專(zhuān)利名稱(chēng)：一種抗腫瘤組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗腫瘤藥物，特別是涉及一種由三種中藥材—苦參、黃芪和川芎中的抗腫瘤“有效部位群”或有效成份構(gòu)成的抗腫瘤組合物以及上述組合物的制備方法及其作為治療腫瘤病藥物的應(yīng)用。
首先，本發(fā)明提出的抗腫瘤組合物的活性成分是來(lái)源于一定比例(此比例參見(jiàn)后文描述的三種藥材的比例范圍)的苦參、黃芪和川芎的中藥材混合物的總生物堿和總多糖(本文稱(chēng)之為“有效部位群”)。
其次，本發(fā)明提出的抗腫瘤組合物的活性成分是苦參、黃芪和川芎三味中藥材中所含化合物氧化苦參堿、黃芪多糖和川芎嗪按照一定比例(此比例參見(jiàn)后文描述的三種藥材的比例范圍)的比例組合而成。顯然，這三種化合物，不論是植物提取物還是來(lái)源于化學(xué)合成，均可用于本發(fā)明組合物的活性成分之中。
此外，本發(fā)明還提出從三味原藥材中提取本發(fā)明組合物所含的有效部位群的方法，其包括兩種不同的制備路線其一是將三味藥材按上述比例混合后，分步驟提取其總生物堿和總多糖；其二是將上述比例的原藥材分別提取活性成分，即，從苦參原藥材中提取苦參總堿，從黃芪原藥材中提取黃芪多糖，從川芎原藥材中提取川芎總堿，然后將所得的這些成分合并成為有效部位群。
本發(fā)明的抗腫瘤組合物即是由上述活性部位群以及生理學(xué)上可接受的合適的賦形劑組成。本發(fā)明的抗腫瘤組合物所采用的劑型可以包括口服固體制劑如片劑、膠囊劑等，注射用制劑如注射用溶液、粉針劑、及凍干粉針劑等。
本發(fā)明的組合物可作為治療原發(fā)性肺癌和預(yù)防肺癌術(shù)后復(fù)發(fā)及輔助治療其它實(shí)體瘤的藥物。
下面的詳細(xì)描述將有助于更進(jìn)一步理解本發(fā)明。
除另有說(shuō)明外，本說(shuō)明書(shū)的部分術(shù)語(yǔ)的定義如下苦參或其原藥材，是指豆科植物苦參(Sophora flavescens Ait)的干燥根，或由豆科植物苦參干燥根制作的中藥材飲片。在用于本發(fā)明時(shí)，可以將其粉碎成粗顆粒以便于提取。
黃芪或其原藥材，是指豆科植物黃芪(Astragalus membranaceus[Fisch]Bge)的根莖，或由豆科植物黃芪的根莖制作的中藥材飲片。在用于本發(fā)明時(shí)，可以將其粉碎成粗顆粒以便于提取。
川芎或其原藥材，是指?jìng)阈慰浦参镘厚?Ligusticum chuanxiongHort.)的塊狀根，或由傘形科植物芎穹的塊狀根制作的中藥材飲片。在用于本發(fā)明時(shí)，可以將其粉碎成粗顆粒以便于提取。
苦參總堿是指按本說(shuō)明書(shū)所述方法從苦參原藥材中提取獲得的由苦參中含有的多種生物堿組成的總生物堿，并且，其中各種生物堿量的總和不低于總提取量的80％(w/w)。已知苦參總堿中含有氧化苦參堿(oxymatrine)、苦參堿(matrine)、異苦參堿(isomatrine)、槐果堿(sophocarpine)、槐定堿(sophoridine)、氧化槐果堿(oxysophocarpine)、N-甲基野靛堿(N-methylcytisine)、槐醇(sophoranol)等。
黃芪多糖是指按本說(shuō)明書(shū)所述方法從黃芪原藥材中提取獲得的由黃芪中所含多糖類(lèi)物質(zhì)組成的總多糖，并且，其中多糖總量不低于總提取量的80％(w/w)。
