專利名稱：Sn-2-單酰基甘油和脂質(zhì)吸收不良的制作方法
Sn-2-單?；视秃椭|(zhì)吸收不良本發(fā)明概括而言涉及脂質(zhì)的領(lǐng)域，具體而言旨在改善脂質(zhì)吸收，例如在脂質(zhì)吸收不良的情況下改善脂質(zhì)吸收。本發(fā)明的一個實施方案涉及包含sn-2單?；视脱苌?其中sn-Ι和sn-3位被保護(hù)基阻斷)的組合物。所述?；梢允侵舅?，例如具有抗炎特性的脂肪酸。在吸收不良，諸如胰腺機(jī)能不全、膽鹽不足、由于腸切除或粘膜病導(dǎo)致的短腸的狀況下，生物活性脂肪酸的遞送很關(guān)鍵。在這些生理狀況下，消化途徑受損，所述消化途徑包括胰脂肪酶對膳食三酰基甘油的分解和腸內(nèi)吸收所需的膠束微結(jié)構(gòu)的形成。因此，在這些狀況下，具有例如抗炎特性的生物活性脂肪酸的遞送很關(guān)鍵，因為該類型的脂肪酸可幫助降低炎性反應(yīng)。 基于以前公開的現(xiàn)有技術(shù)(MattsonF. H.和 Volpenhein R. A. (1964) ;HunterE. J. (2001) ;Hayes K. C. (2001)),可設(shè)想位于甘油酯的sn_2位的脂肪酸比sn_l或sn_3位的脂肪酸更易被身體吸收。然而，例如在單酰基甘油(MAG)中，已知不飽和的Sn2_MAG隨存儲時間和/或當(dāng)準(zhǔn)備膳食時溫度升高而趨于異構(gòu)化，例如，產(chǎn)生大量較不易吸收的sn-Ι和sn-3MAG。因此僅用sn-2MAG制備的用以改善脂質(zhì)吸收的食品組合物將隨時間喪失其優(yōu)勢。對于人類，目前沒有可用的膳食方案以遞送必需的脂肪酸，特別是當(dāng)涉及脂質(zhì)消化和吸收的機(jī)制受損時如此。因此，在醫(yī)院中使用胃腸外營養(yǎng)配制物。在年老的伴侶動物諸如老的犬或貓中同樣也沒有可用的方法。然而，需要的是甚至在脂質(zhì)吸收不良的狀況下允許有效攝取脂肪酸的可得到的食品組合物。因此，本發(fā)明的目的是為本領(lǐng)域提供允許大量攝取脂肪酸、例如具有抗炎特性的脂肪酸(諸如EPA)的最佳的甘油酯結(jié)構(gòu)，特別是在吸收不良的狀況下允許大量攝取脂肪酸、例如具有抗炎特性的脂肪酸(諸如EPA)。本發(fā)明人驚訝地發(fā)現(xiàn)能通過獨立權(quán)利要求的主題達(dá)到該目的。從屬權(quán)利要求定義了本發(fā)明進(jìn)一步的實施方案。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)通過使用其中的sn-Ι和sn-3位被保護(hù)基阻斷的sn_2單?；视脱苌锟娠@著改善脂肪酸吸收。不希望理論束縛，本發(fā)明人現(xiàn)在相信通過阻斷Sn-2MAG的sn_l和sn_3位可避免異構(gòu)化,且能夠提供100%的吸收更好的sn-2MAG。重要地是，所述改善的吸收性隨存儲時間繼續(xù)保持并且經(jīng)得起溫度增加。因此，本發(fā)明涉及使用sn-2MAG和MAG衍生物(參見

圖1)遞送來生物活性脂肪酸諸如二十碳五烯酸(EPA)，例如，在脂質(zhì)吸收不良的狀況下遞送。MAG在吸收前不需要消化，且具有固有的乳化性質(zhì)，這使得油滴在腸內(nèi)吸收之前有良好的分散性。此外，MAG比游離脂肪酸更好被吸收。本發(fā)明人在脂質(zhì)吸收不良動物模型中檢驗了他們的構(gòu)思。使用奧利司他(Orlistat^)(一種公知的胰和胃脂肪酶抑制劑)獲得了脂質(zhì)消化不良/吸收不良的狀況。用主要含二十碳五烯酸(EPA)長鏈多不飽和脂肪酸(LC-PUFA)補(bǔ)充劑飼喂動物。將魚油用作三?；视偷膩碓?，并評價了不同的EPA甘油酯，例如圖1的那些。在不同的時間間隔評價了紅細(xì)胞脂質(zhì)和血脂的脂肪酸分布特性(profile)。在實驗的結(jié)尾，測定了不同組織的
