專利名稱：治療性肽-聚合物綴合物、粒子、組合物以及相關方法
治療性肽-聚合物綴合物、粒子、組合物以及相關方法優(yōu)先權要求本申請要求2010年8月20日提交的U.S.S.N.61/375，771和2011年4月21日提交的U.S.S.N.61/477，827的優(yōu)先權，所述申請的內(nèi)容均以引用的方式并入本文。
背景技術：
通過治療性肽的受控釋放來遞送治療性肽對于提供最佳使用和有效性是合乎需要的。受控釋放聚合物系統(tǒng)可以增加治療性肽的功效并且將患者依從性問題減少到最低限度。發(fā)明概述 本文描述可以在例如以下病癥的治療中用于例如遞送治療性肽或蛋白質(zhì)的粒子:癌癥、炎癥性病癥(例如炎癥性病癥，包括由例如傳染性疾病造成的炎癥性病癥)或自身免疫性病癥、心血管疾病，或其它病癥(例如傳染性疾病)?？傮w上，粒子包含親水性-疏水性聚合物(例如，二嵌段或三嵌段共聚物)和治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，粒子還包含疏水性聚合物或表面活性劑。總體上，治療性肽被連接至聚合物，例如親水性-疏水性聚合物，或連接至(如果存在)疏水性聚合物。在治療性肽或蛋白質(zhì)帶電荷的實施方案中，粒子還可以包含治療性肽的抗衡離子。本文還描述綴合物如治療性肽或蛋白質(zhì)-聚合物綴合物，含有粒子或綴合物的混合物、組合物以及劑型，使用粒子(例如用于治療病癥)的方法，包含治療性肽或蛋白質(zhì)-聚合物綴合物和粒子的試劑盒，制造治療性肽或蛋白質(zhì)-聚合物綴合物和粒子的方法，儲存粒子的方法以及分析粒子的方法。在一方面，本公開的特征在于一種包含以下各物的粒子:a)多種疏水性聚合物；b)多種親水性-疏水性聚合物；以及c)多種治療性肽或蛋白質(zhì)，其中多種治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分被共價連接至a)的疏水性聚合物或b)的親水性-疏水性聚合物。在一些實施方案中，粒子還包含疏水性部分，如殼聚糖、聚(乙烯醇)或泊洛沙姆(poloxamer)。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分未被共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)，例如，a)的疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至c)的單一治療性肽或蛋白質(zhì)，或a)的疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至c)的多種治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分被直接共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)(例如，在疏水性聚合物的羧基末端或羥基末端處)。在一些實施方案中，
c)的治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分被經(jīng)由連接基共價連接至疏水性聚合物。示例性連接基包括:包含使用“點擊化學”(例如，如在W02006/115547中描述)來形成的部分的連接基，和包含酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯、肟、氨基甲酸酯、碳酸酯、甲硅烷基醚或三唑(例如，酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯或三唑)的連接基。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含多個官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如本文描述的鍵或官能團，所述鍵或官能團不直接連接至通過連接基在連接基的末端鍵聯(lián)的第一或第二部分，而是處于連接基內(nèi)部。在一些實施方案中，連接基可在生理條件下水解，連接基可在生理條件下酶促裂解，或連接基包含可以在生理條件下還原的二硫化物。在一些實施方案中，連接基不在生理條件下裂解，例如，連接基具有治療性肽或蛋白質(zhì)不需要被裂解以便具有活性的足夠長度，例如，連接基的長度為至少約20埃(例如，至少約24埃)。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分通過治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基末端共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分；a)的疏水性聚合物的至少一部分通過治療性肽或蛋白質(zhì)的羧基末端共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分；和/或a)的疏水性聚合物的至少一部分通過治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基酸側共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分與可以阻抑疏水性聚合物或粒子的pH的部分偶合。示例性pH阻抑部分包括弱堿性鹽，如碳酸鈣、氫氧化鎂以及碳酸鋅，和質(zhì)子海綿(例如，包括一個或多個胺基團)，如聚胺。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至c)的單一治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至c)的多種治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分被直接共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，c)的治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分經(jīng)由連接基共價連接至b)的親水性-疏水性聚合物。示例性連接基包括:包含使用“點擊化學”(例如，如在W02006/115547中描述)來形成的部分的連接基，和包含酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯、肟、氨基甲酸酯、碳酸酯、甲硅烷基醚或三唑(例如，酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯或三唑)的連接基。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含多個官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如本文描述的鍵或官能團，所述鍵或官能團不直接連接至通過連接基在連接基的末端鍵聯(lián)的第一或第二部分，而是處于連接基內(nèi)部。在一些實施方案中，連接基可在生理條件下水解，連接基可在生理條件下酶促裂解，或連接基包含可以在生理條件下還原的二硫化物。在一些實施方案中，連接基不在生理條件下裂解，例如，連接基具有治療性肽或蛋白質(zhì)不需要被裂解以便具有活性的足夠長度，例如，連接基的長度為至少約20埃(例如，至少約24埃)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分在疏水性聚合物的羧基末端或羥基末端處共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分通過治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基末端共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分通過治療性肽或蛋 白質(zhì)的羧基末端共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分通過治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基酸側共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分。在一些實施方案中，粒子進一步包含多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)，其中其它治療性肽或蛋白質(zhì)不同于c)的治療性肽或蛋白質(zhì)，例如，多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分被連接至a)的疏水性聚合物和/或b)的親水性-疏水性聚合物中的至少一部分。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分是乳酸與乙醇酸的共聚物(即，PLGA)。例如，在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的一部分是乳酸與乙醇酸的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，乳酸與乙醇酸的比率為約50: 50的 PLGA。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物具有約6至約12kDa，例如約8至約IOkDa的重量平均分子量。在其它實施方案中，a)的疏水性聚合物具有約4至約SkDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物具有約10至約IOOkDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物占粒子的約35重量％至約80重量％。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)并且a)的疏水性聚合物的一部分被連接至多種治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為嵌段共聚物。示例性嵌段共聚物包含中性親水性嵌段(例如，它可以增強循環(huán))，和PH響應性嵌段(例如，它可以促進內(nèi)含體逃逸)。示例性pH響應性嵌段包括具有順-acetonityl、腙或縮醛連接基的那些嵌段，所述連接基可以在例如PH4至6.5下水解。在一些實施方案中，聚合物包括可逆的肽綴合位點，例如，所述位點可以提供在到達細胞溶膠時從載體中釋放肽的手段(例如，氫硫基)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為二嵌段共聚物(例如，PEG-PLGA)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為三嵌段共聚物(例如，PEG-PLGA-PEG)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端并且羥基末端經(jīng)過封端(例如，以酰基部分封端)。例如，在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端并且羥基末端以酰基部分封端。 在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分包含乳酸與乙醇酸的共聚物(即，PLGA)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分包含乳酸與乙醇酸的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，乳酸與乙醇酸的比率為約50: 50的PLGA。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分具有約I至約6kDa (例如，約2至約6kDa)的重量平均分子量。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分具有約8至約13kDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，b)的多種親水性-疏水性聚合物占所述粒子的約5重量％至約25重量％ (例如，約10重量％至約25重量％)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分包含PEG。在一些實施方案中，所述親水性-疏水性聚合物的親水性部分以甲氧基終止。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)并且b)的親水性-疏水性聚合物的一部分被連接至多種治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，治療性肽是本文描述的治療性肽。在一些實施方案中，治療性肽包含約2個至約50個氨基酸殘基，例如，約2個至約40個氨基酸殘基或約2個至約30