川芎總堿是指按本說(shuō)明書(shū)所述方法從川芎原藥材中提取的由中藥川芎所含多種生物堿組成的總生物堿，并且，其中各種生物堿量的總和不低于總提取量的50％(w/w)。已知川芎總堿中含川芎嗪(四甲基吡嗪)等。
有效部位群是指從按照后文描述的比例范圍混合上述三味原藥材中提取的總生物堿和總多糖的混合物，該混合物中生物堿類(lèi)和多糖類(lèi)化合物的實(shí)際含量之和不低于混合物總量的80％；也指上述從三味藥材分別提取苦參總堿、黃芪多糖以及川芎總堿后再?gòu)?fù)合組成的混合物，同樣，該混合物中生物堿類(lèi)化合物和多糖類(lèi)化合物的實(shí)際含量之和不低于混合物總量的80％；還指按照后文描述的比例范圍混合的苦參和黃芪兩味原藥材中提取的總生物堿和總多糖，再加入相應(yīng)比例的川芎嗪而形成的混合物；此外，有效部位群還包括由黃芪多糖及氧化苦參堿、川芎嗪等純品化合物按照后文描述的比例范圍組成的混合物。所有這些有效部位群的混合物中生物堿類(lèi)和多糖類(lèi)化合物的實(shí)際含量之和也都不低于混合物總量的80％。
本發(fā)明組合物包括上述有效部位群和生理學(xué)上可接受的賦形劑。其中，有效部位群的組成及其制備方法如下1、由來(lái)源于特定“比例范圍”內(nèi)的苦參、黃芪和川芎三種原藥材的總生物堿和總多糖組成的有效部位群。該比例范圍是指所使用的苦參、黃芪和川芎三種原藥材的比例在16∶4∶1至1∶1∶1之間，優(yōu)選比例在6∶3∶1至3∶1.5∶1之間，最優(yōu)選的比例為4∶2∶1。該有效部位群按照如下方法制備(1)、“混合提取”或稱(chēng)其為“復(fù)方提取”，即，將上述比例范圍內(nèi)的三種原藥材混合后，提取其所含的總生物堿和總多糖。
本發(fā)明提出的混合提取的方法是首先采用濃度在80％以上的乙醇對(duì)上述三種原藥材的混合物進(jìn)行回流提取，其提取液用于進(jìn)一步分離總生物堿；乙醇回流提取后的殘?jiān)糜谔崛】偠嗵?。該回流提取的條件通常為常壓下在68～80℃之間回流2～3次，每次回流時(shí)間為45～90min，每次回流時(shí)所用乙醇量為原藥材總量的3～5倍(w/w)。優(yōu)選的回流條件是每次回流的乙醇濃度為90％，用量為原藥材總量的4倍，每次回流60min，并且每批藥材回流兩次。
由乙醇回流液分離總生物堿的方法是回收回流液中的乙醇后，殘留液于4℃下靜置12小時(shí)以上，離心去沉淀，上清液中加入2～4倍量的含0.5％鹽酸的水溶液后，過(guò)強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，以生物堿專(zhuān)屬性顯色劑如碘化鉍鉀監(jiān)測(cè)流出液以確認(rèn)樹(shù)脂柱是否飽和。水洗樹(shù)脂柱至流出液近無(wú)色。堿化樹(shù)脂，如適量氨水堿化，以有機(jī)溶劑如氯仿等回流提取樹(shù)脂上吸附的生物堿?；亓飨疵撏耆?，回收洗脫溶劑，即獲得所需的總生物堿。或以堿化后的醇溶液如含15～25％氨水的乙醇液直接洗脫水洗后的樹(shù)脂柱直至無(wú)生物堿流出，回收乙醇后，以水不溶性有機(jī)溶劑如氯仿萃取殘留液。萃取液回收溶劑后即獲得所需的生物堿。
從殘?jiān)刑崛】偠嗵堑姆椒ㄊ且?～10倍于原藥材量的水加熱(80～100℃)提取2～3次，每次30～60min。去殘?jiān)?，合并的提取液適當(dāng)濃縮或不濃縮，加入乙醇使乙醇終濃度達(dá)15～30％，靜置并離心去沉淀。上清液繼續(xù)加乙醇使乙醇終濃度達(dá)到約65～85％，靜置并離心。取沉淀。此即粗制總多糖。采用本領(lǐng)域內(nèi)熟知的方法(參見(jiàn)實(shí)施例1)對(duì)該粗制總多糖進(jìn)行脫色、脫蛋白處理即獲得總多糖。
