專利名稱：藥物和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及方法和化合物，例如雄甾-5-烯-3 P，4 P，16 a，17 P -四醇，用于調(diào)節(jié)炎癥、代謝性病癥和本文中所述的其它病況。使用化合物調(diào)節(jié)炎癥可用于以下病況的治療、改善、預(yù)防或延緩其進(jìn)展，例如2型糖尿病、高血糖癥、肺炎癥狀態(tài)(例如，囊性纖維化)、急性或慢性哮喘/急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)或慢性阻塞性肺病(COPD)以及自身免疫病癥例如多發(fā)性硬化、關(guān)節(jié)炎或紅斑狼瘡。
背景技術(shù)：
有許多因素有助于許多慢性自身免疫病癥和炎癥的形成和維持。通常，這種病癥的病因?qū)W沒有得到充分了解。腫瘤壞死因子-a (TNFa)是首先由單核吞噬細(xì)胞應(yīng)答多種免疫刺激劑而釋放的細(xì)胞因子。在對(duì)動(dòng)物或人給予時(shí)，其引起炎癥、發(fā)燒、心血管作用、出血、血凝固和與急性感染和休克狀態(tài)過程中所看到的那些相似的急性期應(yīng)答。因此，過量的或不受調(diào)節(jié)的TNFa生成牽涉許 多疾病狀態(tài)。這其中包括內(nèi)毒素血癥和/或中毒性休克綜合征，例如，Tracey 等人，Nature 330:662-664(1987)和 Hinshaw 等人，Circ.Shock 30:279-292(1990);惡病質(zhì)，例如，Dezube 等人，Lancet, 335(8690):662(1990);和ARDS，其中已經(jīng)在ARDS患者的肺抽出物中發(fā)現(xiàn)了高的TNFa濃度。例如，Millar等人，Lancet2(8665):712-714(1989)。
TNFa還似乎牽涉骨吸收疾病，包括關(guān)節(jié)炎。在被活化時(shí)，白細(xì)胞可以產(chǎn)生骨-再吸收，TNFa可以對(duì)這一活性有所貢獻(xiàn)，例如，Bertolini等人，Nature 319:516-518(1986)和 Johnson 等人，Endocrinology 124 (3): 1424-1427 (1989)。TNF a 還已經(jīng)表現(xiàn)出在體外和體內(nèi)通過刺激破骨細(xì)胞形成和活化以及抑制成骨細(xì)胞功能而刺激骨吸收和抑制骨形成。已經(jīng)證明用單克隆的抗-TNF a抗體阻斷TNF a在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Elliot等人,Int.J.Pharmac.17(2): 141-1451995)和克隆病(von Dullemen 等人，Gastroenterology, 109(1):129-1352005)中是有利的。
核因子-K B(NF-KB)分子在許多臨床病況中是炎癥的遞質(zhì)。用于治療炎癥的一些治療劑例如地塞米松、潑尼松或氫化可的松是糖皮質(zhì)激素受體(GR)激動(dòng)劑，它們通過增加GR的活性而間接地抑制NF- K B,例如，H.Harkonarson等人，Am.J.Respir.CellMol.Biol.25:761-771,2001。然而，天然的GR激動(dòng)劑的升高水平和合成的GR激動(dòng)劑的藥理學(xué)水平通常產(chǎn)生不需要的毒性，包括顯著的免疫抑制和骨質(zhì)量損失或骨質(zhì)減少，例如，T.L.Popper 等人，Antiinflammatory agents:Ant1-1nflammatory steroids, RA.Scherer&M.ff.Whitehouse 編輯,Academic Press, New York,第 9 章，第 I 卷，第 245-294頁(yè)，1974。與糖皮質(zhì)激素有關(guān)的許多不需要的毒性都是由GR的活化引起的。因此，鑒定可以抑制NF- K B活性而不通過活化GR引起這些毒性的化合物代表了一類可用于治療炎癥和相關(guān)癥狀例如疼痛、發(fā)燒或疲勞的藥物。
