專利名稱：用于治療銀屑病的方法
用于治療銀屑病的方法
相關(guān)申請
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發(fā)明背景
銀屑病是被視為最常見自身免疫疾病之一的T細(xì)胞介導(dǎo)的炎性疾病，影響約 2%-3%成年人，盡管全球流行率廣泛不同(Stern R. S.，等人，J Investig Dermatol Symp Proc 2004,9 :136-39 ；Davidson A 禾口 Diamond B. N Engl J Med 200 1,345 :340-50 ； Langley R. G. B.，等人，Ann Rheum Dis 2005,64 (Supp 1 II) :iil8_23)。銀屑病對生活質(zhì) 量具有較大景i響(de Korte J,等人，J Investig Dermatol Symp Proc 2004，9 140-7 ； Krueger G，等人，Arch Dermatol 2001，137 :280-4 ;FinlayAY 禾口 Coles EC, Br J Dermatol 1995,132 :236-44),并且與許多心理和心理社會問題相關(guān)(Kimball AB，等人，Am J Clin Dermatol 2005,6 :383-92 ；Russo PA,等人，Australas J Dermatol 2004，45 155-9)。 許多常規(guī)銀屑病治療具有毒性副作用；因此，其長期使用是有限的(Lebwohl M.和Ali S. , J Am Acad Dermatol 2001,45 :487-98 ；LebwohlM.禾口 Ali S. , J Am Acad Dermatol 2001,45:649-61)。此外，患有銀屑病的許多患者對常規(guī)治療不滿意(Stern RS，等人，J InvestigDermatol Symp Proc 2004,9 :136-39 ；Finlay AY 禾口 Ortonne JP, J CutanMed Surg 2004,8 =310-20)；因此，明確需要更安全且更容易使用并且可以在長期基礎(chǔ)上開處 方的治療。
白細(xì)胞介素-12(IL-12)和相關(guān)細(xì)胞因子IL-23是共享共同p40亞單位的IL-12 細(xì)胞因子超家族成員(Anderson EJR，等人，Springerkmin Immunopathol 2006,27 425-42)。兩種細(xì)胞因子都促成銀屑病中的1型T輔助細(xì)胞(Thl)免疫應(yīng)答的發(fā)展，但各自 具有獨(dú)特作用(Rosmarin D 禾口 Strober BE, J Drugs Dermatol 2005,4 :318-25 ；Hong K, 等人，J Immunol 1999,162 :7480-91 ；Yawalkar N，等人，J Invest Dermatol 1998, 111 1053-57)。IL-12主要刺激Thl細(xì)胞的分化和干擾素-Y的后續(xù)分泌，而IL-23優(yōu)先刺激 幼稚T細(xì)胞分化成效應(yīng)T輔助細(xì)胞(Thl7)，其分泌IL-17，一種促炎介質(zhì)Rosmarin D和 Strober BE, J Drugs Dermatol 2005,4 :318-25 ；Harrington Le,等人，Nature Immunol 2005,6 :1123-32 ；Park H，等人 Nature Immunol 2005,6 :1132-41) IL_12p40 和 IL_23p40 信使RNA在銀屑病皮膚損傷中的超表達(dá)暗示，用針對IL-12/23p40亞單位蛋白質(zhì)的中 和抗體抑制IL-12和IL-23可能提供用于治療銀屑病的有效治療方法(Yawalkar N，等 人，J Invest Dermatol 1998, 111 :1053-57 ；Lee E，等人，J Exp Med2004，199 125—30 ； Shaker 0G，等人，Clin Biochem 2006,39 :119-25 ；Piskin G,等人，J Immunol 2006,176 51908-15)。用于銀屑病治療的此種治療方法是本領(lǐng)域明確需要的。
發(fā)明概述
本發(fā)明提供了使用結(jié)合人IL-12和/或人IL-23的抗體或其抗原結(jié)合部分，用于 治療銀屑病例如慢性銀屑病的方法和組合物。
在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括給受試 者施用抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與IL-12和/或IL-23的P40亞單位表位結(jié)合，其中 在抗體或其抗原結(jié)合部分的最初施用后，受試者維持至少PASI 75應(yīng)答第一個(gè)延長的時(shí)間 段，其中在抗體或其抗原結(jié)合部分的施用中斷后，受試者顯示應(yīng)答喪失，并且其中在抗體或 其抗原結(jié)合部分的再施用后，受試者維持至少PASI 75應(yīng)答第二個(gè)延長的時(shí)間段，從而治 療受試者中的銀屑病。
在一個(gè)實(shí)施方案中，第一個(gè)延長的時(shí)間段是至少約4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14周，且優(yōu)選12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體的施用中斷至少約4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14周，且優(yōu)選12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，第二個(gè)延長的時(shí)間段是至少約4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14周，且優(yōu)選12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分每兩周施用一次。在一個(gè)實(shí)施方案中， 抗體或其抗原結(jié)合部分每周施用一次。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以單劑 施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以約IOOmgU 10mg、120mg、130mg、 140mg、150mg、160mg、170mg、180mg、190mg、200mg、210 或 220mg 的劑量施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，銀屑病是慢性銀屑病。在一個(gè)實(shí)施方案中，銀屑病是斑狀銀屑 病，例如慢性斑狀銀屑病。在另一個(gè)實(shí)施方案中，銀屑病是慢性銀屑病，例如慢性斑狀銀屑 病。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，銀屑病是中度至重度銀屑病，例如中度至重度斑狀銀屑病、中 度至重度慢性銀屑病、或中度至重度慢性斑狀銀屑病。在一個(gè)實(shí)施方案中，受試者已具有銀 屑病的臨床診斷至少6個(gè)月。在另一個(gè)實(shí)施方案中，受試者已具有穩(wěn)定斑狀銀屑病至少2 個(gè)月。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括給受 試者施用單劑的抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與IL-12和/或IL-23的p40亞單位表位 結(jié)合，其中在抗體或其抗原結(jié)合部分的施用后達(dá)到至少一種藥物代謝動力學(xué)特征，所述藥 物代謝動力學(xué)特征選自至少約3天的半衰期、小于或等于約4天的Tmax、和至少約40%的生 物利用率。
