專利名稱：一種用于抗癌藥物釋放的殼聚糖微球的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于抗癌藥物釋放的殼聚糖微球的制備方法。
背景技術(shù)：
紫杉醇是紅豆杉屬植物中的提取的一種治療癌癥的二萜類化合物，具有穩(wěn)定微管并促進(jìn)其聚合和組裝的作用，是對實(shí)體瘤和白血病有良好前景的抗癌藥。卵磷脂是一類含有磷元素的脂肪化合物，不但可以保護(hù)肝臟，還能降低血清膽固醇含量，此外，還能促進(jìn)大腦發(fā)育，增強(qiáng)記憶力。卵磷脂具有良好的保健作用，將其應(yīng)用在微球體系作為油相，不需要額外去除。殼聚糖具有優(yōu)良的生物活性，如生物相容性、可降解性、抗菌消炎性、無毒性和促進(jìn)傷口愈合等性能，近年來在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域越來越受到青睞，可作為組織工程支架材料、皮膚組織傷口輔料、藥物載體等。殼聚糖微球是目前應(yīng)用較多的藥物緩釋形式，其以優(yōu)良的緩釋性能在臨床藥物中廣泛應(yīng)用，其可靶向分布于腫瘤組織，能加強(qiáng)藥物的穿透性和滯留性，提高藥物的穩(wěn)定性及生物利用度，降低全身血藥濃度，減少副反應(yīng)。殼聚糖特有的性質(zhì)使其成為新型的藥物載體，除具備殼聚糖的一般特性外，還擁有一些納米材料的普遍特征，如表面與界面效應(yīng)、小尺寸效應(yīng)和量子尺寸效應(yīng)等，所以在組織工程及藥物運(yùn)載中表現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。殼聚糖米微球的制備方法主要有以下幾種乳化交聯(lián)法，乳化溶劑蒸發(fā)法，乳化內(nèi)部凝膠化法， 復(fù)乳法，離子交換法，噴霧干燥法，冷凍干燥法和包衣法等。近幾年殼聚糖衍生物的緩釋性能也更優(yōu)良，在微球、微囊、納米球、漂浮片等緩釋劑型中廣泛應(yīng)用。微球是目前作為緩釋劑型研究的熱點(diǎn)，制作方法以乳化交聯(lián)法最為常用， 其基本方法是將藥物分散于殼聚糖的醋酸溶液中，與含有表面活性劑的油相混合處理后， 再與戊二醛等交聯(lián)劑等乳化交聯(lián)變可以制成。殼聚糖微球作為一種新型的藥物和基因載體所展示出的優(yōu)點(diǎn)越來越受到人們的關(guān)注，隨著科技的發(fā)展進(jìn)步，殼聚糖微球載體將進(jìn)入更加廣泛的藥物治療領(lǐng)域，在眾多化學(xué)合成藥和天然藥物中取得突破。運(yùn)用先進(jìn)合成技術(shù)對殼聚糖微球表面進(jìn)行修飾，使其具有靶器官、靶組織和靶細(xì)胞所要求的選擇性，也是未來的發(fā)展趨勢。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于抗癌藥物釋放的殼聚糖微球的制備方法(1)將殼聚糖溶于2wt%的稀酸溶液中，配制成2% (w/v)的殼聚糖稀酸溶液作為水相，將紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇或丙酮中作為油相。(2)將適量乳化劑加入到油相，機(jī)械攪拌5-30min使其分散均勻，將水相逐滴加入油相，水浴加熱控制溫度30-70°C攪拌20-50min。(3)逐滴加入適量京尼平水溶液進(jìn)行交聯(lián)，并快速攪拌。(4)用0. 5-5wt%的妝!10)3溶液調(diào)反應(yīng)體系pH值，快速攪拌反應(yīng)l_10h，除去乙醇或丙酮，干燥即得殼聚糖納米微球。這一方法的主要優(yōu)點(diǎn)在于第一，卵磷脂是人體所必須的物質(zhì)之一，對人體無毒、 無副作用，我們采用卵磷脂是為油相而非乳化劑。第二，京尼平是一種環(huán)烯醚萜類雜環(huán)化合物，是天然生物的交聯(lián)劑。采用京尼平作交聯(lián)劑來進(jìn)一步減少細(xì)胞毒性。第三，在制備過程中加入紫杉醇，將藥物包覆在微球的內(nèi)部，提高粒子的載藥量，從而提高藥物的有效利用率。