專利名稱：遠(yuǎn)端缺血處理改進(jìn)心肌梗死之后的結(jié)果的用途的制作方法
遠(yuǎn)端缺血處理改進(jìn)心肌梗死之后的結(jié)果的用途
相關(guān)申請(qǐng)
本申請(qǐng)要求2010年3月31日提交的名稱為“遠(yuǎn)端缺血處理減輕心肌梗死之后的心功能不全和/或心力衰竭的用途(USE OF REMOTE ISCHEMIC CONDITIONING TO REDUCE HEART DYSFUNCTION AND/OR HEART FAILURE AFTER MYOCARDIAL INFARCTION) ”的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)序列號(hào)61/319，597的權(quán)益，其全部?jī)?nèi)容通過引用結(jié)合在此。
發(fā)明背景
心肌梗死(MI)存活者處于由MI引起的心肌重塑造成心功能不全/衰竭的重大風(fēng)險(xiǎn)。這種重塑與不良長(zhǎng)期預(yù)后相關(guān)，如一項(xiàng)5年隨訪研究中所示，據(jù)報(bào)道MI后充血性心力裳竭患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)聞10倍。心肌梗死的治療集中在減少缺血時(shí)間和將缺血后再灌注期間出現(xiàn)的損傷降低至最低程度。因此，許多療法的目標(biāo)在于盡可能地減小心臟梗死尺寸或完全預(yù)防它的出現(xiàn)。最近，已經(jīng)提出有意和暫時(shí)的缺血預(yù)處理以便降低如與MI —起出現(xiàn)的缺血性心臟損傷效應(yīng)。已經(jīng)假定這種預(yù)處理可以通過減小梗死尺寸而實(shí)質(zhì)上誘導(dǎo)心臟組織對(duì)后來的缺血事件(如MI)的耐受性并且因此導(dǎo)致更好的預(yù)后。
發(fā)明概述
本發(fā)明總體上涉及遠(yuǎn)端缺血處理(RIC)降低與MI相關(guān)的心功能不全/衰竭的發(fā)生率和/或嚴(yán)重性和/或延遲其發(fā)病的用途。本發(fā)明考慮了 RIC在正在經(jīng)歷或已經(jīng)歷MI 的受試者上的的用途。RIC可以在MI之前和/或期間和/或之后進(jìn)行，其條件是至少一次 RIC(包括唯一的RIC)是在MI期間或之后進(jìn)行的。在一些情況下，本發(fā)明進(jìn)一步考慮了受試者將經(jīng)歷一個(gè)以上的RIC方案。在一些重要的實(shí)施方案中，本發(fā)明考慮了在MI期間或之后或期間和之后對(duì)受試者進(jìn)行RIC。在一些實(shí)施方案中，重復(fù)進(jìn)行RIC，包括在MI期間和其后每天、每隔一天(即每?jī)商?、每三天或每四天至少一次，持續(xù)至少10天、至少20天、至少 28天、至少30天或更久。
因此，在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種方法，包括在MI期間和/或MI之后對(duì)一位受試者進(jìn)行重復(fù)RIC方案。該方法可以是一種用于改進(jìn)一位受試者在MI后的總體結(jié)果的方法，包括但不限于降低MI后心功能不全/衰竭的風(fēng)險(xiǎn)，降低與MI后的心功能不全/衰竭相關(guān)的癥狀的發(fā)生率、頻率和/或嚴(yán)重性，和/或延遲心功能不全/衰竭或其相關(guān)癥狀的發(fā)作，這些相關(guān)癥狀包括但不限于MI后的運(yùn)動(dòng)受限、心律不齊以及意外猝死。在另一個(gè)方面中，這些方法包括對(duì)一位患有MI的受試者進(jìn)行一個(gè)重復(fù)RIC方案，其中一個(gè)第一 RIC方案是在MI期間和/或之后(包括之后不久)進(jìn)行的，并且一個(gè)或多個(gè)后續(xù)RIC方案是在第一 RIC方案之后至少每7天、每6天、每5天、每4天、每3天或每2天或每天進(jìn)行的。
在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種包括對(duì)患有MI的受試者進(jìn)行一個(gè)重復(fù)RIC方案的方法，其中第一 RIC方案是在MI期間進(jìn)行的并且后續(xù)RIC方案是在第一 RIC方案之后每天進(jìn)行的。
在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種包括對(duì)已經(jīng)經(jīng)歷MI的受試者進(jìn)行一個(gè)重復(fù)RIC方案的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，在MI期間或在MI的36小時(shí)之內(nèi)、24小時(shí)之內(nèi)、12小時(shí)之內(nèi)、6小時(shí)之內(nèi)、3小時(shí)之內(nèi)、2小時(shí)之內(nèi)或I小時(shí)之內(nèi)任選地以局部或遠(yuǎn)端方式已經(jīng)對(duì)受試4者給予一個(gè)RIC方案。
在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種包括在MI之后對(duì)受試者進(jìn)行一個(gè)重復(fù)RIC方案的方法。在一些實(shí)施方案中，重復(fù)RIC方案是在MI的I周之內(nèi)或I月之內(nèi)開始的。在一些實(shí)施方案中，受試者在MI期間未曾經(jīng)歷在先的缺血處理。
在一些實(shí)施方案中，受試者在MI之前未曾經(jīng)歷缺血處理。在一些實(shí)施方案中，受試者在MI之前已經(jīng)歷缺血處理。在一些實(shí)施方案中，在MI之前的缺血處理是局部的或遠(yuǎn)端的。在一些實(shí)施方案中，在MI期間的缺血處理是局部的或遠(yuǎn)端的。應(yīng)當(dāng)了解的是，如在此所使用的缺血處理是一種對(duì)受試者進(jìn)行的有意方案，并且該方案不包括在MI期間“自然” 發(fā)生的缺血和再灌注階段。
在一些實(shí)施方案中，該方法不影響(例如減小)由MI引起的梗死尺寸(即在該方法下，梗死尺寸保持相對(duì)不變)。
在一些實(shí)施方案中，第一 RIC方案是在與MI相關(guān)的缺血期間進(jìn)行的。在一些實(shí)施方案中，第一遠(yuǎn)端缺血處理方案是在與MI相關(guān)的缺血后的再灌注期間進(jìn)行的。在一些實(shí)施方案中，第一 RIC方案是僅在與MI相關(guān)的缺血期間進(jìn)行的，或在與MI相關(guān)的缺血期間而且在其后每天、其后每?jī)商臁⑵浜竺咳?、其后每四天、其后每五天、其后每六天、或其后每七天進(jìn)行。
在一些實(shí)施方案中，后續(xù)RIC方案是在第一 RIC方案之后或在MI之后每三天、每?jī)商旎蛎刻爝M(jìn)行的。
在一些實(shí)施方案中，后續(xù)RIC方案是在MI之后一個(gè)月或多個(gè)月進(jìn)行的。在一些實(shí)施方案中，重復(fù)RIC方案包括在一天或多天內(nèi)的每天一個(gè)以上(例如，2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè))RIC方案。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，受試者為人類。在一些實(shí)施方案中，受試者未處于如在此更詳細(xì)描述的再狹窄風(fēng)險(xiǎn)中。在一些實(shí)施方案中，受試者不具有慢性醫(yī)學(xué)病癥，如高血壓。
每一 RIC方案的循環(huán)次數(shù)可以是兩次、三次、四次、五次、六次或更多次循環(huán)，并且各循環(huán)包含超收縮壓(supra-systolic pressure)和再灌注。在一些實(shí)施方案中，重復(fù)RIC 方案中的至少一個(gè)RIC方案包含至少四個(gè)循環(huán)。在一些實(shí)施方案中，重復(fù)RIC方案中的至少一個(gè)RIC方案包含一個(gè)以上的循環(huán)，包含5分鐘的超收縮壓和5分鐘的再灌注。在一些實(shí)施方案中，超收縮壓為至少超過收縮壓的一個(gè)絕對(duì)數(shù)的毫米汞柱的壓力，或該超收縮壓為超過收縮壓的一個(gè)百分比。超收縮壓可以是超過收縮壓5mmHg、10mmHg、15mmHg、20mmHg、 25mmHg>3OmmHg>35mmHg>40mmHg>45mmHg>5OmmHg 或更高 mmHg 的壓力。在一些實(shí)施方案中， 超收縮壓為超過收縮壓至少15mmHg并且可以擴(kuò)展到超過收縮壓20mmHg、25mmHg、30mmHg、 35mmHg、40mmHg、45mmHg、50mmHg或更高mmHg的壓力。在一些實(shí)施方案中，超收縮壓為比收縮壓大1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%或更多的壓力。應(yīng)當(dāng)了解的是，這些百分比反映收縮壓的一定百分比，使得超收縮壓還可以被稱為處于收縮壓的101%、102%、 103%,104%,105%,106%,107%,108%,109%,110% (或更大)的一個(gè)水平。在一些實(shí)施方案中，超收縮壓為或大約為一個(gè)絕對(duì)壓力，如為或大約為170mmHg、180mmHg、190mmHg、 2OOmmHg>21OmmHg>22OmmHg>23OmmHg或更高的mmHg。在一些實(shí)施方案中，超收縮壓為或大約為200mmHg的壓力。
在一些實(shí)施方案中，重復(fù)RIC方案中的各RIC方案是在相同部位進(jìn)行的。在一些實(shí)施方案中，重復(fù)RIC方案是在上肢上進(jìn)行的。在一個(gè)實(shí)施方案中，使用定位在身體上不同部位處的兩個(gè)或更多個(gè)裝置(如兩個(gè)或更多個(gè)袖帶)(例如，每個(gè)臂一個(gè)袖帶，或每條腿一個(gè)袖帶，或一個(gè)袖帶在一個(gè)臂上并且一個(gè)袖帶在一條腿上，等等)進(jìn)行單獨(dú)的RIC方案或重復(fù)RIC方案。
在前述方面的一些實(shí)施方案中，進(jìn)一步使用除顫器治療受試者。除顫器可以是一個(gè)體外自動(dòng)除顫器(AED)。
在一些實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括向受試者給予血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)抑制劑。適合于本發(fā)明的ACE抑制劑的實(shí)例包括但不限于卡托普利、依那普利、雷米普利、賴諾普利、喹那普利、福辛普利、貝那普利以及莫西普利。
在一些實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括向受試者給予血管緊張素II受體阻滯劑。 實(shí)例包括但不限于坎地沙坦、厄貝沙坦、洛沙坦、替米沙坦以及維沙坦。
在一些實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括向受試者給予一種抗血小板劑。實(shí)例包括阿司匹林和氯吡格雷。
在一些實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括向受試者給予一種他汀類藥(statin)。
在不同的實(shí)施方案中，可以將這些上述藥劑中的兩種或更多種給予受試者。
在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種成套設(shè)備，包含一個(gè)除顫器以及一個(gè)用于進(jìn)行遠(yuǎn)端缺血處理的裝置，例如像在此所述的自動(dòng)化裝置。除顫器可以是一種體外自動(dòng)除顫器 (AED)。
在此將更詳細(xì)地論述本發(fā)明的這些方面和其他方面以及實(shí)施方案。
附圖簡(jiǎn)要說明
并不旨在按比例繪制這些附圖。在這些圖中，在不同的圖中展示的各個(gè)相同或幾乎相同的部件用同樣的數(shù)字表示。為了清楚起見，不是每個(gè)組件都標(biāo)示在每個(gè)圖中。
現(xiàn)將通過舉例、參考附圖來描述本發(fā)明的不同實(shí)施方案，其中
圖I是展示實(shí)驗(yàn)方案的示意圖。將大鼠隨機(jī)分配到不同組1)假手術(shù)組，其中大鼠在沒有任何干預(yù)的情況下經(jīng)受假手術(shù)；2)MI組，大鼠經(jīng)受45分鐘缺血隨后再灌注，但未給予處理療法；3)SP0St組，在缺血結(jié)束之前遞送單個(gè)處理事件并且在初始再灌注期期間繼續(xù)進(jìn)行；4)dPost組,在第4天(在再灌注之后72小時(shí))遞送單個(gè)處理事件；5)rPost組, 如在第3組中給予處理并且接著每三天給予一次直到第28天；以及6) iPost組，如在第3 組中給予處理并且接著每天給予一次直到第28天。垂直箭頭指示安樂死日期(對(duì)應(yīng)地為第4天和第28天)。在文中所有這些縮寫均相同。
圖2.圖A :來自各組大鼠的代表性顯微照片，顯示了在MI之后第4天浸潤(rùn)心臟梗死區(qū)域的巨噬細(xì)胞(上部多個(gè)圖)和中性粒細(xì)胞(下部多個(gè)圖)的數(shù)目(放大倍數(shù)X400， 比例尺=50 μ m)。圖B:在梗死區(qū)域中的浸潤(rùn)巨噬細(xì)胞(陽性ED-I染色)和中性粒細(xì)胞 (陽性MPO染色)數(shù)目的定量分析。圖C :來自各組大鼠的邊緣帶區(qū)域中的MCP-I染色(以棕色顯示)的代表性心臟組織切片(放大倍數(shù)X400，比例尺=50μπι)。數(shù)據(jù)表示為平均值土標(biāo)準(zhǔn)差，其中縮寫與上述相同。
圖3.圖A :在第28天選自各組大鼠的靶向8_羥基脫氧鳥苷(8_0hdG)的免疫染色(以棕色染色顯示)的左心室組織切片的顯微照片(放大倍數(shù)X400，比例尺=50 μ m)。 圖B :在第28天各組中心肌MDA濃度的定量。圖C :在MI之后第28天各組大鼠中血漿TNF-α (圖A)和IL-I β (圖B)水平的定量分析。數(shù)據(jù)表示為平均值土標(biāo)準(zhǔn)差，其中縮寫與上述相同。
圖4.圖A :顯示了來自各組大鼠的磷酸基-Ik Ba、1 K Ba以及GAPDH(在左側(cè)上) 和磷酸基-NFkB P65、NFkB P65以及GAPDH(在右側(cè)上)的代表性蛋白質(zhì)印跡條帶。圖B: ΙκΒα蛋白表達(dá)中的磷酸基-I K Ba以及NF K B P65蛋白表達(dá)中的磷酸基-NF κ B Ρ65的比率的定量以條形圖顯示(GAPDH作為內(nèi)參照)。數(shù)據(jù)表示為平均值土標(biāo)準(zhǔn)差，其中縮寫與上述相同。
圖5顯示了磷酸基_Smad2和Smad2的代表性蛋白質(zhì)印跡條帶,總Smad2蛋白表達(dá)中的磷光體Smad2的比率以條形圖顯示(圖A)。來自各組大鼠的TGF-β I也顯示在圖B 中。GAPDH用作蛋白內(nèi)參照。數(shù)據(jù)表示為平均值土標(biāo)準(zhǔn)差，其中縮寫與上述相同。
圖6.圖A:各組大鼠心臟的邊緣帶區(qū)域之內(nèi)的馬松三色染色(Masson’ s trichrome staining)的代表性切片(以藍(lán)色染色，放大倍數(shù)X400,比例尺=50 μ m)。圖 B :各組間質(zhì)纖維化程度的定量分析。數(shù)據(jù)表示為平均值土標(biāo)準(zhǔn)差，其中縮寫與上述相同。
圖7.圖A :顯示了了用蘇木素和伊紅染色的心肌細(xì)胞的橫截面積變化的代表性顯微照片(放大倍數(shù)X 400)。圖B:心肌細(xì)胞橫截面積(mm2)的定量形態(tài)測(cè)量分析。圖C、圖 D以及圖E顯示了 a -MHC, β -MHC以及ANP的mRNA表達(dá)。數(shù)據(jù)表示為平均值土標(biāo)準(zhǔn)差， 其中縮寫與上述相同。
圖8為遠(yuǎn)端缺血處理系統(tǒng)的一個(gè)實(shí)施方案的圖不，該遠(yuǎn)端缺血處理系統(tǒng)包括一個(gè)可氣動(dòng)充氣的袖帶，該袖帶配置成圍繞受試者的肢體收縮。
圖9是RIC系統(tǒng)的一種操作方案的一個(gè)實(shí)施方案的框圖


圖10顯示了被配置成圍繞受試者的肢體收縮的袖帶的一個(gè)替代實(shí)施方案。
