專利名稱：一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法
一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法。
背景技術(shù)：
纈草是我國傳統(tǒng)的中藥材，其有效成份主要有揮發(fā)油類、環(huán)烯醚萜類、黃酮類、生物堿類等。纈草烯酸是纈草屬植物揮發(fā)油中分離出的一種倍半萜類成分；臨床試驗(yàn)表明 纈草烯酸具有鎮(zhèn)靜、抗焦慮的作用，并且藥物依賴性小、不易成癮，因此纈草烯酸在開發(fā)安全、低毒、有效的鎮(zhèn)靜催眠藥和抗焦慮藥方面具有很大潛力。
目前，現(xiàn)有技術(shù)中存在兩種從纈草中提取纈草烯酸的方法
第一種方法利用一定濃度的乙醇進(jìn)行提取，但由于乙醇對(duì)很多物質(zhì)都有很好的溶解性，因此在提取纈草烯酸的過程中會(huì)帶入很多不必要的雜質(zhì)；這些雜質(zhì)不僅降低了纈草烯酸的純度，而且給后續(xù)的分離純化工藝帶來很大的負(fù)擔(dān)，增加了整個(gè)纈草烯酸提取工藝的成本。
第二種方法采用超臨界二氧化碳裝置，并通過高速逆流方法分離得到纈草提取物，但是這種設(shè)備十分昂貴，大大增加了生產(chǎn)成本，因此在實(shí)際生產(chǎn)中很少使用。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，不僅提升了從纈草中獲取纈草烯酸的有效產(chǎn)量，提高了纈草烯酸的純度，而且節(jié)約了生產(chǎn)成本、環(huán)保無污染、經(jīng)濟(jì)效益高，因此十分適合工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的
一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，包括如下步驟
A、原料破碎選取闊葉纈草粉碎，并過10目篩，得到至少70%過10目篩的纈草顆粒;
B、回流提取向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，并進(jìn)行回流提取，得到繳草醇提液；
C、減壓濃縮在50 60°C的真空環(huán)境下，對(duì)纈草醇提液進(jìn)行減壓濃縮，直至無醇味，得到纈草浸膏；
D、熱水溶解向纈草浸膏中加入70 100°C的熱水，直至該纈草浸膏溶解成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20% 24%的纈草混合液；
E、過濾除雜向纈草混合液中加入除雜劑，并進(jìn)行過濾，得到纈草濾液；
F、層析精制將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，并靜置I 4小時(shí)；然后向該層析柱中注入去離子水進(jìn)行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色；再向該層析柱中注入甲醇溶液進(jìn)行洗脫，得到含纈草烯酸的洗脫液；
G、濃縮干燥在50 60°C的真空環(huán)境下，對(duì)含纈草烯酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，直至濃縮成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60% 80%纈草烯酸濃縮液；再對(duì)該纈草烯酸濃縮液進(jìn)行干燥，即得到成品的纈草烯酸粉末。
其中，所述的除雜劑由下述重量份的原料混合而成有機(jī)硅膠30 40份，殼聚糖 40 50份，明膠10 30份；
所述的大孔樹脂由下述重量份的原料混合而成活性炭10 30份，氧化鋁20 40份，聚酰胺40 80份。
優(yōu)選地，所述的向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，并進(jìn)行回流提取包括以下步驟
BI、向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，并在80 85°C的加熱溫度下回流提取2小時(shí)，過濾，得到首次提取的濾渣和濾液；
B2、向首次提取的濾渣中添加8倍重量的甲醇溶液，并在80 85°C的加熱溫度下回流提取I. 5小時(shí)，過濾，得到再次提取的濾渣和濾液；
B3、將兩次提取的濾液混合在一起，即得到纈草醇提液。
優(yōu)選地，所述的層析精制包括以下步驟
F1、以每小時(shí)2BV的流速，將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，并靜置I 4 小時(shí)；
F2、以每小時(shí)I. 5BV的流速，向該層析柱中注入去離子水進(jìn)行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色；
F3、以每小時(shí)I. O I. 2BV的流速，向該層析柱中注入甲醇溶液進(jìn)行洗脫；當(dāng)該層析柱排出的洗脫液有顏色時(shí)開始收集洗脫液，直至該層析柱排出的洗脫液無顏色；所收集的洗脫液即為含纈草烯酸的洗脫液。
優(yōu)選地，在除雜劑的組分中，殼聚糖為未經(jīng)過酰化處理的殼聚糖。