不需要的或損壞性的炎癥發(fā)生在許多慢性或急性病況中，例如，ARDS、C0ro和膿毒病中。活化的單核細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞在介導(dǎo)炎癥相關(guān)的病理學(xué)中起作用。特別重要的是活化的嗜中性粒細(xì)胞，其表現(xiàn)出細(xì)胞核中的NFk-B轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的積累增加和促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生增加。嗜中性粒細(xì)胞也是毒性氧物質(zhì)的來(lái)源，毒性氧物質(zhì)的產(chǎn)生至少部分地通過活化巨噬細(xì)胞來(lái)介導(dǎo)腫瘤壞死因子-a (TNF-a)分泌，這可能是在膿毒病中所見的器官損傷和衰竭所必需的。
與炎癥有關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可以通過不同的途徑發(fā)生，并且這可以提高受影響的細(xì)胞中的NF- K B活性。NF- K B被腫瘤壞死因子-a (TNF- a )活化從TNF- a結(jié)合于細(xì)胞膜上的TNF-a受體開始，隨后是一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)物(包括MAP激酶)的活化。NF_k B在細(xì)胞質(zhì)中的活化引起其易位到細(xì)胞核中并且引起在啟動(dòng)子中包含NF-K B應(yīng)答成分的基因活化。細(xì)胞質(zhì)的NF-K B被細(xì)菌脂多糖(LPS)活化從LPS結(jié)合于細(xì)胞表面上的Toll樣受體4開始，并且隨后發(fā)生胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)物的活化，包括磷脂酰肌醇-3-激酶的活化。已知TNF-a和LPS都在體內(nèi)和在體外在細(xì)胞中誘導(dǎo)強(qiáng)烈的炎癥性應(yīng)答。應(yīng)答這種促炎性信號(hào)的細(xì)胞包括巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞和其它類型的免疫細(xì)胞。
有多種T細(xì)胞亞群似乎在某些疾病狀態(tài)的發(fā)展過程中起作用。已經(jīng)提出了包括調(diào)節(jié)性和/或抑制性T細(xì)胞在內(nèi)的獨(dú)特的T細(xì)胞群在介導(dǎo)免疫力的各個(gè)方面中的重要作用，例如，E.Sur1-Payer 等人，J.Tmmuno1., 160 (3): 1212-1218，1998 ； J.Shimizu 等人，J.1mmunol.，163(10):5211-5218, 1999 ；M.1toh 等人，J.1mmunol.，162(9):5317-5326, 1999 ；A.M.Miller 等人，J.1mmunol., 177:7398-7405，2006。CD4+CD25+T 細(xì)胞可以在抑制一些免疫應(yīng)答中起作用。
已經(jīng)描述了在動(dòng)物模型中對(duì)這些T細(xì)胞亞群中的一些進(jìn)行的研究，例如在美國(guó)專利6，593，511中。例如，在sc id/sc id CD4+CD45Rbhi模型中考查了對(duì)于研究人自身免疫病況的作用。這個(gè)動(dòng)物模型已經(jīng)用于研究失調(diào)的免疫應(yīng)答，例如炎癥狀況和用于評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)藥物和治療規(guī)程，例如，K.Hong 等人，J.1mmunol., 162:7480-7491，1999 ;Powrie 等人，J.Exp.Med.，183(6):2669-2674, 1996。
