專利名稱：：抗腫瘤藥物及制備方法和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種中藥，即抗腫瘤藥物及制備方法和質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
：在現(xiàn)有技術(shù)中，腫瘤是機(jī)體在各種致癌因素作用下，局部組織的某一個(gè)細(xì)胞在基因水平上失去對其生長的正常調(diào)控，導(dǎo)致其克隆性異常增生而形成的新生物。一般將腫瘤分為良性和惡性兩大類。所有的惡性腫瘤總稱為癌癥。中醫(yī)認(rèn)為，癌癥的起因首先是人體內(nèi)陰陽平衡、組織細(xì)胞在不同的致癌因素長期作用下，細(xì)胞突變而引起的，它的主要表現(xiàn)是組織細(xì)胞異常和過度的增生。只有在人本陰陽平衡失調(diào)，五行生克乘侮發(fā)生變化的前提下，人體的免疫監(jiān)控系統(tǒng)才會(huì)對其失去監(jiān)控，任其發(fā)展。久而久之，癌細(xì)胞日益增殖，腫瘤隊(duì)伍日益壯大，最后侵蝕周圍正常組織，消耗大量能量和營養(yǎng)，影響人體的正常生理代謝，造成機(jī)體逐漸衰竭，最終導(dǎo)致死亡。腫瘤治療通常歷經(jīng)手術(shù)、放療、化療及生物治療。西藥毒副作用大，價(jià)格貴，中藥療效慢，不能快速遏制癌細(xì)胞擴(kuò)散，手術(shù)后的放化療在殺死癌細(xì)胞的同時(shí)也殺死了健康細(xì)胞，副作用大。針對治療腫瘤的中藥，種類繁多，組方各異，療效不一。人類通過實(shí)驗(yàn)室、臨床試驗(yàn)，篩選中藥成分，確定合理用量，始終在做不懈追求。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是針對上述情況而提供一種療效明顯、穩(wěn)定的抗腫瘤藥物及制備方法和質(zhì)量控制方法。本發(fā)明的技術(shù)解決方案是抗腫瘤藥物由以下重量原料藥制成白花蛇舌草150g，半枝蓮150g，丹參113g，郁金113g，虎杖113g，兩頭尖113g，川楝子75g，枳殼(炒)75g，天南星(制)75g，青黛45g，全蝎45g，鱉甲(制)75g，桃仁(生)75g，鹿角霜45g，人參75g，大棗45g。枳殼(炒)除去雜質(zhì)，洗凈，潤透，切薄片，干燥后篩去碎落的瓤核，得枳殼片。取麩皮，撒在熱鍋中，加熱至冒煙時(shí)，加入枳殼片，迅速翻動(dòng)，炒至色變深，取出，篩去麩皮，放涼即得。每100kg枳殼片，用麩皮10kg。天南星(制)取凈天南星，按大小分別用水浸泡，每日換水23次，如起白沫時(shí)，換水后加白礬(每100kg天南星，加白礬2kg)，泡一日后，再進(jìn)行換水，至切開口嘗微有麻舌感時(shí)取出。將生姜片、白礬置鍋內(nèi)加適量水煮沸后，倒入天南星共煮至無干心時(shí)取出，除去姜片，晾至四之六成干，切薄片，干燥即得。每100kg天南星，用生姜、白礬各12.5kg。鱉甲(制)取鱉甲置蒸鍋內(nèi)，沸水蒸45分鐘，取出，放入熱水中，立即用硬刷除去皮肉，洗凈，曬干，得凈鱉甲。取潔凈河砂置鍋內(nèi)，用武火炒熱后，加入凈鱉甲，不斷翻動(dòng)，燙至表面淡黃色時(shí)，取出，篩去河砂，趁熱醋淬，干燥即得。每100kg鱉甲，用醋20kg。桃仁(生)取桃仁，除去雜質(zhì)即得。白花蛇舌草性味甘、淡、涼，清熱解毒，利尿消腫；半枝蓮微苦、涼，清熱解毒，散瘀利尿；二藥同用相輔相成，清熱解毒，散瘀消腫力強(qiáng)，故為君藥。郁金辛、苦、寒，入心、肝、肺經(jīng)，有行氣活血，疏利肝膽，清心涼血之功能；丹參苦、微寒，入心、肝經(jīng)，活血化瘀，善治癥瘕積聚兩頭尖系竹節(jié)香附之別名，又名草烏喙，辛熱有毒，能消癰腫，善治瘡癤，用其辛熱，助其甘、苦、寒、涼，不會(huì)傷及脾胃，且寒熱并用，能增加消腫之勢；虎杖苦、酸、涼，入肝經(jīng)，清熱，活血解毒，協(xié)郁金、丹參寒涼之性，同兩頭尖辛熱散結(jié)消癰之長，其輔君藥解毒消腫，故為臣藥。以上六味，正符君二臣四之制，君臣和合，以達(dá)到清熱解毒，行瘀消腫之功能。方用人參大補(bǔ)無氣；鱉甲消瘀散結(jié)；川楝子理氣止癰；枳殼行痰消積；天南星消腫散結(jié)；桃仁活血行瘀；鹿角霜補(bǔ)虛助陽；青黛清熱涼血；全蝎直入肝經(jīng)，熄風(fēng)鎮(zhèn)痙，通絡(luò)，解毒；以上九味寒熱并用，補(bǔ)瀉兼施，行瘀散結(jié)，攻中有補(bǔ)，因此為佐藥。大棗性味甘、溫，入脾、胃經(jīng)，補(bǔ)中益氣，養(yǎng)血蘇神，且有榮肝之效，"見肝之病，知肝傳脾，當(dāng)先實(shí)脾"，今肝己病，邪實(shí)正虛，正以此品調(diào)補(bǔ)，實(shí)有保胃氣，存津液之能事，雖祛邪而不傷正，雖補(bǔ)膩而不礙邪，緩調(diào)諸味故為使藥。本品藥味十六，祛邪當(dāng)先，扶正為本，標(biāo)本兼顧，調(diào)補(bǔ)適宜，直達(dá)病所，共奏清熱解毒，散瘀消腫之效。優(yōu)選為膠囊劑，按原料命名為"蛇蓮膠囊"。按上述各藥用原料與制藥上常用的藥用載體、添加劑或輔料可以混合制成片劑、膠囊劑(軟膠囊劑)、顆粒劑、散劑、丸劑、液體制劑或其它常規(guī)制劑。功能主治具有清熱解毒，散瘀消腫功能。在治療原發(fā)性肝癌病人過程中具有抑瘤增效，改善生活質(zhì)量，提高機(jī)體免疫力，延長生存期的作用。