脂肪酸分布特性。統(tǒng)計學(xué)評價顯示使用奧利司他(OrliStafti)減少了進(jìn)入紅細(xì)胞中的epa。
發(fā)現(xiàn)接受本發(fā)明的MAG衍生物的動物的紅細(xì)胞中所納入的例如EPA的水平顯著高于施用具有sn-l、sn-2和sn_3位的EPA的混合物的魚油的情況。這清楚地證實了，例如在脂質(zhì)吸收不良的狀況中，以三酰基甘油形式提供的LC-PUFA的進(jìn)入(incorporation)減少。然而,如果以本發(fā)明的MAG衍生物形式提供LC-PUFA，則在脂質(zhì)吸收不良的狀況中進(jìn)入組織中的水平未發(fā)生改變。因此，本發(fā)明的一個實施方案是包含sn-2單?；视脱苌锏慕M合物，其中sn-1和sn-3位被保護(hù)基阻斷。例如，所述?；梢允侨魏沃舅?。本發(fā)明的組合物可用于提供至少一種必需脂肪酸以防止必需脂肪酸缺乏，或用于在亞油酸或α亞麻酸的延長和去飽和受損的狀況中提供至少一種非必需脂肪酸(distalfattyacid),諸如花生四烯酸、二十碳五烯酸或二十二碳六烯酸。例如這種狀況可以是早產(chǎn)兒或有嚴(yán)重的肝功能不全的患者的情況。所述?；梢允蔷哂锌寡滋匦缘闹舅帷Ｋ鼍哂锌寡滋匦缘闹舅釣楸绢I(lǐng)域技術(shù)人員所知。例如，具有抗炎特性脂肪酸可選自二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、α-亞麻酸(ALA)、十八碳四烯酸(SA)、Y-亞麻酸(GLA)、二高1-亞麻酸(DGLA)、n-3 二十二碳五烯酸(DPA)、5 (Z)，11 (Z), 14 (Z) - 二十碳三烯酸(sciadonic acid)和 5 (Z), 11 (Z), 14 (Z), 17 (Z)- 二十碳四烯酸(juniperonic acid)。當(dāng)然，所述組合物可包含在sn-2位具有不同的脂肪酸和/或在sn_l和/或sn_3位具有不同的保護(hù)基的不同的MAG的混合物。所述脂肪酸可以以例如使用特定的比例的n-3脂肪酸和n-6脂肪酸的方式混合。n-3脂肪酸包括例如α -亞麻酸、十八碳四烯酸、η_3 二十碳三烯酸(eicosatrienoic acid)、n_3 二十碳四烯酸(eicosatetraenoic acid)、二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid)、鰷魚酸、二十二碳六烯酸、n-3 二十四碳五烯酸。n-6脂肪酸包括例如亞油酸、Y -亞麻酸、n-6 二十碳二烯酸、二高-Y _亞麻酸、花生四烯酸、n-6 二十二碳二烯酸、腎上腺酸、n-6 二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid)(Osbond acid)。或者，可以將共軛脂肪酸、諸如瘤胃酸(rumenic acid)或桐油酸(calendicacid)、梓樹酸(catalpic acid)或桐酸(eleostearic acid)、或非亞甲基間斷的Δ 5-多烯(NMIP)脂肪酸、諸如5 (Z)，9 (Z) _十八碳二烯酸(taxoleic acid)、皮諾斂酸(pinolenic acid)、5 (Z)，11 (Z)，14 (Z) - 二十碳三烯酸(sciadonic acid)或5 (Z), 11 (Z), 14 (Z), 17 (Z)-二十碳四烯酸(juniperonic acid)以一定方式混入 sn_2MAG衍生物。
