專利名稱：具有防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于白藜蘆醇藥物制劑的制備領(lǐng)域，特別涉及一種具有防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)
炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的制備方法。
背景技術(shù)：
白藜戸醇(Resveratrol)是植物在受到應(yīng)激時(shí)自身合成的一種植物抗毒素，廣泛 存在植物中，現(xiàn)在至少在21個(gè)科、31個(gè)屬的72種植物中發(fā)現(xiàn)有白藜蘆醇存在。但從文獻(xiàn)報(bào) 道情況來(lái)看，目前研究最多、最被關(guān)注的只有虎杖、葡萄、花生等少數(shù)幾種中草藥和可食用 的植物。 目前，提取天然白藜蘆醇多以中藥材虎杖(根)為原料。由于中藥虎杖種植容 易，產(chǎn)量高、價(jià)格低，來(lái)源方便，后續(xù)資源有保障，研究人員做了很多研究，如CN1251361A， 一種從中藥虎杖中提取白藜蘆醇的工藝；01126769. O，一種從虎杖中制備白藜蘆醇的方法； 02114583. O—種從虎杖中提取白藜戸醇的制備方法；03147908. l，一種從虎杖中制備白藜 戸醇的方法；200510027573. 4，從中草藥植物虎杖中制備白藜戸醇的方法；
200610161949. 5， 一種從中藥虎杖中分離純化白藜蘆醇苷和白藜蘆醇的方法；
200810032067. 8，從虎杖中提取純度98 %以上的白藜蘆醇的工藝； 200710030601. 7， 一種從新鮮虎杖中提取、純化白藜蘆醇的工藝方法。但是以上技術(shù)均未解 決工業(yè)化生產(chǎn)和藥用問題。 白藜蘆醇具有多方面的保健功能，具有防治心血管疾病、防癌、抗病毒及免疫調(diào)節(jié) 作用，其作用主要表現(xiàn)為它的抗氧化特性。在醫(yī)藥、食品、化妝等行業(yè)有著廣泛應(yīng)用前景。近
年來(lái)，歐美各國(guó)已將其開發(fā)為保健食品上市，有片齊U、膠囊、口服液等多種劑型。最近，國(guó)內(nèi) 也出現(xiàn)了 一些白藜蘆醇產(chǎn)品，如"天獅活力膠囊"、"紫金膠囊"、"納貝益生膠囊"等；歐美已 批準(zhǔn)上市的白藜蘆醇高端制劑產(chǎn)品(包括藥品及保健品)已有千余種，全球使用者約2億 人，并且，平均以每年5000萬(wàn)人的速度增長(zhǎng)。估計(jì)未來(lái)白藜蘆醇制劑的銷售將達(dá)到5億 8億美元，形成非常巨大的產(chǎn)業(yè)。 由于其具有調(diào)節(jié)免疫功能，在治療免疫性疾病有一定療效、副作用小的優(yōu)點(diǎn)，文獻(xiàn) 報(bào)道，200510031435. 3，白藜蘆醇在治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、非感染性炎癥中的應(yīng)用。然而，沒有 解決應(yīng)用到人體的制劑及制備方法，以及人體口服的劑量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種具有防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的白藜蘆醇緩 釋膠囊的制備方法，該制備方操作簡(jiǎn)單，原料來(lái)源廣泛，成本低，對(duì)環(huán)境友好，在制備過程中 加入纖維素酶預(yù)處理，大大提高了有效成分的轉(zhuǎn)移率，確保了提取的白藜蘆醇的純度，適合 工業(yè)化生產(chǎn)。 本發(fā)明的一種具有防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的制備方法，包括
(1)白藜蘆醇的提取
粉碎虎杖粉得10-30目的粗粉，加入O. 1-1. 0% (W/V)的纖維素酶(市售)的溶液 于20-4(TC預(yù)處理30-60小時(shí)，然后用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，加水，用大孔吸附樹 脂分離，再傾入水和15% 75%的乙醇進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，加入0. 1-0.5% (W/V)的活性炭脫色，最后用乙醇反復(fù)結(jié)晶得白藜蘆醇；
(2)緩釋膠囊的制備 速釋顆粒白藜蘆醇50-100g、乳糖20-50g和淀粉20_50g分別過100目，混合均 勻，加入1_10%的淀粉漿制成軟材，過40目篩，干燥，備用； 緩釋顆粒白藜戸醇50-100g、羥丙基甲基纖維素30-60g、甲基纖維素10-50g、乳 糖10-20g分別過100目，混合均勻，加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP-K30)的5%乙醇溶液潤(rùn)濕， 制成軟材，過40目篩，干燥，備用； 將上述速、緩二顆粒按質(zhì)量比1 : l混合，填充膠囊。 所述步驟(1)中藥粉與0. 1-1. 0 % (W/V)纖維素酶液的質(zhì)量體積比為 lg : 1. 0-2. Oml ; 所述步驟(1)中的大孔吸附樹脂的用量為虎杖粉質(zhì)量的0. 5-2倍； 所述步驟(1)中的分離是指用D型大孔吸附樹脂柱子，流速lL/分鐘，用去離子水