合并上述總生物堿和總多糖即為“有效部位群”。
(2)、“分別提取”或稱(chēng)其為“單味提取”，即，本發(fā)明的三味原藥材在提取前并不混合，而是分別提取各味藥材的有效成分從苦參中提取苦參總堿；從黃芪中提取黃芪多糖；從川芎中提取川芎總堿。這些提取方法可見(jiàn)于多種專(zhuān)著或相關(guān)文獻(xiàn)。將前文定義的比例范圍內(nèi)的各味藥材中所得的苦參總堿、黃芪多糖和川芎總堿混合即獲得所需的“有效部位群”。
2、由來(lái)源于特定“比例范圍”內(nèi)的苦參、黃芪兩種原藥材的總生物堿和總多糖與適量川芎嗪純化合物組成的有效部位群。該特定“比例范圍”是指所使用的苦參、黃芪兩種原藥材的比例在4∶1至1∶1之間，優(yōu)選比例2∶1。該有效部位群中來(lái)源于苦參和黃芪兩味藥材的總生物堿和總多糖，可以采用類(lèi)似于1(1)“混合提取”或1(2)“分別提取”中描述的方法提取，不同之處在于，此時(shí)的“混合提取”及“分別提取”的原藥材中均不包括川芎。而獲得這些總生物堿和總多糖后，按照川芎嗪量/提取物總量約為1∶15至1∶35的比例加入川芎嗪，由此獲得“有效部位群”。對(duì)于上述川芎嗪的加入量，在“混合提取”的情況下，其川芎嗪量/提取物總量的比例優(yōu)選為1∶25；在“分別提取”的情況下，其川芎嗪量/提取物總量的比例優(yōu)選為1∶20。
3、由黃芪多糖與氧化苦參堿、川芎嗪純品化合物組成的“有效部位群”。其中氧化苦參堿/黃芪多糖/川芎嗪的比例在3∶3∶1至24∶9∶1之間，并優(yōu)選10∶6∶1的比例。此外，上述氧化苦參堿、川芎嗪化合物既可以來(lái)源于植物(中藥材)提取，也可以來(lái)源于化學(xué)合成或半合成。
本發(fā)明還提出由上述“有效部位群”和生理學(xué)上可接受的賦形劑組成的藥用組合物。這些藥用組合物的劑型可以是口服固體制劑，如片劑、較囊劑等，也可以是胃腸外給藥用制劑，如注射液、注射用粉針劑或注射用凍干粉針劑等。
其中，口服固體制劑可以采用每日口服一次的單位劑型，其每片(粒)中含有上述“有效部位群”50～200mg。也可以制備每片(粒)含20～100mg“有效部位群”的口服固體制劑，例如，每片(粒)含50mg“有效部位群”的制劑，而每日給藥數(shù)次和/或每次給藥數(shù)片(粒)，如每日2～3次，每次2～3片(粒)。優(yōu)選的固體制劑是每片(粒)含“有效部位群”50～100mg，每日給藥2次，每次1～2片(粒)。
鑒于本發(fā)明組合物中含有總多糖，因而優(yōu)選的胃腸外給藥制劑為粉針劑或凍干粉針劑。
本發(fā)明的抗腫瘤組合物可用作治療原發(fā)性肺癌和預(yù)防肺癌術(shù)后復(fù)發(fā)及輔助治療其它實(shí)體瘤的藥物。
本發(fā)明組合物還可以與其它化療藥物聯(lián)用。由于本發(fā)明化合物具有免疫調(diào)節(jié)作用，因此當(dāng)本發(fā)明組合物與化療藥物聯(lián)合使用時(shí)，不僅在抗腫瘤療效上獲得加和作用，而且可在一定程度上減輕其它化療藥物對(duì)免疫系統(tǒng)和造血系統(tǒng)產(chǎn)生的不良副作用，并可能由此改善其它化療藥物的用藥周期。
