用于成像或治療的包含反式環(huán)辛烯親雙烯體和二烯的預(yù)靶向試劑盒的制作方法
【專(zhuān)利摘要】描述了用于靶向的醫(yī)學(xué)成像和/或治療的預(yù)靶向方法和相關(guān)的試劑盒，其中使用顯示出彼此生物正交反應(yīng)性的非生物反應(yīng)性化學(xué)基團(tuán)。本發(fā)明涉及[4+2]逆電子需求(逆)狄爾斯-阿爾德化學(xué)反應(yīng)在提供預(yù)靶向探針和效應(yīng)物探針之間的偶聯(lián)中的用途。為此，這些探針中的一個(gè)包含缺電子的四嗪或其它合適的二烯，且另一個(gè)是由于至少兩個(gè)環(huán)外鍵的位置而具有展平結(jié)構(gòu)的E-環(huán)辛烯。
【專(zhuān)利說(shuō)明】用于成像或治療的包含反式環(huán)辛烯親雙烯體和二烯的預(yù)靶
向試劑盒
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及用于靶向的醫(yī)學(xué)成像和/或治療的預(yù)靶向方法，其中使用彼此顯示出生物正交(bio-orthogonal)反應(yīng)性的非生物(abiotic)反應(yīng)性化學(xué)基團(tuán)。本發(fā)明還涉及包含至少一種預(yù)祀向探針和至少一種效應(yīng)物(effector)探針的預(yù)祀向試劑盒(kit),其中所述預(yù)祀向探針包含初級(jí)祀向部分(primary targeting moiety)和第一生物正交反應(yīng)性基團(tuán)，且其中所述效應(yīng)物探針包含效應(yīng)物部分，例如標(biāo)記物或藥學(xué)活性化合物，和第二生物正交反應(yīng)性基團(tuán)。本發(fā)明還涉及在上述方法和試劑盒中使用的預(yù)靶向試劑。本發(fā)明特別地涉及核成像和放射療法。
【背景技術(shù)】
[0002]在醫(yī)學(xué)診斷和治療的許多領(lǐng)域中，希望選擇性地將試劑，例如治療劑(藥物)或診斷(例如成像)劑遞送到受試者(例如患者)體內(nèi)的特定位點(diǎn)或有限區(qū)域。
[0003]器官或組織的活性靶向通過(guò)所希望的活性部分(例如對(duì)比增強(qiáng)劑或細(xì)胞毒性化合物)與靶向結(jié)構(gòu)的直接或間接結(jié)合實(shí)現(xiàn)，所述靶向結(jié)構(gòu)與細(xì)胞表面結(jié)合或促進(jìn)在感興趣的靶位點(diǎn)處或附近的細(xì)胞攝取。用于靶向此類(lèi)試劑的靶向部分通常是對(duì)細(xì)胞表面靶(例如膜受體)、結(jié)構(gòu)蛋白(例如淀粉樣斑)或細(xì)胞內(nèi)靶(例如RNA、DNA、酶、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路)具有親和力的結(jié)構(gòu)。這些部分可以是抗體(片段)、蛋白質(zhì)、適體(aptamers)、寡肽、寡核苷酸、寡糖以及肽 、擬肽(peptoids)和已知在特定疾病或障礙處積累的有機(jī)藥物化合物。此外，對(duì)比/治療劑可以靶向代謝途徑，其在疾病(例如感染或癌癥)期間表達(dá)升高，例如DNA、蛋白質(zhì)和膜合成和碳水化合物攝取。在患病組織中，上述標(biāo)志物可以將患病細(xì)胞從健康組織區(qū)分并提供早期檢測(cè)、特異性診斷和(靶向的)治療的獨(dú)特可能性。
[0004]通常對(duì)于成功的分子成像/治療劑和特別對(duì)于核成像/治療劑的一個(gè)重要標(biāo)準(zhǔn)是它們呈現(xiàn)高靶攝取，同時(shí)顯示出從非靶組織和從血液的快速清除(通過(guò)腎臟和/或肝膽系統(tǒng))。但是，這經(jīng)常存在問(wèn)題:例如，人體中的成像研究已經(jīng)顯示，在腫瘤位置處經(jīng)放射標(biāo)記的抗體在24小時(shí)內(nèi)可達(dá)到最大濃度，但需要另外幾天在循環(huán)中的所述經(jīng)標(biāo)記的抗體的濃度才下降到低至足以進(jìn)行成功成像的水平。
[0005]在靶組織中的緩慢或不充分的積累以及從非靶區(qū)域緩慢清除所帶來(lái)的這些問(wèn)題(特別是對(duì)于核成像和治療)已經(jīng)導(dǎo)致預(yù)靶向方法的應(yīng)用。
