專利名稱：核苷類化合物在制備治療腸病毒71(ev71)感染疾病藥物的應(yīng)用的制作方法
核苷類化合物在制備治療腸病毒71 (EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明是關(guān)于治療腸病毒71 (EV71)感染的化合物、藥物組合物，以及這類化合物的合成方法、制劑方法。具體地，本發(fā)明提供一類核苷類化合物，含有這類化合物的藥物組合物及這類化合物治療EV71感染的方法。
發(fā)明背景
手足口病(Hand-Foot-Mouth disease,HFMD)又名發(fā)疹性水皰口腔炎，是由腸道病毒引起的全球性常見傳染病，世界大部分國(guó)家和地區(qū)均有此病流行的報(bào)導(dǎo)。該疾病主要通過糞-口途徑和呼吸道進(jìn)行傳播，傳染性強(qiáng)、極易導(dǎo)致流行或暴發(fā)。手足口病以嬰幼兒發(fā)病為主，大多數(shù)患者癥狀輕微，以發(fā)熱和手、足、口腔等部位的皮疹或皰疹為主要特征。少數(shù)患者可并發(fā)無菌性腦膜炎、腦炎、急性弛緩性麻痹、呼吸道感染和心肌炎等，個(gè)別重癥患兒病情進(jìn)展快，易發(fā)生死亡。少年兒童和成人感染后多不發(fā)病，但能夠傳播病毒。臨床表現(xiàn)以發(fā)熱和手、足、口腔等部位的皮疹為主要臨床特征，更為嚴(yán)重的是，病毒還可以侵犯患者呼吸系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等引起腦炎、肺水腫、弛緩性麻痹、心肌炎等癥狀，病情進(jìn)展快，容易發(fā)生死亡。東南亞和中國(guó)一直以來都是人手足口病的高發(fā)地區(qū)，特別是近些年來，隨著人員流動(dòng)、病毒變異等多種因素的共同影響，該疾病在我國(guó)山東、河南、臺(tái)灣等省份發(fā)生了大爆發(fā)， 造成了上千例的嬰幼兒死亡病例，給患兒家庭帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)和精神損害。
病毒學(xué)和流行病學(xué)的研究證實(shí)，人腸道病毒71型(Entrovirus 71，EV71)是近年來爆發(fā)的人手足口病的主要病原體，同時(shí)還能引起無菌性腦膜炎(as印tic meningitis), 腦干腦炎(brain stem encephalitis)和脊髓灰質(zhì)炎樣的麻痹(poliomyelitis like paralysis)等多種與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的疾病。EV71近年來已經(jīng)引起多次流行，研究發(fā)現(xiàn)EV71 的基因型在流行中不斷變化，某些位點(diǎn)的基因突變引起EV71的致病性的改變，因此EV71的防治面臨著相當(dāng)大的壓力。目前尚未闡明EV71病毒形成病毒持久性及引起手足口病的具體機(jī)制，臨床上仍缺乏特異、有效的治療藥物，只能采取中藥或其他抗病毒藥進(jìn)行治療，研究表明，相當(dāng)多的參與者對(duì)該治療沒有產(chǎn)生有利的效果，臨床上不斷出現(xiàn)死亡病例。
因此，需要發(fā)展具有高效的特異性的用于手足口病的抗EV71病毒制劑。
EV71是1969等人首次從患有中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的嬰兒糞便標(biāo)本中分離得到，屬于小RNA病毒科腸病毒屬，病毒顆粒為典型的正二十面體結(jié)構(gòu)。其基因約由7，408 個(gè)核苷酸組成，屬單股正鏈RNA病毒，僅含有一個(gè)開放讀碼框(open-reading frame, 0RF)， 編碼2194個(gè)氨基酸構(gòu)成的多聚蛋白(polyprotein)，在基因組兩側(cè)分別為746bp的5’非編碼區(qū)(UTR)和83bp的3’非編碼區(qū)。EV71基因組編碼的多聚蛋白(polyprotein)約含 2，193個(gè)氨基酸。在受感染的細(xì)胞內(nèi)，該多聚蛋白被水解成為P1、P2、P3三個(gè)前體蛋白。經(jīng)過細(xì)胞和病毒的蛋白酶進(jìn)一步的剪切，Pl前體蛋白可以進(jìn)一步成熟為VP1、VP2、VP3和VP4 四個(gè)病毒結(jié)構(gòu)蛋白，負(fù)責(zé)病毒顆粒的裝配和穩(wěn)定；P2前體蛋白則進(jìn)一步成熟為非結(jié)構(gòu)蛋白 (non-structural protein, nsp) 2A(特異性蛋白酶)、2B和2C ；P3前體蛋白則用以形成非結(jié)構(gòu)蛋白3A、3B(VPg，5，末端結(jié)合蛋白)、3C(特異性蛋白酶)和3D(RNA-cbpendent RNApolymerase, RdRp)。