在各種實(shí)施方案中，達(dá)到至少約2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天或10天 的半衰期。
在各種實(shí)施方案中，達(dá)到小于或等于約1天、2天、3天、4天、5天、6天或更多天的 T1 max °
在各種實(shí)施方案中，達(dá)到至少約0. 1%,1%>5%,10%,20%,30%,40%,50%, 60%、70%、80%或更多的生物利用率。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體經(jīng)由靜脈內(nèi)注射進(jìn)行施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體經(jīng)由皮下注射進(jìn)行施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，單劑是約0. 1-約5. Omg/kg(例如，約0. 1_約1. Omg/kg、約 0. 1-約 2. Omg/kg、約 0. 1-約 3. Omg/kg、約 0. 1-約 4. Omg/kg、約 1. 0-約 2. Omg/kg、約 1. 0-約 3. Omg/kg、約1. 0-約4. Omg/kg或約1. 0-約5. Omg/kg)抗體或其抗原結(jié)合部分。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括給受 試者施用抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與IL-12和/或IL-23的p40亞單位表位結(jié)合，其 中在抗體或其抗原結(jié)合部分的最初施用后，受試者維持至少PASI 75應(yīng)答第一個(gè)延長的時(shí) 間段，其中在抗體或其抗原結(jié)合部分的施用中斷后，受試者顯示應(yīng)答喪失，并且其中在抗體 或其抗原結(jié)合部分的再施用后，受試者維持至少PASI 50應(yīng)答第二個(gè)延長的時(shí)間段，從而 治療受試者中的銀屑病。
在一個(gè)實(shí)施方案中，第一個(gè)延長的時(shí)間段是至少約4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14周，且優(yōu)選12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體的施用中斷至少約4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14周，且優(yōu)選12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，第二個(gè)延長的時(shí)間段是至少約4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14周，且優(yōu)選12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分每兩周施用一次。在一個(gè)實(shí)施方案中， 抗體或其抗原結(jié)合部分每周施用一次。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以單劑施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗 體或其抗原結(jié)合部分以約 100mg、110mg、120mg、130mg、140mg、150mg、160mg、170mg、180mg、 190mg或200mg的劑量施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，銀屑病是慢性銀屑病。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括給受 試者施用抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與IL-12和/或IL-23的p40亞單位表位結(jié)合，其 中在抗體或其抗原結(jié)合部分的最初施用后，受試者維持至少PASI 75應(yīng)答第一個(gè)延長的時(shí) 間段，其中在抗體或其抗原結(jié)合部分的施用中斷后，受試者顯示應(yīng)答喪失，并且其中在抗體 或其抗原結(jié)合部分的再施用后，受試者維持清除或最低限度的PGA得分第二個(gè)延長的時(shí)間 段，從而治療受試者中的銀屑病。
在一個(gè)實(shí)施方案中，第一個(gè)延長的時(shí)間段是至少約4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14周，且優(yōu)選12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體的施用中斷至少約4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14周，且優(yōu)選12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，第二個(gè)延長的時(shí)間段是至少約4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14周，且優(yōu)選12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分每兩周施用一次。在一個(gè)實(shí)施方案中， 抗體或其抗原結(jié)合部分每周施用一次。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以單劑施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗 體或其抗原結(jié)合部分以約 100mg、110mg、120mg、130mg、140mg、150mg、160mg、170mg、180mg、 190mg或200mg的劑量施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，銀屑病是慢性銀屑病。
在另外一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括給 受試者施用單劑的抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與IL-12和/或IL-23的p40亞單位表 位結(jié)合，其中在抗體或其抗原結(jié)合部分的施用后達(dá)到至少一種藥物代謝動力學(xué)特征，所述 藥物代謝動力學(xué)特征選自約0. 15-約150 μ g/mL(例如，約0. 2-約140 μ g/mL、約0. 5-約 125 μ g/mL、約 1. 0-約 100 μ g/mL、約 10-約 90 μ g/mL、約 25-約 75 μ g/mL、約 35-約 60 μ g/ mL、和約40-約50 μ g/mL)的最大血清濃度(Cmax)，和約80-約13，000 μ g χ小時(shí)/mL (例如， 約 100-約 12，000 μ g χ 小時(shí) /mL、約 150-約 10，000 μ g χ 小時(shí) /mL、約 200-約 8，000 μ g χ 小時(shí) /mL、約 400-約 6，000 μ g χ 小時(shí) /mL、約 800-約 4，000 μ g χ 小時(shí) /mL、約 1000-約 2，000 μ g χ 小時(shí) /mL、約 145-約 13，000 μ g χ 小時(shí) /mL、和約 80-約 5，000 μ g χ 小時(shí) /mL) 的血清濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體經(jīng)由靜脈內(nèi)注射進(jìn)行施用。