圖11. A.治療組的示意圖。B.顯示了以下組在MI后經(jīng)過85天時(shí)間的卡普蘭-邁耶曲線(Kaplan Meier curve)(存活率)假手術(shù)組、未接受治療的MI組、在MI的缺血階段期間接受RIC的rIPerC組、在MI的缺血階段期間以及其后每三天接受RIC的rPostC組、 在MI的缺血階段期間以及其后每天接受RIC的iPostC組、以及接受戊巴比妥鈉以控制重復(fù)麻醉的影響的SP組。*表示相對(duì)于MI組P < O. 05 ;#，相對(duì)于MI組P < O. 001 相對(duì)于 rIPerC 組 P < O. 05。
表I呈現(xiàn)了從各組大鼠獲得以評(píng)定心臟幾何形態(tài)、功能、梗死尺寸以及血液動(dòng)力學(xué)變化的數(shù)據(jù)。
發(fā)明詳細(xì)說明
本發(fā)明部分地以下面的發(fā)現(xiàn)為前提通過在MI期間和/或之后有意地并且在一些情況下重復(fù)地在受試者中進(jìn)行誘導(dǎo)性短暫缺血和再灌注的循環(huán)可以完全減輕、延遲或預(yù)防 MI后心功能不全/衰竭。本發(fā)明還部分地以下面的發(fā)現(xiàn)為前提在MI期間，包括在與MI相關(guān)的缺血期間，對(duì)受試者進(jìn)行誘導(dǎo)性短暫缺血和再灌注具有相似的益處。根據(jù)本發(fā)明，誘導(dǎo)性短暫缺血和再灌注的用途還與MI后受試者的存活率增加相關(guān)。
本發(fā)明提供了用于降低MI后心功能不全/衰竭的風(fēng)險(xiǎn)、延遲其發(fā)病和/或降低其嚴(yán)重性的方法。本發(fā)明旨在改善或預(yù)防由于MI而引起的心功能不全/衰竭。本發(fā)明通過使正患有或已經(jīng)患有MI的受試者經(jīng)受一個(gè)或多個(gè)RIC方案來達(dá)到這些目的。在本發(fā)明的一些方面，這些方案中的至少一個(gè)(包括受試者可以接受的僅僅一個(gè))是在MI期間進(jìn)行的。這些方案被稱為“同時(shí)處理”(“per-conditioning”)方案，并且這些方案可以在MI的缺血階段和/或隨后的再灌注階段期間進(jìn)行。在某些實(shí)施方案中，受試者在MI期間(包括在 MI的缺血階段期間)接受一個(gè)RIC方案。在本發(fā)明的這些方面和其它方面，可以在MI之后進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)方案。這些方案被稱為“后處理”方案。因此，本發(fā)明的一些方法涉及在受試者經(jīng)歷MI的同時(shí)以及任選地在MI之后對(duì)此受試者進(jìn)行RIC。任選地如果在在先的MI 期間對(duì)受試者已經(jīng)進(jìn)行了一個(gè)RIC方案，則本發(fā)明的其他方法涉及在MI之后對(duì)該受試者進(jìn)行RIC。在一些實(shí)施方案中，RIC可以在MI期間(例如在MI的缺血階段期間、在MI的再灌注階段期間或在MI的缺血與再灌注階段期間)和/或MI停止之后(例如，在幾小時(shí)之內(nèi)， 并且優(yōu)選地在一小時(shí)之內(nèi))立即和/或在MI后(如下述所論述)進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，受試者未接受任何預(yù)處理RIC方案(即，在MI之前的RIC方案)。在一些實(shí)施方案中， 受試者接受了一個(gè)或多個(gè)預(yù)處理RIC方案。
因此，在一些方面，這些方法涉及在MI期間并且在MI之后重復(fù)進(jìn)行RIC。在一些方面，這些方法涉及在MI之后重復(fù)進(jìn)行RIC，即使在MI期間沒有進(jìn)行RIC。這種RIC在此可以稱為MI后RIC。在一些實(shí)施方案中，MI后RIC是在MI之后數(shù)天、數(shù)周或數(shù)月進(jìn)行的。 因此，在MI與第一 RIC之間的時(shí)間可以是I天、2天、3天、4天、5天或6天,或I周、2周、3 周或4周，或I個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、4個(gè)月、5個(gè)月、6個(gè)月或更多個(gè)月或更久。
在一些實(shí)施方案中，如上文所描述的，改進(jìn)了心臟功能和/或減輕了心功能不全/ 衰竭，即使梗死本身未受MI后出現(xiàn)的RIC影響。也就是說，相對(duì)于MI時(shí)單個(gè)RIC的影響， 梗死尺寸顯得未受MI后RIC影響。在一些實(shí)施方案中，存活時(shí)間增加。
已經(jīng)非常出人意料地發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明，在MI期間和之后使個(gè)體經(jīng)受RIC能保護(hù)受試者免于不良重塑，否則在缺血和再灌注心臟損傷之后發(fā)生(如最典型地與MI —起發(fā)生)不良重塑。甚至更出人意料地，即使在不影響梗死尺寸的情況下也可獲得此益處。也就是說，長(zhǎng)期重塑作用顯得與由MI引起的梗死尺寸的任何變化(例如減小)不相關(guān)。
同樣出人意料的是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)后處理方案提供了治療益處，特別是因?yàn)槠駷橹挂呀?jīng)認(rèn)為缺血處理必須在缺血事件之前進(jìn)行(即“預(yù)處理”)。本發(fā)明證明，無論受試者是否已經(jīng)歷任何形式的缺血預(yù)處理，該受試者仍然可以受益于缺血后處理，至少達(dá)到這種后處理減輕或預(yù)防與MI相關(guān)的心功能不全/衰竭的程度。
如在實(shí)例中所述，可以通過在MI期間對(duì)受試者進(jìn)行單個(gè)RIC方案來實(shí)現(xiàn)治療性MI 后益處。這個(gè)方案可以發(fā)生在MI的缺血階段期間和/或在MI的再灌注階段期間。因此， 本發(fā)明考慮，在一些情況下，如本領(lǐng)域中已知以及如下文所述，一旦受試者經(jīng)鑒定為患有MI 的受試者，則照料該受試者的某人(包括但不限于受過醫(yī)療培訓(xùn)的人員)將對(duì)該受試者進(jìn)行RIC方案。如下文更詳細(xì)地描述，這個(gè)方案涉及對(duì)受試者上的一個(gè)遠(yuǎn)端位置進(jìn)行一次并且優(yōu)選地一次以上的缺血-再灌注循環(huán)。這些位置優(yōu)選地是易于接近的并且該方案優(yōu)選地是非侵入性方案。典型地，該方案是通過在皮膚上施加壓力(例如通過使用一條壓力袖帶或一條止血帶)而在一個(gè)或多個(gè)肢體上進(jìn)行的。
在這些實(shí)例中所用的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?，在MI的再灌注階段期間的單個(gè)處理方案提供了長(zhǎng)期益處，而在第4天(其中MI在第I天開始)進(jìn)行的單個(gè)處理方案沒有效果。
因此，在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，RIC方案是在心肌梗死的30天之內(nèi)、或20天之內(nèi)、10天之內(nèi)、或I天之內(nèi)、或12小時(shí)之內(nèi)、或6小時(shí)之內(nèi)、或3小時(shí)之內(nèi)、或2小時(shí)之內(nèi)、I小時(shí)之內(nèi)、30分鐘之內(nèi)、10分鐘之內(nèi)、或5分鐘之內(nèi)和/或在心肌梗死時(shí)進(jìn)行的。
這些實(shí)例再次出人意料地進(jìn)一步顯示，當(dāng)對(duì)MI后受試者進(jìn)行多個(gè)RIC方案時(shí)可以獲得甚至更多的益處。更確切地說，當(dāng)在MI后進(jìn)行多個(gè)RIC方案時(shí)觀測(cè)到針對(duì)重塑不良作用有更大程度的保護(hù)作用以及存活時(shí)間增加。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在MI之后每三天進(jìn)行一次RIC提供了相比于在MI時(shí)的單個(gè)方案的更大的保護(hù)作用。重要的是，在兩組動(dòng)物之間的梗死尺寸無顯著不同，表明由這種早期處理方案提供的有益作用與對(duì)梗死的影響無關(guān)。
進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)在MI之后每天進(jìn)行RIC相比于當(dāng)每三天進(jìn)行一次RIC時(shí)提供了更大的保護(hù)作用以及更高的存活率。
因此，在一些情況下本發(fā)明提供了涉及在MI后，對(duì)受試者進(jìn)行一周至少一次、每6 天至少一次、每5天至少一次、或每4天至少一次RIC的方法,優(yōu)選地其中RIC也已經(jīng)在MI 期間進(jìn)行。在一些重要的實(shí)施方案中，在MI后對(duì)受試者進(jìn)行每3天至少一次、每2天至少一次或每天至少一次(即每天)遠(yuǎn)端缺血處理，優(yōu)選地其中RIC也已經(jīng)在MI期間進(jìn)行。
如在此所使用的，如在例如“每三天至少一次”中的“至少一次”表示在三天時(shí)間內(nèi)進(jìn)行至少一個(gè)RIC方案。因此，這包括每天、每?jī)商旎蛎咳爝M(jìn)行RIC的情況?？商娲鼗蛄硗獾兀ㄔ谌鞎r(shí)間中的第一天、第二天和/或第三天進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)RIC方案的情況。在最簡(jiǎn)單的情況下，每三天進(jìn)行一次RIC。然而，應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明考慮在任何給定的日期更頻繁地進(jìn)行。還應(yīng)當(dāng)理解的是，這個(gè)相同的含義適用于如上文所述以其他頻率進(jìn)行的方案。因此，為了清楚起見，“至少每天”表示每天進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)RIC方案。
在一些實(shí)施方案中，在單天進(jìn)行單個(gè)RIC方案。在其他實(shí)施方案中，在單天進(jìn)行一個(gè)以上(包括2、3、4、5或更多個(gè))RIC方案。
無論是在單天還是在不同天進(jìn)行，RIC方案可以在相同位置或不同位置進(jìn)行。這些可以在兩個(gè)位置之間交替進(jìn)行或它們可以通過兩個(gè)以上的位置循環(huán)進(jìn)行。使用一個(gè)以上的位置可以是在先確定的或它可以是隨機(jī)的。在一些實(shí)施方案中，可以使用單個(gè)位置或多個(gè)位置來進(jìn)行單個(gè)方案。例如，可以在人類受試者上臂的單個(gè)位置處進(jìn)行單個(gè)方案或可以使用兩個(gè)上臂位置(例如單獨(dú)的上臂)同時(shí)或以交替方式進(jìn)行該單個(gè)方案。當(dāng)使用多個(gè)位置時(shí)，可以使用兩個(gè)或更多個(gè)裝置。
就前述方案的頻率是在先確定的并且以相似方式進(jìn)行來說，這些方案被認(rèn)為在本質(zhì)上是有規(guī)律的。將清楚的是，在方案之間的時(shí)間可以是均勻的(或相同的)或它可以不同，其條件是這種計(jì)時(shí)是提前已知的。本發(fā)明考慮其中至少兩組的兩個(gè)連續(xù)方案由第一時(shí)段隔開并且至少兩個(gè)其他組的兩個(gè)連續(xù)方案由不同于第一時(shí)段的第二時(shí)段隔開的治療方案。
然而，本發(fā)明考慮進(jìn)行隨機(jī)隔開的多個(gè)MI后方案，然而其條件是甚至在這些情況下，這些方案是在至少如每周一次那樣頻繁地進(jìn)行的。
可以經(jīng)過任何時(shí)段進(jìn)行這些遠(yuǎn)端缺血處理方案，包括但不限于MI后長(zhǎng)達(dá)I個(gè)月、2 個(gè)月、3個(gè)月、4個(gè)月、5個(gè)月、6個(gè)月、7個(gè)月、8個(gè)月、9個(gè)月、10個(gè)月、11個(gè)月或12個(gè)月或更久。在一些情況下，這些方案經(jīng)過數(shù)年進(jìn)行，包括長(zhǎng)達(dá)2年、3年、4年、5年或更多年。仍然在其他情況下，這些方案繼續(xù)進(jìn)行經(jīng)過受試者的剩余壽命或一直到確定該受試者不再處于心功能不全/衰竭的高風(fēng)險(xiǎn)時(shí)為止。如在此所使用的，心功能不全/衰竭的高風(fēng)險(xiǎn)是一種比未經(jīng)歷MI的一般人群的風(fēng)險(xiǎn)更高的風(fēng)險(xiǎn)。因此，盡管這些實(shí)例顯示了以實(shí)驗(yàn)方式模擬的MI后長(zhǎng)達(dá)30天進(jìn)行的RIC方案的效果，本發(fā)明考慮更短和更長(zhǎng)的“治療”時(shí)間兩者。
有待通過本發(fā)明“治療”的這些受試者最低限度地正在經(jīng)歷或已經(jīng)經(jīng)歷MI。他們可能已經(jīng)或可能尚未經(jīng)受缺血預(yù)處理(即，MI之前的缺血處理)。他們可能患有或可能未患有指示需要缺血處理(包括缺血預(yù)處理)的病癥。例如在一種醫(yī)療操作或干預(yù)之后他們可能處于或可能不處于再狹窄的風(fēng)險(xiǎn)中，該醫(yī)療操作或干預(yù)涉及使體內(nèi)的血管或其他脈管變寬或擴(kuò)張。這些醫(yī)療程序或干預(yù)的實(shí)例包括但不限于血管成形術(shù)或支架置入術(shù)。同樣， 受試者可能是或可能不是已經(jīng)經(jīng)歷誘導(dǎo)了或可能誘導(dǎo)血管損傷的醫(yī)療干預(yù)的受試者。受試者可能呈現(xiàn)或可能不呈現(xiàn)或可能具有慢性醫(yī)學(xué)病癥(如但不限于高血壓)的病史。本發(fā)明的這些受試者將優(yōu)選地是人類，雖然也考慮了非人類受試者。
如在此所使用的，術(shù)語“治療”表示對(duì)MI后受試者可能經(jīng)歷的心功能不全/衰竭的可能性、發(fā)作時(shí)間和/或嚴(yán)重性具有積極益處或治療益處?？梢酝ㄟ^將受試者與未經(jīng)受本發(fā)明的這些方法的人群進(jìn)行比較來測(cè)量這些積極作用或治療有益的作用。可以在心功能不全/衰竭發(fā)生率、心功能不全/衰竭的發(fā)作時(shí)間以及心功能不全/衰竭的嚴(yán)重性方面將受試者與人群進(jìn)行比較。以下更詳細(xì)地描述心功能不全/衰竭標(biāo)記。
因此，基于前述內(nèi)容，應(yīng)當(dāng)清楚的是本發(fā)明考慮對(duì)正患有MI的受試者以及那些已經(jīng)患有MI的受試者進(jìn)行RIC方案(特別是，如果是后者這些受試者，在MI時(shí)或接近MI時(shí)給予一個(gè)缺血處理方案)，無論是局部地還是遠(yuǎn)端地。
本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員(包括但不限于執(zhí)業(yè)醫(yī)師和醫(yī)療急救人員)將熟悉MI的特征。MI的癥狀(特別地在男性中)包括突然胸痛(時(shí)常放射至左臂或頸左側(cè))、呼吸短促、惡心、嘔吐、心悸、出汗以及焦慮。在女性中的癥狀與在男性中的癥狀稍有不同，并且典型地包括呼吸短促、虛弱、消化不良以及疲勞。無論是存在還是缺乏這些癥狀，可以使用例如心電圖、血液標(biāo)志物檢測(cè)(例如肌酸激酶、肌鈣蛋白T或I)以及心臟成像(如胸部X射線)來檢測(cè)MI。用于診斷MI的指南包括WHO標(biāo)準(zhǔn)(即缺血型胸痛持續(xù)超過20分鐘的病史、 連續(xù)ECG 中的變化以及血清心臟標(biāo)志物(如肌酸激酶MB和肌鈣蛋白)的上升/下降)， 其中兩項(xiàng)和三項(xiàng)這樣的標(biāo)準(zhǔn)的存在分別指示可能的MI和明確的MI。
如在此所使用的，術(shù)語“遠(yuǎn)端缺血處理方案”或“RIC方案”是指對(duì)受試者在身體上除心臟之外的一個(gè)位置(即一個(gè)“遠(yuǎn)端”位置)進(jìn)行的一個(gè)或多個(gè)缺血-再灌注循環(huán)。如在此所使用的，RIC方案(或單獨(dú)的RIC方案)表示誘導(dǎo)性短暫缺血事件繼之為再灌注事件的至少一個(gè)循環(huán)。因此，單獨(dú)的RIC方案可以由1、2、3、4、5或更多個(gè)這種循環(huán)組成。