在這七種非結(jié)構(gòu)蛋白中，3D蛋白是一個(gè)RNA依賴的RNA聚合酶，在病毒的增殖復(fù)制期起到了非常重要的作用，它一方面以病毒RNA為模板復(fù)制子代病毒的基因，另一方面也將病毒增殖期間需要的蛋白質(zhì)和酶類的基因轉(zhuǎn)錄成為mRNA，所以它擔(dān)負(fù)了復(fù)制酶和轉(zhuǎn)錄酶雙重功能。抑制RNA聚合酶的功能被認(rèn)為可以阻斷病毒蛋白的復(fù)制，因此可被特異性識(shí)別的選擇性小分子抑制這種RNA聚合酶的作用是治療EV71病毒感染的有效手段，RNA聚合酶成為治療手足口病的重要藥物靶點(diǎn)。
最近幾年已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一些RNA聚合酶的酶活性的小分子抑制劑。例如以下專利申請(qǐng)案=US 6，815，444 ；US 7，259，174 ；US 7，501，445 ；US 7，129，359。
本發(fā)明提供了一種新型的核苷類RNA聚合酶抑制劑在制備治療腸病毒71 (EV71) 感染疾病藥物的應(yīng)用。作為病毒RNA依賴的RNA聚合酶抑制劑，Novartis于2008年申請(qǐng)了專利(W02008/09599;3)，闡述了該系列化合物針對(duì)登革熱病毒，西尼羅病毒，黃病毒等都具有很強(qiáng)的抑制活性，其中化合物VIII(NITD008)作為世界上第一個(gè)治療登革熱病毒感染的試驗(yàn)性藥物，該研究成果在2009年底發(fā)表在PNAS(ftx)c. Natl. Acad. Sci. USA 2009， 106 08) ,20435-20439)，并受到廣泛關(guān)注，Nature Rev. Drug. Discov.于 2010 年 1 月作為研究亮點(diǎn)，專文進(jìn)行了介紹(Nature Rev. Drug. Discov.，2010，9 (1)，21)。
本發(fā)明通過生物活性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)化合物VIII對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)中的EV71病毒顯示了非常好的抑制活性，同時(shí)化合物I，II，III等也顯示了良好的EV71病毒的抑制活性。
本發(fā)明的目標(biāo)是提供一類核苷化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及式(I)的核苷類化合物和/或藥學(xué)上可接受的鹽和/或水合物制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用。這些化合物作為其藥學(xué)上可接受的鹽和/或水合物，或者作為藥物組合物成分(無論其是否與其他治療手足口病的抗病毒劑，抗感染藥， 免疫調(diào)節(jié)劑或抗生素同時(shí)給藥)而用于抑制EV71病毒的RNA聚合酶，或者預(yù)防/治療一項(xiàng)或多項(xiàng)EV71病毒感染癥狀。
更具體的說，本發(fā)明涉及式⑴化合物和/或藥學(xué)上可接受的鹽和/或水合物制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用
權(quán)利要求
1.通式I的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用
2.如權(quán)利要求1所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，R1 可以是鹵素，NR4I 5，OR6A6選自氫，烷基，烯基，炔基，&優(yōu)先選自低碳烷基，例如甲基，乙基， 丙基，丁基。R4與&獨(dú)立地選自于氫，烷基，烯基，炔基。
3.如權(quán)利要求1所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，& 可以是氫，NR4Ii5。R4與&獨(dú)立地選自于氫，烷基，烯基，炔基，例如NR4Ii5可以是NH2或Mffi5。 R2可以表示鹵素。
4.如權(quán)利要求1所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，其中R3的芳基是苯基。
5.如權(quán)利要求1所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，其中R3的雜芳基是五_、六-或七-員的飽和或不飽和的雜環(huán)，含有一至四個(gè)選自氧，氮和硫的雜原子。包括吡咯基，咪唑基，吡唑基，噻唑基，噁唑基，異噁唑基，1,2,3-三唑基，1，2-噻二唑基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，1,2,4-三嗪基，苯并噁唑基，苯并噻唑基，喹啉基。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，R3 為咪唑基，吡咯基。
7.如權(quán)利要求1所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，鹵素是Cl或Br。