個氨基酸殘基。在一些實施方案中，蛋白質(zhì)是本文描述的蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分經(jīng)過化學修飾。在一些實施方案中，多種治療性肽占所述粒子的約I重量％至約90重量％ (例如，約50%至約90%，約70%至約90%，約10%至50%，約10%至約30% )。在一些實施方案中，粒子進一步包含表面活性劑。在一些實施方案中，表面活性劑是聚合物，例如，表面活性劑是PVA。在一些實施方案中，PVA具有約23至約26kDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，表面活性劑占所述粒子的約15重量％至約35重量％。在一些實施方案中，粒子進一步包含抗衡離子。例如，在治療性肽是帶電荷的肽的實施方案中，粒子可以包含抗衡離子，其中抗衡離子具有與治療性肽上的電荷相反的電荷。在一些實施方案中，粒子中的治療性肽的電荷與抗衡離子的電荷的比率是約1:1.5至約1.5: I (例如，約1.25: I 至約1:1.25，或約1:1)。在一些實施方案中，抗衡離子可以充當表面活性劑(例如，單一部分可以充當抗衡離子以及表面活性劑)。在一些實施方案中，粒子的直徑小于約200nm(例如，小于約150nm)。在一些實施方案中，粒子的表面大致上涂有如PEG的聚合物。在一些實施方案中，粒子的(電位為約-10至約IOmV(例如，約_5至約5mV)。在一些實施方案中，粒子在包括23攝氏度的溫度和60%的百分率濕度的條件下化學穩(wěn)定至少I天(例如，至少7天,至少14天,至少21天,至少30天)。在一些實施方案中，粒子是凍干粒子。在一些實施方案中，粒子被配制成藥物組合物。在一些實施方案中，粒子的表面大致上不含靶向劑。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)被連接至a)的疏水性聚合物并且治療性肽或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物具有一種或多種以下特性:i)連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的疏水性聚合物可以為均聚物或由一種以上單體亞單元組成的聚合物；ii)連接至所述治療性肽或蛋白質(zhì)的疏水性聚合物具有約4_15kDa的重量平均分 子量;iii)疏水性聚合物由第一和第二類型的單體亞單元組成，并且連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的所述疏水性聚合物中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75 至約 75: 25 或 85: 15，例如，約 50: 50; iv)疏水性聚合物是PLGA ；以及V)治療性肽或蛋白質(zhì)占所述粒子的約I重量％至約100重量％ (例如，約50%至約 100%，約 70%至約 100%，約 50%至 90% )。在一些實施方案中，連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的疏水性聚合物具有約4_15kDa的重量平均分子量，例如6-12kDa，例如8-10kDa。
在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物具有一種或多種以下特性:i)親水性部分具有約l_6kDa (例如，2_6kDa)的重量平均分子量；ii)疏水性聚合物具有約4_15kDa的重量平均分子量；iii)親水性聚合物為PEG ；iv)疏水性聚合物由第一和第二類型的單體亞單元組成，并且疏水性聚合物中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，約50: 50 ;以及V)疏水性聚合物為PLGA。在一些實施方案中，如果b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分的重量平均分子量為約l_3kDa，例如約2kDa，那么親水性部分的重量平均分子量與疏水性部分的重量平均分子量的比率在1: 3-1: 7之間，并且如果親水性部分的重量平均分子量為約4-6kDa，例如約5kDa,那么未水性部分的重量平均分子量與疏水性部分的重量平均分子量的比率在1:1-1: 4 之間。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分具有約2_6kDa的重量平均分子量并且疏水性部分具有約8-13kDa之間的重量平均分子量。在一些實施方案中，b)的所述親水性-疏水性聚合物的親水性部分以甲氧基終
止。 在一些實施方案中，治療性肽被連接至a)的疏水性聚合物并且治療性肽-疏水性聚合物綴合物具有一種或多種以下特性:i)連接至治療性肽的疏水性聚合物可為均聚物或由一種以上單體亞單元組成的聚合物；ii)連接至治療性肽的疏水性聚合物具有約4_15kDa的重量平均分子量；iii)疏水性聚合物由第一與第二類型的單體亞單元組成，并且連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的所述疏水性聚合物中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，約50: 50;以及iv)疏水性聚合物為PLGA。在一些實施方案中，粒子進一步包含表面活性劑(例如PVA)。在另一方面，本公開的特征在于一種包含以下各物的粒子:a)多種治療性肽或蛋白質(zhì)-聚合物綴合物，所述綴合物包含連接至疏水性聚合物的治療性肽或蛋白質(zhì)；以及b)多種親水性-疏水性聚合物。在一些實施方案中，粒子進一步包含疏水性聚合物(例如PLGA)。在一些實施方案中，粒子還包含疏水性部分，如殼聚糖、聚(乙烯醇)或泊洛沙姆。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)經(jīng)由連接基共價連接至疏水性聚合物。示例性連接基包括:包含使用“點擊化學”(例如，如在W02006/115547中描述)來形成的部分的連接基，和包含酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯、肟、氨基甲酸酯、碳酸酯、甲硅烷基醚或三唑(例如，酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯或三唑)的連接基。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含多個官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如本文描述的鍵或官能團，所述鍵或官能團不直接連接至通過連接基在連接基的末端鍵聯(lián)的第一或第二部分，而是處于連接基內(nèi)部。在一些實施方案中，連接基可在生理條件下水解，連接基可在生理條件下酶促裂解，或連接基包含可以在生理條件下還原的二硫化物。在一些實施方案中，連接基不在生理條件下裂解，例如，連接基具有治療性肽或蛋白質(zhì)不需要被裂解以便具有活性的足夠長度，例如，連接基的長度為至少約20埃(例如，至少約24埃)。在一些實施方案中，粒子進一步包含多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)，其中其它治療性肽或蛋白質(zhì)不同于a)的治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分被連接至疏水性聚合物和/或b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分是乳酸與乙醇酸的共聚物(即，PLGA)。例如，在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的一部分是乳酸與乙醇酸的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，乳酸與乙醇酸的比率為約50: 50的 PLGA。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物具有約6至約12kDa，例如約8至約IOkDa的重量平均分子量。在其它實施方案中，a)的疏水性聚合物具有約4至約SkDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物具有約10至約IOOkDa的重量平均分子量。
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在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物占粒子的約35重量％至約80重量％。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為嵌段共聚物，例如，b)的親水性-疏水性聚合物為二嵌段共聚物。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為嵌段共聚物。示例性嵌段共聚物包含中性親水性嵌段(例如，它可以增強循環(huán))，和PH響應性嵌段(例如，它可以促進內(nèi)含體逃逸)。示例性PH響應性嵌段包括具有順-acetonityl、腙或縮醛連接基的那些嵌段，所述連接基可以在例如PH4至6.5下水解。在一些實施方案中，聚合物包括可逆的肽綴合位點，例如，所述位點可以提供在到達細胞溶膠時從載體中釋放肽的手段(例如，氫硫基)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端并且羥基末端經(jīng)過封端(例如，以?；糠址舛?。例如，在一些實施方案中，
b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端并且羥基末端以?；糠址舛?。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分與可以阻抑疏水性聚合物或粒子的pH的部分偶合。示例性pH阻抑部分包括弱堿性鹽，如碳酸鈣、氫氧化鎂以及碳酸鋅，和質(zhì)子海綿(例如，包括一個或多個胺基團)，如聚胺。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分包含乳酸與乙醇酸的共聚物(即，PLGA)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分包含乳酸與乙醇酸的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，乳酸與乙醇酸的比率為約50: 50的PLGA。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分具有約I至約6kDa (例如，約2至約6kDa)的重量平均分子量。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分具有約8至約13kDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，b)的多種親水性-疏水性聚合物占所述粒子的約5重量％至約25重量％ (例如，約10重量％至約25重量％)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分包含PEG。在一些實施方案中，所述親水性-疏水性聚合物的親水性部分以甲氧基終止。在一些實施方案中，治療性肽是本文描述的治療性肽。在一些實施方案中，治療性肽包含約2個至約50個氨基酸殘基，例如，約2個至約40個氨基酸殘基或約2個至約30
個氨基酸殘基。在一些實施方案中，蛋白質(zhì)是本文描述的蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，治療性肽的至少一部分經(jīng)過化學修飾。在一些實施方案中，多種治療性肽占所述粒子的約I重量％至約50重量％ (例如，約1%至約20% )。在一些實施方案中，粒子進一步包含表面活性劑。在一些實施方案中，表面活性劑是聚合物，例如，表面活性劑是PVA。在一些實施方案中，PVA具有約23至約26kDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，表面活性劑占所述粒子的約15重量％至約35重量％。在一些實施方案中，粒子進一步包含抗衡離子。例如，在治療性肽是帶電荷的肽的實施方案中，粒子可以包含抗衡離子，其中`抗衡離子具有與治療性肽或蛋白質(zhì)上的電荷相反的電荷。在一些實施方案中，粒子中的治療性肽或蛋白質(zhì)的電荷與抗衡離子的電荷的比率是約1:1.5至約1.5: I (例如，約1.25: I至約1:1.25，或約1:1)。在一些實施方案中，抗衡離子可以充當表面活性劑(例如，單一部分可以充當抗衡離子以及表面活性劑)。在一些實施方案中，粒子的直徑小于約200nm(例如，小于約150nm)。在一些實施方案中，粒子的表面大致上涂有如PEG的聚合物。在一些實施方案中，粒子的(電位為約-10至約IOmV(例如，約_5至約5mV)。在一些實施方案中，粒子在包括23攝氏度的溫度和60%的百分率濕度的條件下化學穩(wěn)定至少I天(例如，至少7天,至少14天,至少21天,至少30天)。在一些實施方案中，粒子是凍干粒子。在一些實施方案中，粒子被配制成藥物組合物。在一些實施方案中，粒子的表面大致上不含靶向劑。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)被連接至a)的疏水性聚合物并且治療性肽或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物具有一種或多種以下特性:i)連接至所述治療性肽或蛋白質(zhì)的疏水性聚合物可為均聚物或由一種以上單體亞單元組成的聚合物；ii)連接至所述治療性肽或蛋白質(zhì)的疏水性聚合物具有約4_15kDa的重量平均分