由胸腺上皮誘導(dǎo)的FoXpro3基因可以在誘導(dǎo)T細(xì)胞形成⑶4+CD25+或⑶4+CD25high(TregT細(xì)胞或調(diào)節(jié)性T細(xì)胞)表現(xiàn)型中起作用。⑶25表面抗原是IL-2受體a-鏈。在一些自身免疫 疾病的動(dòng)物模型中，F(xiàn)oXpro3基因缺乏與自身免疫疾病的發(fā)生有關(guān)，例如，美國(guó)專利申請(qǐng)2006/0111316。這種基因的恢復(fù)似乎是減少自身免疫異常。已經(jīng)描述了用于⑶4+⑶25+細(xì)胞的各種試劑或試驗(yàn)規(guī)程,例如，H.Yagietal., InternationalImmunol.，16 (11): 1643-1656，2004 ；ff.R.Godfrey 等人，Blood, 105 (2) 750-758，2005。
早已經(jīng)認(rèn)識(shí)到了不耐受葡萄糖的受試者的胰島素耐受。Reaven等人(AmericanJournal of Medicine, 60 (I): 80-88, 1976)使用連續(xù)輸注的葡萄糖和胰島素(胰島素/葡萄糖鉗夾技術(shù))和口服葡萄糖耐量試驗(yàn)來(lái)證明在不同的非肥胖、非酮癥受試者組中存在胰島素耐受。這些受試者從臨界葡萄糖耐受到明顯的空腹高血糖癥而不同。這些研究中的糖尿病組包括胰島素依賴型的(IDDM)和非胰島素依賴型(NIDDM)的受試者。
與持續(xù)的胰島素耐受一致的是更容易確定的高胰島素血癥，其可以通過精確測(cè)定受試者血漿中的循環(huán)血漿胰島素濃度來(lái)測(cè)量。高胰島素血癥可以作為胰島素耐受的結(jié)果出現(xiàn)，例如在肥胖和/或糖尿病(NIDDM)受試者中和/或葡萄糖不耐受受試者中，或者在IDDM受試者中，是作為與內(nèi)分泌腺胰腺正常生理學(xué)釋放的胰島素相比過量注射胰島素的結(jié)果出現(xiàn)的。
已經(jīng)通過實(shí)驗(yàn)性的臨床和流行病學(xué)研究描述了高胰島素血癥與肥胖癥和與大血管缺血性疾病(例如，動(dòng)脈粥樣硬化)的關(guān)聯(lián)(Stout, Metabolism, 34:7, 1985 ;Pyorala等人,Diabetes/Metabolism Reviews, 3:463, 1987)。在口服葡萄糖負(fù)荷之后的I和2小時(shí)出現(xiàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性的血漿胰島素上升與增加的冠心病危險(xiǎn)有關(guān)。
人糖尿病的一種模型是db/db小鼠。對(duì)db/db小鼠模型已經(jīng)有所描述，例如，D.Koya 等人，The FASEB Journal, 14:439-447, 2000 ；K.Kobayashi 等人，Metabolism, 49(1):22-31, 2000 ；J.Berger等人，J.Biol.Chem.，274(10):6718-6725, 1999。db/db小鼠在編碼瘦素受體的基因上具有突變，隨著其功能性胰腺P -細(xì)胞團(tuán)塊隨時(shí)間惡化，賦予了以食欲過盛、肥胖癥、胰島素耐受和糖尿病為特征的表型，特別是對(duì)于C57BL/KS遺傳背景的動(dòng)物而言。db/db小鼠典型地在約3到4周齡時(shí)變得明顯肥胖并且在10到14天血漿胰島素開始上升?？梢栽?到8周齡觀察到血糖升高，具有失控的血糖增加，胰島的生產(chǎn)胰島素的￠-細(xì)胞嚴(yán)重耗竭，并且在約10月齡時(shí)死亡。這個(gè)模型已經(jīng)被用于表征藥物候選物影響與糖尿病的形成和維持有關(guān)的參數(shù)(例如，高血糖癥和體重增加)的進(jìn)展開始或其速率的能力。
用PPAR-Y激動(dòng)劑治療糖尿病已經(jīng)涉及心臟肥大，或者心臟重量增加。用馬來(lái)酸羅格列酮(一種PPAR-Y激動(dòng)劑)治療顯示，患者可能經(jīng)歷積液和液體容積相關(guān)事件，例如浮腫和充血性心力衰竭。與PPAR-Y激動(dòng)劑治療有關(guān)的心臟肥大典型地通過中止治療來(lái)處理。