實(shí)施例1混合提取法獲得“有效部位群”I)、分離總生物堿 取本文定義的三種原藥材，其中，苦參400g，黃芪200g，川芎100g，將這些藥材粉碎成20目粗粉(參見(jiàn)《中國(guó)藥典》2000版，一部，附錄)?；旌仙鲜鏊幉姆勰?，加入2800ml濃度為90％的乙醇進(jìn)行回流提取，回流2遍，每次60min。合并回流液，減壓回收乙醇，余約500ml殘留液于4℃下靜置過(guò)夜。離心去沉淀，上清液中加入2000ml含0.5％鹽酸的水溶液后，過(guò)柱體積約500ml強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂(732型，上?；瘜W(xué)試劑公司)。水洗樹(shù)脂柱至流出液近無(wú)色。取出樹(shù)脂適當(dāng)晾干，15％氨水(約80ml)堿化樹(shù)脂。堿化后樹(shù)脂以1000ml氯仿進(jìn)行索氏回流提取直至生物堿全部被洗脫。回流液以NaSO4干燥后，回收氯仿，獲得淺黃色總生物堿6.8g(以原藥材總量計(jì)得率約0.97％)。該總生物堿通過(guò)HPLC檢定(色譜條件為固定相—BDS柱[5.0mm×25cm×10μm]；流動(dòng)相—水∶甲醇＝42∶58[含0.01％三乙胺]；流速--1ml/min；柱溫35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)-220nm；進(jìn)樣量-20μl)，其氧化苦參堿、槐定堿、苦參堿、川芎嗪、總生物堿的含量分別為10.77％、9.50％、44.59％、0.005％、90.60％(參見(jiàn)附圖
)。
II)、分離總多糖步驟I)中乙醇回流后的原藥材殘?jiān)尤?000ml水煎煮提取。共煎2次，每次60min。之后，去殘?jiān)?，將合并濃縮至1000ml，加入乙醇使乙醇終濃度達(dá)20％，靜置并離心去沉淀。上清液繼續(xù)加乙醇使乙醇終濃度達(dá)到約70％，靜置并離心。取沉淀。將此沉淀重新溶解于500ml水中，加入活性炭10g，攪拌30min，加入乙醇使其終濃度達(dá)到30％，離心去沉淀。上清液繼續(xù)加乙醇至終濃度達(dá)70％，離心得沉淀，90％乙醇洗滌(200ml×2)，真空干燥獲得近白色總多糖5.7g(以原藥材總量計(jì)得率約0.81％)。以硫酸～苯酚法測(cè)得其糖含量為91％。
III)、制備“有效部位群”將步驟I)和步驟II)所得總生物堿和總多糖合并即得“有效部位群”12.5g，總得率約1.8％。其中總生物堿與總多糖的比例約為10∶8.3。
實(shí)施例2分別提取法獲得“有效部位群”I)、分離苦參總堿 取苦參原藥材400g粉碎成20目粗粉，以類(lèi)似實(shí)施例1中步驟I)的方法分離獲得苦參總堿約6.6g(得率約1.4％)。
II)、分離黃芪多糖 取黃芪原藥材200g粉碎成約20目粗粒，以類(lèi)似實(shí)施例1中步驟II)的方法獲得黃芪多糖3.8g(得率約1.9％)。
III)、分離川芎總堿 取川芎原藥材100g粉碎成20目粗粉，以400ml90％乙醇回流提取3次，每次60min，合并提取液，加入5％鹽酸75ml，回收乙醇后，4℃下靜置過(guò)夜。離心去沉淀，上清液以石油醚萃取(150ml×2)，水相以飽和碳酸鈉堿化pH10，氯仿萃取(150ml×3)。合并的氯仿相以1％鹽酸反萃(150ml×3)，再以飽和碳酸鈉堿化pH10，氯仿萃取(150ml×3)。減壓回收氯仿得到淡褐色川芎總堿約0.08g(得率約0.08％)。
IV)、制備“有效部位群”將步驟I)、步驟II)和步驟III)所得苦參總堿、黃芪多糖和川芎總堿糖合并即得“有效部位群”10.5g，總得率約1.5％。其中苦參總堿/黃芪多糖/川芎總堿約為10∶5.8∶0.01。