子量;iii)疏水性聚合物由第一和第二類型的單體亞單元組成，并且連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的所述疏水性聚合物中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75 至約 75: 25 或 85: 15，例如，約 50: 50;
iv)疏水性聚合物是PLGA ；以及V)治療性肽占粒子的約I重量％至約20重量％。在一些實施方案中，連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的疏水性聚合物具有約4_15kDa、例如6-12kDa、例如8-10kDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物具有一種或多種以下特性:i)未水性部分具有約l_6kDa (例如,2_6kDa)的重量平均分子量；ii)疏水性聚合物具有約4_15kDa的重量平均分子量；iii)親水性聚合物為PEG ；

iv)疏水性聚合物由第一與第二類型的單體亞單元組成，并且疏水性聚合物中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，約50: 50 ;以及V)疏水性聚合物為PLGA。在一些實施方案中，如果b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分的重量平均分子量為約l_3kDa，例如約2kDa，那么親水性部分的重量平均分子量與疏水性部分的重量平均分子量的比率在1: 3-1: 7之間，并且如果親水性部分的重量平均分子量為約4-6kDa，例如約5kDa,那么未水性部分的重量平均分子量與疏水性部分的重量平均分子量的比率在1:1-1: 4 之間。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分具有約2_6kDa的重量平均分子量并且疏水性部分具有在約8-13kDa之間的重量平均分子量。在一些實施方案中，b)的所述親水性-疏水性聚合物的親水性部分端接于甲氧基。在一些實施方案中，治療性肽被連接至a)的疏水性聚合物并且治療性肽-疏水性聚合物綴合物具有一種或多種以下特性:i)連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的疏水性聚合物可為均聚物或由一種以上單體亞單元組成的聚合物；ii)連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的疏水性聚合物具有約4_15kDa的重量平均分子量;iii)疏水性聚合物由第一與第二類型的單體亞單元組成，并且連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的所述疏水性聚合物中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，約50: 50;以及iv)疏水性聚合物為PLGA。在一些實施方案中，粒子進一步包含表面活性劑(例如PVA)。在一些實施方案中，治療性肽是本文描述的治療性肽。在一些實施方案中，治療性肽包含約2個至約50個氨基酸殘基，例如，約2個至約40個氨基酸殘基或約2個至約30
個氨基酸殘基。在一些實施方案中，蛋白質(zhì)是本文描述的蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分經(jīng)過化學修飾。在一些實施方案中，多種治療性肽或蛋白質(zhì)占所述粒子的約I重量％至約100重量％ (例如，約50%至約100%，約70%至約100%，約50%至約90% )。
在一些方面，本公開的特征在于一種包含以下各物的粒子:a)任選地多種疏水性聚合物；以及b)多種治療性肽或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物，所述綴合物包含連接至親水性-疏水性聚合物的治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，粒子大致上不含疏水性聚合物。在一些實施方案中，粒子還包含疏水性部分，如殼聚糖、聚(乙烯醇)或泊洛沙姆。在一些實施方案中，粒子進一步包含多種親水性-疏水性聚合物，其中所述多種親水性-疏水性聚合物的所述親水性-疏水性聚合物中的每一種包含連接至疏水性部分的親水性部分。在一些實施方案中，b)的綴合物的疏水性-親水性聚合物經(jīng)由連接基共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)。示例性連接基包括:包含使用“點擊化學”(例如，如在W02006/115547中描述)來形成的部分的連接基，和包含酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯、肟、氨基甲酸酯、碳酸酯、甲硅烷基醚或三唑(例如，酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯或三唑)的連接基。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含多個官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如本文描述的鍵或官能團，所述鍵或官能團不直接連接至通過連接基在連接基的末端鍵聯(lián)的第一或第二部分，而是處于連接基內(nèi)部。在一些實施方案中，連接基可在生理條件下水解，連接基可在生理條件下酶促裂解，或連接基包含可以在生理條件下還原的二硫化物。在一些實施方案中，連接基不在生理條件下裂解，例如，連接基具有治療性肽或蛋白質(zhì)不需要被裂解以便具有活性的足夠長度，例如，連接基的長度為至少約20埃(例如，至少約24埃)。在一些實施方案中，粒子進一步包含多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)，其中其它治療性肽或蛋白質(zhì)不同于b)的治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分被連接至a)的疏水性聚合物和/或親水性-疏水性聚合物的至少一部分。在一些實施方案中，多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分被連接至a)的疏水性聚合物的至少一部分。在一些實施方案中，粒子包含疏水性聚合物。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分具有羧基末端。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分具有羥基末端。在一些實施方案中，具有羥基末端的a)的疏水性聚合物的至少一部分具有經(jīng)過封端的輕基末端(例如，以?；糠址舛?。在一些實施方案中，疏水性聚合物的末端經(jīng)過修飾(例如，通過與官能部分反應)，例如，疏水性聚合物的羥基末端經(jīng)過修飾(例如，通過與官能部分反應)和/或疏水性聚合物的羧基末端經(jīng)過修飾(例如，通過與官能部分反應)。例如，羥基末端或羧基末端以反應性部分來修飾，所述部分可以用于例如通過連接基將治療性肽或蛋白質(zhì)連接至聚合物。在一些實施方案中，反應性部分未與治療性肽或蛋白質(zhì)反應并且保留于聚合物上或在后續(xù)反應中水解。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分具有羧基末端與輕基末端，例如，具有羥基末端的a)的疏水性 聚合物的至少一部分具有經(jīng)過封端的羥基末端(例如，以?；糠址舛?。
在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分是乳酸與乙醇酸的共聚物(即，PLGA)。例如，在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的一部分是乳酸與乙醇酸的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，乳酸與乙醇酸的比率為約50: 50的 PLGA。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物具有約6至約12kDa，例如約8至約IOkDa的重量平均分子量。在其它實施方案中，a)的疏水性聚合物具有約4至約SkDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物具有約10至約IOOkDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物占粒子的約35重量％至約80重量％。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)并且a)的疏水性聚合物的一部分被連接至多種治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分與可以阻抑疏水性聚合物或粒子的pH的部分偶合。示例性pH阻抑部分包括弱堿性鹽，例如碳酸鈣、氫氧化鎂以及碳酸鋅，和質(zhì)子海綿(例如，包括一個或多個胺基團)，如聚胺。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為嵌段共聚物。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為嵌段共聚物。示例性嵌段共聚物包含中性親水性嵌段(例如，它可以增強循環(huán))，和PH響應性嵌段(例如，它可以促進內(nèi)含體逃逸)。示例性pH響應性嵌段包括具有順-acetonityl、腙或縮醛連接基的那些嵌段，所述連接基可以在例如PH4至6.5下水解。在一些實施方案中，聚合物包括可逆的肽綴合位點，例如，所述位點可以提供在到達細胞溶膠時從載體中釋放肽的手段(例如，氫硫基)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為二嵌段共聚物(例如，PEG-PLGA)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為三嵌段共聚物(例如，PEG-PLGA-PEG)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端并且羥基末端經(jīng)過封端(例如，以?；糠址舛?。例如，在一些實施方案中，
b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端并且羥基末端以?；糠址舛恕Ｔ谝恍嵤┓桨钢?，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分包含乳酸與乙醇酸的共聚物(即，PLGA)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分包含乳酸與乙醇酸的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，乳酸與乙醇酸的比率為約50: 50的PLGA。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分具有約I至約6kDa (例如，約2至約6kDa)的重量平均分子量。 在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分具有約8至約13kDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，b)的多種親水性-疏水性聚合物占所述粒子的約5重量％至約25重量％ (例如，約10重量％至約25重量％)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分包含PEG。在一些實施方案中，所述親水性-疏水性聚合物的親水性部分以甲氧基終止。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)并且b)的親水性-疏水性聚合物的一部分被連接至多種治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，疏水性聚合物具有一種或多種以下特性:i)疏水性聚合物可為均聚物或由一種以上單體亞單元組成的聚合物；ii)疏水性聚合物具有約4_15kDa的重量平均分子量；iii)疏水性聚合物由第一與第二類型的單體亞單元組成，并且連接至所述試劑的所述疏水性聚合物中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，約50: 50;以及

iv)疏水性聚合物為PLGA。在一些實施方案中，疏水性聚合物具有約4_15kDa、例如6_12kDa、例如8_10kDa的