所述組合物可包含不同的sn-2MAG衍生物的組合；例如具有比例為約5:1至約15:1的n-3脂肪酸和n-6脂肪酸的sn_2MAG衍生物的組合；例如約8:1至約10:1?？梢允褂檬称房捎玫娜魏伪Ｗo(hù)基。本領(lǐng)域的技術(shù)人員能容易地確認(rèn)適合的保護(hù)基。理想情況下所述保護(hù)基應(yīng)當(dāng)是無味的或具有通常感到愉悅的口味。例如，所述保護(hù)基可選自乙酰基、乙基、丙基、香草醛或其它能形成縮醛的分子。對于一些應(yīng)用而言，如果選擇的保護(hù)基，則能橋聯(lián)sn-Ι和sn-3位的羥基的保護(hù)基可以是優(yōu)選的。
當(dāng)制備MAG衍生物時所述橋聯(lián)作用將是有益的，因為這兩個結(jié)合位點與只與一個羥基發(fā)生的結(jié)合相比將產(chǎn)生熱力學(xué)優(yōu)勢。由于立體化學(xué)的原因，也幾乎不存在任何的其中保護(hù)基偶然結(jié)合于sn-1 (3)和sn-2而不結(jié)合于sn_l和sn_3的分子?？苫谝f送的預(yù)期益處及最終組合物的性質(zhì)選擇脂肪酸和保護(hù)基的多種組合。所有這些組合都包括在本發(fā)明之中。例如，sn-2單?；视脱苌锟蛇x自I, 3- 二乙酰基-2- 二十碳五烯?；视?eicosapentaenoylglycerol),I, 3- 二乙基-2- 二十碳五烯?；视停琁, 3- 二丙基-2- 二十碳五烯?；视?，sn-2單二十碳五烯?；视偷南悴萑┭苌?，單二十碳五烯?；视偷钠渌目s醛衍生物，或其組合。本發(fā)明的組合物可以是任何種類的可食用組合物。如果組合物被批準(zhǔn)用于人或動物消耗則其被認(rèn)為是“可食用”的。優(yōu)選地，所述組合物為口服或腸內(nèi)施用的組合物。例如，所述組合物可選自食品、動物食品、藥物組合物、營養(yǎng)組合物、功能食品、飲料、食品添加劑或藥物。例如，所述組合物可以是例如在醫(yī)院用于腸內(nèi)施用的液體營養(yǎng)配制物。所述組合物還可以是用于年齡60歲以上的人施用的營養(yǎng)配制物。所述組合物還可以是用于在乳或水中重新配制的粉末狀組合物。如果所述組合物以粉末形式提供，則其可以為耐貯存粉末。貯存穩(wěn)定性可以例如通過提供水分活度小于O. 2、例如在O. 19-0. 05的范圍內(nèi)、優(yōu)選小于O. 15的組合物而獲得。水分活度或Bw是系統(tǒng)中水的能量狀態(tài)的度量。其被定義為水的蒸氣壓除以相同溫度的純水的蒸氣壓；因此，純蒸餾水具有恰好為I的水分活度。本發(fā)明的組合物的熱量密度可根據(jù)患者的需求而調(diào)節(jié)。例如，依據(jù)本發(fā)明的組合物可具有O. 5kcal/ml至15kcal/ml的范圍內(nèi)的熱量密度。對于罹患吸收不良和/或食欲低的患者，可優(yōu)選較高的熱量密度。對于此類患者可使用7-12kcal/ml的范圍內(nèi)的熱量密度。所述組合物還可包含蛋白質(zhì)源和/或碳水化合物源。優(yōu)選易消化的碳水化合物和
/或蛋白質(zhì)。
