專利名稱：：一種中藥提取物,包含該提取物的口服制劑及該制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種藥物提取物，特別是涉及一種中藥提取物，包含該提取物的口服制劑及該制劑的制備方法。
背景技術(shù)：
：當(dāng)前，以高血壓、腦卒中和冠心病為代表的心腦血管疾病嚴(yán)重危害人類健康，被稱為"人類健康的頭號劊子手"。心腦血管疾病的數(shù)量絕對和相對地增多，心腦血管疾病已經(jīng)逐漸成為我國城鄉(xiāng)居民的第一位死因，目前近40%的死亡者都是死于這類疾病，心腦血管疾病已成為威脅人類健康的主要原因。目前我國各種心腦血管病藥物中，口服制劑主要有復(fù)方丹參滴丸、通心絡(luò)、步長腦心通、地奧心血康、速效救心丸、脈絡(luò)寧、麝香保心丸、杏靈滴丸等。這些藥物多以活血化瘀為治療原則，多采用傳統(tǒng)中藥如丹參、銀杏葉、川芎等藥材。但心血管疾病病因復(fù)雜，非單純活血化瘀能治療。傳統(tǒng)的方式服藥量大，口服不容易吸收，藥效不能得到充分的保證，本品種克服了傳統(tǒng)用藥的缺陷，在保證藥效的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改革和創(chuàng)新。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種治療腦中風(fēng)及心血管疾病的中藥提取物。本發(fā)明另一個(gè)目的是提供包含該提取物的口服制劑及該制劑的制備方法。本發(fā)明的中藥提取物，選用水蛭和地龍為原料藥，該提取物由如下方法制備1)原料藥的重量配比水蛭1-100份、地龍1-100份；2)按原料藥的重量份取水蛭、地龍，用50-95%乙醇(體積濃度)、4_12倍量(相對于水蛭和地龍的總重量)、每次l_3h，分別提取1-3次，濾過，回收濾液，濃縮，得干膏。優(yōu)選地，所述提取物由如下方法制備1)原料藥的重量配比水蛭50份、地龍50份；2)取上述重量份的水蛭、地龍，用70%乙醇(V/V)、10倍量(相對于水蛭或地龍的重量)、每次1.5h，提取2次，濾過，回收濾液，濃縮，得干膏。本發(fā)明還提供包含上述中藥提取物的口服制劑，它包括下述重量比的組分干膏微晶纖維素淀粉為631。本發(fā)明中藥提取物的口服制劑可以為膠囊劑、顆粒劑、片劑，軟膠囊，滴丸，口崩片，咀嚼片，分散片等口服劑型。本發(fā)明還提供本發(fā)明中藥提取物口服制劑的制備方法，包括如下步驟將干膏粉和微晶纖維素、淀粉按配比混合，用乙醇潤濕，制成軟材，用合適的目篩制粒。本發(fā)明中藥組合物以水蛭為君藥，職其味成性平，成能軟堅(jiān)走血，而善于破血逐瘀。早在《神農(nóng)本草經(jīng)》就稱其“主逐惡血、瘀血、月閉、破血瘕積聚、無子、利水道”。地龍為臣，本品味成性寒，善于走竄，為清熱，化瘀通絡(luò)之常用藥?！侗静萸笳妗吩啤膀球颈居秀@土之能，化藥之力，而凡跌撲受傷，血瘀經(jīng)絡(luò)，又安有任其停蓄而不為之消化乎”《中藥大辭典》、《全國中草藥匯編》和《中藥藥理與應(yīng)用》均記載地龍能治“半身不遂”，并稱其“降血壓，舒筋治絡(luò)”。水蛭主要含蛋白質(zhì)、水蛭素、肝素、抗血栓素，其分泌物另含一種組織胺樣物質(zhì)，此外含有十幾種氨基酸和Zn、Mn、Fe、Co、Cr、Se、Mo和Ni等多種微量元素。地龍中含有蛋白質(zhì)、豐富的酶類、琥珀酸等多種不飽和脂肪酸、20種游離氨基酸、核苷酸等等，因此，需將其有效的使有效成分充分的提取出來才能達(dá)到良好的效果。