氫化可的松的生理作用在于其對(duì)胰島素的拮抗作用。肝臟中高的氫化可的松濃度可以降低該器官中的胰島素敏感性，其傾向于增加糖原異生和增加血糖水平(M.F.Dallman等人，F(xiàn)ront Neuroendocrine., 14 :303-347, 1993)。這種作用加重了葡萄糖耐量低減或糖尿病。在由過多的氫化可的松的循環(huán)濃度引起的庫(kù)氏綜合征中，在易感個(gè)體中的對(duì)胰島素的拮抗作用可以引起糖尿病(E.J.Ross等人,Lancet, 2:646-649，1982)。
氫化可的松可以在體內(nèi)通過11 P -羥類固醇脫氫酶的11 P -脫氫酶活性轉(zhuǎn)化為可的松。其逆反應(yīng)，即無(wú)活性的可的松轉(zhuǎn)化為活性的氫化可的松，是在某些器官中由這些酶的11還原酶活性實(shí)現(xiàn)的。這種活性又稱為皮質(zhì)類固醇IlP-還原酶活性。IlP-羥類固醇脫氫酶有至少兩種獨(dú)特的同功酶。在多種細(xì)胞系中11 P-HSD I型的表達(dá)產(chǎn)生雙向的酶或占優(yōu)勢(shì)的11 P -還原酶，其可以從否則為無(wú)活性的11-酮類固醇母體再生11 P -羥類固醇。
線粒體磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(又稱為PEPCK-線粒體，PEPCK-M，PCK2和mtPEPCK)在各種人組織中表達(dá)，主要在肝臟、腎臟、胰臟、腸和成纖維細(xì)胞中表達(dá)(Modaressi 等人，Biochem.J.，333:359-366，1998)。盡管沒有充分記載，但是 PEPCK-線粒體缺乏已經(jīng)涉及發(fā)育停滯、低血糖和肝臟異常。與胞漿形式(PEPCK-C)不同，線粒體形式(PEPCK-線粒體)是組成型表達(dá)的，并且不受激素刺激調(diào)節(jié)(Hanson和Patel, Adv.Enzymo1.Relat.Areas Mol.Biol., 69:203-281，1994)。兩種形式都位于單獨(dú)的染色體上，定位在染色體14qll，而PEPCK-C存在于染色體20qll上(Stoffel等人，Hum.Mol.Genet,2:1-4, 1993)。
多發(fā)性硬化(MS)是作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性疾病的一種自身免疫疾病(Bar-Or, A., J.Neuroimmunol.100:252-259, 1999)。盡管最近該疾病的自然過程通過用免疫調(diào)節(jié)性-免疫抑制性化合物例如干擾素(IFN)-3、共聚物、環(huán)磷酰胺和米托蒽醌進(jìn)行治療而得到改善(Hafler, D.A.和 Weiner, H.L., Immunological Reviewsl44:75, 1995 ；Goodkin, D.E.，Lancet352:1486, 1998)，但是這些藥物中沒有一個(gè)可以阻斷疾病的進(jìn)展，并且他們中有一些具有限制其長(zhǎng)期應(yīng)用的嚴(yán)重副作用。另外，顯著數(shù)量的患者表現(xiàn)出差的對(duì)IFN-^的應(yīng)答，包括復(fù)發(fā)緩解型患者和繼發(fā)進(jìn)展型MS患者。因此，需要新的化合物，用于在單獨(dú)治療或在聯(lián)合治療中通過例如延緩MS的進(jìn)展來(lái)改善其進(jìn)程。
目前需要有成本有效的藥物或治療方法來(lái)更有效地治療上述的病況。本發(fā)明提供用于治療這些病況中的一種或多種的治療劑和治療方法。因此，所述藥物和方法可用于減少與本文中所述病況有關(guān)的一種或多種癥狀。另外，本發(fā)明的藥物和方法的應(yīng)用可以與用于這些病癥的一種或多種常規(guī)療法聯(lián)合。發(fā)明內(nèi)容
實(shí)施方案簡(jiǎn)述
本發(fā)明提供用于治療、預(yù)防、延緩有此需要的哺乳動(dòng)物中的不期望的炎癥狀況、自身免疫性疾病或代謝病癥或其癥狀的進(jìn)展或改善所述不期望的炎癥狀況、自身免疫性疾病或代謝病癥或其癥狀的化合物或組合物，任選地，其中所述哺乳動(dòng)物是人或非人類的靈長(zhǎng)類動(dòng)物，其中組合物包括式I化合物(“F1C”)，