與介入化療(MMC+5-FU+PDD，如腎功能差者PDD改為ADM)，合并治療原發(fā)性肝癌，具有較強(qiáng)的控制腫瘤增長的作用，并可以很好的提高介入化療期間的生存質(zhì)量。用法用量口服，一次4粒，一日3次，療程4-8周。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是1、本品組方合理，標(biāo)本兼顧，療效確切。2、本發(fā)明通過臨床試驗(yàn)觀察403例住院肝癌患者，對腫瘤有明顯的抑制作用，又能提高肌體免疫功能，并能夠提高患者的生存質(zhì)量和增加體重。3、本品為純中藥制劑無毒副作用，且無明顯的不良反應(yīng)。下面將結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。具體實(shí)施方式實(shí)施例1蛇蓮膠囊由以下重量原料藥制成IOOO粒白花蛇舌草150g，半枝蓮150g，丹參113g，郁金113g，虎杖113g，兩頭尖113g，川楝子75g，枳殼(炒)75g，天南星(制)75g，青黛45g，全蝎45g，鱉甲(制)75g，桃仁(生)75g，鹿角霜45g，人參75g，大棗45g。如工業(yè)化生產(chǎn)各組分用量可成比例擴(kuò)大。實(shí)施例2蛇蓮膠囊的制備方法以上十六味，青黛過篩制成細(xì)粉，人參粉碎成細(xì)粉，全蝎和郁金粉碎成細(xì)粉；白花蛇舌草、丹參二味加8倍量80%乙醇回流提取二次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過，回收乙醇，濃縮至相對密度為1.10-1.15(50°C)的稠膏；鱉甲加8倍量水煎煮三次，煎煮時(shí)間為3、2、1小時(shí)，合并煎煮液，濾過，備用；白花蛇舌草、丹參的藥渣同其余半枝蓮等九味藥合并(其中桃仁于第一次煎煮沸騰時(shí)再加入)加10、10、8倍量水煎煮三次，煎煮時(shí)間為3、2、l小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液與上述鱉甲煎液合并，濃縮至相對密度為1.10-1.15(50°C)的稠膏，與乙醇提取物稠膏混勻，干燥，粉碎成細(xì)粉；與人參、青黛等四味細(xì)粉及淀粉適量，混勻，制粒，裝入膠囊制成1000粒，即得。性狀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為深棕色的顆粒狀粉末，氣微，味苦，酸。實(shí)施例3蛇蓮膠囊的鑒別鑒別(l)取本品，置顯微鏡下觀察，體壁碎片棕色，綠黃色或黃綠色，有光澤，橫紋肌纖維近無色或淡黃色，多碎斷；側(cè)面觀邊緣較平整或呈纖維波狀，剛毛淡棕色，多碎斷，先端銳尖或純圓，基部稍窄，色淡，體部中斷直徑8-40ym，具縱直紋理，髓腔細(xì)窄，腔壁較平直。(2)取本品8粒內(nèi)容物，置磨口錐形瓶中，加乙醇30ml，回流提取1小時(shí)，濾過，濾液揮散甲醇至約lml，作為供試品溶液；另取丹參酮IIA對照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述二種溶液各2iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯(19:l)為展開劑，展開，取出，晾干，日光下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)。(3)取本品8粒內(nèi)容物，置磨口錐形瓶中，加氯仿30ml，回流提取1小時(shí)，濾過，濾液濃縮至5ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅及靛藍(lán)對照品，加氯仿制成每lml各含lmg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-氯仿(4:1:l)為展開劑，展開，取出，晾干，日光下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(4)取本品10粒內(nèi)容物，置錐形瓶中，加甲醇50ml，回流提取2小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，并轉(zhuǎn)移到分液漏斗中加氯仿提取二次，每次20ml，棄去氯仿液，再用水飽和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液洗滌二次，每次60ml，分取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)状糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Rh、Re、Rgi對照品，加甲醇制成每lml各含lmg的混合溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液4iU，對照品溶液2iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層上，以氯仿-甲醇-水(65:35:IO)I(TC以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，置11(TC烘箱中加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的顏色斑點(diǎn)。