙醇解吸液，解吸率達(dá)91. 8%。
(4)步驟(3)所述NaOH洗脫液以活性炭吸附，脫去色素后，循環(huán)用于步驟(2)。
(5)步驟(4)所述的乙醇液，減壓蒸餾，回收乙醇，固體烘干，得總皂苷干粉，顏色 為淡綠色。 (6)總皂苷含量測定步驟① ③同實施例l，計算得總皂苷含量為89. 0%。
以上所述實施例僅是為充分說明本發(fā)明而所舉的較佳的實施例，本發(fā)明的保護(hù)范 圍不限于此。本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明基礎(chǔ)上所作的等同替代或變換，均在本發(fā)明 的保護(hù)范圍之內(nèi)。本發(fā)明的保護(hù)范圍以權(quán)利要求書為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
一種絞股藍(lán)總皂苷的提取方法，其特征在于，包括下述步驟(1)將絞股藍(lán)粉碎，得到絞股藍(lán)粉末；(2)取步驟(1)得到的絞股藍(lán)粉末，加入NaOH水溶液煮沸，過濾，取濾液；(3)步驟(2)所述濾液通過大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，然后以NaOH水溶液對所述大孔吸附樹脂進(jìn)行洗脫至無色，收集NaOH洗脫液，再以純化水洗至中性，最后以乙醇解吸，收集乙醇解吸液；(4)步驟(3)所述NaOH洗脫液以活性炭吸附，脫去色素后，循環(huán)用于步驟(2)；(5)步驟(4)所述的乙醇液，減壓蒸餾，回收乙醇，固體烘干，得總皂苷。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述絞股藍(lán)粉末粒徑大小為2 4mm 。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述的NaOH水溶液PH = 9 11。
4 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述大孔吸附樹脂為ADS-7型大孔樹脂與AB-8型大孔吸附樹脂任意比的混合物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征在于，步驟(3)所述大孔吸附樹脂為ADS-7型大孔吸附樹脂與AB-8型大孔吸附樹脂質(zhì)量比2 : l的混合物。
6. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的提取方法，其特征在于，步驟(3)所述乙醇為質(zhì)量濃度大于等于50%的乙醇溶液。
7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的提取方法，其特征在于，步驟(3)所述乙醇為質(zhì)量濃度50 70%的乙醇水溶液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種絞股藍(lán)總皂苷的提取方法，包括下述步驟(1)將絞股藍(lán)粉碎，得到絞股藍(lán)粉末；(2)取步驟(1)得到的絞股藍(lán)粉末，加入NaOH水溶液煮沸，過濾，取濾液；(3)步驟(2)所述濾液通過大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，然后以NaOH水溶液對所述大孔吸附樹脂進(jìn)行洗脫至無色，收集NaOH洗脫液，再以純化水洗至中性，最后以乙醇解吸，收集乙醇解吸液；(4)步驟(3)所述NaOH洗脫液以活性炭吸附，脫去色素后，循環(huán)用于步驟(2)；(5)步驟(4)所述的乙醇液，減壓蒸餾，回收乙醇，固體烘干，得總皂苷。此方法成本低，效率高，無污染，產(chǎn)品純度高。
文檔編號A61P9/00GK101732398SQ20101010501
公開日2010年6月16日 申請日期2010年2月3日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月3日
發(fā)明者張向軍, 李培幫 申請人:陜西太極華青信息系統(tǒng)有限公司