專利名稱：一種構(gòu)樹葉總黃酮提取物及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種構(gòu)樹葉總黃酮提取物及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
構(gòu)樹(Broussonetia papyrifera(L. ) Ven. t)為?？茦?gòu)樹屬植物，在我國大部分地區(qū)有分布，日本、越南、印度等國亦有分布，資源十分豐富。構(gòu)樹的成熟果實，稱為“楮實子”， 收載于歷版《中國藥典》，為常見中藥，具有補腎清肝、明目利尿的功效。構(gòu)樹葉又稱為楮葉， 性涼味甘，無毒，能清熱利濕，涼血止血，殺蟲解毒，可用于治療吐血、衄血、血崩、外傷出血、 水腫、疝氣、痢疾和癬瘡等。從20世紀80年代開始，人們即開始對構(gòu)樹的化學和藥理進行研究。如Lee等從構(gòu)樹的整株植物中分離得到了多個黃酮類化合物(Lee D，Bhat K，F(xiàn)ong H et al. Aromatase inhibitors from Broussonetia papyrifera[J]. J. Nat. Prod,2001,64(10) : 1286—1293)。 高允生等(高允生，邱玉芳，高聆等.構(gòu)葉醇提取物與黃酮苷對離體心房的抑制作用[J]. 中國藥理學通報，1988,4(2) =122-123)對構(gòu)樹葉的乙醇提取物(BPAE)與總黃酮苷(BPF) 對家兔和豚鼠離體心房的作用進行了研究，發(fā)現(xiàn)BPAE和BPF均有抑制家兔和豚鼠心房收縮的作用，且BPF的效價強度遠大于BPAE，證明了 BPF是構(gòu)樹抑制心房收縮的主要有效成分， 同時也說明了構(gòu)樹葉具有類似鈣拮抗劑的作用。但目前尚沒有關(guān)于構(gòu)樹葉總黃酮抗糖尿病作用的相關(guān)報道。中國專利申請“構(gòu)樹葉總黃酮提取物及其制備方法與應(yīng)用”，公開號為 CN101637503A，對構(gòu)樹葉抑菌抗炎的有效部位和有效成分進行了研究，公開了采用溶劑法、 聚酰胺法和打孔吸附樹脂法制備構(gòu)樹葉總黃酮；中國專利申請“一種構(gòu)樹葉總酚酸提取物及其在制備抗癌藥物中的應(yīng)用”，申請?zhí)枮?01110240305. 6，對構(gòu)樹葉抗癌的有效成分進行研究發(fā)現(xiàn)木脂素類成分抗癌活性較強，以綠原酸為指標，對抗癌有效部位進行了研究。糖尿病是一種常見的帶有遺傳傾向的內(nèi)分泌代謝病。目前我國糖尿病患者的人數(shù)約為4千萬，居世界各國之首，它是繼心腦血管和腫瘤之后人類的第三大致死疾病(周廣智.糖尿病有關(guān)問題進展.現(xiàn)代臨床醫(yī)學生物工程學雜志1999，5(1) :1)。；因此為了更好地開發(fā)和利用構(gòu)樹葉資源，有必要對構(gòu)樹葉的成分進行活性研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種構(gòu)樹葉總黃酮提取物及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明提供的構(gòu)樹葉總黃酮提取物的制備方法，包括如下步驟(1)用乙醇水溶液對構(gòu)樹葉進行提取至少一次得提取液；所述提取液經(jīng)濃縮得到濃縮液；(2)所述濃縮液經(jīng)脫脂溶劑進行脫脂后得到脫脂濃縮液；(3)所述脫脂濃縮液經(jīng)分離純化即得所述構(gòu)樹葉總黃酮提取物。上述的制備方法中，所述構(gòu)樹葉包括葉片和葉柄；所述構(gòu)樹葉為粉末狀，粒度可為2目-60目。上述的制備方法中，步驟(1)中所述乙醇水溶液中乙醇的體積百分含量可為0 100 %，但不為0，優(yōu)選40 % 80 %，如70 % ；所述提取為回流提取、索氏提取、超聲提取或閃式提??；所述提取的次數(shù)為1 3次；每次所述提取的時間可為0. 5 3小時，如2小時。上述的制備方法中，步驟(1)中所述乙醇水溶液的用量為所述構(gòu)樹葉的質(zhì)量的 6 20倍，具體可為10倍；所述濃縮液與所述構(gòu)樹葉的重量份數(shù)比為O 1) 1，具體可為1.5 1 ；步驟O)中所述脫脂溶劑為石油醚或氯仿。上述的制備方法中，步驟(3)所述分離純化的方法為樹脂吸附法；所述樹脂吸附法中樹脂的用量為所述構(gòu)樹葉的質(zhì)量的0. 5 2倍，優(yōu)選1倍；所述樹脂吸附法的淋洗液依次為、體積百分含量為30 80%的乙醇水溶液(優(yōu)選為60%的乙醇水溶液)和體積百分含量為95%的乙醇水溶液，收集體積百分含量為30 80%的乙醇水溶液的洗脫液即可。