專利名稱：抗her2抗體-藥物偶聯(lián)物和化療劑的組合,及使用方法
抗HER2抗體-藥物偶聯(lián)物和化療劑的組合，及使用方法
對相關(guān)申請的交叉引用
依據(jù)37CFR § 1. 53(b)提交的此非臨時申請依據(jù)35USC § 119(e)要求2008年3月 18日提交的美國臨時申請流水號61/037，410(通過述及完整收入本文)的權(quán)益。發(fā)明領(lǐng)域
本發(fā)明一般涉及具有針對高增殖性病癥諸如癌癥的活性的化合物的藥物組合。本 發(fā)明還涉及使用所述化合物組合體外，原位，和體內(nèi)診斷或治療哺乳動物細(xì)胞，或有關(guān)病理 狀況的方法。
發(fā)明背景
HER2 (ErbB2)受體酪氨酸是表皮生長因子受體(EGFR)跨膜受體家族的一個成員。 在大約20%的人乳腺癌中觀察到HER2的過表達(dá)，而且HER2的過表達(dá)涉及與這些腫瘤有關(guān) 的侵入性生長和不良臨床結(jié)果(Slamon等(1987) Science 235:177-182)。
trastuzumab (CAS 180288-69-1，HERCEPTIN ，huMAb4D5_8，rhuMAbHER2， Genentech)是鼠HER2抗體的一種重組DNA衍生人源化，IgGl κ，單克隆抗體型式，其在 基于細(xì)胞的測定法中以高親和力(Kd = 5ηΜ)選擇性結(jié)合人表皮生長因子受體2蛋白， HER2 (ErbB2)的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域(US5677171 ;US 5821337 ；US 6054297 ；US 6165464 ；US 6339142 ；US 6407213 ；US 6639055 ；US 6719971 ；US 6800738 ；US 7074404 ；Coussens 等 (1985) Science 230 :1132-9 ；Slamon 等(1989)kience 244 :707-12 ；Slamon 等 O001)New Engl. J. Med. 344 :783-792)。trastuzumab含有人框架區(qū)及結(jié)合HER2的鼠抗體0D5)的互 補(bǔ)決定區(qū)。trastuzumab結(jié)合HER2抗原，由此抑制癌性細(xì)胞的生長。已經(jīng)在體外測定法中 和在動物中顯示了 trastuzumab抑制過表達(dá)HER2的人腫瘤細(xì)胞的增殖(Hudziak等(1989) Mol Cell Biol 9 :1165-72 ；Lewis 等(1993)Cancer Immunol Immunother ；37 :255-63 ； Baselga 等(1998) Cancer Res. 58 J825-2831)。trastuzumab 是抗體依賴性細(xì)胞的細(xì)胞毒 性，ADCC的介導(dǎo)物(Lewis等(1993)Cancer ImmunolImmunother 37(4) :255-263 ；Hotaling 等(1996)[abstract]. Proc. Annual Meeting Am Assoc Cancer Res ；37 :471 ；Pegram MD等 (1997)[abstract]. Proc Am Assoc Cancer Res ；38 602 ；Sliwkowski ^ (1999)Seminars in Oncology 26(4)，Suppl 12 :60-70 ；Yarden Y.禾口 Sliwkowski，Μ· (2001)Nature Reviews :Molecular Cell Biology, Macmillan Magazines, Ltd. , Vol. 2 :127-137)。
HERCEPTIN 在1998年被批準(zhǔn)用于治療已經(jīng)接受廣泛在先抗癌療法，具有過 表達(dá)ErbB2的轉(zhuǎn)移性乳腺癌的患者(Baselga等，(1996) J. Clin. Oncol. 14 :737-744)，而且 已經(jīng)在超過 300，000 名患者中使用(Slamon DJ 等，N Engl J Med2001 ；344 :783-92 ；Vogel CL 等，J Clin Oncol 2002 ；20 :719-26 ；Marty M 等，J Clin Oncol 2005；23 :4265-74 ； Romond EH 等，T N EnglJ Med 2005 ；353 :1673-84 ；Piccart-Gebhart MJ 等，N Engl J Med 2005 ；353 :1659-72 ；Slamon D 等，[abstract]. Breast Cancer Res Treat 2006， 100 (Suppll) 52)。在 2006 年，F(xiàn)DA 批準(zhǔn)了 HERCEPTIN (trastuzumab，Genentech Inc.)作為含有多柔比星，環(huán)磷酰胺和帕利他塞的治療方案的一部分用于具有HER2陽性，4結(jié)節(jié)陽性乳腺癌的患者的輔助治療。雖然HERCEPTIN 的開發(fā)給具有HER2陽性腫 瘤的患者提供了比單獨(dú)的化療顯著要好的結(jié)果，但是實(shí)質(zhì)上所有HER2陽性，轉(zhuǎn)移性乳腺 癌(MBC)患者最終會在已有療法上進(jìn)展。仍有機(jī)會來改善具有MBC的患者的后果。盡管 trastuzumab的多樣作用機(jī)制，許多用trastuzumab治療的患者不顯示響應(yīng)或在一段時間 的治療受益后停止響應(yīng)。有些HER2+(HER2陽性)腫瘤沒有響應(yīng)HERCEPTIN ，而且腫瘤 有響應(yīng)的患者大多數(shù)最終有發(fā)展。臨床上顯著需要為對HERCEPTIN 治療不響應(yīng)或響 應(yīng)不足，具有過表達(dá)HER2的腫瘤或其它與HER2表達(dá)有關(guān)的疾病的患者開發(fā)別的針對HER2 的癌癥療法。
抗體靶向療法的一種替代辦法是利用抗體來特異性遞送細(xì)胞毒性藥物至表達(dá) 抗原的癌細(xì)胞。美登木素生物堿類，即抗有絲分裂藥物美登素的衍生物，以與長春花生 物堿類藥物相似的方式結(jié)合微管(Issell BF等(1978)Cancer Treat. Rev. 5 =199-207 ； Cabanillas F 等(1979)Cancer Treat Rep,63 :507-9) 由美登木素生物堿類 DMl 連接 至trastuzumab構(gòu)成的抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC)在過表達(dá)HER2的trastuzumab敏感性 和trastuzumab抗性腫瘤細(xì)胞系，和人乳腺癌的異種移植物模型中顯示有力的抗腫瘤活 性。美登木素生物堿類經(jīng)MCC接頭連接至抗HER2鼠乳腺癌抗體TA. 1的偶聯(lián)物比相應(yīng)的 具有二硫化物接頭的偶聯(lián)物效力低200倍(Chari等(1992)Cancer Res. 127-133)。由美 登木素生物堿類DMl連接至trastuzumab構(gòu)成的抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC)在過表達(dá)HER2 的trastuzumab敏感性和抗性腫瘤細(xì)胞系和人癌癥的異種移植物模型中顯示有力的抗腫 瘤活性。trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)當(dāng)前正在其疾病對HER2定向療法不應(yīng)的患者中在 II 期臨床試驗(yàn)中進(jìn)行評估(Beeram 等 Q007) “A phase I study of trastuzumab-MCC-DM 1(T-DM 1)，a first-in-class HER2antibody-drug conjugate (ADC), in patients (pts) with HER2+metastatic breast cancer (BC)，，，American Society of Clinical Oncology 43rd : June 02 (Abs 1042 ；Krop 等，European Cancer Conference ECC0, Poster 2118, September 23-27，2007，Barcelona ;US 7097840 ；US 2005/0276812 ；US 2005/0166993)。
以一些劑量給藥方案或施藥形式一起使用兩種或更多種藥物的組合療法通常具 有下述一項(xiàng)或多項(xiàng)目的(i)通過組合具有最小交叉耐藥性的藥物來降低發(fā)生獲得性耐 藥性的頻率，(ii)降低具有非交疊毒性和相似治療特性的藥物的劑量以實(shí)現(xiàn)功效及較少 的副作用，即提高治療指數(shù)，(iii)通過使用一種藥物，諸如改變細(xì)胞周期階段或生長特性 使細(xì)胞對另一種藥物的作用敏感，和(iv)通過探索兩種藥物在生物學(xué)活性中的加和效應(yīng) (additivity)，或大于加和效應(yīng)的效應(yīng)來實(shí)現(xiàn)增強(qiáng)的效力(Pegram，Μ.等(1999) Oncogene 18 :2241-2251 ；Konecny, G.等(2001)Breast Cancer Res. and Treatment 67:223-233; Pegram, M.等(2004)J. ofthe Nat. Cancer Inst. 96(10) :739-749 ；Fitzgerald ^ (2006) Nature Chem. Biol. 2 (9) :458-466 ；Borisy ^ (2003) Proc. Natl. Acad. Sci 100(13) 7977-7982)。
Loewe 加和效應(yīng)(Chou, Τ. C.和 Talalay，P. (1977) J. Biol. Chem. 252 :6438-6442 ； Chou, Τ. C.禾口 Talalay，P. (1984) Adv. Enzyme Regul. 22 :27-55 ；Berenbaum, Μ. C. (1989) Pharmacol. Rev. 41 :93-141)和 Bliss 獨(dú)立性 / 協(xié)同性(Bliss, C. I. (1956)Bacteriol. Rev. 20 :243-258 ；Greco 等(1995)Pharmacol. Rev. 47 :331-385)是基于參數(shù)諸如 IC50,即 實(shí)現(xiàn)50%目標(biāo)抑制需要的，在最簡單的情況中等于Ki的藥物劑量，與單一療法相比為組合療法計(jì)算預(yù)期劑量-響應(yīng)關(guān)系的方法。