在一些方面，本發(fā)明考慮了對(duì)受試者進(jìn)行重復(fù)RIC方案。如在此所使用的，重復(fù) RIC方案為在單天進(jìn)行的兩個(gè)或更多個(gè)單獨(dú)的RIC方案和/或在多天進(jìn)行的一個(gè)或多個(gè) RIC方案。例如，重復(fù)RIC方案可以包括在單天進(jìn)行多個(gè)RIC方案，或在多天進(jìn)行單個(gè)RIC 方案，或在多天進(jìn)行多個(gè)RIC方案。如果重復(fù)RIC方案在單天進(jìn)行，在單獨(dú)的方案之間的時(shí)間可以是例如至少10分鐘、至少20分鐘、至少40分鐘、至少I小時(shí)、至少2小時(shí)或至少6小時(shí)。如果經(jīng)過數(shù)天的過程進(jìn)行重復(fù)RIC方案，在單獨(dú)的方案之間的時(shí)間可以是I天、2天、3 天、4天、5天、6天或7天。這些重復(fù)RIC方案的全體在此稱為一個(gè)RIC治療方案。
如在此所論述的，并不要求在重復(fù)RIC方案中的任何或所有這些RIC方案在計(jì)時(shí)、 每方案的循環(huán)次數(shù)、超收縮壓、位置等等方面是相同的。
典型地，RIC是在肢體(如上肢或下肢)上進(jìn)行的，雖然并不限于此。重復(fù)RIC方10案可以在身體中的單個(gè)部位或多個(gè)部位上進(jìn)行。例如，重復(fù)RIC方案可以包括在右上臂上進(jìn)行的第一 RIC方案，隨后在左上臂上進(jìn)行的第二 RIC方案。重復(fù)RIC方案可以包括在身體上的多個(gè)遠(yuǎn)端部位之間交替。在一些情況下，可以對(duì)受試者在兩個(gè)不同部位在重疊時(shí)間 (包含同時(shí))進(jìn)行RIC方案。在這些情況下，如下文所述可以使用兩個(gè)裝置。心功能不全/ 衰竭
心力衰竭被定義為心臟不能泵送血液到全身或阻止血液返流進(jìn)入肺部。心力衰竭時(shí)常被稱為充血性心力衰竭并且與收縮性或舒張性心功能不全相關(guān)。心力衰竭典型地隨時(shí)間的過去而產(chǎn)生并且可以由于另一種引起心臟組織損傷或引起心臟組織比正常做功更多 (或更困難)的病癥(例如MI)觸發(fā)或惡化。
因此，并且如本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員所將理解的，心力衰竭指示了心功能不全，并且本發(fā)明考慮在心力衰竭的存在或缺乏下降低心功能不全的風(fēng)險(xiǎn)、延遲心功能不全的發(fā)作、預(yù)防和/或治療心功能不全。因此，除非另有說明，在此對(duì)心力衰竭的論述也旨在克服 (capture)心功能不全。
在一些情況下，本發(fā)明提供了用于在已經(jīng)具有或正患有MI的受試者中降低心功能不全/衰竭的風(fēng)險(xiǎn)的方法。該方法旨在降低心功能不全/衰竭以及其相關(guān)癥狀的產(chǎn)生率和/或嚴(yán)重性，這些相關(guān)癥狀包括但不限于由MI引起的運(yùn)動(dòng)不耐受、心律失常以及猝死。 可以通過監(jiān)測(cè)和測(cè)量與心功能不全/衰竭相關(guān)的癥狀或其他特征來測(cè)量心功能不全/衰竭的產(chǎn)生和嚴(yán)重性。以下對(duì)這些進(jìn)行了論述。這些方法可以導(dǎo)致對(duì)所有或一些這類癥狀的預(yù)防、延遲所有或一些此類癥狀的發(fā)作和/或降低所有或一些此類癥狀的嚴(yán)重性?？梢酝ㄟ^監(jiān)測(cè)被治療受試者中與心功能不全/衰竭相關(guān)的癥狀或其他特征并且將該受試者中的這些癥狀或特征的數(shù)目、發(fā)作以及嚴(yán)重性與心功能不全/衰竭的歷史人群數(shù)據(jù)比較來確定心功能不全/衰竭的風(fēng)險(xiǎn)降低。例如，已知存活的MI受試者比一般人群更可能產(chǎn)生心功能不全/衰竭。本發(fā)明的這些方法旨在降低這種心功能不全/衰竭產(chǎn)生的可能性或風(fēng)險(xiǎn)。
心功能不全/衰竭的癥狀包括呼吸短促(呼吸困難)、足和腿腫脹(水腫)(典型地由異常液體潴留引起)、肺部積液、持續(xù)性咳嗽或喘息、低運(yùn)動(dòng)耐受性、全身疲勞(甚至運(yùn)動(dòng)缺乏)、心率增快(或心悸)、食欲缺乏、記憶喪失(或混亂)以及惡心。在具有心功能不全/衰竭的受試者中將表現(xiàn)出一種以及典型地一種以上的這些癥狀。本發(fā)明的這些方法旨在預(yù)防一種或多種這些癥狀的產(chǎn)生、延遲其發(fā)作和/或降低其嚴(yán)重性。
可以基于呈現(xiàn)一種以及典型地一種以上的前述癥狀來診斷心功能不全/衰竭。還可以診斷心功能不全/衰竭，或可以用測(cè)試，例如心電圖(ECG或EKG)、超聲心動(dòng)圖(“心臟超音波”)或心導(dǎo)管插入術(shù)來確認(rèn)心功能不全/衰竭的可疑診斷。例如，超聲心動(dòng)圖能夠測(cè)量每次心跳從左心室射出的血液的體積或分?jǐn)?shù)。這被稱作射血分?jǐn)?shù)。在正常受試者中，左心室中的大約60%的血液被射出。受試者可以呈現(xiàn)出輕度降低的射血分?jǐn)?shù)(例如40%-45%)、 中度降低的射血分?jǐn)?shù)(例如30% -40% )或重度降低的射血分?jǐn)?shù)(例如10% -25% )。因此，在本發(fā)明的一些方面，這些方法旨在維持射血分?jǐn)?shù)，特別是如果受試者呈現(xiàn)出正?；蜉p度降低的射血分?jǐn)?shù)時(shí)。在一些方面，本發(fā)明的這些方法旨在延遲降低的射血分?jǐn)?shù)的開始，無論初始射血分?jǐn)?shù)呈現(xiàn)如何。也可以使用壓力測(cè)試來診斷心功能不全/衰竭，且這些壓力測(cè)試可以與上文所論述的一種或多種成像測(cè)試相組合。例如，壓力測(cè)試可以與超聲心動(dòng)圖組合以便在運(yùn)動(dòng)周期之前、期間和/或之后監(jiān)測(cè)并且測(cè)量心功能不全/衰竭。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員(包括執(zhí)業(yè)醫(yī)師和更具體地說心臟病學(xué)家)將熟悉這些測(cè)試以及其在診斷心功能不全/衰竭中的用途。
應(yīng)當(dāng)了解的是，有待根據(jù)本發(fā)明的這些方法治療的受試者也具有一種或多種MI 的病史或跡象。在一些方面，受試者可能呈現(xiàn)或可能不呈現(xiàn)或可能具有其他風(fēng)險(xiǎn)因素或其他病癥的歷史。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，這些受試者可能不具有高血壓病史和/或可能不呈現(xiàn)高血壓。作為另一個(gè)實(shí)例，在一個(gè)實(shí)施方案中，這些受試者可能未曾經(jīng)歷旨在擴(kuò)張受試者中的管狀器官(如動(dòng)脈或靜脈)的醫(yī)療程序或干預(yù)。這些干預(yù)的實(shí)例包括血管成形術(shù)、 支架置入術(shù)等。
重要的是，在一些情況下，由本發(fā)明的方法提供的一個(gè)或多種益處獨(dú)立于對(duì)心肌梗死尺寸或體積的任何影響而存在。也就是說，如在實(shí)例中所述，在一些實(shí)施方案中提供了在MI期間或其后不久施加的RIC的一個(gè)第一循環(huán)，而梗死尺寸通過后續(xù)慢性RIC可以不顯著降低。然而，出人意料地，甚至在缺乏任何梗死尺寸的進(jìn)一步降低時(shí)，使用本發(fā)明的這些方法仍然有可能降低心功能不全/衰竭的風(fēng)險(xiǎn)、發(fā)病和/或嚴(yán)重性。雖然不旨在限制于任何特定的作用機(jī)制來解釋這一發(fā)現(xiàn)，慢性RIC可以預(yù)防心肌梗死后發(fā)生的左心室重塑或限制其程度。如在實(shí)例中所論述的，重復(fù)的MI后RIC方案可以減弱炎癥應(yīng)答、降低氧化應(yīng)激和/或調(diào)節(jié)與MI相關(guān)的肥厚和纖維化信號(hào)。
因此，本發(fā)明的一些方法包括在心肌梗死期間和/或之后(包括之后不久)對(duì)受試者進(jìn)行RIC方案。優(yōu)選地，一個(gè)RIC方案是在心肌梗死期間對(duì)受試者進(jìn)行的。在這些實(shí)施方案中，該RIC方案是在缺血階段(或時(shí)期)期間或在再灌注階段(或時(shí)期)期間進(jìn)行的，或其可以在不同程度上重疊兩個(gè)階段。如果在心肌梗死期間進(jìn)行，則該處理在此稱為同時(shí)處理(perconditioning)。在其他實(shí)施方案中，RIC方案是在心肌梗死的缺血期結(jié)束30 分鐘之內(nèi)、I小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)、4小時(shí)、5小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)、10小時(shí)、12小時(shí)、18小時(shí)或 24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行的。仍然在其他實(shí)施方案中，RIC方案是在心肌梗死的36小時(shí)、48小時(shí)或60 小時(shí)之內(nèi)進(jìn)行的。
后續(xù)RIC方案可以在每天基礎(chǔ)上、每隔一天或每三天進(jìn)行。這些RIC方案可以進(jìn)行每天一次或大于每天一次，包括一天兩次、一天3次或更多。
附加療法
本發(fā)明的RIC方案可以與旨在降低心功能不全/衰竭的風(fēng)險(xiǎn)或嚴(yán)重性的其他療法或程序組合使用。這些療法包括(但不限于)抗血小板藥物療法(包括纖維蛋白溶解劑、 抗凝劑以及血小板功能抑制劑)、β阻滯劑療法、ACE抑制劑療法、他汀類藥物療法、醛固酮拮抗劑療法(例如依普利酮)以及Ω-3-脂肪酸療法。取決于實(shí)施方案，一種或多種這些藥劑可以在MI之前、在MI時(shí)或在MI之后給予，無論是否與RIC方案和/或治療方案重疊。 以下將更詳細(xì)論述這些和其他適合的療法。
纖維蛋白溶解劑是通常通過酶促作用溶解纖維蛋白來溶解血栓(例如血塊)的藥齊U。這些實(shí)例包括但不限于安克洛酶、阿尼普酶、乳酸比索布啉、米曲溶栓酶(brinolase)、 哈格曼因子(Hageman factor)(即因子XII)片段、嗎多明、纖溶酶原激活劑(如鏈激酶、組織型纖溶酶原激活劑(TPA)以及尿激酶)以及纖溶酶和纖溶酶原。
抗凝劑是通過負(fù)面影響血塊形成中必需的因子的產(chǎn)生、沉積、裂解和/或激活來抑制凝血途徑的藥劑?？鼓齽┌ǖ幌抻诰S生素K拮抗劑，如香豆素和香豆素衍生物(例如華法林鈉);糖氨聚糖，如呈未分級(jí)形式和呈低分子量形式的肝素；阿地肝素鈉、比伐盧定、溴卻二酮、香豆素達(dá)肝素鈉(coumarin dalteparin sodium)、地西盧定、雙香豆素、阿樸酸鈉、甲磺酸萘莫司他、苯丙香豆素、硫腦苷脂、亭扎肝素鈉、因子Xa、因子TFPI、因子Vila、 因子IXc、因子Va、因子VIIIa的抑制劑以及其他凝血因子的抑制劑。
血小板功能抑制劑是削弱成熟血小板進(jìn)行其正常生理作用(即，其正常功能)的能力的藥劑。實(shí)例包括但不限于阿卡地新、阿那格雷、阿尼帕米、阿加曲班、阿司匹林、氯吡格雷、環(huán)加氧酶抑制劑(如非留體抗炎藥和合成化合物FR-122047)、達(dá)那肝素鈉、鹽酸達(dá)唑氧苯、二腺苷5’，5”，-PI, P4-四磷酸(Ap4A)類似物、去纖苷酸(difibrotide)、二鹽酸地拉齊普(dilazep dihydrochloride)、甘油1,2-二硝酸酯和甘油I, 3_ 二硝酸酯、雙卩密達(dá)莫、多巴胺和3-甲氧酪胺、硫酸依非加群、依諾肝素鈉、胰高血糖素、糖蛋白Ilb/IIIa拮抗劑(如Ro-43-8857和L-700,462)、伊非曲班、伊非曲班鈉、伊洛前列素、異卡巴環(huán)素甲酯 (isocarbacyclin methylester)、異山梨醇-5-單硝酸酯、伊他格雷、酮色林和BM-13. 177、 拉米非班、利法利嗪、嗎多明、硝苯地平、氧格雷酯、PGE、血小板活化因子拮抗劑(如來昔帕泛)、前列環(huán)素(PGI2)、卩比嗪類、卩比醇氨酯(pyridinol carbamate)、ReoPro (即，阿昔單抗)、磺吡酮、合成化合物 BN-50727、BN-52021、CV-4151、E-5510、FK-409、GU-7、KB-2796、 KBT-3022、KC-404、KF-4939、0P-41483、TRK-100、TA-3090、TFC-612 以及 ZK_36374、2，4，5，7-四硫雜辛烷、2，4，5，7-四硫雜辛烷2，2- 二氧化物、2，4，5-三硫雜己烷、茶堿己酮可可堿 (theophyllin pentoxifyllin)、血栓素和血栓素合成酶抑制劑(如批考他胺和磺曲苯)、 噻氯匹定、替羅非班、曲匹地爾和噻氯匹定、三苯格雷、三亞油精、3-取代5，6-雙(4-甲氧基苯基)-1，2，4_三嗪、及針對(duì)糖蛋白Ilb/IIIa的抗體以及在美國(guó)專利5，440，020中披露的抗體、以及抗5-羥色胺藥、氯吡格雷；磺吡酮；阿司匹林；雙嘧達(dá)莫；氯貝丁酯；吡醇氨酯； PGE ;胰高血糖素；抗5-羥色胺藥；咖啡因；茶堿己酮可可堿；噻氯匹定。
抗炎劑包括阿氯芬酸；阿氯米松雙丙酸酯；阿孕奈德；α淀粉酶；安西法爾；安西非特；氨芬酸鈉；鹽酸氨普立糖；阿那白滯素；阿尼羅酸；阿尼扎芬；阿扎丙宗；巴柳氮二鈉；芐達(dá)酸；苯噁洛芬；鹽酸芐達(dá)明；菠蘿蛋白酶；溴哌莫；布地奈德；卡洛芬；環(huán)洛芬；辛噴他宗；克利洛芬；丙酸氯倍他索；丁酸氯倍他松；氯吡酸；丙酸氯硫卡松；醋酸三氟米松; 可托多松；地夫可特；地奈德；去羥米松；地塞米松二丙酸酯；雙氯芬酸鉀；雙氯芬酸鈉；雙氟拉松雙醋酸酯；二氟米酮鈉；二氟尼柳；二氟潑尼酯；地弗他酮；二甲亞砜；羥西奈德；恩甲輕松(endrysone);恩莫單抗；依諾利康鈉；依匹唑；依托度酸；依托芬那酯；聯(lián)苯乙酸； 非那莫；芬布芬；芬氯酸；苯克洛酸；芬度柳；奮匹帕??；芬替酸；夫拉扎酮；氟孔可特；氟芬那酸；氟咪唑；醋酸氟尼縮松；氟尼辛；氟尼辛葡甲胺；氟可丁丁酯；醋酸氟美松龍；氟喹宗；氟比洛芬；氟瑞托芬；丙酸氟替卡松；呋喃洛芬；呋羅布芬；哈西奈德；丙酸鹵倍他索； 醋酸鹵潑尼松；異丁芬酸；布洛芬；布洛芬鋁；布洛芬吡啶甲醇；伊洛達(dá)普；吲哚美辛；吲哚美辛鈉；吲哚洛芬；吲哚克索；吲四唑；醋酸異氟潑尼龍；伊索克酸；伊索昔康；酮基布洛芬；鹽酸洛非咪唑；氯諾昔康；依碳氯替潑諾；甲氯芬那酸鈉；甲氯芬那酸；二丁酸甲氯松；甲芬那酸；美沙拉嗪；美西拉宗；磺庚甲潑尼龍；嗎尼氟酯；萘丁美酮；萘普生；萘普生鈉；萘普索；尼馬宗；奧沙拉嗪鈉；奧古蛋白；奧帕諾辛；奧沙普嗪；羥布宗；鹽酸瑞尼托林; 木聚硫鈉；苯布他宗；甘油保泰松鈉；吡非尼酮；吡羅昔康；肉桂酸吡羅昔康；吡羅昔康乙醇胺；吡洛芬；潑那扎特；普立非酮；普羅度酸；普羅喹宗；普羅沙唑；檸檬酸普羅沙唑；利美索龍；氯馬扎利；柳膽來司；沙那西定；雙水楊酯；水楊酸酯；血根氯銨(Sanguinarium Chloride);司克拉宗；絲美辛；舒多昔康；舒林酸；舒洛芬；他美辛；他尼氟酯；他洛柳酯； 特丁非?。惶婺徇_(dá)普；替尼達(dá)普鈉；替諾昔康；替昔康；替昔米德；四氫達(dá)明；硫平酸；特戊酸硫氫可的松；托美丁 ；托美丁鈉；三氯奈德；三氟米酯；齊多美辛；糖皮質(zhì)激素；佐美酸鈉。一種優(yōu)選的抗炎劑是阿司匹林。
降脂劑包括吉非貝齊、考來烯胺(cholystyramine)、考來替泊、煙酸、普羅布考洛伐他汀(probucol Iovastatin)以及多種他汀類藥物,如氟伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、 普伐他汀、西立伐他汀。
直接的凝血酶抑制劑包括水蛭素、水蛭原、水蛭肽、阿加曲班(agatroban) >PPACK> 凝血酶適體。
糖蛋白Ilb/IIIa受體抑制劑是抗體和非抗體兩者，并且包括但不限于ReoPro (阿昔單抗)、拉米非班、替羅非班。
鈣通道阻滯劑是在控制多種疾病(包括數(shù)種心血管疾病，如高血壓、心絞痛以及心律失常)中具有重要的治療價(jià)值的一類在化學(xué)上多樣的化合物(弗萊肯施泰因 (Fleckenstein),心血管研究(Cir. Res.),第 52 卷，(增刊 I),第 13-16 頁(1983);弗萊肯施泰因，實(shí)驗(yàn)事實(shí)與治療前景(Experimental Facts and Therapeutic Prospects),約翰威利(John Wiley)，紐約(New York) (1983);麥考爾，D. (McCall, D.)，當(dāng)代心臟病學(xué)實(shí)踐 (Curr Pract Cardiol),第10卷,第1-11頁(1985))。隹丐通道阻滯劑是一組不同種類的藥物，這些藥物通過調(diào)節(jié)細(xì)胞鈣通道來防止或減緩鈣進(jìn)入到細(xì)胞中。(雷明頓(Remington)， 制藥科學(xué)與實(shí)踐(The Science and Practice of Pharmacy),第十九版,麥克出版公司 (Mack Publishing Company),伊頓(Eaton), PA,第 963 頁(1995))。大多數(shù)當(dāng)前可獲得并且根據(jù)本發(fā)明有用的鈣通道阻滯劑屬于以下三個(gè)主要的化學(xué)藥物組之一 二氫吡啶類(如硝苯地平)、苯烷基胺類(如維拉帕米)以及苯并硫氮雜卓(如地爾硫卓)。根據(jù)本發(fā)明有用的其他鈣通道阻滯劑包括但不限于氨利農(nóng)、氨氯地平、芐環(huán)烷、非洛地平、芬地林、氟桂利嗪、伊拉地平、尼卡地平、尼莫地平、哌克昔林、戈洛帕米、噻帕米和噻帕米類似物(如 1993R0-11-2933)、苯妥英、巴比妥酸鹽類以及肽類(強(qiáng)啡肽、Ω芋螺毒素以及Ω漏斗網(wǎng)蛛毒素)等等和/或其藥學(xué)上可接受的鹽。