本發(fā)明提取物及制劑具有以下有益效果1、通過70%濃度的醇回流提取，這與傳統(tǒng)的水煎煮方式和直接原藥材粉碎入藥均由很大的區(qū)別，同時(shí)，所獲得的有效成分也不一樣，脂溶性物質(zhì)占絕大多數(shù)，通過醇熱回流提取，大部分不能口服吸收的大分子物質(zhì)有可能分裂成小分子片段，更容易吸收通過血腦屏障，因此能起到更好的療效；2、在處方篩選上，為了減少輔料的用量，本發(fā)明摒棄了傳統(tǒng)的采用提取過的藥材殘?jiān)蠓圩鲚o料的方法，而適當(dāng)?shù)牟捎昧烁现苄运幬镄再|(zhì)的化學(xué)輔料，通過試驗(yàn)，最大程度的降低了輔料的用量，減少了病人的服用劑量，也節(jié)約了成本；3、在劑型設(shè)計(jì)上，也充分考慮到藥物的特點(diǎn)，以及產(chǎn)品的穩(wěn)定性，經(jīng)濟(jì)性，服用的方便性等，采用與藥物性質(zhì)更符合的口服制劑，優(yōu)選膠囊制劑；4、對腦中風(fēng)及心血管等方面的疾病具有良好的治療效果。圖14號樣品不同相對濕度下顆粒吸濕百分率；圖26號樣品不同相對濕度下顆粒吸濕百分率；圖37號樣品不同相對濕度下顆粒吸濕百分率。具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1本發(fā)明的中藥提取物的制備方法如下取水蛭、地龍各50g，用500g、70%乙醇(體積濃度)提取2次，每次1.5h，濾過，回收濾液，濃縮，得干膏。實(shí)施例2本發(fā)明的中藥提取物的制備方法如下取水蛭lg、地龍100g，用450g、50%乙醇(體積濃度)提取1次，每次lh，濾過，回收濾液，濃縮，得干膏。實(shí)施例3本發(fā)明的中藥提取物的制備方法如下取水蛭100g、地龍lg，用1000g、95%乙醇(體積濃度)提取3次，每次3h，濾過，回收濾液，濃縮，得干膏。實(shí)施例4本發(fā)明的中藥提取物的制備方法如下取水蛭、地龍各50g，用1200g、80%乙醇(體積濃度)提取2次，每次2h，濾過，回收濾液，濃縮，得干膏。實(shí)施例5本發(fā)明中藥制劑通過以下方法制備將過4號篩的干膏粉(按照實(shí)施例1方法得到)6g和微晶纖維素3g、淀粉Ig混合，用乙醇潤濕，制成軟材，用10目篩制粒，8目篩整粒，65目篩去細(xì)粉，得顆粒劑。實(shí)施例6本發(fā)明中藥制劑通過以下方法制備將過4號篩的干膏粉(按照實(shí)施例1方法得到)6g和微晶纖維素3g、淀粉Ig混合，用乙醇潤濕，制成軟材，18-22目篩制粒，填充入膠囊，得膠囊劑。實(shí)施例7本發(fā)明中藥制劑通過以下方法制備將過4號篩的干膏粉(按照實(shí)施例1方法得到)6g和微晶纖維素3g、淀粉Ig混合，用乙醇潤濕，制成軟材，16-18目篩制粒，壓片即得片劑。實(shí)施例8本發(fā)明中藥制劑通過以下方法制備將過4號篩的干膏粉(按照實(shí)施例1方法得到)6g，與氫化大豆油1份，黃蠟1份，植物油4份，0.1%的吐溫80，研磨，壓制成軟膠囊即得。實(shí)施例9將過4號篩的干膏粉(按照實(shí)施例1方法得到)6g，乳糖8g，甘露醇4g，低取代羥丙基纖維素4g，微晶纖維素3g，微粉硅膠0.5g，酒石酸0.5g，研細(xì)，過80目篩，混合均勻，將聚乙烯吡咯烷酮溶于適量50%乙醇中作為粘合劑，制成軟材，濕法制粒，60°C鼓風(fēng)烘干，過篩后，加硬脂酸鎂0.3g，整粒，混勻，壓片，即得口崩片。實(shí)施例10稱取PEG4000和PEG6000(23重量比)18g，加熱融化，加入過4號篩的干膏粉(按照實(shí)施例1方法得到)6g，不斷攪拌使熔融，趁熱轉(zhuǎn)移至滴丸機(jī)貯液池，滴制溫度85°C，滴距6cm，滴速40滴/min，冷卻劑為二甲硅油，高度85cm，溫度10°C，收集滴丸，以濾紙吸去滴丸表面的冷卻劑，干燥，即得滴丸。實(shí)施例11將過4號篩的干膏粉(按照實(shí)施例1方法得到)6g，蔗糖乳糖甘露醇(3:1:1重量比)18g，，按等量遞加法放置在混合機(jī)中混合，加1%。硬脂酸鎂，混合均勻，壓片，即得咀嚼片。實(shí)施例12將過4號篩的干膏粉(按照實(shí)施例1方法得到)6g，羧甲淀粉鈉2g交聯(lián)PVP3g，低取代羥丙基纖維素4g，微晶纖維素4g，混勻，過100-120目篩，再與其他輔料混勻，制粒，最后加入交聯(lián)PVP2g，硬脂酸鎂0.6g微粉硅膠0.4g，混勻，壓片，即得分散片。實(shí)驗(yàn)例1提取工藝考察本發(fā)明中藥提取物在提取時(shí)，以次黃嘌呤和藥效學(xué)為指標(biāo)，對乙醇濃度、乙醇用量，提取時(shí)間進(jìn)行了考察。