專利名稱：2-巰基環(huán)戊烷甲酸化合物、其制備方法和含有它們的藥用組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的2-巰基環(huán)戊烷甲酸化合物、其制備方法和含有它們的藥用組合 物。
背景技術(shù)：
本發(fā)明化合物為TAFIa抑制劑(活化的凝血酶可激活的纖溶抑制劑)。TAFI (也稱為血漿羧肽酶原B、羧肽酶原R或羧肽酶原U)為60kDa的血漿糖蛋 白，由肝臟產(chǎn)生，它以酶原的形式循環(huán)。在血液凝結(jié)和纖溶過程中，凝血酶和纖溶酶能夠裂 解Arg92-Ala93鍵的TAFI的前片段，將其轉(zhuǎn)化為活性酶(TAPIa)，該酶于37°C的半衰期為 8-15分鐘。血栓調(diào)節(jié)蛋白可以促進(jìn)凝血酶導(dǎo)致的前片段的裂解，該蛋白為存在于血漿中 和血管內(nèi)皮細(xì)胞表面上的輔助因子(Bouma BN和Meijers JC，凝血酶可激活的纖溶抑制 齊[J (Thrombin-activatab1e fibrinolysis inhibitor),2003,Journal ofThrombosis and Haemostasis,l : 1566-1574)。TAFIa通過裂解纖維蛋白纖維的C-末端賴氨酸殘基而負(fù)向調(diào) 節(jié)纖溶，所述纖維蛋白纖維由于痕量血漿導(dǎo)致的纖維蛋白部分降解而出現(xiàn)。在所述部分降 解的纖維蛋白上的這些C-末端賴氨酸殘基作為循環(huán)中的血漿纖溶酶原的配體和組織纖溶 酶原激活劑(tPA)的配體，該激活劑是在血栓性缺血的情況下由內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的。因此，它 們使得通過tPA將纖溶酶原轉(zhuǎn)化為血漿酶局部化成為可能，同時(shí)不會干擾循環(huán)血漿酶抑制 劑a2-抗血漿酶或干擾循環(huán)組織纖溶酶原激活劑抑制劑(PAl-I)。因此TAFIa導(dǎo)致的C-末 端賴氨酸位點(diǎn)的裂解降低了血漿酶產(chǎn)生的速度。然后又抑制了內(nèi)源性纖溶并減少動脈纖維 蛋白的溶解和靜脈血栓形成，同時(shí)在血栓形成后急性缺血期的患者中進(jìn)行溶栓治療。因此， TAFIa抑制劑能夠有效地提高內(nèi)源性和治療性纖溶可能性，作為抗血栓形成和纖溶酶原藥 物而又不具有重大的出血風(fēng)險(xiǎn)，因?yàn)樗鼈兗炔粫蓴_血小板激活，也不會在止血過程中造 成凝結(jié)。因此，抑制TAFIa的特性使得本發(fā)明化合物能夠治療和預(yù)防風(fēng)險(xiǎn)患者中的血栓形 成事件。它們在治療、預(yù)防和二級預(yù)防血管并發(fā)癥中有重要價(jià)值，更特別是用于心血管、肺 和腦血管并發(fā)癥，上述并發(fā)癥與下列疾病有關(guān)動脈血栓形成疾病、動脈粥樣硬化、糖尿病、 高脂血癥、高血壓、慢性靜脈疾病、與肥胖有關(guān)的代謝綜合征和癌癥。本發(fā)明化合物尤其可 以用于治療、預(yù)防和二級預(yù)防心肌梗塞、心絞痛、腦血管意外、主動脈瘤、下肢動脈炎、靜脈 血栓形成和肺動脈栓塞。血管風(fēng)險(xiǎn)因素和血管疾病(例如高血壓、肥胖、糖尿病、心臟病、腦血管疾病和高 脂血癥以及動脈粥樣硬化)是導(dǎo)致癡呆(如阿爾茨海默病和血管性癡呆)的部分原因(Qiu C.，De Ronchi D.和 Fratiglioni L.，癡呆的流行病學(xué)最新進(jìn)展(The epidemiology of the dementias :an update), 2007, Current Opinion in Psychiatry，20 :380_385)。因此， 本發(fā)明化合物也可以用于治療和/或預(yù)防癡呆，例如阿爾茨海默病和血管性癡呆。TAFIa能夠降低內(nèi)源性纖維蛋白成分的效能。因此，本發(fā)明化合物作為TAFIa抑制劑可以用作注射用纖維蛋白溶解藥物的急性治療的輔助成分，所述藥物例如重組tPA(例 如，阿替普酶、替奈普酶、瑞替普酶)、重組uPA或鏈激酶，它們均可以用于緊急狀態(tài)(例如， 心肌梗塞、腦血管意外)。本發(fā)明化合物能夠增強(qiáng)那些注射用纖維蛋白溶解藥物的效能，因此，可以使用它 們而同時(shí)僅具有少量出血和神經(jīng)毒性的風(fēng)險(xiǎn)(可以降低它們的劑量，因此，可以減少其副 作用)。

發(fā)明內(nèi)容
更具體地講，本發(fā)明涉及式(I)化合物、其光學(xué)異構(gòu)體以及其與可藥用酸形成的 加成鹽其中R1代表氫原子或式COR4基團(tuán)，其中R4代表線性或支鏈C「C6烷基或芳基，或R1代表式㈧基團(tuán) R2代表式NR5R6基團(tuán)，其中R5和R6為相同或不同的，每一個均代表氫原子或直鏈或 支鏈C1-C6烷基，或者R2代表含氮雜環(huán)基團(tuán)、芳基或雜芳基，R3代表氫原子或直鏈或支鏈C1-C6烷基，m代表1-6的整數(shù)，包含1和6，η 代表 0、1 或 2。 芳基可以理解為任選被一或多個相同或不同的選自下列的基團(tuán)取代的苯基鹵 素、直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基，氨基(任選被1或2個直鏈或支鏈 (C1-C6)烷基取代)和氨基烷基，所述氨基任選被1或2個直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代。雜芳基可以理解為含有1、2或3個選自氧、氮和硫的雜原子的5-12元單環(huán)或雙 環(huán)芳族基團(tuán)，可以理解，雜芳基可以任選被一或多個相同或不同的選自下列的基團(tuán)取代商 素、直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、氨基(任選被1或2個直鏈或支鏈 (C1-C6)烷基取代)和氨基烷基，所述氨基任選被1或2個直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代。在雜芳基中，可以提及的(不加任何限定)基團(tuán)包括下列基團(tuán)噻吩基、吡啶基、呋 喃基、吡咯基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基。含氮雜環(huán)基團(tuán)可以理解為4-7元飽和的或不飽和的單環(huán)基團(tuán)，該環(huán)含有一或多個 氮原子并任選含有一或多個選自氧和硫的雜原子。
在含氮雜環(huán)基團(tuán)中，可以提及的(不加任何限定)基團(tuán)包括下列氮雜環(huán)丁基、吡 咯烷基、哌啶基和哌嗪基。光學(xué)異構(gòu)體可以理解為非對映異構(gòu)體和對映異構(gòu)體。式(I)化合物含有至少兩個不對稱中心(在該環(huán)的1和2位)，因此，可以存在單 一對映異構(gòu)體形式、單一非對映異構(gòu)體形式或非對映異構(gòu)體混合物形式。在可藥用酸中，可以提及的(不加任何限定)包括下列酸鹽酸、氫溴酸、硫酸、 磷酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、酒石酸、馬來酸、檸檬 酸、抗壞血酸、草酸、甲磺酸、苯磺酸、樟腦酸。
另-另-另-另-另-另-
-方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中R1代表氫原子。 -方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中R2代表氨基。 -方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中R2代表吡啶基。 -方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中R3代表氫原子。 -方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物。其中m代表3。 -方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中η代表1。 -方面，本發(fā)明涉及式(Ia)化合物，它是式(I)化合物的-
-種特別形式
NR5R6
CO2R3
(Ia)其中R1^R3, R5和R6如式(I)所定義。另一方面，本發(fā)明涉及下列式⑴化合物(1R，2S)-1-(3-氨基丙基)_2_巰基環(huán)戊烷甲酸以及其光學(xué)異構(gòu)體和其與可藥用 酸的加成鹽，(1R，2S)_2-乙?；虼?1-(3-氨基丙基)_環(huán)戊烷甲酸以及其光學(xué)異構(gòu)體和其與 可藥用酸的加成鹽。本發(fā)明還涉及式(I)化合物的制備方法，采用式(II)化合物作為原料
(II)
其中η代表0、1或2，G代表羧基官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)， 將其與式(III)化合物反應(yīng)
X-(CH2)-R'
(III)
其中χ代表鹵素原子或三氟甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或甲磺酸酯基，
9
m代表1-6的整數(shù)，包括1和6，R' 2代表式NR' 5R' 6基團(tuán)，其中R' 5和1 ' 6可以是相同或不同的，每一個均 代表氨基官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)或直鏈或支鏈C1-C6烷基，或R' 2代表任選被氨基官能團(tuán)的保 護(hù)基團(tuán)取代的含氮雜環(huán)基團(tuán)，或R' 2代表芳基或雜芳基，獲得式(IV)化合物 其中R' 2、G、m和η如上文所定義，將其采用用于氧代官能團(tuán)的還原劑處理，獲得式(V)化合物 其中R' 2、G、m和η如上文所定義，將其與甲磺酰氯、甲苯磺酰氯、三氟甲磺酸酐或鹵化試劑反應(yīng)，獲得式(VI)化合物 其中R' 2、G、m和η如上文所定義，X代表甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或三氟甲磺 酸酯基或鹵素原子，當(dāng)需要時(shí)，將其非對映異構(gòu)體分離獲得單一非對映異構(gòu)體形式的式(I)化合物，然后，將其與式(VII)化合物反應(yīng)MS-(CO)-R' ！ (VII),其中M代表鉀、鈉或鋰，R' ！代表烷基或芳基，獲得式(VIII)化合物 其中R' ”R' 2、G、m和η如上文所定義，當(dāng)需要時(shí)，其對映異構(gòu)體可以通過手性色譜分離，從而獲得單一對映異構(gòu)體形式的式⑴化合物，如果適當(dāng)?shù)脑?，可以將其硫醇、氨基和羧基官能團(tuán)脫保護(hù)，獲得式(I)化合物，當(dāng)需要時(shí)，將其與相應(yīng)的酸反應(yīng)，獲得式(I)化合物與可藥用酸的加成鹽。本發(fā)明還涉及式(Ia)化合物的制備方法，它是式(I)化合物的特殊形式，其中m 代表3并且R2代表NR5R6，采用式(II)化合物為原料 其中η代表0、1或2，G代表羧基官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)，在不對稱催化劑(根據(jù)需要，例如催化劑Q或QD)存在下，將其與丙烯醛反應(yīng)，可 以獲得構(gòu)型為(IR)或(IS)的化合物 獲得構(gòu)型為(IR)或(IS)的式(IX)化合物 其中η和G如上文所定義，將其醛官能團(tuán)還原，獲得式(χ)化合物