β腎上腺素受體阻滯劑(也稱為β阻滯劑)是拮抗兒茶酚胺在心絞痛、高血壓以及心律失常中的心血管效應(yīng)的一類藥物。β腎上腺素受體阻滯劑包括但不限于阿替洛爾、醋丁洛爾、阿普洛爾、苯呋洛爾、倍他洛爾、布尼洛爾、卡替洛爾、塞利洛爾、hedroxalol、 茚諾洛爾、拉貝洛爾、左布諾洛爾、甲吲洛爾、美替洛爾、吲哚美辛(metindol)、美托洛爾、 metrizoranolol、氧烯洛爾、品多洛爾、普萘洛爾、普拉洛爾、普拉洛爾、索他洛爾、納多洛爾、替普洛爾、tomalolol、噻嗎洛爾、布拉洛爾、噴布洛爾、三甲苯心安(trimepranol)、2-(3- (I, I- 二甲基乙基)-氨基-2-輕基丙氧基)_3_卩比唳甲臆鹽酸鹽、I- 丁基氨基-3- (2, 5- 二氯苯氧基)~2~丙醇、I-異丙基氨基-3- (4- (2-環(huán)丙基甲氧基乙基)苯氧基)-2-丙醇、3-異丙基氛基_1_(7-甲基卻滿-4-基氧基)-2- 丁醇、2_ (3-叔丁基氛基-2-輕基_丙硫基)-4-(5-氨基甲酰-2-噻吩基)噻唑、7-(2-羥基-3-叔丁基氨基丙氧基)苯酞。以上鑒定的化合物可以作為異構(gòu)混合物或以其對(duì)應(yīng)的左旋或右旋形式使用。
許多選擇性“C0X-2抑制劑”是本領(lǐng)域中已知的。這些包括但不限于在以下專利中描述的C0X-2抑制劑美國(guó)專利5，474，995 “作為cox-2抑制劑的苯基雜環(huán) (Phenyl heterocycles as cox-2 inhibitors) ”；美國(guó)專利 5，521，213 “作為環(huán)加氧酶-2 抑制劑的二芳基雙環(huán)雜環(huán)(Diaryl bicyclic heterocycles as inhibitors of cyclooxygenase-2) ”；美國(guó)專利5，536，752 “作為C0X-2抑制劑的苯基雜環(huán)(Phenyl heterocycles as COX-2 inhibitors) ” ；美國(guó)專利 5，550，142 “作為 C0X-2 抑制劑的苯基雜環(huán)(Phenyl heterocycles as C0X_2inhibitors) ” ；美國(guó)專利 5，552，422 “作為抗炎劑的芳基取代的 5，5 稠合芳香氮化合物(Aryl substituted 5，5 fused aromatic nitrogen compounds as anti-inflammatory agents) ” ；美國(guó)專利 5，604，253 “作為環(huán)加氧酶抑制劑的 N-節(jié)基卩引哚-3-基丙酸衍生物(N-benzylindol-3-ylpropanoic acid derivatives as cyclooxygenase inhibitors) ”；美國(guó)專利5，604，260 “作為環(huán)加氧酶-2抑制劑的 5-甲石黃酉先氨基-I-節(jié)酮(5-methanesulfonamido-l-indanones as an inhibitor of cyclooxygenase-2) ”；美國(guó)專利5，639，780 “作為環(huán)加氧酶抑制劑的N-芐基吲哚_3_基丁酸衍生物(N-benzyl indol-3-yl butanoic acid derivatives as cyclooxygenase inhibitors) ” ；美國(guó)專利 5，677，318 “作為抗炎劑的二苯基-1,2-3-噻二唑(Diphenyl-1, 2-3-thiadiazoles as anti-inflammatory agents) ” ；美國(guó)專利 5，691，374 “作為 C0X-2 抑制劑的二芳基 _5_ 氧化 _2_ (5H)-咲喃麗(Diaryl-5-oxygenated_2- (5H) -furanone s as C0X-2inhibitOTS)”；美國(guó)專利5，698，584 “作為C0X-2抑制劑的前藥的3，4-二芳基 _2_ 輕基-2，5_ 二氫呋喃(3，4-diaryl-2_hydroxy-2，5-dihydrofurans as prodrugs to C0X-2inhibitors)”；美國(guó)專利5，710，140 “作為C0X-2抑制劑的苯基雜環(huán)(Phenyl heterocycles as C0X_2inhibitors) ” ；美國(guó)專利 5，733，909 “作為 C0X-2 抑制劑的前藥的二苯基甚(Diphenyl stilbenes as prodrugs to C0X_2inhibitors) ” ；美國(guó)專利 5，789，413“作為C0X-2抑制劑的前藥的焼基化苯乙烯(Alkylated styrenes as prodrugs to COXjinhibitors)”；美國(guó)專利5，817，700 “作為環(huán)加氧酶抑制劑的雙芳基環(huán)丁烯衍生物(Bisaryl cyclobutenes derivatives as cyclooxygenase inhibitors)，，；美國(guó)專利5，849，943 “用作環(huán)加氧酶-2抑制劑的甚衍生物(Stilbene derivatives useful as cyclooxygenase-2inhibitors) ”；美國(guó)專利5，861，419 “作為選擇性環(huán)加氧酶~2抑制劑的取代的批P定(Substituted pyridines as selective cyclooxygenase_2inhibitors)，，； 美國(guó)專利5，922，742 “作為選擇性環(huán)加氧酶_2抑制劑的吡啶基-2-環(huán)戊烯-I-酮 (Pyridinyl-2-cyclopenten-l-ones as selective cyclooxygenase-2inhibitors)” ;美國(guó)專利5，925，631 “作為C0X-2抑制劑的前藥的烷基化苯乙烯(Alkylated styrenes as prodrugs to C0X_2inhibitors) ” 所有這些專利共同轉(zhuǎn)讓給加拿大默克弗羅斯特公司 (MerckFrosst Canada, Inc.)(加拿大柯克蘭(Kirkland，CA))。另外的 C0X-2 抑制劑也在美國(guó)專利5，643，933中描述，該專利轉(zhuǎn)讓給G. D.塞爾公司(G. D. Searle&Co.)(伊利諾伊州司考基(Skokie，IL))，名稱為“作為環(huán)加氧酶_2和5-脂肪氧合酶抑制劑的取代的磺酉先基苯基雜環(huán)(Substituted sulfonylphenylheterocycIes as cyclooxygenase-2 and 5-lipoxygenase inhibitors)，，。
許多以上鑒定的C0X-2抑制劑是選擇性C0X-2抑制劑的前藥，并且通過活體內(nèi)轉(zhuǎn)化為活性的選擇性的C0X-2抑制劑來發(fā)揮其作用。在1995年I月5日公開的WO 95/00501、1995年7月13日公開的W095/18799以及1995年12月12日頒布的美國(guó)專利155，474，995中詳細(xì)地描述了由以上鑒定的C0X-2抑制劑前藥形成的活性的選擇性的C0X-2 抑制劑。鑒于名稱為“人類環(huán)加氧酶_2cDNA以及用于評(píng)估環(huán)加氧酶_2活性的分析(Human cyclooxygenase-2cDNA and assays for evaluating cyclooxygenase-2activity) ” 的美國(guó)專利5，543，297的傳授內(nèi)容，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將能夠確定是否一種藥劑是選擇性 C0X-2抑制劑還是C0X-2抑制劑的前體，并且因此是否是本發(fā)明的一部分。
血管緊張素系統(tǒng)抑制劑是干擾血管緊張素II的功能、合成或分解代謝的一種藥劑。這些藥劑包括但不限于血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑、血管緊張素II拮抗劑、血管緊張素II受體拮抗劑、激活血管緊張素II的分解代謝的藥劑以及防止血管緊張素I (從其最終衍生出血管緊張素II)的合成的藥劑。腎素-血管緊張素系統(tǒng)參與血液動(dòng)力學(xué)以及水與電解質(zhì)平衡的調(diào)節(jié)。降低血容量、腎灌注壓力或血漿中的Na+濃度的因子傾向于激活該系統(tǒng)，而使這些參數(shù)增加的因子傾向于抑制它的功能。
血管緊張素II拮抗劑是通過結(jié)合到血管緊張素II受體并且干擾其活性來干擾血管緊張素II的活性的化合物。血管緊張素II拮抗劑是熟知的并且包括肽化合物和非肽化合物。大多數(shù)血管緊張素II拮抗劑是稍作修改的同源物，其中通過用某一種其他氨基酸置換位置8上的苯丙氨酸來削弱激動(dòng)劑活性；可以通過減緩體內(nèi)降解的其他置換來增強(qiáng)穩(wěn)定性。血管緊張素II拮抗劑的實(shí)例包括但不限于肽化合物(例如沙拉新，[(San1) (Val5) (Ala8)]血管緊張素_(1_8)八肽和相關(guān)類似物)；N_取代咪唑-2-酮(美國(guó)專利號(hào)5，087，634);咪唑醋酸鹽衍生物，包含2-N-丁基-4-氯-I-(2-氯芐基)咪唑-5-乙酸(參見龍(Long)等人，藥理學(xué)與實(shí)驗(yàn)治療學(xué)雜志(J. Pharmacol. Exp. Ther.), 247 (I), 1-7(1988)) ;4，5，6，7-四氫-IH-咪唑并[4，5_c]吡啶_6_甲酸和類似物衍生物(美國(guó)專利號(hào)4，816，463) ;N2-四唑β -葡糖苷酸類似物(美國(guó)專利號(hào)5，085，992);取代的吡咯、吡唑以及三唑(美國(guó)專利號(hào)5，081，127);酚和雜環(huán)衍生物，如1，3_咪唑(美國(guó)專利號(hào)5，073，566);咪唑-稠合7元環(huán)雜環(huán)(美國(guó)專利號(hào)5，064，825);肽(例如美國(guó)專利號(hào) 4，772，684);針對(duì)血管緊張素II的抗體(例如美國(guó)專利號(hào)4，302，386)；以及芳烷基咪唑化合物，如聯(lián)苯-甲基取代的咪唑(例如1988年I月20日的EP號(hào)253，310) ;ES8891(N_嗎啉基乙?；?(-1-萘基)-L-丙氨?；?(4，噻唑基)-L-丙氨?；?35，45) -4-氨基-3-羥基-5-環(huán)-己戍?；?N-己酰胺，日本東京三共株式會(huì)社(Sankyo Company, Ltd. , Tokyo, Japan)) ;SKF108566 (E_ a-2_[2_ 丁基-l-(羧基苯基)甲基]IH-咪唑-5-基[亞甲基]-2-噻吩丙酸，賓夕法尼亞州史克必成制藥(Smith Kline Beecham Pharmaceuticals, PA));氯沙坦(DUP753/MK954,杜邦默克制藥公司(DuPont Merck Pharmaceutical Company));瑞米吉侖(R042-5892,彖夫邁 羅氏股份公司(F. Hoffman LaRoche AG)) ；A2 激動(dòng)劑(瑪利安 梅羅爾 道(Marion Merrill Dow))以及某些非肽雜環(huán)(G. D.塞爾公司 (G. D. Searle and Company))。
ACE抑制劑包括氨基酸及其衍生物；肽，包含二肽和三肽；以及針對(duì)ACE的抗體，這些抑制劑通過抑制ACE的活性，從而減少或消除加壓物質(zhì)血管緊張素II的形成來干預(yù)腎素_血管緊張素系統(tǒng)。ACE抑制劑已經(jīng)在醫(yī)學(xué)上用來治療高血壓、心功能不全/衰竭、心肌梗死以及腎病。已知可用作ACE抑制劑的多種化合物類別包括酰基巰基和巰基烷?；彼幔缈ㄍ衅绽?美國(guó)專利號(hào)4，105，776)和佐芬普利(美國(guó)專利號(hào)4，316，906);羧基烷基二肽，如依那普利(美國(guó)專利號(hào)4，374，829)、賴諾普利(美國(guó)專利號(hào)4，374，829)、喹那普利(美國(guó)專利號(hào)4，344，949)、雷米普利(美國(guó)專利號(hào)4，587，258)以及培哚普利(美國(guó)專利號(hào) 4，508，729);羧基烷基二肽模擬物，如西拉普利(美國(guó)專利號(hào)4，512，924)和貝那普利(美國(guó)專利號(hào)4，410，520);氧膦基鏈烷?；彼?，如福辛普利(美國(guó)專利號(hào)4，337，201)和群多普利。
腎素抑制劑是干擾腎素活性的化合物。腎素抑制劑包括氨基酸及其衍生物、肽和其衍生物以及針對(duì)腎素的抗體。作為美國(guó)專利的主題的腎素抑制劑的實(shí)例如下肽的尿素衍生物(美國(guó)專利號(hào)5，116，835);通過非肽鍵連接的氨基酸(美國(guó)專利號(hào)5，114，937) ;二肽和三肽衍生物(美國(guó)專利號(hào)5，106，835);氨基酸和其衍生物(美國(guó)專利號(hào)5，104，869 和5，095，119) ;二醇磺酰胺和亞磺酰(美國(guó)專利號(hào)5，098，924);改性肽(美國(guó)專利號(hào) 5，095，006);肽基β-氨?；被及被姿狨?美國(guó)專利號(hào)5，089，471);吡咯咪唑啉酮(美國(guó)專利號(hào)5，075，451);含有氟和氯的他汀類(statine)或二氟司特酮(statone)的肽(美國(guó)專利號(hào)5，066，643);肽基氨基二醇(美國(guó)專利號(hào)5，063，208和4，845，079) ；N-嗎啉基衍生物(美國(guó)專利號(hào)5，055，466);抑肽素衍生物(美國(guó)專利號(hào)4，980，283) ;N_雜環(huán)醇 (美國(guó)專利號(hào)4，885，292);針對(duì)腎素的單克隆抗體(美國(guó)專利號(hào)4，780，401);以及多種其他肽和其類似物(美國(guó)專利號(hào) 5，071，837,5, 064，965,5, 063，207,5, 036，054,5, 036，053、 5，034，512 以及 4，894，437)。