權(quán)利要求
1.用于治療炎癥狀況、關(guān)節(jié)炎、外傷、2型糖尿病、高血糖癥、I型糖尿病、胰島素耐受、骨損失病況或癌癥的組合物，其中該組合物包含一定量的17a-乙炔基雄甾-5-烯-3 P，7 P，17 P -三醇的口服制劑，所述量足以維持約Ing/mL到約250ng/mL的血清水平歷時(shí)至少約30分鐘到約8小時(shí)。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物是包含約5mg到約80mg的17a -乙炔基雄甾-5-烯-3 P，7 @，17 @ -三醇的單位劑型。
3.鑒定具有用于治療或改善哺乳動(dòng)物的代謝病癥的潛力的化合物的方法，該方法包括: (i)在體外使試驗(yàn)化合物與人或哺乳動(dòng)物細(xì)胞接觸，并測(cè)量PPAR-a、PPAR-Y或PPAR- 6的活性； (ii)在體外使試驗(yàn)化合物與人或哺乳動(dòng)物細(xì)胞接觸，并測(cè)量NF-kB的轉(zhuǎn)錄活性或水平; (iii)對(duì)人或另外的哺乳動(dòng)物給藥試驗(yàn)化合物，并測(cè)量下列中的一種或多種:(a)高血糖癥，(b)高血糖癥的進(jìn)展，(C)高血糖癥的發(fā)病，(d)黃斑變性的進(jìn)展，(e)黃斑變性的發(fā)病，(f)血管潰瘍的出現(xiàn)或發(fā)生，(g)血管潰瘍的嚴(yán)重程度，(h)胰島素敏感性，(i)葡萄糖不耐受，(j)胰腺￠-小島細(xì)胞數(shù)量或它們分泌胰島素的能力喪失的進(jìn)展或速率(k)胰腺 小島細(xì)胞數(shù)量或它們分泌胰島素的能力，(I)在db/db小鼠或患有飲食誘導(dǎo)的肥胖癥的小鼠中體重增加的速率，(m)甘油三酯水平，(n)總的血液或血清膽固醇水平，(O)血液或血清中LDL、VLDL, apoB-100或apoB-48的水平，(p)血液或血清中HDL或apoAl的水平(q)血液或血清中相反應(yīng)蛋白的水平，任選C反應(yīng)蛋白或纖維蛋白原(r)血紅素Aic的水平，(s)空腹血糖水平，(t)在口服葡萄糖耐量試驗(yàn)中的血清或血液葡萄糖，(u)在膳食葡萄糖檢驗(yàn)后2小時(shí)內(nèi)的血清或血液葡萄糖，(V)整體或組織葡萄糖消除或攝??；以及 (iv)并選擇步驟(i)、(ii)和(iii)中的試驗(yàn)化合物，使得 (1)在體外與適當(dāng)?shù)年幮詫?duì)照人或哺乳動(dòng)物細(xì)胞相比，不使體外人或哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的PPAR- a、PPAR- y和PPAR- 8中的一種、兩種或三種活化超過約30% ；以及 (2)與體外適當(dāng)?shù)年幮詫?duì)照人或哺乳動(dòng)物細(xì)胞相比，在體外使人或哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的NF- K B的轉(zhuǎn)錄活性或水平抑制或減少約20-80% ；以及 (3)與適當(dāng)?shù)年幮詫?duì)照或正常對(duì)照相比，(a)減輕高血糖癥，(b)延緩高血糖癥的進(jìn)展，(C)延遲高血糖癥的發(fā)病，(d)降低黃斑變性的速率，(e)延遲黃斑變性的發(fā)病，(f)降低血管潰瘍的出現(xiàn)或發(fā)生，(g)降低血管潰瘍的嚴(yán)重程度，(h)增加胰島素敏感性，(i)降低葡萄糖不耐受，(j)延緩胰腺￠-小島細(xì)胞數(shù)量或它們分泌胰島素的能力喪失的進(jìn)展和速率， (k)增加胰腺￠-小島細(xì)胞數(shù)量或它們分泌胰島素的能力，(I)延緩db/db小鼠或患有膳食誘導(dǎo)的肥胖癥的小鼠的體重增加速率，(m)降低升高的甘油三酯水平，(n)降低升高的總的血液或血清膽固醇水平，(O)降低血液或血清中正?；蛏叩腖DL、VLDL, apoB-100或apoB-48水平，(P)增加血液或血清中正?；蜉^低的HDL或apoAl水平，(q)降低或正常化血液或血清中相反應(yīng)蛋白，任選C反應(yīng)蛋白或纖維蛋白原的升高的水平，(r)降低或正常化血紅素Aie，(s)降低或正?；崭寡撬?，(t)在口服葡萄糖耐量試驗(yàn)中使血清或血液葡萄糖正?；?U)在膳食葡萄糖檢驗(yàn)后2小時(shí)內(nèi)使血清或血液葡萄糖正?；?v)在體內(nèi)在人或另外的哺乳動(dòng)物中增加整體或組織葡萄糖消除或攝取，用于上列中的一種或多種，其中鑒定具有用于治療或改善人或哺乳動(dòng)物的代謝病癥的潛力。