重量平均分子量。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物具有一種或多種以下特性:i)未水性部分具有約l_6kDa (例如,2_6kDa)的重量平均分子量，ii)疏水性聚合物具有約4_15kDa的重量平均分子量；iii)親水性聚合物為PEG ；iv)親水性-疏水性聚合物的疏水性部分由第一與第二類型的單體亞單元組成，并且疏水性部分中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，約50: 50;以及 V)親水性-疏水性聚合物的疏水性部分為PLGA。在一些實施方案中，如果親水性-疏水性聚合物的親水性部分的重量平均分子量為約l_3kDa，例如約2kDa，那么親水性部分的重量平均分子量與疏水性部分的重量平均分子量的比率在1: 3-1: 7之間，并且如果親水性部分的重量平均分子量為約4-6kDa，例如約5kDa,那么未水性部分的重量平均分子量與疏水性部分的重量平均分子量的比率在1:1-1: 4 之間。在一些實施方案中，親水性-疏水性聚合物的親水性部分具有約2_6kDa的重量平均分子量并且疏水性部分具有在約8-13kDa之間的重量平均分子量。在一些實施方案中，所述親水性-疏水性聚合物的親水性部分以甲氧基終止。在一些實施方案中，疏水性聚合物具有一種或多種以下特性:i)疏水性聚合物可為均聚物或由一種以上單體亞單元組成的聚合物；ii)疏水性聚合物具有約4_15kDa的重量平均分子量；iii)疏水性聚合物由第一與第二類型的單體亞單元組成，并且疏水性聚合物中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，約50: 50 ;以及iv)疏水性聚合物為PLGA。在一些實施方案中，治療性肽是本文描述的治療性肽。在一些實施方案中，治療性肽包含約2個至約50個氨基酸殘基，例如，約2個至約40個氨基酸殘基或約2個至約30
個氨基酸殘基。在一些實施方案中，蛋白質(zhì)是本文描述的蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分經(jīng)過化學修飾。在一些實施方案中，多種治療性肽或蛋白質(zhì)占所述粒子的約I重量％至約100重量％ (例如，約50%至約100%，約70%至約100%，約50%至約90% )。在一些實施方案中，粒子進一步包含表面活性劑。在一些實施方案中，表面活性劑是聚合物，例如，表面活性劑是PVA。在一些實施方案中，PVA具有約23至約26kDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，表面活性劑占所述粒子的約15重量％至約35重量％。在一些實施方案中，粒子進一步包含抗衡離子。例如，在治療性肽是帶電荷的肽的實施方案中，粒子可包含抗衡離子，其中抗衡離子具有與治療性肽上的電荷相反的電荷。在一些實施方案中，粒子中的治療性肽或蛋白質(zhì)的電荷與抗衡離子的電荷的比率是約I:1.5 至約1.5: I (例如，約 1.25: I 至約1:1.25，或約1:1)。在一些實施方案中，抗衡離子可以充當表面活性劑(例如，單一部分可以充當抗衡離子以及表面活性劑)。在一些實施方案中，粒子的直徑小于約200nm(例如，小于約150nm)。在一些實施方案中，粒子的表面大致上涂有如PEG的聚合物。在一些實施方案中，粒子的(電位為約-10至約IOmV(例如，約-5至約5mV)。在一些實施方案中，粒子在包括23攝氏度的溫度和60%的百分率濕度的條件下化學穩(wěn)定至少I天(例如，至少7天,至少14天,至少21天,至少30天)。在一些實施方案中，粒子是凍干粒子。

在一些實施方案中，粒子被配制成藥物組合物。在一些實施方案中，粒子的表面大致上不含靶向劑。在一些方面，本公開的特征在于一種包含以下各物的粒子:a)任選地，多種疏水性聚合物；b)多種親水性-疏水性聚合物-綴合物，其中親水性-疏水性聚合物綴合物包含連接至帶電荷的肽的親水性-疏水性聚合物；以及c)多種帶電荷的治療性肽或蛋白質(zhì)，其中治療性肽或蛋白質(zhì)的電荷與綴合至親水性-疏水性聚合物的肽的電荷相反，并且其中所述帶電荷的治療性肽或蛋白質(zhì)與親水性-疏水性聚合物-綴合物的帶電荷的肽或蛋白質(zhì)形成非共價鍵(例如，離子鍵)。在一些實施方案中，粒子大致上不含疏水性聚合物。在一些實施方案中，粒子還包含疏水性部分，如殼聚糖、聚(乙烯醇)或泊洛沙姆。在一些實施方案中，粒子進一步包含親水性-疏水性聚合物，如嵌段共聚物(例如，PEG-PLGA)。示例性嵌段共聚物包含中性親水性嵌段(例如，它可以增強循環(huán))，和pH響應性嵌段(例如，它可以促進內(nèi)含體逃逸)。示例性pH響應性嵌段包括具有順-acetonityl、腙或縮醛連接基的那些嵌段，所述連接基可以在例如pH4至6.5下水解。在一些實施方案中，聚合物包括可逆的肽綴合位點，例如，所述位點可以提供在到達細胞溶膠時從載體中釋放肽的手段(例如，氫硫基)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為二嵌段共聚物(例如，PEG-PLGA)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為三嵌段共聚物(例如，PEG-PLGA-PEG)。在一些實施方案中，嵌段共聚物為二嵌段或三嵌段共聚物。示例性嵌段共聚物包含中性親水性嵌段(例如，它可以增強循環(huán))，和PH響應性嵌段(例如，它可以促進內(nèi)含體逃逸)。示例性PH響應性嵌段包括具有順-acetonityl、腙或縮醛連接基的那些嵌段，所述連接基可以在例如PH4至6.5下水解。在一些實施方案中，聚合物包括可逆的肽綴合位點，例如，所述位點可以提供在到達細胞溶膠時從載體中釋放肽的手段(例如，氫硫基)。在一些實施方案中，b)的綴合物的疏水性-親水性聚合物經(jīng)由連接基共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)。示例性連接基包括:包含使用“點擊化學”(例如，如在W02006/115547中描述)來形成的部分的連接基，以及包含酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯、肟、氨基甲酸酯、碳酸酯、甲硅烷基醚或三唑(例如，酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯或三唑)的連接基。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含多個官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如本文描述的鍵或官能團，所述鍵或官能團不直接連接至通過連接基在連接基的末端連接的第一或第二部分，而是處于連接基內(nèi)部。在一些實施方案中，連接基可在生理條件下水解，連接基可在生理條件下酶促裂解，或連接基包含可以在生理條件下還原的二硫化物。在一些實施方案中，連接基不在生理條件下裂解，例如，連接基具有治療性肽或蛋白質(zhì)不需要被裂解以便具有活性的足夠長度，例如，連接基的長度為至少約20埃(例如，至少約24埃)。在一些實施方案中，粒子進一步包含多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)，其中其它治療性肽或蛋白質(zhì)不同于b)的治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分被連接至a)的疏水性聚合物和/或親水性-疏水性聚合物的至少一部分。在一些實施方案中，多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分被連接至a)的疏水性聚合物中的至少一部分。在一些實施方案中，粒子包含疏水性聚合物。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分具有羧基末端。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分具有羥基末端。在一些實施方案中，具有羥基末端的a)的疏水性聚合物的至少一部分具有經(jīng)過封端的輕基末端(例如，以?；糠址舛?。在一些實施方案中，疏水性聚合物的末端經(jīng)過修飾(例如，通過與官能部分反應)，例如，疏水性聚合物的羥基末端經(jīng)過修飾(例如，通過與官能部分反應)和/或疏水性聚合物的羧基末端經(jīng)過修飾(例如，通過與官能部分反應)。例如，羥基末端或羧基末端以反應性部分來修飾，所述部分可以用于例如通過連接基將治療性肽或蛋白質(zhì)連接至聚合物。在一些實施方案中，反應性部分未與治療性肽或蛋白質(zhì)反應并且保留于聚合物上或在后續(xù)反應中水解。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分具有羧基末端和輕基末端，并且例如，具有羥基末端的a)的疏水性聚合物的至少一部分具有經(jīng)過封端的羥基末端(例如，以酰基部分封端)。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分是乳酸與乙醇酸的共聚物(BP, PLGA)。例如，在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的一部分是乳酸與乙醇酸的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15的，例如，乳酸與乙醇酸的比率為約50: 50 的 PLGA。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物具有約6至約12kDa，例如約8至約IOkDa的重量平均分子量。在其它實施方案中，a)的疏水性聚合物具有約4至約SkDa的重量平均分子量。在一些實施方案中， a)的疏水性聚合物具有約10至約IOOkDa的重量平均分子量。
在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)，并且a)的疏水性聚合物的一部分被連接至多種治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，a)的疏水性聚合物的至少一部分與可以阻抑疏水性聚合物或粒子的pH的部分偶合。示例性pH阻抑部分包括弱堿性鹽，如碳酸鈣、氫氧化鎂以及碳酸鋅，和質(zhì)子海綿(例如，包括一個或多個胺基團)，例如聚胺。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為嵌段共聚物。示例性嵌段共聚物包含中性親水性嵌段(例如，它可以增強循環(huán))，和PH響應性嵌段(例如，它可以促進內(nèi)含體逃逸)。示例性pH響應性嵌段包括具有順-acetonityl、腙或縮醛連接基的那些嵌段，所述連接基可以在例如PH4至6.5下水解。在一些實施方案中，聚合物包括可逆的肽綴合位點，例如，所述位點可以提供在到達細胞溶膠時從載體中釋放肽的手段(例如，氫硫基)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為二嵌段共聚物(例如，PEG-PLGA)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物為三嵌段共聚物(例如，PEG-PLGA-PEG)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端并且羥基末端經(jīng)過封端(例如，以?；糠址舛?。例如，在一些實施方案中，
b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分的疏水性部分具有羥基末端并且羥基末端以酰基部分封端。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分包含乳酸與乙醇酸的共聚物(即，PLGA)。在一些實施 方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分包含乳酸與乙醇酸的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，乳酸與乙醇酸的比率為約50: 50的PLGA。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分具有約I至約6kDa (例如，約2至約6kDa)的重量平均分子量。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分具有約8至約13kDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，b)的多種親水性-疏水性聚合物占所述粒子的約5重量％至約25重量％ (例如，約10重量％至約25重量％)。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分包含PEG。在一些實施方案中，所述親水性-疏水性聚合物的親水性部分以甲氧基終止。在一些實施方案中，b)的親水性-疏水性聚合物具有一種或多種以下特性:i)親水性部分具有約l_6kDa (例如，2_6kDa)的重量平均分子量；ii)疏水性聚合物具有約4_15kDa的重量平均分子量；iii)親水性聚合物為PEG ；iv)親水性-疏水性聚合物的疏水性部分由第一與第二類型的單體亞單元組成，并且疏水性部分中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，約50: 50;以及V)親水性-疏水性聚合物的疏水性部分為PLGA。在一些實施方案中，如果親水性-疏水性聚合物的親水性部分的重量平均分子量為約l_3kDa，例如約2kDa，那么親水性部分的重量平均分子量與疏水性部分的重量平均分子量的比率在1: 3-1: 7之間，并且如果親水性部分的重量平均分子量為約4-6kDa，例如約5kDa,那么未水性部分的重量平均分子量與疏水性部分的重量平均分子量的比率在1:1-1: 4 之間。