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，Cmax是約1-約150 μ g/mL(例如，約2_約125 μ g χ小時(shí)/ mL、約 5-約 100 μ g χ 小時(shí) /mL、約 10-約 80 μ g χ 小時(shí) /mL、約 20-約 60 μ g χ 小時(shí) /mL、 約30-約50 μ g χ小時(shí)/mL、約1-約20 μ g χ小時(shí)/mL、約20-約300 μ g χ小時(shí)/mL、和約 140-約 150 μ g χ 小時(shí) /mL)。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，AUC是約145-約13，000 μ g χ小時(shí)/mL(例如，約200-約 11，OOOyg X 小時(shí)/mL、約 500-約 10，000 μ g χ 小時(shí)/mL、約 1000-約 5，000 μ g χ 小時(shí)/mL、 約 2000-約 4000 μ g χ 小時(shí) /mL、約 145-約 165 μ g χ 小時(shí) /mL、約 500-約 600 μ g χ 小時(shí) /mL、約 2000-約 3000 μ g χ 小時(shí) /mL、和約 12000-約 13000 μ g χ 小時(shí) /mL)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體經(jīng)由皮下注射進(jìn)行施用。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，Cmax是約0. 15-約20 μ g/mL(例如，約0. 25-約15 μ g/mL、約 0. 5-約 13 μ g/mL、約 1-約 10 μ g/mL、約 2-約 8 μ g/mL、約 0. 15-約 0. 3 μ g/mL、約 0. 5-約 2 μ g/mL、約 2-約 4 μ g/mL、和約 10-約 15 μ g/mL)。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，AUC是約80-約5000 μ g χ小時(shí)/mL (例如，約200-3000 μ g χ 小時(shí) /mL、約 400-2000 μ g χ 小時(shí) /mL、約 500-1500 μ g χ 小時(shí) /mL、約 4000-5000 μ g χ 小時(shí) /mL、約 80-90 μ g χ 小時(shí) /mL、和約 200-300 μ g χ 小時(shí) /mL)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，單劑是約0. 1-約5. Omg/kg(例如，約0. 1_約1. Omg/kg、約 0. 1-約 2. Omg/kg、約 0. 1-約 3. Omg/kg、約 0. 1-約 4. Omg/kg、約 1. 0-約 2. Omg/kg、約 1. 0-約 3. Omg/kg、約1. 0-約4. Omg/kg、或約1. 0-約5. Omg/kg)抗體或其抗原結(jié)合部分。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括給受 試者施用單劑的抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與IL-12和/或IL-23的p40亞單位表位結(jié) 合，其中在抗體或其抗原結(jié)合部分的靜脈內(nèi)施用后達(dá)到至少一種藥物代謝動力學(xué)特征，所 述藥物代謝動力學(xué)特征選自約30-約600mL/小時(shí)(例如，約50-約500mL/小時(shí)、約75-約 400mL/小時(shí)、約100-約300mL/小時(shí)、約150-約250mL/小時(shí)、約30-約40mL/小時(shí)、約40-約 60mL/小時(shí)、和約500-約600mL/小時(shí))的清除率(CL)，和約8-約IlL(例如，約8-約10L、 約8-約9L、約9-約10L、約10-約11L、和約8. 5-9. 5L)的分布容積(Vz)。
在相關(guān)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括給受試 者施用單劑的抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與IL-12和/或IL-23的p40亞單位表位結(jié)合，其中在抗體或其抗原結(jié)合部分的皮下施用后達(dá)到至少一種藥物代謝動力學(xué)特征，所述 藥物代謝動力學(xué)特征選自約90-約250mL/小時(shí)(例如，約100-約225mL/小時(shí)、約125-約 200mL/小時(shí)、約140-約180mL/小時(shí)、約90-約IOOmL/小時(shí)、約150-約200mL/小時(shí)、和約 200-約250mL/小時(shí))的表觀清除率(CL/F)，和約23-約67L (例如，約25-約60L、約30-約 55L、約35-約50L、約40-約45L、約23-約35L、和約60-約70L)的表觀分布容積(V/F)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，單劑是約0. 1-約5. Omg/kg(例如，約0. 1_約1. Omg/kg、約 0. 1-約 2. Omg/kg、約 0. 1-約 3. Omg/kg、約 0. 1-約 4. Omg/kg、約 1. 0-約 2. Omg/kg、約 1. 0-約 3. Omg/kg.約1. 0-約4. Omg/kg、或約1. 0-約5. Omg/kg)抗體或其抗原結(jié)合部分。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括給受 試者施用抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與IL-12和/或IL-23的p40亞單位表位結(jié)合，其 中在抗體或其抗原結(jié)合部分的最初施用后，受試者顯示PASI 75應(yīng)答，其中在抗體或其抗 原結(jié)合部分的施用中斷后，受試者顯示應(yīng)答喪失，并且其中到抗體或其抗原結(jié)合部分的再 施用后約25天時(shí)，受試者顯示至少PASI 75應(yīng)答，從而治療受試者中的銀屑病。
在一個(gè)實(shí)施方案中，到抗體或其抗原結(jié)合部分的再施用后約50天時(shí)，受試者顯示 至少PASI 75應(yīng)答。在一個(gè)實(shí)施方案中，到抗體或其抗原結(jié)合部分的再施用后約60天時(shí)， 受試者顯示至少PASI 75應(yīng)答。在一個(gè)實(shí)施方案中，到抗體或其抗原結(jié)合部分的再施用后 約30、35、40、45、50、60、65、70、75、80、85、90或更多天時(shí)，受試者顯示至少PASI 75應(yīng)答。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體的最初施用是至少約12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體的施用中斷至少約4、5、6、7、8、9、10、11或12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分每兩周施用一次。在一個(gè)實(shí)施方案中， 抗體或其抗原結(jié)合部分每周施用一次。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以單劑 施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以約IOOmgU 10mg、120mg、130mg、 140mg、150mg、160mg、170mg、180mg、190mg 或 200mg 的劑量施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，銀屑病是慢性銀屑病。