至少部分水解的蛋白質(zhì)較易消化和吸收。因此，提供至少部分水解的蛋白質(zhì)(2至20%的水解度)可能是合乎需要的。如果水解的蛋白質(zhì)是必需的，則水解過程可如所需要和本領(lǐng)域中所知的那樣進(jìn)行。例如，蛋白質(zhì)水解物可通過在一個或多個步驟中酶法水解蛋白質(zhì)級分而制備。對于深度水解的蛋白，可使用Alcalase2. 4L(EC940459)、然后使用NeutraseO. 5L (可從Novo Nordisk Ferment AG獲得)、然后在55。C使用膜酶對蛋白質(zhì)進(jìn)行三重水解。本發(fā)明組合物中的脂肪酸的量可根據(jù)患者需求而調(diào)節(jié)。在治療性應(yīng)用中，可以以足以至少部分地治愈或阻止疾病的癥狀及其并發(fā)癥的量施用MAG衍生物。足以實現(xiàn)該目的的量被定義為“治療有效劑量”。對該目的有效的量將取決于本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種因素、諸如疾病的嚴(yán)重性和患者的體重和總體狀態(tài)。在預(yù)防性應(yīng)用中，將MAG衍生物以足以至少部分地降低發(fā)展為疾病的風(fēng)險的量施·用于易患或以其他方式處于特定的疾病的風(fēng)險中的患者。所述量被定義為“預(yù)防有效劑量”。同樣地，精確的所述量取決于多種患者的特定因素，諸如患者的健康狀態(tài)和體重。以足以提供治療有效劑量或預(yù)防有效劑量的MAG衍生物的量施用本發(fā)明的組合物。例如，所述組合物可包含相當(dāng)于組合物能量的約3%至40%的量的sn-2MAG衍生物。低至3%的花生四烯酸、二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸可滿足必需脂肪酸需求，并提供有效的抗炎作用。本發(fā)明的組合物可用于功能性脂肪酸的遞送。為了本發(fā)明的目的，功能性脂肪酸是遞送健康益處的脂肪酸。 例如，本發(fā)明組合物可用于遞送具有抗炎特性的脂肪酸。本發(fā)明的組合物在脂質(zhì)消化不良或吸收不良的狀況下特別有用。因此，可將本發(fā)明的組合物施用于患有脂質(zhì)消化不良或吸收不良的狀況的個體。所述組合物可用于患有任何類型的脂質(zhì)消化不良或吸收不良的狀況的個體。例如，所述吸收不良的狀況的原因可以是胰腺機(jī)能不全、膽鹽不足、粘膜障礙和/或短腸。例如，如果MAG衍生物所包含的脂肪酸是具有抗炎特性的脂肪酸，則依據(jù)本發(fā)明的組合物可用于治療或預(yù)防炎性疾病。本發(fā)明還涉及sn-2MAG衍生物在制備組合物中的應(yīng)用，其中sn_l和sn_3位被保護(hù)基阻斷且其中所述?；鶠榫哂锌寡滋匦缘闹舅?，所述組合物用于治療或預(yù)防炎性疾病、特別是用于在脂質(zhì)消化不良和/或吸收不良的狀況下治療或預(yù)防炎性疾病。所述炎性疾病可選自急性炎癥諸如膿毒癥，和慢性炎癥諸如炎癥性腸病、局限性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、壞死性小腸結(jié)腸炎、皮膚炎癥、諸如UV或化學(xué)誘導(dǎo)的皮膚炎癥、濕疫、反應(yīng)性皮膚(reactive skin)、銀屑病、白斑、痤瘡、炎癥性腸綜合征、肝臟炎癥、酒精性肝硬化、變態(tài)反應(yīng)、特應(yīng)性(atopy)、骨炎癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性狼瘡(systemiclupus)、皮肌炎、甲狀腺炎、I型糖尿病、乳糜灣、比爾默氏病(Biermer’ s disease)、多發(fā)性硬化、腦脊髓炎、眼炎癥、肥胖相關(guān)的炎癥、年齡相關(guān)的輕度炎癥、Blau綜合征、阿爾茨海默病、心血管疾病、動脈粥樣硬化、代謝綜合征或其組合。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，他們可以自由地組合本文所述的本發(fā)明的所有特征而不背離所公開的本發(fā)明的范圍。特別地，對本發(fā)明的用途所述的特征可以適用于本發(fā)明的組合物，反之亦然。