[0006]預(yù)靶向是指在靶向方法中的步驟，其中向初級(jí)靶(例如細(xì)胞表面)提供預(yù)靶向探針。后者包括次級(jí)靶，其最后將通過(guò)裝備有次級(jí)靶向部分的其它探針(所述效應(yīng)物探針)進(jìn)行靶向。
[0007]因此，在預(yù)靶向中，將預(yù)靶向探針結(jié)合到初級(jí)靶。所述預(yù)靶向探針還攜帶次級(jí)靶，其促進(jìn)對(duì)診斷(成像)和/或治療劑(所述效應(yīng)物探針)的特異性結(jié)合。在形成所述預(yù)靶向探針的結(jié)構(gòu)已經(jīng)定位在靶位點(diǎn)處之后(花費(fèi)時(shí)間例如24小時(shí))，如果自然清除不充分，則可以使用清除劑從血液除去過(guò)量的部分。在第二溫育步驟(優(yōu)選采取較短的時(shí)間，例如1-6小時(shí))中，所述效應(yīng)物探針通過(guò)它的次級(jí)靶向部分結(jié)合到所述(預(yù))結(jié)合的預(yù)靶向探針。所述次級(jí)靶(存在于所述預(yù)靶向探針上)和所述次級(jí)靶向部分(存在于所述效應(yīng)物探針上)應(yīng)該以高特異性和高親和力快速結(jié)合，并且在體內(nèi)應(yīng)該是穩(wěn)定的。
[0008]對(duì)于成像，預(yù)靶向的一般概念在圖1中繪出。在這里，所述效應(yīng)物探針是包含用于成像模式的可檢測(cè)標(biāo)記物的成像探針。所述效應(yīng)物探針通過(guò)其次級(jí)靶向基團(tuán)結(jié)合到所述(預(yù))結(jié)合的預(yù)靶向探針。
[0009]次級(jí)靶/次級(jí)靶向部分對(duì)的一般例子是生物素/鏈霉親和素或抗體/抗原系統(tǒng)。為了有效，所述效應(yīng)物探針必須快速?gòu)捏w內(nèi)排出(例如通過(guò)腎臟)以提供所希望的具有相對(duì)低的非靶積累的高腫瘤積累。因此，這些探針通常很小。
[0010]在核成像和放射療法中，預(yù)靶向的概念具有進(jìn)一步的益處，因?yàn)楹馁M(fèi)時(shí)間的預(yù)靶向步驟可以不必使用放射性核素實(shí)施，而使用放射性核素的次級(jí)靶向步驟能夠更快地實(shí)施。后者使得能夠使用較短壽命的放射性核素，優(yōu)點(diǎn)是將對(duì)患者的放射劑量最小化，并且例如使用PET試劑代替SPECT試劑。結(jié)合多齒配體系統(tǒng)(鏈霉親和素、樹(shù)枝狀聚合物)在MRI中使用預(yù)靶向方法能夠在靶位點(diǎn)處提供信號(hào)放大。此外，一般而言，該方法有利于通用對(duì)比劑的使用。
[0011]通常在生物學(xué)中(如抗體-抗原)和特別在預(yù)靶向中(生物素-鏈霉親和素、抗體/半抗原、反義寡核苷 酸)實(shí)施高度選擇性相互作用的實(shí)體非常大。因此，使用肽和小有機(jī)部分作為初級(jí)靶向基團(tuán)的預(yù)靶向，以及代謝成像和細(xì)胞內(nèi)靶成像，由于次級(jí)靶的尺寸使得小初級(jí)基團(tuán)的使用毫無(wú)意義而仍然無(wú)法實(shí)現(xiàn)。
[0012]而且，現(xiàn)有的預(yù)靶向系統(tǒng)被與它們的生物特性相關(guān)的因素所限制。生物素是內(nèi)源分子，并且它的綴合物能夠通過(guò)血清酶生物素酶斷開(kāi)。當(dāng)使用反義預(yù)靶向時(shí)，所述寡核苷酸會(huì)受到RNA酶和DNA酶的攻擊。蛋白質(zhì)和肽也經(jīng)歷自然分解途徑。這些相互作用可被它們的非共價(jià)和動(dòng)態(tài)特性以及有限的靶上駐留時(shí)間進(jìn)一步削弱。而且，內(nèi)源性生物素與生物素綴合物競(jìng)爭(zhēng)鏈霉親和素結(jié)合。最后，鏈霉親和素是高度免疫原性的。
[0013]近來(lái)的一個(gè)發(fā)展是避免與僅基于天然/生物靶向結(jié)構(gòu)(即生物素/鏈霉親和素、抗體/半抗原、反義寡核苷酸)的預(yù)靶向相關(guān)的缺點(diǎn)。