在另外一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括給 受試者施用抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與IL-12和/或IL-23的p40亞單位表位結(jié)合， 其中在抗體或其抗原結(jié)合部分的最初施用后，受試者顯示PASI 75應(yīng)答，其中到抗體或其 抗原結(jié)合部分的施用中斷后約60天時(shí)，受試者顯示應(yīng)答喪失，并且其中在抗體或其抗原結(jié) 合部分的再施用后，受試者達(dá)到PASI 75應(yīng)答，從而治療受試者中的銀屑病。
在一個(gè)實(shí)施方案中，到抗體或其抗原結(jié)合部分的施用中斷后約120天時(shí)，受試者 顯示應(yīng)答喪失。在一個(gè)實(shí)施方案中，到抗體或其抗原結(jié)合部分的施用中斷后約180天時(shí)，受 試者顯示應(yīng)答喪失。在一個(gè)實(shí)施方案中，到抗體或其抗原結(jié)合部分的施用中斷后約50、55、 60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200 或更多天 時(shí)，受試者顯示應(yīng)答喪失。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體的最初施用是至少約12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分每兩周施用一次。在一個(gè)實(shí)施方案中， 抗體或其抗原結(jié)合部分每周施用一次。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以單劑 施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以約IOOmgU 10mg、120mg、130mg、 140mg、150mg、160mg、170mg、180mg、190mg 或 200mg 的劑量施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，銀屑病是慢性銀屑病。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括給受 試者施用每兩周一次、每周一次或單劑的抗體或其抗原結(jié)合部分，其針對人IL-12和/或 人IL-23。在相關(guān)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括步驟: (i)選擇患有慢性銀屑病的受試者；和(ii)給受試者施用抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠 與IL-12和/或IL-23的p40亞單位表位結(jié)合；從而治療受試者中的慢性銀屑病。
在另一個(gè)相關(guān)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括 給受試者施用抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與IL-12和/或IL-23的p40亞單位表位結(jié) 合，其中在抗體或其抗原結(jié)合部分的施用中斷后，受試者維持至少PASI 50應(yīng)答、至少PASI 75應(yīng)答或至少PASI 90應(yīng)答延長的時(shí)間段，從而治療受試者中的銀屑病。
在另外一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括給 受試者施用抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與受試者的IL-12和/或IL-23的p40亞單位 表位結(jié)合，其中在抗體或其抗原結(jié)合部分的最初施用后，受試者維持清除或最低限度的PGA 等級延長的時(shí)間段，從而治療受試者中的銀屑病。
在再進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供了治療受試者中的銀屑病的方法，所述方法包括 給受試者施用抗體或其抗原結(jié)合部分，其能夠與受試者的IL-12和/或IL-23的p40亞單位 表位結(jié)合，其中到抗體或其抗原結(jié)合部分的最初施用后約8周時(shí)，受試者顯示改善的PASI 得分，從而治療受試者中的銀屑病。在一個(gè)實(shí)施方案中，到抗體或其抗原結(jié)合部分的最初施 用后約7周、約6周、約5周、約4周、約3周、約2周或約1周時(shí)，受試者顯示改善的PASI 得分。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體施用中斷后的延長的時(shí)間段是至少約12周。在一個(gè)實(shí)施 方案中，延長的時(shí)間段是至少約12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23或?qū)χ?。在一個(gè) 實(shí)施方案中，抗體施用至少約12周。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分能夠與 IL-12的p40亞單位表位結(jié)合。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)p40亞單位與IL-12的p35亞單位結(jié)合時(shí)，抗體或其抗原 結(jié)合部分能夠與P40亞單位表位結(jié)合。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)p40亞單位與pl9亞單 位結(jié)合時(shí)，抗體或其抗原結(jié)合部分能夠與P40亞單位表位結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)p40 亞單位與IL-12的p35亞單位結(jié)合時(shí)，并且當(dāng)p40亞單位與pl9亞單位結(jié)合時(shí)，抗體或其抗 原結(jié)合部分能夠與P40亞單位表位結(jié)合。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分與IL-12的p40亞單位表位結(jié)合，選自 Y61和J695的抗體與所述IL-12的p40亞單位表位結(jié)合。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體進(jìn)一步能夠與第一種異二聚體結(jié)合，并且還能夠與第 二種異二聚體結(jié)合，其中第一種異二聚體包括11-12的p40亞單位和11-12的p35亞單位， 并且其中第二種異二聚體包括IL-12的p40亞單位和pl9亞單位。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，抗體中和第一種異二聚體的活性。在另一個(gè)實(shí)施方案中， 抗體中和第二種異二聚體的活性。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，抗體中二種異二聚體的活性。