本發(fā)明的其它優(yōu)點和特征從如下實施例和附圖中是顯而易見的。圖1顯示了本發(fā)明中使用的EPA甘油酯的實例(A) 1，3_ 二乙?；鵢2_ 二十碳五烯酰基甘油和[B] sn-2單二十碳五烯?；视偷目s醛衍生物。圖2顯示了紅細(xì)胞中納入的EPA。處置飼喂魚油和奧利司他或者飼喂魚油而沒有奧利司他的對照大鼠，以及飼喂圖1中描述的MAG衍生物(A和B)的大鼠。數(shù)值為平均值土 SEM(n=6)。
實施例在脂質(zhì)消化不良或吸收不良動物模型中測試本發(fā)明的構(gòu)思。使用奧利司他(一種公知的胰和胃脂肪酶抑制劑)獲得了消化不良或吸收不良的狀況。在21天期間用主要含二十碳五烯酸(EPA)的長鏈多不飽和脂肪酸(LC-PUFA)補(bǔ)充劑飼喂動物。將魚油用作三酰基甘油的來源，并評價了圖1提供的的不同的EPA甘油酯。給予以足以降低脂質(zhì)吸收達(dá) 40%的水平的奧利司他。將接受魚油而沒有奧利司他的組用作陽性對照。在不同的時間間隔(第3天、第7天、第14天和第21天)測定了紅細(xì)胞脂質(zhì)和血脂的脂肪酸分布特性。在實驗的結(jié)尾，測定了不同組織的脂肪酸分布特性。主要目標(biāo)是尋求紅細(xì)胞脂質(zhì)和血脂的EPA水平。在評價中主要對比的是接受EPA衍生物(圖1)及奧利司他的組與陽性對照組(魚油+奧利司他)之間的EPA水平的差別。例如，圖2中報道了在第7天獲得的紅細(xì)胞脂質(zhì)中的EPA水平的數(shù)據(jù)。統(tǒng)計學(xué)評價顯示使用奧利司他減少了進(jìn)入紅細(xì)胞中的EPA(接受魚油和奧利司他的組與接受魚油而沒有奧利司他的組之間的比較)。由于該比較證實了模型的有效性，所以非常重要。接受MAG衍生物的動物的紅細(xì)胞中所納入的EPA的水平在統(tǒng)計學(xué)上高于魚油+奧利司他組的紅細(xì)胞中納入的EPA的水平(所有的P值都低于O. 05)。該實施例清楚地證實了，在脂質(zhì)消化不良或吸收不良的狀況中，以三?；视托问教峁┑腖C-PUFA的進(jìn)入減少。然而，如果以本發(fā)明的MAG衍生物(組A和B)形式提供LC-PUFA，那么甚至在脂質(zhì)消化不良或吸收不良的狀況中進(jìn)入組織中的水平也未發(fā)生改變。
權(quán)利要求
1.含sn-2單酰基甘油衍生物的組合物，其中sn-Ι和sn_3位被保護(hù)基阻斷，且其中所述酰基是具有抗炎特性的脂肪酸。
2.依據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中具有抗炎特性的脂肪酸選自二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、α-亞麻酸(ALA)、十八碳四烯酸(SA)、Y-亞麻酸(GLA)、二高1-亞麻酸(DGLA)、n-3 二十二碳五烯酸(DPA)、5 (Z)，11 (Z)，14 (Z) - 二十碳三烯酸和5 (Z)，Il(Z), 14 (Z)，17 (Z)-二十碳四烯酸。
3.依據(jù)前述權(quán)利要求中的一項的組合物，其中所述保護(hù)基選自乙?；?、乙基、丙基、香草醛或其它能形成縮醛的分子。
4.依據(jù)前述權(quán)利要求中的一項的組合物，其中所述sn-2單?；视脱苌镞x自1，3- 二乙?；?2- 二十碳五烯酰基甘油、1，3- 二乙基-2- 二十碳五烯?；视?、1，3- 二丙基-2- 二十碳五烯?；视?、sn-2單二十碳五烯?；视偷南悴菪蜒苌?、單二十碳五烯酰基甘油的其它的縮醛衍生物或其組合。