[0014]這方面的一篇參考文獻(xiàn)是WO 2010/051530，其中基于某些二烯(例如四嗪類(lèi))和親雙烯體(例如反式-環(huán)辛烯醇(TCO))之間的反應(yīng)性對(duì)預(yù)靶向進(jìn)行了討論。
[0015]盡管在這些系統(tǒng)的基礎(chǔ)上能夠獲得相對(duì)快速的反應(yīng)，但這還遠(yuǎn)不如上述生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)的反應(yīng)性。因此，避免后者的缺點(diǎn)，卻犧牲了所述反應(yīng)的主要要求，即速度。因此，希望提供一種系統(tǒng)，其不以如上討論的生物分子為基礎(chǔ)，并且還具有理想的快速反應(yīng)速率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0016]為了更好地滿(mǎn)足上述愿望，在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了用于靶向的醫(yī)學(xué)成像和/或治療的試劑盒，其包含至少一種預(yù)靶向探針和至少一種效應(yīng)物探針，其中所述預(yù)靶向探針包含初級(jí)靶向部分和第一生物正交反應(yīng)性基團(tuán)，且其中所述效應(yīng)物探針包含效應(yīng)物部分(例如標(biāo)記物或藥學(xué)活性化合物)和第二生物正交反應(yīng)性基團(tuán)，其中所述第一和第二生物正交反應(yīng)性基團(tuán)中的任一個(gè)是親雙烯體(dienophile),且所述第一和第二生物正交反應(yīng)性基團(tuán)中的另一個(gè)是二烯，其中所述親雙烯體是反式-環(huán)辛烯部分，該部分包含至少兩個(gè)被固定在相同平面中的環(huán)外鍵，且包含至少一個(gè)任選經(jīng)由間隔體與所述預(yù)靶向探針或所述效應(yīng)物探針的連接(linkage)。
[0017]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種預(yù)靶向方法，以及其中使用的預(yù)靶向試劑，和其中使用該試劑盒的靶向的醫(yī)學(xué)成像或療法。
[0018]在另一個(gè)方面，本發(fā)明是用于動(dòng)物或人類(lèi)的預(yù)靶向方法中的包含8元非芳族環(huán)狀單亞烯基部分(優(yōu)選環(huán)辛烯部分，和更優(yōu)選反式-環(huán)辛烯部分)的化合物，所述部分包含至少兩個(gè)被固定在相同平面中的環(huán)外鍵。
[0019]在又一個(gè)方面，本發(fā)明涉及包含反式-環(huán)辛烯部分的化合物作為親雙烯體反應(yīng)物在基于逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)(retro Diels-Alder reaction)的預(yù)祀向方法中的用途,所述部分包含至少兩個(gè)被固定在基本上相同平面中的環(huán)外鍵。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0020]圖1描繪了如上所述的預(yù)靶向概念的一般方案；
圖2提供了(3，6) - 二- (2-吡啶基)-S-四嗪和反式-環(huán)辛烯親雙烯體之間的[4+2]狄爾斯-阿爾德反應(yīng)、接著是其中形成產(chǎn)物和分子氮的逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)的反應(yīng)方案。因?yàn)樗龇词?環(huán)辛烯衍生物不像在經(jīng)典狄爾斯-阿爾德反應(yīng)中那樣包含吸電子基團(tuán)，所以這類(lèi)狄爾斯-阿爾德反應(yīng)與經(jīng)典的狄爾斯-阿爾德反應(yīng)不同，并且通常被稱(chēng)作“逆電子需求狄爾斯 _ 阿爾德反應(yīng)(inverse electron demand Diels Alder reaction) ”。在下文中，兩個(gè)反應(yīng)步驟序列，即最初的狄爾斯-阿爾德環(huán)加成(通常是逆電子需求狄爾斯-阿爾德環(huán)加成)和后續(xù)的逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)，將被簡(jiǎn)稱(chēng)為“逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)”或“逆-DA”。