優(yōu)選地，在50 60°C的真空環(huán)境下，對(duì)纈草醇提液進(jìn)行減壓濃縮包括在對(duì)纈草醇提液進(jìn)行減壓濃縮的同時(shí)，回收纈草醇提液中的甲醇溶液。
優(yōu)選地，在50 60°C的真空環(huán)境下，對(duì)含纈草烯酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮包括 在對(duì)含纈草烯酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮的同時(shí)，回收纈草醇提液中的甲醇溶液。
優(yōu)選地，纈草烯酸濃縮液在50 60°C的真空環(huán)境下，進(jìn)行微波真空干燥，得到成品的纈草烯酸粉末。
由上述本發(fā)明實(shí)施例提供的技術(shù)方案可以看出，本發(fā)明實(shí)施例所提供的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法依次經(jīng)過原料破碎、回流提取、減壓濃縮、熱水溶解、過濾除雜、層析精制以及濃縮干燥處理后得到成品的纈草烯酸粉末；該纈草烯酸粉末中纈草烯酸的含量為8.6%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于國家產(chǎn)品質(zhì)量中的規(guī)定指標(biāo)(即O. 8%)，而從闊葉纈草中提取纈草烯酸的收率達(dá)到O. 1% O. 4%，由此可見，本發(fā)明實(shí)施例所提供的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法提升了從纈草中獲取纈草烯酸的有效產(chǎn)量，提高了纈草烯酸的純度。此外，本發(fā)明實(shí)施例所提供的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法未采用價(jià)格高昂的提取設(shè)備，也未使用低沸點(diǎn)、容易揮發(fā)的有機(jī)溶劑(例如石油醚、乙酸乙酯等)，并且采用了層析柱的層析精制工藝，因此在提高生產(chǎn)安全性的同時(shí)，降低了能耗和對(duì)環(huán)境的污染，大大的節(jié)約了生產(chǎn)成本， 十分適合工業(yè)化生產(chǎn)。


為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
圖I為本發(fā)明實(shí)施例所提供的從纈草中提取纈草烯酸方法的流程示意圖。
具體實(shí)施方式
下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，可以理解的是，所描述的實(shí)施例僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
下面將結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明實(shí)施例所提供的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法作進(jìn)一步地詳細(xì)描述。
如圖I所示，一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，包括如下步驟
A、原料破碎選取闊葉纈草粉碎，并過10目篩，得到至少70%過10目篩的纈草顆粒;
B、回流提取向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，并進(jìn)行回流提取，得到繳草醇提液；
C、減壓濃縮在50 60°C的真空環(huán)境下，對(duì)纈草醇提液進(jìn)行減壓濃縮，直至無醇味，得到纈草浸膏；
D、熱水溶解向纈草浸膏中加入70 100°C的熱水，直至該纈草浸膏溶解成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20% 24%的纈草混合液；
E、過濾除雜向纈草混合液中加入除雜劑，并進(jìn)行過濾，得到纈草濾液；
F、層析精制將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，并靜置I 4小時(shí)；然后向該層析柱中注入去離子水進(jìn)行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色；再向該層析柱中注入甲醇溶液進(jìn)行洗脫，得到含纈草烯酸的洗脫液；
G、濃縮干燥在50 60°C的真空環(huán)境下，對(duì)含纈草烯酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮， 直至濃縮成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60% 80%纈草烯酸濃縮液；再對(duì)該纈草烯酸濃縮液進(jìn)行干燥，即得到成品的纈草烯酸粉末。
其中，相應(yīng)的除雜劑可以由下述重量份的原料混合而成有機(jī)硅膠30 40份，殼聚糖40 50份，明膠10 30份；在實(shí)際應(yīng)用中，所述的殼聚糖最好為未經(jīng)過?；幚淼臍ぞ厶恰Ｏ鄳?yīng)的大孔樹脂可以由下述重量份的原料混合而成活性炭10 30份，氧化鋁 20 40份，聚酰胺40 80份。