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1將殼聚糖(分子量為50，000)溶于2wt%的乙酸水溶液中，配制成2% (w/v)的殼聚糖乙酸水溶液作為水相，將紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇中作為油相，司班80加入到油相， lOOOr/min機(jī)械攪拌20min使其分散均勻，將水相逐滴加入油相，其中水相/油相為1 2， 紫杉醇的加入量為乙醇質(zhì)量的0.01%，軟磷脂為乙醇質(zhì)量的2%，司班的加入量為油相的 0.5% (ν/ν) 0水浴加熱控制溫度30°C攪拌20min。逐滴加入2%的京尼平溶液進(jìn)行交聯(lián)， 快速攪拌30min。用質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的NaHCO3溶液調(diào)反應(yīng)體系pH值為9，快速反應(yīng)10h，除去乙醇，真空干燥即可。所得微球的平均粒徑為5 μ m。實(shí)施例2將殼聚糖(分子量為100，000)溶于2wt%的甲酸水溶液中，配制成2% (w/v)的殼聚糖甲酸水溶液IOml作為水相，將紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇中作為油相，司班80加入到油相，2000r/min機(jī)械攪拌5min使其分散均勻，將水相逐滴加入油相，其中水相/油相為 1 2，紫杉醇的加入量為乙醇質(zhì)量的0.5%，軟磷脂為乙醇質(zhì)量的6%，司班的加入量為油相的2% (ν/ν) 0水浴加熱控制溫度40°C攪拌30min。逐滴加入lmL2%的京尼平溶液進(jìn)行交聯(lián)，快速攪拌30min。用質(zhì)量分?jǐn)?shù)1 %的NaHCO3溶液調(diào)反應(yīng)體系pH值為7. 5，快速反應(yīng) lh，除去乙醇，真空干燥即可。所得微球的平均粒徑為2 μ m。實(shí)施例3將殼聚糖(分子量為3，000)溶于2wt%的檸檬酸水溶液中，配制成2% (w/v)的殼聚糖檸檬酸水溶液IOml作為水相，將紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇中作為油相，司班80加入到油相，2500r/min機(jī)械攪拌30min使其分散均勻，將水相逐滴加入油相，其中水相/油相為 1 8，紫杉醇的加入量為乙醇質(zhì)量的2%，軟磷脂為乙醇質(zhì)量的3%，司班的加入量為油相的6% (ν/ν) 0水浴加熱控制溫度50°C攪拌50min。逐滴加入lmL2%的京尼平溶液進(jìn)行交聯(lián)，快速攪拌30min。用質(zhì)量分?jǐn)?shù)1 %的NaHCO3溶液調(diào)反應(yīng)體系pH值為6. 5，快速反應(yīng)2h， 除去乙醇，真空干燥即可。所得微球的平均粒徑為830nm。實(shí)施例4將殼聚糖(分子量為5，000)溶于2wt%的羥基乙酸水溶液中，配制成2% (w/v) 的殼聚糖羥基乙酸水溶液IOml作為水相，將紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇中作為油相，將司班 85加入到油相，2000r/min機(jī)械攪拌IOmin使其分散均勻，將水相逐滴加入油相，其中水相 /油相為1 4，紫杉醇的加入量為乙醇質(zhì)量的1%，軟磷脂為乙醇質(zhì)量的10%，司班的加入量為油相的10% (ν/ν) 0水浴加熱控制溫度40°C攪拌30min。逐滴加入lmL2%的京尼平溶液進(jìn)行交聯(lián)，快速攪拌50min。用質(zhì)量分?jǐn)?shù)2 %的NaHCO3溶液調(diào)反應(yīng)體系pH值為7，快速反應(yīng)池，除去乙醇，真空干燥即可。所得微球的平均粒徑為1 μ m。實(shí)施例5將殼聚糖(分子量為200，000)溶于2wt%的乳酸水溶液中，配制成2% (w/v)的殼聚糖乳酸水溶液IOml作為水相，將紫杉醇和卵磷脂溶于丙酮中作為油相，司班83加入到油相，2500r/min機(jī)械攪拌20min使其分散均勻，將水相逐滴加入油相，其中水相/油相為 1 3，紫杉醇的加入量為丙酮質(zhì)量的2%，軟磷脂為丙酮質(zhì)量的8%，司班的加入量為油相的(ν/ν) 0水浴加熱控制溫度70°C攪拌50min。逐滴加入2%的京尼平溶液進(jìn)行交聯(lián)， 快速攪拌20min。用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0. 5%的NaHCO3溶液調(diào)反應(yīng)體系pH值為5，快速反應(yīng)5h，除去丙酮，真空干燥即可。所得微球的平均粒徑為2. 