已經(jīng)報告了 HER2 二聚化抑制劑抗體和EGFR抑制劑用于針對癌癥的組合療法(US 2007/0020261)。trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)和 pertuzumab 已經(jīng)分別在 MBC 患者中展示 了活性，而且pertuzumab和trastuzumab的組合已經(jīng)顯示了在HER陽性MBC患者中有活性 (Baselga J 等,“A Phase II trial of trastuzumab and pertuzumab in patients with HER2-positive metastatic breast cancer that had progressed during trastuzumab therapy :full response data", European Society of Medical Oncology, Stockholm, Sweden, September 12-16,2008)。
發(fā)明概述
本發(fā)明一般涉及與一種或多種化療劑組合施用以抑制癌細(xì)胞生長的抗HER2抗 體-藥物偶聯(lián)物，trastuzumab-MCC-DMl。trastuzumab-MCC-DMl和化療劑的某些組合在體 外和在體內(nèi)在抑制癌細(xì)胞生長中顯示協(xié)同效應(yīng)。本發(fā)明的組合和方法可用于治療高增殖性 病癥諸如癌癥。所述組合可抑制哺乳動物中的腫瘤生長，而且可用于治療人癌癥患者。
一方面，本發(fā)明包括一種用于治療高增殖性病癥的方法，包括以組合配制劑 形式或交替地對哺乳動物施用治療劑組合，其中所述治療劑組合包含治療有效量的 trastuzumab-MCC-DMl，和治療有效量的選自HER2 二聚化抑制劑抗體，抗VEGF抗體，5-FU， 卡鉬，lapatinib，ABT-869，多西他賽，GDC-0941，和 GNE-390 的化療劑。
所述治療有效量的trastuzumab-MCC-DMl和所述治療有效量的化療劑可以以組 合配制劑形式或交替地施用。
本發(fā)明還涉及使用所述組合物體外，原位，和體內(nèi)診斷或治療哺乳動物細(xì)胞，生物 體，或有關(guān)病理狀況的方法。
本發(fā)明還涉及其中所述治療劑組合的施用導(dǎo)致協(xié)同效應(yīng)的方法。
本發(fā)明的另一個方面是藥物組合物，其包含trastuzumab-MCC-DMl，選自HER2 二 聚化抑制劑抗體，抗VEGF抗體，5-FU，卡鉬，lapatinib，ABT-869，多西他賽，⑶C-0941，和 GNE-390的化療劑；和一種或多種藥學(xué)可接受載體，助流劑，稀釋劑，或賦形劑。
本發(fā)明的另一個方面提供治療高增殖性疾病或病癥的方法，包括對需要此類治療 的哺乳動物施用有效量的trastuzumab-MCC-DMl和化療劑。trastuzumab-MCC-DMl和化療 劑可以共配制，供作為藥物配制劑組合施用，或者它們可以作為治療劑組合交替地(交替， 序貫給藥)分開施用。在一個實(shí)施方案中，T-DMl是通過輸注遞送的，而化療劑是口服遞送 的。
本發(fā)明的另一個方面提供為體內(nèi)功效預(yù)測有效藥物組合的方法，其中所述組合包 括trastuzumab-MCC-DMl和抗癌標(biāo)準(zhǔn)化療劑。定性和定量分析來自體外細(xì)胞增殖和體內(nèi)腫 瘤異種移植物實(shí)驗(yàn)的功效數(shù)據(jù)。定量分析方法可基于Chou和Talalay的中位效應(yīng)(median effect)和等效線圖解法，生成組合指數(shù)(Combination Index, Cl)值來表示協(xié)同，拮抗，或 加和，或者基于Bliss獨(dú)立性帶狀圖偏離。
本發(fā)明的另一個方面是一種使用本發(fā)明的治療劑組合來治療哺乳動物中的疾病 或狀況(諸如癌癥，包括受HER2或KDR9 (VEGF受體1)調(diào)控的)的方法。
本發(fā)明的另一個方面是本發(fā)明的治療劑組合在制備用于治療哺乳動物中疾病或 狀況(諸如癌癥，包括受HER2或KDR9 (VEGF受體1)調(diào)控的)的藥物中的用途。6
本發(fā)明的另一個方面包括制品或試劑盒，其包含trastuzumab-MCC-DMl，化療劑， 容器，和任選的指示治療方法的包裝插頁或標(biāo)簽。
本發(fā)明的另一個方面包括一種用于為癌癥治療確定要組合使用的化合物的方法， 包括a)對體外腫瘤細(xì)胞系施用trastuzumab-MCC-DMl，和選自HER2 二聚化抑制劑抗體，抗 VEGF 抗體，5-FU，卡鉬，lapatinib，ABT-869，多西他賽，GDC-0941，和 GNE-390 的化療劑的治 療劑組合，并b)測量協(xié)同或非協(xié)同效應(yīng)。
本發(fā)明的另外的優(yōu)點(diǎn)和新穎的特征部分在下面的說明中列出，部分在檢查下面的 說明書后對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的或可以通過本發(fā)明的實(shí)踐而學(xué)會。憑借所附權(quán) 利要求中特別指出的手段/工具，組合，組合物，和方法可以認(rèn)識和獲得本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。
附圖簡述


圖1顯示3天SK-BR-3體外細(xì)胞生存力相對于IC50倍數(shù)濃度的trastuzumab， trastuzumab-MCC-DM 1 (T-DM 1)，和 trastuzumab 和 T-DM 1 組合的圖。
圖2顯示3天BT-474EEI體外細(xì)胞生存力相對于IC50倍數(shù)濃度的trastuzumab， trastuzumab-MCC-DM 1 (T-DM1)，和 trastuzumab 和 T-DM1 組合的圖。
圖3顯示5天MDA-MB-175體外細(xì)胞生存力相對于IC50倍數(shù)濃度的pertuzumab， trastuzumab-MCC-DMl (T-DM1)，和 pertuzumab 和 T-DM1 組合的圖。
圖3a顯示5天MDA-MB-175體外細(xì)胞生存力相對于IC50倍數(shù)濃度的pertuzumab， trastuzumab-MCC-DMl (T-DM1)，和 pertuzumab 和 T-DM1 組合的圖。
圖4顯示5天BT-474體外細(xì)胞生存力相對于各種各種固定劑量的pertuzumab聯(lián) 合trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)，和單獨(dú)的各種劑量的T-DMl的劑量響應(yīng)的圖。
圖5顯示5天BT-474體外細(xì)胞生存力相對于各種固定劑量的 trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)聯(lián)合 pertuzumab，和單獨(dú)的各種劑量的 pertuzumab 的劑量 響應(yīng)的圖。
圖6顯示5天BT-474體外細(xì)胞生存力相對于IC50倍數(shù)濃度的pertuzumab， trastuzumab-MCC-DM 1 (T-DM 1)，和 pertuzumab 和 T-DM 1 組合的圖。
圖7顯示3天SK-BR-3體外細(xì)胞生存力相對于不同劑量的T-DMl聯(lián)合固定劑量的 lapatinib (4. 5nM，14nM，41nM，123nM)，和單獨(dú)的不同劑量的 T-DM1 (0-1000ng/ml)的圖。
圖7a顯示3天SK-BR-3體外細(xì)胞生存力相對于T-DM1，lapatinib，和固定劑量比 例的T-DMl和lapatinib組合的圖。
圖8a顯示3天BT-474體外細(xì)胞生存力相對于T-DM1，lapatinib，和固定劑量比 例的T-DMl和lapatinib組合的圖。
圖8顯示3天BT-474體外細(xì)胞生存力相對于不同劑量的T-DMl聯(lián)合固定劑量的 lapatinib (1. 5nM, 4. 5nM, 14nM, 41nM, 123nM)，和單獨(dú)的不同劑量的 T-DMl (0-1000ng/ml) 的圖。
圖9顯示3天BT-474-EEI體外細(xì)胞生存力相對于不同劑量的T-DMl聯(lián)合固定劑量 的 lapatinib (14nM，41nM，123nM，370nM，IlllnM)，和單獨(dú)的不同劑量的 T-DMl (O-IOOOng/ ml)的圖。
圖10顯示如下給藥后接種入SCID米色小鼠乳房脂肪墊的KPL-4腫瘤的體內(nèi) 腫瘤體積均值隨時間變化的圖(每只小鼠Matrigel中3百萬個細(xì)胞)=(I)ADC緩沖液，(2)pertuzumab 15mg/kg, (3)T-DM10. 3mg/kg，(4)T-DMllmg/kg, (5)T_DM13mg/kg，(6) pertuzumab 15mg/kg+T-DM10. 3mg, (7)pertuzumab 15mg/kg+T-DMllmg/kg, (8)pertuzumab 15mg/kg+T-DMi;3mg/kg。ADC 緩沖液和 T-DMl 第 O 天給藥一次。pertuzumab 第 0，7，和 14 天給藥。
圖11顯示如下給藥后接種入SCID米色小鼠乳房脂肪墊的KPL-4腫瘤的體內(nèi) 腫瘤體積均值隨時間變化的圖(每只小鼠Matrigel中3百萬個細(xì)胞)=(I)ADC緩沖液， (2) 5-FU 100mg/kg, (3) pertuzumab 40mg/kg,第一劑 pertuzumab (第 5，7，禾口 9 組)為 2x 加載劑量，(4)B20-4. l，5mg/kg，(5) T-DM1，5mg/kg，(6) 5-FU，100mg/kg+T-DMl，5mg，(7) pertuzumab 40mg/kg+T_DMl，5mg/kg，(8)B20_4. 1，5mg/kg+T_DMl，5mg/kg，(9)B20-4.1, 5mg/kg+pertuzumab，40mg/kg。ADC緩沖液和T-DMl通過單次iv注射第0天給藥一次。 pertuzumab 第 0，7，14，21 天給藥(qwk x4)。5-FU 第 0，7 和 14 天給藥(qwkx3)。B20-4. 1 第 0，3，7，10，14，17，21 和 24 天給藥(2X/wk，總共 8 次)。
圖12顯示如下給藥后接種入CRL nu/nu小鼠乳房脂肪墊的MMTV_HER2Fo5轉(zhuǎn)基 因乳腺腫瘤的體內(nèi)腫瘤體積均值隨時間變化的圖(1)媒介(ADC緩沖液)，(2)B20-4. 1， 5mg/kg, (3)T-DMl，3mg/kg，(4)T-DMl，5mg/kg，(5)T-DMl，10mg/kg，(6) B20-4. 1，5mg/ kg+T-DM13mg/kg, (7)Β20_4· 1，5mg/kg+T_DM15mg/kg，⑶B20-4. 1，5mg/kg+T_DMl，10mg/kg。 ADC緩沖液和T-DMl第0和21天給藥。B20-4. 1第0，3，7，10，14，17，21和24天給藥(2X/ wk x4,總共8次)。
圖13顯示如下給藥后接種入CRL nu/nu小鼠乳房脂肪墊的MMTV_HER2Fo5轉(zhuǎn) 基因乳腺腫瘤的體內(nèi)腫瘤體積均值隨時間變化的圖(1)媒介(ADC緩沖液)，(2)T-DMl 10mg/kg, (3) 5-FU 100mg/kg, (4)吉西他濱 120mg/kg, (5)卡鉬 100mg/kg, (6) 5-FU IOOmg/ kg+T-DM110mg/kg, (7)吉西他濱 l20mg/kg+T-DM110mg/kg，(8)卡鉬 100mg/kg+T-DM110mg/ kg。ADC緩沖液，T-DMl和卡鉬第0天給藥；單次注射。5-FU第0，7和14天給藥(qwk x3)。 吉西他濱第0，3，6和9天給藥(q3d x4)。
