專利名稱:紫參總皂苷及其醫(yī)藥用途和制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及從紫參中分離的具有醫(yī)藥用途的提取物,特別是涉及從紫參中分離的紫參總皂苷及其制備工藝、醫(yī)藥用途和分析方法。
背景技術(shù):
人參(Panax ginseng C.A.Meyer)為五加科植物人參的根部,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,人參有“補(bǔ)五臟、安精神、定魂魄、止驚悸、除邪氣、明目開(kāi)心益智,久服輕身延年”的功效,享有“中藥之王”的美譽(yù),居?xùn)|北三寶之冠。人參對(duì)多種疾病具有良好的預(yù)防保健和治療效果,特別是在抗疲勞、抗衰老、預(yù)防癌癥和心血管疾病方面更具有獨(dú)特的作用。人參保健品也由此產(chǎn)生。目前市場(chǎng)上的人參保健品大都是全參制品,而事實(shí)上,人參中各成分的生理功能是有較大差別的。人參的主要活性成分是人參皂苷(ginsenoside),目前已分離并鑒定的人參皂苷達(dá)60余種,各種人參皂苷都有其獨(dú)特的生理活性。大量研究結(jié)果表明人參皂苷具有抗疲勞、延緩衰老、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高機(jī)體免疫力、改善心腦血管供血不足、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)等作用。因此可以預(yù)見(jiàn),人參皂苷各單體的系列營(yíng)養(yǎng)保健品,會(huì)因其功效顯著專一而占據(jù)21世紀(jì)的保健品市場(chǎng)。
同時(shí)值得關(guān)注的是人參在體內(nèi)到底如何發(fā)揮最佳功效?人們服用人參及人參制劑后,人參皂苷類在體內(nèi)完成分解、吸收、分布等代謝全過(guò)程而發(fā)揮功效。人體腸內(nèi)微生物菌群構(gòu)成因人有很大的個(gè)體差異。其中,分解人參皂苷的微生物存在與否及數(shù)量多少與不同體質(zhì)、種族、地域、環(huán)境、生活習(xí)性也密切相關(guān)。由此推斷,服用人參及其制劑后產(chǎn)生的效能差異的關(guān)鍵是不同人體腸內(nèi)微生物分解人參皂苷能力不同而導(dǎo)致的吸收差異,所以人參皂苷的吸收有個(gè)體差異,因此在臨床效果也不同。前期研究中,驚奇的發(fā)現(xiàn)人參皂苷幾乎不被人體所吸收(Rg1 1.9%、Rb1 0.1%、Rb2 3.7%),口服的人參皂苷不被胃液及肝臟酶分解。人參皂苷有30多種,以原人參三醇為母體的糖苷被腸道微生物分解為其代謝產(chǎn)物((原人參萜三醇-FGM4),以原人參二醇為母體的糖苷被腸道微生物分解為其代謝產(chǎn)物(原人參萜二醇-FGM1)。所以,人參在體內(nèi)發(fā)揮效能不是人參皂苷而是被腸內(nèi)微生物分解的代謝物。通過(guò)生物轉(zhuǎn)化技術(shù)開(kāi)發(fā)高附加值人參產(chǎn)品取代目前市場(chǎng)上的全參制品已刻不容緩。
紫參是一種采用發(fā)酵的方法,在體外制備可供人體百分百吸收利用的發(fā)酵人參-人參皂苷代謝物FGM1和FGM4,其產(chǎn)品安全、療效確定,無(wú)任何毒、副作用。而且發(fā)酵人參與腸內(nèi)微生物分解能力無(wú)關(guān)的,用微生物發(fā)酵而得到的它主要含有人參皂苷分解物原人參萜二醇及原人參萜三醇。直接服用人參皂苷的代謝物避免人參效能的個(gè)體差異,克服了這種由人體腸內(nèi)分解人參皂苷微生物引起吸收差異導(dǎo)致的人參服用后的效能個(gè)體差異,增加了人參的效能。因?yàn)樽蠀⑹抢梦覀內(nèi)梭w有益腸內(nèi)微生物分解的代謝產(chǎn)物,沒(méi)有副作用、安全可靠。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)發(fā)酵處理的紫參中的總皂苷與人參比較,其化學(xué)組成已經(jīng)發(fā)生了顯著的化學(xué)變化,因此,通過(guò)本發(fā)明制備的紫參總皂苷為新的中藥提取物,其化學(xué)組成已經(jīng)過(guò)LC-MS分析。并且發(fā)現(xiàn)其具有顯著的抗疲勞、延緩衰老、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高機(jī)體免疫力、改善心腦血管供血不足、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)等生物活性,有望應(yīng)用于治療和預(yù)防抗腫瘤、抗疲勞、增強(qiáng)免疫等功能的食品、功能食品和藥品。
發(fā)明內(nèi)容