稱取水蛭50g、地龍50g，共100g，9份，按表1進(jìn)行熱回流提取，放冷，濾過，合并相對應(yīng)的濾液，回收乙醇至無醇味，濃縮定容至250ml。用于次黃嘌呤的測定，計(jì)算提得量。結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3、4。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表3方差分析表<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>結(jié)論由表3可知因素A對試驗(yàn)結(jié)果有顯著影響，結(jié)合藥理的藥效結(jié)果，正交試驗(yàn)表中的2號樣品的藥效最佳，因此確定最優(yōu)提取方案為A1B2Cy即70%乙醇，10倍量提取，每次1.5小時(shí)。提取次數(shù)考察取水蛭、地龍各50g，分別用70%乙醇、10倍量、1.5h/次，分別提取1、2、3次，濾過，分別回收濾液，濃縮，定容至250ml，搖勻，即得，備用。以次黃嘌呤含量為指標(biāo)，確定提取次數(shù)。結(jié)果見表4:表4提取次數(shù)考察<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由上表可知提取2次的次黃嘌呤的提得量是提取三次的92%，所以結(jié)合實(shí)際的大生產(chǎn)，確定為提取2次。提取工藝為70%乙醇，10倍量，提取2次，每次1.5h。實(shí)驗(yàn)例2本發(fā)明中藥口服制劑成型工藝考察1、對不同的輔料及配比進(jìn)行考察將過4號篩的干膏粉(實(shí)施例1得到的提取物)和不同的輔料按不同的比例混合，用乙醇潤濕，制成軟材，用18目篩制粒。結(jié)果見表5:表5不同的輔料配比及結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>2、堆密度的測定將過篩后的顆粒放入干燥的IOml量筒中，輕輕振動至刻度，然后將量筒中的顆粒稱重為M(g)，兩者的比值即為堆密度。堆密度=M/V，結(jié)果見表6表6各樣品的堆密度<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>3、休止角的測定采用固定漏斗法，將2只漏斗串聯(lián)并固定于水平放置的坐標(biāo)紙上2cm的高度處，小心地將顆粒沿漏斗壁倒入最上的漏斗中直到坐標(biāo)紙上形成的顆粒圓錐體尖端接觸到漏斗口為止，由坐標(biāo)紙測出圓錐底部的直徑(2R)，計(jì)算出休止角tga=H/R。做3次，計(jì)算平均值。結(jié)果見表7:表7各樣品的休止角<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>4、臨界相對濕度的確定平衡吸濕時(shí)間的測定分別稱取4、6、7號樣品約lg，平鋪于干燥至恒重的秤量瓶中，干燥至恒重，精密秤定，打開瓶蓋，置盛有氯化鈉過飽和溶液的玻璃干燥器內(nèi)(相對濕度為75.3%)，于251恒溫保存，分別于2、4、8、12、18、24、36、48、60、72、9611取出秤量瓶，精密秤定重量，計(jì)算吸濕率。結(jié)果4份樣品均在72h達(dá)到吸濕平衡。臨界相對濕度的測定分別稱取4、6、7號樣品，每份約lg，平鋪于干燥至恒重的秤量瓶中，干燥至恒重，精密秤定，打開瓶蓋，置盛有不同鹽過飽和溶液的玻璃干燥器內(nèi)，于25°C的恒溫放置保存72h，取出秤量瓶，精密秤定重量，計(jì)算吸濕率，結(jié)果見表8。以吸濕率對相對濕度作圖得吸濕平衡曲線，見附圖1、2、3。表8臨界相對濕度測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由以上各圖可知，4號樣品的臨界相對濕度約為70%、6號樣品的臨界相對濕度約為75%，7號樣品的臨界相對濕度約為60%。