上述的制備方法中，所述樹脂按照包括如下步驟的方法進行預(yù)處理將所述樹脂用體積百分含量為95%的乙醇水溶液依次經(jīng)浸泡和回流后即可；所述樹脂與所述體積百分含量為95%的乙醇水溶液的體積份數(shù)比可為1 2。本發(fā)明還提供了由上述方法制備的構(gòu)樹葉總黃酮提取物；該提取物包括式(I) (大波斯菊苷)、式(II)(木犀草素-7-0-β-D-葡萄糖苷)、式(III)(黑立脂素苷)、式(IV) (松脂醇-4' -Ο-β-D-葡萄糖-4〃 -Ο-β-D-芹糖苷)、式(V) (R = Glc(2-l)Rha，芹菜素-8-C- α -L-鼠李糖-(1 —幻-0- β -D-葡萄糖碳苷)、式(VI)(木犀草素-6_C_ β -D-葡萄糖碳苷)和式(VII) (R’ =Glc Glc木犀草素-8-C-β-D-葡萄糖苷(1-2)-0-β-D-葡
萄糖碳苷)所示化合物
權(quán)利要求
1. 一種構(gòu)樹葉總黃酮提取物的制備方法，包括如下步驟(1)用乙醇水溶液對構(gòu)樹葉進行提取至少一次得提取液；所述提取液經(jīng)濃縮得到濃縮液(2)所述濃縮液經(jīng)脫脂溶劑進行脫脂后得到脫脂濃縮液；(3)所述脫脂濃縮液經(jīng)分離純化即得所述構(gòu)樹葉總黃酮提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述構(gòu)樹葉包括葉片和葉柄；所述構(gòu)樹葉為粉末狀，粒度為2目-60目；步驟(1)中所述乙醇水溶液中乙醇的體積百分含量為0 100%，但不為0 ；所述提取為回流提取、索氏提取、超聲提取或閃式提?。凰鎏崛〉拇螖?shù)為1 3次；每次所述提取的時間為0. 5 3小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于步驟(1)中所述乙醇水溶液的用量為所述構(gòu)樹葉的質(zhì)量的6 20倍；所述濃縮液與所述構(gòu)樹葉的重量份數(shù)比為O 1) 1 ； 步驟O)中所述脫脂溶劑為石油醚或氯仿。
4.根據(jù)權(quán)利要求1 3中任一所述的方法，其特征在于步驟(3)所述分離純化的方法為樹脂吸附法；所述樹脂吸附法中樹脂的用量為所述構(gòu)樹葉的質(zhì)量的0. 5 2倍；所述樹脂吸附法的淋洗液依次為體積百分含量為30 80%的乙醇水溶液和體積百分含量為95% 的乙醇水溶液，收集體積百分含量為30 80%的乙醇水溶液的洗脫液即可。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述樹脂按照包括如下步驟的方法進行預(yù)處理將所述樹脂用體積百分含量為95%的乙醇水溶液依次經(jīng)浸泡和回流后即可；所述樹脂與所述體積百分含量為95%的乙醇水溶液的體積份數(shù)比為1 2。
6.權(quán)利要求1-6中任一所述方法制備的構(gòu)樹葉總黃酮提取物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的總黃酮提取物，其特征在于所述提取物包括式(I)、式 (II)、式(III)、式(IV)、式(V)、式(VI)和式(VII)所示化合物
8.權(quán)利要求6或7所述構(gòu)樹葉總黃酮提取物在制備抗糖尿病藥物中的應(yīng)用。
9.一種抗糖尿病藥物，其活性成分為權(quán)利要求6或7所述提取物。
10.權(quán)利要求6或7所述構(gòu)樹葉總黃酮提取物在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種構(gòu)樹葉總黃酮提取物及其制備方法與應(yīng)用。該制備方法包括如下步驟(1)用乙醇水溶液對構(gòu)樹葉進行提取至少一次得提取液；所述提取液經(jīng)濃縮得到濃縮液；(2)所述濃縮液經(jīng)脫脂溶劑進行脫脂后得到脫脂濃縮液；(3)所述脫脂濃縮液經(jīng)分離純化即得所述構(gòu)樹葉總黃酮提取物。本發(fā)明提供的構(gòu)樹葉總黃酮提取物，按照比色法測定的總黃酮的重量含量為20％～70％，收率為1％～30％，藥理試驗證明，該構(gòu)樹葉總黃酮提取物可單獨或與其它藥物組合作為原料藥應(yīng)用于抗糖尿病藥物的制劑中。本發(fā)明提供的方法制備的構(gòu)樹葉總黃酮提取物中的總黃酮的純度高，且制備方法簡便實用，適合工業(yè)化生產(chǎn)；本發(fā)明提供的構(gòu)樹葉總黃酮提取物可用于制備抗糖尿病藥物。
文檔編號A61P3/10GK102423343SQ20111036649
公開日2012年4月25日 申請日期2011年11月17日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月17日
發(fā)明者張宏, 熊偉, 竇德強, 高思華 申請人:大連中植環(huán)境生物科技有限公司