(5)取本品IO粒內(nèi)容物，置磨口錐形瓶中，加乙醚30ml，回流提取1.5小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取郁金對照藥材，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各3iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸(10:l)下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的蘭綠色熒光斑點(diǎn)。檢查應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄IL)。實(shí)施例4蛇蓮膠囊的含量測定(1)熊果酸與齊墩果酸的含量測定取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物約3g，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚50ml;回流提取3小時(shí)，提取液回收乙醚至干，殘?jiān)檬兔?30-6(TC;)浸泡兩次，每次5ml(約浸泡2分鐘)，傾去石油醚，殘?jiān)訜o水乙醇-氯仿(3:2)混合溶液溶解至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另精密稱取熊果酸對照品，加無水乙醇，制成每lml含熊果酸0.25mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，精密吸取供試品溶液liU，對照品溶液liU、3iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯-氯仿-甲醇(20:8:5:o.i)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在ll(TC烘5-7分鐘，至呈現(xiàn)紫紅色斑點(diǎn)，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層掃描法)進(jìn)行掃描，波長As=540nm，AR=700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計(jì)算，即得；本品每粒含熊果酸與齊墩果酸總量以熊果酸(C3。H4803)計(jì)；不得少于0.30mg。(2)大黃素的含量測定取裝置差異項(xiàng)下的內(nèi)容物約lg，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇回流提取至近無色，提取液蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解，加鹽酸2ml，置沸水浴上加熱水解1小時(shí)，立即冷卻，用乙醚提取六次，每次20ml，合并乙醚液，低溫蒸干，殘?jiān)勇确氯芙庵?ml量瓶中并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，濾液作為供試品溶液；另精密稱取大黃素對照品，加甲醇制成每lml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，精密吸取供試品溶液3ii1，對照品溶液1y1、4iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-醋酸(15:5:0.3)為展開劑，展開，取出，晾干，照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層掃描法)進(jìn)行掃描，波長、=440nm，AR=600nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計(jì)算，即得；本品每粒含虎杖以大黃素(C^Hi。Cg計(jì)，不得少于0.12mg。試驗(yàn)例1藥理及毒性研究綜述藥理實(shí)驗(yàn)證明小鼠灌胃給予蛇蓮膠囊劑量達(dá)到1.0g/kg體重時(shí)，對小鼠移植性腫瘤S，、HepA22、ESC瘤株有明顯的抑制作用。與化療藥合用增效減毒作用的實(shí)驗(yàn)研究表明蛇蓮膠囊可明顯的起到增效減毒作用，并有一定的升高白細(xì)胞作用。免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)表明該蛇蓮膠囊有明顯的提高肌體的體液免疫和細(xì)胞免疫功能。抑瘤機(jī)理實(shí)驗(yàn)研究表明該膠囊有明顯的提高荷瘤小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化指數(shù)及白細(xì)胞介素2(IL-2)的生長指數(shù)，同時(shí)還明顯的表現(xiàn)有提高荷瘤小鼠NK細(xì)胞殺傷率的作用。毒理學(xué)研究表明于24小時(shí)內(nèi)給小鼠灌胃蛇蓮膠囊達(dá)到36g/kg體重時(shí)(為人臨床用量的600倍)，小鼠僅于給藥后20分鐘表現(xiàn)活動(dòng)減少，2小時(shí)侯后恢復(fù)正常，未見任何異常反應(yīng)，觀察七天無一死亡，因限于給藥體積和濃度無法再增加，故測不出LD,長期毒性實(shí)驗(yàn)表明于六個(gè)月內(nèi)每天給大鼠1.8、3.6、7.2、10.8g/kg體重蛇蓮膠囊時(shí)，對大鼠體重增長、血象、肝腎功能等均無明顯的影響；組織切片，經(jīng)光鏡檢查，所有檢查的組織心、肝、脾、肺、腎上腺、睪丸、卵巢等均未發(fā)現(xiàn)藥物所致的病理改變。