結(jié)論根據(jù)以上的各試驗(yàn)數(shù)據(jù)，考慮到實(shí)際的工業(yè)大生產(chǎn)的成本和服用量，確定最優(yōu)的制劑成型工藝為干膏微晶纖維素淀粉(6:3:1)，用乙醇潤濕，根據(jù)劑型不同，采用不同的目篩制粒。實(shí)驗(yàn)例3本發(fā)明中藥提取物對小鼠腦缺血的影響作用1實(shí)驗(yàn)?zāi)康目疾毂景l(fā)明中藥提取物對尾靜脈注射過氧化物引起小鼠腦缺氧模型的影響作用。2實(shí)驗(yàn)材料2.1受試物由中國醫(yī)藥研究開發(fā)中心有限公司天然藥物研發(fā)部提供，批號20080303。1號藥液(50%醇提)黃棕色液體200ml，-20°C保存，臨用時(shí)解凍后應(yīng)用(用蒸餾水適量，最終配成含生藥材66mg/ml)。2號藥液(水提)黃棕色液體200ml，-20°C保存，臨用時(shí)解凍后應(yīng)用(含生藥材66mg/ml)。3號藥液(70%醇提)黃棕色液體200ml，-20°C保存，臨用時(shí)解凍后應(yīng)用(使用實(shí)施例1所得干膏配制，用蒸餾水適量，最終配成含生藥材66mg/ml)。4號藥液(細(xì)粉_藥材生藥粉)黃白色細(xì)粉40g，常溫保存，臨用時(shí)用0.5%CMC配制成所需濃度(含生藥材66mg/ml)灌胃給予動物。2.2藥品與試劑過氧化氫叔丁基國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，黃色透明狀液體，易燃易爆品遠(yuǎn)離熱源，火種，處于陰涼通風(fēng)處保存。批號T20060822。過氧化氫國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，無色透明液體，含量30%，無色透明液體，批號20070907。維腦路通片北京大恒制藥有限公司，片劑，規(guī)格60mg/片。臨用時(shí)研磨成藥粉后用0.5%CMC配制成所需濃度(60mg/ml)灌胃給予動物。批號071214。2.3實(shí)驗(yàn)動物SPF級ICR小鼠60只，雌雄各半，體重1822g；動物由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司提供，許可證編號SCXK(京)2007-0001。3實(shí)驗(yàn)方法3.1實(shí)驗(yàn)原理利用尾靜脈注射過氧化物及缺氧引起的血液內(nèi)高氧化狀態(tài)導(dǎo)致小鼠TIA樣發(fā)作為動物模型，觀察本發(fā)明中藥提取物的治療和保護(hù)作用。3.2實(shí)驗(yàn)過程取體重1822gSPF級ICR小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為7組①陽性對照組；②模型對照組；③⑦供試品1號藥液、2號藥液、3號藥液、4號藥液。陽性對照組灌胃給予300mg/kg的維腦路通溶液，空白組給等量溶酶，各給藥組分別給20%(體積用量)的供試品溶液(給藥劑量分別為6g/kg)，給藥5d，2次/d。給藥第6d，在給藥30min后，采用尾靜脈注射過氧化物(過氧化氫叔丁基/過氧化氫)的方法，每間隔24小時(shí)給藥7.5ml/kg,在尾靜脈給藥后觀察lOmin，再把小鼠置于容積為500ml的密封容器中觀察15min，連續(xù)給藥并觀察4d，1次/d。觀察給藥后的動物反應(yīng)的TIA樣發(fā)作并對其評分，同時(shí)記錄給藥后的死亡率。評分標(biāo)準(zhǔn)表9:表9TIA樣發(fā)作評分標(biāo)準(zhǔn)__<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>4實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明中藥提取物對尾靜脈注射過氧化物后導(dǎo)致小鼠TIA樣發(fā)作為動物模型有一定的保護(hù)作用，四個(gè)藥物對模型動物的TIA樣發(fā)作癥狀均有一定的抑制作用，反應(yīng)在其癥狀評分都低于對應(yīng)的模型組，其中24號藥液對該反應(yīng)的抑制作用最為明顯，其反應(yīng)癥狀評分與模型組均顯著性的降低，并與模型組比較有顯著性差異(P<0.05)，其中以3號藥物和4號藥物作用最為明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表10。