1、本發(fā)明的目的本發(fā)明提供一種提取物,該提取物含有20S-原人參二醇,20S-原人參三醇,20S-人參皂苷Rh2苷元,20S-人參皂苷Rh1苷元,化合物K苷元和20S-人參皂苷Rh2,20S-人參皂苷Rh1,人參皂苷Rg1,20S-人參皂苷Rg3,化合物K等(詳見(jiàn)下表),其突出特征為含有西洋參皂苷L14(結(jié)構(gòu)見(jiàn)下表)。其中的20S-原人參二醇型皂苷和20S-原人參三醇型皂苷之和含量為60%以上,20S-原人參二醇和20S-原人參三醇之和含量為2%以上。本發(fā)明的提取物其中的各組分的重量含量見(jiàn)下表
本發(fā)明提取物的突出特點(diǎn)在于,,其突出特征為含有西洋參皂苷L14,并且提取物中的20S-原人參二醇、20S-原人參三醇含量較人參提取物高20倍以上,20位的構(gòu)型均為天然20S構(gòu)型(如下所示)。
其中R1代表氫,葡萄糖,或者巖藻雙糖 R2代表氫,葡萄糖,或者2-鼠李糖基葡萄糖 R3代表氫,葡萄糖,6-葡萄糖基葡萄糖,6-呋喃型阿拉伯糖基葡萄糖,6-吡喃型阿拉伯糖基葡萄糖,6-吡喃型木糖基葡萄糖,木糖 其中20S-原人參二醇、20S-原人參三醇、20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、化合物K、20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、人參皂苷Rg1、20S-人參皂苷Rg3、化合物K,均為已知化合物。
化合物K代表20S-原人參二醇-20-O-葡萄糖苷 本發(fā)明還包括本發(fā)明的提取物的制備方法,其特征在于,步驟如下紫參用水或含水有機(jī)溶劑提取,提取物應(yīng)用大孔樹(shù)脂、離子交換樹(shù)脂、聚酰胺、葡聚糖凝膠、反相硅膠等色譜手段精制分離,先用水或低濃度有機(jī)溶劑洗脫除去雜質(zhì),再用高濃度有機(jī)溶劑洗脫得到產(chǎn)物,采用反復(fù)以上色譜分離精制純化,或重結(jié)晶純化,其中,提取用有機(jī)溶劑選自乙醇、甲醇、丙酮,大孔樹(shù)脂、離子交換樹(shù)脂包括苯乙烯型、丙烯酸型高分子樹(shù)脂。
優(yōu)選的,本發(fā)明的制備方法,步驟如下紫參用水回流提取。減壓回收,得糖漿狀浸膏。用適量水混懸、溶解,經(jīng)大孔樹(shù)脂PD101柱色譜依次以水、10%乙醇、70%乙醇、95%乙醇洗脫,分別得到水洗脫部分、10%乙醇洗脫部分、70%乙醇洗脫部分、95%乙醇洗脫部分。
其中,70%乙醇洗脫部分富含西洋參皂苷L14、20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、人參皂苷Rg1、20S-人參皂苷Rg3、化合物K、20S-人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Re、人參皂苷Rf、人參皂苷F1、人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra3、20S-人參皂苷Ra3等三萜皂苷類成分,為本發(fā)明的優(yōu)選組分,即本發(fā)明優(yōu)選的提取物。
水洗脫部分、10%乙醇洗脫部分、95%乙醇洗脫部分也屬于本發(fā)明的內(nèi)容。各組分的合并物也屬于本發(fā)明的內(nèi)容。
另外,本發(fā)明還提供利用含有本發(fā)明化合物的紫參粗提取物酸水解制備本發(fā)明紫參提取物的方法,其中所述酸選自無(wú)機(jī)酸和有機(jī)酸如硫酸、鹽酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸。
本發(fā)明還包括本發(fā)明的化合物在制備抗疲勞、延緩衰老、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高機(jī)體免疫力、改善心腦血管供血不足、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、去膩醒酒、護(hù)膚美容以及活血脈、抗衰老、降血脂、降膽固醇、降甘油三脂、改善血液粘稠度和微循環(huán)、擴(kuò)張血管、清除自由基、增強(qiáng)人體免疫力、抗腫瘤、抗癌等食品、功能食品和藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明還包括上述紫參總?cè)圃碥仗崛∥锏臋z測(cè)方法如HPLC分析,以質(zhì)譜(MS)檢測(cè)、紫外(UV)檢測(cè)、圓二色譜(CD)檢測(cè)、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等為檢測(cè)器。