HMG-CoA還原酶抑制劑包括但不限于他汀類藥物，如辛伐他汀(美國(guó)專利第4，444，784號(hào))、洛伐他汀(美國(guó)專利第4，231，938號(hào))、普伐他汀鈉(美國(guó)專利第4，346，227號(hào))、氟伐他汀(美國(guó)專利第4，739，073號(hào))、阿托伐他汀(美國(guó)專利第 5，273，995號(hào))、西立伐他汀以及在以下專利中描述的許多其他HMG-CoA還原酶抑制劑美國(guó)專利號(hào)5，622，985、美國(guó)專利號(hào)5，135，935、美國(guó)專利號(hào)5，356，896、美國(guó)專利號(hào) 4，920，109、美國(guó)專利號(hào)5，286，895、美國(guó)專利號(hào)5，262，435、美國(guó)專利號(hào)5，260，332、美國(guó)專利號(hào)5，317，031、美國(guó)專利號(hào)5，283，256、美國(guó)專利號(hào)5，256，689、美國(guó)專利號(hào)5，182，298、 美國(guó)專利號(hào)5，369，125、美國(guó)專利號(hào)5，302，604、美國(guó)專利號(hào)5，166，171、美國(guó)專利號(hào) 5，202，327、美國(guó)專利號(hào)5，276，021、美國(guó)專利號(hào)5，196，440、美國(guó)專利號(hào)5，091，386、美國(guó)專利號(hào)5，091，378、美國(guó)專利號(hào)4，904，646、美國(guó)專利號(hào)5，385，932、美國(guó)專利號(hào)5，250，435、 美國(guó)專利號(hào)5，132，312、美國(guó)專利號(hào)5，130，306、美國(guó)專利號(hào)5，116，870、美國(guó)專利號(hào) 5，112，857、美國(guó)專利號(hào)5，102，911、美國(guó)專利號(hào)5，098，931、美國(guó)專利號(hào)5，081，136、美國(guó)專利號(hào)5，025，000、美國(guó)專利號(hào)5，021，453、美國(guó)專利號(hào)5，017，716、美國(guó)專利號(hào)5,001, 144、 美國(guó)專利號(hào)5，001，128、美國(guó)專利號(hào)4，997，837、美國(guó)專利號(hào)4，996，234、美國(guó)專利號(hào) 4，994，494、美國(guó)專利號(hào)4，992，429、美國(guó)專利號(hào)4，970，231、美國(guó)專利號(hào)4，968，693、美國(guó)專利號(hào)4，963，538、美國(guó)專利號(hào)4，957，940、美國(guó)專利號(hào)4，950，675、美國(guó)專利號(hào)4，946,864、 美國(guó)專利號(hào)4，946，860、美國(guó)專利號(hào)4，940，800、美國(guó)專利號(hào)4，940，727、美國(guó)專利號(hào) 4，939，143、美國(guó)專利號(hào)4，929，620、美國(guó)專利號(hào)4，923，861、美國(guó)專利號(hào)4，906，657、美國(guó)專利號(hào)4，906，624以及美國(guó)專利號(hào)4，897，402，這些專利的披露內(nèi)容通過引用結(jié)合在此。
應(yīng)當(dāng)了解的是，本發(fā)明考慮了與本發(fā)明的重復(fù)RIC方案組合的一種或多種任何前述藥劑的用途。
RIC
如在此所使用的，RIC方案是至少一個(gè)被誘發(fā)的短暫缺血事件隨后再灌注事件的循環(huán)。典型地，這些方案是通過限制受試者的肢體或外周組織中的血流并且然后去除血流限制并且允許血液再灌注該肢體或組織來進(jìn)行的。RIC方案典型地是非侵入性的。一個(gè)方案可以包括單個(gè)循環(huán)或多個(gè)循環(huán)，包括2、3、4、5個(gè)或更多個(gè)循環(huán)。在一個(gè)重要的實(shí)施方案中，一個(gè)方案包括4個(gè)缺血與再灌注循環(huán)。
血流限制典型地采用向該肢體或組織施加的超出收縮壓的壓力(即超收縮壓)的形式。該壓力可以超出(或大于)收縮壓大約5、大約10、大約15、大約20或更高的mmHg。 因?yàn)槭茉囌咧g的收縮壓將不同，誘發(fā)缺血所需要的絕對(duì)壓力將在受試者之間變化。在其他實(shí)施方案中，可以將壓力預(yù)置在例如200mmHg?？梢允褂萌魏畏椒▉韺?shí)現(xiàn)血流限制，因?yàn)楸景l(fā)明在這一點(diǎn)上不受限制。典型地，可以用可充氣袖帶來實(shí)現(xiàn)，雖然止血帶系統(tǒng)也是適合的。用于進(jìn)行RIC的自動(dòng)化裝置的另外的實(shí)例描述如下。
誘發(fā)的缺血事件是短暫的。也就是說，它可以具有大約I、大約2、大約3、大約4、 大約5或更多分鐘的持續(xù)時(shí)間。同樣，再灌注事件可以具有大約I、大約2、大約3、大約4、 大約5或更多分鐘的持續(xù)時(shí)間。實(shí)例證明了 4個(gè)5分鐘缺血接著5分鐘再灌注的循環(huán)對(duì)身體活動(dòng)能力的影響。
如果使用肢體來進(jìn)行，可以使用上肢或下肢，雖然在一些情況下上肢是優(yōu)選的。在一些情況下，以重疊或同時(shí)的方式在身體上的兩個(gè)不同部位進(jìn)行RIC。
可以使用任何裝置來進(jìn)行RIC，其條件是該裝置能夠誘發(fā)短暫缺血和再灌注，無論是手動(dòng)地還是自動(dòng)地。
在其最簡(jiǎn)單的一種形式中，該方法可以使用血壓計(jì)(即典型地用來測(cè)量受試者血壓的儀器)來進(jìn)行。將血壓計(jì)的袖帶放置在受試者的肢體(例如一個(gè)臂或腿)周圍并且充氣到大到足以閉塞通過該肢體的血流的壓力(即比受試者的收縮壓更大的壓力)。將袖帶維持在充氣狀態(tài)以阻止通過該肢體的血流，持續(xù)規(guī)定的一段時(shí)間(在此稱為缺血持續(xù)時(shí)間)。在缺血持續(xù)時(shí)間之后，從袖帶釋放壓力以允許血液通過該肢體再灌注一段時(shí)間，這段時(shí)間在此稱為再灌注持續(xù)時(shí)間。接著將袖帶再充氣并且立即重復(fù)該程序許多次。
該方法同樣可以使用手動(dòng)型止血帶來進(jìn)行。還可以使用如在公開的PCT申請(qǐng)WO 83/00995和公開的美國(guó)申請(qǐng)20060058717中所描述的裝置。
可以使用的另一個(gè)系統(tǒng)描述于公開的美國(guó)申請(qǐng)20080139949中。這個(gè)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)是這個(gè)系統(tǒng)可以獨(dú)立于執(zhí)業(yè)醫(yī)師使用，并且這個(gè)系統(tǒng)自動(dòng)誘導(dǎo)所要求的RIC方案。這個(gè)系統(tǒng)部分地例示在圖8中，圖8展示了一個(gè)袖帶10、一個(gè)致動(dòng)器12、一個(gè)控制器14以及一個(gè)用戶界面16。袖帶被配置成置放在受試者的肢體15 (如受試者的臂或腿)周圍。致動(dòng)器在致動(dòng)時(shí)引起袖帶在肢體周圍收縮以閉塞通過該肢體的血流?？刂破鲌?zhí)行一個(gè)方案，該方案包括重復(fù)一個(gè)循環(huán)一次或多次。循環(huán)本身包括致動(dòng)袖帶以阻止血流，將袖帶維持在致動(dòng)狀態(tài)持續(xù)一個(gè)缺血持續(xù)時(shí)間，釋放袖帶，并且將袖帶維持在松弛狀態(tài)以允許再灌注。
圖9顯示了呈現(xiàn)可以用來進(jìn)行RIC的一個(gè)方案的一個(gè)框圖。該方案以將袖帶放置在受試者的肢體周圍開始。然后將該系統(tǒng)起動(dòng)并且通過該控制器使方案開始。在一個(gè)實(shí)施方案中，該系統(tǒng)由醫(yī)學(xué)專業(yè)人員起動(dòng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，系統(tǒng)可以由受試者啟動(dòng)。袖帶收縮以向受試者的肢體施加比收縮壓更大的初始?jí)毫ΑＨ缭诖怂撌龅?，初始?jí)毫梢允窍到y(tǒng)的一個(gè)默認(rèn)值或可以被編程到一個(gè)具體方案中。然后將該袖帶放氣以確定受試者的收縮壓。這可以伴隨著監(jiān)測(cè)受試者的科羅特科夫音(Korotkoff sound)或振動(dòng)的開始?？商娲鼗蛄硗獾兀梢允褂眠h(yuǎn)端遙感器(例如，一個(gè)在指尖上的裝置，該裝置對(duì)流量存在或缺乏或流量的維持是敏感的)。一旦確定了收縮壓，該系統(tǒng)開始該方案的第一個(gè)循環(huán)。在一些實(shí)施方案中，可以確定收縮壓作為方案的初始部分。如在此所使用的，術(shù)語治療方案 (protocol)和方案(regimen)可互換地使用。
隨著袖帶收縮以在方案中規(guī)定的一個(gè)量向受試者的肢體施加大于該受試者的收縮壓的目標(biāo)壓力，該循環(huán)開始。這使得通過受試者的肢體的血流閉塞。以在方案中定義的一個(gè)缺血持續(xù)時(shí)間保持該針對(duì)受試者的肢體的外部壓力。該系統(tǒng)在缺血持續(xù)時(shí)間期間監(jiān)測(cè)受試者的壓力釋放標(biāo)準(zhǔn)，該壓力釋放標(biāo)準(zhǔn)可以包括系統(tǒng)電力故障、系統(tǒng)電源尖脈沖(power spike)以及快速釋放機(jī)構(gòu)的手動(dòng)起動(dòng)。該系統(tǒng)還在缺血持續(xù)時(shí)間期間監(jiān)測(cè)受試者的通過受試者的肢體再灌注的任何征象，并且因此增加通過袖帶所施加的外部壓力以防止這種再灌注。再灌注的征象可以包括科羅特科夫音或振動(dòng)的開始。在經(jīng)過缺血持續(xù)時(shí)間之后，袖帶從受試者的肢體的周圍釋放壓力以允許再灌注。允許再灌注持續(xù)在循環(huán)中所定義的一個(gè)再灌注持續(xù)時(shí)間。
初始循環(huán)典型地在再灌注持續(xù)時(shí)間之后結(jié)束。此時(shí)，隨著袖帶被致動(dòng)以在受試者的肢體周圍收縮以閉塞通過該肢體的血流持續(xù)另一個(gè)缺血持續(xù)時(shí)間，可以開始一個(gè)后續(xù)循環(huán)。
在圖8中所展示的袖帶被配置成定位在受試者的肢體周圍并且當(dāng)致動(dòng)時(shí)在肢體周圍收縮。在一個(gè)實(shí)施方案中，套袖包裹在受試者的上臂、小腿或大腿周圍并且緊密固定在適當(dāng)位置。袖帶的多個(gè)部分可能包括鉤和環(huán)型材料，這種材料可以用于將套袖固定在受試者的肢體周圍的適當(dāng)位置。致動(dòng)器將袖帶充氣使得肢體被束緊到閉塞通過受試者的肢體的血流的程度。
所展示的袖帶包括一個(gè)可充氣氣囊(未顯示)，該可充氣氣囊接受一種流體(如空氣)以引起袖帶膨脹并且在受試者的肢體周圍收縮。氣囊是由一種不可滲透的材料(如柔性塑料或橡膠)構(gòu)成的。在氣囊的一端存在一個(gè)連接端口 18以允許空氣在充氣過程中進(jìn)入氣囊或在放氣過程中離開氣囊。該端口可以包括多個(gè)接合特征以促進(jìn)如通過空氣軟管連接到致動(dòng)器。這些特征可以包括螺紋、夾子等。雖然所展示的實(shí)施方案包括被定位在袖帶內(nèi)的單個(gè)氣囊，但應(yīng)當(dāng)理解的是其他實(shí)施方案也是有可能的。例如，根據(jù)一些實(shí)施方案，織物套袖本身可能不透氣，使得獨(dú)立的氣囊是不需要的。在其他實(shí)施方案中，可以將多個(gè)獨(dú)立的可充氣的氣囊結(jié)合到一個(gè)共同套袖中，因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在此方面不受限制。
經(jīng)歷RIC的受試者的總體大小可以變化很大，特別是考慮到可以對(duì)其應(yīng)用這些方法的種類范圍。鑒于這種變化，可能所希望的是袖帶的某些實(shí)施方案可以在較寬范圍內(nèi)調(diào)整以適應(yīng)可預(yù)期到的受試者肢體圍長(zhǎng)的多樣性。根據(jù)一些實(shí)施方案，袖帶包括一個(gè)可充氣織物套袖，該可充氣織物套袖的長(zhǎng)度大于三英尺，使得可以適應(yīng)長(zhǎng)達(dá)三英尺的圍長(zhǎng)。袖帶的實(shí)施方案可以包括小到兩英寸、一英寸或甚至更小的寬度，以便適應(yīng)很小的受試者(包含新生兒)的上臂或腿。然而，應(yīng)當(dāng)理解的是，其他實(shí)施方案可以被配置成圍繞范圍小很多的肢體尺寸，因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在這一點(diǎn)上不受限制。
可以使用不同的裝置作為致動(dòng)器以使袖帶在受試者的肢體周圍束緊或釋放袖帶。 如圖8的實(shí)施方案中所展示的，致動(dòng)器包括一個(gè)氣動(dòng)泵以通過一根空氣軟管向一個(gè)可充氣袖帶提供加壓空氣。該致動(dòng)器還包括一個(gè)釋放閥20，該釋放閥在被致動(dòng)時(shí)在可充氣袖帶與外部環(huán)境之間打開一個(gè)通道以允許加壓空氣從袖帶中逸出，以使得袖帶在受試者的肢體周圍松開。
空氣泵可以包括能夠遞送壓縮空氣的任何裝置。根據(jù)一些實(shí)施方案，空氣泵包括一個(gè)活塞式壓縮機(jī)，雖然也可以使用其他類型的泵(如離心泵和渦旋式壓縮機(jī))。根據(jù)一些實(shí)施方案，泵可以被配置成提供速率在O. I到20立方英尺/分鐘之間的氣流，且排出壓力高達(dá)50psi。然而，其他流速和/或壓力是可能的，因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在此方面不受限制。
如以上所論述，致動(dòng)器還可以包括一個(gè)釋放機(jī)構(gòu)以從受試者的肢體周圍釋放袖帶。在所展示的實(shí)施方案中，該釋放機(jī)構(gòu)包括一個(gè)釋放閥20，該釋放閥被定位在控制器外殼之內(nèi)。如所顯示的，該釋放閥可以是一個(gè)螺線管，該螺線管在完全閉合的位置與完全打開的位置之間快速移動(dòng)以從袖帶快速釋放空氣并且從而使袖帶從受試者快速釋放。根據(jù)一些實(shí)施方案，還可以致動(dòng)同一釋放閥或另一個(gè)釋放閥以緩慢地打開，以便調(diào)節(jié)袖帶的壓力或允許更受控制的壓力釋放(如在測(cè)量受試者的血壓時(shí)可能需要)。
該系統(tǒng)的實(shí)施方案可以包括多個(gè)安全特征以允許袖帶從受試者的肢體快速釋放。 而且，如當(dāng)受試者感覺不適時(shí)，可以由受試者容易地起動(dòng)這些實(shí)施方案中的一些實(shí)施方案。 在一個(gè)實(shí)施方案中，安全釋放22包括被定位在袖帶上或附近的一個(gè)大按鈕。在這一點(diǎn)上， 該安全釋放是受試者夠得著的。在其他實(shí)施方案中，該安全釋放可以包括一個(gè)獨(dú)立的致動(dòng)器，如握持在受試者的自由手中的致動(dòng)器。起動(dòng)安全釋放可以引起充氣袖帶的釋放閥打開， 從而使空氣從袖帶快速去除。
該系統(tǒng)還可以包括一個(gè)連續(xù)操作的袖帶釋放機(jī)構(gòu)。例如，可以將一個(gè)緩慢釋放閥結(jié)合到一個(gè)充氣袖帶中以提供加壓空氣從袖帶的連續(xù)緩慢釋放。連續(xù)緩慢釋放機(jī)構(gòu)可以為受試者的肢體提供安全釋放，即使在面臨電力故障或可能阻止適當(dāng)操作冗余安全特征 (redundant safety feature)的其他事件時(shí)?？梢詫⑾嗨祁愋偷臋C(jī)構(gòu)結(jié)合到不使用可氣動(dòng)充氣的袖帶的實(shí)施方案中，因?yàn)檫B續(xù)緩慢釋放機(jī)構(gòu)不限于充氣袖帶。該系統(tǒng)還可以包括一個(gè)壓力止回閥作為一個(gè)安全特征。這種閥門可以通過釋放超過最大設(shè)定點(diǎn)的壓力來操作。最大設(shè)定點(diǎn)將等于或超過在遠(yuǎn)端缺血處理期間所使用的超收縮壓，并且可以是但不限于 200mm Hg、210mm Hg、220mm Hg>230mm Hg>240mm Hg 或 250mm Hg。該系統(tǒng)還可以包括軟件和/或硬件部件，這些部件監(jiān)測(cè)壓力(例如袖帶壓力和/或受試者的血壓)并且優(yōu)選地讀出這些壓力測(cè)量值，無論實(shí)時(shí)還是在遠(yuǎn)端缺血處理完成之后。以此方式，可以確定壓力偏差。
該系統(tǒng)的實(shí)施方案包括一個(gè)控制器，該控制器接受來自系統(tǒng)中的一個(gè)方案和任何其他傳感器的信息，從而控制該致動(dòng)器來進(jìn)行RIC。可以用許多方式的任何一種來實(shí)施該控制器與方案的組合。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，可以使用硬件、軟件或其組合來實(shí)施該控制器與方案的組合。當(dāng)在軟件中實(shí)施時(shí)，可以在任何適合的處理器或處理器集合(無論是提供在單個(gè)計(jì)算機(jī)中還是分布在多個(gè)計(jì)算機(jī)中)上執(zhí)行軟件代碼。應(yīng)當(dāng)理解的是，進(jìn)行在此所描述的功能的任何部件或部件集合一般可以被考慮為控制在此所論述的功能的一個(gè)或多個(gè)控制器。該一個(gè)或多個(gè)控制器可以用許多方式，如用專用硬件或用通用硬件(例如一個(gè)或多個(gè)處理器)來實(shí)施，使用微代碼或軟件將該硬件編程以執(zhí)行上述功能。該一個(gè)或多個(gè)控制器可以包括在一個(gè)或多個(gè)主計(jì)算機(jī)、一個(gè)或多個(gè)存儲(chǔ)器系統(tǒng)或任何其他類型的計(jì)20算機(jī)中，該任何其他類型的計(jì)算機(jī)可以包含與一個(gè)或多個(gè)控制器連接的一個(gè)或多個(gè)存儲(chǔ)裝置。在一個(gè)實(shí)施方案中，控制器包括一個(gè)通信鏈路以通過無線方式或通過電纜或光纜與一個(gè)遠(yuǎn)端位置通信。
