專利名稱:多糖組合物和用于治療和預(yù)防與祖細(xì)胞動員相關(guān)聯(lián)的病癥的方法
多糖組合物和用于治療和預(yù)防與祖細(xì)胞動員相關(guān)聯(lián)的病癥的方法本申請是2010年4月16日提交的美國序號12/762,268的部分繼續(xù)申請并要求它的優(yōu)先權(quán),美國序號12/762,268是2008年11月3日提交的PCT申請?zhí)朠CT/US2008/082223的部分繼續(xù)申請并要求它的優(yōu)先權(quán),PCT申請?zhí)朠CT/US2008/082223要求2007年11月2日提交的美國臨時申請序號60/985123的優(yōu)先權(quán)。在先申請的披露被視為本申請的披露的一部分(并且通過引用結(jié)合在本申請的披露中)。背景肝素(由肥大細(xì)胞產(chǎn)生并從自然的來源中分離的一種高度硫酸化的肝素樣葡糖胺多糖(HLGAG))是一種被廣泛使用的臨床抗凝劑。然而,天然的或未分級肝素的作用是很難預(yù)測的,并且必須密切監(jiān)護(hù)患者以防止過度抗凝作用或抗凝作用不足。與未分級肝素(UFH)相比,通過不同的聚合性肝素的分級或解聚的方法而獲得的低分子量肝素(LMWH)作為抗凝劑具有更可以預(yù)測性的藥理作用,減少的副作用、持續(xù)的抗血栓活性、以及更好的生物利用率。數(shù)個LMWH已被批準(zhǔn)用于血栓性病況的門診治療。在治療癌癥患者中,對抗血檢劑的潛在作用存在著越來越多的興趣。來自幾個最近的臨床試驗的結(jié)果提示了對于用LMWH治療的某些類形的癌癥患者的一種生存優(yōu)勢(綜述于 Lemoine(雷蒙恩),2005,臨床腫瘤學(xué)雜志(Journal of Clinical Oncology), 23:2119-20)。發(fā)明概述 本發(fā)明部分地基于多糖制劑(例如衍生自肝素的多糖制劑)的開發(fā),這些制劑缺少實質(zhì)性抗凝劑活性(例如,具有降低的抗凝劑活性的多糖的制劑),但在其他非凝結(jié)介導(dǎo)的生物學(xué)過程中仍保持著活性。這些化合物可以具有以下特點(diǎn)中的一種或多種:1)抗Xa活性,例如小于50IU/mg、20IU/mg、10IU/mg、5IU/mg或5IU/mg或更小,和2)抗轉(zhuǎn)移、抗血管生成、抗纖維化和/或抗炎活性。在此提供的多糖制劑還可以具有以下特點(diǎn)中的一個或多個:該制劑具有乙二醇裂解的糖醛酸殘基(例如小于乙二醇裂解的糖醛酸殘基);該制劑具有每條多糖鏈不大于3個乙二醇裂解的糖醛酸殘基(Ue);該制劑具有大于40%的U2SHNS,6S 二糖殘基;該制劑的脫硫酸化程度小于40% (例如N-脫硫酸化程度小于40% );該制劑中的一條或多條多糖鏈具有一個非還原端糖醛酸殘基的一個4,5-不飽和結(jié)構(gòu);該制劑中的一條或多條多糖鏈在還原端具有一個2,5-脫水甘露醇?xì)埢辉撝苿┑闹鼐肿恿吭?,500與8,OOODa之間,例如在4,000與8,OOODa之間;以及在此所述的一個分子量分布。本披露包括具有這些特性和特點(diǎn)中的一種或多種的制劑連同制備和使用這些制劑的方法。因此,在第一方面,本發(fā)明的特征是具有以下特點(diǎn)的一種多糖制劑(例如,一種肝素衍生的制劑):在該制劑中(a)重均分子量在3,500與8,OOODa之間,例如在此所述的一個重均分子量;(b)抗-Xa活性和/或抗-1Ia活性,例如小于50IU/mg(例如抗-Xa活性小于約 40IU/mg、30IU/mg、20IU/mg、15IU/mg、10IU/mg、5IU/mg、4IU/mg 或 3IU/mg 和抗-1Ia 活性小于約 40IU/mg、30IU/mg、20IU/mg、10IU/mg、5IU/mg、4IU/mg 或 3IU/mg);以及(c)小于50 %的乙二醇裂解的糖醛酸殘基(例如小于40 %、30 %、25 %或20 %的乙二醇裂解的糖醛酸殘基,但大于1%、5%、10%、15% )。在一些實施方案中,該制劑含有在5%與50%之間的乙二醇裂解的糖醛酸殘基(例如,在5%與40%、5%與30%、10%與50%、10%與40%、10 %與30 %、或10 %與20 %之間的乙二醇裂解的糖醛酸殘基)。