圖14顯示如下給藥后接種入Harlan無胸腺裸小鼠乳房脂肪墊的MMTV-Her2Fo5 轉(zhuǎn)基因乳腺腫瘤的體內(nèi)腫瘤體積均值隨時間變化的圖(1)媒介(PBS緩沖液)iv，qwk x4, (2)lapatinib 101mg/kg, po, bid x21, (3)pertuzumab 40mg/kg, iv, qwk x4, (4) B20-4. 15mg/kg, ip,2x/wk x4, (5) T-DM115mg/kg, iv,(6) lapatinib IOlmg/ kg, po, bid x21 +T-DM115mg/kg, iv, q3wk 至 結(jié) 束，(7)pertuzumab 40mg/kg, iv, qwk x4+T-DM115mg/kg, iv, q3wk 至結(jié)束，⑶ B20-4. 15mg/kg, ip,2x/wk x4+T_DM115mg/kg，iv, q3wk至結(jié)束。
圖15顯示如下給藥后接種入Harlan無胸腺裸小鼠乳房脂肪墊的MMTV_Her2 Fo5 轉(zhuǎn)基因乳腺腫瘤的體內(nèi)腫瘤體積均值隨時間變化的圖(1)媒介(PBS緩沖液)po，bid x21, (2)T-DM1，7. 5mg/kg，iv，qd xl,(3)T-DM1，15mg/kg，iv，qd xl, (4)ABT-869，5mg/kg，po，bid x21, (5)ABT-869,15mg/kg, po, bid x21, (6)T-DM1,7. 5mg/kg, iv, qd χ1+ABT-869,5mg/kg, po，bid x21, (7)T-DM17. 5mg/kg, iv,qd xl+ABT—869，15mg/kg，po，bidx21，(8)T-DMl,15mg/ kg,iv,qd xl+ABT-869,5mg/kg, po,bid x21,(9)T-DM1,15mg/kg,iv,qd χ1+ABT-869,15mg/ kg, po,bid x21ο
圖16顯示如下給藥后接種入Harlan無胸腺裸小鼠乳房脂肪墊的MMTV-Her2Fo5轉(zhuǎn)基因乳腺腫瘤的體內(nèi)腫瘤體積均值隨時間變化的圖⑴媒介，i V, qwk x3, (2)T-DMl, 7. 5mg/kg, iv, q3wk x2, (3) T-DMl, 15mg/kg, iv, q3wk x2, (4) ^Hftll^, 30mg/kg, iv, qwk x3, (5)T-DM1,7. 5mg/kg, iv, q3wk x2+多胃，30mg/kg，iv, qwk x3, (6) T-DMl, 15mg/kg, iv, q3wk x2+ 多西他賽，30mg/kg, iv, qwk x3
圖17顯示如下給藥后種接入Harlan無胸腺裸小鼠乳房脂肪墊的MMTV-Her2Fo5 轉(zhuǎn)基因乳腺腫瘤的體內(nèi)腫瘤體積均值隨時間變化的圖(1)媒介，po，qd x21, (2)T-DMl, 7. 5mg/kg, iv, q3wk x2, (3) T-DMl, 15mg/kg, iv, q3wk x2, (4) lapatinib, lOOmg/kg, po, bid x21, (5)T-DMl，7. 5mg/kg,iv,q3wk x2+lapatinib,lOOmg/kg,po,bid x21, (6)T-DMl,15mg/ kg, iv, q3wk x2+lapatinib, lOOmg/kg, po, bid x21。
圖18顯示3天SK-BR-3體外細(xì)胞生存力相對于IC50倍數(shù)濃度的5-FU， trastuzumab-MCC-DMl (T-DM1)，和固定劑量比例的5-FU和T-DM1組合的圖。
圖19顯示3天BT-474體外細(xì)胞生存力相對于IC50倍數(shù)濃度的5_FU， trastuzumab-MCC-DMl (T-DM1)，和固定劑量比例的5-FU和T-DM1組合的圖。
圖20顯示3天SK-BR-3體外細(xì)胞生存力相對于IC50倍數(shù)濃度的吉西他濱， trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)，和固定劑量比例的吉西他濱和T-DMl組合的圖。
圖21顯示3天MDA-MD-361體外細(xì)胞生存力相對于IC50倍數(shù)濃度的吉西他濱， trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)，和固定劑量比例的吉西他濱和T-DMl組合的圖。
圖22顯示以IC50倍數(shù)濃度0. 2 至4x用T-DM1，GDC-0941，和1 10固定劑量 比例的T-DMl和GDC-0941 (62. 5nM至1 μ Μ)組合處理后3天KPL4體外細(xì)胞生存力(增殖) 的圖。加和效應(yīng)的Bliss預(yù)測以虛線繪圖。
圖 23 顯示以 IC50 倍數(shù)濃度 0. 0625x 至 16x 用 T-DMl，GDC-0941，和 1 25 固定 劑量比例的 T-DMl (1. 25 至 80ng/ml)和 GDC-0941 (31. 25nM 至 2 μ Μ)組合處理后 3 天 KPL4 體外細(xì)胞生存力(增殖)的圖。加和效應(yīng)加和效應(yīng)的Bliss預(yù)測以虛線繪圖。
圖24顯示以IC50倍數(shù)濃度0至16x用T_DM1，PI103，GDC_0941，和固定劑量比例 的T-DM1+PI103，和T-DM1+GDC-0941組合處理后3天Her2擴(kuò)增的、HERCEPTIN 耐藥性 的、PIK3CA(H1047R)突變的KPL-4細(xì)胞體外細(xì)胞生存力(增殖)的圖。
圖25顯示以T-DMl濃度高至160ng/ml用T-DM1，⑶C-0941，和固定劑量比例的 T-DMl和⑶C-0941組合處理后M小時KPL4胱天蛋白酶3/7體外細(xì)胞生存力(增殖)的 圖。
圖26顯示以T-DMl濃度0至200ng/ml用T-DMl，GDC-0941，和固定劑量比例的 T-DMl和⑶C-0941組合處理后3天KPL4體外細(xì)胞生存力(增殖)的圖。
圖27顯示以IC50倍數(shù)濃度0. 12 至8x用T-DM1，GDC-0941，和1 20固定劑量比 例的 T-DMl (3. 125 至 50ng/ml)和 GDC-0941 (62. 5nM 至 1 μ Μ)組合處理后 3 天MDA-0MB-361 體外細(xì)胞生存力(增殖)的圖。加和效應(yīng)的Bliss預(yù)測以虛線繪圖。
圖洲顯示以IC50倍數(shù)濃度0. 12 至8x用T-DM1，GDC-0941，和1 20固定劑量比 例的 T-DMl (3. 125 至 100ng/ml)和 GDC-0941 (62. 5nM至 2 μ Μ)組合處理后 3 天MDA-0MB-361 體外細(xì)胞生存力(增殖)的圖。加和效應(yīng)的Bliss預(yù)測以虛線繪圖。
圖四顯示以IC50倍數(shù)濃度0. 12 至4x用T-DM1，GDC-0941，和1 10固定劑量 比例的 T-DMl (3. 125 至 100ng/ml)和 GDC-0941 (31. 25nM 至 1 μ Μ)組合處理后 3 天 ΒΤ-474體外細(xì)胞生存力(增殖)的圖。加和效應(yīng)的Bliss預(yù)測以虛線繪圖。
圖30顯示以IC50倍數(shù)濃度0. 2 至4x用T-DM1，GDC-0941，和1 10固定劑量 比例的 T-DMl (6. 25 至 100ng/ml)和 GDC-0941 (62. 5nM 至 1 μ Μ)組合處理后 3 天 ΒΤ-474 體 外細(xì)胞生存力(增殖)的圖。加和效應(yīng)的Bliss預(yù)測以虛線繪圖。
圖31顯示以IC50倍數(shù)濃度O至16x用T_DM1，PI103，GDC_0941，和固定劑量比例 的T-DM1+PI103，和T-DM1+GDC-0941組合處理后3天Her2擴(kuò)增的，非PI3K突變的，AU565 細(xì)胞體外細(xì)胞生存力(增殖)的圖。
圖32顯示以IC50倍數(shù)濃度O至16x用T_DM1，PI103，GDC_0941，和固定劑量比例 的 T-DM1+PI103，和 T-DM1+GDC-0941 組合處理后 3 天 Her2 擴(kuò)增的，PIK3CA (C420R)突變的， EFM192A細(xì)胞體外細(xì)胞生存力(增殖)的圖。
圖33顯示以IC50倍數(shù)濃度O至16x用T_DM1，PI103，GDC_0941，和固定劑量比例 的T-DM1+PI103，和T-DM1+GDC-0941組合處理后Her2擴(kuò)增的，HERCEPTIN 耐藥性的， PIK3CA(H1047R)突變的，HCCl卯4細(xì)胞體外細(xì)胞生存力(增殖)的圖。
圖34顯示如下給藥后接種入CRL nu/nu小鼠的MMTV_Her2Fo5轉(zhuǎn)基因乳腺腫瘤的 體內(nèi)腫瘤體積均值隨時間變化的圖(1)媒介，po, qd x21, (2)T_DMl，10mg/kg，iv, q3wk, (3) 5-FU, lOOmg/kg, po, qwk x2, (4) T-DM1，5mg/kg，iv, q3wk+5-FU, lOOmg/kg, po, qwk x2。
圖35顯示如下給藥后接種入CRL nu/nu小鼠的MMTV-Her2Fo5轉(zhuǎn)基因乳腺腫瘤的 體內(nèi)腫瘤體積均值隨時間變化的圖⑴媒介，po，qd x21, (2)T-DMl,5mg/kg, iv, qd xl, (3)GDC-0941,lOOmg/kg,po,qd x21, (4)GDC-0152,50mg/kg, po,qwk x3, (5)T-DM1，5mg/kg， iv, qd xl+⑶C-0941，100mg/kg，po，qd x21, (6) T-DM1, 5mg/kg, iv, qd xl+⑶C-0152，50mg/ kg, po, qwk x30
圖36顯示如下給藥后接種入CRLnu/nu小鼠的MDA_MB_361. 1乳腺腫瘤的體內(nèi)腫 瘤體積均值隨時間變化的圖(1)媒介，po，qd x21, (2)⑶C-0941，25mg/kg，po，qd x21, (3) GDC-0941，50mg/kg， po, qd x21, (4)GDC-0941,lOOmg/kg, po, qd x21, (5)T-DM1,3mg/kg, iv, qd xl, (6) T-DMl, lOmg/kg, iv, qd xl, (7)GDC-0941, 25mg/kg, po, qd x21+T_DMl，3mg/ kg, iv, qd xl, (8)GDC-0941,50mg/kg,po, qd x21+T_DMl，3mg/kg，iv,qd xl, (9)GDC-0941, 100mg/kg，po，qd x21+T_DMl，3mg/kg，iv，qd xl,(10)GDC-0941,25mg/kg,po,qd x21+T_DMl， lOmg/kg, iv, qd xl, (11)GDC-0941,50mg/kg, po, qd x21+T_DMl，10mg/kg，iv, qd xl, (12) GDC-0941,lOOmg/kg, po, qd x21+T_DMl，lOmg/kg, iv, qd xl
