專利名稱：豬血去蛋白提取物口腔膏及其制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種豬血去蛋白提取物，尤其涉及一種豬血去蛋白提取物口腔膏，以及該豬血去蛋白提取物口腔膏的制備工藝。它是豬血去蛋白提取物的一種新劑型，本發(fā)明的豬血去蛋白提取物口腔膏劑是治療口腔粘膜、牙齦及嘴唇的損傷、炎癥或潰瘍、假牙托壓瘡等的藥物，屬于生物制藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
口腔潰瘍以口腔的唇、頰、軟腭或齒齦等處的粘膜多見，發(fā)生單個(gè)或者多個(gè)大小不等的圓形或橢圓形潰瘍，表面覆蓋灰白或黃色假膜，中央凹陷，邊界清楚，周圍粘膜紅而微腫，潰瘍局部灼痛明顯，具有周期性、復(fù)發(fā)性、自限性的特征。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為口腔潰瘍的發(fā)生是多種因素綜合作用的結(jié)果。免疫、遺傳和環(huán)境可能是口腔潰瘍發(fā)病的“三聯(lián)因素”，即遺傳背景與適當(dāng)?shù)沫h(huán)境因素，包括精神神經(jīng)體質(zhì)、心理行為狀態(tài)、生活工作和社會(huì)環(huán)境等，可引發(fā)異常的免疫反應(yīng)而出現(xiàn)口腔潰瘍特征性病損。目前仍無根治的特效方法，治療原則是消除病因、增強(qiáng)體質(zhì)、對(duì)癥治療，以減少復(fù)發(fā)次數(shù)，延長間隙期，減輕疼痛，促進(jìn)愈合。中國專利，專利號(hào)為ZL20051013M78.0，專利名稱“小牛血清去蛋白口腔膏及其制備方法”中公開了小牛血清去蛋白口腔膏，它提供了一種治療上述疾病的藥物，但此技術(shù)是以小牛血為原料的去蛋白提取物藥物制劑，受瘋牛病檢測(cè)方法的局限性、瘋牛病病毒滅活的限制性等因素，使得藥物效果不理想，由于輔料等的選擇，此藥物起效慢，療程長，在臨床應(yīng)用上受到廣泛的限制。雖然豬血去蛋白提取物具有促進(jìn)細(xì)胞對(duì)氧和葡萄糖的攝取等作用，但不能直接用于患者臨床應(yīng)用，并且此提取物是水溶液，儲(chǔ)存條件困難，只能冷凍保存，不僅耗電量大，一旦停電將直接影響其質(zhì)量。并且現(xiàn)有的豬血去蛋白提取物為注射制劑，其注射劑主要為治療腦血管疾病，并無口腔損傷、潰瘍治療研究的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種豬血去蛋白提取物口腔膏及其制備工藝，其具有起效快、療程短、治療效果好、安全性高、易于儲(chǔ)存的特點(diǎn)。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
一種豬血去蛋白提取物口腔膏，它是由下述原料按所述重量份數(shù)比制備而成豬血去蛋白提取物粉末0. 1-0. 3份，果膠15-20份，甘油5. 5-10. 5份，二甲基硅油9. 1-19. 35份， 白凡士林30-40份，液體石蠟20-30份，尼泊金甲乙酯0. 05-0. 1份。上述豬血去蛋白提取物口腔膏的最佳重量份數(shù)比為豬血去蛋白提取物粉末0. 2 份，果膠17. 5份，甘油7. 22份，二甲基硅油15份，白凡士林35份，液體石蠟25份，尼泊金甲乙酯0. 08份。上述豬血去蛋白提取物口腔膏的制備工藝，取符合所述重量份數(shù)的果膠、甘油、二甲基硅油、白凡士林、液體石蠟和尼泊金甲乙酯混合均勻，115-121 條件下高壓滅菌25-35分鐘，壓力為67kPa-97kPa，得基質(zhì)混合物，將符合所述重量份數(shù)的豬血去蛋白提取物粉末加入到基質(zhì)混合物中，混合均勻后，分裝，即得豬血去蛋白提取物口腔膏。