在此方面，應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明的實(shí)施方案的一種實(shí)施包括用呈計(jì)算機(jī)程序 (即多個(gè)指令)形式的方案編碼的至少一個(gè)計(jì)算機(jī)可讀介質(zhì)(例如計(jì)算機(jī)存儲(chǔ)器、軟盤、光盤、磁帶等)，當(dāng)由該控制器執(zhí)行時(shí)該計(jì)算機(jī)可讀介質(zhì)進(jìn)行在此所論述的本發(fā)明的實(shí)施方案的功能。計(jì)算機(jī)可讀介質(zhì)可以是可傳送的，使得存儲(chǔ)在其上的方案可以加載到任何計(jì)算機(jī)系統(tǒng)資源上，以實(shí)施在此所論述的本發(fā)明的多個(gè)方面。另外，應(yīng)當(dāng)理解的是，提到一個(gè)方案或控制器(當(dāng)執(zhí)行時(shí)該方案或控制器進(jìn)行在此論述的功能)不限于在一個(gè)主計(jì)算機(jī)上運(yùn)行的一個(gè)應(yīng)用程序。相反，術(shù)語方案在此以一般意義使用來提及任何類型的計(jì)算機(jī)代碼(例如軟件或微代碼)，這些任何類型的計(jì)算機(jī)代碼可以用來對(duì)處理器進(jìn)行編程，以實(shí)施本發(fā)明的在此所論述的多個(gè)方面。
該系統(tǒng)還可以包括一個(gè)或多個(gè)傳感器26，該一個(gè)或多個(gè)傳感器接受來自受試者和 /或系統(tǒng)本身的多個(gè)部分的信息。這些傳感器可以接受關(guān)于受試者的任何部分(包括正在接受治療的肢體)中的血流的信息。這些傳感器還可以接受關(guān)于該系統(tǒng)的其他操作參數(shù) (如在充氣袖帶之內(nèi)的空氣壓力、由袖帶施加的直接壓力讀數(shù)或張力帶的多個(gè)部分之內(nèi)的張力)的信息。
充氣袖帶可以包括測(cè)量在袖帶之內(nèi)的壓力的一個(gè)傳感器。袖帶壓力經(jīng)常直接指示存在于在袖帶下方的肢體的血管之內(nèi)的壓力。如在此所論述，一個(gè)系統(tǒng)的控制器經(jīng)常被編程為將在一個(gè)循環(huán)的缺血持續(xù)時(shí)間期間有待維持的一個(gè)特定袖帶壓力作為目標(biāo)。在包括一個(gè)充氣袖帶的實(shí)施方案中，可以將壓力傳感器定位在袖帶的加壓空間之內(nèi)、空氣軟管或甚至在致動(dòng)器本身之內(nèi)的任何位置。還可以將壓力傳感器定位在袖帶的內(nèi)表面上以直接測(cè)量在袖帶與受試者的肢體的外表面之間的壓力。在使用中，可以將袖帶定向?yàn)槭沟脡毫鞲衅髦苯佣ㄎ辉谑茉囌叩膭?dòng)脈上方，以便提供對(duì)感興趣的血管處的壓力的更直接測(cè)量?？梢詤⒖寂瑺柖〉热说墓桥c關(guān)節(jié)雜志(J Bone Joint Surg Am), 2009,91 :2958_2967，該文獻(xiàn)論述了袖帶寬度、周長(zhǎng)以及壓力與血壓測(cè)量值的關(guān)系。
在一個(gè)實(shí)施方案中，系統(tǒng)還可以包括一個(gè)或多個(gè)振動(dòng)和/或超聲波傳感器28以確定科羅特科夫音?？屏_特科夫音通常被理解為當(dāng)從外部向受試者的動(dòng)脈施加介于收縮壓與舒張壓之間的壓力時(shí)將存在。收縮壓與完全地閉塞通過受試者的血管的血流的壓力值相關(guān)，并且在這一點(diǎn)上可以被系統(tǒng)用作確定在何時(shí)系統(tǒng)中的壓力低到足以允許血流或高到足以閉塞血流的反饋。
可以包括一個(gè)或多個(gè)傳感器以確認(rèn)接受袖帶的肢體中的血流停止或再灌注。例如，在一些實(shí)施方案中，可以將一個(gè)脈搏血氧計(jì)30定位在接受袖帶的肢體的一個(gè)遠(yuǎn)端部分上，如在肢體的一個(gè)手指或腳趾上。脈搏血氧計(jì)可以提供關(guān)于通過受試者的血管的血液脈動(dòng)和氧飽和血紅蛋白的百分比的信息。當(dāng)通過肢體的血流未出現(xiàn)時(shí)，脈搏血氧計(jì)將檢測(cè)到?jīng)]有脈搏以確認(rèn)血流的閉塞。而且，脈搏血氧計(jì)還可以檢測(cè)氧飽和血紅蛋白的百分比，當(dāng)通過肢體的血流停止時(shí)該百分比將下降。應(yīng)當(dāng)理解的是，還可以使用其他傳感器來確認(rèn)血流的停止，其他傳感器如光體積描記傳感器、超聲波流量傳感器、溫度傳感器、紅外檢測(cè)器以及近紅外傳感器，因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在此方面不受限制。
如以上所提到的，該系統(tǒng)包括通過控制器來指導(dǎo)該系統(tǒng)的操作的方案。該方案的實(shí)施方案包括一個(gè)循環(huán)，該循環(huán)包括袖帶致動(dòng)、一個(gè)缺血持續(xù)時(shí)間、袖帶釋放以及一個(gè)再灌注持續(xù)時(shí)間。在方案的許多實(shí)施方案中，該循環(huán)可以重復(fù)多次。另外，該方案的一些實(shí)施方案包括收縮壓確定。
循環(huán)的袖帶致動(dòng)部分包括使袖帶在受試者肢體周圍收縮以使通過該肢體的血流閉塞。袖帶的收縮是通過控制器從方案讀取指令(如對(duì)于袖帶壓力的目標(biāo)設(shè)定點(diǎn))，并且然后通過啟動(dòng)控制器以使袖帶達(dá)到目標(biāo)設(shè)定點(diǎn)而實(shí)現(xiàn)?？梢酝ㄟ^在此所描述的任何一種傳感器和技術(shù)來感測(cè)目標(biāo)設(shè)定點(diǎn)的達(dá)到。
在循環(huán)的缺血階段期間，在受試者的肢體周圍維持壓力以防止通過肢體的血流的再灌注。缺血階段的長(zhǎng)度(稱為缺血持續(xù)時(shí)間)典型地由醫(yī)生或其他醫(yī)學(xué)專業(yè)人員規(guī)定， 并且被編程到方案中。缺血持續(xù)時(shí)間可以短到幾秒或長(zhǎng)到20分鐘或甚至更長(zhǎng)，因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在此方面不受限制。在一些實(shí)施方案中，在同一方案期間的缺血持續(xù)時(shí)間在從循環(huán)到循環(huán)之間變化，雖然在其他實(shí)施方案中，缺血持續(xù)時(shí)間保持恒定。
控制器發(fā)揮作用以將由袖帶所施加的壓力維持在超出受試者的收縮壓的一個(gè)設(shè)定點(diǎn)處。袖帶的實(shí)施方案可以隨時(shí)間相對(duì)于受試者的肢體而松馳，從而降低壓力并且最終允許再灌注。這可以由不同的因素引起，這些因素包括受試者的肢體中的肌肉的松弛、肢體周圍的袖帶的拉伸、漏氣(有意的或無意的)，等等。為此目的，傳感器可以提供壓力讀數(shù)作為對(duì)控制器的反饋。控制器可以測(cè)量設(shè)定點(diǎn)與實(shí)際壓力讀數(shù)之間的任何差異并且可以向致動(dòng)器提供任何必需的命令以補(bǔ)償誤差。
可以使用不同的方法來規(guī)定在缺血持續(xù)時(shí)間期間對(duì)于控制器的一個(gè)適當(dāng)設(shè)定點(diǎn)。 根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，設(shè)定點(diǎn)是由醫(yī)生(或其他醫(yī)學(xué)專業(yè)人員)手動(dòng)輸入到方案中的?？商娲?，醫(yī)生可以根據(jù)受試者的收縮壓選擇一個(gè)設(shè)定點(diǎn)。在一個(gè)實(shí)施方案中，設(shè)定點(diǎn)可以選擇為超過受試者的收縮壓的固定壓力量，如超出受試者的收縮壓5_ Hg、10_ Hg、15_ Hg、 20mm Hg、25mm Hg、30mm Hg、35mm Hg或任何其他固定量。在其他實(shí)施方案中，設(shè)定點(diǎn)可以規(guī)定為受試者的收縮壓的一個(gè)百分比，如101 % ,102% ,103% ,104% ,105% ,106% ,107%, 108%、109%、110%、111 %、112%、1113%、114%、115%或收縮壓以及其他百分比，因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在此方面不受限制。超出收縮壓的點(diǎn)可以由醫(yī)學(xué)專業(yè)人員設(shè)定并且可能取決于若干因素，包括但不限于受試者的大小、受試者的肢體的大小、受試者的血壓、血流停止的確認(rèn)，等等。
根據(jù)一些實(shí)施方案，該方案包括多個(gè)階段以確定受試者的收縮壓?？梢栽试S袖帶在受試者的肢體周圍以一種系統(tǒng)性方式從認(rèn)為超出收縮壓的一個(gè)點(diǎn)起松開，同時(shí)傳感器監(jiān)測(cè)肢體的科羅特科夫音或振動(dòng)的開始。一旦確定了收縮壓，那么該方案就可按正常過程繼續(xù)。
收縮壓的確定可以任選地發(fā)生在一個(gè)方案期間的任何時(shí)間，或根本不發(fā)生。根據(jù)一些實(shí)施方案，各循環(huán)以確定受試者的收縮壓開始。在其他實(shí)施方案中，可以僅在該方案的初始部分期間確定收縮壓一次。仍然在其他實(shí)施方案中，可以在各循環(huán)的袖帶釋放部分期間釋放袖帶時(shí)確定收縮壓。然而，如在此所論述，在一個(gè)方案期間可能根本不確定收縮壓， 因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在這一點(diǎn)上不受限制。
該系統(tǒng)可以被配置成在缺血持續(xù)時(shí)間期間調(diào)節(jié)壓力設(shè)定點(diǎn)。如在此所論述，該系統(tǒng)可以包括對(duì)再灌注的開始進(jìn)行檢測(cè)的傳感器。作為一個(gè)實(shí)例，這可以通過檢測(cè)科羅特科夫音或振動(dòng)的存在來實(shí)現(xiàn)。在一個(gè)缺血持續(xù)時(shí)間期間科羅特科夫音的存在可能指示袖帶壓力已經(jīng)降到收縮壓以下或收縮壓已經(jīng)上升到超出設(shè)定點(diǎn)，該設(shè)定點(diǎn)先前是高于收縮壓的。 可以另外或可替代地使用其他裝置，包括例如手指或腳趾上的裝置，這些裝置檢測(cè)流動(dòng)的存在或缺乏。在這種情形下，控制器可以基于新確定的收縮壓和/或其他信息來調(diào)節(jié)設(shè)定點(diǎn)，并且在這一點(diǎn)上可以確定并且防止否則可能會(huì)發(fā)生的不需要的再灌注。
循環(huán)的袖帶釋放部分在缺血持續(xù)時(shí)間結(jié)束時(shí)發(fā)生并且包括釋放袖帶達(dá)到低于舒張壓的一個(gè)點(diǎn)。根據(jù)一些實(shí)施方案，袖帶釋放包括釋放袖帶的壓力或張力。在利用充氣袖帶的實(shí)施方案中，這可能簡(jiǎn)單地與移動(dòng)空氣釋放閥到完全打開的位置以允許袖帶壓力快速降低以及在受試者的肢體周圍的袖帶相應(yīng)的快速松弛相關(guān)聯(lián)。然而，應(yīng)當(dāng)理解的是，在其他實(shí)施方案中，袖帶松弛可以用一種更慢更受控制的方式發(fā)生，因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在此方面不受限制。另外，如在此所論述，袖帶釋放可以伴隨著監(jiān)測(cè)科羅特科夫音或振動(dòng)的開始以確定或確認(rèn)受試者的收縮壓。
在循環(huán)的多個(gè)實(shí)施方案中，再灌注持續(xù)時(shí)間跟隨在袖帶釋放之后。允許通過肢體的再灌注持續(xù)被稱為再灌注持續(xù)時(shí)間的一段時(shí)間。很像缺血持續(xù)時(shí)間，可以允許再灌注持續(xù)不同長(zhǎng)度的時(shí)間，短到五秒、一分鐘或更多分鐘以及長(zhǎng)到20分鐘或甚至更久。再灌注持續(xù)時(shí)間可以在一個(gè)普通的方案期間從循環(huán)到循環(huán)之間保持恒定，或可以在各循環(huán)之間變化，因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在此方面不受限制。
該方案可以包括任何數(shù)目的循環(huán)。如在此所論述，一個(gè)普通的循環(huán)可以簡(jiǎn)單地重復(fù)多次(如二、三、四次或更多次)以完成一個(gè)方案?？商娲兀梢杂貌煌瑓?shù)(如不同的缺血持續(xù)時(shí)間、再灌注持續(xù)時(shí)間、缺血持續(xù)時(shí)間期間的壓力設(shè)定點(diǎn)，等等)將一個(gè)方案的多個(gè)循環(huán)編程。
在一些實(shí)施方案中，該系統(tǒng)可以包括一個(gè)數(shù)據(jù)記錄特征，該數(shù)據(jù)記錄特征記錄一個(gè)方案的所有階段期間的多個(gè)系統(tǒng)參數(shù)(如袖帶壓力或張力)。還可以記錄操作時(shí)的日期。 還可以通過該系統(tǒng)記錄其他特征(如識(shí)別受試者的個(gè)人信息)。
該系統(tǒng)的實(shí)施方案可以結(jié)合不同的特征來告知受試者或醫(yī)學(xué)專業(yè)人員有關(guān)方案的進(jìn)展。聽覺或視覺指示器可以伴隨該方案的任何階段。例如，時(shí)鐘可以顯示該方案的指定部分或整個(gè)方案已經(jīng)過去或剩余的時(shí)間量。實(shí)施方案還可以包括保持受試者和/或醫(yī)學(xué)專業(yè)人員知情的其他特征，因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在此方面不受限制。
根據(jù)一些實(shí)施方案，系統(tǒng)包括多個(gè)特征以防止受試者篡改或意外的再編程。例如， 在一些實(shí)施方案中，可再編程的特征僅在輸入密碼之后才可以進(jìn)入。這可以防止受試者錯(cuò)誤地將該方案再編程或以別的方式干擾系統(tǒng)操作。應(yīng)當(dāng)理解的是，也可以使用其他裝置來防止意外的再編程，其他裝置如電子鑰匙、機(jī)械鎖，等等。
系統(tǒng)可以被配置成用在多種環(huán)境中。例如，可以將該系統(tǒng)安裝在具有多個(gè)腳輪的便攜式架子上以便于容易移動(dòng)。架子可以將控制器、用戶界面以及與袖帶的連接物定位在對(duì)于受試者來說方便的高度。在其他實(shí)施方案中，該系統(tǒng)被配置成供便攜式使用。在這些實(shí)施方案中，該系統(tǒng)可以被配置成預(yù)先放置到一個(gè)手提箱中以便容易運(yùn)輸。
該系統(tǒng)也不限于在圖I的實(shí)施方案中所展示的部件。例如，根據(jù)其他實(shí)施方案(如在圖10中所展示的實(shí)施方案)，袖帶可以被配置成通過可替代機(jī)構(gòu)來束緊受試者的肢體。23在所展示的實(shí)施方案中，該袖帶被配置成具有被定位在一端的棘輪機(jī)構(gòu)的一條帶子。在使用中，該帶子包裹在受試者的肢體周圍，且?guī)ё拥淖杂啥舜┻^該棘輪機(jī)構(gòu)。在這樣一個(gè)實(shí)施方案中，致動(dòng)器可以包括這樣一個(gè)機(jī)構(gòu)，該機(jī)構(gòu)通過棘輪機(jī)構(gòu)進(jìn)一步拉動(dòng)帶子的自由端以使袖帶在肢體周圍收縮，或解除棘輪機(jī)構(gòu)以釋放帶子從而使帶子從肢體釋放。然而其他的機(jī)構(gòu)(如止血帶機(jī)構(gòu))是可能的，因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在此方面不受限制。
如以上參考圖10所描述的，某些實(shí)施方案可以具有一個(gè)袖帶，該袖帶包括一條帶子，該帶子不充氣而是通過另一種機(jī)構(gòu)在受試者的肢體周圍收緊。在這些實(shí)施方案中，致動(dòng)器可以包括被配置成使帶子的一端相對(duì)于帶子的其他部分移動(dòng)以便使帶子處于緊張狀態(tài)的一個(gè)張緊機(jī)構(gòu)。如所顯示的，該機(jī)構(gòu)可以包括在一個(gè)外殼內(nèi)保持彼此靠近的相對(duì)的輥。該外殼包括用于接受帶子的一個(gè)自由端的一條縫和用于固定地連接到帶子的相對(duì)端的一個(gè)固定點(diǎn)。帶子的自由端穿到該縫中以及這些輥之間。這些輥可以如由電動(dòng)機(jī)機(jī)械地致動(dòng)以相對(duì)于彼此旋轉(zhuǎn)，從而拉動(dòng)自由端穿過外殼并且因此使帶子在受試者的肢體周圍收緊。