其中n、G和X如上文所定義， 將其與式(XIII)化合物反應(yīng) NHR" 5R" 6 (XIII),
其中R" 5和『6各自代表氨基官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)或線性或支鏈C1-C6烷基， 獲得式(XIV)化合物
物
其中η和G如上文所定義，
將其與甲磺酰氯、甲苯磺酰氯、氟甲磺酸酐或鹵化試劑反應(yīng)，獲得式(XI)化合 其中η和G如上文所定義，X代表鹵素原子或三氟甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或甲 磺酸酯基，
將其酮官能團(tuán)在還原劑的作用下還原，獲得式(XII)化合物
其中n、G、R〃 5和1 〃 6如上文所定義，
將其與甲磺酰氯、甲苯磺酰氯、三氟甲磺酸酐或鹵化試劑反應(yīng)，獲得式(XV)化合 其中n、G、R〃 5和1 〃 6如上文所定義，X代表甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或三氟甲 磺酸酯基或鹵素原子，
然后將其與式(VII)化合物反應(yīng)
MS-(CO)-R' ！ (VII),
其中M代表鉀、鈉或鋰，R'工代表烷基或芳基，
獲得式(XVI)化合物
其中n、R' i、G、R〃 5和1 〃 6如上文所定義，
如果適當(dāng)?shù)脑挘梢詫⑵淞虼?、氨基和羧基官能團(tuán)脫保護(hù)，獲得式(Ia)化合物，
13 其中n、H RjPR6如上文所定義，當(dāng)需要時(shí)，將其與相應(yīng)的酸反應(yīng)，獲得式(Ia)化合物與可藥用酸的加成鹽。采用手性還原劑，通過式(XI)酮的不對稱還原，可以獲得光學(xué)純的式(Ia)化合 物，或者在后期階段將它們自非對映異構(gòu)體混合物分離也可以獲得光學(xué)純的式(Ia)化合 物。本發(fā)明化合物為TAFIa抑制劑。因此，它們可以用于預(yù)防或治療風(fēng)險(xiǎn)患者的血栓形成事件。它們在治療和預(yù)防血 管并發(fā)癥中有重要價(jià)值，更特別是用于心血管、肺和腦血管并發(fā)癥，上述并發(fā)癥與下列疾病 有關(guān)動脈血栓形成疾病、動脈粥樣硬化、糖尿病、高脂血癥、高血壓、慢性靜脈疾病、與肥胖 有關(guān)的代謝綜合征或癌癥。發(fā)明化合物尤其可以用于治療、預(yù)防和二級預(yù)防心肌梗塞、心絞痛、任何起因的腦 血管意外(特別是動脈血栓性、心源性或房顫導(dǎo)致的意外)、主動脈瘤或下肢動脈炎、靜脈 血栓形成(特別是在接受插管的癌癥患者中)和肺動脈栓塞。血管風(fēng)險(xiǎn)因素和血管疾病(例如高血壓、肥胖、糖尿病、心臟病、腦血管疾病和高 脂血癥以及動脈粥樣硬化)是導(dǎo)致癡呆(如阿爾茨海默病和血管性癡呆)的部分原因(Qiu C.，De Ronchi D.和 Fratiglioni L.，癡呆的流行病學(xué)最新進(jìn)展(The epidemiology of the dementias :an update), 2007, Current Opinion in Psychiatry，20 :380_385)。因此， 本發(fā)明化合物也可以用于治療和/或預(yù)防癡呆，例如阿爾茨海默病和血管性癡呆。TAFIa能夠降低內(nèi)源性纖維蛋白成分的效能。因此，本發(fā)明化合物作為TAFIa抑制 劑可以用作注射用纖維蛋白溶解藥物的急性治療的輔助成分，所述藥物例如重組tPA(例 如，阿替普酶、替奈普酶、瑞替普酶)、重組uPA或鏈激酶，它們均可以用于緊急狀態(tài)(例如， 心肌梗塞、腦血管意外)。本發(fā)明化合物能夠增強(qiáng)那些注射用纖維蛋白溶解藥物的效能，因此，可以使用它 們而同時(shí)僅具有少量出血和神經(jīng)毒性的風(fēng)險(xiǎn)(可以降低它們的劑量，因此，可以減少其副 作用)。本發(fā)明還涉及藥用組合物，該組合物含有式(I)化合物以及一或多種惰性、無毒、 可藥用的賦形劑或載體。在本發(fā)明的藥用組合物中，更特別可以述及的是那些適合于下列途徑給藥的組合 物口服、腸胃外(靜脈內(nèi)、肌肉或皮下)、經(jīng)皮或透皮、鼻、直腸、舌下或呼吸道，特別是片劑 或糖衣劑、舌下片劑、膠囊、硬明膠膠囊、栓劑、霜劑、軟膏、皮膚用凝膠劑、注射用或飲用制 劑、氣霧劑、滴眼劑和滴鼻劑。除了式(I)化合物外，本發(fā)明藥用組合物還可以含有一或多種賦形劑或載體，例如稀釋劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑、吸附劑、著色劑、甜味劑。對于賦形劑或載體的實(shí)例而言，可以述及的包括稀釋劑乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素、甘油，潤滑劑二氧化硅、滑石粉、硬脂酸及其鎂鹽和鈣鹽、聚乙二醇，粘合劑娃酸鋁、硅酸鎂、淀粉、明膠、黃芪膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和聚乙 烯吡咯烷酮，崩解劑瓊脂、藻酸及其鈉鹽、泡騰混合物。式(I)活性成分在藥用組合物中的重量百分比優(yōu)選為5% -50%。使用的劑量取決于患者的年齡和體重、給藥途徑、疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度以及所 采用的任何相關(guān)治療，劑量范圍為每天0. 5mg至lOOOmg，分為一或多次給藥。根據(jù)本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明藥用組合物除式(I)化合物外不合有任何其他活 性成分。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，除了式(I)化合物外，本發(fā)明藥用組合物還含有纖維蛋 白溶解藥物，更特別的是注射用纖維蛋白溶解藥物，例如重組tPA(例如阿替普酶)、重組 uPA或鏈激酶。在此情況下，組合物為可注射用形式。所述tPA劑量可以在0至IOOmg的范圍內(nèi)變動。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，除了式(I)化合物外，本發(fā)明藥用組合物還含有抗凝血 藥物，例如華法令、達(dá)比加群酯(dabigatran etexilate)、利伐沙班(rivaroxaban)。華法令的劑量可以在1至IOOmg的范圍內(nèi)變動。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，除了式(I)化合物外，本發(fā)明藥用組合物含有抗血小板 藥物，例如阿司匹林、氯吡格雷、普拉格雷....阿司匹林的劑量可以在10至IOOOmg的范圍內(nèi)變動。氯吡格雷的劑量可以在10至IOOOmg的范圍內(nèi)變動。
具體實(shí)施例方式下列實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了說明。實(shí)施例中所述化合物的結(jié)構(gòu)根據(jù)常規(guī)色譜技術(shù) (紅外、核磁共振、質(zhì)譜)測定?？s寫(+)-DIPCl (+)_ 二異松菔基基(diisopinocampheyl)氯硼烷((+)_ 二異松菔基 硼氯化物)DMAP 二甲基氨基吡啶DMF: 二甲基甲酰胺DMSO 二甲基亞砜eq.摩爾當(dāng)量HMPA 六甲基磷酰胺HPLC 高效液相色譜NMR:核磁共振TAFIa 活化的凝血酶可激活的纖溶抑制劑THF:四氫呋喃
tPA 組織纖溶酶原激活劑upa 尿激酶或尿激酶類纖溶酶原激活劑實(shí)施例1 :(1R，2S)-1_(3-氨基丙基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽步驟A 2-氧代_環(huán)戊烷甲酸芐基酯在配備Dean-Stark設(shè)備和冷凝器的4_升燒瓶中，將2_氧代環(huán)戊烷甲酸甲酯 (380mL ;3mol)、芐基醇(342mL ；3. 3mol ； 1. Ieq.)和 DMAP(18. 3g ;0· 15mol ；0. 05eq.)溶于 ISOOmL環(huán)己烷溶液中。將反應(yīng)混合物于回流下攪拌48小時(shí)(混合物的溫度90°C )，蒸餾 除去形成的甲醇。冷卻后，將反應(yīng)混合物濃縮并溶于1500mL 二氯甲烷中。有機(jī)相采用IN 鹽酸洗滌，用水洗滌，然后采用飽和的氯化鈉溶液洗滌。然后將其干燥，過濾并蒸發(fā)。將如此獲得的油狀物經(jīng)減壓分餾(128-130°C /4X 10_2mbar)得到目標(biāo)產(chǎn)物。步驟B 1- (4-叔-丁氧基-4-氧代丁基)-2-氧代-環(huán)戊烷甲酸芐基酯于室溫下，在劇烈攪拌下，將上面步驟中獲得的2-氧代-環(huán)戊烷甲酸芐基酯(Ig ； 5. 43mmol)的5mL無水丙酮溶液倒入無水碳酸鉀(3g ；21. 7mmol ；4eq.)的IOmL無水丙酮懸 浮液中。將反應(yīng)混合物劇烈攪拌1小時(shí)，然后快速倒入溶于2ml丙酮中的4-溴丁酸叔-丁 基酯(2. 04g ;9. 16mmol ;2eq.)。反應(yīng)混合物于回流下加熱過夜。冷卻后，將反應(yīng)混合物過 濾并溶于20mL 二氯甲烷。將有機(jī)相洗滌，干燥，過濾，然后蒸發(fā)。粗品產(chǎn)物經(jīng)硅膠快速色譜 純化，采用庚烷/乙酸乙酯(95/5)作為洗脫液。步驟C:4-{1-[(芐基氧基)羰基}-2_氧代環(huán)戊基} 丁酸于室溫下，20分鐘內(nèi)將140mL三氟乙酸倒入上面步驟中獲得的叔-丁基酯(200g ； 0. 545mol)的700mL無水二氯甲烷溶液中。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過夜。注意攪拌 過夜后，如果有原料剩余，則加入更多10%三氟乙酸，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)并溶于甲苯(3X500ml)從而除去最大量的三氟乙酸。