[0021]圖3 (a和b)描繪了利用逆狄爾斯-阿爾德化學(xué)反應(yīng)的預(yù)靶向的一般方案。
[0022]圖4和圖5描繪了在實(shí)施例中提及的化合物的反應(yīng)方案和化學(xué)結(jié)構(gòu)。
[0023]圖6描繪了(A)天然CC49、每個(gè)分子被(B) 0.4或(C) 5.2當(dāng)量的內(nèi)-TCO部分
(6)修飾的CC49、以及每個(gè)分子被(D) 0.7或(E) 8.9當(dāng)量的外-TCO部分(7)修飾的CC49的SEC-HPLC色譜圖(在260 nm的UV曲線(xiàn))。
[0024]圖7描繪了 CC49-TC0構(gòu)建體的SDS-PAGE分析。泳道1_5分別含有天然CC49、被0.4和5.2的內(nèi)-TCO部分6修飾的CC49、以及被0.7和8.9的外-TCO部分7官能化的CC49(全長(zhǎng)凝膠，分子量標(biāo)準(zhǔn)品在左側(cè))。
[0025]圖8描繪了用于TCO定量的反應(yīng)混合物的SDS-PAGE分析，所述TCO定量使用在實(shí)施例2中描述的mLu-DOTA-四嗪滴定(A:凝膠放射攝影術(shù)；B:蛋白染色)。泳道1_3含有CC49-TC0-6和mLu-DOTA四嗪(相對(duì)于mAb而言10、12和14當(dāng)量)的混合物；泳道4_6含有CC49-TC0-7和mLu-DOTA-四嗪(相對(duì)于mAb而言10、12和14當(dāng)量)的混合物。
[0026]圖9描繪了在實(shí)施例3中描述的動(dòng)力學(xué)測(cè)定的結(jié)果。在mLu-DOTA-四嗪8 (0.67nM)和(A) CC49-TC0-6或(C) CC49-TC0-7 (4種不同的mAb濃度)之間的時(shí)間依賴(lài)性的反應(yīng)收率，以及Ktjbs相對(duì)于(B) TC0-6或(D) TC0-7濃度的圖。
[0027]圖10描繪了如在實(shí)施例4中描述的、與CC49綴合的TCO 6和7的體內(nèi)穩(wěn)定性。條代表平均值，且誤差棒代表1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n = 3)。
[0028]圖11描繪了在實(shí)施例5中描述的(E-主要)-4-((環(huán)辛-4-烯基氧基)甲基)苯甲酸2，5- 二氧代吡咯烷-1-基酯12的合成。
[0029]圖12描繪了在實(shí)施例6中描述的41,45- 二氧代-45-((6-(6-(吡啶-2-基)_1，2，4，5-四嗪-3-基)吡啶-3-基)氨基)_4，7，10，13，16，19，22，25，28,31,3
4,37-十二氧雜-40-氮雜四十五燒-1-酸2，5- 二氧代吡咯燒-1-基酯16的合成。
[0030]圖13描繪了在實(shí)施例7中描述的半乳糖-白蛋白-四嗪22的合成。
[0031]圖14描繪了在實(shí)施例8中描述的⑶-2-(10-氧代-9-氮雜雙環(huán)[6.2.0]癸-4-烯-9-基)乙酸2，5-二氧代吡咯燒-1-基酯(26)的合成。
[0032]圖15 描繪了在實(shí)施例 9 中描述的{E)~l,2, 3,4, 4a, 5,6,9, 10，IOa-十氫 _1，4_ 橋亞甲基苯并[8]輪烯-11-醇(32)的合成。
[0033]圖16描繪了在實(shí)施例10中描述的(E)-3，3a，4，5，9，9a_六氫-1H-環(huán)辛[d]咪唑-2(8H)_酮(40)的合成。
[0034]圖17描繪了在實(shí)施例11中描述的2，2’，2’ '-(10-(2-氧代_2_(6_氧代-6-(646-(吡啶-2-基)-1，2，4，5-四嗪-3-基)吡啶_3_基氨基)己基氨基)乙基)-1，4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-1，4，7-三基)三乙酸(47)和2，2，，2，，-(10-(2-氧代-2-(11-氧代-1 1-(6- (6-(吡啶-2-基)-1，2，4，5-四嗪-3-基)吡啶-3-基氨基)十一烷基氨基)乙基)-1, 4，7，10-四氮雜環(huán)十二烷-1，4，7-三基)三乙酸(48)的合成。