圖37顯示如下給藥后接種入CRL nu/nu小鼠的MDA_MB_361. 1乳腺腫瘤的體內(nèi)腫 瘤體積均值隨時間變化的圖(1)媒介[MCT (0. 5%甲基纖維素/0. 2% TffEEN 80 ) +琥珀酸 鹽緩沖液(IOOmM 琥珀酸鈉，100mg/ml 海藻糖，0. 1% TffEEN 80，pH 5. 0) ]，po+IV，qd x21 禾口 qd, (2)GNE-390,1. Omg/kg, po, qd x21, (3)GNE-390，2. 5mg/kg, po, qd x21, (4)T-DM1，3mg/ kg, iv, qd, (5)GNE-390,1. Omg/kg, po, qd x21+T-DMl,3mg/kg, iv, qd, (6)GNE-390,2. 5mg/ kg, po, qd x21+T_DMl, 3mg/kg, iv, qd。
發(fā)明詳述
現(xiàn)在將會詳細(xì)地述及本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所附結(jié)構(gòu)和公式中例示了它們的例 子。雖然將會連同所列舉的實(shí)施方案來描述本發(fā)明，應(yīng)當(dāng)理解它們并非意圖將本發(fā)明限于 那些實(shí)施方案。相反，本發(fā)明旨在涵蓋所有備選方案，修改，和等同方案，其可以包括在權(quán)利要求所限定的本發(fā)明范圍內(nèi)。本領(lǐng)域技術(shù)人員會領(lǐng)會與本文中所描述的方法和材料相似的 或等同的許多方法和材料可用于實(shí)施本發(fā)明。本發(fā)明絕非限于所描述的方法和材料。倘若 所收入的文獻(xiàn)，專利，和相似的材料與本申請不同或矛盾，包括但不限于所定義的術(shù)語，術(shù) 語的用法，所描述的技術(shù)，諸如此類，以本申請為準(zhǔn)。
定義
詞語“包含”，“含有”，“包括”和“具有”在用于本說明書和權(quán)利要求書時旨在說明 所述特征，整數(shù)，成分，或步驟的存在，但是它們不排除一種或多種其它特征，整數(shù)，成分，步 驟，或其組合的存在或增加。
術(shù)語“治療”或“處理”指治療性處理及預(yù)防性或防范性措施二者，其中目標(biāo)是預(yù) 防或減緩(減輕)不想要的生理學(xué)變化或病癥，諸如高增殖性狀況諸如癌癥的生長，形成或 傳播。為了本發(fā)明，有利或期望的臨床結(jié)果包括但不限于緩解癥狀，削弱疾病的程度，疾病 狀態(tài)穩(wěn)定(即不惡化)，延遲或減緩疾病發(fā)展，改善或減輕疾病狀態(tài)，及康復(fù)(無論是部分的 還是完全的)，無論是可檢測的還是不可檢測的?！爸委煛被颉疤幚怼边€可以指與不接受治療 的預(yù)期存活相比延長存活。需要治療的受試者包括早就患有疾病或病癥的受試者以及傾向 于患上疾病或病癥的受試者或者要預(yù)防狀況或病癥的受試者。
短語“治療有效量”指本發(fā)明化合物的量，其(i)治療本文所述特定疾病，狀況，或 病癥，(ii)減輕，改善，或消除特定疾病，狀況，或病癥的一種或多種癥狀，或(iii)預(yù)防或 延遲特定疾病，狀況，或病癥的一種或多種癥狀的發(fā)作。在癌癥的情況中，藥物的治療有效 量可減少癌細(xì)胞數(shù)；縮小腫瘤體積；抑制(即一定程度的減緩，優(yōu)選停止)癌細(xì)胞浸潤到周 圍器官中；抑制(即一定程度的減緩，優(yōu)選停止)腫瘤轉(zhuǎn)移；一定程度的抑制腫瘤生長；和 /或一定程度的減輕與癌癥有關(guān)的一種或多種癥狀。就藥物可預(yù)防癌細(xì)胞生長和/或殺死 現(xiàn)有癌細(xì)胞的程度而言，它可以是抑制細(xì)胞的和/或毒害細(xì)胞的。對于癌癥療法，可以例如 通過評價距疾病發(fā)展的時間(TTP)和/或測定響應(yīng)率(RR)來測量功效。
“高增殖性病癥”指腫瘤，癌癥，和新生物組織，包括惡變前和非新生物階段，而且 還包括銀屑病，子宮內(nèi)膜異位癥，息肉和纖維腺瘤。
術(shù)語“癌癥”和“癌性”指向或描述哺乳動物中特征通常為細(xì)胞生長不受調(diào)節(jié)的生 理狀況?！澳[瘤”包括一個或多個癌性細(xì)胞。癌癥的例子包括但不限于癌，淋巴瘤，母細(xì)胞 瘤，肉瘤和白血病或淋巴樣惡性腫瘤。此類癌癥的更具體例子包括鱗狀細(xì)胞癌(例如上皮 鱗狀細(xì)胞癌)，肺癌(包括小細(xì)胞肺癌，非小細(xì)胞肺癌(“NSCLC”)，肺的腺癌，和肺的鱗癌)， 腹膜癌，肝細(xì)胞癌，胃癌(包括胃腸癌)，胰腺癌，成膠質(zhì)細(xì)胞瘤，宮頸癌，卵巢癌，肝癌，膀胱 癌，肝瘤，乳腺癌，結(jié)腸癌，直腸癌，結(jié)腸直腸癌，子宮內(nèi)膜癌或子宮癌，唾液腺癌，腎癌，前列 腺癌，外陰癌，甲狀腺癌，肝癌，肛門癌，陰莖癌，以及頭頸癌。
“化療劑”指可用于治療癌癥的化學(xué)化合物，不管作用機(jī)制。化療劑的類別包 括但不限于烷化劑類(alkyating agents)，抗代謝物類(antimetabolites)，紡錘體 毒植物生物堿類(spindle poison plant alkaloids)，細(xì)胞毒性/抗腫瘤抗生素類 (cytoxic/antitumor antibiotics)，拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑類(topoisomeraseinhibitors)， 抗體類(antibodies)，光敏劑類(photosensitizers)，和激酶抑制劑類(kinase inhibitors) 0化療劑包括在“靶向療法”和常規(guī)化療中使用的化合物。化療劑的例 子包括erlotinib( TARCEVA , Genentech/OSI Pharm.)，多西他塞(docetaxel)(TAXOTERE ,Sanofi-Aventis)，5-FU(氟尿嘧啶，5-氟尿嘧啶，CAS No. 51-21-8)，吉西 他濱(gemcitabine) ( GEMZAR , Lilly)，PD-0325901 (CAS No. 391210-10-9，Pfizer)， 順鉬(cisplatin)(順式-二胺，二氯鉬(II)，CAS No. 15663-27-1)，卡鉬(carboplatin) (CAS No. 41575-94-4)，帕利他塞(paclitaxel) ( TAXOL , Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N. J.),曲妥單抗(trastuzumab) ( HERCEPTIN , Genentech)， 替莫唑胺(temozolomide) G-甲基 _5_ 氧 _2，3，4，6，8-五氮雙環(huán) W. 3. 0]九-2，7， 9-三烯-9-羧酰胺，CAS No. 85622-93-1，TEMODAR , TEMODAL , Schering Plough)，他莫昔芬(tamoxifen) ((Z)-244-(l，2-二苯基丁-1-烯基)苯氧基]-N，N 二 甲基-乙胺，NOLVADEX ,ISTUBAL ,VALODEX )，和多柔比星(doxorubicin) (ADRIAMYCIN )，Akti-1/2，HPPD,和雷帕霉素(rapamycin)。
化療劑的更多例子包括化療劑的更多例子包括奧沙利鉬(oxaliplatin) (ELOXATIN , Sanof i) , bortezomib ( VELCADE , Millennium Pharm.), sutent ( SUNITINIB , SU 11248，Pfizer)，來曲唑(Ietrozole) ( FEMARA , Novart is),甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate) ( GLEEVEC ，Novartis)， XL-518(MEK 抑制劑，Exelixis，WO 2007/044515)，ARRY-886 (Mek 抑制劑，AZD6244， ArrayBioPharma, Astra Zeneca), SF-1126 (PI3K 抑制劑，Semafore Pharmaceuticals), BEZ-235(PI3K 抑制劑，Novartis)，XL-147 (PI3K 抑制劑，Exelixis)，PTK787/ ZK222584 (Novartis),氟維司群(fulvestrant) ( FASLODEX ，AstraZeneca)，亞 葉酸(leucovorin, folinic acid)，雷中白霄素(rapamycin)(西羅莫司(sirolimus)， RAPAMUNE ，Wyeth)，lapatinib ( TYKERB , GSK572016, Glaxo SmithKline), lonafarnib (SARASAR , SCH 66336, Schering Plough) , sorafenib ( NEXAVAR , BAY43-9006, Bayer Labs)，gefitinib ( IRESSA , AstraZeneca)，伊立替康 (irinotecan) ( CAMPTOSAR , CPT — ll， Pfizer) , tipifarnib (ZARNESTRA , Johnson&Johnson)，ABRAXANE 不含克列莫佛(Cremophor)，清蛋白改造納米顆粒 齊Ll M 中白禾1J ftk S (paclitaxel) (AmericanPharmaceutical Partners, Schaumberg, II)， vandetanib(rINN, ZD6474, ZACTIMA , AstraZeneca) , chloranmbuci 1, AG 1478, AG1571 (SU 5 271 ； Sugen) , terns iro 1 imus ( TORISEL , ffyeth), pazopanib (GlaxoSmithKline)，canfosfamide ( TELCYTA , Telik)， 塞替派 (thiotepa)和環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide) ( CYTOXAN , NEOSAR )；磺酸 烷基酯類(alkylsulfonates)，諸如白消安(busulfan)，英丙舒凡(improsulfan)和 哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶類(aziridines)，諸如苯佐替派(benzocbpa)，卡 波醌(carboquone)，美妥替派(meturecbpa)和烏瑞替派(urecbpa)；乙撐亞胺類 (ethylenimines)禾口甲基蜜胺類(methylamelamines),包括六甲蜜胺(altretamine),三 乙撐蜜胺(triethylenemelamine)，三乙撐磷酰胺(triethylen印hosphoramide)，三乙撐 硫代磷酉先胺(triethylenethiophosphoramide)禾口三輕甲蜜胺(trimethylomelamine)； 