上述的豬血去蛋白提取物粉末的制備工藝如下取非傳染區(qū)經(jīng)檢驗(yàn)合格的健康豬，采用無菌采血，去纖維蛋白，反復(fù)凍融，勻漿，分別用100000D、30000D、10000,6000D的中空纖維超濾柱依次進(jìn)行四級(jí)超濾，將最終超濾液裝入減壓濃縮罐，在55°C下采用射流真空泵抽真空進(jìn)行減壓濃縮至總固體含量40mg/ml以上，得豬血去蛋白提取物溶液，豬血去蛋白提取物溶液在溫度115-125°C、風(fēng)速2. 5m/s的條件下進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥后 45-55°C真空干燥M小時(shí)，80目過篩，即得豬血去蛋白提取物粉末。所述的分裝是分裝至藥用聚乙烯復(fù)合軟管中。由于采用上述技術(shù)方案使得本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)和效果
豬血去蛋白提取物是細(xì)胞代謝促進(jìn)劑，能增進(jìn)受損細(xì)胞對(duì)氧和葡萄糖的攝取和利用， 促進(jìn)纖維母細(xì)胞的生長，抑制細(xì)胞的損失，激發(fā)毛細(xì)血管形成，改善微循環(huán)，加速組織細(xì)胞的修復(fù)，提升機(jī)體免疫力，促進(jìn)受損粘膜與潰瘍愈合，使纖維重組，減少或避免瘢痕形成。此提取物是水溶性，儲(chǔ)存條件困難，只能冷凍保存，由于豬血去蛋白提取物直接用于患者臨床應(yīng)用，不易被受損表皮吸收，將其制成口腔膏劑可以局部給藥，迅速起效，控制潰瘍面積及其程度，預(yù)防潰瘍反復(fù)發(fā)作，易于儲(chǔ)存，給藥方便。本發(fā)明涉及的豬血去蛋白提取物口腔膏與專利號(hào)ZL20051013M78.0，專利名稱 “小牛血清去蛋白口腔膏及其制備方法”的制備的小牛血清去蛋白口腔膏相比較，能縮小潰瘍面積，加速傷口愈合，顯著減輕潰瘍充血，對(duì)口腔粘膜潰瘍有較好的治療效果，本發(fā)明藥物治療效果明顯優(yōu)于小牛血清去蛋白口腔膏。本發(fā)明未引入有機(jī)溶劑，保證藥物質(zhì)量。同時(shí)以小牛血為原料的去蛋白提取物，受瘋牛病檢測(cè)方法的局限性、瘋牛病病毒滅活的限制性等因素，影響了藥物效果，在臨床應(yīng)用上受到廣泛的限制。與以小牛血為來源的生物制品比較，以豬血為來源的生物制品其原料易得、成本低、高安全性、高生物活性等優(yōu)勢(shì)，彌補(bǔ)牛血制品存在的潛在風(fēng)險(xiǎn)，本發(fā)明豬血去蛋白提取物口腔膏的安全性和治療效果明顯高于小牛血清去蛋白口腔膏。本發(fā)明采用藥用聚乙烯復(fù)合軟管避免了普通鋁管易染菌、加劇潰瘍損傷的缺點(diǎn)， 保證產(chǎn)品不染菌，增加使用安全性。除了本發(fā)明采用了豬血去蛋白提取物外，其它原料與小牛血清去蛋白口腔膏的原料也不同，本發(fā)明經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)篩選得出果膠、甘油、二甲基硅油、白凡士林、液體石蠟、尼泊金甲乙酯混合作為基質(zhì)，由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出，果膠、甘油、二甲基硅油、白凡士林、液體石蠟、尼泊金甲乙酯這幾種原料不僅起到了基質(zhì)的作用，同時(shí)與豬血去蛋白提取物產(chǎn)生了協(xié)同作用，進(jìn)而提高了藥物的治療效果，穩(wěn)定性好。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例多本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受實(shí)施例所限。下述實(shí)施例中的方法，如無特別說明，均為常規(guī)方法。下述的實(shí)施例中的百分含量如無特別說明，均為質(zhì)量百分含量。實(shí)施例1 制備豬血去蛋白提取物粉末的制備