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分在體外 PHA測定中以1110_1或更少的IC5tl抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖，或以ΙχΙΟ,Μ或更少的IC5tl 抑制人IFN γ生產(chǎn)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分以IxlO-ltlM 或更少的Kd或IxKT3iT1或更少的k。ff速率常數(shù)與IL-12的p40亞單位解離，如通過表面等 離振子共振測定的。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的分離抗體或其抗原結(jié)合部分是嵌合 抗體、人源化抗體或人抗體。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分具有包括 SEQ ID NO 25的氨基酸序列的重鏈⑶R3、和包括SEQ ID NO J6的氨基酸序列的輕鏈⑶R3。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分具有包 括SEQ ID NO :27的氨基酸序列的重鏈⑶R2、和包括SEQ ID NO :28的氨基酸序列的輕鏈 CDR2。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分具有包括 SEQ ID NO 29的氨基酸序列的重鏈⑶Rl和包括SEQID NO 30的氨基酸序列的輕鏈⑶R1。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分能夠與包 括p40亞單位的白細(xì)胞介素結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，白細(xì)胞介素包括p40亞單位和p35亞 單位，例如白細(xì)胞介素是IL-12。在另一個(gè)實(shí)施方案中，白細(xì)胞介素包括p40亞單位和pl9 亞單位。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分中和白細(xì)胞介素的活性。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分與p40亞單位表位結(jié)合。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以藥物組合物施用于受試者，所述藥 物組合物包括抗體或其抗原結(jié)合部分、和藥學(xué)上可接受的載體。藥物組合物還可以包括另 外試劑，例如治療劑，例如布地奈德(budenoside)，表皮生長因子，皮質(zhì)類固醇，環(huán)孢菌素， 柳氮磺吡啶，氨基水楊酸鹽，6-巰基嘌呤，硫唑嘌呤，甲硝唑，脂肪加氧酶抑制劑，美沙拉秦， 奧沙拉嗪，巴柳氮，抗氧化劑，血栓烷抑制劑，IL-I受體拮抗劑，抗IL-I β單克隆抗體，抗 IL-6單克隆抗體，生長因子，彈性蛋白酶抑制劑，吡啶基-咪唑化合物，TNF、LT、IL-l、IL-2、 IL-6、IL-7、IL-8、IL-15、IL-16、IL-18、EMAP-II, GM-CSF、FGF 禾口 PDGF 的抗體或激動劑， CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90 或其配體的抗體，氨甲蝶呤， 環(huán)孢菌素，Π(506，雷帕霉素，霉酚酸酯，來氟洛米，NSAIDs，布洛芬，皮質(zhì)類固醇，強(qiáng)的松龍， 磷酸二酯酶抑制劑，腺苷激動劑，抗凝劑，補(bǔ)體抑制劑，腎上腺素能藥，IRAK、NIK, IKK、p38、 MAP激酶抑制劑，IL-I β轉(zhuǎn)換酶抑制劑，TNF α轉(zhuǎn)換酶抑制劑，T細(xì)胞發(fā)信號抑制劑，金屬蛋 白酶抑制劑，柳氮磺吡啶，硫唑嘌呤，6-巰基嘌呤，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑，可溶性細(xì)胞因 子受體，可溶性P55TNF受體，可溶性p75TNF受體，sIL-lRI, sIL-lRII, sIL_6R，抗炎細(xì)胞因 子，IL-4, IL-10, IL-11, IL-13 和 TGF β。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，施用于受試者的藥物組合物中的治療劑可以選自抗TNF抗 體及其抗體片段、TNFR-Ig構(gòu)建體、TACE抑制劑、PDE4抑制劑、皮質(zhì)類固醇、布地奈德、地塞 米松、柳氮磺吡啶、5-氨基水楊酸、奧沙拉嗪、IL-I β轉(zhuǎn)換酶抑制劑、IL-lra、酪氨酸激酶抑 制劑、6-巰基嘌呤和IL-11。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，治療劑可以選自皮質(zhì)類固醇，強(qiáng)的松龍，甲基強(qiáng)的松龍， 硫唑嘌呤，環(huán)磷酰胺，環(huán)孢菌素，氨甲蝶呤，4-氨基吡啶，替扎尼定，干擾素-β la,干擾 素-β lb，共聚物1，高壓氧，靜脈內(nèi)免疫球蛋白，克拉屈濱(clabribine)，TNF、LT、IL-U IL-2、IL-6、IL-7、IL-8、IL-15、IL-16、IL-18、EMAP-II, GM-CSF、FGF、PDGF 的抗體或激動 劑，針對 CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD80、CD86、CD90 或其配 體的抗體，氨甲蝶呤，環(huán)孢菌素，Π(506，雷帕霉素，霉酚酸酯，來氟洛米，NSAIDs，布洛芬，皮 質(zhì)類固醇，強(qiáng)的松龍，磷酸二酯酶抑制劑，腺苷激動劑，抗凝劑，補(bǔ)體抑制劑，腎上腺素能藥， IRAK、NIK、IKK、p38或MAP激酶抑制劑，IL-I β轉(zhuǎn)換酶抑制劑，TACE抑制劑，T細(xì)胞發(fā)信號 抑制劑，激酶抑制劑，金屬蛋白酶抑制劑，柳氮磺吡啶，硫唑嘌呤，6-巰基嘌呤，血管緊張素 轉(zhuǎn)換酶抑制劑，可溶性細(xì)胞因子受體，可溶性P55TNF受體，可溶性p75 TNF受體，sIL_lRI， sIL-lRII，sIL-6R，sIL_13R，抗P7s，ρ-選擇蛋白糖蛋白配體(PSGL)，抗炎細(xì)胞因子，IL-4， IL-10, IL-13 禾口 TGF β。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分與人IL-12 和/或人IL-23結(jié)合，并且以ΙχΙΟ,Μ或更少的Kd和IxKT3iT1或更少的k。ff速率常數(shù)分別 與人IL-12和/或人IL-23解離，如通過表面等離振子共振測定的。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗 體或其抗原結(jié)合部分以IxKT4iT1或更少的k。ff速率常數(shù)與人IL-12和/或人IL-23解離。 在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以IxlO-5S-1或更少的k。ff速率常數(shù)與人IL-12 和/或人IL-23解離。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分與人IL-12和/或人IL-23結(jié)合，并 且以lxlO、—1或更少的k。ff速率常數(shù)分別與人IL-12和/或人IL-23解離，如通過表面等 離振子共振測定的。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以IxlO-3S-1或更少的 k。ff速率常數(shù)與人IL-12和/或人IL-23解離。在再進(jìn)一步的另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其 抗原結(jié)合部分以ΙχΙΟΛΓ1或更少的k。ff速率常數(shù)與人IL-12和/或人IL-23解離。在另一 個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以IxlO-5S-1或更少的k。ff速率常數(shù)與人IL-12和/ 或人IL-23解離。