綜上所述，蛇蓮膠囊為毒性甚低，具有抗癌作用又能提高肌體免疫功能的藥物。試驗(yàn)例2蛇蓮膠囊臨床試驗(yàn)報(bào)告蛇蓮膠囊由國家藥品監(jiān)督管理局藥品臨床研究基地中國中醫(yī)研究院北京廣安門醫(yī)院負(fù)責(zé)完成。本臨床試驗(yàn)共觀察了肝癌403例(試驗(yàn)組283例，對照組60例，空白對照組60例)，現(xiàn)將臨床試驗(yàn)研究總結(jié)如下。—、臨床試驗(yàn)的目的1.觀察該藥對腫瘤患者介入化療的增效作用2.觀察該藥對腫瘤患者介入化療的減毒作用3.觀察該藥對毒熱血瘀癥的改善作用4.觀察該藥對免疫功能的影響5.觀察該藥的安全性和不良反應(yīng)二、一般資料(—)病例選擇標(biāo)準(zhǔn)1.試驗(yàn)病例納入標(biāo)準(zhǔn)(1)有明顯診斷原發(fā)性的肝癌帶瘤患者。(2)屬中醫(yī)毒熱血瘀的腫瘤患者。(3)經(jīng)各項(xiàng)指標(biāo)檢查屬化療適應(yīng)患者。(4)年齡218歲，《70歲的男、女患者。(5)卡氏評(píng)分260分，預(yù)計(jì)生存3個(gè)月以上，可接受化療患者。本臨床試驗(yàn)病例均為住院患者，共403例，其中試驗(yàn)組283例，對照組60例，空白組對照組60例(簡稱化療組，下同)，各單位病例分布詳見表l。表1.臨床試驗(yàn)病例分布織別]S忠龍江竹腫瘤K大連第人WM、V林f人W阪院.遼'i,腫瘤K院^JIii隱III<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>肝癌患者男性339例，女性64例，男女之比為5.29:1，組間性別分布均衡，詳見表2。表2.性別分布表<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>秩和檢驗(yàn)X2=0.3977P=0.820(四)年齡年齡分布于30-70歲之間，最大年齡70歲，最小年齡24歲，平均年齡53.8歲，年齡分布統(tǒng)計(jì)學(xué)顯示P>0.05，詳見表3。表3.年齡分布圖<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>秩和檢驗(yàn)X2=1.198P=0.5507(五)臨床分期共403例肝癌中，均按國際抗癌聯(lián)盟(UICC)制定的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床分期，見表4。表4.臨床分期情況(WHO)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>秩和檢驗(yàn)乂2=2.14P=0.3431(六)生存質(zhì)量試驗(yàn)組和對照組治療前Kamofsky評(píng)分主要分布在50-100分之間，見表5。表5.Karnofsky分級(jí)比較表<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>秩和檢驗(yàn)乂2=3.236P=0.1983(七)臨床癥狀分布情況試驗(yàn)組和對照組治療前主要癥狀情況，見表6。表6.治療前癥狀分析<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>三、臨床試驗(yàn)方法(—)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)采用多中心、隨機(jī)分組、前瞻性設(shè)計(jì)方法，按隨機(jī)數(shù)字表分配入試者分為試驗(yàn)組和對照組，要求兩組在性別、年齡、分期和化療方案選擇均有可比性。(二)分組病種原發(fā)性腫瘤試驗(yàn)組283例(化療介入+蛇蓮膠囊)；對照組60例(化療介入+肝復(fù)樂片)；空白對照組60例(化療介入)。(三)用藥方案試驗(yàn)組化療介入+蛇蓮膠囊，蛇蓮膠囊，每次4?？诜?，每日三次，8周為一療程。對照組化療介入+對照藥物，對照藥物肝復(fù)樂，每次3?？诜咳杖?，8周為一療程。(四)化療方案MMC10mg。5-PUlg，股動(dòng)脈導(dǎo)管一次介入法，4周后重復(fù)一次。PDD80mg。如腎功能不好病史PDD改為ADM40mg/次。四、試驗(yàn)結(jié)果[O109](—)腫瘤瘤體變化的比較按照衛(wèi)生部《中國常見惡性腫瘤診治規(guī)范》記載的原發(fā)性支氣管肺癌化療療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)(緩解率)，以患者入院治療前后及治療后一個(gè)月胸片或CT進(jìn)行對照比較，以1、完全緩解(CR)。2、部分緩解(PR)。3、輕度緩解(MR)。4、穩(wěn)定(SD)。5、進(jìn)展(PD)進(jìn)行療效評(píng)定。