具體地，本發(fā)明實(shí)施例所提供的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其每個(gè)步驟可以采用以下技術(shù)方案中的至少一項(xiàng)
(I)原料破碎本發(fā)明所選取闊葉纈草最好是經(jīng)過剔除雜質(zhì)、洗凈、干燥處理后的闊葉纈草，從而可以保證纈草烯酸具有較高的純度和提取率。至少70%過10目篩的纈草顆粒是指在粉碎后的纈草顆粒中，至少占纈草顆?？傮w積70%的纈草顆粒能夠通過10目篩，也就是說，粒度小于10目的纈草顆粒至少占纈草顆?？傮w積的70%。
(2)回流提取所述的回流提取可以包括以下步驟
BI、向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，并在80 85°C的加熱溫度下回流提取2小時(shí)，過濾，得到首次提取的濾渣和濾液；
B2、向首次提取的濾渣中添加8倍重量的甲醇溶液，并在80 85°C的加熱溫度下回流提取I. 5小時(shí)，過濾，得到再次提取的濾渣和濾液；
B3、將兩次提取的濾液混合在一起，即得到纈草醇提液。
(3)減壓濃縮，在對(duì)纈草醇提液進(jìn)行減壓濃縮的同時(shí)，最好回收纈草醇提液中的甲醇溶液，這可以節(jié)省整個(gè)工藝流程中甲醇溶液的使用量，進(jìn)而降低了生產(chǎn)成本。
(4)層析精制所述的層析精制具體可以包括以下步驟
F1、以每小時(shí)2BV (BV是指層析柱中樹脂床的體積；每小時(shí)2BV可寫作2BV/h，是指每小時(shí)流動(dòng)的液體相當(dāng)于多少個(gè)層析柱中樹脂床的體積)的流速，將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，并靜置I 4小時(shí)；
F2、以每小時(shí)I. 5BV的流速，向該層析柱中注入去離子水進(jìn)行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色，從而可以將層析柱中的雜質(zhì)洗出；
F3、以每小時(shí)I. O I. 2BV的流速，向該層析柱中注入甲醇溶液進(jìn)行洗脫；此步驟開始時(shí)，該層析柱中排出的液體無色的，該液體是步驟F2中殘留在該層析柱中的水；當(dāng)該層析柱排出的洗脫液有顏色時(shí)開始收集洗脫液，直至該層析柱排出的洗脫液無顏色；所收集的洗脫液即為含纈草烯酸的洗脫液。
(5)濃縮干燥在50 60°C的真空環(huán)境下，對(duì)含纈草烯酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮， 直至濃縮成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60% 80%纈草烯酸濃縮液；再對(duì)該纈草烯酸濃縮液進(jìn)行干燥，即得到成品的纈草烯酸粉末；
具體而言，在對(duì)含纈草烯酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮的同時(shí)，最好回收纈草醇提液中的甲醇溶液，這可以節(jié)省整個(gè)工藝流程中甲醇溶液的使用量，進(jìn)而降低了生產(chǎn)成本。纈草烯酸濃縮液最好是在50 60°C的真空環(huán)境下，進(jìn)行微波真空干燥，得到成品的纈草烯酸粉末，這樣可以保證纈草烯酸具有較高的純度。將該成品的纈草烯酸粉末按照中國藥典 (HPLC)中的檢測方法進(jìn)行檢測可以得到如下表I中所示的數(shù)據(jù)
表I :
權(quán)利要求
1.一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特征在于，包括如下步驟 A、原料破碎選取闊葉纈草粉碎，并過10目篩，得到至少70%過10目篩的纈草顆粒； B、回流提取向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，并進(jìn)行回流提取，得到纈草醇提液； C、減壓濃縮在50 60°C的真空環(huán)境下，對(duì)纈草醇提液進(jìn)行減壓濃縮，直至無醇味，得到纈草浸膏； D、熱水溶解向纈草浸膏中加入70 100°C的熱水，直至該纈草浸膏溶解成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20% 24%的纈草混合液； E、過濾除雜向纈草混合液中加入除雜劑，并進(jìn)行過濾，得到纈草濾液； F、層析精制將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，并靜置I 4小時(shí)；然后向該層析柱中注入去離子水進(jìn)行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色；再向該層析柱中注入甲醇溶液進(jìn)行洗脫，得到含纈草烯酸的洗脫液； G、濃縮干燥在50 60°C的真空環(huán)境下，對(duì)含纈草烯酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，直至濃縮成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60% 80%纈草烯酸濃縮液；再對(duì)該纈草烯酸濃縮液進(jìn)行干燥，即得到成品的纈草烯酸粉末。