4.權(quán)利要求3的方法，其中代謝病癥是II型糖尿病、高血糖癥、升高的單酯化脂肪酸或胰島素耐受。
5.權(quán)利要求3的方法，其中所述化合物是17a -乙炔基雄甾-5-烯-3 P，7 P，17 P -三醇。
6.鑒定生物動(dòng)力學(xué)化合物的方法，該方法包括 (a)對(duì)個(gè)體給藥試驗(yàn)化合物； (b)將個(gè)體暴露于急性刺激或生物學(xué)損害下； (C)測(cè)量試驗(yàn)化合物對(duì)急性刺激或生物學(xué)損害的急性生物學(xué)應(yīng)答的遞質(zhì)的影響；以及 (d)鑒定步驟(C)的發(fā)揮對(duì)急性刺激或生物學(xué)損害的遞質(zhì)的瞬時(shí)影響的化合物，從而鑒定生物動(dòng)力學(xué)化合物。
7.權(quán)利要求6的方法，該方法還包括 (e)將試驗(yàn)化合物或生物動(dòng)力學(xué)化合物的生物學(xué)作用與一種或多種參考化合物的生物學(xué)作用進(jìn)行比較。
8.權(quán)利要求7的方法，其中一種或多種參考化合物是選自氫化可的松、地塞米松和17 a -乙炔基雄甾-5-烯-3 P，7 @，17 P -三醇中的一種或多種。
9.藥物產(chǎn)品或批準(zhǔn)前的藥物產(chǎn)品，其包含處于藥物的劑型和包裝中的藥物以及包裝說(shuō)明書或標(biāo)簽，所述包裝說(shuō)明書或標(biāo)簽包括關(guān)于藥物的效力、作用機(jī)理或臨床應(yīng)用的信息，其中效力、作用機(jī)理或臨床應(yīng)用信息至少部分地得自這樣的方法，所述方法包括(a)使細(xì)胞在體外與足夠量的NF-k B活性的活化劑接觸足夠的時(shí)間，其中所述細(xì)胞可以通過可檢測(cè)到的細(xì)胞中NF- K B水平或活性增加來(lái)應(yīng)答NF- K B活化劑；(b)使細(xì)胞在體外與足夠量的藥物接觸足夠的時(shí)間，其中與適合的對(duì)照相比，所述藥物可檢測(cè)到地抑制NF-k B活性的活化；和(c)任選地將藥物抑制NF-K B活化的能力與參考化合物進(jìn)行對(duì)比，其中參考化合物為本文中所述的式I化合物，其具有在表征方法中使NF-K B活化受到抑制的能力，其中所述藥物使NF- K B活化抑制約25%到約75%，以及任選地其中(I)參考化合物或藥物不會(huì)可檢測(cè)到地或顯著地直接結(jié)合于糖皮質(zhì)激素受體或者任選地其中參考化合物或藥物不會(huì)可檢測(cè)到地或顯著地激動(dòng)糖皮質(zhì)激素受體或(2)與適合的激動(dòng)劑對(duì)照相比，所述藥物不使糖皮質(zhì)激素受體有超過約20%的激動(dòng)。
10.權(quán)利要求9的 藥物產(chǎn)品，其中藥物使NF-K B活化受到約35%到約70%或約40%到約65%的抑制。
11.鑒定化合物的方法，所述化合物具有可檢測(cè)到地調(diào)節(jié)哺乳動(dòng)物中的CD4+CD25+調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞、CD4+CD25+CD103+ 調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞、CD4+CD25highCD103+ 調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞或 