[0035]圖18描繪了在實(shí)施例15中描述的mLu-DOTA-四嗪8 (26.6 nM)和CC49-TC0 (12)(3種不同的mAb濃度)之間的時(shí)間依賴(lài)性的反應(yīng)收率，以及Ktjbs相對(duì)于TCO 12濃度的圖。
[0036]圖19描繪了在實(shí)施例15中描述的mLu-DOTA-四嗪8 (1.73 nM)和CC49-TC0 (26)(3種不同的mAb濃度)之間的時(shí)間依賴(lài)性的反應(yīng)收率，以及Ktjbs相對(duì)于TCO 26濃度的圖。
[0037]圖20描繪了在實(shí)施例16中描述的與CC49綴合的TCO 12的體內(nèi)穩(wěn)定性。條代表平均值，且誤差棒代表1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n = 3)。
[0038]圖21描繪了在實(shí)施例17中描述的在mAb注射后29 h，1251-CC49_TC0 (7)和1251-CC49-TC0 (12)在荷瘤小鼠中的生物分布。將數(shù)據(jù)表示為％ID/g，誤差棒=1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=4)。
[0039]圖22描繪了在實(shí)施例17中描述的用CC49-TC0(7)和CC49_TC0(12)預(yù)處理過(guò)的小鼠中的177Lu-四嗪8 (注射后3 h)的生物分布。將數(shù)據(jù)表示為％ID/g，誤差棒=1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=4)。
[0040]圖23描繪了在實(shí)施例18中描述的通過(guò)建模軟件實(shí)現(xiàn)的三維結(jié)構(gòu)表示(字母x、y和z分別代表X-軸、y-軸和Z-軸)。
[0041]發(fā)明詳述
一般而言，本發(fā)明是基于下述認(rèn)識(shí):在使用反式-環(huán)辛烯部分作為親雙烯體的系統(tǒng)中，如果迫使8元環(huán)部分成為展平結(jié)構(gòu)(flattened structure),可以得到反應(yīng)速率的大幅增加。
[0042]根據(jù)本發(fā)明， 通過(guò)向反式-環(huán)辛烯部分提供至少兩個(gè)被固定在基本上相同平面中的環(huán)外鍵，審慎地達(dá)到該展平結(jié)構(gòu)。
[0043]在下文中，為了清晰起見(jiàn)，將該8元環(huán)部分定義為反式-環(huán)辛烯部分，或縮寫(xiě)為“TC0”部分。應(yīng)該理解，重點(diǎn)在于該8元環(huán)充當(dāng)親雙烯體的可能性。技術(shù)人員熟知下述事實(shí):親雙烯體活性不一定依賴(lài)于所有碳原子在環(huán)中的存在，因?yàn)橐惨阎s環(huán)單亞烯基8元環(huán)具有親雙烯體活性。
[0044]因而，一般而言，本發(fā)明不嚴(yán)格限于反式-環(huán)辛烯。有機(jī)化學(xué)技術(shù)人員會(huì)意識(shí)到，存在其它基于8元環(huán)的親雙烯體，其包含與反式-環(huán)辛烯相同的環(huán)內(nèi)雙鍵，但是其可以具有在環(huán)內(nèi)別處的一個(gè)或多個(gè)雜原子。即，本發(fā)明一般地涉及包含至少兩個(gè)被固定在相同平面中的環(huán)外鍵的8元非芳族環(huán)狀亞烯基部分，優(yōu)選環(huán)辛烯部分和更優(yōu)選反式-環(huán)辛烯部分。
[0045]與例如藥物活性物質(zhì)(其中微小結(jié)構(gòu)變化經(jīng)常會(huì)改變體內(nèi)作用)的情況不同，本發(fā)明首先且最重要的是，要求正確的化學(xué)反應(yīng)性。因而，可能的結(jié)構(gòu)擴(kuò)展至技術(shù)人員熟知它們作為親雙烯體的反應(yīng)性的那些結(jié)構(gòu)。