5.依據(jù)前述權(quán)利要求中的一項的組合物，其中所述組合物選自食品、動物食品、藥物組合物、營養(yǎng)組合物、功能食品、飲料、食品添加劑或藥物。
6.依據(jù)前述權(quán)利要求中的一項的組合物，其中所述組合物具有O.5kcal/ml至15kcal/ml的范圍內(nèi)的熱量密度。
7.依據(jù)前述權(quán)利要求中的一項的組合物，其中所述sn-2單?；视脱苌锾峁┙M合 物的能量的約3%至40%。
8.依據(jù)前述權(quán)利要求中的一項的組合物，其中所述組合物包含不同的sn-2單?；视脱苌锏慕M合；例如具有比例為約5:1至約15:1的n-3脂肪酸和n_6脂肪酸的sn_2單?；视脱苌锏慕M合；例如約8:1至約10:1。
9.用于遞送具有抗炎特性的脂肪酸的依據(jù)前述權(quán)利要求中的一項的組合物，特別是在脂質(zhì)消化不良或吸收不良的狀況下遞送具有抗炎特性的脂肪酸。
10.用于施用于患有脂質(zhì)消化不良或吸收不良的狀況的個體的依據(jù)前述權(quán)利要求中的一項的組合物。
11.依據(jù)權(quán)利要求9的組合物，其中所述消化不良或吸收不良的狀況是由于胰腺機(jī)能不全、膽鹽不足、粘膜障礙和/或短腸。
12.用于治療或預(yù)防炎性疾病的依據(jù)前述權(quán)利要求中的一項的組合物。
13.依據(jù)前述權(quán)利要求中的一項的組合物，其中所述炎性疾病選自急性炎癥諸如膿毒癥，和慢性炎癥諸如炎癥性腸病、局限性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、壞死性小腸結(jié)腸炎、皮膚炎癥、諸如UV或化學(xué)誘導(dǎo)的皮膚炎癥、濕疹、反應(yīng)性皮膚、銀屑病、白斑、痤瘡、炎癥性腸綜合征、肝臟炎癥、酒精性肝硬化、變態(tài)反應(yīng)、特應(yīng)性、骨炎癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性狼瘡、皮肌炎、甲狀腺炎、I型糖尿病、乳糜瀉、比爾默氏病、多發(fā)性硬化、腦脊髓炎、眼炎癥、肥胖相關(guān)的炎癥、年齡相關(guān)的輕度炎癥、Blau綜合征、阿爾茨海默病、心血管疾病、動脈粥樣硬化、代謝綜合征。
14.用于治療或預(yù)防與脂質(zhì)消化不良或吸收不良的狀況相關(guān)的障礙的依據(jù)前述權(quán)利要求中的一項的組合物。
15.用于施用于早產(chǎn)兒的依據(jù)權(quán)利要求14的組合物。
全文摘要
本發(fā)明概括而言涉及脂質(zhì)的領(lǐng)域，具體而言旨在改善脂質(zhì)吸收，例如在脂質(zhì)消化不良或吸收不良的情況下改善脂質(zhì)吸收。本發(fā)明的一個實施方案涉及包含sn-2單?；视脱苌?其中sn-1和sn-3位被保護(hù)基阻斷)的組合物。所述?；梢允侵舅幔缇哂锌寡滋匦缘闹舅?。
文檔編號A61K31/202GK103002889SQ201180033290
公開日2013年3月27日 申請日期2011年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月5日
發(fā)明者B·比斯特利安, F·德塔亞, C·克魯茲-赫爾南德斯, F·迪歐尼斯, I·馬斯雷-埃爾梅萊吉, M·奧利維拉, J·C·穆蘭 申請人:雀巢產(chǎn)品技術(shù)援助有限公司, 貝斯以色列女執(zhí)事醫(yī)療中心公司