緩解率X片中腫瘤最大直徑乘以其垂直直徑較治療前縮小50X以上為有效，50%以下為無效，根據(jù)吸收程度可以分為l、CR:經(jīng)X線片/和纖支鏡檢查，病灶全部吸收者；2、PR:病灶縮小>50%;3、MR:病灶縮小面積在25%和50%之間；SD:病灶縮小面積不到25%或增大不超過25%;4、PD(進(jìn)展)病灶較治療前擴(kuò)大25X，兩周期治療后作療效評(píng)價(jià)。有效率=CR+PR。各組瘤體緩解情況見表7。結(jié)果表明CR+PR緩解率試驗(yàn)組24.7%，對照組18.3%，單純介入化療組16.7%，試驗(yàn)組優(yōu)于對照組和單純介入化療組(P〈0.05)。不同單位試驗(yàn)組組間療效比較P>0.05，詳見表8。表7肝癌治療后病灶變化的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>秩和檢驗(yàn)乂2=6.409P=0.0406表8不同單位試驗(yàn)組治療后病灶變化的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>[cms](二)癥狀改善的比較臨床癥狀總積分值較療前下降2/3為顯著改善，下降2l/3為部分改善，下降<1/3為無改善。癥狀改善總體情況見表9，有效率(顯著改善+部分改善)試驗(yàn)組53.0%，對照組33.3%，單純介入化療組25.0%，組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.01)。各單位療效情況，有效率分布在45.6%-61.4%之間，統(tǒng)計(jì)學(xué)P>0.05見表10。對具體癥狀的改善情況見表10，雖然各癥狀療后較療前均有改善(P〈0.05)，但根據(jù)療前癥狀脅下脹痛或剌痛、惡心、發(fā)熱試驗(yàn)組與對照組分布均衡(PX).05)，故結(jié)果表明對具體癥狀中試驗(yàn)組較對照組能明顯改善脅下脹痛或剌痛、惡心、發(fā)熱癥狀。表9.癥狀改善總體療效的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表10.不同單位試驗(yàn)組中醫(yī)癥狀改善的積分有效率比較<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>蛇蓮膠囊改善具體癥狀情況見表ll.表ll.癥狀改善比較<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>(三)一般情況比較比較治療前后卡氏(Kamofsky)評(píng)分上升或下降及體重增加或減少情況，來評(píng)價(jià)腫瘤患者的生存質(zhì)量。治療前患者的生存質(zhì)量按Kamofsky活動(dòng)狀態(tài)分級(jí)進(jìn)行評(píng)定，凡在療程結(jié)束后，較治療前評(píng)分增加或減少大于10分者為升高或下降，增加或減少未超過IO分者為穩(wěn)定，同時(shí)，凡在療程結(jié)束后較治療前體重增加或減少1公斤者為上升或下降，增加或減少未超過1公斤者為穩(wěn)定。表12可見治療后卡氏評(píng)分升高、穩(wěn)定、下降例數(shù)，表13可見治療后體重升高、穩(wěn)定、下降例數(shù)。試驗(yàn)組與對照組相比升高和穩(wěn)定例數(shù)相比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.05)表12.生存質(zhì)量情況的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表13.體重變化情況的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>(四)免疫功能變化的比較療效判定升高治療后較治療前由異常提高^10%，或由異?；謴?fù)到正常。下降治療后較治療前由異常下降^10%，或由正常轉(zhuǎn)變?yōu)楫惓?。穩(wěn)定治療后較治療前上升、下降不足10%者或維持在正常范圍。l.NK細(xì)胞(自熱殺傷細(xì)胞)治療后NK細(xì)胞總體變化的比較表14可見試驗(yàn)組療后自然殺傷細(xì)胞活性情況，試驗(yàn)組比對照組明顯升高NK細(xì)胞活性(P<0.05)表14.治療后二組NK細(xì)胞變化的比較:0142]<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>2.CD4/CD8試驗(yàn)組與對照組療后CD4/CD8比值總體變化的比較表15可見，試驗(yàn)組療后CD/CD8與對照組比值情況，試驗(yàn)組比對照組明顯升高CD4/CD8比值(P<0.05)表15.二組治療后CD4/CD3比值變化的比較:0147]<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>(五)AFP療前療后情況試驗(yàn)組、對照組，化療組療后比療前AFP值均下降，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但試驗(yàn)組與對照組，化療組療后比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，詳見表16.(五)AFP療前療后情況試驗(yàn)組、對照組，化療組療后比療前AFP值均下降，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但試驗(yàn)組與對照組，化療組療后比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，詳見表16.