在一些實施方案中,該制劑具有在此所述的一個分子量分布。在第二方面,本發(fā)明的特征是具有以下特點(diǎn)的一種多糖制劑(例如,一種肝素衍生的制劑):(a)重均鏈分子量在3,500與8,OOODa之間,例如在此所述的一個重均分子量;(b)抗-Xa活性和/或抗-1Ia活性各自小于50IU/mg(例如抗-Xa活性小于約40IU/mg、30IU/mg、20IU/mg、15IU/mg、10IU/mg、5IU/mg、4IU/mg 或 3IU/mg 和抗-1Ia 活性小于約40IU/mg、30IU/mg、20IU/mg、10IU/mg、5IU/mg、4IU/mg 或 3IU/mg);以及(c)該制劑的多條多糖鏈具有每條多糖鏈不大于3個乙二醇裂解的糖醛酸殘基(Ue)(例如各多糖鏈具有每條多糖鏈不大于2個或不大于I個乙二醇裂解的糖醛酸殘基(Ue))。該多糖制劑包括具有一個乙二醇裂解的糖醛酸殘基(Ue)的一條或多條鏈。在一些實施方案中,該制劑具有在此所述的一個分子量分布。在第三方面,本發(fā)明的特征是具有以下特點(diǎn)的一種多糖制劑(例如,一種肝素衍生的制劑):(a)重均鏈分子量在3,500與8,OOODa之間,在此所述的一個重均分子量;(b)抗-Xa活性和抗-1Ia活性例如各自小于50IU/mg(例如抗-Xa活性小于約40IU/mg、30IU/mg、20IU/mg、15IU/mg、10IU/mg、5IU/mg、4IU/mg、3IU/mg 和抗-1Ia 活性小于約 40IU/mg、30IU/mg、20IU/mg、10IU/mg、5IU/mg、4IU/mg 或 3IU/mg);以及(c)該制劑的多條多糖鏈具有每條多糖鏈平均不大于3個乙二醇裂解的糖醛酸殘基(Ue)(例如每條多糖鏈平均不大于
2.5個、不大于2個、不大于1.5個或不大于I個乙二醇裂解的糖醛酸殘基(Ue))。在一些實施方案中,該制劑具有在此所述的一個分子量分布。在第四方面,本發(fā)明的特征是具有以下特點(diǎn)的一種多糖制劑(例如,一種肝素衍生的制劑):(a)重均鏈分子量在3,500與8`,OOODa之間,例如在此所述的一個重均分子量;
(b)抗-Xa活性和/或抗-1Ia活性例如各自小于50IU/mg (例如抗-Xa活性小于約40IU/mg、30IU/mg、20IU/mg、15IU/mg、10IU/mg、5IU/mg、4IU/mg、3IU/mg 和抗-1Ia 活性小于約 40IU/mg、30IU/mg、20IU/mg、10IU/mg、5IU/mg、4IU/mg 或 3IU/mg);以及(c)該制劑具有大于 40%的U2sHns,63二糖殘基(例如大于50%、60(%、70(%或80(%的^!11^二糖殘基)。在一些實施方案中,該制劑具有小于40% (例如,小于30%、20%或10%)的一個脫硫酸化程度。在一些實施方案中,該制劑具有小于40%、小于30%、小于20%、小于10%、小于5%、小于2%、小于I %的一個N-脫硫酸化、6-0脫硫酸化和/或2-0脫硫酸化程度。在一些實施方案中,N-脫硫酸化和6-0脫硫酸化程度小于40 %、小于30 %、小于20 %、小于10 %、小于5 %、小于2%、小于1%。在一些實施方案中,6-0脫硫酸化程度大于N-脫硫酸化的水平。在一些實施方案中,N-脫硫酸化程度小于40%、30%、20%、10%、5%、4%、3%、2%、1%,6-0脫硫酸化程度小于40%、30%、20%、10%、5%,并且6-0脫硫酸化程度大于N-脫硫酸化程度。例如,在一個實施方案中,N-脫硫酸化程度小于5 %、4 %、3 %、2 %、I %,而6-0脫硫酸化程度大于5%、6%、7%、8%、9%、10%、15%。在一些實施方案中,該制劑具有在此所述的一個分子量分布O在第五方面,本發(fā)明的特征是一種缺少實質(zhì)性抗凝劑活性(例如,具有降低的抗凝劑活性)的多糖制劑(例如,一種肝素衍生的制劑),其中該制劑包括多種多糖,這些多糖包括式1:[Uw-Hx, y,丄 [Ug-Hx, y,丄其中U表示一個糖醛酸殘基,并且H表示一個己糖胺殘基;其中m和η是整數(shù),以使m = 4 至 16(例如,4 至 8、4 至 9、4 至 10、4 至 11、4 至 12、4 至 13、4 至 14、或 4 至15),并且η = I至4(例如,I至2或I至3);W = -20S 或-20Η ;X =-NS 或-NAc;y = -30S 或-30Η;z = -60S 或-60H ;并且