實(shí)施例3混合提取苦參和黃芪有效部位與純品川芎嗪合并獲得“有效部位群”I)、分離總生物堿 取苦參原藥材400g和黃芪原藥材200g粉碎成20目粗粉，以類(lèi)似實(shí)施例1中步驟I)的方法分離獲得總生物堿約6.6g(以生藥總量計(jì)得率約1.1％)。
II)、分離總多糖 步驟I)的藥材殘?jiān)灶?lèi)似實(shí)施例1中步驟II)的方法獲得總多糖4.9g(得率約0.8％)。
III)、制備“有效部位群”將步驟I)和步驟II)所得總堿和總多糖合并，并且加入0.66g川芎嗪即得“有效部位群”約12.2g。其中苦參總堿/黃芪多糖/川芎總堿約為10∶5.8∶1。
實(shí)施例4分別提取苦參和黃芪有效部位與純品川芎嗪合并獲得“有效部位群”取苦參原藥材400g和黃芪原藥材200g粉碎成20目粗粉，以實(shí)施例2中步驟I)和步驟II)的分別分離苦參總堿和黃芪多糖并，將它們合并后加入0.66g純品川芎嗪即得“有效部位群”約11.1g。其中總堿/總多糖/川芎嗪約為10∶7.4∶1。
實(shí)施例5以氧化苦參堿、黃芪多糖及川芎嗪制備“有效部位群”將純品化合物苦參堿、實(shí)施例2步驟II)中所得黃芪多糖與川芎嗪以10∶6∶1的比例混合即得所需的“有效部位群”。
實(shí)施例6實(shí)施例1所得“有效部位群”的抗腫瘤作用檢測(cè)(1)、對(duì)S180肉瘤的作用 昆明種小鼠，前肢腋下接種S180肉瘤細(xì)胞懸液(懸液濃度0.3g/ml，接種量0.01ml/g)，接種次日起腹腔注射系列濃度的實(shí)施例1所得“有效部位群”，連續(xù)10天。末次給藥后24小時(shí)剝離瘤塊稱(chēng)重，結(jié)果如表1所示。
表1 有效部位群給要前 給藥后 平均瘤重腫瘤抑給藥體重[g] 體重[g] [g] 制率[％][mg/kg]0 18.5±0.417.6±0.78.3±2.350 19.1±0.318.5±0.95.0±2.739.7100 18.5±0.618.5±14 4.5±2.145.7150 18.8±0.718.7±1.83.0±1.763.8(2)、對(duì)H22荷瘤小鼠的作用 昆明種小鼠，前肢腋下接種H22瘤株細(xì)胞懸液(懸液濃度0.3g/ml，接種量0.01ml/g)，接種次日起腹腔注射系列濃度的實(shí)施例1所得“有效部位群”，連續(xù)10天。末次給藥后24小時(shí)剝離瘤塊稱(chēng)重，結(jié)果如表2所示。
表2 [n＝12，X±S]有效部位群給要前 給藥后 平均瘤重 腫瘤抑給藥體重[g] 體重[g] [g] 制率[％][mg/kg]020.5±1.330.8±3.02.77±1.2250 21.7±1.232.8±3.21.71±0.8638.3100 21.3±1.331.5±1.91.43±0.6548.4150 21.3±0.731.7±1.81.09±0.3760.7(3)、對(duì)Lewis荷瘤小鼠的作用 C57BL/6J小鼠，前肢腋下接種Lewis瘤株細(xì)胞懸液(懸液濃度0.3g/ml，接種量0.01ml/g)，接種次日起腹腔注射系列濃度的實(shí)施例1所得“有效部位群”，連續(xù)10天。末次給藥后24小時(shí)剝離瘤塊稱(chēng)重，結(jié)果如表3所示。
表3 [n＝12，X±S]有效部位群給要前 給藥后 平均瘤重 腫瘤抑給藥體重[g] 體重[g] [g] 制率[％][mg/kg]0 21.3±1.325.2±1.02.85±0.655021.3±1.524.5±1.51.93±0.7432.3