按照專利號(hào)為ZL200510046^9. 1，發(fā)明名稱為“從豬血中提取具有刺激細(xì)胞呼吸活性作用物質(zhì)的方法”中描述的制備方法取非傳染區(qū)經(jīng)檢驗(yàn)合格的健康豬，采用無菌采血，去纖維蛋白，得去纖維蛋白血10L，反復(fù)凍融(_20°C 40°CO2-4次；于2_8°C條件下在膠體磨中勻漿2分鐘，重復(fù)3次；取勻漿液于4000轉(zhuǎn)/分鐘離心20分鐘后，棄去沉淀；取上清液， 分別用100000D、30000D、10000、6000D的中空纖維超濾柱依次進(jìn)行四級(jí)超濾，得濾液7. 2L ； 將最終超濾液裝入減壓濃縮罐，在下采用射流真空泵抽真空進(jìn)行減壓濃縮至總固體含量40mg/ml以上，得豬血去蛋白提取物溶液1. 2L ；將豬血去蛋白提取物溶液在溫度120°C， 風(fēng)速2. 5m/s條件下進(jìn)行噴霧干燥，45-55°C真空干燥對(duì)小時(shí)，80目過篩，得豬血去蛋白提取物粉末48g。實(shí)施例2
豬血去蛋白提取物口腔膏的制備(含豬血去蛋白提取物粉末0. 1%，相當(dāng)于豬血去蛋白提取物溶液2. 5%) 1、基質(zhì)的制備
取果膠750g，甘油275g，二甲基硅油967. 5g，白凡士林2000g，液體石蠟lOOOg，尼泊金甲乙酯2. 5g，攪拌混勻，在115°C下高壓滅菌(67kPa) 30分鐘。2、豬血去蛋白提取物口腔膏分裝
取實(shí)施例1方法制備的豬血去蛋白提取物粉末5g與上述滅菌基質(zhì)混合均勻后，制成 5000g 口腔膏，用填充器分裝，分裝至中，每支5g，即得1000支豬血去蛋白提取物口腔膏。實(shí)施例3
豬血去蛋白提取物口腔膏的制備(含豬血去蛋白提取物粉末0. 15%，相當(dāng)于豬血去蛋白提取物溶液3. 75%) 1、基質(zhì)的制備
取果膠800g，甘油325g，二甲基硅油864. 5g，白凡士林1875g，液體石蠟1125g，尼泊金甲乙酯3. 25g，攪拌混勻，在120°C下高壓滅菌(75kPa) 25分鐘。2、豬血去蛋白提取物口腔膏分裝
取實(shí)施例1方法制備的豬血去蛋白提取物粉末7. 5g與上述滅菌基質(zhì)混合均勻后，制成 5000g 口腔膏，用填充器分裝，分裝至藥用聚乙烯復(fù)合軟管中，每支5g，即得1000支豬血去蛋白提取物口腔膏。實(shí)施例4
豬血去蛋白提取物口腔膏的制備(含豬血去蛋白提取物粉末0. 2%，相當(dāng)于豬血去蛋白提取物溶液5%) 1、基質(zhì)的制備
取果膠875g，甘油361g，二甲基硅油750g，白凡士林1750g，液體石蠟1250g，尼泊金甲乙酯4g，攪拌混勻，在115°C下高壓滅菌(67kPa) 30分鐘。2、豬血去蛋白提取物口腔膏的分裝
取實(shí)施例1方法制備的豬血去蛋白提取物粉末IOg與上述滅菌基質(zhì)混合均勻后，制成 5000g 口腔膏，用填充器分裝，分裝至藥用聚乙烯復(fù)合軟管中，每支5g，即得1000支豬血去蛋白提取物口腔膏。
實(shí)施例5
豬血去蛋白提取物口腔膏的制備(含豬血去蛋白提取物粉末0. 25%，相當(dāng)于豬血去蛋白提取物溶液6. 25%) 1、基質(zhì)的制備
取果膠925g，甘油450g，二甲基硅油608g，白凡士林1625g，液體石蠟1375g，尼泊金甲乙酯4. 5g，攪拌混勻，在115°C下高壓滅菌(97kPa) 25分鐘。2、豬血去蛋白提取物口腔膏的分裝
取實(shí)施例1方法制備的豬血去蛋白提取物粉末12. 5g與上述滅菌基質(zhì)混合均勻后，制成5000g 口腔膏，用填充器分裝，分裝至藥用聚乙烯復(fù)合軟管中，每支5g，即得1000支豬血去蛋白提取物口腔膏。實(shí)施例6