表16.AFP療前療后情況<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>試驗(yàn)組與對照組療前比較t試驗(yàn)組與化療組療后比較t試驗(yàn)組與對照組療后比較t試驗(yàn)組與對照組療后比較t(六)治療前、后血象變化的比較1.白細(xì)胞(WBC)試驗(yàn)組與對照組化療組治療前后白細(xì)胞變化見表17c胞均未見明顯的影響(P>0.05)。表17.治療前后白細(xì)胞變化的比較(千/mm3)三組療后比療前對比紅細(xì)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>三組療前相比X2=0.732P=0.6937三組療后相比X2=0.642P=0.72532.血紅蛋白(Hb)試驗(yàn)組與對照組化療組治療前后血紅蛋白變化見表18。蛋白均未見明顯的影響(P>0.05)。表18.治療前后血紅蛋白變化的比較(克/100ml)三組療后比療前對血紅<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>三組療前相比X2=0.315P=0.8541三組療后相比X2=0.256P=0.87993、血小板(BPC)試驗(yàn)組與對照組化療組治療前后血小板變化見表19。試驗(yàn)組與對照組療后比療前對血小板均未見明顯影響(P>0.05)。化療組療后血小板降低明顯(P>0.05)。表19.治療前后血小板變化的比較(萬/mm3)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>三組療前相比X2=2.954P=0.2283三組療后相比X2=5.682P=0.0584[O177](七)不良反應(yīng)觀察1、心、肝、腎功能按化療藥急性及亞急性毒性分析標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)，心、肝、腎功能治療前后的積分值(0度，I度，II度，III度，IV度或0、1、2、3、4分)表示。試驗(yàn)組對心、肝、腎功能的影響見表20，21，22。結(jié)果表明，對心、肝、腎功能無明顯影響(P>0.05)。表20.心功能治療前后積分值比較<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表21.肝功能治療前后積分值比較<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>表22...................腎功能治療前后積分值比較<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>2.不良反應(yīng)的一般情況試驗(yàn)過程中有7例死亡，屬嚴(yán)重不良事件，均與本試驗(yàn)藥品無關(guān)，作為剔除病例，詳見表23。表23.嚴(yán)重不良事件分析表<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>余未見與本藥相關(guān)的不良反應(yīng)(八)完成治療情況本臨床試驗(yàn)共入組290例，其中有7例屬踢出病例，無脫落病例。詳見表23。六、結(jié)論本試驗(yàn)觀察了403例住院肝癌患者。試驗(yàn)隨機(jī)分為試驗(yàn)組、對照組和單純介入化療組，不同組別的性別、年齡及臨床分期均無明顯差異，分布均衡，具有可比性。臨床試驗(yàn)研究結(jié)果表明，蛇蓮膠囊具有如下作用。1、蛇蓮膠囊增效作用優(yōu)于對照組和單純化療組CR+PR緩解率試驗(yàn)組24.7%，對照組18.3%，單純介入化療組16.7%，三組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.05)，表明該藥能夠明顯提高化療療效，即對化療有增效作用，優(yōu)于對照組和化療組。不同單位試驗(yàn)組組間療效比較P>0.05，組間療效均衡。2、蛇蓮膠囊能明顯改善肝癌患者臨床癥狀臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，肝癌患者臨床癥狀試驗(yàn)組改善率(顯著改善+部分改善)試驗(yàn)組53.0%，對照組33.3%，單純介入化療組25.0%，組間統(tǒng)計(jì)學(xué)P〈0.01。各單位療效情況，有效率分布在45.6%-61.4%之間，統(tǒng)計(jì)學(xué)P>0.05。組間療效均衡。對具體癥狀的改善情況，各癥狀療后較療前均有改善(P<0.05)，根據(jù)療前癥狀脅下脹痛或剌痛、惡心、發(fā)熱，試驗(yàn)組與對照組分布均衡(PX).05)，故結(jié)果表明對具體癥狀中試驗(yàn)組較對照組能明顯改善脅下脹痛或剌痛、惡心、發(fā)熱癥狀。3、對肝癌患者免疫功能有提高作用試驗(yàn)組比對照組明顯升高NK細(xì)胞活性和CD4/CD8比值(P<0.05)。4、能提高患者的生存質(zhì)量和體重采用卡氏評(píng)分法和患者生存質(zhì)量指數(shù)調(diào)查表評(píng)分方法，觀察了蛇蓮膠囊對癌癥患者生存質(zhì)量的影響。結(jié)果表明，治療后卡氏評(píng)分升高、穩(wěn)定、下降例數(shù)，治療后體重升高、穩(wěn)定、下降例數(shù)。