其中，所述的除雜劑由下述重量份的原料混合而成有機(jī)硅膠30 40份，殼聚糖40 50份，明膠10 30份； 所述的大孔樹脂由下述重量份的原料混合而成活性炭10 30份，氧化鋁20 40份，聚酰胺40 80份。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特征在于，所述的向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，并進(jìn)行回流提取包括以下步驟 BI、向纈草顆粒中添加8 10倍重量的甲醇溶液，并在80 85°C的加熱溫度下回流提取2小時(shí)，過濾，得到首次提取的濾渣和濾液； B2、向首次提取的濾渣中添加8倍重量的甲醇溶液，并在80 85°C的加熱溫度下回流提取I. 5小時(shí)，過濾，得到再次提取的濾渣和濾液； B3、將兩次提取的濾液混合在一起，即得到纈草醇提液。
3.根據(jù)權(quán)利要求I至2中任一項(xiàng)所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特征在于，所述的層析精制包括以下步驟 Fl、以每小時(shí)2BV的流速，將纈草濾液注入盛有大孔樹脂的層析柱，并靜置I 4小時(shí)； F2、以每小時(shí)I. 5BV的流速，向該層析柱中注入去離子水進(jìn)行水洗，直至該層析柱排出的水洗液無色； F3、以每小時(shí)I. 0 I. 2BV的流速，向該層析柱中注入甲醇溶液進(jìn)行洗脫；當(dāng)該層析柱排出的洗脫液有顏色時(shí)開始收集洗脫液，直至該層析柱排出的洗脫液無顏色；所收集的洗脫液即為含纈草烯酸的洗脫液。
4.根據(jù)權(quán)利要求I至3中任一項(xiàng)所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特征在于，在除雜劑的組分中，殼聚糖為未經(jīng)過?；幚淼臍ぞ厶恰?br> 5.根據(jù)權(quán)利要求I至3中任一項(xiàng)所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特征在于，在50 60°C的真空環(huán)境下，對(duì)纈草醇提液進(jìn)行減壓濃縮包括在對(duì)纈草醇提液進(jìn)行減壓濃縮的同時(shí)，回收纈草醇提液中的甲醇溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求I至3中任一項(xiàng)所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特征在于，在50 60°C的真空環(huán)境下，對(duì)含纈草烯酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮包括在對(duì)含纈草烯酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮的同時(shí)，回收纈草醇提液中的甲醇溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求I至3中任一項(xiàng)所述的從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，其特征在于，纈草烯酸濃縮液在50 60°C的真空環(huán)境下，進(jìn)行微波真空干燥，得到成品的纈草烯酸粉末。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從闊葉纈草中提取纈草烯酸的方法，包括如下步驟選取闊葉纈草粉碎，并過10目篩，得到至少70%過10目篩的纈草顆粒；向纈草顆粒中添加8～10倍重量的甲醇溶液，并進(jìn)行回流提取，得到纈草醇提液；在50～60℃的真空環(huán)境下，將纈草醇提液減壓濃縮至無醇味，得到纈草浸膏；向纈草浸膏中加入70～100℃的熱水，直至溶解成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%～24%的纈草混合液；向纈草混合液中加入除雜劑，并進(jìn)行過濾，得到纈草濾液；對(duì)纈草濾液進(jìn)行層析精制，得到含纈草烯酸的洗脫液；對(duì)含纈草烯酸的洗脫液進(jìn)行濃縮干燥，即得到成品的纈草烯酸粉末。本發(fā)明實(shí)施例不僅提升了從纈草中獲取纈草烯酸的有效產(chǎn)量，提高了纈草烯酸的純度，而且節(jié)約了生產(chǎn)成本、環(huán)保無污染、經(jīng)濟(jì)效益高，因此十分適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/185GK102973618SQ201210574410
公開日2013年3月20日 申請(qǐng)日期2012年12月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月26日
發(fā)明者何莉, 路貴霖, 吳瓊明, 田 浩 申請(qǐng)人:江口縣苗藥生物科技有限公司