CD4+CD25high調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的數(shù)量或活性的潛力，所述方法包括選擇以下的化合物: (i)與在體外的適合的對(duì)照人或哺乳動(dòng)物細(xì)胞相比，在體外使人或哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的糖皮質(zhì)激素受體、雄激素受體、雌激素受體-a、雌激素受體或任何這些生物分子的生物學(xué)活性變體中的一種或多種受到超過約30%的活化或抑制； (ii)分子量為約100-1000道爾頓，任選地分子量為約250-850道爾頓； (iii)與適合的陰性對(duì)照或正常對(duì)照相比，在適合的試驗(yàn)中使⑶4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、CD4+CD25+CD103+ 調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞、CD4+CD25highCD103+ 調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞、或 CD4+CD25high 調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞的數(shù)量或活性有超過20%的增加或降低；和 (iv)與體外適當(dāng)?shù)年幮詫?duì)照人或哺乳動(dòng)物細(xì)胞相比，在體外任選地使人或哺乳動(dòng)物細(xì)胞中NF-k B的轉(zhuǎn)錄活性或水平抑制或減少約20-80% ;從而鑒定化合物。
12.權(quán)利要求11的方法，其中哺乳動(dòng)物為嚙齒動(dòng)物或人。
13.產(chǎn)品，其中所述產(chǎn)品是通過以下方法獲得的雄甾-5-烯-3P，7 P，16 a，17 P -四醇的固體形式，所述方法包括⑴獲得純化的雄甾-5-烯_3@，70，16 a，170-四醇，和(2)從乙腈水溶液回收雄甾-5-烯-3 P，7 @，16 a，17 @ -四醇。
14.組合物，其包含一種或多種賦形劑和通過以下方法獲得的雄甾-5-烯-3 @，7 P，16 a，17 @ -四醇的固體形式，所述方法包括⑴獲得純化的雄甾-5-烯-3 P，7 P，16 a，17 P -四醇，和⑵從乙腈水溶液回收雄甾-5-烯-3 P，7 @，16 a，17 @ -四醇。
15.制備液體制劑的方法，該方法包括將雄甾-5-烯-3P，7 P，16 a，17 P -四醇的固體形式與液體賦形劑混合，所述雄留-5-烯-3 P，7 P，16 a，17 P -四醇的固體形式通過以下方法獲得，所述方法包括:⑴獲得純化的雄甾-5-烯-3 P，7 P，16 a，17 P -四醇，和(2)從乙腈水溶液回收 雄甾-5-烯-3 P，7 P，16 a，17 P -四醇的方法獲得。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物和用途，特別涉及治療特定臨床病癥例如高血糖癥、2型糖尿病、關(guān)節(jié)炎和多發(fā)性硬化的方法。本發(fā)明還提供鑒定和表征藥物的方法，所述藥物部分地通過在一個(gè)時(shí)間引發(fā)對(duì)生物分子不同生物學(xué)治療作用和在另一個(gè)時(shí)間點(diǎn)使所述生物分子的相對(duì)正?；瘉?lái)表征的。所述化合物包括17α-乙炔基雄甾-5-烯-3β,7β,17β-三醇或雄甾-5-烯-3β,4β,16α,17β-四醇，其都可以用作參考標(biāo)準(zhǔn)來(lái)促進(jìn)這種候選藥物的評(píng)價(jià)和表征。
文檔編號(hào)A61P29/00GK103211821SQ201310054309
公開日2013年7月24日 申請(qǐng)日期2007年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月22日
發(fā)明者詹姆斯·M·弗林克, 克里斯托弗·L·雷丁 申請(qǐng)人:霍利斯—伊登醫(yī)藥公司