100 21.5±1.2 24.0±1.5 1.76±0.71 38.3150 21.8±1.4 24.2±1.4 1.34±0.36 53.0實(shí)施例7實(shí)施例5所得“有效部位群”的抗腫瘤作用檢測(cè)對(duì)H22荷瘤小鼠的作用 昆明種小鼠，前肢腋下接種H22瘤株細(xì)胞懸液(懸液濃度0.3g/ml，接種量0.01ml/g)，接種次日起腹腔注射系列濃度的實(shí)施例5所得“有效部位群”，連續(xù)10天。末次給藥后24小時(shí)剝離瘤塊稱(chēng)重，結(jié)果如表4所示。
表4[n＝12，X±S]有效部位群給要前 給藥后 平均瘤重 腫瘤抑給藥體重[g] 體重[g] [g] 制率[％][mg/kg]0 20.0±0.327.7±4.02.72±1.1850 20.0±0.929.6±3.12.34±1.0213.9100 20.5±0.930.5±3.21.87±0.8331.3150 20.0±0.829.4±2.51.58±0.6142.0
權(quán)利要求
1.一種抗腫瘤組合物，其特征在于，它包括來(lái)源于苦參、黃芪和川芎三種中藥材的抗腫瘤“有效部位群”，以及生理學(xué)上可接受的藥用賦形劑，其中，“有效部位群”為(1)、從按一定比例混合的上述三味原藥材中提取的總生物堿和總多糖的混合物；(2)、從一定比例的上述三味藥材分別提取苦參總堿、黃芪多糖以及川芎總堿后再?gòu)?fù)合組成的混合物；(3)、從一定比例的苦參和黃芪兩味原藥材中提取的總生物堿和總多糖，此既可以是將苦參和黃芪兩種藥材混合后提取其所含的總生物堿和總多糖，也可以是分別提取苦參總堿和黃芪多糖，然后再加入相應(yīng)比例的川芎嗪而形成的混合物；(4)、由黃芪多糖與氧化苦參堿、川芎嗪等純品化合物按照比例組成的混合物。
2.權(quán)利要求1的組合物，其有效部位群所含生物堿類(lèi)化合物和多糖類(lèi)化合物的實(shí)際含量之和不低于混合物總量的80％。
3.權(quán)利要求1的組合物，其有效部位群是從苦參、黃芪及川芎三味原藥材的混合物中提取的總生物堿和總多糖的混合物。
4.權(quán)利要求3的組合物，其中用于提取有效部位群的苦參、黃芪及川芎三味原藥材的用量比例(w/w/w)在16∶4∶1至1∶1∶1之間。
5.如權(quán)利要求4的組合物，其中用于提取有效部位群的苦參、黃芪及川芎三味原藥材的用量比例(w/w/w)在6∶3∶1至3∶1.5∶1之間。
6.權(quán)利要求5的組合物，其中用于提取有效部位群的苦參、黃芪及川芎三味原藥材的用量比例(w/w/w)為4∶2∶1。
7.權(quán)利要求1的組合物，其中的有效部位群是從苦參、黃芪及川芎三味原藥材中分別提取的苦參總堿、黃芪多糖和川芎總堿的混合物。
8.權(quán)利要求7的組合物，其中用于提取有效部位群的苦參、黃芪及川芎三味原藥材的用量比例(w/w/w)在16∶4∶1至1∶1∶1之間。
9.權(quán)利要求8的組合物，其中用于提取有效部位群的苦參、黃芪及川芎三味原藥材的用量比例(w/w/w)在6∶3∶1至3∶1.5∶1之間。
10.權(quán)利要求9的組合物，其中用于提取有效部位群的苦參、黃芪及川芎三味原藥材的用量比例(w/w/w)為4∶2∶1。
11.權(quán)利要求1的組合物，其中的有效部位群是從苦參、黃芪兩味原藥材的混合物中提取的總生物堿和總多糖與純品川芎嗪的混合物。