番荔枝內(nèi)酯類(acetogenins)(尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮 (bullatacinone))；喜樹堿(camptothecin)(包括合成類似物托泊替康(topotecan))； 苔蘚抑素(bryostatin) ；callystatin ;CC_1065 (包括其阿多來新(adozelesin)，卡折來新(carzelesin)和比折來新(bizelesin)合成類似物)；隱藻素類(cryptophycins) (特別是隱藻素1和隱藻素8)；多拉司他汀(dolastatin) ；duocarmycin (包括合 成類似物，KW-2189 和 CB1-TM1)；艾槽塞洛素(eleutherobin) ；pancratistatin ； sarcodictyin ；海綿抑素(spongistatin)；氮芥類(nitrogen mustards),諸如苯丁酸氮 芥(chlorambucil),萘氮芥(chlornaphazine),膽磷酉先胺(chlorophosphamide),雌莫 司汀(estramustine),異環(huán)磷酉先胺(ifosfamide),雙氯乙基甲胺(mechlorethamine), 鹽酸氧氮芥(mechlorethamineoxide hydrochloride)，美法倉(melphalan)，新氮芥 (novembichin),苯芥膽留酉享(phenesterine),撥尼莫司汀(prednimustine),曲磷胺 (trofosfamide),尿啼唆氮芥(uracil mustard)；亞硝脲類(nitrosoureas),諸如卡莫 司汀(carmustine),氯脲菌素(chlorozotocin)，福莫司汀(fotemustine)，洛莫司汀 (Iomustine)，尼莫司汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimustine)；抗生素類，諸如烯二炔 類抗生素(enediyne)(例如加利車霉素(calicheamicin)，加利車霉素γ II，加利車霉 素 ω Il (Angew Chem. Intl. Ed. Engl. , (1994)33 :183-186)；蒽環(huán)類抗生素(dynemicin), dynemicin A ； 二膦酸鹽類(bisphosphonates)，諸如氯膦酸鹽(clodronate)；埃斯 波霉素(esperamicin)；以及新制癌素(neocarzinostatin)發(fā)色團(tuán)和相關(guān)色蛋白烯 二炔類抗生素發(fā)色團(tuán))，阿克拉霉素(aclacinomycin)，放線菌素(actinomycin)，氨 茴霉素(anthramycin)，偶氮絲氨酸(azaserine)，博來霉素(bleomycin)，放線菌素 C(cactinomycin), carabicin, 7^^1 (carminomycin), ^miSMM (carzinophilin), 霉素(chromomycin),方文線菌素D (dactinomycin),柔紅霉素(daunorubicin),地托比星 (detorubicin)，6- 二氮-5-氧-L-正亮氨酸，嗎啉代多柔比星，氰基嗎啉代多柔比星，2-吡 咯代多柔比星和脫氧多柔比星)，表柔比星(印irubicin)，依索比星(esorubicin)，伊達(dá) 比星(idarubicin)，麻西羅霉素(marcellomycin)，絲裂霉素類(mitomycins)諸如絲裂霉 素 C,霉酚酸(mycophenolic acid),諾拉霉素(nogalamycin),橄欖霉素(olivomycin), 培洛霉素(ρ印lomycin)，泊非霉素(porf iromycin)，嘌呤霉素(puromycin)，三鐵 阿霉素(quelamycin)，羅多比星(rodorubicin)，鏈黑菌素(str印tonigrin)，鏈佐 M (streptozocin)， ^ ^ ^M M M (tubercidin), 4 ￥ ^ ] (ubenimex), W] ftk T (zinostatin)，佐柔比星(zorubicin)；抗代謝物類，諸如甲氨蝶呤(methotrexate)和5_氟 尿嘧啶(5-FU)；葉酸類似物，諸如二甲葉酸(denopterin)，甲氨蝶呤(methotrexate)，蝶羅 呤(pteropterin)，三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤類似物，諸如氟達(dá)拉濱(fludarabine)， 6-巰基嘌呤(mercaptopurine)，硫咪嘌呤(thiamiprine)，硫鳥嘌呤(thioguanine)；嘧啶 類似物，諸如安西他濱(ancitabine)，阿扎胞苷(azacitidine)，6_氮尿苷(azauridine)， 卡莫氟(carmofur)，阿糖胞苷(cytarabine)，雙脫氧尿苷(dideoxyuridine)，去氧氟尿 苷(doxifluridine)，依諾他濱(enocitabine)，氟尿苷(floxuridine)；雄激素類，諸 如卡魯睪酮(calusterone),丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate),表硫雄醇 (印itiostanol)，美雄烷(mepitiostane)，睪內(nèi)酯(testolactone)；抗腎上腺類，諸如氨魯 米特(aminoglutethimide)，米托坦(mitotane)，曲洛司坦(trilostane)；葉酸補(bǔ)充劑，諸 如亞葉酸(folinic acid)；醋葡醛內(nèi)酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酉先丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿啼唆(eniluracil)；安 口丫 唆(amsacrine) ；bestrabucil ；比生群(bisantrene)；依達(dá)曲沙(edatraxate)；地磷酉先月安(defosfamide)；地美可辛(demecolcine)；地口丫酉昆(diaziquone) ；elfomithine ； Hc 利醋銨(elliptinium acetate)；埃坡霉素(印othilone)；依托格魯(etoglucid)；硝 酸鎵；羥脲(hydroxyurea)；香菇多糖(Ientinan)；氯尼達(dá)明(Ionidamine)；美登木素 生物喊類(maytansinoids),諸如美登素(maytansine)禾口安絲菌素(ansamitocin)； 米ft月瓜月宗(mitoguazone)；米托惠酉昆(mitoxantrone)；莫口；！達(dá)酉享(mopidamol) ； 二月安 硝吖啶(nitracrine)；噴司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星 (pirarubicin)；洛索惠酉昆(Iosoxantrone)；鬼白酸(podophyllinic acid) ；2-乙基 酰胼(ethylhydrazide)；丙卡巴胼(procartazine) ；PSK 多糖復(fù)合物(JHS Natural Products, Eugene, OR)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西佐口南(sizofiran)；螺 方 錯(spirogermanium)；細(xì)交鏈 包菌麗酸(tenuazonic acid)；三亞月安酉昆(triaziquone)； 2,2 ‘，2 〃 -三氯三乙胺；單端孢菌素類(trichothecenes) (T_2毒素，疣孢菌素 (verrucarin)A，桿抱菌素(roridin) A 禾口蛇 亍菌素(anguidin))；烏拉坦(urethan)；長春 地辛(vindesine)；達(dá)卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine) ；二溴甘露酉享 (mitobronitol) ；二漠衛(wèi)矛酉享(mitolactol)；喊泊漠燒(pipobroman) ；gacytosine ；阿糖 胞苷(arabinoside) (Ara-C)；環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide)；塞替派(thiot印a) ；6-硫 鳥嘌呤(thioguanine)；巰基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨蝶呤(methotrexate)；鉬類 似物，諸如順鉬(cisplatin)和卡鉬(carboplatin)；長春堿(vinblastine)；依托泊苷 (etoposide) (VP-16)；異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)；米托蒽醌(mitoxantrone)；長春新堿 (vincri stine)；長春瑞濱(vinorelbine) ( NAVELBINE )；能滅瘤(novantrone)； 替尼泊苷(teniposide)；依達(dá)曲沙(edatrexate)；道諾霉素(daunomycin)；氨基蝶 呤(aminopterin)；卡培他濱(capecitabine) ( XELODA ，Roche)；伊本膦酸鹽 (ibandronate) ；CPT-11 ；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑RFS 2000 ；二氟甲基鳥氨酸(DMFO)；類視黃酸 類(retinoids)，諸如視黃酸(retinoic acid)；及任何上述物質(zhì)的藥劑學(xué)可接受的鹽，酸 和衍生物。