同時(shí)從動物的病死率上判斷，四個(gè)藥物組的病死率均低于模型組，其中以3號藥和4號藥的效果最為明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表11。表10本發(fā)明中藥提取物給藥后癥狀評分統(tǒng)計(jì)表模型組陽性組1號藥2號藥3號藥4號藥第一天5.6±1.83.2士2.0*3.3±2.5*3.3士2.6*3.7土2.2*3.0土2.8*第二天7.0±0.04.1±2.6*4.0±2.8*4.1士2.5*5.1±2.4*4.0±3.4*第三天8.0±1.42.4士2.1*5.4±2.53.4±1,5*3.6±2.4*2.7±1.9*第四天7.5±0.72.4±1.6**6.0土2.62.6±2.4**2.2±1.7**2.8+2.7**合計(jì)28.112.118.713.414.612.5與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01表11本發(fā)明中藥提取物給藥后病死率統(tǒng)計(jì)表模型組陽性組1號藥2號藥3號藥4號藥第一天0/100/100/100/100/100/10第二天8/101/101/103/101/101/10第三天0/20/94/92/72/92/9第四天0/22/91/50/51/71/7合計(jì)8/103/106/105/104/104/105結(jié)論4個(gè)供試樣品對尾靜脈注射過氧化物后導(dǎo)致小鼠TIA樣發(fā)作為動物模型均有一定的保護(hù)作用，其中以3號藥和4號藥的效果最為明顯。實(shí)驗(yàn)例41實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶Ρ景l(fā)明的中藥口服膠囊，進(jìn)行藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)比較研究，以確定本品口服是否有效。2實(shí)驗(yàn)材料2.1受試物由牡丹江友搏制藥廠提供，批號070731；供試品A水蛭、地龍寡肽液兩瓶，黑棕色液體，生藥含量分別為0.81g/ml和1.4g/ml，臨用時(shí)用蒸餾水配制成所需濃度，4V保存。供試品B疏血通注射液，黃色透明狀液體，生藥含量為0.5g/ml，臨用時(shí)用蒸餾水配制成所需濃度，4°C保存。供試品C實(shí)施例6所得膠囊(下稱疏血通膠囊)，臨用時(shí)用0.5%CMC(羧甲基纖維素)配制成所需濃度，4°C保存。供試品D水蛭、地龍殘?jiān)?，深灰色粉末，生藥含量為llg/g，臨用時(shí)用0.5%CMC配制成所需濃度，4°C保存。2.2藥品與試劑凝血酶原時(shí)間(PT)測定試劑盒上海太陽生物技術(shù)有限公司，批號105053凝血酶時(shí)間(TT)測定試劑盒上海太陽生物技術(shù)有限公司，批號121018阿司匹林(ASP)白色粉末，沈陽萬能制藥廠生產(chǎn)，批號20020808ADPsigma進(jìn)口分裝，批號073K70072.3儀器QX-200全血血小板聚集儀上海醫(yī)大儀器廠2.4動物SPF級ICR小鼠100只，雌雄各半，體重1822g；SPF級雄性SD大鼠200只，體重250300g;動物由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司提供，許可證編號SCXK(京)2007-0001。3實(shí)驗(yàn)方法3.1疏血通膠囊對小鼠凝血系統(tǒng)的影響取體重1822gSPF級ICR小鼠100只，雌雄各半，隨機(jī)分為十組①陽性對照組；②空白對照組；③⑩供試品A、B、C、D高低劑量組。陽性對照組灌胃給予100mg/kg的ASP溶液，空白組給等量溶酶，各給藥組高低劑量組分別給予20%及5%(給藥劑量分別為6g/kg及1.5g/kg)的供試品溶液，給藥體積為15ml/kg，給藥7d，2次/d。