12.權(quán)利要求11的組合物，其中用于提取有效部位群的兩味原藥材的混合物中苦參與黃芪的比例在4∶1至1∶1之間，而加入的川芎嗪與提取物總量的比例在1∶10至1∶40之間。
13.權(quán)利要求12的組合物，其中用于提取的有效部位群的兩味原藥材的混合物中苦參與黃芪的比例為2∶1，而加入的川芎嗪與提取物總量的比例為1∶20。
14.權(quán)利要求1的組合物，其中的有效部位群是從苦參中提取的苦參總堿、從黃芪中提取的黃芪多糖與純品川芎嗪的混合物。
15.權(quán)利要求14的組合物，其中用于提取有效部位群的苦參與黃芪兩味原藥材的用量比例在4∶1至1∶1之間，而加入的川芎嗪與提取物總量的比例在1∶10至1∶40之間。
16.權(quán)利要求15的組合物，其中用于提取的有效部位群的苦參與黃芪兩味原藥材的用量比例為2∶1，而加入的川芎嗪與提取物總量的比例為1∶16。
17.權(quán)利要求1的組合物，其中的有效部位群由氧化苦參堿、黃芪多糖以及川芎嗪組成。
18.權(quán)利要求17的組合物，其中的有效部位群中的氧化苦參堿/黃芪多糖/川芎嗪的比例在3∶3∶1至24∶9∶1之間。
19.權(quán)利要求18的組合物，其中的有效部位群中的氧化苦參堿/黃芪多糖/川芎嗪的比例為10∶6∶1。
20.權(quán)利要求1的組合物的制備方法，其有效部位群按如下步驟制取(1)、將三種原藥材粉碎成粗粉，混合后采用濃度為80％以上的乙醇進(jìn)行回流提取；(2)、回收步驟(1)所得回流液中的乙醇后，殘留液于0℃～10℃下靜置，離心去沉淀，上清液中加入2～4倍量的含0.1％～2％鹽酸的水溶液后，過(guò)強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，水洗樹(shù)脂柱后再堿化樹(shù)脂，以有機(jī)溶劑回流提取樹(shù)脂上吸附的生物堿，或以堿化后的醇溶液直接洗脫水洗后的樹(shù)脂柱，回收流出液的乙醇后，以水不溶性有機(jī)溶劑萃取，回收萃取液溶劑后即獲得所需的生物堿；(3)、適量的水加熱提取步驟(1)中醇回流后的藥材殘?jiān)?，合并的提取液中以乙醇進(jìn)行分級(jí)沉淀，獲得粗制總多糖，并對(duì)該粗制總多糖進(jìn)行脫色、脫蛋白處理即獲得總多糖；(4)、合并步驟(2)和步驟(3)所得的總生物堿和總多糖即為有效部位群。
21.權(quán)利要求1的組合物用作治療原發(fā)性肺癌和預(yù)防肺癌術(shù)后復(fù)發(fā)及輔助治療其它實(shí)體瘤的藥物。
全文摘要
一種抗腫瘤組合物及其制備方法和用途,其組合物包括以來(lái)源于三種中藥材——苦參、黃芪和川芎的生物堿和多糖,或者以上述三種中藥材所含化合物——氧化苦參堿、黃芪多糖和川芎嗪組成抗腫瘤活性成分,并包括生理上可接受的藥用賦形劑;其制備方法包括兩種,其一是將三味藥材按上述比例混合后,分步驟提取其總生物堿和總多糖;其二是將上述比例的原藥材分別提取活性成分,然后將所得的這些成分合并成為有效部位群。本發(fā)明的抗腫瘤組合物可用作治療原發(fā)性肺癌和預(yù)防肺癌術(shù)后復(fù)發(fā)及輔助治療其它實(shí)體瘤的藥物。
文檔編號(hào)A61K31/715GK1362064SQ0113018
公開(kāi)日2002年8月7日 申請(qǐng)日期2001年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2001年12月30日
發(fā)明者趙金華, 趙耘, 姚倩, 梅映昊, 李靖, 蔡培烈, 林洪生, 李樹(shù)奇, 李攻戍 申請(qǐng)人:深圳海王藥業(yè)有限公司