權(quán)利要求
1.一種具有以下特點(diǎn)的多糖制劑: (a)重均鏈分子量在3,500與7,OOODa之間; (b)抗-Xa活性和抗-1Ia活性各自小于50IU/mg;以及 (c)大于5%并且小于50%的乙二醇裂解的糖醛酸殘基。
2.按權(quán)利要求1所述的制劑,其中該制劑具有小于30%的乙二醇裂解的糖醛酸殘基。
3.按權(quán)利要求1所述的制劑,其中該制劑具有10%與30%之間的乙二醇裂解的糖醛酸殘基。
4.一種具有以下特點(diǎn)的多糖制劑: (a)重均鏈分子量在3,500與7,OOODa之間; (b)抗-Xa活性和抗-1Ia活性各自小于50IU/mg; (c)一條多糖鏈,該多糖鏈具有乙二醇裂解的糖醛酸殘基(Ue);以及 (d)多條多糖鏈,這些多糖鏈各自具有不大于3個的乙二醇裂解的糖醛酸殘基(Ue)。
5.按權(quán)利要求4所述的制劑,其中各多糖鏈具有不大于2個的乙二醇裂解的糖醛酸殘基(Ug)。
6.一種具有以下特點(diǎn)的多糖制劑: (a)重均鏈分子量在3,500與7,OOODa之間; (b)抗-Xa活性和抗-1Ia活性各自小于50IU/mg;以及 (c)多條多糖鏈,所述多糖鏈具有每條多糖鏈平均0.2與3個之間的乙二醇裂解的糖醛酸殘基(Ug)。
7.按權(quán)利要求6所述的制劑,具有每條多糖鏈平均不大于I個的乙二醇裂解的糖醛酸殘基(Ug) ο
8.一種組合物,包含具有以下特點(diǎn)的多糖制劑: (a)重均鏈分子量在3,500與7,OOODa之間; (b)抗-Xa活性和抗-1Ia活性各自小于50IU/mg;以及 (c)多條多糖鏈,這些多糖鏈具有大于40%的U2sHns,6S二糖殘基。
9.按權(quán)利要求8所述的組合物,具有大于70%的U2sHns,6S二糖殘基。
10.按權(quán)利要求8所述的組合物,具有小于40%的脫硫酸化程度。
11.按權(quán)利要求8所述的組合物,具有小于30%的脫硫酸化程度。
12.按權(quán)利要求8所述的組合物,具有小于10%的脫硫酸化程度。
13.一種組合物,包含缺少實質(zhì)性抗凝劑活性的多糖制劑,其中該制劑主要由包括式I的多種多糖組成: [Uw-Hx,y, Jm [Ug-Hx,y, Jn 其中U表示糖醛酸殘基,并且H表示己糖胺殘基; 其中m和η是整數(shù),使得 m = 4-16,并且 η = 1-4 ; w = -20S 或-20Η ;X = -NS 或-NAc ;y = -30S 或-30H ;Z = -60S 或-60H ;并且
14.一種組合物,包含具有的重均鏈分子量在3,500與7,OOODa之間并且具有降低的抗凝劑活性的多糖制劑,其中該制劑包含多重多糖,這些多糖包括式1: [Uw-Hx,y, Jm [Ug-Hx,y, Jn 其中U表示糖醛酸殘基,并且H表示己糖胺殘基; 其中m和η是整數(shù),使得 m = 4-16,并且 η = 1-4 ; w = -20S 或-20Η ;X = -NS 或-NAc ;y = -30S 或-30H ;z = -60S 或-60H ; 并且
15.一種多種多糖和它們的藥學(xué)上可以接受的鹽的制劑,該組合物缺少實質(zhì)性抗凝劑活性,具有抗轉(zhuǎn)移活性,并且主要由包括式II的多種多糖組成: [Uftr Hx,y,z]m [Uq Hx,y,z]n [Uw Ηχ , y , Z ] O [U(J HX,y,Z]py,^ 其中U表示糖醛酸殘基,并且H表示己糖胺殘基; 其中m至r是整數(shù),以使: m = 0-10 ; η = 0-3 ; ο = 0-10 ;P = 0-3 ;q = 0-10 ;w = -20S 或-20H ;X = -NS 或-NAc ;y = -30S 或-30H ;z = -60S 或-60H ; 并且
16.按權(quán)利要求15所述的制劑,其中n+p的和小于或等于3。
