專利名稱：黃酮類化合物wx-03用于舒張血管平滑肌的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及黃酮類化合物WX-03用于舒張血管平滑肌的用途。
背景技術(shù)：
近年來，抗高血壓藥物的研究發(fā)展迅速，特別是3受體阻滯劑、鈣拮抗劑和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑等新型降壓藥的問世，從根本上改變了高血壓藥物治療的面貌。高血壓發(fā)病率高，可以造成靶器官的損害，出現(xiàn)腦卒中、心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、腎功能衰竭等嚴重合并癥，目前各類降壓藥均有不同程度的不良反應(yīng)。因此，如果能找到一種選擇性比較強、不良反應(yīng)較少的降壓藥物，應(yīng)用前景會更好。黃酮類化合物WX-03的化學(xué)名稱是7-[2_( 二甲氨基)乙氧基]黃酮，至今未見有 關(guān)WX-03舒張血管平滑肌作用的報道。申請者經(jīng)多方面實驗篩選，首次發(fā)現(xiàn)該化合物具有舒張血管平滑肌作用。

發(fā)明內(nèi)容
黃酮類化合物WX-03的化學(xué)名稱是7-[2-( 二甲氨基)乙氧基]黃酮，具體合成方法如
下
將I. 12 g (5 mmol) 7-輕基黃酮、0. 72 g (5 mmol) b_氯乙基二甲胺鹽酸鹽、0. 83 g(5mmol)碘化鉀、6. 66 g(0. 05 mol)無水碳酸鉀、20 mL干燥丙酮,加熱回流16 h,冷卻,過濾，蒸除丙酮，硅膠柱層析分離得到白色固體，收率68. 7%。HR-MS (m/z) :310. 1433( [M+H]+)，641. 2607 ([2M+Na]+)；
IR (KBr, cm-1) :3068, 2942，2820，1634，1573，1448，1379，1250，1129，845 ；1HMffi(CDCl3)-S 2. 39 (6H, s)，2. 82 (2H, m)，4. 20 (2H, t)，6. 77 (1H, s)，6. 99 (1H, m), 7.03(1H, d, ^8. 4Hz), 7. 51-7. 55 (3H, m)，7.91(2 m)，8. 13 (1H, d,/=8. 4Hz)。本發(fā)明是關(guān)于黃酮類化合物WX-03舒張血管平滑肌的用途。血管平滑肌強烈收縮致痙攣可引起多種疾病，如高血壓及其帶來的多種并發(fā)癥，所以研究血管平滑肌舒張藥有很大的現(xiàn)實意義。對治療高血壓從而減少對靶器官的損害，降低腦卒中、心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、腎功能衰竭等嚴重合并癥等疾病的發(fā)病率均有指導(dǎo)意義和參考價值。我們的研究表明WX_03能夠降低家兔離體血管平滑肌的張力，可舒張由致痙劑去甲腎上腺素、氯化鉀引起的血管平滑肌收縮，WX-03舒張血管作用可能與ATP敏感性鉀通道無關(guān)；WX-03舒張血管作用與抑制鈣通有關(guān)。其最小起效濃度是3X 10_5mol/L。


圖I為WX-03對致痙劑去甲腎上腺素誘導(dǎo)收縮的家兔離體血管平滑肌舒張作用的量效曲線(n=6)；
圖2為WX-03對致痙劑高鉀液誘導(dǎo)收縮的家兔離體血管平滑肌舒張作用的量效曲線(n=6)；
圖3為格列苯脲孵育前后WX-03舒張由去甲腎上腺素誘導(dǎo)收縮的家兔離體血管平滑肌量效曲線(n=6)；圖4為格列苯脲孵育前后WX-03舒張由高鉀液誘導(dǎo)收縮的家兔離體血平滑肌量效曲線(n=6)。
具體實施例方式 實驗材料 I.動物
新西蘭兔，雌雄兼用，體重2. 0 2. 5kg，沈陽藥科大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號scxk (遼)2009-0002。2.儀器
HSS-I (B)型恒溫浴槽、RM6240B型多道生理信號采集處理系統(tǒng)、JZJOl型肌肉張力換能器、TG-328A電光分析天平、T-500型電子天平、醫(yī)用供氧器(95%02+5%C02)、微量移液器III WKY 型 50-250ML。3.藥品與試劑
氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KCl)、硫酸鎂(MgSO4WH2O)、磷酸二氫鈉(NaH2PO4)、無水氯化鈣(CaCl2)、碳酸氫鈉(NaHCO3)、葡萄糖(Glucose)、磷酸二氫鉀(KH2PO4)、去甲腎上腺素(Norepinephrine), WX-03 (純度>99%，以蒸餾水為溶劑配置成相應(yīng)濃度)。實施例I :離體實驗
I. I WX-03對致痙劑引起的家兔離體血管平滑肌張力的影響待標本張力穩(wěn)定后，將基線調(diào)節(jié)到零，記錄一段波形后，向浴管內(nèi)加入致痙劑去甲腎上腺素(l(T6m0l/L)，氯化鉀(60mmol/L)誘導(dǎo)收縮，當達到最大收縮后，充分洗凈標本。待標本恢復(fù)穩(wěn)定后，再次用同濃度致痙劑誘導(dǎo)二次收縮，當與前一次收縮基本一致時分別累積加入1乂-03(3\10_%01/1 10_%01/1)，記錄數(shù)據(jù)。以致痙劑的最大收縮幅度為100%，舒張百分數(shù)為縱坐標，WX-03的負對數(shù)濃度為橫坐標繪制舒張量效曲線，數(shù)據(jù)以平均值土標準誤表示，并求EC5tl值。由圖I和圖2可知WX-03能夠舒張由去甲腎上腺素、氯化鉀誘導(dǎo)的收縮家兔離體血管平滑肌。1.2 WX-03舒張家兔離體血管平滑肌機制初探