在一些實施方案中，親水性-疏水性聚合物的親水性部分具有約2_6kDa的重量平均分子量并且疏水性部分具有在約8-13kDa之間的重量平均分子量。在一些實施方案中，所述親水性-疏水性聚合物的親水性部分以甲氧基終止。在一些實施方案中，治療性肽是本文描述的治療性肽。在一些實施方案中，治療性肽包含約2個至約50個氨基酸殘基，例如，約2個至約40個氨基酸殘基或約2個至約30個氨基酸殘基。在一些實施方案中，蛋白質(zhì)是本文描述的蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分經(jīng)過化學修飾。在一些實施方案中，多種治療性肽或蛋白質(zhì)占所述粒子的約I重量％至約90重量％ (例如，約50%至約90%，約70%至約90%，約20%至約70% )。在一些實施方案中，粒子進一步包含表面活性劑。在一些實施方案中，表面活性劑是聚合物，例如，表面活性劑是PVA。在一些實施方案中，PVA具有約23至約26kDa的重量平均分子量。在一些實施方案中，表面活性劑占所述粒子的約15重量％至約35重量％。在一些實施方案中，粒子進一步包含抗衡離子。例如，在治療性肽是帶電荷的肽的實施方案中，粒子可以包含抗衡離子，其中抗衡離子具有與治療性肽上的電荷相反的電荷。在一些實施方案中，粒子中的治療性肽或蛋白質(zhì)的電荷與抗衡離子的電荷的比率是約I:1.5 至約1.5: I (例如，約 1.25: I 至約1:1.25，或約1:1)。在一些實施方案中，抗衡離子可以充當表面活性劑(例如，單一部分可以充當抗衡離子以及表面活性劑)。在一些實施方案中，粒子的直徑小于約200nm(例如，小于約150nm)。在一些實施方案中，粒子的表面大致上涂有如PEG的聚合物。在一些實施方案中，粒子的(電位為約-10至約IOmV(例如，約_5至約5mV)。在一些實施方案中，粒子在包括23攝氏度的溫度和60%的百分率濕度的條件下化學穩(wěn)定至少I天(例如，至少7天,至少14天,至少21天,至少30天)。在一些實施方案中，粒子是凍干粒子。在一些實施方案中，粒子被配制成藥物組合物。在一些實施方案中，粒子的表面大致上不含靶向劑。在一些方面，本公開的特征在于一種包含本文描述的多種粒子的組合物。在一些實施方案中，組合物為藥物組合物。在一些實施方案中，至少50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或所有粒子具有小于約200nM的直徑。 在一些實施方案中，粒子具有小于200nm(例如，小于150nm)的Dv90直徑。在一些實施方案中，組合物大致上不含具有小于約500Da的分子量的聚合物。在一些實施方案中，組合物大致上不含游離形式的治療性肽或蛋白質(zhì)(即，未包埋于粒子中或連接至粒子的治療性肽或蛋白質(zhì))。在一些實施方案中，組合物在環(huán)境條件下化學穩(wěn)定至少I天(例如，至少7天、至少14天、至少21天、至少30天)。在一些實施方案中，組合物在包括23攝氏度的溫度和60、70或80百分率的濕度的條件下化學穩(wěn)定至少I天(例如，至少7天、至少14天、至少21天、至少30天)。在一些實施方案中，組合物為凍干組合物。在一些實施方案中，組合物在施用至受試者時導致與施用至受試者的游離形式的治療性肽或蛋白質(zhì)(即，不呈粒子形式)的AUC相比，AUC增加至少10%、20%、50%、75%、80 %、90 %、100 %、200 %或500 %。在一些實施方案中，組合物和所施用的游離形式的治療性肽或蛋白質(zhì)是在相似條件下施用。在一些實施方案中，施用至受試者的粒子組合物中的治療性肽或蛋白質(zhì)的量，例如，就重量或分子的數(shù)量而論，與所施用的游離形式的治療性肽的量相同。在一些實施方案中，定義AUC的曲線選自:a)在所選擇的目標區(qū)室，例如所選擇的組織、器官或其它區(qū)室中的治療性肽或蛋白質(zhì)相對于時間的曲線圖。在一些實施方案中，曲線是在所選擇的目標區(qū)室，例如外周血中的治療性肽或蛋白質(zhì)相對于時間的曲線圖。在一些實施方案中，在30分鐘、I小時、2小時、3小時、6小時、12小時、24小時、2天或7天的一·段時期內(nèi)計算AUC。在一些實施方案中，所述時期開始于施用一定劑量的所述組合物或游離形式的治療性肽或蛋白質(zhì)之時或I分鐘、10分鐘、60分鐘、2小時、12小時、24小時、2天或7天之后。在一些實施方案中，受試者為小鼠、大鼠、犬或人類中的任何一種。在一些實施方案中，組合物在施用至受試者時所導致的血漿濃度峰值(Cmax)小于施用至受試者的所述游尚形式的治療性妝或蛋白質(zhì)的Cmax的90*%、805^705^6040%、30%、20%、10%、5%或1%。在一些實施方案中，組合物和所施用的游離形式的治療性肽或蛋白質(zhì)是在相似條件下施用。在一些實施方案中，施用至受試者的粒子組合物中的治療性肽或蛋白質(zhì)的量，例如，就重量或分子的數(shù)量而論，與所施用的游離形式的量相同。在一些實施方案中，Cmax通過血漿中的游離形式的標記治療性肽或蛋白質(zhì)的存在來測量。在一些實施方案中，在30分鐘、I小時、2小時、3小時、6小時、12小時、24小時、2天或7天的一段時期內(nèi)取得Cmax測量值。在一些實施方案中，該時期開始于施用一定劑量的組合物或治療性肽或蛋白質(zhì)之時或I分鐘、10分鐘、60分鐘、2小時、12小時、24小時、2天或7天之后。在一些實施方案中，受試者為小鼠、大鼠、犬或人類中的任何一種。在一些實施方案中，組合物在施用至受試者時所導致的分布容積(Vz)小于施用至受試者的游離形式的治療性肽或蛋白質(zhì)的Vz的90 %、80 %、70 %、60 %、50 %、40 %、30 %、20%、10%、5% 或 1%0在一些實施方案中，組合物和所施用的游離形式的治療性肽或蛋白質(zhì)是在相似條件下施用。在一些實施方案中，施用至受試者的粒子組合物中的治療性肽或蛋白質(zhì)的量，例如，就重量或分子的數(shù)量而論，與所施用的游離形式的量相同。在一些實施方案中，Vz通過檢測血漿中的游離形式的標記治療性肽或蛋白質(zhì)來測量。在一些實施方案中，在30分鐘、I小時、2小時、3小時、6小時、12小時、24小時、2天或7天的一段時期內(nèi)取得Vz測量值。在一些實施方案中，該時期開始于施用一定劑量的組合物或游離形式的治療性肽或蛋白質(zhì)之時或I分鐘、10分鐘、60分鐘、2小時、12小時、24小時、2天或7天之后。在一些實施方案中，受試者為小鼠、大鼠、犬或人類中的任何一種。在一些方面，本公開的特征在于一種包含本文描述的多種粒子或本文描述的組合物的試劑盒。在一些方面，本公開的特征在于一種包含本文描述的多種粒子或本文描述的組合
物的單一劑量單位。在一些方面，本公開的特征在于一種治療患有病癥的受試者的方法，所述方法包括向所述受試者施用有效量的本文描述的粒子或本文描述的組合物。在一個實施方案中，病癥為例如人類的受試者的增生性病癥，例如癌癥，該方法包括:將包含本文描述的綴合物或粒子的組合物以有效治療病癥的量施用至受試者，從而治療增生性病癥。在一個實施方案中，組合一種或多種其它抗癌劑來施用組合物，所述抗癌劑例如，化療劑，例如，本文描述的化療劑或化療劑的組合，和輻射。在一個實施方案中，癌癥為本文描述的癌癥。例如，癌癥可為以下器官的癌癥:膀胱(包括加速和轉移性膀胱癌)、乳腺(例如，雌激素受體陽性乳腺癌；雌激素受體陰性乳腺癌；HER_2陽性乳腺癌；HER_2陰性乳腺癌；孕酮受體陽性乳腺癌；孕酮受體陰性乳腺癌；雌激素受體陰性，ffiR-2陰性并且孕酮受體陰性乳腺癌(即，三重陰性乳腺癌)；炎癥性乳腺癌)、結腸(包括結直腸癌)、腎(例如，移行細胞癌)、肝、肺(包括小細胞肺癌和非小細胞肺癌、肺腺癌以及鱗狀細胞癌)，泌尿生殖道，例如卵巢(包括輸卵管和腹膜癌)、子宮頸、前列腺、睪丸、腎以及輸尿管，淋巴系統(tǒng)、直腸、喉、胰腺(包括外分泌胰腺癌)、食道、胃、膽囊、甲狀腺、皮膚(包括鱗狀細胞癌)、大腦(包括多形性成膠質(zhì)細胞瘤)、頭和頸(例如，隱匿性原發(fā)性)，以及軟組織(例如，卡波西氏肉瘤(Kaposi’s sarcoma ;例如,AIDS相關卡波西氏肉瘤)、平滑肌肉瘤、血管肉瘤以及組織細胞瘤)。優(yōu)選的癌癥包括乳腺癌(例如，轉移性或局部晚期乳腺癌)、前列腺癌(例如，激素難治性前列腺癌)、腎細胞癌、肺癌(例如，非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌以及鱗狀細胞癌，例如，不可切除的、局部晚期或轉移性非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌以及鱗狀細胞癌)、胰腺癌、胃癌(例如，轉移性胃腺癌)、結直腸癌、直腸癌、頭和頸鱗狀細胞癌、淋巴瘤(何杰金氏淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma)或非何杰金氏淋巴瘤)、腎細胞癌 、尿道上皮癌、軟組織肉瘤(例如，卡波西氏肉瘤(例如，AIDS相關卡波西氏肉瘤)、平滑肌肉瘤、血管肉瘤以及組織細胞瘤)、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、骨髓瘤(例如，多發(fā)性骨髓瘤)、黑素瘤(例如，晚期或轉移性黑素瘤)、生殖細胞腫瘤、卵巢癌(例如，晚期卵巢癌，例如，晚期輸卵管或腹膜癌)，以及胃腸癌。在一個實施方案中，與炎癥相關的疾病或病癥是本文描述的疾病或病癥。例如，與炎癥相關的疾病或病癥可以例如為多發(fā)性硬化、類風濕性關節(jié)炎、牛皮癬性關節(jié)炎、退行性關節(jié)病、脊椎關節(jié)病(spondi loarthropathies)、痛風性關節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡、幼年型關節(jié)炎、類風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥、糖尿病(例如，胰島素依賴性糖尿病或幼年發(fā)作糖尿病)、經(jīng)痛、囊腫性纖維化、炎癥性腸病、腸易激綜合癥、克羅恩氏病(Crohn' s disease)、粘液性結腸炎、潰瘍性結腸炎、胃炎、食道炎、胰腺炎、腹膜炎、阿茲海默病(Alzheimer' s disease)、休克、強直性脊柱炎、胃炎、結膜炎、胰腺炎(pancreatis)(急性或慢性)、多器官損傷綜合癥(例如，敗血病或創(chuàng)傷繼發(fā)性的)、心肌梗塞、動脈粥樣硬化癥、中風、再灌注損傷(例如，歸因于心肺分流或腎滲析)、急性腎小球性腎炎、脈管炎、熱損傷(即，曬傷)、壞死性小腸結腸炎、粒細胞輸注相關綜合征和/或休格倫氏綜合癥(Sjogren' s syndrome)。皮膚的示例性炎癥病狀包括,例如,濕疫、特應性皮炎、接觸性皮炎、風疹、硬皮病、牛皮癬以及具有急性炎癥組分的皮膚病。
在另一個實施方案中，包含本文描述的粒子或綴合物的組合物可以用于治療或預防過敏癥和呼吸病狀，包括哮喘、支氣管炎、肺纖維化、過敏性鼻炎、氧中毒、肺氣腫、慢性支氣管炎、急性呼吸窘迫綜合征以及任何慢性阻塞性肺病(COPD)。本文描述的粒子或綴合物可以用于治療慢性肝炎感染，包括乙型肝炎和丙型肝炎。另外，包含本文描述的粒子或綴合物的組合物可以用于治療自體免疫疾病和/或與自體免疫疾病相關的炎癥，如器官-組織自體免疫疾病(例如，雷諾氏綜合征(Raynaud; s syndrome))、硬皮病、重癥肌無力、移植排斥反應、內(nèi)毒素休克、敗血癥、牛皮癬、濕疹、皮炎、多發(fā)性硬化癥、自體免疫性甲狀腺炎、葡萄膜炎、全身性紅斑狼瘡、愛迪生氏病(Addison' s disease)、自體免疫多腺疾病(也稱為自體免疫多腺綜合征)，以及格拉夫病(Grave' s disease)。在一個實施方案中，病癥與例如人類的受試者的例如心臟病的心血管疾病相關，所述方法包括:將包含本文描述的粒子或綴合物的組合物以有效治療病癥的量施用至受試者，從而治療心血管疾病。在一個實施方案中，心血管疾病為本文描述的疾病或病癥。例如，心血管疾病可以為心肌病或心肌炎；如特發(fā)性心肌病、代謝性心肌病、酒精性心肌病、藥物誘導的心肌病、缺血性心肌病以及高血壓性心肌病。還可以使用本文所述的粒子、綴合物、組合物以及方法來治療或預防主要血管的動脈粥樣化病癥(大血管疾病)，所述主要血管如主動脈、冠狀動脈、頸動脈、腦血管動脈、腎動脈、髂動脈、股動脈以及胭動脈?？梢灾委熁蝾A防的其它血管疾病包括與以下相關的那些疾病:血小板聚集、視網(wǎng)膜小動脈、腎小球小動脈、神經(jīng)滋養(yǎng)血管、心臟小動脈，以及眼睛、腎、心臟以及中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的相關毛細管血管床?？梢杂帽疚乃龅牧Ｗ印⒕Y合物、組合物以及方法治療的其它病癥包括在例如冠狀動脈介入治療之后的再狹窄，和與異常水平的高密度和低密度膽固醇有關的病癥。在一個實施方案中，將包含本文描述的粒子或綴合物的組合物施用至正經(jīng)歷或已經(jīng)經(jīng)歷血管成形術的受試者。在一個實施方案中，將包含本文描述的粒子或綴合物的組合物施用至正經(jīng)歷或已經(jīng)經(jīng)歷伴有支架放置的血管成形術的受試者。在一些實施方案中，包含本文描述的粒子或綴合物的組合物可以用作支架的撐桿或支架的涂層。