17.按權(quán)利要求15所述的制劑,其中該制劑具有的重均鏈分子量在3,500與7,OOODa之間。
18.以上權(quán)利要求的任一項所述的組合物或制劑,其中在該組合物中的多糖鏈的非還原端糖醛酸具有一個4,5-不飽和結(jié)構(gòu)。
19.按權(quán)利要求18所述的組合物或制劑,其中在該組合物中約30%的非還原糖醛酸具有一個4,5-不飽和結(jié)構(gòu)。
20.按權(quán)利要求18所述的組合物或制劑,其中該4,5_不飽和結(jié)構(gòu)是肝素酶消化或芐基酯化,接著β消除的結(jié)果。
21.按權(quán)利要求1至17的任一項所述的組合物或制劑,其中該還原端進(jìn)一步包括2,5-脫水甘露醇?xì)埢?br>
22.按權(quán)利要求21所述的組合物或制劑,其中約50%的還原端包括2,5-脫水甘露醇?xì)埢?br>
23.按權(quán)利要求1至22的任一項所述的組合物或制劑,其中該組合物是藥物組合物。
24.以上權(quán)利要求的任一項所述的組合物或制劑,其中該制劑的10%-50%的寡糖具有< 3000Da的分子量;40% -65%的寡糖具有在3000_8000Da之間的分子量,并且5% -30%的寡糖具有> 8000Da的分子量。
25.以上權(quán)利要求的任一項所述的組合物或制劑,其中該多糖是由包括以下步驟的方法產(chǎn)生: 使UFH解聚,以產(chǎn)生解聚的肝素;并且 在解聚之后,對這一解聚的肝素進(jìn)行乙二醇裂解反應(yīng)。
26.按權(quán)利要求25所述的組合物或制劑,其中該乙二醇裂解步驟包括: 用高碘酸鹽氧化這一解聚的肝素;并且 用硼氫化鈉還原這一被氧化的解聚的肝素。
27.一種治療受試者的以下疾病的方法:轉(zhuǎn)移性疾病,VEGF、FGF-、SDF-1 α和/或選擇素介導(dǎo)的疾病,炎性疾病,傳染病,自身免疫疾病,纖維化,或涉及血管生成的疾病,包括將如權(quán)利要求1-42任一項所述的組合物或制劑給予該受試者。
28.按權(quán)利要求27所述的方法,其中該組合物或制劑被長期給予。
29.按權(quán)利要求27所述的方法,其中該疾病是癌癥。
30.按權(quán)利要求29所述的方法,其中該癌癥是胰腺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、腦癌、肺癌、黑色素瘤、或前列腺癌。
31.按權(quán)利要求29所述的方法,其中該組合物或制劑是聯(lián)合手術(shù)、放射性治療、化療齊 、抗體或酪氨酸激酶抑制劑來給予的。
32.按權(quán)利要求29所述的方法,其中該組合物或制劑是以5-50mg/kg的劑量給予該受試者。
33.一種制造制劑的方法,該方法包括: (1)用亞硝酸(HONO)使未分級的肝素(UFH)解聚,以得到多糖制劑; (2)用高碘酸鹽氧化該多糖制劑; (3)用硼氫化鈉還原這一被氧化的多糖制劑;以及 (4)分離該多糖制劑,從而制作LMW H組合物。
34.按權(quán)利要求33所述的 方法,其中該解聚步驟包括用約0.02至0.04M亞硝酸,在約2至4的pH值下,在約10°C至30°C的溫度下處理該UFH約I至5小時。
35.按權(quán)利要求33所述的方法,其中該氧化步驟包括用約0.05M至0.2M的高碘酸鹽,在約0°C至10°C的溫度下,處理該多糖制劑約10至20小時。
36.按權(quán)利要求33所述的方法,其中該還原步驟包括用約0.5%至2.0% (w/v)的硼氫化鈉,在約6.0至7.0的pH下,并且在約0°C至10°C的溫度下,處理這一氧化的多糖制劑約.0.5至1.5小時。
全文摘要
在此提供了缺少實質(zhì)性抗凝劑活性的多糖制劑。提供了制造和使用這樣的制劑的方法。
文檔編號A61K39/395GK103096924SQ201180029397
公開日2013年5月8日 申請日期2011年4月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月16日
發(fā)明者M.孫達(dá)拉姆, T.K.基希莫托, S.羅, H.周, B.舒爾特斯 申請人:動量制藥公司