“化療劑”的定義中還包括(i)抗激素劑，其作用是調(diào)節(jié)或抑制激素對腫瘤 的作用，諸如抗雌激素類和選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑類(SERM)，包括例如他莫昔芬 (tamoxifen) ( NOLVADEX ；檸檬酸他莫昔芬)，雷洛昔芬(raloxifene)，屈洛昔 芬(droloxifene)，4_羥基他莫昔芬，曲沃昔芬(trioxifene)，那洛昔芬(keoxifene)， LY117018，奧那司酮(onapristone)，和FARESTON (檸檬酸托瑞米芬(toremifene citrate)) ； (ii)芳香酶抑制劑，其抑制在腎上腺中調(diào)節(jié)雌激素生成的芳香酶，諸如例如 4(5)-咪唑，氨魯米特(aminoglutethimide)，MEGASE (醋酸甲地孕酮(megestrol acetate))，AROMASIN (依西美坦(exemestane) ；Pfizer),福美坦(formestane)， 法倔唑(fadrozole)，RIVISOR (伏羅唑(vorozole))，F(xiàn)EMARA (來曲唑 (Ietrozole) ;Novartis),fPARJMIDEX (阿那曲唾(anastrozole) ；AstraZeneca)； (iii)抗雄激素類，諸如氟他米特(flutamide)，尼魯米特(nilutamide)，比卡米特 (bicalutamide)，亮丙瑞林(Ieuprolide)，和戈舍瑞林(goserelin)；以及曲沙他濱 (troxacitabine) (1，3_ 二氧戊環(huán)核苷胞嘧啶類似物)；(iv)蛋白質(zhì)激酶抑制劑，諸如MEK 抑制劑(W02007/0445M) ； (ν)脂質(zhì)激酶抑制劑；(vi)反義寡核苷酸，特別是抑制牽涉異常 (aberrant)細(xì)胞增殖的信號傳導(dǎo)途經(jīng)中的基因表達(dá)的反義寡核苷酸，例如HiC-α，Raf和Mas，諸如 oblimersen (GENASENSE , Genta Inc.) ； (vii)核酶，諸如 VEGF 表達(dá)抑制 劑(例如ANGIOZYME )和HER2表達(dá)抑制劑；(viii)疫苗，諸如基因療法疫苗，例如 ALLOVECTIN ,LEUVECTIN ,和VAXID ;PROLEUKIN rlL-2 ；拓?fù)洚悩?gòu)酶 1抑制劑，諸如LURTOTECAN ；ABARELIX rmRH ； (ix)抗血管發(fā)生劑，諸如貝伐單 抗(bevacizumab) (AVASTIN ,Genentech)；及任何上述物質(zhì)的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生 物。
“化療劑”的定義中還包括治療性抗體，諸如阿倫單抗(alemtuzumab) (Campath)， 貝伐單抗(bevacizumab) ( AVASTIN , Genentech)，西妥昔單抗(cetuximab) (ERBITUX ,Imclone)，panitumumab(VECTIBIX ,Amgen)，利妥昔單抗(rituximab) (RITUXAN , Genentech/Biogen Idee)，pertuzumab (OMNITARGTM, 2C4, Genentech), 曲妥單抗(trastuzumab) ( HERCEPTIN ，Genentech),托西莫單抗(tositumomab) (Bexxar, Corixia)，及抗體藥物偶聯(lián)物，吉姆單抗奧佐米星(gemtuzumab ozogamicin) (MYLOTARG , ffyeth)。
作為化療劑聯(lián)合trastuzumab-MCC-DMl具有治療潛力的人源化單克隆抗體包 括alemtuzumab, apolizumab, aselizumab, atlizumab, bapineuzumab, bevacizumab, bivatuzumab mertansine, cantuzumab mertansine, cedelizumab, certolizumab pegol, cidfusituzumab, cidtuzumab, daclizumab, eculizumab, efalizumab, epratuzumab, erlizumab, felvizumab, fonto 1izumab, gemtuzumabozogamicin, inotuzumab ozogamicin, ipilimumab, labetuzumab, 1intuzumab, matuzumab, mepolizumab, motavizumab, motovizumab, natalizumab, nimotuzumab, nolovizumab, numavizumab, ocrelizumab, omaIizumab, palivizumab, pascolizumab, pecfusituzumab, pectuzumab, pertuzumab, pexelizumab, ralivizumab, ranibizumab, reslivizumab, resIizumab, resyvizumab, rovelizumab, rupIizumab, sibrotuzumab, siplizumab, sontuzumab, tacatuzumabtetraxetan, tadocizumab, talizumab, tefibazumab, tocilizumab, toralizumab, trastuzumab, tucotuzumab celmoleukin, tucusituzumab, umavizumab, urtoxazumab，和 visiIizumab0
“代謝物”指特定化合物或其鹽在身體中經(jīng)由代謝生成的產(chǎn)物?；衔锏拇x物可 以使用本領(lǐng)域已知的常規(guī)技術(shù)來鑒定，而且它們的活性可以使用諸如本文中所描述的測試 來測定。此類產(chǎn)物可能源自例如所施用化合物的氧化，還原，水解，酰胺化，脫酰胺，酯化，脫 酯，酶促切割，等等。因而，本發(fā)明包括本發(fā)明化合物的代謝物，包括通過如下過程生成的化 合物，所述過程包括使本發(fā)明的化合物接觸哺乳動物一段時間，該段時間足以生成其代謝 產(chǎn)物。
術(shù)語“包裝插頁”用于指通常包括在治療用產(chǎn)品的商業(yè)包裝中的說明書，它們包含 有關(guān)涉及此類治療用產(chǎn)品應(yīng)用的適應(yīng)征，用法，劑量，施用，禁忌癥，和/或警告的信息。
短語“藥學(xué)可接受鹽”在用于本文時指本發(fā)明化合物的藥學(xué)可接受的有機(jī)或無機(jī) 鹽。例示性的鹽包括但不限于硫酸鹽，檸檬酸鹽，乙酸鹽，草酸鹽，氯化物，溴化物，碘化物， 硝酸鹽，硫酸氫鹽，磷酸鹽，酸式磷酸鹽，異煙酸鹽，乳酸鹽，水楊酸鹽，酸式檸檬酸鹽，酒石 酸鹽，油酸鹽，丹寧酸鹽，泛酸鹽，酒石酸氫鹽，抗壞血酸鹽，琥珀酸鹽，馬來酸鹽，龍膽酸鹽， 富馬酸鹽，葡糖酸鹽，葡糖醛酸鹽，糖酸鹽，甲酸鹽，苯甲酸鹽，谷氨酸鹽，甲磺酸鹽，乙磺酸鹽，苯磺酸鹽，對甲苯磺酸鹽和撲酸鹽(即1，1’_亞甲基-雙(2-羥基-3-萘甲酸鹽))。藥 學(xué)可接受鹽可能牽涉包含另一種分子，諸如乙酸鹽離子，琥珀酸鹽離子或其它抗衡離子。抗 衡離子可以是穩(wěn)定母體化合物電荷的任何有機(jī)或無機(jī)部分。另外，藥學(xué)可接受鹽可以在其 結(jié)構(gòu)中具有超過一種帶電荷原子。在多種帶電荷原子作為藥學(xué)可接受鹽的組成部分的情況 中可以具有多種抗衡離子。因此，藥學(xué)可接受鹽可具有一種或多種帶電荷原子和/或一種 或多種抗衡離子。
如果本發(fā)明的化合物是堿，那么期望的藥學(xué)可接受的鹽可以通過本領(lǐng)域可得的 任何合適方法來制備，例如用無機(jī)酸(諸如氫氯酸，氫溴酸，硫酸，硝酸，甲磺酸，磷酸等 等)或用有機(jī)酸(諸如乙酸，馬來酸，琥珀酸，扁桃酸，富馬酸/延胡索酸，丙二酸，丙酮 酸，草酸，乙醇酸，水楊酸，吡喃糖苷酸(pyranosidyl acid)(諸如葡萄糖醛酸或半乳糖醛 酸)，α羥酸(諸如檸檬酸或酒石酸)，氨基酸(諸如天冬氨酸或谷氨酸)，芳香酸(諸如 苯甲酸或肉桂酸)，磺酸(諸如對甲苯磺酸或乙磺酸)，等等)處理游離堿。文獻(xiàn)中討論 了一般認(rèn)為適合于自堿性藥學(xué)化合物形成藥學(xué)有用或可接受的鹽的酸，例如p. Mahl等， Camille G.(編)Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use. (2002)Zurich :ffiley-VCH ；S.Berge 等，Journal of PharmaceuticalSciences(1977)66 (1)119 ；P. Gould, International J. of Pharmaceutics(1986)33201217 ；Anderson 等， The Practice ofMedicinal Chemistry(1996), AcademicPress, New York ；Remington' s Pharmaceutical Sciences,第 18 片反，(1995)Mack Publishing Co.，Easton PA ；禾口 The Orange Book(Food&DrugAdministration,Washington,D. C.,它們的網(wǎng)站)。通過述及將這 些公開內(nèi)容收入本文。
如果本發(fā)明的化合物是酸，那么期望的藥學(xué)可接受的鹽可以通過任何合適方法來 制備，例如用無機(jī)或有機(jī)堿(諸如胺(伯，仲或叔))，堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物， 等等處理游離酸。合適的鹽的例示性例子包括但不限于自氨基酸(諸如甘氨酸和精氨酸)， 銨，伯/仲/叔胺，和環(huán)胺(諸如哌啶，嗎啉和哌嗪)衍生的有機(jī)鹽，和自鈉，鈣，鉀，鎂，錳， 鐵，銅，鋅，鋁和鋰衍生的無機(jī)鹽。
短語“藥學(xué)可接受的”指明該物質(zhì)或組合物必須是在化學(xué)和/或毒理學(xué)方面與構(gòu) 成配制劑的其它成分和/或用它治療的哺乳動物相容的。
“溶劑合物”指一個或多個溶劑分子與本發(fā)明化合物的物理締合物或復(fù)合物。本 發(fā)明的化合物可以以未溶劑化的以及溶劑化的形式存在。形成溶劑合物的溶劑的例子包 括但不限于水，異丙醇，乙醇，甲醇，DMS0,乙酸乙酯，乙酸，和乙醇胺。術(shù)語“水合物”指其 中的溶劑分子是水的復(fù)合物。這種物理締合涉及不同程度的離子和共價鍵合，包括氫鍵 合。在某些情況中，溶劑合物會能夠分離，例如當(dāng)結(jié)晶固體的晶格中摻入一個或多個溶劑分 子時。溶劑合物的制備是普遍知道的，例如M. Caira等，J. Pharmaceutical Sci. ,93(3), 601611 0004)。溶劑合物，半溶劑合物，水合物等等的類似制備記載于Ε. C. van Tonder 等，AAPS PharmSciTech. ,5(1), article 12(2004)；和 A. L. Bingham 等，Chem. Commun.， 60360乂2001)。一種典型的非限制性工藝涉及在比環(huán)境高的溫度在期望量的期望溶劑(有 機(jī)的或水或其混合物)中溶解本發(fā)明化合物，并以足以形成晶體的速率冷卻溶液，然后通 過標(biāo)準(zhǔn)方法分離晶體。分析技術(shù)諸如例如I. R.光譜術(shù)顯示作為溶劑合物(或水合物)的 晶體中溶劑(或水)的存在。16
如本文中所使用的，術(shù)語“協(xié)同的”指比兩種或更多種單一藥劑的加和效果更有效 的治療劑組合。trastuzumab-MCC-DMl，和一種或多種化療劑之間的協(xié)同相互作用的確定可 以基于自本文所述測定法獲得的結(jié)果。用CalcuSyn軟件使用Chou和Talalay組合法和劑 量-效果分析來分析這些測定法的結(jié)果以獲得組合指數(shù)“Cl” (Chou和Talalay (1984)Adv. Enzyme Regul. 22 :27-55)。已經(jīng)在數(shù)種測定系統(tǒng)中評估了本發(fā)明提供的組合，而且可以利 用標(biāo)準(zhǔn)程序來分析數(shù)據(jù)以量化抗癌藥間的協(xié)同、加和和拮抗效應(yīng)。優(yōu)選利用的程序是Chou 禾口 Talalay，“New Avenues in Developmental Cancer Chemotherapy，，，AcademicPress， 1987，第2章中所記載的。組合指數(shù)(Cl)小于0. 8的值指示協(xié)同，大于1. 2的值指示拮抗， 而介于0. 8至1. 2之間的值指示加和效應(yīng)。組合療法可提供“協(xié)同性”和證明是“協(xié)同的”， 即一起使用活性成分時所實(shí)現(xiàn)的效果大于分開使用所致效果的和。當(dāng)活性成分如下所述時 可獲得協(xié)同效應(yīng)(1)以組合的單位劑量配制劑共配制和同時施用或遞送；(2)作為分開的 配制劑交替遞送；或C3)提供一些其它方案。當(dāng)在交替療法中遞送時，當(dāng)化合物序貫施用或 遞送時(例如通過分開的注射器中的不同注射)可獲得協(xié)同效應(yīng)。一般而言，在交替療法 期間，序貫地(即時間上連續(xù)地)施用有效劑量的每種活性成分。TRASTUZUMAB-MCC-DM1