真空泵 干燥后，將獲得的粗品油狀物溶于碳酸氫鈉溶液(84g/lL ;2eq.)。然后堿性水相采用乙醚 洗滌(3X300mL)，再用4N鹽酸溶液酸化。酸性水相用乙酸乙酯萃取(3X300mL)，將合并的 有機(jī)相洗滌、干燥并蒸發(fā)。產(chǎn)物無需純化可以直接用于下一步驟。步驟D:l-(3_{[芐基氧基)羰基]氨基}丙基-2-氧代-環(huán)戊烷甲酸芐基酯于室溫下，5分鐘內(nèi)向上面步驟獲得的酸(123. 7g ；0. 406mol)的IL無水甲苯溶液 中滴加三乙胺(84. 5mL ；0. 610mol ；1. 5eq.)、節(jié)基醇(75. 6mL ； 0. 731mol ；1. 8eq.)，然后滴 加二苯基磷酰基疊氮化物(96. 3mL ；0. 447mol ；1. Ieq.)。將反應(yīng)混合物于回流下攪拌過夜。 冷卻后，將反應(yīng)混合物蒸發(fā)并溶于IL乙酸乙酯中。乙酸乙酯相用IN鹽酸溶液(3X200mL)、 水、飽和的碳酸氫鈉溶液洗滌，然后采用飽和的氯化鈉溶液洗滌。將有機(jī)相干燥，過濾，然后 蒸發(fā)。將粗品產(chǎn)物于50-70°C、4X10_2mbar蒸餾除去雜質(zhì)(主要是苯基醇)純化。步驟E (3-{[芐基氧基)羰基氨基}丙基)-2_羥基-環(huán)戊烷甲酸芐基酯于-10°C，向上面步驟獲得的酮酯(98g ；0. 239mol)的600mL無水甲醇溶液中分10 份加入硼氫化鈉(11. 4g ；0. 30Imol ；1. 25eq.)。將反應(yīng)混合物保持在_10°C—小時(shí)，然后將 其在2小時(shí)內(nèi)于攪拌下溫?zé)嶂潦覝?。蒸發(fā)除去甲醇后，反應(yīng)混合物溶于IL乙酸乙酯。有機(jī) 相采用10%氯化銨溶液、水、飽和的氯化鈉溶液洗滌。將有機(jī)相干燥，過濾，然后蒸發(fā)。步驟F 1- (3- {[(芐基氧基)羰基]氨基}丙基)-2-[(甲基磺?；?氧基]環(huán)戊 烷甲酸鹽芐基酯(外消旋反式非對映異構(gòu)體)
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于室溫下，將三乙胺(49. 53mL;0. 357mol ;1.5eq.)加至上面步驟中獲得的醇 (98g ；0. 238mol)的950mL無水四氫呋喃溶液中。將反應(yīng)混合物冷卻至_30°C，然后滴加溶 于120mL無水四氫呋喃中的甲磺酰氯(27. 6ImL ；0. 357mol ；1. 5eq.)。然后將混合物在2小 時(shí)內(nèi)于攪拌下溫?zé)嶂潦覝?。蒸發(fā)除去四氫呋喃后，將反應(yīng)混合物溶于IL乙酸乙酯。將有機(jī) 相洗滌，干燥，過濾，然后蒸發(fā)。粗品產(chǎn)物經(jīng)硅膠(5kg)快速色譜純化，采用梯度庚烷/乙酸 乙酯(7/3-6/4)作為洗脫液。反式非對映異構(gòu)體為洗脫過程中的第一組分。步驟G:2_(乙?；虼?-1-(3_{[(芐基氧基)羰基]氨基}丙基)環(huán)戊烷甲酸 芐基酯(外消旋順式非對映異構(gòu)體)硫代乙酸鉀的制備非常吸濕_不用干燥_制備并立即使用將40g硫代乙酸鉀的350mL無水乙腈懸浮液于回流下加熱30分鐘，過濾，然后將
該操作重復(fù)一次。向獲自上面步驟的(外消旋反式)甲磺酸酯(25g;0.051mol)的SOOmL無水乙腈 溶液中加入先前洗滌的硫代乙酸鉀(45g沒有抽濾-理論值29. 2g ； 0. 255mol ；5eq.)和 18C6冠醚(13. 5g ；0. 051mol ；leq.)，然后將反應(yīng)混合物于回流下加熱20小時(shí)。冷卻后，將 反應(yīng)混合物過濾，然后蒸發(fā)除去溶劑。粗品產(chǎn)物經(jīng)硅膠(2kg)快速色譜純化，采用梯度庚烷/乙酸乙酯(8/2-5/5)作為 洗脫液。注意該第一次上柱為預(yù)純化并回收未反應(yīng)的原料。含有目標(biāo)產(chǎn)物的組分(6. 5g) 經(jīng)凝膠(200g)快速色譜純化，采用梯度二氯甲烷/乙酸乙酯(99/1-95/5)作為洗脫液。步驟!1:(11 ，25)-2-(乙?；虼?(3_ {[(芐基氧基)羰基]氨基}丙基)環(huán) 戊烷甲酸芐基酯將上面步驟中獲得的外消旋順式化合物的對映異構(gòu)體通過制備性手性色譜在 CHIRALPAK AD-H 5μπι柱上分離，采用C02/Et0H(80/20k)混合物作為流動相。檢測波長為230nm。(1R，2S)對映異構(gòu)體=對映異構(gòu)體2為洗脫過程中的第二組分。步驟I :(lR，2S)-l-(3-{[(芐基氧基)羰基]氨基}丙基)_2_巰基環(huán)戊烷甲酸芐
基酯于10°C，向上面步驟中獲得的化合物(8. 16g ；0. 0174mol)的150mL無水和脫氣二 氧六環(huán)溶液中滴加IN氫氧化鈉溶液(35mL ；0. 0348mol ；2eq.)。將混合物于60°C加熱30分 鐘。冷卻后，反應(yīng)混合物通過加入35mL IN鹽酸中和，然后冷凍干燥。步驟J (1R，2S)-1-(3-氨基丙基)_2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽將600mL氨在2升反應(yīng)器中濃縮，于-78 °C，分10份加入鈉(IOg ；0. 435mol ； 25eq.)。將反應(yīng)混合物于_78°C保持45分鐘。然后在30分鐘內(nèi)滴加上面步驟中獲得的化 合物的預(yù)先脫氣的四氫呋喃/甲醇(140mL/12mL)混合物溶液。于_78°C繼續(xù)攪拌1小時(shí)， 在攪拌下將混合物溫?zé)嶂潦覝?。除去氨后，?0分鐘內(nèi)將氯化銨溶液(23. 3g的IlOmL水 溶液)加至反應(yīng)混合物中，蒸發(fā)除去四氫呋喃，然后采用6M鹽酸溶液(15mL)酸化。過濾， 然后進(jìn)行冷凍干燥。粗品產(chǎn)物通過制備性HPLC在Kromasil柱上脫鹽，采用梯度水/乙腈/三氟乙酸 作為流動相(100/0/0. 1洗脫10分鐘，然后自100/0/0. 1-70/30/0. 1洗脫20分鐘，隨后以70/30/0. 1等度洗脫)。將含有目標(biāo)產(chǎn)物和相應(yīng)的二聚物(二硫化橋)的組分冷凍干燥。向上述冷凍干燥物(4. 3g)的IOOmL乙酸溶液中加入4. 5g鋅(IOeq.)，然后，在劇 烈攪拌下，將反應(yīng)混合物于60°C加熱直到二聚物消失(約6小時(shí))。冷卻后，將反應(yīng)混合物 過濾，濾液用400mL稀釋，然后冷凍干燥。粗品產(chǎn)物通過制備性HPLC 在 Kromasil 柱(lkg_600mmX 60mm-70ml/min)上純化， 采用水/乙腈/三氟乙酸(85/15/0. 1)作為流動相。將含有目標(biāo)產(chǎn)物的組分冷凍干燥。旋光度溶劑甲醇，C=l，T = 21°C，L = 589nm，[a]D = +32.46°。[M+H] + 的 CAD/MS/MS 譜=204. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu)符合。實(shí)施例2 :(1R，2S)_2-乙?；虼?l-(3-氨基丙基)_環(huán)戊烷甲酸鹽酸鹽于室溫下，向?qū)嵤├?步驟H化合物(2. 40g ；4. 72mmoles)的20mL無水二氯甲烷 溶液中滴加4M HCl/ 二氧六環(huán)溶液(35. 5mL ；141. 6mmoles ；30eq.)。將反應(yīng)混合物于室溫 下攪拌放置直到兩個官能團(tuán)脫保護(hù)(通過LC/MS檢測-大約時(shí)間過夜)，然后蒸發(fā)除去溶 劑。將獲得的產(chǎn)物在BIOGEL P2柱上純化，采用水/乙腈/IN鹽酸(1000/1000/2)混合物 作為流動相。將含有目標(biāo)產(chǎn)物的組分冷凍干燥。 實(shí)施例3 :(1R，2S)-1_(3-氨基丙基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸鹽酸鹽將實(shí)施例2化合物(4. 51g ； 16mmoles)的148mL 4M HCl溶液于45°C加熱過夜。冷 卻后，將反應(yīng)混合物采用50mL水稀釋，然后冷凍干燥。粗品產(chǎn)物通過制備性HPLC在Kromasil柱(lkg_600mmX 60mm-70ml/min)上純化， 采用水/乙腈(95/5)混合物作為流動相。將含有目標(biāo)產(chǎn)物的組分冷凍干燥。 [M+H] + 的 CAD/MS/MS 譜=204. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu)符合。實(shí)施例3a (1R，2S) (3_氨基丙基)_2_巰基環(huán)戊烷甲酸步驟A 己二酸二 -叔-丁基酯于室溫下，將己二酰氯(629. 8g ；3. 44moles)倒入叔-丁醇(3. 27L ； 34. 4moles-10eq.)和吡啶(800mL ； 10. 32moles-3eq.)的3L無水甲苯溶液中。將反應(yīng)混合 物于70°C加熱攪拌過夜。冷卻后，將吡啶氯化物的沉淀物過濾，采用甲苯?jīng)_洗。甲苯相采用IN鹽酸溶液 (4X500mL)、10%碳酸鈉溶液(lX500mL)、水(lX500mL)洗滌，然后采用飽和的氯化鈉溶 液洗滌(lX500mL)。有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，然后蒸發(fā)。獲得的粗品油狀物經(jīng)減壓分餾純化(100°C /2X 10_2mmHg)。
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步驟B 2-氧代-環(huán)戊烷甲酸叔丁基酯將叔-丁醇(5.66mL ；0. 06mole-0. 05 eq.)和 14g 己二酸二 _ 叔 _ 丁基酯于室溫 下倒入NaH(108. 54g的60%懸浮物；2. 71moles 2. 15eq.)的1. IL無水甲苯懸浮液中。將 反應(yīng)混合物于回流下加熱。于此溫度下，滴加溶于500mL無水甲苯中的己二酸二叔-丁基 酯溶液(324. 6g ；1. 26moles)，同時(shí)控制氣體的溢出。加入時(shí)間約為3小時(shí)。注意在己二酸二叔丁基酯的加入過程中，觀察到大量反應(yīng)混合物凝聚，但逐漸形 成懸浮液。一旦加入完成，將反應(yīng)混合物于回流下保持5小時(shí)。冷卻后，將反應(yīng)混合物于0°C 采用10%乙酸溶液(IL)水解。分離有機(jī)相，水相采用甲苯(300ml)萃取。合并的甲苯相用 水洗滌(2X300ml)，然后采用飽和的氯化鈉溶液(300ml)洗滌。有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過 濾，然后蒸發(fā)。橙色油狀物經(jīng)減壓分餾純化(65_70°C /1 X 1 O^mmHg)。步驟C:(lS)-2-氧代-1_(3-氧代丙基)環(huán)戊烷甲酸叔-丁基酯在氬氣環(huán)境中、于-25 °C，30分鐘內(nèi)將丙烯醛(4. 19g ；74. 83mmoles-2. 5eq.) 的IOmL無水二氯甲烷溶液在緩慢攪拌下倒入2-氧代-環(huán)戊烷甲酸叔丁基酯(5. 51g ； 29. 93mmoles)和催化劑 Q (1. 46g ；2. 99mmoles-0. Ieq.)的 60mL 無水二氯甲烷溶液中。