對(duì)照品溶液的配置20S-原人參二醇、20S-原人參三醇、20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、人參皂苷Rg1、20S-人參皂苷Rg3、化合物K等三萜類化合物化學(xué)對(duì)照品精密稱取適量,用甲醇配制成適量的對(duì)照品溶液。
樣品溶液的配置精密稱取紫參、紫參提取物或者紫參總?cè)圃碥諛悠犯鬟m量,用100ml氯仿(或甲醇、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、石油醚、環(huán)己烷等有機(jī)溶劑及其不同濃度的水溶液)提取,回收提取液,甲醇(或氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、石油醚、環(huán)己烷等有機(jī)溶劑及其不同濃度的水溶液)溶解,經(jīng)裝填ODS的SPE小色譜柱預(yù)處理,95%乙腈(或甲醇、乙酸乙酯、丙酮、氯仿、石油醚、環(huán)己烷等有機(jī)溶劑及其不同濃度的水溶液)洗滌,合并洗脫液,甲醇定容,過(guò)濾,即得。
測(cè)試方法進(jìn)行HPLC分析,以質(zhì)譜(MS)檢測(cè)、紫外(UV)檢測(cè)、圓二色譜(CD)檢測(cè)、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等為檢測(cè)器。以樣品中各化合物的色譜峰面積,與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照樣品相應(yīng)色譜峰面積,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線法(或外標(biāo)1點(diǎn)法、外標(biāo)2點(diǎn)法等),進(jìn)行定量分析,計(jì)算,即得。
本發(fā)明還包括含有本發(fā)明的提取物的藥物組合物。
所述組合物可以是本發(fā)明紫參提取物和藥物可接受的載體混合制備成的藥物制劑。
這些制劑包括通用的藥物劑型如片劑,膠囊,顆粒,口服液,注射劑等。
本發(fā)明的藥物組合物在使用時(shí)根據(jù)病人的情況確定用法用量,可每日服三次,每次1-20劑,如1-20袋或?;蚱縿?mg-1000mg。
試驗(yàn)表明,本發(fā)明提取物具有抗腫瘤活性和提高機(jī)體免疫力活性,提示其可用于抗疲勞、延緩衰老、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高機(jī)體免疫力、改善心腦血管供血不足、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、去膩醒酒、護(hù)膚美容以及活血脈、抗衰老、降血脂、降膽固醇、降甘油三脂、改善血液粘稠度和微循環(huán)、擴(kuò)張血管、清除自由基、增強(qiáng)人體免疫力、抗腫瘤、抗癌等藥物、功能食品和食品的應(yīng)用。
以下實(shí)驗(yàn)用于說(shuō)明本發(fā)明紫參總?cè)圃碥仗崛∥锉痊F(xiàn)有類似物更加優(yōu)越。
毒性試驗(yàn) 藥品本發(fā)明實(shí)施例2方法制備的紫參總?cè)圃碥?70%乙醇洗脫部位), 對(duì)照品人參總?cè)圃碥? 本發(fā)明紫參總?cè)圃碥盏男∈罂诜淮谓o與最大給藥濃度10g/Kg體重,均未見(jiàn)毒副反應(yīng),血液生化指標(biāo)均正常, 對(duì)照組本發(fā)明紫參總?cè)圃碥盏男∈罂诜淮谓o與最大給藥濃度10g/Kg體重,解剖尸體見(jiàn)肝臟紅腫,肝功能異常。
因此說(shuō)明本發(fā)明藥物毒性小于對(duì)照組。
藥效試驗(yàn) 藥品本發(fā)明實(shí)施例2方法制備的紫參總?cè)圃碥?70%乙醇洗脫部位,ZSZ表示) 對(duì)照品人參總?cè)圃碥? 抗疲勞試驗(yàn)延長(zhǎng)小鼠負(fù)重(體重5%)游泳時(shí)間試驗(yàn)結(jié)果表明紫參總?cè)圃碥赵?0mg/Kg體重即可與人參總皂苷的抗疲勞活性相當(dāng),說(shuō)明其活性更強(qiáng)。
與模型組比較*p<0.05,**p<0.01 耐缺氧試驗(yàn)小鼠常壓密閉耐缺氧時(shí)間結(jié)果表明紫參總?cè)圃碥赵?0mg/Kg體重即可與人參總皂苷的耐缺氧活性相當(dāng),說(shuō)明其活性更強(qiáng)。
與模型組比較*p<0.05,**p<0.01 抗腫瘤試驗(yàn)對(duì)Hela荷瘤小鼠瘤體生長(zhǎng)的影響結(jié)果表明紫參總?cè)圃碥赵?0mg/Kg體重即可與人參總皂苷的抗腫瘤活性相當(dāng),說(shuō)明其活性更強(qiáng)。
與模型組比較*p<0.05,**p<0.01