5μπι。實(shí)施例6將殼聚糖(分子量為10，000)溶于2wt%的丙二酸水溶液中，配制成2% (w/v)的殼聚糖丙二酸水溶液IOml作為水相，將紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇中作為油相，司班80加入到油相，1500r/min機(jī)械攪拌5min使其分散均勻，將水相逐滴加入油相，其中水相/油相為 1 5，紫杉醇的加入量為乙醇質(zhì)量的0.7%，軟磷脂為乙醇質(zhì)量的5%，司班的加入量為油相的3% (ν/ν) 0水浴加熱控制溫度40°C攪拌50min。逐滴加入1 %的京尼平溶液進(jìn)行交聯(lián)，快速攪拌30min。用質(zhì)量分?jǐn)?shù)1 %的NaHCO3溶液調(diào)反應(yīng)體系pH值為4. 5，快速反應(yīng)7h， 除去乙醇，真空干燥即可。所得微球的平均粒徑為3 μ m。
權(quán)利要求
1.一種用于抗癌藥物釋放的殼聚糖微球的制備方法，其方法如下步驟(1)將殼聚糖溶于的稀酸溶液中，配制成2%(w/v)的殼聚糖稀酸溶液作為水相， 將紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇或丙酮中作為油相。(2)將適量乳化劑加入到油相，機(jī)械攪拌5-30min使其分散均勻，將水相逐滴加入油相，水浴加熱控制溫度30-70°C攪拌20-50min。(3)逐滴加入京尼平水溶液進(jìn)行交聯(lián)，并快速攪拌。(4)用0.5-5wt%的妝!10)3溶液調(diào)反應(yīng)體系pH值，快速攪拌反應(yīng)l_10h，除去乙醇或丙酮，干燥即得殼聚糖納米微球。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟1中的殼聚糖的分子量為 3000-200，000。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟1中的稀酸溶液的酸包括甲酸、乙酸、檸檬酸、羥基乙酸、乳酸、丙二酸。
4.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟1中的水相/油相為1 2-1 8， 紫杉醇的加入量為乙醇或丙酮質(zhì)量的0. 01-1%，軟磷脂為乙醇或丙酮質(zhì)量的2-10%。
5.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟2中司班乳化劑包括司班80、司班 83或司班85，且其司班的加入量為油相的0. 5% -10% (ν/ν)。
6.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟3中京尼平水溶液為Iwt% -2wt%0
7.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟2、3、4中攪拌的轉(zhuǎn)速 1000-2500rpm。
8.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟4中反應(yīng)體系的pH值為4-9。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于抗癌藥物釋放的殼聚糖微球的制備方法。該方法采用油包水技術(shù)，將殼聚糖溶于2wt％的稀酸溶液中，配制成2％(w/v)的殼聚糖稀酸溶液作為水相，將紫杉醇和卵磷脂溶于乙醇或丙酮中作為油相，將適量司班80加入到油相，機(jī)械攪拌5-30min使其分散均勻，將水相逐滴加入油相，水浴加熱控制溫度30-70℃攪拌20-50min。逐滴加入適量京尼平水溶液進(jìn)行交聯(lián)，快速攪拌一定時(shí)間后，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5-5％的NaHCO3溶液調(diào)反應(yīng)體系pH值，快速攪拌反應(yīng)1-10h，除去乙醇或丙酮，干燥即得殼聚糖納米微球。
文檔編號A61K9/16GK102293751SQ20111016871
公開日2011年12月28日 申請日期2011年6月17日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月17日
發(fā)明者聶俊, 馬貴平 申請人:北京化工大學(xué)常州先進(jìn)材料研究院