[0046]有機(jī)化學(xué)技術(shù)人員會(huì)理解，術(shù)語(yǔ)“被固定在基本上相同平面中”表示這樣的鍵合理論:根據(jù)該理論，通常認(rèn)為鍵是被固定在相同平面中。在相同平面中的這種固定的典型例子包括雙鍵和具有張力的(strained)稠合環(huán)。例如，所述至少兩個(gè)環(huán)外鍵可以是與氧形成的雙鍵的兩個(gè)鍵(即C=O)。所述至少兩個(gè)環(huán)外鍵還可以是在兩個(gè)鄰近碳原子上的單鍵，前提條件是，這些鍵一起形成呈現(xiàn)基本上展平結(jié)構(gòu)的稠合環(huán)的一部分(即與TCO環(huán)稠合)，由此將所述兩個(gè)單鍵固定在 基本上一個(gè)和相同的平面中。后者的例子包括張力環(huán)例如環(huán)丙基和環(huán)丁基。
[0047]在另一個(gè)實(shí)施例中，組合前述可能性，所述稠合環(huán)是芳族環(huán)。在該情況下，所述至少兩個(gè)鍵所連接的TCO碳原子是sp2碳原子，且所述鍵是稠合環(huán)的一部分。應(yīng)該理解，所述鍵參與芳族稠合環(huán)的雜交。
[0048]不希望受理論的約束，本發(fā)明的發(fā)明人基于該發(fā)現(xiàn)認(rèn)為，至少兩個(gè)環(huán)外鍵在相同平面中的存在將導(dǎo)致TCO環(huán)的至少部分展平，并且該展平又會(huì)提供滿(mǎn)足在基于逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)的預(yù)靶向中對(duì)較高反應(yīng)性的要求的關(guān)鍵。TCO環(huán)的部分展平是兩個(gè)被固定在相同平面中的環(huán)外鍵存在的固有結(jié)果，并且至少代表與環(huán)內(nèi)雙鍵(即碳原子5和6)相對(duì)的部分。不論這兩個(gè)環(huán)外鍵是位于與(4，5)鄰近的碳原子5和6處，還是位于碳原子3和4處，都是如此。
[0049]應(yīng)當(dāng)指出，根據(jù)命名法的選擇，TCO親雙烯體也可以被稱(chēng)作E-環(huán)辛烯。就常規(guī)命名法而言，應(yīng)該理解，由于環(huán)辛烯環(huán)上的取代，取決于取代基的位置和分子量，相同的環(huán)辛烯異構(gòu)體形式上可以變成表示為Z-異構(gòu)體。在本發(fā)明中，本發(fā)明的任何取代變體，無(wú)論是否形式上是“E”或“Z”，或“順式”或“反式”異構(gòu)體，都將被認(rèn)為是未被取代的反式-環(huán)辛烯或未被取代的E-環(huán)辛烯的衍生物。術(shù)語(yǔ)”反式-環(huán)辛烯”(TCO)以及E-環(huán)辛烯可以互換使用，并且對(duì)于根據(jù)本發(fā)明的所有親雙烯體，以及對(duì)于取代基形式上將需要相反命名的情況，都適用。即，本發(fā)明涉及其中如下編號(hào)的碳原子I和6位于或反式位置的環(huán)辛烯。
【權(quán)利要求】
1.用于靶向的醫(yī)學(xué)成像和/或治療的試劑盒，其包含至少一種預(yù)靶向探針和至少一種效應(yīng)物探針，其中所述預(yù)靶向探針包含初級(jí)靶向部分和第一生物正交反應(yīng)性基團(tuán)，且其中所述效應(yīng)物探針包含效應(yīng)物部分，例如標(biāo)記物或藥學(xué)活性化合物，和第二生物正交反應(yīng)性基團(tuán)，其中所述第一和第二生物正交反應(yīng)性基團(tuán)中的任一個(gè)是親雙烯體，并且所述第一和第二生物正交反應(yīng)性基團(tuán)中的另一個(gè)是二烯，其中所述親雙烯體是反式-環(huán)辛烯部分，該部分包含至少兩個(gè)被固定在相同平面中的環(huán)外鍵，且包含至少一個(gè)任選經(jīng)由間隔體與所述預(yù)革El向探針或所述效應(yīng)物探針的連接。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其中所述至少兩個(gè)環(huán)外鍵是基本上展平的稠合環(huán)結(jié)構(gòu)的一部分。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其中所述至少兩個(gè)環(huán)外鍵與反式-環(huán)辛烯環(huán)中的單個(gè)sp2碳連接。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其中所述至少兩個(gè)環(huán)外鍵是碳-至-雜原子雙鍵的一部分。