催化劑 Q -才艮據(jù) Angew. Chem. Int. Ed. 2005, 44, 105-108中所述合成 在加入結(jié)束時(shí)，將反應(yīng)混合物于此溫度下攪拌4小時(shí)，然后于_5°C攪拌過夜。將濾液蒸發(fā)，獲得無色油狀物。步驟D :(lS)-l-(3-羥基丙基)-2_氧代環(huán)戊烷甲酸叔丁基酯向獲自上面步驟中的酮酯醛(6. 5g ；26. 9mmoles)的80mL無水四氫呋喃溶液中加 入三乙酰氧基硼氫化鈉(6. 84g ；32. 3mmoles 1. 2eq.)。將反應(yīng)混合物于回流下加熱攪拌5 小時(shí)30分鐘。回歸室溫后，將反應(yīng)混合物蒸發(fā)。將殘留物溶于IOOmL 二氯甲烷中，采用飽 和的碳酸氫鈉溶液洗滌(2X20mL)。堿性水相采用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)相采用飽和 的氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，然后蒸發(fā)。粗品產(chǎn)物經(jīng)硅膠快速色譜純化，采用CH2Cl2/ 異丙醇(95/5)混合物作為洗脫液。步驟E :(lS)-l-(3-溴丙基)-2_氧代環(huán)戊烷甲酸叔丁基酯向獲自上面步驟中的醇(5. 4g ；22. 12mmoles)和三苯膦(6. 7g ； 25. 44mmoles-l. 15eq.)的35mL無水二氯甲烷溶液中分次加入N-溴代琥珀酰亞胺 (4. 53g ；25. 44mmoles-l. 15eq.)，同時(shí)將溫度保持在5°C。于室溫下攪拌1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物蒸發(fā)。殘留物溶于IOOmL異丙基醚并研磨，獲得三苯膦衍生物的結(jié)晶。過濾固體并 沖洗。濾液濃縮，溶于戊烷，然后再過濾。將含有戊烷的濾液蒸發(fā)。粗品產(chǎn)物經(jīng)硅膠快速色 譜純化，采用庚烷/乙酸乙酯(8/2)混合物作為洗脫液。步驟F (1S，2R) (3_溴丙基)_2_羥基環(huán)戊烷甲酸叔-丁基鹽酯于室溫、攪拌下，將得自商業(yè)的1. 8M(+) DIPCl的己烷溶液(320mL ； 0. 577mole-l. 5eq.)倒入獲自上面步驟中的酮酯(117. 5g ；0. 385mole)中。將反應(yīng)混合物 于55 °C、于室溫下攪拌過夜.向反應(yīng)混合物加入950mL乙醚，然后在攪拌下、于0 °C，加入乙醛(35. 9mL ； 0. 635mole-9. 65eq.)。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至10°C后，加 入6N氫氧化鈉溶液(480mL ；2. 88moles-7. 5eq.)。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌1小時(shí)。分 離有機(jī)相，用水(3X300ml)、10%檸檬酸溶液(2X300mL)和飽和的氯化鈉溶液(3X150mL) 洗滌。有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，然后蒸發(fā)。粗品產(chǎn)物經(jīng)硅膠快速色譜純化，采用梯度庚烷/乙 酸乙酯(95/5-85/15)作為洗脫液。步驟G:(lS，2R)-l-{3-[二(叔-丁氧基羰基)氨基]丙基}_羥基環(huán)戊烷甲酸 叔_ 丁基酯于室溫下，向獲自上面步驟中的溴化醇(11.8g;36. 06mmoles)的IlOmL無水DMF 溶液中加入亞氨基二甲酸二 _叔_ 丁基酯(7. 83g ；36. 06mmoles ；leq.)，然后加入碳酸銫 (11. 75g ；36. 06mmoles ；leq.)。反應(yīng)混合物于室溫下攪拌3小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物。濾液濃縮后，將油狀殘留物溶于300mL乙酸乙酯。乙酸乙酯相 用水洗滌(3X IOOmL)，然后采用飽和的氯化鈉溶液(IOOmL)洗滌。有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過 濾并蒸發(fā)。粗品產(chǎn)物經(jīng)硅膠快速色譜純化，采用梯度庚烷/乙酸乙酯(9/1-85/15)作為洗脫 液。步驟H:(lS，2R)-l-{3-[二(叔-丁氧基羰基)氨基]丙基}_2_[(甲基磺?；? 氧基]環(huán)戊烷甲酸叔-丁基酯于室溫下，將三乙胺(4. llmL;29. 55mmoles ;1.5eq.)加至獲自上面步驟中的醇 (8. 70g ；19. 7mmoles)的130mL無水四氫呋喃溶液中。將反應(yīng)混合物冷卻至_30°C，然后滴 加溶于IOmL無水四氫呋喃中的甲磺酰氯(2. 29mL ；29. 55mmoles ；1. 5eq.)。將混合物在攪 拌下2小時(shí)內(nèi)回歸至室溫。蒸發(fā)除去四氫呋喃，將反應(yīng)混合物溶于200mL乙酸乙酯。乙酸 乙酯相用水(2X20mL)和飽和的氯化鈉溶液(lX20mL)洗滌。有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾， 然后蒸發(fā)。粗品產(chǎn)物經(jīng)硅膠快速色譜純化，采用梯度庚烷/乙酸乙酯(85/15-8/2)作為洗脫 液。步驟I :(lR，2S)-2-(乙酰基硫代)_{3_[二(叔-丁氧基羰基)氨基]丙基)環(huán) 戊烷甲酸叔-丁基酯采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟G的方法，獲得目標(biāo)產(chǎn) 物。步驟J. (1R，2S)-1_(3-氨基丙基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸鹽酸鹽酸和胺官能團(tuán)的去保護(hù)
于室溫下，向上面步驟中獲得的化合物(8. 80g ；17. 6mmoles)的IOOmL無水二氯甲 烷溶液中滴加4M HCl/二氧六環(huán)溶液(132mL ；0. 53moles ；30eq.)。將反應(yīng)混合物于室溫下 攪拌放置使2個官能團(tuán)脫保護(hù)(通過LC/MS檢測-大約時(shí)間過夜)，然后蒸發(fā)除去溶劑。 獲得的產(chǎn)物無需純化可以直接用于下一步驟。硫醇的去保護(hù)將蒸發(fā)的產(chǎn)物溶于預(yù)先采用氬氣脫氣的200mL的4M HCl水溶液中，然后于45°C加 熱過夜。冷卻后，將反應(yīng)混合物采用IOOmL脫氣水稀釋，然后冷凍干燥。步驟K (1R，2S) (3_氨基丙基)_2_巰基環(huán)戊烷甲酸將獲自上面步驟的化合物(10g，41. 5mmol)溶于80mL水中并攪拌。溶液為澄清的 淺黃色(PH約為1.2)。在攪拌下，加入約IlmL飽和的碳酸氫鈉溶液。在pH = 4，觀察到 第一次沉淀，將其濾出。然后將濾液調(diào)至更為堿性，高至pH = 5. 5，當(dāng)沉淀形成時(shí)，濾出沉 淀。濾液減壓蒸發(fā)(T浴=55°C)。當(dāng)剩余約IOmL溶液時(shí)，再次過濾。收集相等量的沉淀物，真空干燥，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。匪R譜(1H 匪R，D20,600MHz) δ = 3. 08ppm(lH, dd) ；2.91(2H，t) ；2. 18(lH，m) ；2. 11 (1H, m) ；1.79(lH，m) ； 1. 69-1. 56 (4H，m) ；1.52(lH，m) ；1.45(lH，m) ;1.37(lH，m)。實(shí)施例3b :(1R，2S)-1_(3-氨基丙基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸磷酸鹽將實(shí)施例3a化合物與磷酸的85%水溶液反應(yīng)，然后冷凍干燥。匪R譜(1H 匪R，D20,600MHz) δ = 3. 09ppm(lH, t) ；2. 93 (2H, t) ；2. 18 (2H, m) ；1. 82 (1H, m) ； 1. 79 (1H, dt) ； 1. 72-1. 50 (5H, m) ；1. 41 (1H, dt)。實(shí)施例3c (1R，2S) (3_氨基丙基)~2~巰基環(huán)戊烷甲酸苯磺酸鹽將實(shí)施例3a化合物與苯磺酸水的水溶液反應(yīng)，然后冷凍干燥。匪R譜(1H NMR, DMS0—D6，600ΜΗζ) δ = 12. 38ppm(lH, si) ；7. 64 (3H, si) ；7. 59 (2H, m) ；7. 32 (2H, m) ；7. 29 (1H, m) ；3. 02 (1H, tl) ；2. 76 (2H, m) ；2. 33 (1H, si) ；2. 13 (2H, m)； 1. 84-1. 65 (3H, m) ；1.61(lH，m) ；1.52(3H，m) ;1.32(lH，m)。實(shí)施例4 (1S，2R) (3_氨基丙基)~2~巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽根據(jù)實(shí)施例1步驟I和J中所述方法，采用施例1步驟H中獲得的另一個對映異構(gòu) 體作為原料，即采用(1S，2R)-2-(乙酰基硫代P1-C3-I;[(芐基氧基)羰基]氨基}丙基) 環(huán)戊烷甲酸芐基酯作為原料，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。[M+H]+的CAD/MS/MS譜=204. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu) 相符。實(shí)施例5 :(lS，2R)-2-乙?；虼?l-(3-氨基丙基)_環(huán)戊烷甲酸鹽酸鹽采用實(shí)施例2步驟H中獲得的另一個對映異構(gòu)體作為原料，即(lS，2R)-2_(乙酰 基硫代)-1_(3-{[(芐基氧基)羰基]氨基}丙基)環(huán)戊烷甲酸芐基酯為原料，根據(jù)實(shí)施例 2中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。