具體實(shí)施例方式 1、從紫參中提取分離制備以上三萜苷元及皂苷類化合物和紫參總?cè)圃碥盏姆椒?。其關(guān)鍵技術(shù)為水或含水有機(jī)溶劑提取,提取物應(yīng)用大孔樹(shù)脂、離子交換樹(shù)脂、聚酰胺、葡聚糖凝膠、反相硅膠等色譜手段精制分離,先用水或低濃度有機(jī)溶劑洗脫除去雜質(zhì),再用高濃度有機(jī)溶劑洗脫得到產(chǎn)物,采用反復(fù)以上色譜分離精制純化,或重結(jié)晶純化。其中,提取用有機(jī)溶劑包括乙醇、甲醇、丙酮等。大孔樹(shù)脂、離子交換樹(shù)脂包括各種苯乙烯型、丙烯酸型等高分子樹(shù)脂。
2、利用含三萜苷元及皂苷類化合物的紫參提取物,發(fā)明了酸水解制備紫參水解皂苷或三萜苷元的方法。所用酸包括各種濃度的礦酸和有機(jī)酸,礦酸如硫酸、鹽酸等,有機(jī)酸如甲酸、乙酸、三氟乙酸等。
3、發(fā)現(xiàn)紫參總?cè)圃碥盏目蛊?、延緩衰老、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高機(jī)體免疫力、改善心腦血管供血不足、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、去膩醒酒、護(hù)膚美容以及活血脈、抗衰老、降血脂、降膽固醇、降甘油三脂、改善血液粘稠度和微循環(huán)、擴(kuò)張血管、清除自由基、增強(qiáng)人體免疫力、抗腫瘤、抗癌等醫(yī)藥用途。
4、建立了分析方法HPLC分析,以質(zhì)譜(MS)檢測(cè)、紫外(UV)檢測(cè)、圓二色譜(CD)檢測(cè)、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等為檢測(cè)器。
對(duì)照品溶液的配置對(duì)照品溶液的配置20S-原人參二醇、20S-原人參三醇、20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、人參皂苷Rg1、20S-人參皂苷Rg3、化合物K等三萜類化合物化學(xué)對(duì)照品精密稱取適量,用甲醇配制成適量的對(duì)照品溶液。
樣品溶液的配置精密稱取紫參總?cè)茦悠犯鬟m量,用100ml氯仿(或甲醇、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、石油醚、環(huán)己烷等有機(jī)溶劑及其不同濃度的水溶液)提取,回收提取液,甲醇 (或氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、石油醚、環(huán)己烷等有機(jī)溶劑及其不同濃度的水溶液)溶解,經(jīng)裝填ODS的SPE小色譜柱預(yù)處理,95%乙腈(或甲醇、乙酸乙酯、丙酮、氯仿、石油醚、環(huán)己烷等有機(jī)溶劑及其不同濃度的水溶液)洗滌,合并洗脫液,甲醇定容,過(guò)濾,即得。
測(cè)試方法進(jìn)行HPLC分析,以質(zhì)譜(MS)檢測(cè)、紫外(UV)檢測(cè)、圓二色譜(CD)檢測(cè)、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等為檢測(cè)器。以樣品中各化合物的色譜峰面積,與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照樣品相應(yīng)色譜峰面積,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線法(或外標(biāo)1點(diǎn)法、外標(biāo)2點(diǎn)法等),進(jìn)行定量分析,計(jì)算,即得。
實(shí)施例1紫參總?cè)圃碥罩腥圃碥疹惢衔锏奶崛≈苽? 紫參6kg,用95%乙醇60L回流提取兩次。減壓回收乙醇得糖漿狀浸膏。用適量水混懸,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。
石油醚萃取層(180g)經(jīng)硅膠柱色譜,以石油醚/丙酮梯度洗脫,再經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜、制備薄層、Sephadex LH-20柱色譜等分離純化手段得到化合物20S-原人參二醇、20S-原人參三醇、20S-人參皂苷Rh2。
氯仿萃取層(30g)經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜,以石油醚/丙酮梯度洗脫,經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜、制備薄層、Sephadex LH-20柱色譜等分離分離純化手段得到化合物20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、人參皂苷Rg1、20S-人參皂苷Rg3、化合物K。