d7給藥30min后，利用尾靜脈采血測定凝血時(shí)間(CT)后，每只動物眼眶采血0.8Iml加入裝有0.109M的枸掾酸鈉的離心管中，3000rmp/min離心IOmin后，取血漿檢測凝血酶原時(shí)間(PT)及凝血酶時(shí)間(TT)，結(jié)果見表12。3.2疏血通膠囊對大鼠凝血系統(tǒng)的影響取體重250300gSPF級SD雄性大鼠100只，隨機(jī)分為十組①陽性對照組；②空白對照組；③⑩供試品A、B、C、D高低劑量組。陽性對照組灌胃給予70mg/kg的ASP溶液，空白組給等量溶酶，各給藥組高低劑量組分別給予20%及5%(給藥劑量分別為4.Og/kg及1.Og/kg)的供試品溶液，給藥體積為10ml/kg，給藥7d，2次/d。給藥前，動物眼眶靜脈取血23ml，測定凝血時(shí)間(CT)后，將0.8Iml血液分裝于裝有0.109M的枸掾酸鈉的離心管中，3000rmp/min離心IOmin后，取血漿檢測凝血酶原時(shí)間(PT)及凝血酶時(shí)間(TT)。d7給藥30min后，動物眼眶靜脈取血測定凝血時(shí)間(CT)后，每只動物眼眶采血0.8Iml加入裝有0.109M的枸掾酸鈉的離心管中，3000rmp/min離心IOmin后，取血漿檢測凝血酶原時(shí)間(PT)及凝血酶時(shí)間(TT)，結(jié)果見表13、14。3.3疏血通膠囊對ADP引起的大鼠血小板聚集的影響取體重250300gSPF級SD雄性大鼠100只，隨機(jī)分為十組①陽性對照組；②空白對照組；③⑩供試品A、B、C、D高低劑量組。陽性對照組灌胃給予70mg/kg的ASP溶液，空白組給等量溶酶，各給藥組高低劑量組分別給予20%及5%(給藥劑量分別為4.Og/kg及1.Og/kg)的供試品溶液，給藥體積為10ml/kg，給藥7d，2次/d。d7給藥30min后，動物眼眶靜脈取血測定凝血時(shí)間(CT)后，繼續(xù)取血0.81.Oml分裝于裝有200U/ml肝素的離心管內(nèi)代測。實(shí)驗(yàn)時(shí)，取0.5ml血樣加入專有的試管中，再用定量移液器在血樣中加入0.5ml的臺式液，37°C溫育5min后，加入lmmol/L的ADP溶液5μ1，觀察5min內(nèi)的最大聚集程度。分別記錄30s、60s、90s的血小板聚集程度，并記錄達(dá)到最大聚集程度的時(shí)間點(diǎn)和達(dá)到1/2最大聚集程度的時(shí)間點(diǎn)。所有樣本的血小板聚集實(shí)驗(yàn)均在4h內(nèi)完成。臺式液(pH=7.4)的制備取NaCl8.Og、MgCl2.6H200.427g、CaCl2O.2g、KCl0.2g、葡萄糖lg、NaHC031.5g,NaH2PO4.2H200.065g、肝素2000U，用蒸餾水定容至1000ml，即為該實(shí)驗(yàn)專用的緩沖溶液，4°C保存。結(jié)果見表15。3.4疏血通膠囊對大鼠靜脈血栓的影響取體重250300gSPF級SD雄性大鼠100只，隨機(jī)分為十組①陽性對照組；②空白對照組；③⑩供試品A、B、C、D高低劑量組。陽性對照組灌胃給予70mg/kg的ASP溶液，空白組給等量溶酶，各給藥組高低劑量組分別給予20%及5%(給藥劑量分別為4.Og/kg及1.Og/kg)的供試品溶液，給藥體積為10ml/kg，給藥8d，2次/d。d8給藥30min后，3.5%水合氯醛(10ml/kg，ip)麻醉動物后開腹，分離下腔靜脈，與左腎靜脈下方用手術(shù)線結(jié)扎下腔靜脈，縫合腹壁，2h、6h后重新打開腹腔，取出血栓除去浮血后稱濕重，60°C干燥4h，冷卻后稱干重，計(jì)算血栓重量及血栓抑制率。結(jié)果見表16、17。