在一個實施方案中，病癥與例如人類的受試者的腎相關，例如腎病癥，該方法包括:將包含本文描述的粒子或綴合物的組合物以有效治療病癥的量施用至受試者，從而治療與腎病相關的疾病或病癥。在一個實施方案中，與腎相關的疾病或病癥是本文描述的疾病或病癥。例如，與腎相關的疾病或病癥可以例如為急性腎功能衰竭、急性腎臟綜合征、止痛藥性腎病、粥狀梗塞性腎病、慢性腎功能衰竭、慢性腎炎、先天性腎病綜合征、末期腎病、古德帕斯丘綜合征(goodpasture syndrome)、間質(zhì)性腎炎、腎損害、腎感染、腎損傷、腎結石、狼瘡性腎炎、膜增生性GN1、膜增生性GN I1、膜性腎病、微小病變疾病、壞死性腎小球性腎炎、成腎細胞瘤、腎鈣質(zhì)沉著、腎原性尿崩癥、腎變性病(腎病綜合征)、多囊性腎病、鏈球菌感染后GN、返流性腎病、腎動脈栓塞、腎動脈狹窄、腎乳頭壞死、腎小管性酸中毒I型、腎小管性酸中毒II型、腎低灌注、腎靜脈血栓形成。在一些方面，本公 開的特征在于一種治療性肽或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物，所述綴合物包含共價連接至疏水性聚合物的治療性肽或蛋白質(zhì)，例如，治療性肽或蛋白質(zhì)經(jīng)由羧基末端共價連接至疏水性聚合物，治療性肽或蛋白質(zhì)經(jīng)由氨基末端共價連接至疏水性聚合物，和/或治療性肽或蛋白質(zhì)經(jīng)由氨基酸側鏈共價連接至疏水性聚合物。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)在聚合物的末端處共價連接至疏水性聚合物。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)在疏水性聚合物的骨架上共價連接至聚合物。在一些實施方案中，單一治療性肽或蛋白質(zhì)被共價連接至單一疏水性聚合物。在其它實施方案中，多種治療性肽或蛋白質(zhì)被共價連接至單一疏水性聚合物。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)被直接共價連接至疏水性聚合物(例如，經(jīng)由酰胺鍵)。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)經(jīng)由連接基共價連接至疏水性聚合物。示例性連接基包括:包含使用“點擊化學”(例如，如在W02006/115547中描述)來形成的部分的連接基，和包含酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯、肟、氨基甲酸酯、碳酸酯、甲硅烷基醚或三唑(例如，酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯或三唑)的連接基。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含多個官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如本文描述的鍵或官能團，所述鍵或官能團不直接連接至通過連接基在連接基的末端鍵聯(lián)的第一或第二部分，而是處于連接基內(nèi)部。在一些實施方案中，連接基可在生理條件下水解，連接基可在生理條件下酶促裂解，或連接基包含可以在生理條件下還原的二硫化物。在一些實施方案中，連接基不在生理條件下裂解，例如，連接基具有治療性肽或蛋白質(zhì)不需要被裂解以便具有活性的足夠長度，例如，連接基的長度為至少約20埃(例如，至少約24埃)。在一些實施方案中，疏水性聚合物具有末端羥基部分。在一些實施方案中，疏水性聚合物的羥基末端經(jīng)過修飾(例如，通過與官能部分反應)。在一些實施方案中，疏水性聚合物具有經(jīng)過封端的末端羥基部分(例如，以酰基部分封端)。在一些實施方案中，疏水性聚合物具有末端羧基部分。在一些實施方案中，疏水性聚合物的羧基末端經(jīng)過修飾(例如，通過與官能部分反應)。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物的疏水性聚合物具有一種或多種以下特性:
i)連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的疏水性聚合物為均聚物或由一種以上單體亞單元組成的聚合物；ii)連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的疏水性聚合物具有約4_15kDa (例如6_12kDa，例如8-10kDa)的重量平均分子量；iii)疏水性聚合物由第一與第二類型的單體亞單元組成，并且連接至治療性肽或蛋白質(zhì)的所述疏水性聚合物中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，約50: 50;以及iv)疏水性聚合物為PLGA。在一些方面，本公開的特征在于一種包含本文描述的多種治療性肽或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物的組合物。在一些實施方案中，組合物為藥物組合物。在一些實施方案中，組合物為反應混合物。
在一些實施方案中，組合物大致上不含未綴合的治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，組合物大致上不含具有小于約500Da的分子量的疏水性聚合物。在一些方面，本公開的特征在于一種制造本文描述的治療性肽或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物的方法，該方法包括:提供治療性肽或蛋白質(zhì)和聚合物；和使治療性肽或蛋白質(zhì)和聚合物經(jīng)受實現(xiàn)治療性肽或蛋白質(zhì)與聚合物的共價連接的條件。在一些實施方案中，該方法是在反應混合物中執(zhí)行，例如，包含單一溶劑的反應混合物或包含多種溶劑的溶劑系統(tǒng)的反應混合物(例如，多種溶劑為可混溶的，溶劑系統(tǒng)包含水和極性溶劑(例如，DMF、DMS0、丙酮或乙腈)，或溶劑系統(tǒng)為二相性的(例如，包含有機相和水相))。在一些實施方案中，聚合物被連接至不溶性基質(zhì)。
·
在一些實施方案中，所述方法包括使用“點擊化學”(例如，如W02006/115547中描述)來形成鍵。在一些實施方案中，所述方法導致形成酰胺鍵、二硫化物鍵、酯鍵和/或三唑。在一些實施方案中，疏水性聚合物具有小于約lmg/ml的水溶解性。在一些實施方案中，疏水性聚合物通過治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基末端共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，疏水性聚合物通過治療性肽或蛋白質(zhì)的羧基末端共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，疏水性聚合物通過治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基酸側鏈共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)在疏水性聚合物的末端處共價連接至聚合物。在一些實施方案中，疏水性聚合物具有羥基和/或羧酸末端。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)在疏水性聚合物的骨架上共價連接至聚合物。在一些實施方案中，單一治療性肽或蛋白質(zhì)被共價連接至單一疏水性聚合物。在其它實施方案中，多種治療性肽或蛋白質(zhì)被共價連接至單一疏水性聚合物。在一些實施方案中，該方法產(chǎn)生具有至少約80% (例如，至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約99% )的純度的治療性肽或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物。在一些實施方案中，該方法產(chǎn)生至少約IOOmg的治療性肽或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物(例如，至少約Ig)。在一些方面，本公開的特征在于一種通過本文所述的方法制造的治療性肽或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物。在一些方面，本公開的特征在于一種治療性肽或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物，該綴合物包含共價連接至親水性-疏水性聚合物的治療性肽或蛋白質(zhì)，其中親水性-疏水性聚合物包含連接至疏水性部分的親水性部分。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)被連接至親水性-疏水性聚合物的親水性部分。
在一些實施方案中，治療性肽被連接至親水性-疏水性聚合物的疏水性部分。在一些實施方案中，親水性-疏水性聚合物通過治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基末端共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)，親水性-疏水性聚合物通過治療性肽或蛋白質(zhì)的羧基末端共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)，和/或親水性-疏水性聚合物通過治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基酸側鏈共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)在聚合物的末端處共價連接至親水性-疏水性聚合物。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)在親水性-疏水性聚合物的骨架上共價連接至聚合物。在一些實施方案中，單一治療性肽或蛋白質(zhì)被共價連接至單一親水性-疏水性聚合物。在一些實施方案中，多種治療性肽或蛋白質(zhì)被共價連接至單一親水性-疏水性聚合物，例如，治療性肽或蛋白質(zhì)被連接至親水性-疏水性聚合物的親水性部分，并且治療性肽或蛋白質(zhì)被連接至親水性-疏水性聚合物的疏水性部分。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)被直接共價連接至疏水性-疏水性聚合物的疏水性部分(例如，經(jīng)由酰胺或酯鍵)。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)被直接共價連接至親水性-疏水性聚合物的親水性部分(例如，經(jīng)由酰胺或酯鍵)。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)經(jīng)由連接基共價連接至親水性-疏水性聚合物。示例性連接基包括:包含使用“點擊化學”(例如，如在W02006/115547中描述)來形成的部分的連接基，以及包含酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯、肟、氨基甲酸酯、碳酸酯、甲硅烷基醚或三唑(例如，酰胺、酯、二硫化物、硫化物、縮酮、丁二酸酯或三唑)的連接基。在一些實施方案中，連接基`包含官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含多個官能團，如可在生理條件下裂解的鍵。在一些實施方案中，連接基包含官能團，如本文描述的鍵或官能團，所述鍵或官能團不直接連接至通過連接基在連接基的末端連接的第一或第二部分，而是處于連接基內(nèi)部。在一些實施方案中，連接基可在生理條件下水解，連接基可在生理條件下酶促裂解，或連接基包含可以在生理條件下還原的二硫化物。在一些實施方案中，連接基不在生理條件下裂解，例如，連接基具有治療性肽或蛋白質(zhì)不需要被裂解以便具有活性的足夠長度，例如，連接基的長度為至少約20埃(例如，至少約24埃)。在一些實施方案中，親水性-疏水性聚合物具有一種或多種以下特性:i)未水性部分具有約l_6kDa (例如,2_6kDa)的重量平均分子量；ii)疏水性聚合物具有約4_15kDa(例如6_12kDa，8_10kDa)的重量平均分子量；iii)親水性聚合物為PEG ；iv)疏水性聚合物由第一與第二類型的單體亞單元組成，并且連接至治療性肽的疏水性聚合物中的第一與第二類型的單體亞單元的比率為約15: 85或25: 75至約75: 25或85: 15，例如，約50: 50;以及V)疏水性聚合物為PLGA。在一些實施方案中，如果親水性-疏水性聚合物的親水性部分的重量平均分子量為約l_3kDa，例如約2kDa，那么親水性部分的重量平均分子量與疏水性部分的重量平均分子量的比率在1: 3-1: 7之間，并且如果所述親水性部分的重量平均分子量為約4-6kDa，例如約5kDa，那么所述親水性部分的重量平均分子量與所述疏水性部分的重量平均分子量的比率在1: 1-1: 4之間。在一些實施方案中，親水性-疏水性聚合物的親水性部分具有約2_6kDa的重量平均分子量并且疏水性部分具有在約8-13kDa之間的重量平均分子量。在一些實施方案中，親水性-疏水性聚合物的親水性部分以甲氧基終止。在一些方面，本公開的特征在于一種包含本文描述的多種治療性肽或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物的組合物。在一些實施方案中，組合物為藥物組合物。在一些實施方案中，組合物為反應混合物。在一些實施方案中，組合物大致上不含未綴合的治療性肽。在一些實施方案中，組合物大致上不含具有小于約500Da的分子量的親水性-疏水性聚合物。在一些方面，本公開的特征在于一種制造本文描述的治療性肽或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物的方法，該方法包括: 提供治療性肽或蛋白質(zhì)和親水性-疏水性聚合物；和使治療性肽或蛋白質(zhì)和親水性-疏水性聚合物經(jīng)受實現(xiàn)治療性肽或蛋白質(zhì)與聚合物的共價連接的條件。