乙酸乙酯萃取層(85g)經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜,以石油醚/丙酮梯度洗脫,制備薄層,SephadexLH-20等分離得到化合物20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、人參皂苷Rg1、20S-人參皂苷Rg3、化合物K。
正丁醇萃取層(640g)經(jīng)大孔樹(shù)脂PD101柱色譜依次以水、30%乙醇、70%乙醇、95%乙醇洗脫,分別得到水層、30%乙醇層、70%乙醇層、95%乙醇層(見(jiàn)Fig.5)。取70%乙醇洗脫部分100g,經(jīng)硅膠柱色譜,以氯仿/甲醇梯度洗脫,再經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜、反復(fù)制備HPLC等分離純化手段,分離得到化合物20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、人參皂苷Rg1、20S-人參皂苷Rg3、化合物K、20S-人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Re、人參皂苷Rf、人參皂苷F1、人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra3、20S-人參皂苷Ra3。
實(shí)施例2紫參總?cè)圃碥盏奶崛≈苽? 紫參6kg,用水60L回流提取兩次。減壓回收,得糖漿狀浸膏。用適量水混懸、溶解,經(jīng)大孔樹(shù)脂PD101柱色譜依次以水、30%乙醇、70%乙醇、95%乙醇洗脫,分別得到水洗脫部分、10%乙醇洗脫部分、70%乙醇洗脫部分、95%乙醇洗脫部分。其中,70%乙醇洗脫部分富含20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、人參皂苷Rg1、20S-人參皂苷Rg3、化合物K、20S-人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Re、人參皂苷Rf、人參皂苷F1、人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra3、20S-人參皂苷Ra3等三萜皂苷類成分,總皂苷含量達(dá)到80%以上。95%乙醇洗脫部分和10%乙醇洗脫部分也含有三萜皂苷類成分,其含量少低,但其組成和比例與70%乙醇洗脫部分不同,因此,以上提取物方法均可用于紫參總?cè)圃碥盏闹苽洹?br>
實(shí)施例3紫參總?cè)圃碥盏腍PLC-TOF-MS分析 對(duì)照品溶液的配置三萜類化合物化學(xué)對(duì)照品精密稱取適量,用甲醇配制成適量的對(duì)照品溶液。
樣品溶液的配置精密稱取紫參總?cè)茦悠犯鬟m量,用100ml氯仿(或甲醇、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、石油醚、環(huán)己烷等有機(jī)溶劑及其不同濃度的水溶液)提取,回收提取液,甲醇(或氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、石油醚、環(huán)己烷等有機(jī)溶劑及其不同濃度的水溶液)溶解,經(jīng)裝填ODS的SPE小色譜柱預(yù)處理,95%乙腈(或甲醇、乙酸乙酯、丙酮、氯仿、石油醚、環(huán)己烷等有機(jī)溶劑及其不同濃度的水溶液)洗滌,合并洗脫液,甲醇定容,過(guò)濾,即得。
測(cè)試方法進(jìn)行HPLC分析,以質(zhì)譜(MS)檢測(cè)、紫外(UV)檢測(cè)、圓二色譜(CD)檢測(cè)、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等為檢測(cè)器。以樣品中各化合物的色譜峰面積,與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照樣品相應(yīng)色譜峰面積,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線法(或外標(biāo)1點(diǎn)法、外標(biāo)2點(diǎn)法等),進(jìn)行定量分析,計(jì)算,即得。
利用20S-原人參二醇、20S-原人參三醇、20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、人參皂苷Rg1、20S-人參皂苷Rg3、化合物K、20S-人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Re、人參皂苷Rf、人參皂苷F1、人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra3、20S-人參皂苷Ra3的精確分子量,進(jìn)行分析,定性、定量地確定紫參總皂苷中的化學(xué)成分及其含量。