張緊機(jī)構(gòu)可以包括安裝在一個(gè)棘輪自由輪機(jī)構(gòu)上的相對(duì)的輥。自由輪機(jī)構(gòu)允許帶子沿具有最小阻力的一個(gè)方向拉動(dòng)通過該縫，使得該帶子可以快速拉動(dòng)到受試者的肢體周圍的一個(gè)緊貼的位置。除非該機(jī)構(gòu)被釋放或相對(duì)的輥被致動(dòng)，該自由輪機(jī)構(gòu)還防止帶子沿松開方向移動(dòng)通過該縫。應(yīng)當(dāng)理解的是，不是所有的實(shí)施方案都將包括一個(gè)自由輪機(jī)構(gòu)，因?yàn)楸景l(fā)明的多個(gè)方面在這一點(diǎn)上不受限制。
相對(duì)的輥在使用期間沿任一方向旋轉(zhuǎn)以收緊和松開該帶子。當(dāng)需要時(shí)，這些輥可以快速旋轉(zhuǎn)直到該帶子達(dá)到一個(gè)特定張力?？梢赃M(jìn)一步致動(dòng)這些輥以在使用期間對(duì)帶子的張力進(jìn)行較小的調(diào)整。當(dāng)袖帶將要從受試者的肢體釋放時(shí)，可以釋放棘輪機(jī)構(gòu)或離合器，使得允許相對(duì)的輥?zhàn)杂梢苿?dòng)，因此快速釋放張力。
該系統(tǒng)和/或裝置可以包括一次性部件以防止在受試者之間的污染，并且避免在受試者之間對(duì)系統(tǒng)或裝置進(jìn)行滅菌的需要。整個(gè)系統(tǒng)或裝置可以是一次性的或其一種或多種部件可以是一次性的。一次性部件包括但不限于該系統(tǒng)和/或套袖的這個(gè)或這些袖帶或這個(gè)或這些袖帶的襯墊。
本發(fā)明的多個(gè)方面不限于在此所展示的袖帶的實(shí)施方案。
實(shí)例
材料和方法
動(dòng)物。研究了五十八周齡的雄性Sprague-Dawly (SD)大鼠，重量在250g與 280g之間(中華人民共和國(guó)上海復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(ExperimentalAnimalCenter, FudanUniversity, Shanghai, P. R. China))。動(dòng)物研究方案與由國(guó)立衛(wèi)生研究院(National Institute of Health)出版(NIH出版號(hào)85-23，1996年修訂版)的‘實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物護(hù)理與使用指南(The Guide for the Care of Use of Laboratory Animals)，一致，并且由上海第六醫(yī)院動(dòng)物保健委員會(huì)(Animal Care Committee of Shanghai Sixth Hospital)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院(Shanghai Jiao Tong University School of Medicine)批準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)之前所有這些大鼠都被關(guān)養(yǎng)(housed)兩周作為馴化期。
手術(shù)準(zhǔn)備。在用戊巴比妥鈉(40mg/kg，腹腔注射)麻醉并且氣管內(nèi)插管之后，用室內(nèi)空氣為動(dòng)物通氣(動(dòng)物呼吸器DW-2000，中華人民共和國(guó)上海奧爾科特生物技術(shù)公司 (Aloctt Biotech, Shanghai, P. R. China))。通過在左第四肋間隙處開胸使心臟暴露。用一根6-0聚丙烯縫線將左冠狀動(dòng)脈前降支(LAD)在距左心耳端部以下I到2mm處纏繞， 并且通過一根聚乙烯管(PE-50)穿透其末端以形成一個(gè)用于可逆性冠狀動(dòng)脈閉塞的圈套 (snare)。在LAD閉塞之前，使這些動(dòng)物經(jīng)抗凝處理(150U/Kg肝素鈉)并且接受利多卡因 (4mg/Kg)靜脈注射。心臟缺血是通過縫線以下的一個(gè)蒼白區(qū)域或在ECG中顯示的ST-T上升來確認(rèn)，同時(shí)再灌注的特征為紫甜(cyanosis)的快速消失和血管變紅(vascular blush)。 在該方案結(jié)束時(shí)，去除圈套，閉合胸部，并且允許動(dòng)物恢復(fù)，并且在它們獲得意識(shí)之前立即向它們給予丁丙諾啡(tamgesic) (O. 03mg/kg)。
實(shí)驗(yàn)方案。在麻醉之后，將所有大鼠隨機(jī)分成隨后的六個(gè)實(shí)驗(yàn)組
I) MI組(MI對(duì)照)，用45分鐘LAD結(jié)扎產(chǎn)生MI隨后再灌注以便長(zhǎng)期觀察；
2)單個(gè)遠(yuǎn)端缺血后處理(sPost)組(在此也稱為rIPerC)，在缺血再灌注損傷外科手術(shù)期間，在麻醉動(dòng)物的同時(shí)遞送遠(yuǎn)端缺血后處理，該遠(yuǎn)端缺血后處理在指示缺血期結(jié)束之前20分鐘開始，通過用一條在大腿周圍收緊的止血帶閉塞后肢血流，持續(xù)4個(gè)5分鐘閉塞隨后5分鐘釋放的循環(huán)。肢體缺血是通過在止血帶以下的下肢的蒼白和紫紺來確認(rèn)；
3)延遲后處理(dPost)組，延遲遠(yuǎn)端后處理在第4天(再灌注72小時(shí)后)遞送。 用更小劑量的戊巴比妥鈉(30mg/Kg)再次麻醉大鼠。以與上文所描述相同的方式遞送遠(yuǎn)端后處理。同樣在大鼠蘇醒之前給予丁丙諾啡(O. 03mg/kg)；
4)重復(fù)遠(yuǎn)端后處理(rPost)組(在此也稱為rPostC)，在初始遠(yuǎn)端后處理(與組2 相同)之后，每三天重復(fù)后處理持續(xù)28天，并且以與在dPost組大鼠中所描述的相同的方式遞送療法；
5)加強(qiáng)的遠(yuǎn)端后處理(iPost)組(在此也稱為iPostC)，在初始遠(yuǎn)端后處理(與組2相同)之后，每天重復(fù)與上文所描述的相同的遠(yuǎn)端后處理療法持續(xù)28天；
6)假手術(shù)組，大鼠在沒有縫合系緊(suture tie-down)的情況下經(jīng)受假手術(shù)。在第4天(再灌注72小時(shí)后)(本人在方案圖上也對(duì)此作了標(biāo)記)或在再灌注后第28天將所有完成觀察期的存活著的大鼠處死，分別用于以下所概述的測(cè)試并且在圖I中詳述。
對(duì)于第4天和第28天的研究，使分配到遠(yuǎn)端缺血后處理療法的動(dòng)物在第4天或第 28天在后處理事件之后2小時(shí)安樂死。進(jìn)行超聲心動(dòng)圖和有創(chuàng)血液動(dòng)力學(xué)檢查(描述如下)以在安樂死之前立即評(píng)估重塑過程。
在安樂死之后，接著從下腔靜脈收集全血并且收獲心臟。對(duì)各大鼠進(jìn)行細(xì)致的尸體解剖，包括那些經(jīng)歷心臟性猝死(特別是與可能的心臟破裂有關(guān))的大鼠。在尸體解剖之后，記錄從第28天獲得的心臟的左心室重量并且計(jì)算左心室重量與體重的比率(LVMI)。 收集在乳頭肌水平的左心室心肌組織的一個(gè)大約5_的截面，并且固定在4%福爾馬林中， 隨后石蠟包埋用于組織學(xué)檢驗(yàn)。將其余左心室組織在液氮中迅速冷凍并且在_80°C下儲(chǔ)存用于隨后的分析。
存活研究。為了評(píng)估存活率，將另一批總共250只大鼠分成MI組、RIPerC組、 rPostC組、iPostC組以及SP組(各組50只大鼠)，同時(shí)25只假手術(shù)操作的大鼠充當(dāng)對(duì)照。 嚴(yán)密監(jiān)測(cè)所有大鼠12周。對(duì)各大鼠進(jìn)行細(xì)致的尸體解剖，尋找猝死(尤其提及心臟破裂) 的原因。分析存活率以評(píng)估治療的長(zhǎng)期益處。
超聲心動(dòng)圖和血液動(dòng)力學(xué)研究。僅在MI后第28天進(jìn)行經(jīng)胸超聲心動(dòng)圖。使用裝備有一個(gè)15-MHz探頭的超聲波系統(tǒng)(Acuson Sequoia 512)。在麻醉誘導(dǎo)之后獲得二維和M型超聲心動(dòng)圖兩者。在乳頭肌水平的短軸方向測(cè)量左心室舒張末期直徑(LVEDD)和左心室收縮末期直徑(LVESD)。還計(jì)算了縮短分?jǐn)?shù)(FS)。所有值都是在五個(gè)連續(xù)心臟循環(huán)上平均的，并且由兩個(gè)對(duì)治療方案不知情的獨(dú)立研究者來分析測(cè)量值。此后，在動(dòng)物中進(jìn)行心臟導(dǎo)管插入術(shù)用于血液動(dòng)力學(xué)研究。用與一個(gè)流體填充的壓力傳感器連接的一根預(yù)肝素化的細(xì)聚乙烯管(MPA-CFS，中國(guó)上海奧爾科特生物技術(shù)公司)對(duì)右側(cè)頸動(dòng)脈插管，并且接著將該管推進(jìn)到左心室中。記錄心率(HR)、左心室收縮和舒張末期壓力峰值(LVEDP)以及左心室壓力上升和下降的最大速率(對(duì)應(yīng)地為dP/dtmax和dP/dtmin)。
心肌梗死尺寸測(cè)定。在第4天(再灌注后72小時(shí))，使LAD再閉塞并且將lmll% 伊文思藍(lán)(Evan' s blue)灌注到主動(dòng)脈和冠狀動(dòng)脈中。然后分離心臟，用PBS灌注并且在垂直于頂端-基底軸的一個(gè)平面中橫向切成8mm厚的切片。接著將心臟切片在37°C下在 1% 2，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)(西格馬(Sigma))中孵育5到10分鐘。使用Image J軟件測(cè)量各切片的梗死面積(蒼白)、處于風(fēng)險(xiǎn)中的面積(紅色)以及總左心室面積。通過用從所有切片加權(quán)而得的梗死面積總和除以從所有切片加權(quán)而得的左心室風(fēng)險(xiǎn)面積總和并且乘以100來計(jì)算梗死尺寸(表示為百分比)。
為了測(cè)量在MI之后28天的梗死尺寸，使用從在乳頭肌水平的心肌的中央部分獲得的一個(gè)切片來估計(jì)左心室面積。追蹤梗死(表示為纖維化區(qū)域)周長(zhǎng)并且使用以下等式將MI尺寸歸一化為左心室面積梗死周長(zhǎng)(IP)百分比=梗死疤痕的周長(zhǎng)/[(心外膜周長(zhǎng) +心內(nèi)膜周長(zhǎng))/2] X 100% [22]。
組織學(xué)分析。制備脫石蠟組織切片用于免疫組織化學(xué)染色。使用從第4天獲得的心臟組織，針對(duì)髓過氧物酶(ΜΡ0，I 50稀釋，Abeam)、針對(duì)ED-I (對(duì)于巨噬細(xì)胞的特異性標(biāo)記，I : 100稀釋，Chemicon)以及單核細(xì)胞趨化蛋白-I (MCP-1,1 : 100稀釋,Abeam)的第一抗體，進(jìn)行中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)定量。使用從第28天獲得的心臟組織，還使用針對(duì)8-羥基鳥苷(8-0hdG，l 300稀釋，Abeam)的抗體，將氧化應(yīng)激介導(dǎo)的DNA損傷定量。 將切片與單獨(dú)的二級(jí)抗體孵育作為陰性對(duì)照。所有切片都用蘇木素復(fù)染。
通過馬松染色將邊界區(qū)域中的膠原蛋白沉積定量并且通過使用Image J軟件進(jìn)行分析，并且表示為10個(gè)隨機(jī)高倍視野的膠原蛋白染色的平均百分比。
另外，從左心室的中央部分獲得蘇木素-伊紅染色切片以評(píng)估那些橫向切割的中央有核細(xì)胞中的肌細(xì)胞橫截面積(CSA)。測(cè)量來自各樣品的左心室的后壁(非梗死區(qū)域) 中的50個(gè)細(xì)胞的CSA并且取其平均值，并且對(duì)各組分析總共四個(gè)樣品。
蛋白質(zhì)印跡。在8%-16% Tris甘氨酸凝膠(Novex, Invitrogen,美國(guó)加利福尼亞州(CA，USA))上分離等量的蛋白質(zhì)(50 μ g)，并且轉(zhuǎn)移到PVDF膜上。用5%脫脂乳封閉之后，將針對(duì)磷酸基_Smad2、磷酸基IkB-a (Ser32)、I κ B-α、磷酸基-NF-κ Β_Ρ65、 NF-kB-P65(細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)技術(shù)公司(Cell Signaling Tech)，美國(guó)(USA))以及TGF-βΙ 和Smad2 (圣塔克魯斯公司(Santa Cruz)，美國(guó)(USA))的初級(jí)抗體在4°C下孵育過夜，隨后與抗鼠或抗兔的辣根過氧化物酶結(jié)合的二級(jí)抗體一起孵育(I 2000)。最后使用一個(gè)ECL 檢測(cè)成套設(shè)備(Amersham, Beverly,美國(guó)馬薩諸塞州(MA, USA))將免疫反應(yīng)可視化。針對(duì) GAPDH強(qiáng)度調(diào)節(jié)所有蛋白質(zhì)表達(dá)水平(細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)技術(shù)公司，美國(guó))。通過光密度測(cè)定法使用Image J軟件(型號(hào)1·41，ΝΙΗ，美國(guó))將條帶定量。
實(shí)時(shí)室溫聚合酶鏈反應(yīng)。使用Trizol試劑(Invitrogen)從150mg左心室組織制備總RNA，隨后進(jìn)行氯仿提取和異丙醇沉淀。通過與DNA酶I (O. I μ Γ1，37°C ) 一起孵育30 分鐘來消除基因組DNA，隨后進(jìn)行酸酚-氯仿提取。通過在260nm下的分光光度吸光度將 RNA定量，在變性瓊脂糖凝膠上通過A26tlA28tl比率確認(rèn)其純度并且通過溴化乙錠染色來評(píng)估其完整性。然后使用寡(dT)引物和Superscript II逆轉(zhuǎn)錄酶(室溫,Invitrogen)將總 RNA (2 μ g)逆轉(zhuǎn)錄。
以12. 5ng cDNA以及最終體積為25 μ I、濃度為900nM的正義引物和反義引物(Invitrogen)開始，使用 SYBR Green master mix(應(yīng)用生物系統(tǒng)公司(Applied Biosystem))進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR定量。在一個(gè)GeneAmp 7000檢測(cè)系統(tǒng)儀器(應(yīng)用生物系統(tǒng)公司)中監(jiān)測(cè)并且分析熒光。用一個(gè)三步循環(huán)程序(95°C變性，15秒；60°C退火，30秒；72°C延伸，30秒)將PCR反應(yīng)循環(huán)42次，隨后進(jìn)入初始階段(95°C，10分鐘)。對(duì)各樣本獲得一個(gè) Λ Ct值以定量mRNA水平并且用一個(gè)內(nèi)源性對(duì)照(b_微管蛋白mRNA)歸一化。使用一種相對(duì)定量Δ Δ Ct方法用于多組之間的比較。使用引物表達(dá)軟件(Primer Express software) (應(yīng)用生物系統(tǒng)公司)設(shè)計(jì)寡核苷酸引物。
所使用的引物列舉如下
a -MHC，正義(CTGCTGGAGAGGTTATTCCTCG) (SEQ ID NO 1)
和反義(GGAAGAGTGAGCGGCGCATCAAGG)(SEQ ID NO 2)；
β-MHC，正義(TGCAAAGGCTCCAGGTCTGAGGGC) (SEQ ID NO 3)
和反義(GCCAACACCAACCTGTCCAAGTTC)(SEQ ID 4)；
ΑΝΡ，正義(CTCTGAGAGACGGCAGTGCT) (SEQ ID NO 5)
和反義(TATGCAGAGTGGGAGAGGCA)(SEQ ID NO 6)；
β-微管蛋白，正義(TCACTGTGCCTGAACTTACC) (SEQ ID NO 7)以及
反義(GGAACATAGCCGTAAACTGC)(SEQ ID NO 8)。