本發(fā)明包括治療劑組合，其包含trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)，即一種具有如下 結(jié)構(gòu)的抗體-藥物偶聯(lián)物(CAS Reg. No. 139504-50-0)
CH3O。 CH3O
其中Tr指trastuzumab，其經(jīng)由接頭部分MCC連接至美登木素生物堿類藥物部 分 DMl (US 5208020 ；US 6441163)。藥物對抗體比或藥物載荷在 trastuzumab-MCC-DMl 的上述結(jié)構(gòu)中用P表示，而且范圍為1至約8的整數(shù)值。藥物載荷值ρ為1至8。 trastuzumab-MCC-DMl包括各種加載和附著的抗體-藥物偶聯(lián)物的所有混合物，其中1，2， 3，4，5，6，7，和 8 個藥物部分共價附著至抗體 trastuzumab (US 7097840 ；US 2005/0276812 ； US 2005/0166993)。trastuzumab-MCC-DMl 可以依照實(shí)施例 1 來制備。
trastuzumab是由哺乳動物細(xì)胞(中國倉鼠卵巢，CH0)懸浮培養(yǎng)物生產(chǎn)的。 HER2(或c-erbB》原癌基因編碼一種185kDa跨膜受體蛋白，其在結(jié)構(gòu)上與表皮生長因 子受體相關(guān)。在25% -30%的原發(fā)性乳腺癌中觀察到HER2蛋白質(zhì)過表達(dá)，而且能使用 對固定腫瘤塊的基于免疫組織化學(xué)的評估來確定(Press MF等(1993)Cancer Res 53: 4960-70。trastuzumab是一種具有鼠4D5抗體(ATCC CRL 10463，依據(jù)布達(dá)佩斯條約于 1990年5月24日保藏于美國典型培養(yǎng)物保藏中心，12301Parklawn Drive, Rockville,Md. 20852)的或自鼠4D5抗體衍生的抗原結(jié)合殘基的抗體。例示性的人源化4D5抗體包括 huMAb4D5-l, huMAb4D5_2，huMAb4D5_3，huMAb4D5_4，huMAb4D5_5，huMAb4D5_6，huMAb4D5_7 和 huMAb4D5-8 ( HERCEPTIN )，如 US 5821337 中的。
在I期研究中，每3周通過IV輸注施用T-DMl的最大耐受劑量(MTD)為3. 6mg/ kg。DLT(劑量限制毒性)包括用4. 8mg/kg處理的3名患者的2名中的4級血小板減少。 3. 6mg/kg的相關(guān)> 2級不良事件罕見且易掌控。如先前所述，這種治療時間表耐受較好且 與顯著的臨床活性有關(guān)。II期研究已經(jīng)顯示每3周施用3. 6mg/kg劑量水平有相似的耐受 性，只有小百分比的患者(112名患者中的3名)需要降低劑量。如此，基于下述各點(diǎn)在這 項(xiàng)研究中為測試選擇每3周施用3. 6mg/kgT-DMl劑量1)已證明的每3周3. 6mg/kg T-DMl 的功效和安全性，和2)3周方案對這個患者群的方便。
化療劑
某些化療劑已經(jīng)在體外和在體內(nèi)聯(lián)合trastuzumab-MCC-DMl在抑制細(xì)胞增殖中 展示了令人驚訝和出乎意料的特性。此類化療劑包括HER2 二聚化抑制劑抗體，抗VEGF抗 體，5-FU，卡鉬，lapatinib, ABT-869，多西他賽，GDC-0941，和 GNE-390。
pertuzumab (CAS Reg. No. 380610-27-5, OMNITARG , 2C4, Genentech)是一 種抑制HER2 二聚化的重組，人源化單克隆抗體(US 6054297 ；US6407213 ；US 6800738 ；US 6627196，US 6949245 ；US 7041292)。pertuzumab 和 trastuzumab 靴向 HER-2 酪氨酸激酶 受體的不同胞外區(qū)(Nahta 等 Q004)Cancer Res. 64 :2；343-2；346)。表達(dá) 2C4(pertuzumab) 的雜交瘤細(xì)胞系于1999年4月8日作為ATCC HB-12697保藏于美國典型培養(yǎng)物保藏中心 (ATCC), 10801University Boulevard, Manassas, Va. 20110-2209, USA。 pertuzumab 阻斷 HER2受體其它HER受體家族成員，即HER1/EGFR，HER3，和HER4合作的能力(Agus等Q002) Cancer Cell 2 :127-37 Jackson 等 U004)Cancer Res 64 :2601-9 ；Takai 等 U005) Cancer 104 :2701-8 ；US 6949M5)。在癌細(xì)胞中，干擾HER2與其它HER家族受體合作的能 力阻斷細(xì)胞信號傳導(dǎo)，而且最終可導(dǎo)致癌細(xì)胞生長抑制和癌細(xì)胞死亡。由于它們獨(dú)特的作 用模式，HDI具有在廣泛的腫瘤中運(yùn)轉(zhuǎn)的潛力，包括那些不過表達(dá)HER2的腫瘤(Mullen等 (2007)Molecular Cancer Therapeutics 6:93-100)。
pertuzumab基于人IgGl(K)框架序列。它由兩條重鏈和兩條輕鏈組成。像 trastuzumab 一樣，pertuzumab針對HER2的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域。然而,它與trastuzumab的區(qū) 別在于輕鏈和重鏈的表位結(jié)合區(qū)。因此，pertuzumab結(jié)合已知是HER2的亞結(jié)構(gòu)域2內(nèi)的表 位，而 trastuzumab 的表位位于亞結(jié)構(gòu)域 4 (Cho 等 2003 ；Franklin 等 2004)。Pertuzumab 是通過阻斷HER2與其它HER家族成員，包括HERl (表皮生長因子受體；EGFR)，HER3，和HER4 的結(jié)合來起作用的。這種結(jié)合是在存在配體下及經(jīng)MAP-激酶和PI3-激酶發(fā)信號所需要的。 因此，pertuzumab抑制配體啟動的細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)。抑制這些信號傳導(dǎo)途徑分別能導(dǎo)致生 長阻滯和凋亡(Hanahan 和 Weinberg 2000)。因?yàn)?pertuzumab 和 trastuzumab 結(jié)合HER2 受 體上的不同表位，所以配體活化的下游信號傳導(dǎo)受pertuzumab阻斷，但不受trastuzumab 阻斷。因此，pertuzumab發(fā)揮其作為抗腫瘤劑的活性可能不需要HER2過表達(dá)。另外，由于 它們互補(bǔ)的作用模式，pertuzumab和T-DMl組合在過表達(dá)HER2的疾病中可具有潛在作用。
pertuzumab已經(jīng)在五項(xiàng)II期研究中作為單一藥劑進(jìn)行了評估，這五項(xiàng)II期研 究是在各種癌癥類型中進(jìn)行的，包括表達(dá)低水平HER2的MBC，非小細(xì)胞肺癌，激素不應(yīng)性前列腺癌，和卵巢癌。一項(xiàng)II期試驗(yàn)在具有正常HER2表達(dá)的轉(zhuǎn)移性乳腺癌(MBC)患者 的二線或三線治療中作為單一藥劑評估pertuzumab (Cortes等Q005)J. Clin. Oncol. 23 3068)。已經(jīng)在兩項(xiàng)II期研究中聯(lián)合trastuzumab評估了 pertuzumab (Baselga J等，“A Phase II trial of trastuzumab and pertuzumab in patients with HER2-positive metastatic breast cancer that had progressed during trastuzumab therapy :full response data，，,European Society of Medical Oncology,Stockholm,Sweden,September 12-16,2008 ;Gelmon 等(2008) J. Clin. Oncol. 26 :1026) 第一項(xiàng)研究登記了 11 名先前 接受多至三種在先含trastuzumab方案，具有HER2陽性MBC的患者(Portera等2007)。 Bevacizumab (CAS Reg. No. 216974-75-3，AVASTIN , Genentech)是抗 VEGF 單克隆 抗體，其針對血管內(nèi)皮生長因子(US 7227004 ；US 6884879 ；US 7060269 ；US 7169901 ；US 7297334)，在癌癥治療中使用，其中它通過阻斷新血管形成來抑制腫瘤生長。bevacizumab 是美國第一種臨床可用的血管發(fā)生抑制劑，2004年被FDA批準(zhǔn)聯(lián)合標(biāo)準(zhǔn)化療用于治療轉(zhuǎn)移 性結(jié)腸癌和大多數(shù)形式的轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌。數(shù)項(xiàng)晚期臨床研究正在測定它對具有下述 癌癥的患者的安全性和有效性佐劑/非轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌，轉(zhuǎn)移性乳腺癌，轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌， 轉(zhuǎn)移性多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤，轉(zhuǎn)移性卵巢癌，轉(zhuǎn)移性激素不應(yīng)性前列腺癌，和轉(zhuǎn)移的或不能 切除的局部晚期的胰腺癌。