洗脫至無(wú)色； 所述步驟(1)中的洗脫是指先后用15wt^乙醇和75wt^乙醇進(jìn)行洗脫。 本發(fā)明提供了從虎杖提取、分離白藜蘆醇的方法，用纖維素酶預(yù)處理，將糖苷水解
使白藜蘆醇游離，再用乙醇萃取，有效成分轉(zhuǎn)移率高，雜質(zhì)少；另因?yàn)榇罂孜綐渲蛛x效
果好，成本低，易生產(chǎn)，本發(fā)明制備白藜蘆醇的方法中主要使用D、DA系列，確定大孔吸附樹
脂用量為藥材量的0. 5-2倍的最佳用量，充分確保吸附有效成分，減少樹脂的浪費(fèi)。 通過對(duì)白藜蘆醇在對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的防治作用、對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎繼發(fā)性
病變的預(yù)防作用、對(duì)II型膠原引起大鼠風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎作用研究等三個(gè)方面作用研究，證明
該藥在治療關(guān)節(jié)炎方面具有較好的治療作用，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明無(wú)論對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎還是
對(duì)大鼠由II型膠原誘導(dǎo)的風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎多具有治療作用，同時(shí)該藥具有抗炎、鎮(zhèn)痛作用。
這些實(shí)驗(yàn)充分證明了該藥具有多個(gè)作用靶點(diǎn)、多種治療作用，是一個(gè)非常獨(dú)特的藥物。 有益效果 本發(fā)明的制備方操作簡(jiǎn)單，原料來(lái)源廣泛，成本低，對(duì)環(huán)境友好，在制備過程中加 入纖維素酶預(yù)處理，大大提高了有效成分的轉(zhuǎn)移率，確保了提取的白藜蘆醇的純度，適合工 業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定 的范圍。 實(shí)施例1 干燥虎杖200kg，粉碎成粗粉(10目)，用0. 1%的纖維素酶液(藥粉酶液= lg : 1.3ml)預(yù)處理，25t:，30小時(shí)，處理過的藥粉，用乙醇1200L回流提取，提取液回收乙醇，加水，用D101-I型大孔吸附樹脂200kg的柱子，流速lL/分鐘，用去離子水洗脫至無(wú)色， 再用15%乙醇200L洗脫，及用75%乙醇500L洗脫，收取75%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮 液用0. 1-0. 5% (W/V)的活性炭脫色，乙醇反復(fù)結(jié)晶得白藜蘆醇2. 2kg。
實(shí)施例2 干燥虎杖200kg，粉碎成粗粉(20目)，用0.3%的纖維素酶液(藥粉酶液= lg : 1.5ml)預(yù)處理，3(TC，48小時(shí)，處理過的藥粉，用乙醇1400L回流提取，提取液回收乙 醇，加水，用D101-I型大孔吸附樹脂250kg的柱子，流速1L/分鐘，用去離子水洗脫至無(wú)色， 再用15 %乙醇200L洗脫，及用75 %乙醇500L洗脫，收取75 %乙醇洗脫液，回收乙醇，用 0. 1-0. 5% (W/V)的活性炭脫色，乙醇反復(fù)結(jié)晶得白藜蘆醇2. 4kg。
實(shí)施例3 干燥虎杖200kg，粉碎成粗粉(30目)，用0.5%的纖維素酶液(藥粉酶液= lg : 1.8ml)預(yù)處理，35t:，60小時(shí)，處理過的藥粉，用乙醇1600L回流提取，提取液回收乙 醇，加水，用D101-I型大孔吸附樹脂300kg的柱子，流速1L/分鐘，用去離子水洗脫至無(wú)色， 再用15 %乙醇200L洗脫，及用75 %乙醇500L洗脫，收取75 %乙醇洗脫液，回收乙醇，用 0. 1-0. 5% (W/V)的活性炭脫色，乙醇反復(fù)結(jié)晶得白藜蘆醇2. 5kg。


實(shí)施例4 白藜蘆醇緩釋膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)處方每粒含白藜蘆醇120mg。 速釋顆粒 品名規(guī)格用量備注
白藜蘆醇》98.5%70g主藥乳糖藥用35g輔料
淀粉 藥用 30g 輔料 緩釋顆粒
a々規(guī)格用量備注
白藜盧醇》98.5%50g主藥
羥丙基甲基纖維素藥用(HPMC-K4M)50g輔料
甲基纖維素藥用EC25g輔料
乳糖藥用10g輔料
聚乙烯吡咯烷酮藥用(PVP-K30) 5%乙醇溶液QS黏合劑制備工藝
速釋顆粒；將主藥與輔料分別過IOO目，混合均勻，用5%的淀粉漿制成軟材，過40 目篩，干燥，備用。 緩釋顆粒；將主藥與輔料分別過100目，混合均勻，用適量PVP-K305 %乙醇溶液潤(rùn) 濕，制成軟材，過40目篩，干燥，備用。 將速、緩二顆粒，等分混合，填充1號(hào)膠囊，每粒0. 3g。
性狀膠囊劑，內(nèi)容物為白色至類白色顆粒狀，味微苦。鑒別取本品內(nèi)容物0. lg，用乙醇2ml溶解，乙醇溶液，滴在濾紙上，干燥后，噴灑
三氯化鐵試液，顯紫藍(lán)色。檢查含量測(cè)定
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 色譜杜(4. 6X250mm);填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠。
流動(dòng)相甲醇水=40 : 60 ;