丙二醛(MDA)水平的測(cè)定。將從處于風(fēng)險(xiǎn)中的區(qū)域獲得的心肌在含有5mmol/L 丁基羥基甲苯的1.0ml的20mmol/L Tris-HCl (pH 7.4)中均質(zhì)化。使用可商購(gòu)的成套設(shè)備 (目錄號(hào)437639, Calbiochem)根據(jù)制造商的介紹分析脂質(zhì)過氧化物,并且MDA的水平表示為每克蛋白質(zhì)的μΜ數(shù)。
細(xì)胞因子水平。通過使用可商購(gòu)的固相夾心ELISA試劑盒(研發(fā)系統(tǒng)(R&D Systems),美國(guó)明尼阿波利斯(Minneapolis, USA))根據(jù)制造商的介紹來評(píng)估白細(xì)胞介素 TNF-α和IL-I β的血漿水平。各分析的檢測(cè)限如下TNF_ α為16pg/ml，并且IL-1 β為 10pg/mlo
統(tǒng)計(jì)。所有值都表示為平均值土標(biāo)準(zhǔn)差。使用SPSS 13. O統(tǒng)計(jì)軟件來進(jìn)行所有數(shù)據(jù)分析。使用單向ANOVA隨后用Student-Newman-Keuls檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較來確定治療對(duì)不同參數(shù)的影響。通過標(biāo)準(zhǔn)卡普蘭-邁耶分析來分析在六個(gè)組之間的在追蹤現(xiàn)察期間的存活率，并且用對(duì)數(shù)秩和檢驗(yàn)來進(jìn)行在存活曲線之間的統(tǒng)計(jì)比較。使用費(fèi)歇爾精確檢驗(yàn)法 (Fisher’s exact method)分析在這些組之間的存活率差異。統(tǒng)計(jì)顯著性定義為P < O. 05。
結(jié)果
通過加強(qiáng)后處理提高存活率。在84天觀察時(shí)段期間，與MI組和SP組比較， rIPerC(或sPost)、rPostC (或rPost)以及iPostC (或iPost)導(dǎo)致存活率提高(對(duì)于所有組P < 0. 05)。有趣的是，僅僅在iPostC組中在早至MI后第28天存活率就明顯提高，而在rPostC組中，直到在MI之后第56天才觀察到這種效果。此外，與RIPerC和rPostC治療比較，在第84天iPostC與提高的存活率相關(guān)(對(duì)應(yīng)地P < O. 05)。在觀察時(shí)段期間，與 MI組比較，每天遞送戊巴比妥鈉沒有提供任何有益或有害作用(P > O. 05)(圖11)。對(duì)那些死亡動(dòng)物的尸體解剖顯示，在治療組中沒有心臟破裂發(fā)生，在SP組中有I例并且在MI組中有I例心臟破裂，在不同的組之間沒有統(tǒng)計(jì)顯著性(對(duì)應(yīng)地P > O. 05)。
針對(duì)再灌注損傷的早期保護(hù)階段。在SP0St、rP0St以及iPost治療組中，在第一個(gè)七十二小時(shí)期間與MI組比較存在著猝死降低的傾向，然而不是統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的(參見表，對(duì)應(yīng)地P > O. 05)。徹底尸體解剖檢查并未揭示在任何動(dòng)物中的任何心臟破裂發(fā)現(xiàn)。對(duì)來自各組的8只大鼠的梗死尺寸定量。在五個(gè)組之間用伊文思藍(lán)描繪的處于風(fēng)險(xiǎn)中的面積是相似的(數(shù)據(jù)未顯示)。在sPost組大鼠(35.63±4.21%)、rPost組大鼠(33·88±3·52% ) 以及iPost組大鼠(31·88±4·82% )中的梗死尺寸有顯著減小(所有組P < 0. 05)，然而， 在這三個(gè)Post組之間的梗死尺寸沒有顯著不同(對(duì)應(yīng)地P > 0. 05)，表明重復(fù)遠(yuǎn)端后處理治療相比于單個(gè)后處理事件對(duì)梗死尺寸沒有額外影響。相比之下，與MI組(50. 5±4. 11%) 比較，當(dāng)安樂死之前2小時(shí)(第4天)遞送dPost時(shí)未能改變梗死尺寸(42±4. 54%, P >0.05)。
通過后處理調(diào)節(jié)早期階段炎癥應(yīng)答。在第4天(再灌注后72小時(shí))，從各組收集五個(gè)心臟分別用于免疫組織化學(xué)染色，使用分別靶向ED-I和MPO的抗體，在假手術(shù)組中進(jìn)入梗死區(qū)域的巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)是極微的(圖2A)。在梗死心肌中檢測(cè)到存在著巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞兩者的加強(qiáng)浸潤(rùn)(ED-1細(xì)胞，1722±217/mm2 ；ΜΡ0細(xì)胞，880± 144/mm。 對(duì)應(yīng)地P < 0. 001)，這在sPost大鼠中是減弱的(對(duì)應(yīng)地口 < 0. 001 ;圖2B)。由rPost和 iPost進(jìn)一步減弱了巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)(對(duì)應(yīng)地P <0.001)，其中在iPost組大鼠中檢測(cè)到最大效應(yīng)(P < 0. 001 ;圖2B)。
在梗死區(qū)域中的MCP-I表達(dá)水平顯示與巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)的模式完全一樣，證明rIPost對(duì)炎癥細(xì)胞應(yīng)答的劑量依賴性作用(對(duì)應(yīng)地P < 0. 001 ;圖2C)。dPost 當(dāng)在檢查之前早2小時(shí)遞送時(shí)未顯示炎癥應(yīng)答的任何改變(圖2)。
經(jīng)由后處理引起的晚期階段保護(hù)。與假手術(shù)組比較，在第28天在MI組和dPost 組中的存活者更少(對(duì)應(yīng)地P < 0. 05),而sPost和重復(fù)后處理(rPost和iPost)治療組大鼠相比于假手術(shù)組大鼠顯示出沒有顯著性差異(參見表，對(duì)應(yīng)地P >0.05)。到第28天，存活者的梗死尺寸顯示與第4天相似的模式(對(duì)應(yīng)地P < 0. 05，表I)。
晚期階段氧化應(yīng)激和炎癥應(yīng)答。通過S-OHdG免疫染色評(píng)估了由氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的 DNA損傷。在第28天在MI大鼠中的8-0HdG的表達(dá)增加，rIPost也導(dǎo)致了 8_0HdG強(qiáng)度的顯著劑量依賴性降低(圖3A)，然而dPost不影響8-0HdG表達(dá)(圖3A)。
MDA測(cè)量概括了 8-0HdG強(qiáng)度的變化(圖3B)。然而，雖然sPost沒有改變?cè)诘?8 天的TNF- α和IL-I β水平(對(duì)應(yīng)地ρ > 0. 001)，經(jīng)由iPost組和rPost組兩者的重復(fù)降低了 TNF- α和IL-I β水平，并且程度相同(對(duì)應(yīng)地ρ < 0. 001，圖3C)。
轉(zhuǎn)錄因子NF-κ B的活化。通過與MI組比較，sPost與較少的I κ B α和NF-κ B ρ65磷酸化相關(guān)。rPost和iPost都與I κ B α和NF- κ B ρ65磷酸化程度的進(jìn)一步降低相關(guān)(對(duì)應(yīng)地ρ < 0. 001)，其中iPost組大鼠顯示了 NF-κ B信號(hào)傳導(dǎo)的最低活化(對(duì)應(yīng)地ρ < 0. 01，圖 4)。28
通過重復(fù)后處理調(diào)節(jié)纖維化反應(yīng)。通過rIPost調(diào)節(jié)TGF-β 1/Smad2信號(hào)傳導(dǎo)活化與NF-κ B信號(hào)傳導(dǎo)活化的有益影響模式一致(圖5)，這進(jìn)一步由馬松三色染色法中顯示的間質(zhì)纖維化減弱(圖6)支持。
肥大反應(yīng)。在MI組中見到的LVMI增加被sPost減弱(ρ < O. 05 ;表)。在rPost 和iPost中都檢測(cè)到進(jìn)一步減小，而且在iPost中觀測(cè)到最低LVMI (對(duì)應(yīng)地ρ < 0. 001， 表)O
與此一致，心肌細(xì)胞的平均橫截面積(CSA)以劑量依賴性方式減小(圖7Α、圖 7Β)。肥大相關(guān)基因表達(dá)的定量顯示，增加ANP和β -MHC的基因表達(dá)被減弱，而a -MHC表達(dá)的降低通過rIPost得以恢復(fù)，同樣是呈劑量依賴性方式(圖7C-圖7Ε)。然而，當(dāng)操作延遲到再灌注后72小時(shí)，則缺乏這些效應(yīng)(圖7A-圖7E)。
改進(jìn)的心臟幾何形狀、功能以及血液動(dòng)力學(xué)參數(shù)。在第28天，如通過與假手術(shù)大鼠比較在LVEDD方面的增加所證明，MI大鼠顯示顯著的左心室擴(kuò)張(P < 0. 05，表)。與假手術(shù)大鼠比較，這種幾何變化伴隨著在FS方面的降低化<0.05，表)。雖然sPost顯著改進(jìn)了不良左心室重塑(通過與MI大鼠比較的LVEDD降低和FS增加(對(duì)應(yīng)地ρ < 0. 05， 表)反映)，與rPost比較，rIPost療法導(dǎo)致左心室腔室尺寸和功能進(jìn)一步改進(jìn)，其中最大效應(yīng)通過iPost實(shí)現(xiàn)(對(duì)應(yīng)地ρ <0.05)。血液動(dòng)力學(xué)分析顯示，與MI和dPost比較，來自 rIPost的益處模式相同，并且呈劑量依賴性方式(表)。
表I.從各組大鼠獲得以評(píng)定心臟幾何形狀、功能、梗死尺寸以及血液動(dòng)力學(xué)變化的數(shù)據(jù)
權(quán)利要求
1.一種方法，包括對(duì)一位受試者在心肌梗死之后進(jìn)行重復(fù)遠(yuǎn)端缺血處理(RIC)方案。
2.如權(quán)利要求I所述的方法，其中這些重復(fù)RIC方案是該心肌梗死的I周之內(nèi)或I個(gè)月之內(nèi)開始的。
3.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中該受試者在該心肌梗死之前未曾經(jīng)歷在先的缺血處理。
4.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中該受試者在心肌梗死期間未曾經(jīng)歷在先的缺血處理。
5.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中該在先的缺血處理是遠(yuǎn)端的或局部的。
6.如權(quán)利要求I所述的方法，其中該受試者已經(jīng)經(jīng)歷了在先的缺血處理。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中該在先的缺血處理發(fā)生在心肌梗死之前。
8.一種方法，包括對(duì)一位受試者在心肌梗死之后進(jìn)行重復(fù)遠(yuǎn)端缺血處理(RIC)方案，其中該受試者在心肌梗死期間已經(jīng)經(jīng)歷了遠(yuǎn)端或局部缺血處理。
9.一種用于降低心功能不全和/或心力衰竭的發(fā)生率、延遲其發(fā)作和/或降低其嚴(yán)重性的方法，該方法包括對(duì)一位受試者在心肌梗死期間和之后進(jìn)行重復(fù)遠(yuǎn)端缺血處理(RIC)方案。
10.一種方法，包括對(duì)一位患有心肌梗死的受試者進(jìn)行重復(fù)遠(yuǎn)端缺血處理(Ric)方案，其中一個(gè)第一 Ric 方案是在心肌梗死期間進(jìn)行的，并且后續(xù)RIC方案是在該第一 RIC方案之后至少每三天進(jìn)行一次。
11.一種方法，包括對(duì)一位患有心肌梗死的受試者進(jìn)行重復(fù)遠(yuǎn)端缺血處理(Ric)方案，其中一個(gè)第一 Ric 方案是在心肌梗死期間進(jìn)行的，并且后續(xù)RIC方案是在該第一 RIC方案之后每天進(jìn)行。
12.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中后續(xù)RIC方案是在該第一RIC方案之后每?jī)商爝M(jìn)行一次。
13.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中這些重復(fù)RIC方案是每三天、每?jī)商旎蛎刻爝M(jìn)行一次。
14.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中這些后續(xù)RIC方案是在心肌梗死之后一個(gè)月之內(nèi)進(jìn)行的。
15.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中這些重復(fù)RIC方案是在心肌梗死之后一個(gè)月之內(nèi)進(jìn)行的。
16.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中這些重復(fù)RIC方案包括在一天或多天進(jìn)行每天一個(gè)以上RIC方案。
17.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中該受試者未曾經(jīng)歷球囊血管成形術(shù)或支架置入術(shù)。
18.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中該受試者是人類。
19.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中該第一RIC方案是在與心肌梗死相關(guān)的缺血期間進(jìn)行的。
20.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中該第一RIC方案是在與心肌梗死相關(guān)的缺血之后的再灌注期間進(jìn)行的。
21.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中這些重復(fù)RIC方案中的至少一個(gè)RIC方案包含至少四個(gè)循環(huán)，各循環(huán)包含超收縮壓和再灌注。
22.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中這些重復(fù)RIC方案中的至少一個(gè)RIC方案包含一個(gè)以上的循環(huán)，一個(gè)循環(huán)包含5分鐘的超收縮壓和5分鐘的再灌注。
23.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中該超收縮壓是超出收縮壓至少15mmHg 或是200mmHg的一個(gè)壓力。
24.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中在這些重復(fù)RIC方案中的這些RIC方案各自是在相同部位進(jìn)行的。
25.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中這些重復(fù)RIC方案是在上肢上進(jìn)行的。
26.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，進(jìn)一步包括向該受試者給予一種血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)抑制劑。
27.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，進(jìn)一步包括向該受試者給予一種血管緊張素II受體阻滯劑。
28.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，進(jìn)一步包括向該受試者給予一種抗血小板療法。
全文摘要
本發(fā)明提供了用于降低心功能不全/衰竭的發(fā)生率和/或嚴(yán)重性和/或延遲其發(fā)作，并且通過使用遠(yuǎn)端缺血同時(shí)處理和后處理來提高總存活率的方法。
文檔編號(hào)A61B17/32GK102939054SQ201180026015
公開日2013年2月20日 申請(qǐng)日期2011年2月4日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月31日
發(fā)明者安德魯·雷丁頓 申請(qǐng)人:兒童醫(yī)院