在另外一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分與人IL-12和/或人IL-23結(jié)合， 并且以1. 34xlO-10M或更少的Kd分別與人IL-12和/或人IL-23解離。在另外一個(gè)實(shí)施方 案中，抗體或其抗原結(jié)合部分與人IL-12和/或人IL-23結(jié)合，并且以9. 74X10_"M或更少 的Kd分別與人IL-12和/或人IL-23解離。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分是 重組抗體或其抗原結(jié)合部分。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分是中和抗 體，例如中和人IL-12和/或人IL-23的活性。在一個(gè)實(shí)施方案中，中和抗體或其抗原結(jié)合 部分在體外PHA測定中以IxlO-9M或更少的IC5tl抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖。在另一個(gè)實(shí) 施方案中，中和抗體或其抗原結(jié)合部分在體外PHA測定中以IxlO-ltlM或更少的IC5tl抑制植 物凝集素胚細(xì)胞增殖。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，中和抗體或其抗原結(jié)合部分在體外PHA測 定中以IxlO-nM或更少的IC5tl抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，中和 抗體或其抗原結(jié)合部分在體外植物凝集素胚細(xì)胞增殖測定(PHA測定)中以IxlO-7M或更少 的IC5tl抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，中和抗體或其抗原結(jié)合部分 在體外PHA測定中以IxlO-8M或更少的IC5tl抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖。在一個(gè)實(shí)施方案中，中和抗體或其抗原結(jié)合部分以lxlO_1(lM或更少的IC5tl抑制人IFNy生產(chǎn)。在另外一個(gè) 實(shí)施方案中，中和抗體或其抗原結(jié)合部分以lxlO_"M或更少的IC5tl抑制人IFNy生產(chǎn)。在 另外一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，中和抗體或其抗原結(jié)合部分以5xlO~M或更少的IC5tl抑制 人IFNy生產(chǎn)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分
a)在體外PHA測定中以1χ10_9Μ或更少的IC5tl抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖；
b)具有包括SEQ ID NO 25的氨基酸序列的重鏈⑶R3 ；禾口
c)具有包括SEQ ID NO :26的氨基酸序列的輕鏈⑶R3。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體 進(jìn)一步具有包括SEQ ID NO 27的氨基酸序列的重鏈⑶R2 ；和包括SEQ ID NO 28的氨基 酸序列的輕鏈CDR2。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分進(jìn)一步具有包括SEQ IDNO 29的氨基酸序列的重鏈⑶Rl ；和包括SEQ ID NO 30的氨基酸序列的輕鏈⑶R1。在 另外一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分在體外PHA測定中以IxlO-ltlM或更少的IC5tl 進(jìn)一步抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖。在另外一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分在體 外PHA測定中以1χ10_"Μ或更少的IC5tl進(jìn)一步抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分具有包括 SEQ ID NO :31的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)、和包括SEQ ID NO :32的氨基酸序列的輕鏈可 變區(qū)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分包括選自 IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA和IgE恒定區(qū)的重鏈恒定區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體重 鏈恒定區(qū)是IgGl。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體是Fab片段、F (ab' )2片段或單鏈Fv片段。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分以IxlO-ltlM 或更少的Kd與人IL-12和/或人IL-23解離，并且與人IL-12和/或人IL-23的p40亞單 位上的表位結(jié)合。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分是人抗體或 其抗原結(jié)合部分，其
a)以IxKT3iT1或更少的k。ff速率常數(shù)與人IL-12解離，如通過表面等離振子共振 測定的；
b)具有包括SEQ ID NO 25的氨基酸序列的重鏈⑶R3 ；禾口
c)具有包括SEQ ID NO 26的氨基酸序列的輕鏈⑶R3。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分以 IxlO-4S-1或更少的k。ff速率常數(shù)與人IL-12解離。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，人抗體或其抗 原結(jié)合部分以IxlO-5S-1或更少的k。ff速率常數(shù)與人IL-12解離。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分是人抗體或 其抗原結(jié)合部分，其與人IL-12結(jié)合并且包含
包括SEQ ID NO 26的氨基酸序列的輕鏈⑶R3結(jié)構(gòu)域；禾口
包括SEQ ID NO 25的氨基酸序列的重鏈⑶R3結(jié)構(gòu)域。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分具有輕鏈可變區(qū)(LCVR)且具有重鏈 可變區(qū)(HCVR)，所述LCVR具有包括SEQ IDNO 26的氨基酸序列的⑶R3結(jié)構(gòu)域，所述HCVR 具有包括SEQ IDN0:25的氨基酸序列的CDR3結(jié)構(gòu)域。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗13原結(jié)合部分包括LCVR和HCVR，所述LCVR進(jìn)一步具有包括SEQ ID NO 28的氨基酸序列的 ⑶R2結(jié)構(gòu)域，所述HCVR進(jìn)一步具有包括SEQ ID NO 27的氨基酸序列的⑶R2結(jié)構(gòu)域。在 另外一個(gè)實(shí)施方案中，LCVR進(jìn)一步具有包括SEQ ID NO 30的氨基酸序列的⑶Rl結(jié)構(gòu)域， 并且HCVR具有包括SEQ ID NO 29的氨基酸序列的⑶Rl結(jié)構(gòu)域。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分與人IL-12和/或人IL-23結(jié)合，并且 是抗體J695 (也稱為ABT-874)，或其抗原結(jié)合部分。