5.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的試劑盒，其中所述至少兩個(gè)環(huán)外鍵是稠合的芳族環(huán)的一部分。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中所述反式-環(huán)辛烯部分滿(mǎn)足式(I):
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒，其中所述至少兩個(gè)被固定在相同平面中的環(huán)外鍵選自:(a)稠合的環(huán)丙基環(huán)的單鍵，(b)稠合的環(huán)丁基環(huán)的單鍵，(C)稠合的芳族環(huán)的雜合鍵，(d)與氧形成的環(huán)外雙鍵，和(e)與碳形成的環(huán)外雙鍵。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中所述親雙烯體是選自下述結(jié)構(gòu)的化合物:
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中所述二烯選自如下定義的式(2)、(3)、⑷和(5)的化合物:
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中所述預(yù)靶向探針包含作為初級(jí)靶向部分的抗體。
11.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中所述效應(yīng)物探針包含作為效應(yīng)物部分的可檢測(cè)標(biāo)記物，優(yōu)選用于成像系統(tǒng)的對(duì)比劑，所述可檢測(cè)標(biāo)記物選自:可MRI成像的試劑、自旋標(biāo)記物、光學(xué)標(biāo)記物、超聲響應(yīng)試劑、X-射線(xiàn)響應(yīng)試劑、放射性核素、FRET型染料、(生物)發(fā)光或熒光分子或標(biāo)記、生物素、順磁成像試劑和超順磁成像試劑。
12.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中所述效應(yīng)物探針包含作為效應(yīng)物部分的藥學(xué)活性化合物。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的試劑盒，其中所述藥學(xué)活性化合物是選自下述的同位素:.24Na、32P、33P、47Sc、59Fe、67Cu、76As、77As、80Br、82Br、89Sr、90Nb、90Y、103Ru、105Rh、ici9PcU .111Ag、121 Sn、.127Te,1311,140La^141Ce,142Pr,143Pr,144Pr,149Pm,149Tb,151Pm,153Sm,159Gd,161Tb,165Dy,166Dy,166Ho,.169Er、172Tm、175Yb、177Lu、186Re、188Re、198Au、199Au、211At、211B1、212B1、212Pb、213B1、214M
14.化合物，選自下述結(jié)構(gòu):
15.預(yù)靶向試劑，其包含初級(jí)靶向部分和生物正交反應(yīng)性基團(tuán)，其中所述生物正交反應(yīng)性基團(tuán)是根據(jù)權(quán)利要求9中限定的式(2)-(5)中任意一個(gè)的二烯與權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)中限定的親雙烯體之間的[4+2]逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)的反應(yīng)配偶體。