I.2. I WX-03舒張家兔離體血管平滑肌與鉀通道的關(guān)系
待標本張力穩(wěn)定后，將基線調(diào)節(jié)到零，記錄一段波形后，向浴管內(nèi)加入去甲腎上腺素(l(T6mol/L)或高鉀液(60mmol/L)誘導(dǎo)收縮，當達到最大收縮后,充分洗凈標本。待標本恢復(fù)穩(wěn)定后，再次用同濃度致痙劑誘導(dǎo)二次收縮，當與前一次收縮基本一致時分別累積加入WX-03(3X10_5Mol/L 10_3Mol/L)，記錄數(shù)據(jù)。以去甲腎上腺素或高鉀液的最大收縮幅度為100%，WX-03的負對數(shù)濃度為橫坐標繪制舒張量效曲線，并求EC5tl值。待標本張力穩(wěn)定后，向浴管內(nèi)分別加入格列苯脲(10_5mol/L)孵育lOmin，再加入去甲腎上腺素(10_6mol/L)或高鉀液(60mmol/L)誘導(dǎo)收縮，當達到最大收縮后，分別累積加入WX-03 (3 X IO^5MoI/L 10_3Mol/L)，記錄數(shù)據(jù)。以去甲腎上腺素(10_6mol/L)或高鉀液(60mmol/L)的最大收縮幅度為100%，WX-03的負對數(shù)濃度為橫坐標繪制舒張量效曲線，并求EC5tl值。比較兩次獲得的量效曲線圖形，對EC5tl值進行統(tǒng)計學(xué)檢驗。由圖2和圖3可知格列苯脲孵育前后，黃酮類化合物WX-03(3X10_5Mol/L IO-3MoVL)舒張由致痙劑去甲腎上腺素(10_6mol/L)、氯化鉀(60mmol/L)引起的血管收縮量效曲線均未發(fā)生顯著性改變，格列苯脲不影響WX-03對血管的舒張作用。I. 2. 2 WX-03舒張家兔離體血管平滑肌與鈣通道的關(guān)系
待標本張力穩(wěn)定后，用無鈣克氏液換洗平衡30分鐘，然后加入去甲腎上腺素(10_6mol/L)，血管平滑肌出現(xiàn)快速收縮反應(yīng)，此時引起的收縮為去甲腎上腺素在無鈣液中促使細胞內(nèi)鈣釋放所致；待 收縮幅度穩(wěn)定后再加入CaCl2,以恢復(fù)克氏液中的Ca2+ (2. 5mmol/l)濃度，此時血管平滑肌進一步收縮，這是去甲腎上腺素作用下促使細胞外鈣進入細胞內(nèi)所致。待反應(yīng)達到最大值，再用無鈣克氏液反復(fù)沖洗血管平滑肌，待其收縮張力恢復(fù)正常后，加入WX-03，對照組給等容量的生理鹽水(100%)，給藥20分鐘后重復(fù)上述實驗，比較給藥張力前后肌張力的變化。結(jié)果表明，WX-03能拮抗去甲腎上腺素誘發(fā)的內(nèi)鈣收縮反應(yīng)，而且也能抑制外鈣內(nèi)流引起的收縮。結(jié)果見表I。
表I- WX 03對去甲腎上腺素引起的依賴內(nèi)鈣和外鈣收緒的影響G±s n=6}
權(quán)利要求
1.7-[2-( 二甲氨基)乙氧基]黃酮在制備治療血管平滑肌痙攣性疾病藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的應(yīng)用，其特征在于所述的血管平滑肌痙攣性疾病包括高血壓及高血壓帶來的腦卒中、心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、腎功能衰竭等合并癥；由血管痙攣引起的腦缺血性疾病、心肌缺血性疾?。荒I血管痙攣引起的腎功能低下和外周血管痙攣性疾病。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的應(yīng)用，其特征在于其最小有效劑量為3X10_5 mol/L。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及黃酮類化合物WX-03(7-[2-(二甲氨基)乙氧基]黃酮)用于舒張血管平滑肌的用途。研究表明WX-03能夠降低家兔離體血管平滑肌的張力，可舒張由致痙劑去甲腎上腺素、氯化鉀引起的血管平滑肌收縮，WX-03舒張血管作用可能與ATP敏感性鉀通道無關(guān)；WX-03舒張血管作用與抑制鈣通道有關(guān)。其最小起效濃度是3×10-5mol/L。7-[2-(二甲氨基)乙氧基]黃酮對治療高血壓從而減少對靶器官的損害，降低腦卒中、心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、腎功能衰竭等嚴重合并癥等疾病的發(fā)病率均有指導(dǎo)意義。
文檔編號A61P13/12GK102846595SQ20121035379
公開日2013年1月2日 申請日期2012年9月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月21日
發(fā)明者胡春, 劉曉平, 黃二芳, 付守廷, 黃雪松, 賈春明, 宋愛華 申請人:沈陽藥科大學(xué)