實(shí)施例6 1-(3-氨基丙基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式非對映 異構(gòu)體)采用實(shí)施例1步驟G中獲得的化合物為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟I和J中所述方 法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。[M+H]+ 的 CAD/MS/MS 譜=204. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。實(shí)施例7 :1-(4_氨基丁基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋反式非對映 異構(gòu)體)步驟A 1- (4-溴丁基)-2-氧代-環(huán)戊烷甲酸鹽芐基酯在惰性氮?dú)猸h(huán)境中，在配備磁力攪拌和冷凝器的500mL三頸燒瓶中，將氫化鈉 95% (2. 2g ；87. Immol ；1. 25eq.)懸浮于無水 THF(115mL) ^P HMPA(14. 6mL)的混合物中。滴 加2-氧代環(huán)戊烷甲酸芐基酯(15. 3g ；70. 3mmol)的45mL無水THF溶液，從而將溫度保持 在45°C以下。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌1小時(shí)。向該澄清的黃色溶液中加入1，4_ 二溴 丁烷(12. 6mL ；105. 4mmol ；1. 5eq.)。將反應(yīng)混合物于回流下再攪拌14小時(shí)。冷卻至室溫 后，加入80mL飽和的氯化銨水溶液。將混合物倒入500mL乙醚中，有機(jī)相用IOOmL水洗滌 5次，然后采用IOOmL飽和的氯化鈉水溶液洗滌。有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜純化，采用環(huán)己烷/乙酸乙酯混合物(95/5-80/20的梯度)作為 洗脫液，得到目標(biāo)產(chǎn)物，為黃色油狀物形式。步驟B 1- (4-溴丁基)-2-羥基-環(huán)戊烷甲酸芐基酯采用獲自上面步驟中的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟E中所述方法，獲得目 標(biāo)產(chǎn)物。 步驟C 1- (4-疊氮丁基)-2-羥基-環(huán)戊烷甲酸芐基酯在惰性氮?dú)猸h(huán)境中，在燒瓶中，將上面步驟中獲得的化合物(4.41g;16.6mmol)、 疊氮化鈉(5. 5g ；84. 6mmol ；5eq.)和碘化鈉(0. 2g)懸浮于60mL乙醇中。將反應(yīng)混合物于 回流下攪拌24小時(shí)，然后濃縮至干。將油性殘留物溶于150mL乙醚和SOmL水。有機(jī)相采 用SOmL水和40mL飽和的氯化鈉水溶液洗滌。有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。形成的 (Rac)-反式和(Rac)-順式疊氮化物混合物直接用于下一步驟。步驟D 1- (4-氨基丁基)-2-羥基-環(huán)戊烷甲酸芐基酯在燒瓶中，將(Rac)-反式和(Rac)-順式疊氮化物混合物(20. 64g ；62. 3mmol)和 三苯膦(24. 4g ；93mmol ；1. 5eq.)溶于500mL的THF中。將溶液于50°C攪拌1小時(shí)。加入水 (IOmL ；556mmol ；9eq.)。將反應(yīng)混合物于50°C攪拌4小時(shí)，然后濃縮至干。將油性殘留物 溶于250mL乙醚中，有機(jī)相采用120mL的IN鹽酸水溶液萃取二次。水相采用IOOmL乙醚洗 滌。通過加入固體氫氧化鉀使得水相的PH為12-13。水相采用250mL乙酸乙酯萃取三次。 合并的有機(jī)相采用IOOmL水洗滌，然后采用IOOmL飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機(jī)相經(jīng)硫酸 鎂干燥，過濾并濃縮。獲得順式/反式混合物形式的目標(biāo)產(chǎn)物，可以直接用于下一步驟。步驟E:l-(4-{[芐基氧基)羰基}氨基} 丁基)-2_羥基-環(huán)戊烷甲酸芐基酯在燒瓶中，將上面步驟中獲得的產(chǎn)物(62. 3mmol)溶于160mL 二氧六環(huán)。加入碳 酸鈉(13. 16g ； 124mmol ；2eq.)的160mL水溶液。于0°C，緩慢加入氯代甲酸芐基酯(12mL ； 84. 4mmol ；1. 35eq.)的30mL 二氧六環(huán)溶液。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌12小時(shí)，然后部分濃縮。水相采用250mL乙醚萃取二次。將合并的有機(jī)相洗滌，干燥，過濾并濃縮。將產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜純化(石油醚/乙酸乙酯9/1_2/8梯度洗脫)，獲得為黃色油 狀物的目標(biāo)產(chǎn)物。步驟F: 1-(4-{[芐基氧基)羰基]氨基} 丁基)-2_[(甲基磺?；?氧基-環(huán)戊 烷甲酸芐基酯(外消旋順式非對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟F中所述方法，獲得目 標(biāo)產(chǎn)物。該順式非對映異構(gòu)體為洗脫過程中的第一組分。步驟G:2_(乙酰基硫代)-1-(4_{[(芐基氧基)羰基]氨基} 丁基)環(huán)戊烷甲酸 芐基酯(外消旋反式非對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟G中所述方法，獲得目 標(biāo)產(chǎn)物。步驟H :1-(4_氨基丁基)-2-巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋反式非對映異 構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟I和J中所述方法，獲 得目標(biāo)產(chǎn)物。 實(shí)施例8 1-(4-氨基丁基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式非對映 異構(gòu)體)步驟A 1- (4- {[(芐基氧基)羰基]氨基} 丁基)-2-[(甲基磺?；?氧基環(huán)戊烷 甲酸芐基酯(外消旋反式非對映異構(gòu)體)目標(biāo)產(chǎn)物為實(shí)施例7步驟F中獲得的另一個非對映異構(gòu)體(反式非對映異構(gòu)體)。步驟B :1-(4_氨基丁基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式非對映異 構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟G、I和J中所述方法， 獲得目標(biāo)產(chǎn)物。 實(shí)施例9 (4-氨基丁基)-2-巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(順式非對映異構(gòu)體， 對映異構(gòu)體1)步驟A:2-(乙?；虼?-1-(4_{[(芐基氧基)羰基]氨基} 丁基)環(huán)戊烷甲酸 芐基酯(順式非對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體1)采用實(shí)施例8步驟A中獲得的化合物為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟G和H中所述方 法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。對映異構(gòu)體1為洗脫過程中的第一組分。
步驟B :1-(4_氨基丁基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(順式非對映異構(gòu)體，對 映異構(gòu)體1)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟I和J中所述方法，獲 得目標(biāo)產(chǎn)物。[M+H]+的CAD/MS/MS譜=218，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。實(shí)施例10 :1-(4_氨基丁基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(順式非對映異構(gòu) 體，對映異構(gòu)體2)步驟A:2-(乙?；虼?-1-(4_{[(芐基氧基)羰基]氨基} 丁基)環(huán)戊烷甲酸 芐基酯(順式非對映異構(gòu)體，對映異構(gòu)體2)目標(biāo)產(chǎn)物為實(shí)施例9步驟A中獲得的另一個對映異構(gòu)體。步驟B :1-(4_氨基丁基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(順式非對映異構(gòu)體，對 映異構(gòu)體2)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟I和J中所述方法，獲 得目標(biāo)產(chǎn)物。[M+H]+的CAD/MS/MS譜=218，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。實(shí)施例11 :1-[(4_氨基甲基)芐基]-2-巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順 式非對映異構(gòu)體)步驟A:l-(4-溴甲基)芐基-2-氧代-環(huán)戊烷甲酸芐基酯根據(jù)實(shí)施例7步驟A中所述方法，采用2-氧代-環(huán)戊烷甲酸芐基酯和1，4_ 二溴 甲基苯為原料，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。步驟B :1-(4_溴甲基)芐基-2-羥基-環(huán)戊烷甲酸芐基酯(外消旋反式非對映異 構(gòu)體)根據(jù)實(shí)施例1步驟E中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物，隨后將如此獲得的化合物通過快 速硅膠色譜純化，采用環(huán)己烷/乙酸乙酯(90/10-65/35梯度洗脫)作為洗脫液進(jìn)行非對映 異構(gòu)體分離。反式非對映異構(gòu)體為洗脫過程中的第一組分。步驟C:l-[(4_氨基甲基)芐基]-2-巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式非 對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例7步驟C-H中所述方法，獲得 目標(biāo)產(chǎn)物。