在一些實施方案中，該方法是在反應混合物中執(zhí)行，例如，反應混合物包含單一溶劑或反應混合物包含含有多種溶劑的溶劑系統(tǒng)(例如，多種溶劑為可混溶的，或溶劑系統(tǒng)為二相性的(例如，包含有機相和水相))。在一些實施方案中，將治療性肽、蛋白質(zhì)或親水性-疏水性聚合物中的至少一種連接至不溶性基質(zhì)，例如，將親水性-疏水性聚合物連接至不溶性基質(zhì)。在一些實施方案中，所述方法包括使用“點擊化學”(例如，如在W02006/115547中描述)來形成鍵。在一些實施方案中，所述方法導致形成酰胺鍵、二硫化物鍵、酯鍵和/或四唑。在一些實施方案中，親水性-疏水性聚合物通過治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基末端共價連接至治療性肽，親水性-疏水性聚合物通過治療性肽或蛋白質(zhì)的羧基末端共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)，和/或親水性-疏水性聚合物通過治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基酸側鏈共價連接至治療性肽或蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)在聚合物的末端處共價連接至疏水性-親水性聚合物。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)在聚合物的親水性部分上共價連接至疏水性-親水性聚合物。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)在聚合物的疏水性部分上共價連接至疏水性-親水性聚合物。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)在聚合物的骨架上共價連接至疏水性-親水性聚合物。在一些實施方案中，單一治療性肽或蛋白質(zhì)被共價連接至單一疏水性-親水性聚合物。在一些實施方案中，多種治療性肽或蛋白質(zhì)被共價連接至單一疏水性-親水性聚合物。在一些實施方案中，治療性肽或蛋白質(zhì)在聚合物的親水性部分上共價連接至疏水性-親水性聚合物，治療性肽或蛋白質(zhì)在聚合物的疏水性部分上共價連接至疏水性-親水性聚合物，和/或治療性肽或蛋白質(zhì)在聚合物的骨架上共價連接至疏水性-親水性聚合物。在一些實施方案中，該方法產(chǎn)生具有至少約80% (例如，至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約99% )的純度的治療性肽或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物。在一些實施方案中，該方法產(chǎn)生至少約IOOmg的治療性肽或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物(例如，至少約Ig)。在一些方面，本公開的特征在于一種通過本文所述的方法制造的治療性肽或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物。另一方面，本發(fā)明的特征在于一種儲存綴合物、粒子或組合物的方法，所述方法包括:提供安置于容器(例如，氣密或液密性容器，例如，本文描述的容器，例如，具有惰性氣體的容器，例如，頂部空間填充氬氣或氮氣)中的所述綴合物、粒子或組合物；儲存所述綴合物、粒子或組合物，例如，在預先選擇的條件下，例如，溫度，例如，本文描述的溫度；以及，將所述容器移至第二位置或從所述容器移出所述綴合物、粒子或組合物的全部或等分部分。在一個實施方案中，針對例如治療性肽或蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性或活性，例如顏色、凝集、流動或傾倒能力或粒徑或電荷的物理特性來評估綴合物、粒子或組合物。評估可以與標準相比，并且任選地，響應于所 述標準，將綴合物、粒子或組合物分類。在一個實施方案中，綴合物、粒子或組合物是以復原制劑形式(例如，在液體狀態(tài)下以溶液或懸浮液形式)來儲存。在一方面，在上述任何方面和實施方案中，可以使用蛋白質(zhì)而非治療性肽。本文所用的“蛋白質(zhì)”具有超過100個氨基酸或更多個氨基酸，例如，蛋白質(zhì)為至少110個氨基酸的長。附圖簡述

圖1A-C描述可以用于連接本文描述的部分的示例性連接基。發(fā)明詳述本發(fā)明的應用不限于以下描述中所示的或附圖中示出的組分的構造和配置的細節(jié)。本發(fā)明有其它實施方案的可能性并且能夠以不同方式實施或進行。而且，本文使用的措辭和術語是出于描述的目的并且不應視為具有限制性。本文中“包括(including) ”、“包含(comprising) ” 或“具有(having) ”、“含有(containing) ”、“涉及(involving) ” 以及其變化形式的使用是意指包括在其之后列舉的項及其等同物以及其它項。本文描述了粒子、綴合物(例如，治療性肽-聚合物綴合物，和蛋白質(zhì)-聚合物綴合物)以及組合物。還公開了含有綴合物、粒子以及組合物的劑型；使用綴合物、粒子以及組合物(例如，用于治療病癥)的方法；包含綴合物、粒子以及組合物的試劑盒；制造綴合物、粒子以及組合物的方法；儲存綴合物、粒子以及組合物的方法；以及分析綴合物、粒子以及組合物的方法。呈現(xiàn)標題和其它標識符(例如，(a)、(b)、⑴等)僅是為了便于閱讀本說明書和權利要求書。本說明書和權利要求書中標題和其它標識符的使用并不要求步驟或要素是以字母或數(shù)字順序或以他們出現(xiàn)的順序進行。定義除非如另外指明，否則本文使用的術語“環(huán)境條件”是指在約一個大氣壓、50%相對濕度和約25°C下的周圍條件。術語“陰離子部分”是指在至少一種以下條件下具有小于3、2、1或0的pKa和/或負電荷的部分:產(chǎn)生本文描述的粒子期間，在配制成本文描述的粒子時，或在將本文描述的粒子施用至受試者之后，例如，在受試者體內(nèi)循環(huán)時和/或在處于內(nèi)含體中時。陰離子部分包括聚合物質(zhì)，如具有一個以上電荷的部分。術語“陰離子聚合物”是指例如，在配制成本文描述的粒子時具有多個負電荷(即，在至少I種如上所述的條件下為至少2個)的陰離子部分。在一些實施方案中，陰離子聚合物具有至少3、4、5、10、15或20個負電荷。本文所用的關于第一部分與第二部分的關系的術語“連接”(例如，治療性肽連接至聚合物)是指第一部分與第二部分之間形成共價鍵。在相同上下文中，名詞“連接(attachment) ”是指第一與第二部分之間的共價鍵。例如，連接至聚合物的治療性肽是共價鍵合至聚合物(例如，本文描述的疏水性聚合物)的治療性肽。連接可以是直接連接，例如，通過第一部分與第二部分的直接鍵，或可以是通過連接基(例如，通過安置于第一和第二部分之間的一個或多個原子的共價連接鏈)。例如，當連接是通過連接基時，第一部分(例如，藥物)共價鍵合至連接基，所述連接基進而共價鍵合至第二部分(例如，本文描述的疏水性聚合物)。術語“生物可降解的”包括意欲在使用期間降解的聚合物、組合物以及制劑，如本文所描述者。生物可降解聚合物通常不同于非生物可降解聚合物，在于前者可以在使用期間降解。在某些實施方案中，此類使用涉及活體內(nèi)使用，如活體內(nèi)療法，并且在其它某些實施方案中，此類使用涉及活體外使用。一般而言，可歸因于生物可降解性的降解涉及生物可降解聚合物降解成它的組分亞單位，或聚合物消化(例如，通過生化過程)成更小的非聚合物亞單位。在某些實施方案中，通?？梢澡b定兩種不同類型的生物降解。例如，一種類型的生物降解可能涉及聚合物主鏈中的鍵(無論是共價或其它形式)的裂解。在這類生物降解中，通常產(chǎn)生單體和寡聚物，并且甚至更通常，這類生物降解通過連接聚合物的一個或多個亞單位的鍵的裂解而發(fā)生。相比之下，另一類型的生物降解可能涉及側鏈的內(nèi)部或?qū)孺溸B接至聚合物主鏈的鍵(無論是共價或其它形式)的裂解。在某些實施方案中，一種或另一種或兩種一般類型的生物降解可以在聚合物使用期間發(fā)生。本文所用的術語“生物降解”包括以上描述的生物降解的兩種一般類型?？缮锝到獾木酆衔锏慕到馑俾式?jīng)常部分地取決于多種因素，包括造成任何降解的鍵的化學性質(zhì)(identity)、分子量、結晶性、生物穩(wěn)定性以及此類聚合物的交聯(lián)度、聚合物的物理特性(例如，形狀和大小)、聚合物或粒子的組裝以及施用的方式和位置。例如，更大的分子量、更高的結晶度、和/或更高的生物穩(wěn)定性通常導致更慢的生物降解。術語“陽離子部分”是指在至少一種以下條件下具有PKa5或更大(例如，具有5或更大的PKa的路易斯堿)和/或正電荷的部分:在制備本文描述的粒子期間，當被配制成本文描述的粒子時，或在將本 文描述的粒子施用至受試者之后，例如，當在受試者體內(nèi)循環(huán)和/或在內(nèi)體中時。示例性陽離子部分包括含胺部分(例如，帶電荷的胺部分如季胺)、含胍部分(例如，帶電荷的胍如胍陽離子部分)以及雜環(huán)和/或雜芳香族部分(例如，帶電荷的部分如吡啶鎗或組氨酸部分)。陽離子部分包括聚合物質(zhì)，如具有多于一個電荷的部分，例如，由部分的重復存在所促成，(例如，陽離子PVA和/或聚胺)。陽離子部分還包括兩性離子，意指同時具有正電荷和負電荷的化合物(例如，氨基酸如精氨酸、賴氨酸或組氨酸)。術語“陽離子聚合物”，例如聚胺，是指例如，在配制成本文描述的粒子時具有多個正電荷(即，在至少I種如上所述的條件下為至少2個)的聚合物(術語“聚合物”在以下進行描述)。在一些實施方案中，陽離子聚合物，例如聚胺，具有至少3、4、5、10、15、或20個正電荷。措辭“可在生理條件下裂解”是指當經(jīng)受生理條件時具有小于約50或小于約100小時的半衰期的鍵。例如，酶促降解可以在暴露于生理條件(例如，PH為約4至8的水溶液和約25°C至約37°C的溫度)后短于約五年、一年、六個月、三個月、一個月、十五天、五天、三天或一天的一段時間內(nèi)發(fā)生?！坝行Я俊被颉坝行У?.....的量”是指在以單個或多個劑量施用至受試者后有
效治療細胞，或治愈、減輕、緩解或改善病癥的癥狀的治療性肽-聚合物綴合物、粒子或組合物的量。治療性肽-聚合物綴合物、粒子或組合物的有效量可以根據(jù)如個體的疾病狀況、年齡、性別以及體重，以及化合物在個體體內(nèi)引起所需反應的能力的因素而變化。有效量還是治療性肽-聚合物綴合物、粒子或組合物的任何有毒或有害作用被治療有利效果超過的量。本文所用的術語“包埋”是指通過在第一部分與第二部分、例如治療性肽與聚合物(例如，治療或診斷劑與疏水性聚合物)之間形成非共價相互作用將第一部分與第二部分安置在一起或?qū)⒌谝徊糠职仓迷诘诙糠謨?nèi)部。在一個實施方案中，在提及包埋于粒子中的部分時，這個部分(例如，治療性肽或抗衡離子)通過一種或多種非共價相互作用與聚合物或粒子的其它組分締合，所述`非共價相互作用如范德瓦相互作用(van der Waalsinteractions)、疏水性相互作用、氫鍵合、偶極-偶極相互作用、離子相互作用、疊加(pistacking),并且在所述部分與聚合物或粒子的其它組分之間缺失共價鍵。包埋部分可以被包埋它的聚合物或粒子完全或部分地包圍。本文所用的術語“疏水性”描述可以在生理離子強度下僅以小于約0.05mg/mL(如，約0.01mg/mL或更小)的程度溶解于水溶液中的部分。本文所用的術語“親水性”描述在生理離子強度下在水溶液中具有至少約0.05mg/mL或更大的溶解度的部分。本文所用的術語“親水性-疏水性聚合物”描述包含連接至疏水性部分的親水性部分的聚合物。示例性親水性-疏水性聚合物包括嵌段共聚物，所述嵌段共聚物例如包含親水性聚合物的嵌段和疏水性聚合物的嵌段。本文所用的“羥基保護基”是本領域中熟知的并且包括在Protecting Groups inOrganic Synthesis, T.ff.Greene 和 P.G.M.Wuts,第三版,John ffiley&Sons, 1999 中詳細描述的那些保護基，所述文獻的全部以引用的方式并入本文。適合的羥基保護基包括例如?；?例如，乙?；?、三乙基甲硅烷基(TES)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)、2，2，2-三氯乙氧基羰基(Troc)以及節(jié)氧羰基(Cbz)。