流速1. OmL/min ; 檢測(cè)波長(zhǎng)304nm ;進(jìn)樣最20 ii L ;柱溫25°C 。
理論板數(shù)按白藜蘆醇峰計(jì)算應(yīng)不低于2500. 對(duì)照品溶液的制備精密稱取白藜蘆醇對(duì)照品5mg，加甲醇制成每lml含50 y g的 溶液，即得。 供試品溶液的制備取本品10粒，取出內(nèi)容物，精密稱取30mg，置100ml量瓶，加 甲醇至刻度，搖勻，取lml，置20ml量瓶，加甲醇至刻度，即得。 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液(用微孔(0.45m)濾過)各 20 iU，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。 本品每粒含白藜蘆醇(C14H1203)計(jì)，應(yīng)在108-132mg內(nèi)。
適應(yīng)癥適用于成人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，有改善病情作用。
用法與用量每次l粒，一日2次。或遵醫(yī)囑。
規(guī)格每粒0.3g，24粒/盒(瓶)。
貯藏密封。
實(shí)施例5白藜戸醇(090701)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)(使用DAS 2. 1. 1計(jì)算)
統(tǒng)計(jì)矩參數(shù)單位低劑量中劑量高劑量
(20mg/kg)(60mg/kg)(180mg/kg)
AUC(O-t)mg/L*h449.815991547.881
AUC(O-")mg/L*h486.905699.7821641.215
MRT(O-t)h3.8394.4534.151
MRT(O-")h4.7976.374.767
t1/2zh3.0673.9932.072
丁m3Xh0.50.51.5
Vz/FL/kg0.1820.4940.328
CLz/FL/h/kg0.0410.0860.11
GtTl3Xmg/L182.4207.5166667313.權(quán)利要求
一種具有防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的制備方法，包括(1)白藜蘆醇的提取粉碎虎杖粉得10-30目的粗粉，加入0.1-1.0％(W/V)的纖維素酶的溶液于20-40℃預(yù)處理30-60小時(shí)，然后用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，加水，用大孔吸附樹脂分離，再傾入水和15％～75％的乙醇進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，加入0.1-0.5％(W/V)的活性炭脫色，最后用乙醇反復(fù)結(jié)晶得白藜蘆醇；(2)緩釋膠囊的制備速釋顆粒白藜蘆醇50-100g、乳糖20-50g和淀粉20-50g分別過100目，混合均勻，加入1-10％的淀粉漿制成軟材，過40目篩，干燥，備用；緩釋顆粒白藜蘆醇50-100g、羥丙基甲基纖維素30-60g、甲基纖維素10-50g、乳糖10-20g分別過100目，混合均勻，加入聚乙烯吡咯烷酮的5％乙醇溶液潤(rùn)濕，制成軟材，過40目篩，干燥，備用；將上述速、緩二顆粒按質(zhì)量比1∶1混合，填充膠囊。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的制備 方法，其特征在于所述步驟(1)中藥粉與O. 1-1.0% (W/V)纖維素酶的溶液的質(zhì)量體積比 為lg : 1. 0-2. Oml。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的制備 方法，其特征在于所述步驟(1)中的大孔吸附樹脂的用量為虎杖粉質(zhì)量的0.5-2倍。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的制備 方法，其特征在于所述步驟(1)中的分離是指用D型大孔吸附樹脂柱子，流速1L/分鐘，用 去離子水洗脫至無(wú)色。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的制備 方法，其特征在于所述步驟(1)中的洗脫是指先后用15wt^乙醇和75wt^乙醇進(jìn)行洗脫。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的制備方法，包括粉碎虎杖粉得10-30目的粗粉，加入纖維素酶液預(yù)進(jìn)行處理，然后用乙醇回流提取，接著用大孔吸附樹脂分離，再傾入水和乙醇進(jìn)行洗脫后，加入活性炭脫色，最后用乙醇反復(fù)結(jié)晶得白藜蘆醇；分別制備速釋顆粒和緩釋顆粒，然后將速、緩二顆粒按質(zhì)量比1∶1混合，填充膠囊，即可。該制備方操作簡(jiǎn)單，原料來(lái)源廣泛，成本低，對(duì)環(huán)境友好，在制備過程中加入纖維素酶預(yù)處理，大大提高了有效成分的轉(zhuǎn)移率，確保了提取的白藜蘆醇的純度，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61P19/02GK101693022SQ20091019775
公開日2010年4月14日 申請(qǐng)日期2009年10月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月27日
發(fā)明者沈海龍, 趙正福 申請(qǐng)人:趙正福;