豬血去蛋白提取物口腔膏的制備(含豬血去蛋白提取物粉末0. 3%，相當(dāng)于豬血去蛋白提取物溶液7. 5%) 1、基質(zhì)的制備
取果膠lOOOg，甘油525g，二甲基硅油455g，白凡士林1500g，液體石蠟1500g，尼泊金甲乙酯5g，攪拌混勻，在121°C下高壓滅菌(75kPa) 35分鐘。2、豬血去蛋白提取物口腔膏的分裝
取實(shí)施例1方法制備的豬血去蛋白提取物粉末15g與上述滅菌基質(zhì)混合均勻后，制成 5000g 口腔膏，用填充器分裝，分裝至藥用聚乙烯復(fù)合軟管中，每支5g，即得1000支豬血去蛋白提取物口腔膏。實(shí)施例7
豬血去蛋白提取物口腔膏的制備(含豬血去蛋白提取物粉末0. 2%，相當(dāng)于豬血去蛋白提取物溶液5%)
豬血去蛋白提取物粉末為實(shí)施例1方法制得，用此豬血去蛋白提取物粉末替代小牛血去蛋白提取物，并按照專利號(hào)ZL20051013M78.0，專利名稱“小牛血清去蛋白口腔膏及其制備方法”中描述的方法制備，制成1000支豬血去蛋白提取物口腔膏，每支5g。實(shí)施例8:
豬血去蛋白提取物口腔膏對(duì)豚鼠肝細(xì)胞呼吸活性的影響試驗(yàn) 樣品制備
試驗(yàn)藥制備豬血去蛋白提取物口腔膏分別按實(shí)施例2、3、4、5、6、7的方法制得。對(duì)照藥制備按照專利號(hào)ZL20051013M78. 0，專利名稱“小牛血清去蛋白口腔膏及其制備方法”的制備方法制備。肝細(xì)胞分離斷頭處死豚鼠，取肝重2g，于冷生理鹽水中剝除血管等纖維成分，置于Hank’ s液中漂洗廣2次，置1 10的Hank’ s液中，反復(fù)吹打制成細(xì)胞懸液。將懸液注入離心管，室溫放置5 10分鐘，吸去上層脂肪等雜物，反復(fù)三次，200目紗網(wǎng)過濾即得肝細(xì)胞懸液，備用。檢測(cè)采用瓦氏微量呼吸檢壓儀方法。反應(yīng)瓶中先加入Soerensen緩沖液1. Iml，加供試品0. ^iil，然后加肝勻漿液 1. 0ml，加10%氫氧化鈉溶液0. 2ml于具一小濾紙條的反應(yīng)瓶中間小杯。由于肝勻漿本身有耗氧作用，故實(shí)驗(yàn)時(shí)以Soerensen緩沖液0. 2ml代替供試品，其余試劑同樣品管，作為空白管。將裝好的反應(yīng)瓶按管號(hào)與測(cè)壓計(jì)相連，置37°C恒溫水浴中。開動(dòng)振蕩器振搖10分鐘 (75次/分)使反應(yīng)瓶內(nèi)外溫度一致。將測(cè)壓計(jì)右側(cè)柱液面調(diào)至150mm，記下左側(cè)液面初讀數(shù) (A)，然后關(guān)閉三向活塞，開始計(jì)時(shí)，反應(yīng)30分鐘記時(shí)后將測(cè)壓計(jì)右側(cè)柱液面再調(diào)至150mm， 記下左側(cè)液面讀數(shù)(B)。打開三向活塞，重復(fù)上述過程，進(jìn)行下一個(gè)30分鐘的反應(yīng)并記下左側(cè)液面初讀數(shù)(C)及30分鐘后的液面讀數(shù)(D)。實(shí)驗(yàn)過程中必須附加一套供校正用的溫壓計(jì)，在反應(yīng)瓶中加2. 5ml的Soerensen緩沖液，使其在與試驗(yàn)管完全相同的條件下試驗(yàn)，觀察其壓力的變化(Δ C)，以消除試驗(yàn)過程中溫度及大氣壓的影響。計(jì)算
QO2 ( μ 1 · 02/mg · h) =[ (A-B+C-D) XK1- Δ CXK2]/G/1 (QO2 彡 4. 0) 式中Kl為空白或樣品的反應(yīng)瓶常數(shù)，K2為溫壓計(jì)的反應(yīng)瓶常數(shù)，G為每Iml肝勻漿的干重(mg)，G= Δ ff/2-9. 3,9. 3 % Soerensen緩沖液的干重(mg)，I為反應(yīng)時(shí)間(小時(shí))。刺激指數(shù)(Si)=供試品QO2/空白QO2 (Si ^ 2.5)