[M+H]+ 的 CAD/MS/MS 譜=266. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。實(shí)施例12 2-巰基-1-(哌啶-4-基甲基)_環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋反式 非對映異構(gòu)體)步驟A :4_ ({1-[(芐基氧基)羰基} -2-羥基-環(huán)戊基}甲基)哌啶甲酸芐基 酯(外消旋順式非對映異構(gòu)體)采用2-氧代_環(huán)戊烷甲酸芐基酯和4-溴甲基-1-哌啶甲酸芐基酯為原料，根據(jù) 實(shí)施例7步驟A和B中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。順式非對映異構(gòu)體為洗脫過程中的第二組分。步驟B:4-({1-[(芐基氧基)羰基]_2-[(甲基磺?；?氧基]環(huán)戊基}甲基)-1_哌啶甲酸芐基酯(外消旋順式非對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟F中所述方法，獲得目 標(biāo)產(chǎn)物。步驟C :2_巰基-1-(哌啶-4-基甲基)_環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋反式非 對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟G、I和J中所述方法， 獲得目標(biāo)產(chǎn)物。 實(shí)施例13 2-巰基-1-(哌啶-4-基甲基)_環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式 非對映異構(gòu)體)步驟A:4-({1-[(芐基氧基)羰基]_2-[(甲基磺?；?氧基]環(huán)戊基}甲 基)-1_哌啶甲酸芐基酯(外消旋反式非對映異構(gòu)體)目標(biāo)產(chǎn)物為實(shí)施例12步驟B中獲得的另一個非對映異構(gòu)體(反式非對映異構(gòu) 體)。步驟B 2-巰基-1-(哌啶-4-基甲基)_環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式非 對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟G、I和J中所述方法， 獲得目標(biāo)產(chǎn)物。
元素微量分析CHNS計(jì)算值47. 056. 23. 928. 97實(shí)測值46. 586. 244. 027. 78實(shí)施例14 :1-(5_氨基戊基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋反式非對映 異構(gòu)體)步驟A:l-(5-{[芐基氧基)羰基]氨基}戊基)-2_羥基-環(huán)戊烷甲酸芐基酯采用2-氧代-環(huán)戊烷甲酸芐基酯和1，5-二溴戊烷作為原料，根據(jù)實(shí)施例7步驟 A-E中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。步驟B:l-(5-{[芐基氧基)羰基]氨基}戊基)-2_[(甲基磺?；?氧基環(huán)戊烷 甲酸芐基酯(外消旋順式非對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟F中所述方法，獲得目 標(biāo)產(chǎn)物。順式非對映異構(gòu)體為洗脫過程中的第二組分。步驟C 1-(5-氨基戊基)-2-巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋反式非對映異 構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟G、I和J中所述方法， 獲得目標(biāo)產(chǎn)物。[M+H]+ 的 CAD/MS/MS 譜=232. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。
實(shí)施例15 :l-(5-氨基戊基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式非對映 異構(gòu)體)步驟A 1- (5- {[(芐基氧基)羰基]氨基}戊基)-2-[(甲基磺?；?氧基環(huán)戊烷 甲酸芐基酯(外消旋反式非對映異構(gòu)體)目標(biāo)產(chǎn)物為實(shí)施例14步驟B中獲得的另一個非對映異構(gòu)體(反式非對映異構(gòu) 體)。步驟B :1-(5_氨基戊基)-2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式非對映異 構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟G、I和J中所述方法， 獲得目標(biāo)產(chǎn)物。
元 實(shí)施例16 :2_巰基-l-(2-哌啶-4-基乙基)_環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順 式非對映異構(gòu)體)步驟A :4_ (2- {1-[(芐基氧基)羰基]_2_羥基-環(huán)戊基}乙基)哌啶甲酸芐
基酯采用2-氧代-環(huán)戊烷甲酸芐基酯和4- (2-溴乙基)-1-哌啶甲酸芐基酯為原料， 根據(jù)實(shí)施例7步驟A和B中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。反式非對映異構(gòu)體為洗脫過程中的第一組分。步驟Β:4-(2-{1-[(芐基氧基)羰基]_2_[(甲基磺酰基)氧基]環(huán)戊基}乙 基)-ι-哌啶甲酸芐基酯(外消旋反式非對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟F中所述方法，獲得目 標(biāo)產(chǎn)物。步驟C 2-巰基-l-(2-哌啶-4-基乙基)-環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式 非對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟G、I和J中所述方法， 獲得目標(biāo)產(chǎn)物。[M+H]+的CAD/MS/MS譜=258，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。實(shí)施例17 2-巰基-1-(吡啶-3-基甲基)_環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式 非對映異構(gòu)體)步驟A:2-氧代-l-(3-吡啶基甲基)環(huán)戊烷甲酸芐基酯在惰性氮?dú)猸h(huán)境中，在配備磁力攪拌和冷凝器的1-升的三頸燒瓶中，將氫化鉀 32% (25g ；200mmoles ； 1. Ieq.)懸浮于無水THF(200mL)中。將反應(yīng)混合物冷卻至_78°C， 然后滴加2-氧代環(huán)戊烷甲酸芐基酯(39.7g;182mmoles)，同時(shí)保持溫度低于-78°C。將反 應(yīng)混合物于室溫下攪拌1小時(shí)。將3_(氯代甲基)_吡啶堿(38. 7g ；226mmoles ；1. 24eq.) 的IOOmL無水THF溶液加至澄清的黃色溶液。將反應(yīng)混合物于回流下攪拌12小時(shí)。冷卻至 室溫后，將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，溶于80mL水和500mL乙酸乙酯中。水相采用50mL乙酸乙 酯萃取三次。合并的有機(jī)相采用飽和的氯化鈉溶液洗滌，然后經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。
26將產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜純化，采用二氯甲烷/乙醇化合物(98/2-95/5梯度洗脫)作為洗脫液， 得到為黃色油狀物的目標(biāo)產(chǎn)物。步驟B :2_羥基-l-(3-吡啶基甲基)環(huán)戊烷甲酸芐基酯(外消旋反式非對映異構(gòu) 體)根據(jù)實(shí)施例1步驟E中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜純化，采用二氯 甲烷/乙酸乙酯混合物(7/3-5/5梯度洗脫)作為洗脫液，得到為無色油狀物的目標(biāo)產(chǎn)物。 反式非對映異構(gòu)體為洗脫過程中的第二組分。步驟C 2-巰基-1-(吡啶-3-基甲基)_環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式非 對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟F、G、I和J中所述方 法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。 [M+H]+ 的 CAD/MS/MS 譜=238. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。實(shí)施例18 :2_巰基-l-(2-吡啶-2-基乙基)_環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順 式非對映異構(gòu)體)步驟A:2-氧代-l-(2-吡啶-2-基乙基)環(huán)戊烷甲酸芐基酯采用2-氧代_環(huán)戊烷甲酸芐基酯和甲磺酸2-吡啶-2-基乙基酯作為原料，根據(jù) 實(shí)施例17步驟A中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。步驟B :2_羥基-l-(2-吡啶-2-基乙基)環(huán)戊烷甲酸芐基酯(外消旋反式非對映 異構(gòu)體)根據(jù)實(shí)施例17步驟B中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。反式非對映異構(gòu)體為洗脫過程 中的第二組分。步驟C 2-巰基-l-(2-吡啶-2-基乙基)-環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式 非對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟F、G、I和J中所述方 法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。