實(shí)施例4酸水解 分別取1mg的樣品,用1ml 2N三氟乙酸(TFA)溶解于安瓿瓶中,封瓶,110℃反應(yīng)2h。CHCl3萃取三次,水層用N2吹干,加甲醇,再用N2吹干,反復(fù)此過(guò)程直至產(chǎn)物中不存在TFA,即得。
權(quán)利要求
1.一種紫參總?cè)圃碥疹愄崛∥?,其特征在于,所述提取物含?0S-原人參二醇、20S-原人參三醇、20S-人參皂苷Rh2苷元、20S-人參皂苷Rh1苷元、化合物K苷元和20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、人參皂苷Rg1、20S-人參皂苷Rg3、化合物K,其突出特征為含有西洋參皂苷L14(結(jié)構(gòu)見(jiàn)下表)。其中的20S-原人參二醇型皂苷和20S-原人參三醇型皂苷之和含量為60%以上,20S-原人參二醇和20S-原人參三醇之和含量為2%以上。
2.權(quán)利要求1的紫參總?cè)圃碥疹愄崛∥锏闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟?,步驟如下紫參用水或含水有機(jī)溶劑提取,提取物過(guò)大孔樹(shù)脂、離子交換樹(shù)脂、聚酰胺、葡聚糖凝膠或反相硅膠色譜柱,先用水或低濃度有機(jī)溶劑洗脫除去雜質(zhì),再用高濃度有機(jī)溶劑洗脫得到產(chǎn)物,用色譜分離精制.
3.按權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,其中,提取所用的有機(jī)溶劑選自乙醇、甲醇或丙酮,大孔樹(shù)脂、離子交換樹(shù)脂包括苯乙烯型、丙烯酸型高分子樹(shù)脂。
4.按權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟如下紫參6kg,用水60L回流提取兩次。減壓回收,得糖漿狀浸膏。用適量水混懸、溶解,經(jīng)大孔樹(shù)脂PD101柱色譜依次以水、30%乙醇、70%乙醇、95%乙醇洗脫,分別得到水洗脫部分、10%乙醇洗脫部分、70%乙醇洗脫部分、95%乙醇洗脫部分。其中,70%乙醇洗脫部分富含20S-人參皂苷Rh2、20S-人參皂苷Rh1、人參皂苷Rg1、20S-人參皂苷Rg3、化合物K、20S-人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Re、人參皂苷Rf、人參皂苷F1、人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra3、20S-人參皂苷Ra3等三萜皂苷類成分。
5.權(quán)利要求1的紫參總?cè)圃碥疹愄崛∥锏闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟冢襟E如下利用含有權(quán)利要求1中紫參總?cè)圃碥疹愄崛∥锏乃崴庵苽?,所述酸選自硫酸、鹽酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸。
6.權(quán)利要求1的紫參總?cè)圃碥疹愄崛∥镌谥苽淇蛊凇⒀泳徦ダ?、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高機(jī)體免疫力、改善心腦血管供血不足、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、去膩醒酒、護(hù)膚美容以及活血脈、抗衰老、降血脂、降膽固醇、降甘油三脂、改善血液粘稠度和微循環(huán)、擴(kuò)張血管、清除自由基、增強(qiáng)人體免疫力、抗腫瘤、抗癌藥物、功能食品或食品中的應(yīng)用。
7.含有權(quán)利要求1的紫參總?cè)圃碥疹愄崛∥锏乃幬锝M合物。
8.按權(quán)利要求7的藥物組合物,其特征在于,含有藥物可接受的載體。
9.按權(quán)利要求7的藥物組合物,其特征在于,包括任何可藥用的劑型,如片劑,膠囊,顆粒,口服液,注射劑。
10.按權(quán)利要求7的藥物組合物,其特征在于,在使用時(shí)根據(jù)病人的情況,確定用法用量,可每日服三次,每次1-20劑,如1-20袋或?;蚱縿?mg-1000mg。
全文摘要
本發(fā)明涉及紫參總皂苷及其醫(yī)藥用途和制備方法,紫參總皂苷特征為富含20S-原人參二醇型和20S-原人參三醇型人參皂苷類化合物。
文檔編號(hào)A61K36/258GK101810659SQ20101017753
公開(kāi)日2010年8月25日 申請(qǐng)日期2010年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月20日
發(fā)明者李國(guó)玉, 王金輝, 盧立娜, 魏秀巖, 董焱 申請(qǐng)人:吉林省撫松制藥股份有限公司