表1各組藥物對(duì)豚鼠肝細(xì)胞呼吸活性的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果(i 士 s)
權(quán)利要求
1.豬血去蛋白提取物口腔膏，其特征在于它是由下述原料按所述重量份數(shù)比制備而成豬血去蛋白提取物粉末0. 1-0. 3份，果膠15-20份，甘油5. 5-10. 5份，二甲基硅油 9. 1-19. 35份，白凡士林30-40份，液體石蠟20-30份，尼泊金甲乙酯0. 05-0. 1份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬血去蛋白提取物口腔膏，其特征在于它是由下述原料按所述重量份數(shù)比制備而成豬血去蛋白提取物粉末0. 2份，果膠17. 5份，甘油7. 22份，二甲基硅油15份，白凡士林35份，液體石蠟25份，尼泊金甲乙酯0. 08份。
3.—種權(quán)利要求1所述的豬血去蛋白提取物口腔膏的制備工藝，其特征在于取符合所述重量份數(shù)的果膠、甘油、二甲基硅油、白凡士林、液體石蠟和尼泊金甲乙酯混合均勻，在 115-121°C條件下高壓滅菌25-35分鐘，壓力為67kPa_97kPa，得基質(zhì)混合物，將符合所述重量份數(shù)的豬血去蛋白提取物粉末加入到基質(zhì)混合物中，混合均勻后，分裝，即得豬血去蛋白提取物口腔膏。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的豬血去蛋白提取物口腔膏的制備工藝，其特征在于所述的豬血去蛋白提取物粉末的制備方法如下取非傳染區(qū)經(jīng)檢驗(yàn)合格的健康豬，采用無菌采血，去纖維蛋白，反復(fù)凍融，勻漿，分別用100000D、30000D、10000、6000D的中空纖維超濾柱依次進(jìn)行四級(jí)超濾，將最終超濾液裝入減壓濃縮罐，在下采用射流真空泵抽真空進(jìn)行減壓濃縮至總固體含量40mg/ml以上，得豬血去蛋白提取物溶液，豬血去蛋白提取物溶液在進(jìn)口溫度120°C、出口溫度65°C、風(fēng)速2. 5m/s的條件下進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥后45_55°C真空干燥M小時(shí)，80目過篩，即得豬血去蛋白提取物粉末。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的豬血去蛋白提取物口腔膏的制備工藝，其特征在于所述的分裝是分裝至藥用聚乙烯復(fù)合軟管中。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種豬血去蛋白提取物，尤其涉及一種豬血去蛋白提取物口腔膏，以及該豬血去蛋白提取物口腔膏的制備工藝，是用于治療口腔粘膜、牙齦及嘴唇的損傷、炎癥或潰瘍、假牙托壓瘡等疾病的藥物，屬于生物制藥技術(shù)領(lǐng)域。一種豬血去蛋白提取物口腔膏，它是由下述原料按所述重量份數(shù)比制備而成豬血去蛋白提取物粉末0.1-0.3份，果膠15-20份，甘油5.5-10.5份，二甲基硅油9.1-19.35份，白凡士林30-40份，液體石蠟20-30份，尼泊金甲乙酯0.05-0.1份。本發(fā)明是治療口腔粘膜、牙齦及嘴唇的損傷、炎癥或潰瘍、假牙托壓瘡等的藥物，它可以替代牛血為來源的同類生物制品，藥物安全性高，治療效果明顯優(yōu)于小牛血去蛋白口腔膏。
文檔編號(hào)A61K9/06GK102309522SQ201110284378
公開日2012年1月11日 申請(qǐng)日期2011年9月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月23日
發(fā)明者萬琳琳, 劉路, 徐麗穎, 李莉, 王光 申請(qǐng)人:沈陽斯佳科技發(fā)展有限公司