在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分與人IL-12和/或人IL-23結(jié)合，并且 以1. 34xlO_1(lM或更少的Kd與人IL-12解離，并且中和人IL-12和/或人IL-23。在一個(gè)實(shí) 施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以9. 74X10_"M或更少的Kd與人IL-12和/或人IL-23解 離。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分在體外PHA測定中以IxlO-7M或更少的IC5tl 抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分在體外PHA測定 中以ΙχΙΟΛ 或更少的IC5tl抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原 結(jié)合部分在體外PHA測定中以IxlO-i3M或更少的IC5tl抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖。在一個(gè) 實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分在體外PHA測定中以IxlO-ltlM或更少的IC5tl抑制植物凝 集素胚細(xì)胞增殖。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分在體外PHA測定中以IxlO-11M 或更少的IC5tl抑制植物凝集素胚細(xì)胞增殖。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以 ΙχΙΟ,Μ或更少的IC5tl抑制人IFNy生產(chǎn)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以 1χ10_"Μ或更少的IC5tl抑制人IFNy生產(chǎn)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分以 5χ10_12Μ或更少的IC50抑制人IFN γ生產(chǎn)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或其抗原結(jié)合部分在IL-12或 IL-23受體結(jié)合測定(RBA)中以1χ10_9Μ或更少的IC5tl分別抑制IL-12和/或IL-13與其受 體結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體或其抗原結(jié)合部分在IL-12或IL-23受體結(jié)合測定(RBA) 中以IxlO-ltlM或更少的IC5tl分別抑制IL-12和/或IL-13與其受體結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案 中，抗體或其抗原結(jié)合部分在IL-12或IL-23受體結(jié)合測定(RBA)中以IxKT11M或更少的 IC50分別抑制IL-12和/或IL-13與其受體結(jié)合。
附圖簡述


圖1顯示試驗(yàn)的患者布置。(術(shù)語“eow”指每隔一周給藥。)
圖2顯示在試驗(yàn)的12周部分過程中在銀屑病面積和嚴(yán)重程度指數(shù)中具有至少 75%改善(PASI 75)的患者百分比。在第8周前，基于對于意向治療群體觀察的數(shù)據(jù)的方 差分析，除200mgXl組外，對于與安慰劑的每次比較，在每個(gè)ABT-874治療組中，具有PASI 75應(yīng)答的患者百分比在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著更大(ρ <0.001)。(術(shù)語“eow”指每隔一周給藥。)
圖3顯示在銀屑病面積和嚴(yán)重程度指數(shù)(PASI)得分中距離基線的平均百分比改 善。數(shù)據(jù)顯示基于對于意向治療群體觀察的數(shù)據(jù)的方差分析，在所有時(shí)間點(diǎn)時(shí)對于與安慰 劑比較的每個(gè)ABT-874治療組*p < 0.001(除在第1周時(shí)的IOOmg eow外，ρ = 0.023)。 (術(shù)語“eow”指每隔一周給藥。)
圖4A-C顯示在試驗(yàn)的第M周時(shí)，即在抗體施用中斷后12周時(shí)，分別維持PASI 50, PASI 75和PASI 90應(yīng)答的患者百分比。
圖4D顯示在試驗(yàn)的M周時(shí)間段過程中，隨著時(shí)間過去維持PASI75應(yīng)答的患者百 分比。
圖5A顯示從第4周到第12周在PASI得分中距離基線的平均百分比改善。
圖5B顯示從再治療后第4周到第12周在PASI得分中距離基線的平均百分比改善。
圖6A顯示關(guān)于ABT-874的IV給藥的血清濃度-時(shí)間曲線。
圖6B顯示關(guān)于ABT-874的SC給藥的血清濃度-時(shí)間曲線。
圖7A顯示在再治療后再次達(dá)到PASI 75應(yīng)答的患者百分比。
圖7B顯示在再治療過程中跨越所有ABT-874劑量組達(dá)到PASI75應(yīng)答的中值時(shí) 間。
圖7C顯示在治療的最初12周后PASI 75應(yīng)答喪失的中值時(shí)間。
圖7D顯示在再治療后達(dá)到0或1的PGA得分的患者百分比。
圖8A-8B顯示與種系序列Cos-3/JH3和Dpl 18 Lv 1042相比結(jié)合人IL-12的一系 列人抗體的重鏈可變區(qū)氨基酸序列比對。Kabat編號用于鑒定氨基酸位置。對于Joe 9野 生型，顯示了全序列。對于其他抗體，僅僅顯示了與Joe 9野生型不同的那些氨基酸位置。
圖8C-8D顯示結(jié)合人IL-12的一系列人抗體的輕鏈可變區(qū)氨基酸序列比對。Kabat 編號用于鑒定氨基酸位置。對于Joe 9野生型，顯示了全序列。對于其他抗體，僅僅顯示了 與Joe 9野生型不同的那些氨基酸位置。
圖9A-9E顯示通過位點(diǎn)定向誘變突變的Y61抗體重鏈中的⑶R位置以及在每個(gè)位 置的各自氨基酸取代。圖右部的圖表顯示與未突變的Y61(空心條)相比取代的抗體(黑 色條)的解離速率(off-rate)。
圖9F-9H顯示通過位點(diǎn)定向誘變突變的Y61抗體輕鏈中的⑶R位置以及在每個(gè)位 置的各自氨基酸取代。圖右部的圖表顯示與未突變的Y61(空心條)相比取代的抗體(黑 色條)的解離速率。
發(fā)明詳述
為了本發(fā)明可以更容易理解，首先定義了某些術(shù)語。
術(shù)語“活性增強(qiáng)氨基酸殘基”包括改善抗體活性的氨基酸殘基。應(yīng)當(dāng)理解活性增強(qiáng) 氨基酸殘基可以替換在接觸、高變或優(yōu)選選擇性誘變位置處的氨基酸殘基，并且進(jìn)一步地， 超過一個(gè)活性增強(qiáng)氨基酸殘基可以存在于一個(gè)或多個(gè)CDRs內(nèi)?；钚栽鰪?qiáng)氨基酸殘基包括 改善抗體的結(jié)合特異性/親和力的氨基酸殘基，所述抗體例如與人IL-12結(jié)合的抗人IL-12 抗體?；钚栽鰪?qiáng)氨基酸殘基也預(yù)期包括改善抗體的中和效力的氨基酸殘基，所述抗體例如 抑制人IL-12的人IL-12抗體。