試驗(yàn)組與對照組相比升高和穩(wěn)定例數(shù)相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，蛇蓮膠囊優(yōu)于對照組，優(yōu)于化療組。5、蛇蓮膠囊對心、肝、腎功能無影響臨床試驗(yàn)觀察了蛇蓮膠囊治療對心、肝、腎功能的影響。結(jié)果表明試驗(yàn)組療后的心、肝、腎功能無明顯變化。6、無明顯的毒副作用試驗(yàn)組觀察283例腫瘤患者，沒有因此藥物導(dǎo)致心、肝、腎功能損害，無明顯不良反應(yīng)。七、討論本試驗(yàn)對403例肝癌患者進(jìn)行了臨床試驗(yàn)研究，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析證實(shí)，蛇蓮膠囊與化療合并用藥具有增效作用，優(yōu)于對照組和單純介入化療組，在癥狀總療效評(píng)價(jià)、臨床癥狀脅下脹痛或剌痛、惡心、發(fā)熱等方面改善明顯，能提高生存質(zhì)量、增加體重。對免疫功能具有增強(qiáng)作用，優(yōu)于對照組和單純介入化療組，未見明顯不良反應(yīng)。蛇蓮膠囊可以作為肝癌患者的化療合并用藥，是安全有效的中藥。20權(quán)利要求一種抗腫瘤藥物，其特征在于由以下重量原料藥制成白花蛇舌草150g，半枝蓮150g，丹參113g，郁金113g，虎杖113g，兩頭尖113g，川楝子75g，炒枳殼75g，制天南星75g，青黛45g，全蝎45g，制鱉甲75g，生桃仁75g，鹿角霜45g，人參75g，大棗45g。2.如權(quán)利要求1所述的抗腫瘤藥物，其特征在于是蛇蓮膠囊，由以下重量原料藥制成1000粒:白花蛇舌草150g，半枝蓮150g，丹參113g，郁金113g，虎杖113g，兩頭尖113g，川楝子75g，炒枳殼75g，制天南星75g，青黛45g，全蝎45g，制鱉甲75g，生桃仁75g，鹿角霜45g，人參75g，大棗45g。3.如權(quán)利要求1所述的抗腫瘤藥物，其特征在于劑型為片劑、顆粒劑、丸劑或口服液。4.如權(quán)利要求2所述的抗腫瘤藥物的制備方法，其特征在于步驟如下以上十六味，青黛過篩制成細(xì)粉，人參粉碎成細(xì)粉，全蝎和郁金粉碎成細(xì)粉；白花蛇舌草、丹參二味加8倍量80%乙醇回流提取二次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過，回收乙醇，濃縮至相對密度為1.10-1.15，5(TC的稠膏；鱉甲加8倍量水煎煮三次，煎煮時(shí)間為3、2、l小時(shí)，合并煎煮液，濾過，備用；白花蛇舌草、丹參的藥渣同其余半枝蓮等九味藥合并加10、10、8倍量水煎煮三次，煎煮時(shí)間為3、2、l小時(shí)，其中桃仁于第一次煎煮沸騰時(shí)再加入，合并煎液，濾過，濾液與上述鱉甲煎液合并，濃縮至相對密度為1.10-1.15，50°C的稠膏，與乙醇提取物稠膏混勻，干燥，粉碎成細(xì)粉；與人參、青黛等四味細(xì)粉及淀粉適量，混勻，制粒，裝入膠囊制成1000粒，即得。5.如權(quán)利要求2所述的抗腫瘤藥物的鑒別方法，其特征在于該方法中包括如下任一種或幾種組合(1)取本品8粒內(nèi)容物，置磨口錐形瓶中，加乙醇30ml，回流提取l小時(shí)，濾過，濾液揮散甲醇至約lml，作為供試品溶液；另取丹參酮IIA對照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述二種溶液各2iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯=19:l為展開劑，展開，取出，晾干，日光下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)；(2)取本品8粒內(nèi)容物，置磨口錐形瓶中，加氯仿30ml，回流提取l小時(shí)，濾過，濾液濃縮至5ml，作為供試品溶液。另取靛玉紅及靛藍(lán)對照品，加氯仿制成每lml各含lmg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-氯仿-4:1:l為展開劑，展開，取出，晾干，日光下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取本品IO粒內(nèi)容物，置錐形瓶中，加甲醇50ml，回流提取2小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，并轉(zhuǎn)移到分液漏斗中加氯仿提取二次，每次20ml，棄去氯仿液，再用水飽和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液洗滌二次，每次60ml，分取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)状糽ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Rbl、Re、Rgl對照品，加甲醇制成每lml各含lmg的混合溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液4iU，對照品溶液2iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層上，以氯仿