16.成像探針，其包含可檢測(cè)標(biāo)記物和生物正交反應(yīng)性基團(tuán)，所述可檢測(cè)標(biāo)記物優(yōu)選是選自下述的同位素:3H、nC、13N、150、18F、19F、51Cr、52Fe、52Mn、55CO、6°Cu、61Cu、62Zn、62Cu、63Zn、64Cu、66Ga、67Ga、68Ga、70As、71As、72As、74As、75Se、75Br、76Br、77Br、80Br、82Br、82Rb、86Y、88Y、89Sr、89Zr、97Ru、"Tc,110In,111In,113In,114In,117Sn, 1201 , 122Xe, 1231 , 1241 , 1251 , 166Ho,167Tm^169Yb,193Pt,195Pt^201Tl2°3Pb，其中所述生物正交反應(yīng)性基團(tuán)是根據(jù)權(quán)利要求9中限定的式(2)-(5)中任意一個(gè)的二烯與權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)中限定的親雙烯體之間的[4+2]逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)的反應(yīng)配偶體。
17.治療探針,其包含藥學(xué)活性化合物和生物正交反應(yīng)性基團(tuán),所述藥學(xué)活性化合物優(yōu)選是選自下述的同位素:24Na、32P、33P、47SC、59Fe、67Cu、76AS、77AS、8°Br、82Br、89Sr、9°Nb、9°Y、103Ru,127Te,1311,140La^141Ce,142Pr,143Pr^144Pr,149Pm^149Tb,151Pm^153Sm,159GcU 161Tb、165Dy、166Dy、166Ho、169Er、172Tm, 175Yb、177Lu、186Re、188Re、198Au、199Au、211At、211B 1、212B 1、212Pb、213B1、214B1、223Ra和225Ac,其中所述生物正交反應(yīng)性基團(tuán)是根據(jù)權(quán)利要求9中限定的式(2)-(5)中任意一個(gè)的二烯與權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)中限定的親雙烯體之間的[4+2]逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)的反應(yīng)配偶體。
18.預(yù)靶向方法，其包括:向受試者給予根據(jù)權(quán)利要求15所述的預(yù)靶向試劑，并使所述試劑在所述受試者的系統(tǒng)中循環(huán)有效實(shí)現(xiàn)所述初級(jí)靶向部分與初級(jí)靶的結(jié)合的一段時(shí)間，接著從身體清除未結(jié)合的試劑。
19.成像方法，其包括:實(shí)施根據(jù)權(quán)利要求18所述的預(yù)靶向方法，接著給予根據(jù)權(quán)利要求16所述的成像探針，其中所述預(yù)靶向試劑和所述成像探針中的所述生物正交反應(yīng)性基團(tuán)一起形成所述[4+2]逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)的反應(yīng)配偶體。
20.在受試者中的靶向的醫(yī)學(xué)治療方法，其包括:實(shí)施根據(jù)權(quán)利要求17所述的預(yù)靶向方法，接著給予根據(jù)權(quán)利要求16所述的治療探針，其中所述預(yù)靶向試劑和所述治療探針中的所述生物正交反 應(yīng)性基團(tuán)一起形成所述[4+2]逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)的反應(yīng)配偶體。
21.用于根據(jù)權(quán)利要求17-19中任一項(xiàng)的方法的根據(jù)權(quán)利要求15所述的試劑。
22.用于動(dòng)物或人類(lèi)的預(yù)靶向方法的如權(quán)利要求1-8或14中任一項(xiàng)中限定的化合物。
23.如權(quán)利要求1-8或14中任一項(xiàng)中限定的反式環(huán)辛烯作為親雙烯體反應(yīng)物在基于逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)的預(yù)靶向方法中的用途。
【文檔編號(hào)】A61K47/48GK103648533SQ201280034134
【公開(kāi)日】2014年3月19日 申請(qǐng)日期:2012年5月7日 優(yōu)先權(quán)日:2011年5月9日
【發(fā)明者】M.S.羅比拉德, J.盧布, R.羅斯辛, S.M.范登博世, R.M.維斯蒂根 申請(qǐng)人:皇家飛利浦有限公司