抗VEGF抗體通常不會結(jié)合其它VEGF同系物，諸如VEGF-B或VEGF-C，也不會 結(jié)合其它生長因子，諸如P1GF，PDGF或bFGF。優(yōu)選的抗VEGF抗體包括與由雜交瘤ATCC HB 10709生成的單克隆抗VEGF抗體A4. 6. 1結(jié)合相同表位的單克隆抗體；依照I^resta 等(1997)Cancer Res. 57 :4593-4599生成的重組人源化抗VEGF單克隆抗體，包括但不限 于bevacizumab。bevacizumab包括突變的人IgGl框架區(qū)和來自阻斷人VEGF結(jié)合其受 體的鼠抗hVEGF單克隆抗體A.4.6. 1的抗原結(jié)合互補(bǔ)決定區(qū)。bevacizumab大約93 %的 氨基酸序列(包括大部分框架區(qū))衍生自人IgGl，而約7%的序列衍生自鼠抗體A4. 6.1。 bevacizumab具有約149，000道爾頓的分子量，而且是糖基化的。bevacizumab和其它人源 化抗VEGF抗體進(jìn)一步記載于US 6884879。別的抗VEGF抗體包括G6或B20系列抗體(例 如G6-31，B20-4. 1)，如W02005/012359圖27- 任一所示。在一個實(shí)施方案中，B20系列抗 體結(jié)合人 VEGF 上包含殘基 F17，M18，D19，Y21，Y25，Q89，191，K101，E103，和 C104 的功能性 表位。
表達(dá)A 4. 6. 1 (ATCC HB 10709)和 B 2. 6. 2 (ATCC HB 10710)抗 VEGF 的雜交瘤細(xì) 胞系已經(jīng)在美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)，10801UniversityBoulevard，Manassas, VA 20110-2209USA保藏和維持。表達(dá)由鑒別為DNA^101_1276的ATCC保藏物的核苷酸序列插 入物編碼的VEGF-E多肽的克隆(US 6391311)于1998年3月5日保藏于美國典型培養(yǎng)物保 藏中心，10801University Boulevard,Manassas, Va. 20110-2209，USA，并作為 ATCC 209653 維持。
5-FU (氟尿嘧啶，5-氟尿嘧啶，CAS Reg. No. 51-21-8)是一種胸苷酸合酶抑制劑， 而且已經(jīng)用于癌癥(包括結(jié)腸直腸癌和胰腺癌)數(shù)十年(US^02005，US 2885396 ；Barton 等(1972) Jour. Org. Chem. 37 :329 ；Hansen, R. Μ. (1991) Cancer Invest. 9 :637-642)。5-FU的名稱是5-氟-IH-嘧啶-2，4- 二酮，而且具有如下結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.一種用于治療高增殖性病癥的方法，包括以組合配制劑形式或交替地對哺乳動物 施用治療劑組合，其中所述組合包含治療有效量的trastuzumab-MCC-DMl，和治療有效量 的選自HER2 二聚化抑制劑抗體，抗VEGF抗體，5-FU，卡鉬，lapatinib，ABT-869，多西他賽， GDC-0941，和 GNE-390 的化療劑。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述HER2二聚化抑制劑抗體是pertuzumab。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述抗VEGF抗體是bevacizumab。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述化療劑是5-FU。
5.權(quán)利要求1的方法，其中所述化療劑是卡鉬。
6.權(quán)利要求1的方法，其中所述化療劑是lapatinib。
7.權(quán)利要求1的方法，其中所述化療劑是ABT-869。
8.權(quán)利要求1的方法，其中所述化療劑是多西他賽。
9.權(quán)利要求1的方法，其中所述化療劑是⑶C-0941。
10.權(quán)利要求1的方法，其中所述化療劑是GNE-390。
11.權(quán)利要求1的方法，其中所述治療有效量的trastuzumab-MCC-DMl和所述治療有效 量的化療劑是以組合配制劑形式施用的。
12.權(quán)利要求1的方法，其中所述治療有效量的trastuzumab-MCC-DMl和所述治療有效 量的化療劑是交替地施用的。
13.權(quán)利要求12的方法，其中對所述哺乳動物施用所述化療劑，隨后施用 trastuzumab-MCC-DMl。
14.權(quán)利要求12的方法，其中所述治療劑組合是以約3周間隔對具有高增殖性病癥的 人施用的。
15.權(quán)利要求12的方法，其中trastuzumab-MCC-DMl是以約1周至3周的間隔對具有 高增殖性病癥的人施用的。
16.權(quán)利要求1的方法，其中所述治療劑組合的施用導(dǎo)致協(xié)同效應(yīng)。
17.權(quán)利要求1的方法，其中所述高增殖性病癥是癌癥。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述高增殖性病癥是表達(dá)EAB2的癌癥。
19.權(quán)利要求17的方法，其中所述癌癥是乳腺癌，卵巢癌，宮頸癌，前列腺癌，睪丸癌， 生殖泌尿道癌，食管癌，喉癌，成膠質(zhì)細(xì)胞瘤，成神經(jīng)細(xì)胞瘤，胃癌，皮膚癌，角化棘皮瘤，肺 癌，表皮樣癌，大細(xì)胞癌，非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)，小細(xì)胞癌，肺的腺癌，骨癌，結(jié)腸癌，腺瘤， 胰腺癌，腺癌，甲狀腺癌，濾泡性癌，未分化的癌，乳頭狀癌，精原細(xì)胞瘤，黑素瘤，肉瘤，膀胱 癌，肝癌和膽管癌，腎癌，胰腺癌，髓樣病癥，淋巴瘤，毛細(xì)胞癌，口腔癌，鼻咽癌，咽癌，唇癌， 舌癌，口癌，小腸癌，結(jié)腸-直腸癌，大腸癌，直腸癌，腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌，何杰金氏病或白 血病。
20.權(quán)利要求1的方法，其中trastuzumab-MCC-DMl的量和化療劑的量各自是約Img至 約 1OOOmg。
21.權(quán)利要求1的方法，其中trastuzumab-MCC-DMl的量和化療劑的量的重量比是約 1 10 至約 10 1。
22.權(quán)利要求1的方法，其中所述哺乳動物是HER2陽性患者。
23.權(quán)利要求1的方法，其中所述HER2陽性患者已經(jīng)接受trastuzumab或lapatinib療法。
24.—種藥物組合物，其包含trastuzumab-MCC-DMl，選自HER2 二聚化抑制劑抗體，抗 VEGF 抗體，5-FU，卡鉬，lapatinib，ABT-869，多西他賽，GDC-0941，和 GNE-390 的化療劑；和 一種或多種藥學(xué)可接受載體，助流劑，稀釋劑，或賦形劑。
25.權(quán)利要求M的藥物組合物，其包含選自二氧化硅，粉狀纖維素，微晶纖維素， 金屬硬脂酸鹽，鋁硅酸鈉，苯甲酸鈉，碳酸鈣，硅酸鈣，玉米淀粉，碳酸鎂，無石棉的滑石， stearowet C，淀粉，淀粉1500，月桂硫酸鎂，氧化鎂，及其組合的藥學(xué)可接受助流劑。
26.權(quán)利要求M的藥物組合物，其中trastuzumab-MCC-DMl的量和化療劑的量各自以 約Img至約IOOOmg存在。
27.權(quán)利要求對的藥物組合物，其中trastuzumab-MCC-DMl的量和化療劑的量以重量 比約1 10至約10 1存在。
28.治療劑組合在制造用于治療選自乳腺癌，卵巢癌，宮頸癌，前列腺癌，睪丸癌，生殖 泌尿道癌，食管癌，喉癌，成膠質(zhì)細(xì)胞瘤，成神經(jīng)細(xì)胞瘤，胃癌，皮膚癌，角化棘皮瘤，肺癌，表 皮樣癌，大細(xì)胞癌，非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)，小細(xì)胞癌，肺的腺癌，骨癌，結(jié)腸癌，腺瘤，胰腺 癌，腺癌，甲狀腺癌，濾泡性癌，未分化的癌，乳頭狀癌，精原細(xì)胞瘤，黑素瘤，肉瘤，膀胱癌， 肝癌和膽管癌，腎癌，胰腺癌，髓樣病癥，淋巴瘤，毛細(xì)胞癌，口腔癌，鼻咽癌，咽癌，唇癌，舌 癌，口癌，小腸癌，結(jié)腸-直腸癌，大腸癌，直腸癌，腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌，何杰金氏病或白血 病的癌癥的藥物中的用途，其中以組合配制劑形式或交替地對哺乳動物施用所述治療劑組 合，所述治療劑組合包含治療有效量的trastuzumab-MCC-DMl，和治療有效量的選自HER2 二聚化抑制劑抗體，抗VEGF抗體，5-FU，卡鉬，lapatinib, ABT-869，多西他賽，⑶C-0941，和 GNE-390的化療劑。
29.一種用于治療高增殖性病癥的制品，其包含(a)治療劑組合，其以組合配制劑形式或交替地對哺乳動物施用，且其包含治療有效 量的trastuzumab-MCC-DMl，和治療有效量的選自HER2 二聚化抑制劑抗體，抗VEGF抗體， 5-FU，卡鉬，lapatinib，ABT-869，多西他賽，GDC-0941，和 GNE-390 的化療劑；禾口(b)使用說明。
30.一種用于為癌癥治療確定要組合使用的化合物的方法，包括(a)對HER2擴(kuò)增的乳腺癌細(xì)胞施用trastuzumab-MCC-DMl和選自HER2二聚化抑制劑 抗體，抗 VEGF 抗體，5-FU，卡鉬，lapatinib，ABT-869，多西他賽，GDC-0941，和 GNE-390 的化 療劑的治療劑組合，并(b)測量對細(xì)胞增殖的抑制，其中通過細(xì)胞生存力來區(qū)分非惡性和惡性乳房細(xì)胞。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述HER2擴(kuò)增的乳腺癌細(xì)胞是BT-474。
32.一種用于為癌癥治療確定要使用的治療劑組合的方法，包括(a)用trastuzumab-MCC-DMl，和選自HER2二聚化抑制劑抗體，抗VEGF抗體，5-FU，卡 鉬，lapatinib, ABT-869,多西他賽，⑶C-0941，和GNE-390的化療劑的治療劑組合處理體外 腫瘤細(xì)胞系，并(b)測量協(xié)同或非協(xié)同效應(yīng)；由此為癌癥治療確定協(xié)同治療劑組合。
全文摘要
抗體-藥物偶聯(lián)物trastuzumab-MCC-DM1和化療劑(包括其立體異構(gòu)體，幾何異構(gòu)體，互變體，溶劑化物，代謝物和藥學(xué)可接受鹽)的組合對于抑制腫瘤細(xì)胞生長，及對于治療由HER2和KDR(VEGFR受體1)介導(dǎo)的病癥諸如癌癥是有用的。公開了用于哺乳動物細(xì)胞中此類病癥，或有關(guān)病理狀況的體外，原位，和體內(nèi)診斷，預(yù)防或治療，使用此類組合的方法。
文檔編號A61K31/416GK102036660SQ200980117906
公開日2011年4月27日 申請日期2009年3月10日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月18日
發(fā)明者利安娜·貝里, 蓋爾·L·菲利普斯, 馬克·X·斯利夫科斯基 申請人:健泰科生物技術(shù)公司