8.如權(quán)利要求1所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，X是 N, CH, CR7。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，X 是N，R1可以是氨基，鹵素，NHR8, R2可以是氫。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用， &可以選自C1-6烷基羰基，C1-8烷氧羰基，C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，C3-8環(huán)烷基，芳基C1-6烷基，雜芳基C1-9烷基，芳基，雜芳基，芳基C2-6烯基，雜芳基C2-6烯基，芳基C2-6炔基，雜芳基C2-6炔基，或者被任選一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代。
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，X 可以表示CR7，其中R7表示氧，商素，氨基，羥基，巰基，硝基，低碳烷基，低碳烯基，低碳炔基， 芳基，雜芳基，或者被任選一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代。
12.如權(quán)利要求1所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，烷基和環(huán)烷基可以被以下任選一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代鹵素，羥基，氨基，亞胺基，叔胺基，巰基，硝基，疊氮基團(tuán)，商C1-8烷基，C1-8烷氧基，C1-6烷基羰基，C1-6烷硫基，C1-8烷氧羰基。
13.如權(quán)利要求1所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，烯基和炔基可以被以下任選一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代鹵素，羥基，氨基，亞胺基，叔胺基，巰基， 硝基，疊氮基團(tuán)，商C1-8烷基，C1-8烷氧基，C1-6烷基羰基，C1-6烷硫基，C1-8烷氧羰基。
14.如權(quán)利要求1所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，芳基，雜芳基或雜環(huán)烷基可以被以下任選一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代鹵素，羥基，氨基，亞胺基， 叔胺基，巰基，硝基，疊氮基團(tuán)，C1-8烷氧基，C1-6烷基羰基，C1-8烷氧羰基。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用， 其中所述的化合物包括以下實(shí)例但不局限于此
16.一種藥物組合物，其包括有效量的權(quán)利要求1-15中任何一項(xiàng)所述的化合物， 或其在藥物上可接受的鹽，與其在藥學(xué)上可接受的載體介質(zhì)或助劑，在制備治療腸病毒 7KEV71)感染疾病藥物的應(yīng)用。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的藥物組合物，其進(jìn)一步包括選自EV71抗病毒劑，免疫調(diào)節(jié)劑和抗感染的第二治療劑，在制備治療腸病毒71 (EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用。
18.按權(quán)利要求16，17的方法，其中所述的其他抗EV71病毒制劑是選自3C蛋白酶抑制劑和VPl蛋白抑制劑的抗病毒制劑。
19.按照權(quán)利要求16的藥物組合物，其用于制造供治療哺乳動(dòng)物的EV71病毒感染的藥
全文摘要
本發(fā)明涉及核苷類化合物(I)在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用，還涉及其各種光學(xué)異構(gòu)體，藥學(xué)上可接受的鹽，溶劑合物以及前藥在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及含有式(I)結(jié)構(gòu)核苷類化合物的藥物組合物在制備治療腸病毒71(EV71)感染疾病藥物的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P25/00GK102526087SQ20101061312
公開日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2010年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月30日
發(fā)明者婁智勇, 尚魯慶, 尹正, 楊誠(chéng), 王亞鑫, 饒子和 申請(qǐng)人:南開大學(xué), 天津市國(guó)際生物醫(yī)藥聯(lián)合研究院高通量分子藥物篩選中心, 清華大學(xué)