本文所用的“惰性氛圍”是指主要由惰性氣體構成的氛圍，所述惰性氣體不與本文描述的聚合物-試劑綴合物、粒子、組合物或混合物化學反應。惰性氣體的實例是氮氣(N2)、氦氣以及氬氣。本文所用的“連接基”是將兩個或更多個部分(例如，治療性肽或抗衡離子與聚合物，如疏水性或親水性-疏水性、或親水性聚合物)連接在一起的部分。連接基具有至少兩個官能團。例如，具有兩個官能團的連接基可以具有能夠與如以下的部分上的官能團反應的第一官能團:治療性肽、抗衡離子、如聚合物的疏水性部分，或本文描述的親水性-疏水性聚合物；和能夠與如以下的第二部分上的官能團反應的第二官能團:治療性肽、抗衡離子、如聚合物的疏水性部分，或本文描述的親水性-疏水性聚合物。連接基可以具有多于兩個官能團(例如，3、4、5、6、7、8、9、10或更多個官能團)，所述官能團可以用于例如將多個試劑連接至一個聚合物或用于在連接基內(nèi)提供生物可裂解部分。在一些實施方案中，例如，當連接基具有多于兩個官能團，例如，并且連接基除將第一部分連接至第二部分的兩個官能團之外還包括官能團時，所述額外官能團(例如，第三官能團)可以被安置于第一與第二基團之間，并且在一些實施方案中，例如在生理條件下可以裂解。例如，連接基可以具有以下形式:
權利要求
1.一種粒子，其包含: a)多種疏水性聚合物； b)多種親水性-疏水性聚合物；以及 c)多種治療性肽或蛋白質(zhì)，其中所述多種治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分被共價連接至a)的疏水性聚合物或b)的親水性-疏水性聚合物中的任一種。
2.如權利要求1所述的粒子，其中a)的所述疏水性聚合物的至少一部分未共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)。
3.如權利要求1至2中任一項所述的粒子，其中a)的所述疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)。
4.如權利要求1至3中任一項所述的粒子，其中c)的所述治療性肽或蛋白質(zhì)的所述至少一部分經(jīng)由連接基共價連接至所述疏水性聚合物。
5.如權利要求1至4中任一項所述的粒子，其中a)的所述疏水性聚合物的至少一部分通過所述治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基酸側鏈共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分。
6.如權利要求1至5中任一項所述的粒子，其中b)的所述親水性-疏水性聚合物的至少一部分被共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)。
7.如權利要求1至6中任一項所述的粒子，其中b)的親水性-疏水性聚合物的至少一部分被直接共價連接至c)的治療性肽或蛋白質(zhì)。
8.如權利要求1至7中任一項所述的粒子，其中c)的所述治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分經(jīng)由連接基共價連接至b)的親水性-疏水性聚合物。
9.如權利要求1至8中任一項所述的粒子，其中b)的所述親水性-疏水性聚合物的至少一部分通過所述治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基酸側鏈共價連接至c)的所述治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分。
10.如權利要求1至9中任一項所述的粒子，其中所述粒子進一步包含多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)，其中所述其它治療性肽或蛋白質(zhì)不同于c)的所述治療性肽或蛋白質(zhì)。
11.如權利要求1至10中任一項所述的粒子，其中所述多種其它治療性肽或蛋白質(zhì)的至少一部分被連接至a)的所述疏水性聚合物和/或b)的所述親水性-疏水性聚合物的至少一部分。
12.如權利要求1至11中任一項所述的粒子，其進一步包含抗衡離子。
13.—種粒子，其包含: a)任選地多種疏水性聚合物； b)多種親水性-疏水性聚合物-綴合物，其中所述親水性-疏水性聚合物綴合物包含連接至帶電荷的肽或帶電荷的蛋白質(zhì)的親水性-疏水性聚合物；以及 c)多種帶電荷的治療性肽或帶電荷的蛋白質(zhì)，其中所述治療性肽或蛋白質(zhì)的電荷與綴合至所述親水性-疏水性聚合物的所述肽或蛋白質(zhì)的電荷相反，并且其中所述帶電荷的治療性肽或蛋白質(zhì)與所述親水性-疏水性聚合物-綴合物的所述帶電荷的肽或所述帶電荷的蛋白質(zhì)形成非共價鍵(例如，離子鍵)。
14.如權利要求13所述的粒子，其中所述粒子大致上不含疏水性聚合物。
15.如權利要求13或14所述的粒子，其中b)的所述綴合物的所述疏水性-親水性聚合物經(jīng)由連接基共價連接至所述帶電荷的肽。
16.如權利要求1至15中任一項所述的粒子，其中a)的所述疏水性聚合物的至少一部分為乳酸與乙醇酸的共聚物(即PLGA)。
17.如權利要求16所述的粒子，其中a)的所述疏水性聚合物的一部分為乳酸與乙醇酸的比率為約50: 50的PLGA。
18.如權利要求1至17中任一項所述的粒子，其中b)的親水性-疏水性聚合物的疏水性部分包含乳酸與乙醇酸的共聚物(即PLGA)。
19.如權利要求18所述的粒子，其中b)的所述親水性-疏水性聚合物的疏水性部分包含乳酸與乙醇酸的比率為約50: 50的PLGA。
20.如權利要求1至19中任一項所述的粒子，其中b)的親水性-疏水性聚合物的親水性部分包含PEG。
21.如權利要求1至20中任一項所述的粒子，其中所述治療性肽包含約2至約60個氨基酸殘基。
22.如權利要求1至21中任一項所述的粒子，其中所述治療性肽或蛋白質(zhì)選自本文所述的治療性肽或蛋白質(zhì)。
23.如權利要求1至22中任一項所述的粒子，其進一步包含表面活性劑。
24.如權利要求1至23中任一項所述的粒子，其中所述粒子的直徑小于約200nm(例如小于約150nm)。
25.如權利要求1至24中任一項所述的粒子，其中所述粒子的(電位為約-20至約+20mV (例如約-5至約+5mV)。
26.—種粒子，其包含: a)多種疏水性聚合物； b)多種親水性-疏水性聚合物；以及 c)蛋白質(zhì)，其中所述蛋白質(zhì)被共價連接至a)的疏水性聚合物或b)的親水性-疏水性聚合物。
27.一種組合物，其包含如前述權利要求中任一項所述的多種粒子。
28.—種試劑盒，其包含如前述權利要求中任一項所述的多種粒子或如前述權利要求中任一項所述的組合物。
29.—種單一劑量單位，其包含如前述權利要求中任一項所述的多種粒子或如前述權利要求中任一項所述的組合物。
30.一種治療患有病癥的受試者的方法，其包括向所述受試者施用有效量的如前述權利要求中任一項所述的粒子或如前述權利要求中任一項所述的組合物。
31.一種治療性肽-疏水性聚合物綴合物，其包含共價連接至疏水性聚合物的治療性肽；或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物，包含共價連接至疏水性聚合物的蛋白質(zhì)。
32.如權利要求31所述的治療性肽-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物，其中所述治療性肽或蛋白質(zhì)經(jīng)由所述治療性肽或蛋白質(zhì)的羧基末端共價連接至所述疏水性聚合物。
33.如權利要求31所述的治療性肽-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物，其中所述治療性肽或蛋白質(zhì)經(jīng)由所述治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基末端共價連接至所述疏水性聚合物。
34.如權利要求31所述的治療性肽-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物，其中所述治療性肽或蛋白質(zhì)經(jīng)由所述治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基酸側鏈共價連接至所述疏水性聚合物。
35.如權利要求31至34中任一項所述的治療性肽-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物，其中所述治療性肽或蛋白質(zhì)在所述聚合物的末端處共價連接至所述疏水性聚合物。
36.如權利要求31至34中任一項所述的治療性肽-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物，其中所述治療性肽或蛋白質(zhì)沿著所述疏水性聚合物的骨架共價連接至所述聚合物。
37.如權利要求31至36中任一項所述的治療性肽-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物，其中所述治療性肽或蛋白質(zhì)經(jīng)由連接基共價連接至所述疏水性聚合物。
38.一種組合物，其包含如權利要求31至37中任一項所述的多種治療性肽-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物。
39.一種制造如權利要求31所述的治療性肽-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-疏水性聚合物綴合物的方法，所述方法包括: 提供治療性肽或蛋白質(zhì)和聚合物；和 使所述治療性肽或蛋白質(zhì)和聚合物經(jīng)受實現(xiàn)所述治療性肽或蛋白質(zhì)與所述聚合物的共價連接的條件。
40.一種治療性肽 -親水性-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物，包含共價連接至親水性-疏水性聚合物的治療性肽或蛋白質(zhì)，其中所述親水性-疏水性聚合物包含連接至疏水性部分的親水性部分。
41.如權利要求40所述的治療性肽-親水性-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物，其中所述治療性肽或蛋白質(zhì)被連接至所述親水性-疏水性聚合物的親水性部分。
42.如權利要求40所述的治療性肽-親水性-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物，其中所述治療性肽或蛋白質(zhì)被連接至所述親水性-疏水性聚合物的疏水性部分。
43.如權利要求40至42中任一項所述的治療性肽-親水性-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物,其中所述親水性-疏水性聚合物通過所述治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基末端共價連接至所述治療性肽或蛋白質(zhì)。
44.如權利要求40至42中任一項所述的治療性肽-親水性-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物,其中所述親水性-疏水性聚合物通過所述治療性肽或蛋白質(zhì)的羧基末端共價連接至所述治療性肽或蛋白質(zhì)。
45.如權利要求40至42中任一項所述的治療性肽-親水性-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物,其中所述親水性-疏水性聚合物通過所述治療性肽或蛋白質(zhì)的氨基酸側鏈共價連接至所述治療性肽或蛋白質(zhì)。
46.如權利要求40至45中任一項所述的治療性肽-親水性-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物，其中所述治療性肽或蛋白質(zhì)經(jīng)由連接基連接至所述親水性-疏水性聚合物。
47.一種組合物，包含如權利要求40至46中任一項所述的多種治療性肽-親水性-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物。
48.一種制造如權利要求40所述的治療性肽-親水性-疏水性聚合物綴合物或蛋白質(zhì)-親水性-疏水性聚合物綴合物的方法，所述方法包括: 提供治療性肽或蛋白質(zhì)和親水性-疏水性聚合物；和 使所述治療性肽或蛋白質(zhì)和親水性-疏水性聚合物經(jīng)受實現(xiàn)所述治療性肽或蛋白質(zhì)與所述聚合物的共價連接的條件。
49.一種儲存如權利要求31至37或40至46中任一項所述的綴合物、如權利要求1至26中任一項所述的粒子或如權利要求27、38或47中任一項所述的組合物的方法，所述方法包括: (a)提供安置于容器中的所述綴合物、粒子或組合物； (b)儲存所述綴合物、粒子或組合物；以及 (c)將所述容器移動至第二位置或從所述容器移出所述綴合物、粒子或組合物的全部或等分部分。
50.如權利要求49所述的方法，其中所儲存的綴合物、粒子或組合物為復原制劑。
全文摘要
本文描述綴合物(例如，治療性肽-聚合物綴合物和蛋白質(zhì)-聚合物綴合物)和粒子，所述綴合物和粒子可以用于(例如)治療如癌癥的病癥。本文還描述含有所述粒子的混合物、組合物和劑型，使用所述粒子(例如，用于治療病癥)的方法，包含所述綴合物(例如，治療性肽-聚合物綴合物和蛋白質(zhì)-聚合物綴合物)和粒子的試劑盒，制造所述綴合物(例如，治療性肽-聚合物綴合物和蛋白質(zhì)-聚合物綴合物)和粒子的方法，儲存所述粒子的方法，以及分析所述粒子的方法。
文檔編號A61K9/14GK103079546SQ201180040374
公開日2013年5月1日 申請日期2011年8月18日 優(yōu)先權日2010年8月20日
發(fā)明者O·S·費策, J·黃, P·利姆索, P-S·額, S·斯文松 申請人:天藍制藥公司