[M+H]+ 的 CAD/MS/MS 譜=252. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。 實(shí)施例19 1- [ (6-氨基吡啶-3-基甲基)]_2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消 旋順式非對映異構(gòu)體)步驟A 2-氧代_環(huán)戊烷甲酸叔_ 丁基酯1)己二酸二叔丁基酯于室溫下，將己二酰氯(629. 8g ；3. 44moles)滴加至叔-丁醇(3. 27L ； 34. 4moles-10eq.)和吡啶(800mL ； 10. 32moles-3eq.)的3L無水甲苯溶液中。將反應(yīng)混合物于70°C加熱攪拌過夜。冷卻后，濾出吡啶氯化物的沉淀物，用甲苯洗滌。甲苯相用IN鹽 酸溶液(4X500mL)、10%碳酸鈉溶液(lX500mL)、水(lX500mL)洗滌，然后用飽和的氯化 鈉溶液洗滌(lX500mL)。將有機(jī)相干燥，過濾，然后蒸發(fā)。獲得的粗品油狀物經(jīng)減壓分餾純 化(100°C /2 X I(T2HimHg)。2) 2-氧代-環(huán)戊烷甲酸叔_ 丁基酯于室溫下，將叔-丁醇(5. 66mL ；0. 06mole-0. 05eq.)和14g己二酸二叔丁基酯倒 Λ NaH(108. 54g的60%懸浮液；2. 71moles 2. 15eq.)的1. IL無水甲苯懸浮液中。將反應(yīng)混 合物于回流下加熱。于此溫度下，滴加溶于500mL無水甲苯的己二酸二叔丁基酯(324. 6g ； 1. 26moles)，同時(shí)控制氣體選出。加入時(shí)間約為3小時(shí)。注意在己二酸二叔丁基酯的加入過程中，觀察到大量反應(yīng)混合物凝聚，但逐漸形 成懸浮液。一旦加入完成，將反應(yīng)混合物于回流下保持5小時(shí)。冷卻后，將反應(yīng)混合物于0°C 采用10%乙酸溶液(IL)水解。分離有機(jī)相，水相采用甲苯(300ml)萃取。合并的甲苯相用 水洗滌(2X300ml)，然后采用飽和的氯化鈉溶液(300ml)洗滌。有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過 濾，然后蒸發(fā)。橙色油狀物經(jīng)減壓分餾純化(65_70°C /1 X 1 O^mmHg)。步驟B:l-({6-[(叔-丁氧基羰基)氨基]-3-吡啶基}甲基)-2_氧代環(huán)戊烷甲 酸叔_ 丁基酯采用2-氧代-環(huán)戊烷甲酸叔-丁基酯和[5_(氯代甲基)吡啶-2-基]氨基甲酸 叔_ 丁基酯作為原料，根據(jù)實(shí)施例17步驟A中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。步驟C:l-({6_[(叔-丁氧基羰基)氨基]-3-吡啶基}甲基)-2_羥基環(huán)戊烷甲 酸叔_ 丁基酯根據(jù)實(shí)施例17步驟B中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜純化，采用二 氯甲烷/乙醇(98/2-95/5梯度洗脫)，得到為無色油狀物的目標(biāo)產(chǎn)物。反式非對映異構(gòu)體 為洗脫過程中的第二組分。步驟D 1- ({6-[(叔-丁氧基羰基)氨基]-3-吡啶基}甲基)_2_ [(甲基磺?；? 氧基]_環(huán)戊烷甲酸叔丁基酯(外消旋反式非對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟F中所述方法，獲得目 標(biāo)產(chǎn)物。步驟E :1_[ (6-氨基吡啶-3-基甲基)]_2_(乙酰基硫代)_環(huán)戊烷甲酸(外消旋 順式非對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物作為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟G中所述方法，獲得目 標(biāo)產(chǎn)物。步驟F :1_[ (6-氨基吡啶-3-基甲基)]_2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋 順式非對映異構(gòu)體)酸和胺官能團(tuán)的去保護(hù)于室溫下，向上面步驟中獲得的化合物(2. 40g ；4. 72mmoles)的20mL無水二氯甲 烷溶液中滴加4M HCl/ 二氧六環(huán)溶液(35. 5mL ；141. 6mmoles ；30eq.)。將反應(yīng)混合物于室 溫下攪拌，直到兩個(胺和酸)官能團(tuán)完成脫保護(hù)(通過LC/MS檢測，大約時(shí)間為過夜)，然后蒸發(fā)除去溶劑。硫醇的去保護(hù)將蒸發(fā)后的產(chǎn)物溶于4M HCl水溶液，然后于45°C加熱過夜。反應(yīng)混合物用水稀 釋，然后冷凍干燥。將產(chǎn)物在BIOGEL P2上采用水/乙腈(1/1)混合物作為洗脫液純化。將含有目標(biāo) 產(chǎn)物的組分冷凍干燥。[M+H]+ 的 CAD/MS/MS 譜=253. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。實(shí)施例20 :(lR，2S，r R,2' S)-2, 2' - 二硫烷二基二 [1_ (3_ 氨基丙基)環(huán)戊
烷甲酸]二鹽酸鹽將實(shí)施例1步驟J中所述化合物(0. 44g ；1. 39mmoles)的3mL IN氫氧化鈉溶液于 65°C加熱過夜。冷卻后，將反應(yīng)混合物采用3mL IN鹽酸溶液中和。將產(chǎn)物在BIOGEL P2上采用水/乙腈(1/1)混合物作為洗脫液純化。將含有目標(biāo) 產(chǎn)物的組分冷凍干燥。 實(shí)施例21 :(lR，2S)-l-[3_( 二甲基氨基)丙基]_2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽步驟A:(lR，2S，r R,2' S)-2, 2' - 二硫烷二基二 [1_ (3_ ( 二甲基氨基)丙基 環(huán)戊烷甲酸于室溫下，向?qū)嵤├?0中獲得的化合物(0. 57g ；0. 70mmole)的4. 5mL甲酸溶液中 滴加0.2mL的37%甲醛水溶液。將反應(yīng)混合物于回流下加熱攪拌1小時(shí)。冷卻后，反應(yīng)混 合物用IOmL水稀釋，然后蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物無需純化可以直接用于下一步驟。步驟B (1R，2S) [3_ ( 二甲基氨基)丙基]_2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽于室溫下，向上面步驟中獲得的化合物的35mL水/THF(1/1)混合物溶液中滴加 2mL三丁基膦。將反應(yīng)混合物于50°C加熱攪拌過夜。冷卻后，將反應(yīng)混合物用IOOmL水稀 釋，然后水相用乙醚洗滌(3X25mL)。蒸發(fā)水相。粗品產(chǎn)物經(jīng)制備性HPLC 在 Kromasil 柱(lkg_600mmX 60mm-70ml/min)上純化，采 用水/乙腈/三氟乙酸(85/15/0-1)混合物作為流動相。將含有目標(biāo)產(chǎn)物的組分冷凍干燥。[M+H]+ 的 CAD/MS/MS 譜=232. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。實(shí)施例22 1-[3-(甲基氨基)丙基]_2_巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順 式非對映異構(gòu)體)步驟A:2-[(甲基磺酰基)氧基]-l-(3-吡啶基甲基)環(huán)戊烷甲酸芐基酯(外消 旋反式非對映異構(gòu)體)采用2-氧代_環(huán)戊烷甲酸芐基酯和3_[[(芐基氧基)羰基](甲基)氨基]丙基 甲烷磺酸酯作為原料，根據(jù)實(shí)施例17步驟A、B和C中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn)物。反式非對映異構(gòu)體為洗脫過程中第二組分。步驟B 1-[3-(甲基氨基)丙基]-2-巰基環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋順式非 對映異構(gòu)體)
采用上面步驟中獲得的化合物為原料，根據(jù)實(shí)施例1步驟G、I和J中所述方法，獲 得目標(biāo)產(chǎn)物。[M+H]+ 的 CAD/MS/MS 譜=218. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。實(shí)施例23 :2_巰基-1-(氮雜環(huán)丁烷-3-基甲基)_環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消 旋順式非對映異構(gòu)體)步驟A :3_ ({1-(叔-丁基氧基羰基)-2-羥基-環(huán)戊基}甲基)氮雜環(huán)丁烷甲 酸芐基酯采用2-氧代-環(huán)戊烷甲酸芐基酯和3_{[(甲基磺酰基)氧基]甲基}氮雜環(huán)丁 烷-1-氨基甲酸叔_ 丁基酯作為原料，根據(jù)實(shí)施例7步驟A和B中所述方法，獲得目標(biāo)產(chǎn) 物。步驟B :3_ ({1-(叔-丁基氧基羰基)-2-[(甲基磺?；?氧基]環(huán)戊基}甲基)_1 氮雜環(huán)丁烷甲酸芐基酯(外消旋反式非對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物為原料，根據(jù)實(shí)施例19步驟D中所述方法，獲得目 標(biāo)產(chǎn)物。產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜純化，采用二氯甲烷/乙酸乙酯(9/1-8/2梯度洗脫)混合物作為 洗脫液，得到為無色油狀物的目標(biāo)產(chǎn)物。反式非對映異構(gòu)體為洗脫過程中的第二組分。步驟C 2-巰基-1-(氮雜環(huán)丁烷-3-基甲基)_環(huán)戊烷甲酸三氟乙酸鹽(外消旋 順式非對映異構(gòu)體)采用上面步驟中獲得的化合物為原料，根據(jù)實(shí)施例19步驟F中所述方法，獲得目 標(biāo)產(chǎn)物。[M+H]+ 的 CAD/MS/MS 譜=216. 1，與預(yù)期結(jié)構(gòu)相符。藥理學(xué)研究實(shí)施例24 =TAFIa的抑制在氯化鈣存在下，純化的人類TAFI (25ng)通過加入凝血酶-血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物 激活。于20°C溫育20分鐘后，反應(yīng)通過加入不可逆轉(zhuǎn)的凝血酶抑制劑PPACK(TAFI活性試劑盒，American Diagnostica)中it。將實(shí)驗(yàn)化合物加至(3. 2nM)TAFIa溶液中，于20°C溫育5分鐘。加入顯色TAFIa底 物，然后于37°C溫育30分鐘。通過加入硫酸(TAFI活性試劑盒，American Diagnostica) 中止反應(yīng)。采用分光光度計(jì)(Spectramax，Molecular Devices)于490nm處測定溶液的光 密度(OD)。自每一個測定的OD值減去含有試劑不含TAFI的孔中的OD值。采用下列方程 式測定給定濃度的實(shí)驗(yàn)化合物的TAFIa抑制百分率抑制％ = 100-[(化合物的ODX 100) /載體的0D]根據(jù)S形四參數(shù)方程(作用_劑量)，采用非線性回歸，自濃度逐漸增加的實(shí)驗(yàn)化 合物的測定OD值的抑制百分率計(jì)算能夠抑制50% TAFIa的酶活性的本發(fā)明化合物的濃度 (IC50) 0獲得的本發(fā)明的具有代表性的化合物的IC5tl值在下表中以nM表示 實(shí)施例25:藥用組合物-片劑
