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      抑制血管新生的中藥組合物的制作方法

      文檔序號:11219581閱讀:1880來源:國知局

      本發(fā)明屬于中醫(yī)藥領(lǐng)域,尤其涉及一種具有抑制血管新生作用的中藥組合物。



      背景技術(shù):

      血管新生是指先前已經(jīng)存在于組織的成熟血管內(nèi)皮細(xì)胞通過增殖和游走以發(fā)芽或者嵌入的方式形成新的子代血管的過程。血管新生在癌癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、子宮內(nèi)膜炎、牛皮癬、子宮平滑肌瘤、良性前列腺肥大等幾十種疾病及炎癥反應(yīng)以及傷口愈合中都起到關(guān)鍵作用。正常情況下,血管新生是由血管生成促進(jìn)因子和血管生成抑制因子共同調(diào)節(jié)的,在人體正常代謝中,二者平衡有序,相互調(diào)控。在特定的時期,如胚胎形成、創(chuàng)傷修復(fù)和月經(jīng)周期等血管生成才會發(fā)生。然而,在疾病發(fā)生時,生長因子失衡,使得血管生成的促進(jìn)因子表達(dá)或作用強于抑制因子,導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞激活,血管生成表型形成,從而引起血管過度生長從而導(dǎo)致了病理性的血管生成,包括腫瘤、心血管疾病、糖尿病等。

      中醫(yī)藥從絡(luò)病的角度治療與血管新生相關(guān)的疾病有著有著悠久的歷史,中醫(yī)理論認(rèn)為:“絡(luò)道亢變”所致“血管新生”是腫瘤、心血管疾病等重大疾病的共性病理環(huán)節(jié)。抑制血管新生藥物是阻斷心血管疾病病變進(jìn)程,“餓死腫瘤”等的重要治療途徑,具有重要的科學(xué)價值和重大的現(xiàn)實意義?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)對于腫瘤、心血管疾病等過程中的血管生成,目前缺乏理想的治療手段與藥物。中藥抗血管新生研究大多集中在單個靶點,對其具體的作用機制研究尚不明確。對單味藥物的機制研究比較多,而復(fù)方的研究相對較少,但往往復(fù)方的療效甚佳,既能遏制血管生長,又具備放化療增敏效應(yīng)。中藥有廉價、低毒、不良反應(yīng)小、提高免疫功能等特點,在抗血管新生方面有廣闊的前景



      技術(shù)實現(xiàn)要素:

      針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題,本發(fā)明提供一種抑制血管新生的中藥組合物。

      一種抑制血管新生的中藥組合物,按照君、臣、佐、使進(jìn)行組方,其特征在于:以白芷、香薷、赤芍為君藥;以椿皮、厚樸、龍葵、川斷為臣藥;以羌活、茯苓、石斛、莪術(shù)為佐藥;以辛夷、桂枝、金蕎麥、蒲公英為使藥;并且所述中藥組合物的配比如下:

      白芷20-30份、香薷10-18份、赤芍5-12份、椿皮8-12份、厚樸6-12份、龍葵6-12份、川斷5-12份、羌活5-12份、茯苓7-15份、石斛3-5份、莪術(shù)4-11份、辛夷1-6份、桂枝3-10份、金蕎麥1-3份、蒲公英3-5份。

      優(yōu)選的,所述的抑制血管新生的中藥組合物,其中,所述中藥組合物的配比具體如下:

      白芷20份、香薷10份、赤芍5份、椿皮8份、厚樸6份、龍葵6份、川斷5份、羌活6份、茯苓7份、石斛3份、莪術(shù)4份、辛夷1份、桂枝3份、金蕎麥1份、蒲公英3份。

      優(yōu)選的,所述的抑制血管新生的中藥組合物,其中,所述中藥組合物的配比具體如下:

      白芷30份、香薷18份、赤芍10份、椿皮10份、厚樸10份、龍葵8份、川斷7份、羌活6份、茯苓7份、石斛6份、莪術(shù)11份、辛夷6份、桂枝8份、金蕎麥3份、蒲公英4份。

      一種抑制血管新生的中藥組合物在抑制血管新生中的應(yīng)用。

      本發(fā)明的有益效果是:

      1)本發(fā)明所述中藥組合物科學(xué)配伍,簡便實用,藥物毒副作用小。

      2)本發(fā)明抑制血管新生的藥物組合物療效顯著,為臨床抑制血管新生提供了一種全新的選擇。

      附圖說明

      圖1為中藥組合物抑制腫瘤生長,治療過程中腫瘤體積的統(tǒng)計圖。

      具體實施方式

      下面結(jié)合實施例和附圖對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明,以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。

      實施例1:

      一種抑制血管新生的中藥組合物的配比具體如下:

      白芷20份、香薷10份、赤芍5份、椿皮8份、厚樸6份、龍葵6份、川斷5份、羌活6份、茯苓7份、石斛3份、莪術(shù)4份、辛夷1份、桂枝3份、金蕎麥1份、蒲公英3份。

      其制備方法為:

      將上述藥材放入砂鍋內(nèi),加6倍藥量的水浸泡1小時,水燒開后,用文火煎煮2小時,過濾藥液,即可服用。

      實施例2:

      一種抑制血管新生的中藥組合物的配比具體如下:

      白芷30份、香薷18份、赤芍10份、椿皮10份、厚樸10份、龍葵8份、川斷7份、羌活6份、茯苓7份、石斛6份、莪術(shù)11份、辛夷6份、桂枝8份、金蕎麥3份、蒲公英4份。

      其制備方法為:

      將上述藥材放入砂鍋內(nèi),加6倍藥量的水浸泡1小時,水燒開后,用文火煎煮2小時,過濾藥液,即可服用。

      實施例3:中藥組合物對雞胚絨毛尿囊膜(cam)血管生成的影響

      含藥血清的制備:sd大鼠分為中藥與生理鹽水灌胃組,每組20只。禁食、禁飲5h后,分別以中藥組合物水煎劑、生理鹽水灌胃,每次2ml,每天2次,間隔10h,連續(xù)灌胃5天。最后1天改為1次給予2ml,灌胃后2.5h,戊巴比妥鈉麻醉,自大鼠腹主動脈無菌采血,室溫靜置2h,置5℃冰箱5h。4℃,3000r·min-1離心40min,吸取上部淡黃色透明的血清,56℃,30min滅活。

      實驗過程:將種蛋60只于(38+0.5)℃孵育至第8天,在外殼上開窗,暴露尿囊膜。雞胚隨機分為2組,將明膠海綿作為載體,植于暴露的尿囊膜上,中藥組合物灌胃組、生理鹽水灌胃組大鼠血清,用hanks液稀釋,配成16%血清濃度,分別向載體加實驗組、對照組樣品40μl。加樣后繼續(xù)孵育,第20天將載體及其周圍的尿囊膜游離,平鋪于濾紙上,放大鏡觀察,并計數(shù)長入載體邊緣的血管數(shù)。

      結(jié)果:將藥物載體放在血管生成旺盛的cam上,藥物對血管生成的影響表現(xiàn)為,向載體方向生長的血管數(shù)目的多少。本文結(jié)果發(fā)現(xiàn),實驗組血管生成狀況不如對照組,實驗組血管生成較為稀疏,新生血管集中不明顯。對照組血管生成明顯向載體集中,血管排列成車輻狀生長。實驗組進(jìn)入載體邊緣的血管數(shù)為(26.3±2.6)條(n=20),明顯少于對照組(38.1±2.3)條(n=30,p<0.05)。表明中藥組合物對血管生成有一定的抑制作用。

      實施例4:中藥組合物對血管內(nèi)皮形態(tài)的影響

      樣品制備:中藥灌胃組、生理鹽水灌胃組大鼠血清,分別配成16%血清的dmem細(xì)胞培養(yǎng)基,過濾滅菌。

      實驗過程:血管內(nèi)皮細(xì)胞以2.0×105的密度接種6孔板,常規(guī)以10%小牛血清培養(yǎng)基培養(yǎng)48h;更換為實驗組、對照組培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)24h,倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)的改變。

      結(jié)果:實驗組與對照組相比,對血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)的影響沒有明顯差異。培養(yǎng)中,血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)呈典型的鋪路石樣,看不到典型凋亡形態(tài)的改變及細(xì)胞毒性表現(xiàn),表明中藥組合物對血管內(nèi)皮細(xì)胞沒有直接的細(xì)胞毒作用。

      實施例5:中藥組合物抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖

      樣品制備:中藥灌胃組、生理鹽水灌胃組大鼠血清,分別配成16%血清的dmem細(xì)胞培養(yǎng)基,過濾滅菌。

      實驗過程:用mtt法,血管內(nèi)皮細(xì)胞以5.0×103的密度接種96孔板,常規(guī)以10%小牛血清培養(yǎng)基培養(yǎng)24h;更換為實驗組、對照組培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)48h;加入mtt溶液20ul繼續(xù)培養(yǎng)4h,終止培養(yǎng)。吸棄上清液,加入dmso150μl,振蕩20min,490nm波長測定吸光度值,每組3個復(fù)孔,重復(fù)3次。

      結(jié)果:實驗組與對照組測得的吸光度值分別為0.25±0.01,0.42±0.01,2組比較發(fā)現(xiàn)實驗組內(nèi)皮細(xì)胞的增殖能力受到抑制,說明中藥組合物可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。

      實施例6:中藥組合物抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移

      樣品制備:中藥灌胃組、生理鹽水灌胃組大鼠血清,分別配成15%血清的dmem細(xì)胞培養(yǎng)基,過濾滅菌。

      實驗方法:血管內(nèi)皮細(xì)胞以2.0×105的密度接種6孔板,常規(guī)以10%小牛血清培養(yǎng)基培養(yǎng);待長到70%密度時,吸棄培養(yǎng)基。以刀片鈍邊豎立于孔中固定為基準(zhǔn)線,刮去一側(cè)細(xì)胞,無血清培養(yǎng)基洗滌;加實驗、對照組培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)4h。觀察細(xì)胞越過基準(zhǔn)線遷移的數(shù)目,每組3個復(fù)孔,重復(fù)3次。

      結(jié)果:實驗組遷移超過基準(zhǔn)線的細(xì)胞數(shù)目為(45.4±4.2)個,明顯少于對照組(58.6±3.8)個(p<0.05),表明血瘤散對血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移有一定程度的抑制作用。

      實施例7:中藥組合物抑制腫瘤生長

      方法:裸鼠是免疫缺陷鼠,癌細(xì)胞可以逃逸免疫系統(tǒng)在裸鼠皮下不斷的增殖形成新的腫瘤,是目前研究腫瘤生長和血管新生較為理想的模型。大鼠皮下荷瘤后用藥,可以觀測腫瘤的生長抑制。將一定數(shù)量的腫瘤細(xì)胞注射到大鼠皮下,等實體腫瘤長到一定體積的時候,分別對對照組和實驗組灌胃不同濃度的中藥組合物,同時每天測量其腫瘤體積,48天后將腫瘤剝離。

      結(jié)果:實驗結(jié)果見圖1,48天后,將經(jīng)過復(fù)方藥物處理的實驗組和對照組的小鼠腫瘤剝離,實驗組的腫瘤體積明顯減小。

      盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上,但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運用,它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域,對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言,可容易地實現(xiàn)另外的修改,因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下,本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的圖例。

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