術(shù)語“抗體”包括由4條多肽鏈(通過二硫鍵互聯(lián)的2條重(H)鏈和2條輕(L)鏈) 組成的免疫球蛋白分子。每條重鏈由重鏈可變區(qū)(本文縮寫為HCVR或VH)和重鏈恒定區(qū)組 成。重鏈恒定區(qū)由3個(gè)結(jié)構(gòu)域CH1、CH2和CH3組成。每條輕鏈由輕鏈可變區(qū)(本文縮寫為 LCVR或VL)和輕鏈恒定區(qū)組成。輕鏈恒定區(qū)由1個(gè)結(jié)構(gòu)域CL組成。VH和VL區(qū)可以進(jìn)一步 再分成稱為互補(bǔ)性決定區(qū)(CDRs)的高變區(qū)，由稱為構(gòu)架區(qū)(FR)的更保守區(qū)域點(diǎn)綴。每個(gè) VH和VL由3個(gè)⑶Rs和4個(gè)FRs組成，從氨基末端到羧基末端以下述順序排列FR1、⑶R1、 FR2、⑶R2、FR3、⑶R3、FR4。在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的組合物和方法中使用的抗體是 在引入本文作為參考的美國專利號6，914，128中描述的抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在本 發(fā)明的組合物和方法中使用的抗體是抗體ABT-874 (也稱為J695 ；AbbottLaboratories)。
術(shù)語抗體的“抗原結(jié)合部分”(或“抗體部分”)包括保留與抗原(例如，hIL-12) 特異性結(jié)合的能力的抗體片段。已顯示抗體的抗原結(jié)合功能可以由全長抗體的片段執(zhí)行。 在術(shù)語抗體的“抗原結(jié)合部分”內(nèi)包括的結(jié)合片段例子包括(i)Fab片段，由VL、VH、CL和 CHl結(jié)構(gòu)域組成的單價(jià)片段；(ii) F (ab ‘ ) 2片段，包括在鉸鏈區(qū)通過二硫鍵連接的2個(gè)Fab 片段的二價(jià)片段；(iii)由VH和CHl結(jié)構(gòu)域組成的Fd片段；(iv)由抗體單臂的VL和VH 結(jié)構(gòu)域組成的Fv片段，(ν)由VH結(jié)構(gòu)域組成的dAb片段(Ward等人，(1989) Nature 341 544-546)；和(vi)分離的互補(bǔ)性決定區(qū)(CDR)。此外，盡管Fv片段的2個(gè)結(jié)構(gòu)域VL和VH 由分開的基因編碼，但它們可以使用重組法通過合成接頭進(jìn)行連接，所述合成接頭使得它 們能夠制備為單條蛋白質(zhì)鏈，其中VL和VH區(qū)配對以形成單價(jià)分子(稱為單鏈Fv(SCFV)； 參見例如，Bird 等人(1988) Science 242 :423-426 ；和 Huston 等人(1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85 :5879-5883)。此種單鏈抗體也意欲包含在術(shù)語抗體的“抗原結(jié)合部分” 內(nèi)。還包括其他形式的單鏈抗體，例如雙抗體。雙抗體是二價(jià)、雙特異性抗體，其中VH和 VL結(jié)構(gòu)域在單條多肽鏈上表達(dá)，但使用太短而不允許相同鏈上的2個(gè)結(jié)構(gòu)域之間的配對 的接頭，從而迫使結(jié)構(gòu)域與另一條鏈的互補(bǔ)結(jié)構(gòu)域配對且產(chǎn)生2個(gè)抗原結(jié)合部位(參見例 如，Holliger, P.，等人(1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90 :6444-6448 ；Poljak, R. J.，等 人(1994) Mructure2 :1121-1123)。再進(jìn)一步地，抗體或其抗原結(jié)合部分可以是更大免疫 粘附分子的部分，所述更大免疫粘附分子由抗體或抗體部分與一種或多種其他蛋白質(zhì)或肽 的共價(jià)或非共價(jià)結(jié)合形成。此種免疫粘附分子的例子包括使用鏈霉抗生物素蛋白核心區(qū)以 制備四聚 scFv 分子(Kipriyanov，S. M.，等人(1995) Human Antibodies and Hybridomas6 93-101)，以及使用半胱氨酸殘基、標(biāo)記肽和C末端聚組氨酸標(biāo)記以制備二價(jià)且生物素化的 scFv 分子(Kipriyanov, S. Μ.，等人(1994)Mol. Immunol. 31 :1047-1058)。抗體部分例如 Fab和F(ab' )2片段可以使用常規(guī)技術(shù)由全抗體制備，例如分別對全抗體的木瓜蛋白酶或 胃蛋白酶消化。此外，抗體、抗體部分和免疫粘附分子可以使用標(biāo)準(zhǔn)重組DNA技術(shù)獲得，如 本文描述的。優(yōu)選的抗原結(jié)合部分是完整結(jié)構(gòu)域或完整結(jié)構(gòu)域?qū)Α?br> 術(shù)語“回復(fù)突變”指其中人抗體的一些或全部體細(xì)胞突變的氨基酸由來自同源種 系抗體序列的相應(yīng)種系殘基替換的過程。本發(fā)明的人抗體的重和輕鏈序列與VBASE數(shù)據(jù)庫 中的種系序列分別比對，以鑒定具有最高同源性的序列。通過使編碼此種不同氨基酸的限 定核苷酸位置突變，使本發(fā)明的人抗體中的差異恢復(fù)至種系序列。應(yīng)就在抗原結(jié)合中的直 接或間接作用研究因此鑒定為回復(fù)突變候選物的每個(gè)氨基酸的作用，并且發(fā)現(xiàn)在突變后影 響人抗體的任何所需特征的任何氨基酸不應(yīng)包括在最終人抗體中；作為例子，通過選擇性 誘變法鑒定的活性增強(qiáng)氨基酸將不實(shí)施回復(fù)突變。為了使實(shí)施回復(fù)突變的氨基酸數(shù)目降到 最低，可以保留發(fā)現(xiàn)與最接近種系序列不同但與第二個(gè)種系序列中的相應(yīng)氨基酸相同的那 些氨基酸位置，前提是在所討論的氨基酸兩側(cè)上，第二個(gè)種系序列與本發(fā)明的人抗體序列 對于至少10、優(yōu)選12個(gè)氨基酸相同且共線?；貜?fù)突變可以在抗體最佳化的任何階段時(shí)發(fā) 生；優(yōu)選地，回復(fù)突變在選擇性誘變法前或后直接發(fā)生。更優(yōu)選地，回復(fù)突變在選擇性誘變 法前直接發(fā)生。
如本文使用的，短語“人白細(xì)胞介素12”(本文縮寫為hIL-12或IL-12)包括主 要由巨噬細(xì)胞和樹突細(xì)胞分泌的人細(xì)胞因子。該術(shù)語包括異二聚蛋白質(zhì)，其包含由二硫 鍵連接在一起的35kD亞單位和40kD亞單位(p40)。異二聚蛋白質(zhì)被稱為“p70亞單位”。人 IL-12 的結(jié)構(gòu)在例如 Kobayashi，等人(1989) J.Exp Med. 170 :827-845 ；Seder, 等人(1993) Proc. Natl. Acad. Sci. 90 :10188-10192 ；Ling,等人(1995) J. Exp Med. 154 116-127 ；Podlaski，等人(199 Arch. Biochem. Biophys. 294 :230-237 中進(jìn)一步描述。術(shù)語 人IL-12預(yù)期包括可以通過標(biāo)準(zhǔn)重組表達(dá)法制備的重組人IL-12(rh IL-12)。
術(shù)語“Kabat編號”、“Kabat定義”和“Kabat標(biāo)記”在本文中可互換使用。本領(lǐng)域公 認(rèn)的這些術(shù)語指編號在抗體或其抗原結(jié)合部分的重和輕鏈可變區(qū)中比其他氨基酸殘基更 可變(即高變)的氨基酸殘基的系統(tǒng)(Kabat等人(1971) Ann. NY Acad, Sci. 190 :382-391, 禾口Kabat, Ε· A.,等人(1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest,第 5版， U. S. Department of Health and Human Services，NIH
發(fā)明者J·M·瓦爾德斯, S·K·保羅森 申請人:雅培制藥有限公司