-甲醇-水=65:35:10，l(TC以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，置11(TC烘箱中加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的顏色斑點(diǎn)；(4)取本品IO粒內(nèi)容物，置磨口錐形瓶中，加乙醚30ml，回流提取1.5小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取郁金對照藥材，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各3iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸=10:l下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈，365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的蘭綠色熒光斑點(diǎn)；6.如權(quán)利要求2所述的抗腫瘤藥物的含量測定方法，其特征在于該方法中包括如下任一種或幾種組合(1)熊果酸與齊墩果酸的含量測定取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物約3g，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚50ml;回流提取3小時(shí)，提取液回收乙醚至干，殘?jiān)檬兔眩?0-6(TC浸泡兩次，每次5ml，浸泡2分鐘，傾去石油醚，殘?jiān)訜o水乙醇-氯仿=3:2混合溶液溶解至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另精密稱取熊果酸對照品，加無水乙醇，制成每lml含熊果酸0.25mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，精密吸取供試品溶液liU，對照品溶液liU、3iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯-氯仿-甲醇=20:8:5:o.i為展開齊U，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在ll(TC烘5-7分鐘，至呈現(xiàn)紫紅色斑點(diǎn)，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB薄層掃描法)進(jìn)行掃描，波長As=540nm，AR=700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計(jì)算，即得；本品每粒含熊果酸與齊墩果酸總量以熊果酸(C30H48O3)計(jì)；不得少于0.30mg;(2)大黃素的含量測定取裝置差異項(xiàng)下的內(nèi)容物約lg，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇回流提取至近無色，提取液蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解，加鹽酸2ml，置沸水浴上加熱水解1小時(shí)，立即冷卻，用乙醚提取六次，每次20ml，合并乙醚液，低溫蒸干，殘?jiān)勇确氯芙庵?ml量瓶中并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，濾液作為供試品溶液；另精密稱取大黃素對照品，加甲醇制成每lml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，精密吸取供試品溶液3iU，對照品溶液liU、4iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-醋酸=15:5:0.3為展開劑，展開，取出，晾干，照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層掃描法)進(jìn)行掃描，波長As=440nm，AR=600nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計(jì)算，即得；本品每粒含虎杖以大黃素(C15H10O5)計(jì)，不得少于0.12mg。全文摘要本發(fā)明涉及一種中藥，即抗腫瘤藥物及制備方法和質(zhì)量控制方法。它由以下重量原料藥制成1000粒白花蛇舌草150g，半枝蓮150g，丹參113g，郁金113g，虎杖113g，兩頭尖113g，川楝子75g，枳殼(炒)75g，天南星(制)75g，青黛45g，全蝎45g，鱉甲(制)75g，桃仁(生)75g，鹿角霜45g，人參75g，大棗45g。具有清熱解毒，散瘀消腫功能。本發(fā)明組方合理，標(biāo)本兼顧，療效確切。通過臨床試驗(yàn)觀察403例住院肝癌患者，對腫瘤有明顯的抑制作用，又能提高肌體免疫功能，并能夠提高患者的生存質(zhì)量和增加體重，無明顯的不良反應(yīng)。文檔編號(hào)A61K36/88GK101690794SQ200910307028公開日2010年4月7日申請日期2009年9月15日優(yōu)先權(quán)日2009年9月15日發(fā)明者杰妮.曹申請人:吉林雙星藥業(yè)有限公司