表12疏血通膠囊對小鼠凝血系統(tǒng)的影響作用(I±s,η=10)組別劑量(g/kg)TT(S)_PT(s)_CT(s)6.015.4±3.311.2+1.963.8+18.4供試品A1.513.2+4.111.8+1.860.1±16.06.014.3±3.612.5±2.469.2+15.6供試品B1.511.8+3.710.4+2.261.8±16.36.014.0±3.911.6±1.784.5±26.4*供試品C1.513.5+4.011.8+1.971.0±22.86.012.4+4.112.0±0.560.2+18.6供試品D1.513.6+3.210.6±1.758.2+12.7ASP0.114.0±3.911.1±1.780.0+21.6*空白對照_—_14.8+3.112.3±1.659.7±14.8與空白對照比較，*P<0.05，**P<0.Ol0表13疏血通膠囊對大鼠凝血系統(tǒng)的影響作用給藥前測量值±s,η=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>與空白對照比較，*P<0.05，**P<0.01表15疏血通膠囊對大鼠血小板聚集的影響作用(S±s,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>與空白對照比較，*P<0.05，**P<0.01表16疏血通膠囊對大鼠下腔靜脈結(jié)扎2h后靜脈血栓的影響作用(^±s,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>與空白對照比較，*P<0.05，**P<0.01表17疏血通膠囊對大鼠下腔靜脈結(jié)扎6h后靜脈血栓的影響作用(^±s,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>實(shí)驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明膠囊對凝血系統(tǒng)的有較明顯的影響作用對小鼠及大鼠的凝血時(shí)間有較明顯的延長作用，并且對大鼠的凝血酶時(shí)間(TT)，有較明顯的延長作用；對ADP引起的大鼠血小板聚集均有較明顯的抑制作用；對大鼠靜脈血栓形成的抑制作用均較明顯。權(quán)利要求一種中藥提取物，選用水蛭和地龍為原料藥，其特征在于，該提取物由如下方法制備1)原料藥的重量份水蛭1-100份、地龍1-100份；2)按原料藥的重量份取水蛭、地龍，用50-95％乙醇(V/V濃度)，相對于水蛭和地龍的總重量4-12倍量，提取1-3次，每次1-3h，濾過，回收濾液，濃縮，得干膏。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥提取物，其特征在于，該提取物由如下方法制備1)原料藥的重量份水蛭50份、地龍50份；2)取上述重量份的水蛭、地龍，用70%乙醇(V/V濃度)，相對于水蛭和地龍的總重量10倍量，提取2次，每次1.5h，濾過，回收濾液，濃縮，得干膏。3.一種包含如權(quán)利要求1或2所述中藥提取物的口服制劑，其特征在于，它包括下述重量比的組分干膏微晶纖維素淀粉為6:3:1。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述中藥提取物的口服制劑，其特征在于，所述制劑為膠囊劑、顆粒劑、片劑，軟膠囊，滴丸，口崩片、咀嚼片或分散片。5.一種制備如權(quán)利要求4所述口服制劑的方法，其特征在于，包括如下步驟將干膏粉和微晶纖維素、淀粉按比例混合，用乙醇潤濕，制成軟材，用合適的目篩制粒。全文摘要本發(fā)明涉及一種中藥提取物，包含該提取物的口服制劑及該制劑的制備方法。該中藥提取物選用水蛭和地龍為原料藥，由如下方法制備1)原料藥的重量份水蛭1-100份、地龍1-100份；2)按原料藥的重量份取水蛭、地龍，用50-95％乙醇(V/V濃度)，4-12倍量(相對于水蛭和地龍的總重量)，提取1-3次，每次1-3h，濾過，回收濾液，濃縮，得干膏。本發(fā)明提取物更容易吸收通過血腦屏障，能起到更好的療效；本發(fā)明口服制劑最大程度的降低了輔料的用量，減少了病人的服用劑量，也節(jié)約了成本；對腦中風(fēng)及心血管等方面的疾病具有良好的治療效果。文檔編號A61K35/62GK101829148SQ200910079760公開日2010年9月15日申請日期2009年3月10日優(yōu)先權(quán)日2009年3月10日發(fā)明者李振國申請人:李振國