專利名稱：用微小rna調(diào)節(jié)劑治療皮膚的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般涉及改善人皮膚的美容外觀和健康的方法，并且還涉及用于鑒定對于治療皮膚有用的化合物的方法。特別地，本發(fā)明涉及減少特定微小RNAs的水平的化合物，所述特定微小RNAs抑制皮膚細胞中的膠原、彈性蛋白和/或微纖維蛋白表達。
背景技術(shù)：
消費者對減輕或延遲老化的皮膚病學(xué)體征和由真皮表皮結(jié)合部和表皮中的細胞間凝聚的進行性降解引起的相關(guān)狀況感興趣，所述體征例如細紋、皺紋和下垂皮膚。年代老化、激素老化和光老化各自涉及降解皮膚的三個主要蛋白質(zhì)組分的過程:膠原、彈性蛋白和微纖維蛋白。膠原是身體的主要結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)，其支持組織和器官且使這些結(jié)構(gòu)與骨連接。膠原在提供圍繞細胞的結(jié)構(gòu)支架中起關(guān)鍵作用，所述結(jié)構(gòu)支架幫助支持細胞形狀和分化。彈性蛋白是給予皮膚伸展和隨后很快恢復(fù)至其原始狀態(tài)的能力的蛋白質(zhì)。微纖維蛋白是在結(jié)締組織中發(fā)現(xiàn)的彈性纖維形成必需的糖蛋白。微纖維蛋白分泌到細胞外基質(zhì)內(nèi)且變得摻入不溶性微纖絲內(nèi)，所述不溶性微纖絲看起來提供用于彈性蛋白沉積的支架。膠原、彈性蛋白和微纖維蛋白通過成纖維細胞產(chǎn)生，所述成纖維細胞是位于真皮中特化的皮膚細胞。膠原、彈性蛋白和微纖維蛋白的刺 激可以改善皮膚的健康和外觀，因為皮膚老化一般與這些蛋白質(zhì)的喪失相關(guān)。本領(lǐng)域存在延緩皮膚老化且補救皮膚老化效應(yīng)的組合物的需要。微小RNAs CmiRNAs)是短核糖核酸(RNA)分子，平均起來僅長約22個核苷酸且在所有真核細胞中發(fā)現(xiàn)。miRNAs被認為是與靶信使RNA轉(zhuǎn)錄物(mRNAs)上的互補序列結(jié)合的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控物，通常導(dǎo)致翻譯阻遏和基因沉默。如果在miRNA和靶mRNA序列之間存在完全互補，那么mRNA可以被切割，導(dǎo)致直接mRNA降解。然而，如果不存在完全互補，那么沉默通過阻止翻譯來達到。已估計人基因組編碼超過1000種miRNAs，其可以靶向約60%哺乳動物基因且在許多人細胞類型中豐富。然而，迄今為止，改善皮膚外觀且對抗老化體征的努力仍未集中于微小RNAs的作用。因此本發(fā)明的目的是提供用于治療、改善、抑制和/或阻止老化的皮膚病學(xué)體征的組合物和方法。本發(fā)明的另一個目的是提供通過調(diào)節(jié)微小RNAs水平用于治療、改善、抑制和/或阻止老化的皮膚病學(xué)體征的組合物和方法，所述微小RNAs與皮膚細胞中的膠原、彈性蛋白和/或微纖維蛋白表達相關(guān)。本發(fā)明的進一步目的是提供基于調(diào)節(jié)與皮膚細胞中的膠原、彈性蛋白和/或微纖維蛋白表達相關(guān)的微小RNAs水平的能力，用于鑒定對于治療、改善、抑制和/或阻止老化的皮膚病學(xué)體征有用的化合物的方法。
前述討論僅呈現(xiàn)為提供本領(lǐng)域面臨問題的性質(zhì)的更佳理解并且不應(yīng)以任何方式解釋為關(guān)于現(xiàn)有技術(shù)的承認。發(fā)明概述依照前述目的及其他，已驚訝地發(fā)現(xiàn)特定微小RNAs是皮膚細胞中的膠原、彈性蛋白和/或微纖維蛋白表達的負調(diào)控物。因此提供了用于改善人皮膚的美容外觀的方法，其包括將在化妝品可接受的媒介物中的有效量的物質(zhì)局部應(yīng)用于有此需要的皮膚區(qū)域足以增強皮膚中的膠原、彈性蛋白和/或微纖維蛋白生產(chǎn)的時間，所述物質(zhì)優(yōu)選通過減少微小RNA-29a (miR-29a)和/或微小RNA_28b (miR-29b)的細胞水平來調(diào)節(jié)微小RNA_29a(miR-29a)和 / 或微小 RNA_28b (miR_29b)。如下所示，miR_29a 包含 SEQ.1D.N0.:1 的核酸序列，并且miR-29b包含SEQ.1D.N0.:2的序列。UAGCACCAUCUGAAAUCGGUUA (SEQ.1D.N0.:1)UAGCACCAUUUGAAAUCAGUGUU (SEQ.1D.N0.:2)在各種實施方案中，該方法可以必須伴有抑制皮膚細胞中的miR_29a水平，抑制皮膚細胞中的miR-29b水平，或抑制皮膚細胞中的miR-29a和miR_29b水平?？紤]皮膚細胞中miR-29a和miR_29b的抑制將提供增強皮膚中的膠原、彈性蛋白和/或微纖維蛋白表達中的協(xié)同利益。在一個方面，適合于調(diào)節(jié)miR_29a和/或miR_29b水平的化合物可以具有式I的
結(jié)構(gòu):
權(quán)利要求
1.一種用于改善人皮膚的美容外觀的方法，其包括將在化妝品可接受的媒介物中的有效量的活性劑局部應(yīng)用于有此需要的皮膚區(qū)域足以增強所述皮膚中的膠原、彈性蛋白和/或微纖維蛋白生產(chǎn)的時間，所述活性劑抑制miR-29a，具有序列UAGCACCAUCUGAAAUCGGUUA(SEQ.1D.N0.:1)，和 / 或 miR-29b，具有序列 UAGCACCAUUUGAAAUCA⑶⑶U (SEQ.1D N0.:2)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述活性劑抑制miR-29a。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述活性劑抑制miR-29b。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述活性劑抑制miR-29a和miR_29b。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其中所述活性劑是具有式I的結(jié)構(gòu)的化合物:
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中％、R2、R3、R4和R6獨立地是氫或基團-R，其中R選自烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基和烷芳基，各自任選由選自鹵素、O、N和S的1-12個雜原子取代。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中R2,RjPR4獨立地是基團-R，其中R是形式-(CH2)a-(CR*=CR*)b- (CH2)c-X2- (CH2)x- (CR*=CR*)y- (CH2) z - X3 的基團；其中 a、b、c、x、y和z獨立地是0-5的整數(shù)，并且X2代表鍵或二價基團或選自-0-、-S-、-C(=0)-、-N(Rn) -、- C (=0) O -、- OC (=0) -、- C (=0) - N (Rn) -、- N (Rn) - C (=0)-的原子，并且X3代表氫、X1或砂。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中R1和R6是氫。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中R2是形式-(CH2)a-X2-(CH2)x-CH3的基團。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中R3是形式-CH=CH-R*的基團，其中R*是芳基基團。
11.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中R4是形式-(CH2)a-R*的基團，其中R*是芳基基團。
12.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中R5是氫。
13.根據(jù)權(quán)利要求 8的方法，其中所述活性劑是具有下式的化合物:
14.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物具有式II的結(jié)構(gòu):
15.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中R7和R8獨立地是基團-R，其中R是形式-(CH2)a-(CR*=CR*)b- (CH2)c-X2- (CH2)x- (CR*=CR*)y- (CH2) z - X3 的基團；其中 a、b、c、x、y和z獨立地是0-5的整數(shù)，并且X2代表鍵或二價基團或選自-0-、-S-、-C(=0)-、-N(Rn) -、- C (=0) O -、- OC (=0) -、- C (=0) - N (Rn) -、- N (Rn) - C (=0)-的原子，并且X3代表氫、X1或R* ;其中R*是任選由基團X1和/或選自氧、氮和硫的一至十二個雜原子取代的C1J烴基團。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中RN、RdPR8獨立地是基團-R，其中R選自烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基和烷芳基，各自任選由選自鹵素、O、N和S的1-12個雜原子取代。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中所述化合物具有下式:
18.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述皮膚的所述美容改善選自: (a)細紋或皺紋的治療、減少和/或預(yù)防， (b)皮膚毛孔大小的減少， (C)皮膚厚度、豐滿度和/或緊固度的改善； Cd)皮膚柔度和/或柔軟性的改善； Ce)皮膚色調(diào)、光亮度和/或澄清度的改善； Cf)彈性蛋白的維持和重塑的改善； (g)皮膚肌理的改善和/或重組構(gòu)化的促進；(h)皮膚屏障修復(fù)和/或功能的改善； (i)皮膚輪廓外觀的改善； (j)皮膚光澤和/或亮度的恢復(fù)； (k)通過絕經(jīng)減少的皮膚外觀的改善； (I)皮膚保濕的改善； (m)皮膚彈力和/或彈性的增加； (n)皮膚下垂的治療、減少和/或預(yù)防；或 (O)色素斑點的減少。
19.一種用于鑒定對于改善皮膚的美容外觀有用的活性劑的方法，其包括就抑制或下調(diào)細胞中的miR-29a和/或miR_29b的能力測定候選物質(zhì)。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中所述測定步驟包括使人真皮成纖維細胞與所述候選物質(zhì)一起溫育，且隨后測量miR-29a和/或miR_29b的水平。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中所述測量步驟通過qRT-PCR進行。
22.一種通過增加皮膚中的膠原、彈性蛋白和/或微纖維蛋白生產(chǎn)用于改善皮膚的美容外觀的方法，所述方法包括將有效量的抑制miR-29a和/或miR_29b的活性劑局部應(yīng)用于有此需要的皮膚區(qū)域，其中所述活性劑通過測定物質(zhì)抑制細胞中的miR-29a和/或miR-29b表達的能力的測定進行鑒定。
23.一種通過刺激選自膠原、彈性蛋白、微纖維蛋白及其組合的細胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)來改善老化皮膚的外觀的方法，其包括將在局部可接受的媒介物中的有效量的抑制miR-29a和/或miR-29b的活性劑局部應(yīng)用于需要此類刺激的皮膚。
24.根據(jù)權(quán)利要求23的方法，其中所述活性劑是具有下式的化合物:
25.根據(jù)權(quán)利要求23的方法，其中所述化合物具有下式:
全文摘要
提供了用于預(yù)防、改善或減少老化的皮膚病學(xué)體征的方法，其采用抑制或下調(diào)真皮成纖維細胞中的微小RNA表達的活性劑，導(dǎo)致皮膚中的膠原、彈性蛋白和/或微纖維蛋白的增強生產(chǎn)。還提供的是用于篩選針對特定微小RNAs的活性的方法和使用通過皮膚治療中的篩選方案鑒定的活性劑的方法。
文檔編號A61K31/17GK103249409SQ201180058494
公開日2013年8月14日 申請日期2011年11月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月28日
發(fā)明者P·R·庫塞爾, U·三沙那姆, J·W·萊加 申請人:雅芳產(chǎn)品公司