制備1000粒片劑的配方，每片含有IOmg活性成分
實(shí)施例1-23之一的化合物IOg
羥丙基纖維素2g
小麥淀粉IOg
乳糖IOOg
硬脂酸鎂3g
滑石粉3g
實(shí)施例26 藥用組合物-片劑，含有華法令
制備1000粒片劑的配方，每片含有IOmg活性成分
實(shí)施例1-23之一的化合物IOg
華法令2g
羥丙基纖維素2g
小麥淀粉IOg
乳糖IOOg
硬脂酸鎂3g
滑石粉g
實(shí)施例27 藥用組合物-片劑，含有阿司匹林
制備1000粒片劑的配方，每片含有IOmg活性成分
實(shí)施例1-23之一的化合物IOg
阿司匹林IOOg
羥丙基纖維素2g
小麥淀粉IOg
乳糖IOOg
硬脂酸鎂3g
滑石粉3g
實(shí)施例28 注射液，含有阿替普酶
制備IOmL溶液的配方
實(shí)施例1-23之一的化合物20mg
阿替普酶IOmg
L-精氨酸350 μ g
吐溫80Img
磷酸q. s. p. pH7
注射用水10mL。
權(quán)利要求
式(I)化合物、其光學(xué)異構(gòu)體以及其與可藥用酸形成的加成鹽其中R1代表氫原子或式COR4基團(tuán)，其中R4代表線性或支鏈C1 C6烷基或芳基，或者R1代表式(A)基團(tuán)R2代表式NR5R6基團(tuán)，其中R5和R6為相同或不同的，每一個均代表氫原子或直鏈或支鏈C1 C6烷基，或者R2代表含氮雜環(huán)基團(tuán)、芳基或雜芳基，R3代表氫原子或線性或支鏈C1 C6烷基，m代表1 6的整數(shù)，包含1和6，n代表0、1或2。FSA00000160097800011.tif,FSA00000160097800012.tif
2.權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中R代表氫原子。
3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的式(I)化合物，其中R2代表氨基或吡啶基。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的式(I)化合物，其中R3代表氫原子。
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的式(I)化合物，其中m代表3。
6.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的式(I)化合物，其中n代表1。
7.權(quán)利要求1的式(la)化合物
8.權(quán)利要求1的式(I)化合物，所述化合物選自(1R，2S)-1-(3-氨基丙基)-2-巰基環(huán)戊烷甲酸、其光學(xué)異構(gòu)體及其與可藥用酸形成的 加成鹽，和(1R，2S) -2-乙?；虼?1- (3-氨基丙基)-環(huán)戊烷甲酸、其光學(xué)異構(gòu)體及其與可藥用 酸形成的加成鹽。
9.合成權(quán)利要求1的式(I)化合物的方法，采用式(II)化合物作為起始原料 其中n代表0、1或2，G代表羧基官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)， 使其與式(III)化合物反應(yīng) 其中X代表鹵素原子或三氟甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或甲磺酸酯基， m代表1-6的整數(shù)，包括1和6，R' 2代表式NR' 5R' 6基團(tuán)，其中R' 5和1 ' 6可以是相同或不同的，每一個均代表 氨基官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)或直鏈或支鏈Ci-Ce烷基，或R' 2代表被氨基官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)任 選取代的含氮雜環(huán)基團(tuán)，或R' 2代表芳基或雜芳基， 獲得式(IV)化合物 其中R' 2、G、m和n如上文所定義， 將其采用用于氧代官能團(tuán)的還原劑處理， 獲得式(V)化合物 其中R' 2、G、m和n如上文所定義，將其與甲磺酰氯、甲苯磺酰氯、三氟甲磺酸酐或鹵化試劑反應(yīng)， 獲得式(VI)化合物RV(CH2)m\ /C°2G(VI)其中R' 2、G、m和n如上文所定義，X代表甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或三氟甲磺酸酯 基或鹵素原子，當(dāng)需要時(shí)，將其非對映異構(gòu)體分離獲得單一非對映異構(gòu)體形式的式(I)化合物，然后，將其與式(VII)化合物反應(yīng)MS-(CO)-R' ！ (VII),其中M代表鉀、鈉或鋰，R'工代表烷基或芳基，獲得式(VIII)化合物 (viii)其中r' i、r' 2、g、m和n如上文所定義，當(dāng)需要時(shí)，其對映異構(gòu)體可以通過手性色譜分離，從而獲得單一對映異構(gòu)體形式的式 ⑴化合物，如果適當(dāng)?shù)脑?，可以將其硫醇、氨基和羧基官能團(tuán)脫保護(hù)，獲得式(i)化合物，當(dāng)需要時(shí)，將其與相應(yīng)的酸反應(yīng)，獲得式(i)化合物與可藥用酸的加成鹽。
10.制備權(quán)利要求7的式(la)化合物的方法，該方法采用式(ii)化合物作為起始原料 (ii)其中n代表0、1或2，g代表羧基官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán) 在不對稱催化劑存在下，將其與丙烯醛反應(yīng)， 獲得構(gòu)型為(1r)或(1s)的式(ix)化合物 (ix)其中n和g如上文所定義， 將其醛官能團(tuán)還原，獲得式(x)化合物 (x)其中n和g如上文所定義，將其與甲磺酰氯、甲苯磺酰氯、三氟甲磺酸酐或鹵化試劑反應(yīng)，獲得式(xi)化合物 其中n和g如上文所定義，x代表鹵素原子或三氟甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或甲磺酸匕曰酉將其酮官能團(tuán)在還原劑的作用下還原，獲得式(xii)化合物 其中n、g和x如上文所定義， 將其與式(xiii)化合物反應(yīng) nhr" 5r" 6 (xiii)，其中r〃 5和1 〃 6各自代表氨基官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)或線性或支鏈ci-q烷基， 獲得式(xiv)化合物 其中n、g、r〃 5和1 〃 6如上文所定義，將其與甲磺酰氯、甲苯磺酰氯、三氟甲磺酸酐或鹵化試劑反應(yīng)，獲得式(xv)化合物 其中n、G、R" 5和1 " 6如上文所定義，X代表甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或三氟甲磺酸 酯基或鹵素原子，然后將其與式(VII)化合物反應(yīng) 其中M代表鉀、鈉或鋰，R'工代表烷基或芳基，獲得式(XVI)化合物其中n、R' i、G、R〃 5和1 〃 6如上文所定義，如果適當(dāng)?shù)脑?，將其硫醇、氨基和羧基官能團(tuán)脫保護(hù)，獲得式(la)化合物，當(dāng)需要時(shí)，將其與相應(yīng)的酸反應(yīng)，獲得式(la)化合物與可藥用酸的加成鹽。
11.藥用組合物，該藥用組合物含有權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的式(I)化合物以及一或多 種惰性、無毒、可藥用的賦形劑或載體。
12.權(quán)利要求11的藥用組合物，其特征在于它另外含有纖溶藥物、抗凝藥物或抗血小 板藥物。
13.可注射形式的權(quán)利要求11的藥用組合物，其特征在于它另外含有選自重組tPA、重 組uPA和鏈激酶的纖溶藥物。
14.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的化合物在生產(chǎn)用于預(yù)防、二級預(yù)防或治療下列疾病的藥 物中的用途心肌梗塞、心絞痛、下肢動脈炎、靜脈血栓形成、肺動脈栓塞、腦血管意外、糖尿 病血管并發(fā)癥、主動脈瘤或癡呆。
15.權(quán)利要求14的化合物的用途，所述化合物與纖溶藥物、抗凝藥物或抗血小板藥物 聯(lián)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及2-巰基環(huán)戊烷甲酸化合物、其制備方法和含有它們的藥用組合物。具體而言，本發(fā)明涉及式(I)化合物、其光學(xué)異構(gòu)體以及其與可藥用酸形成的加成鹽，在式(I)中，R1代表氫原子或式COR4基團(tuán)，或R1代表式(A)基團(tuán)，R2代表式NR5R6基團(tuán)，或者R2代表含氮雜環(huán)基團(tuán)、芳基或雜芳基，R3代表氫原子或烷基，m代表1-6的整數(shù)，包含1和6，n代表0、1或2。本發(fā)明還涉及包含所述化合物的藥物。
文檔編號A61P9/10GK101928241SQ20101021149
公開日2010年12月29日 申請日期2010年6月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月26日
發(fā)明者A·呂潘, A-F·吉尤齊克, G·德南特伊, J-C·奎恩, J-G·帕爾芒捷, M-O·瓦萊, N·博耶爾, P·朱博, P·格洛阿內(nèi)克, P·梅內(nèi)西耶, T·韋伯朗 申請人:瑟維爾實(shí)驗(yàn)室;國立魯昂應(yīng)用科學(xué)學(xué)院;國家科學(xué)研究中心;國立魯昂大學(xué)